FACIDER Revista Cientfica

ISSN 2316-5081

SUBSTNCIAS ANTAGONISTAS PRODUZIDAS POR BACTRIAS

ISOLADAS DE AMOSTRAS DE SOLO DO RIO PITIMBU/RN CONTRA
CEPAS DE Staphylococcus spp.
1

Marlia Raphaela dos Santos Braz , Leonardo Rodrigues , Ivanaldo Amncio da Silveira , Elizabeth
1*
Cristina Gomes dos Santos
1

Universidade Federal do Rio Grande do Norte, UFRN, Natal-RN

Endereo para correspondncia: Av. General Gustavo Cordeiro de Farias, s/n, Petrpolis. CEP: 59012-570.
Natal-Rio Grande do Norte, Brasil.
2
Consultoria de Pesquisas Microbiolgicas, Santa Maria de Jetib-ES
*elizabethcristina@ig.com.br

RESUMO: O aumento da incidncia de infeces adquiridas, tanto na comunidade e,

principalmente, no ambiente hospitalar envolvendo o gnero Staphylococcus extremamente
preocupante, haja vista sua elevada frequncia e patogenicidade, acometendo tanto indivduos
imunocomprometidos quanto hgidos. A emergncia desses micro-organismos resistentes aos
antimicrobianos convencionais gerou um crescente interesse no estudo de substncias bioativas. Os
compostos antimicrobianos isolados de bactrias do solo so uma fonte promissora de novas
alternativas teraputicas, destacando-se a produo de peptdeos e enzimas. O presente estudo teve
como objetivo investigar a atividade antibacteriana de substncias bioativas produzidas por bactrias
isoladas de amostras de solo do Rio Pitimbu/RN contra cepas de Staphylococcus spp., utilizando-se o
mtodo de camada dupla com clorofrmio. Os resultados mostraram que das 25 cepas isoladas 15
demonstraram diferente grau de ao antibacteriana. Quando comparado o efeito inibitrio das
bactrias produtoras contra cepas do gnero Staphylococcus, observou-se que a bactria do gnero
Bacillus (P09) apresentou maior atividade antibacteriana, sendo capaz de inibir bactrias de interesse
clnico e de referncia, destacando-se a linhagem de S. aureus MRSA. Dessa forma, so necessrios
estudos mais aprofundados para a caracterizao e identificao dessa substncia, para que possa
vir a ser utilizada como provvel recurso teraputico no tratamento de infeces causadas por
patgenos resistentes e emergentes.
PALAVRAS-CHAVE: Staphylococcus spp, Resistncia microbiana, Substncias bioativas, Atividade antimicrobiana, Solo.
REA: Microbiologia
TEMA: Microbiologia clnica e do solo

ABSTRACT: The increased incidence of infections acquired in both community and especially in
the hospital environment involving the Staphylococcus genus is extremely worrying, given their high
frequency and pathogenicity, affecting both immunocompromised as healthy individuals. The
emergence of these resistant to conventional antimicrobial microrganisms generated a growing
interest in the study of bioactive substances . the antibacterial compounds isolated from soil bacteria
are a promising source of new therapies, and the bacteria Bacillus a leading producer of substances
with antimicrobial activity, especially in the production of peptides and enzymes. The present study
aimed to investigate the antibacterial activity of bioactive substances produced by bacteria of the
genus Bacillus isolated from soil samples of Rio Pitimbu / RN against Staphylococcus spp. The results
revealed that 25 of the 15 isolates showed antimicrobial activity in varying magnitudes. Compared the
antibacterial activity of the strains on the bacteria of the genus Staphylococcus, it was observed that
the bacteria of the genus Bacillus (P09) showed higher antimicrobial activity, being able to inhibit
bacteria of clinical interest and reference, highlighting the strain of S. aureus MRSA. Thus, further
studies are needed for the characterization and identification of the substance shall, for that might be
used as probable therapeutic tool in the treatment of infections caused by resistant and emerging
pathogens.
KEYWORDS: Staphylococcus spp, Microbial resistance, Bioactive substances, Antimicrobial activity, Soil.
AREA: Microbiology
THEME: Clinical microbiology and soil microbiology
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1 INTRODUO

Staphylococcus so cocos Gram positivos, imveis, no esporulados,

geralmente no encapsulados e anaerbios facultativos. Podem ser agrupados
como coagulase positivo, tendo como representante a bactria Staphylococcus
aureus, e coagulase negativo, abrangendo as bactrias S. epidermidis, S.
saprophyticus, S. lugdunensis, S. haemolyticus dentre outras (KATEETE et al.,
2010).
O aumento da incidncia de infeces adquiridas, tanto na comunidade e,
principalmente, no ambiente hospitalar envolvendo o gnero Staphylococcus
extremamente preocupante, haja vista sua elevada frequncia e patogenicidade,
acometendo tanto indivduos imunocomprometidos, quanto hgidos. As infeces
ocasionadas por esse gnero podem ser associadas a vrias doenas, incluindo
enfermidades sistmicas potencialmente fatais, intoxicao alimentar, infeces
cutneas e oportunistas, entre outras. A sua fcil disseminao intra-hospitalar
contribui para a resistncia aos antimicrobianos, sobretudo oxacilina (KOLLEF,
2008; COHEN et al., 2008; DE LENCASTRE; OLIVEIRA; TOMASZ, 2007;
HAGIHARA et al., 2011; RUDKIN et al., 2012).
A resistncia oxacilina em Staphylococcus spp. heterognea, conferida
principalmente pelo gene mecA, que faz parte de um elemento gentico mvel, o
staphylococcal chromossomal casset mec (SCCmec), codificador de uma protena
de baixa afinidade a este antimicrobiano, a PBP2a (CAUWELIER et al., 2004;
MOON et al., 2007; SCHITO, 2006). Algumas estirpes de Staphylococcus possuem
associado ao SCCmec o gene da leucotoxina Panton-Valentine (PVL) que lhe
confere vantagem seletiva (GORDON; LOWY, 2008).
No Brasil, apesar da inexistncia da meticilina no comrcio nacional, as cepas
resistentes oxacilina so denominadas de MRSA (Staphylococcus aureus
resistentes meticilina). Uma das grandes preocupaes sobre cepas resistentes a
meticilina que normalmente a maioria das cepas de MRSA apresenta resistncia a
diferentes classes de antimicrobianos, o que torna o tratamento de infeces
causadas por esse micro-organismo complicado, devido ao nmero de opes
teraputicas serem limitadas. Dessa forma, habitualmente os frmacos de escolha
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para o tratamento de infeces causadas por MRSA pertencem classe dos

glicopeptdeos (vancomicina e teicoplanina), que agem impedindo a sntese da
parede celular (ROSSI; ANDREZZI, 2006).
Mediante o amplo emprego de vancomicina na prtica clnica, ocorreu o
surgimento de S. aureus com sensibilidade reduzida a esse antimicrobiano e demais
glicopeptdeos, denominados VISA/GISA (S. aureus com sensibilidade intermediria
a vancomicina/glicopeptdeos) e S. aureus resistente vancomicina/glicopeptdeos
(VRSA/GRSA). Resistncia esta que tambm j se encontra disseminada em
diversos outros pases, conforme relatado em alguns estudos (TIWARI; SEN, 2006;
SANTOS; FONSECA, 2007; CUI; MITTAL; DATAR, 2006).
Os principais fatores envolvidos no desenvolvimento da resistncia aos
antibiticos em bactrias so a presso seletiva e a presena de genes de
resistncia (TAVARES, 2000; WITTE, 2000). Os genes que codificam resistncia
aos antimicrobianos podem estar localizados no cromossomo ou nos plasmdios. O
DNA cromossmico relativamente mais estvel, enquanto que o DNA plasmidial
facilmente transportado de uma linhagem para outra por conjugao bacteriana,
permitindo uma transferncia de genes em conjunto incluindo os de resistncia a
antimicrobianos (RIGATTI, 2010).
Embora a descoberta dos antibiticos na teraputica tenha permitido a cura
das infeces que antigamente apresentavam alto ndice de mortalidade clnica
(BRAGA et al., 2004), o tratamento antimicrobiano errneo associado
automedicao tem desencadeado o desenvolvimento de resistncia bacteriana
(CARNEIRO et al., 2008; PEREIRA; CUNHA, 2009; RIGATTI, 2010; SILVEIRA et al.,
2010; VIANA et al., 2011).
A

emergncia

de

micro-organismos

resistentes

aos

antimicrobianos

convencionais gerou um crescente interesse no estudo de substncias bioativas

com atividade antimicrobiana. Como alternativa teraputica, tem-se recorrido aos
produtos naturais e, dentre eles, destaca-se o solo, que tem se revelado um
reservatrio natural de micro-organismos e seus produtos antimicrobianos (CEYLAN;
OKMEN; UGUR, 2008; FREIRE-MORAN et al., 2011).
O solo um habitat extremamente peculiar em relao a outros ambientes
terrestres devido sua natureza complexa, dinmica e heterognea, permitindo
abrigar organismos com diferentes tipos de metabolismos, interagindo de forma
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equilibrada, favorecendo uma larga biodiversidade (ALEXANDER, 1961). Entre os

componentes do solo, a frao biolgica tem demonstrado relevante influncia sobre
as caractersticas das demais, constitudo por diversos grupos de micro-organismos
que atuam sobre a matria orgnica do solo, no desenvolvimento contnuo de
processos de sntese e de anlise de compostos orgnicos.
Considerado uma entidade biolgica, o solo contm uma quantidade elevada
de micro-organismos (ALEXANDER, 1961). A real dimenso da diversidade
microbiana dos solos ainda desconhecida. Estima-se que o nmero global de
clulas procariticas no solo de 4,5 - 6,6 x 1030, e que aproximadamente 4,5 6,5% dos procariotos vivam nos solos (WHITMORE et al., 1996). Estima-se, ainda,
que em apenas um nico grama de solo existam de 2.000 a 8,3 milhes de
bactrias. Deste modo, possvel inferir que o solo sustenta uma diversidade vasta
de micro-organismos, que so promissores na produo de substncias com
propriedades antimicrobianas (GANS; WOILINSKY; DUNBAR, 2005; SCHLOSS;
HANDELSMAN, 2006).
Os compostos antibacterianos isolados de bactrias do solo exibem diferentes
mecanismos de ao antibitica, como inibio da sntese proteica, inibio de RNA
polimerase e interferncia na sntese da parede celular, sendo promissores na
produo de antibiticos (CEYLAN; OKMEN; UGUR, 2008). Pesquisas mostram a
sntese de substncias antimicrobianas isoladas de bactrias do solo com atividade
inibitria contra bactrias Gram positivas, Gram negativas e fungos, como
Streptomyces atuando contra S. aureus MRSA, Stenotrophomonas maltophilia e
Candida albicans; Bacillus thuringiensis contra B. cereus; e B. licheniformis contra S.
aureus MRSA e Salmonella enterica (CHERIF et al., 2001; CEYLAN; OKMEN;
UGUR, 2008; DISCHINGER et al., 2009; GUO et al., 2012).
Devido necessidade em se obter novas alternativas teraputicas para
minimizar o problema da resistncia aos antimicrobianos, este estudo teve como
objetivo investigar a produo de substncias bioativas de bactrias isoladas do solo
do Rio Pitimbu/RN contra cepas de Staphylococcus spp., de grande relevncia
clnica.

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2. MATERIAL E MTODOS

2.1. Coleta de amostras de solo da rea estudada

As amostras de solo foram coletadas em reas situadas na regio da

microbacia do Rio Pitimbu, no Municpio de Natal-RN. O referido rio faz parte dos
municpios de Natal, Parnamirim e Macaba, ocupando uma rea de 138,30 Km 2,
entre as coordenadas de localizao 5 5030, 5 5823 Latitude sul e 35 10, 35
23 Longitude oeste. A coleta das amostras ocorreu em dois locais diferentes,
perfazendo oito pontos de coleta, escolhidos aleatoriamente margem do rio. Um
quilo de cada amostra foi coletada na camada superficial do solo, a uma
profundidade de 15 cm, com o auxlio de uma esptula desinfetada com lcool 70%
sendo

acondicionadas

em

sacos

de

papel

esterilizados,

seguindo-se

processamento da amostra 6h aps a coleta, no Laboratrio de Microbiologia

(LABMICRO),

do

Departamento de

Anlises Clnicas

Toxicolgicas

da

Universidade Federal do Rio Grande do Norte (UFRN).

2.2. Anlise do teor de umidade e pH

Para a determinao do teor de umidade do solo coletaram-se amostras de

100 g de cada rea. Tais amostras foram acondicionadas em um recipiente estril,
previamente tarado e etiquetado, tendo sido secas em estufa a 105 C, at obteno
de peso constante. Os resultados foram obtidos calculando a percentagem (p/p) de
gua do solo com base no valor percentual hdrico sobre o peso seco (ATTILI, 1994;
GARLIPP, 1995).
A anlise do pH do solo foi fundamentada em Pansu e Gautheyrou (2006),
que consistiu em pesar 10 g de solo seco a temperatura ambiente, e peneir-lo a 2
mm. Em seguida adicionou-se amostra 25 mL de gua destilada livre de
carbonatos. Aps esta adio a amostra foi agitada vigorosamente durante 1 min,
seguido por um perodo de repouso de 15 min. Sendo que tal processo foi repetido
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por quatro vezes. Aps o procedimento supracitado, decantou-se a amostra durante

30 min, mergulhando nesta os eletrodos, de modo que sua parte porosa ficasse
situada perto da interface entre a suspenso e o sobrenadante. Procedeu-se
leitura do valor do pH aps a estabilizao da medio.

2.3. Processamento do solo para isolar as bactrias testes

Uma amostra de 25 g de solo foi adicionada a 125 mL de salina estril a

0,9%, perfazendo a diluio correspondente a 10 -1, seguindo-se as diluies
seriadas de 10-2 a 10-5. Alquotas de 100 L das diluies de 10 -2 a 10-5 foram
adicionadas ao gar de contagem em placa (PCA, Himedia), em triplicata, com
posterior incubao a 37C/24h (JAHNEL; CARDOSO; DIAS, 1999). Aps esse
procedimento, foram repicadas para o gar infuso crebro corao (BHI gar,
Himedia), colnias isoladas, com morfologia diferente. Foi realizado o Gram
(KONEMAN et al., 2008) para verificar a pureza das colnias, e em seguida, foram
mantidas em gar nutriente (Himedia) a 4C e em miangas (caldo BHI
suplementado com 10% de glicerol) a -80C. Esse procedimento foi realizado para
as oito amostras, no Laboratrio de Microbiologia do Departamento de Anlises
Clnicas e Toxicolgicas/UFRN.

2.4. Identificao das bactrias isoladas

A identificao microbiolgica consistiu na realizao da colorao de Gram,

objetivando a visualizao da pureza das colnias, como tambm a observao de
sua morfologia e colorao especficas para possvel visualizao de endsporos.
Aps a confirmao das caractersticas morfotintoriais das colnias, as linhagens
foram submetidas s provas bioqumicas de catalase, padro de hemlise,
motilidade, indol, citrato, manitol, prova de Voges Proskauer, fermentao de
acares, prova de reduo do nitrato, produo de lecitinase, hidrlise de casena e
hidrlise de esculina (KONEMAN et al., 2008).

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2.5. Bactrias indicadoras

Foram utilizadas 14 cepas clnicas, sendo nove Staphylococcus aureus e

cinco Staphylococcus coagulase negativo (SCoN), e quatro cepas de referncia,
Staphylococcus aureus ATCC 29213 e 33591 (MRSA), Staphylococcus epidermidis
ATCC 12228 e Staphylococcus saprophyticus ATCC 15305, pertencentes Coleo
do Laboratrio de Microbiologia Clnica da Faculdade de Farmcia-UFRN. Todas as
bactrias foram mantidas nas mesmas condies do item 2.4.

2.6. Perfil de suscetibilidade das bactrias indicadoras

O perfil de suscetibilidade realizou-se de acordo com o CLSI (2013), pelo

mtodo de diluio em gar. Esse mtodo consistiu no preparo de diluies
crescentes seriadas dos antimicrobianos - penicilina, cefoxitina, clindamicina,
eritromicina, vancomicina e teicoplanina nas concentraes de 0,125 a 512
g/mL em gar Mueller Hinton fundido (Himedia). Aps plaqueamento e solidificao
do meio, as cepas de Staphylococcus sp., com densidade celular de acordo com a
escala 0,5 de MacFarland, foram semeadas com o auxlio do replicador de Steers
(105 por spot). Aps incubao a 37C/24h, foi determinada a Concentrao
Inibitria Mnima (CIM). Um controle isento dos antimicrobianos testados foi
realizado. Todos os testes foram realizados em duplicata.

2.7. Investigao da produo de substncias bioativas

A produo de substncias bioativas foi determinada pelo mtodo de camada

dupla descrita por APOLNIO et al. (2007). Foram utilizadas 25 bactrias isoladas
do solo (bacilos Gram-positivos) e uma bactria de referncia, Bacillus cereus ATCC
11778. Posteriormente, foram semeadas em gar Mueller Hinton e infuso crebro
corao (BHI- Brain Heart Infusion) com auxlio do replicador de Steers, e incubadas
a 37C/24h. Aps esse perodo, as bactrias foram expostas ao clorofrmio por 30
min, e para a evaporao de seus resduos, as placas foram entreabertas por 20
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min. Em seguida, foi vertido sobre as bactrias teste o inculo das bactrias
indicadoras, de acordo com o meio utilizado, o qual consistiu em adicionar a 10 mL
de gar fundido de Mueller Hinton e infuso crebro corao, 50L das cepas de
Staphylococcus spp. As placas foram incubadas nas mesmas condies de tempo e
temperatura. A presena de halo inibitrio indicou produo de substncias
bioativas. O teste foi realizado em duplicata.

3. RESULTADOS

3.1. Identificao das Bactrias-Teste

Foram isoladas 92 bactrias das amostras de solo do Rio Pitimbu, e aps

estudos prvios foram selecionadas 25 bactrias para a realizao dos testes de
substncia antagonistas. A partir da caracterizao morfotintorial pode-se verificar
que todas as bactrias isoladas so bacilos Gram-positivos, sendo 14 caracterizadas
como do gnero Bacillus, por serem catalase positivas produtoras de esporos,
bastonetes com extremidades retas ou arredondadas de tamanhos variveis e
geralmente mveis. Desses Bacillus, seis foram identificados como B. cereus
(lecitinase positivo, mvel, manitol negativo e indol negativo). Pela necessidade de
estudos mais sofisticados, como sequenciamento de DNA ribossomal e do
RNAr16S, no foi possvel identificar os outros bacilos Gram-positivos (11 bactrias).

3.2. Perfil de suscetibilidade das bactrias indicadoras

Quanto ao perfil de suscetibilidade das amostras clnicas de Staphylococcus

estudadas, verificou-se que todas as cepas foram resistentes clindamicina, com
CIM50 equivalente a 64 g/mL e CIM90 a >512 g/mL, seguido da eritromicina, com
11 cepas resistentes. A linhagem de S. aureus S001 foi a bactria mais resistente,
mostrando sensibilidade somente a vancomicina e teicoplanina. As bactrias S001,
S002, S005, S008 e S009 apresentaram resistncia a cefoxitina, sendo identificadas

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como meticilina resistente, dado comprovado pelo perfil de resistncia conferida pela
penicilina. Esses resultados encontram-se descritos na Tabela 1.

Tabela 1- Concentrao inibitria mnima (CIM) de 14 cepas clnicas de

Staphylococcus spp., pelo mtodo de diluio em gar.
Antimicrobianos (g/mL)
Bactrias

CFL

CFO

CLI

ERI

GEN

PEN

VAN

TEI

S001

64

64

>512

>512

>512

64

0,5

S002

16

64

0,5

32

0,5

0,5

S005

0,25

64

0,5

0,5

0,5

S007

0,125

64

0,5

0,5

S008

16

64

16

0,5

16

0,5

S009

0,25

16

64

16

0,5

0,5

S010

0,25

64

32

0,5

0,5

S011

0,125

64

0,5

0,5

0,5

S012

0,25

64

64

0,5

0,5

0,5

S013

0,25

64

0,5

0,5

0,5

S014

0,25

64

64

0,5

0,5

0,5

S015

0,25

512

16

0,5

16

0,5

0,5

S016

>512

16

0,5

0,125

0,5

0,25

S017

>512

512

0,5

0,125

0,5

0,25

0,25/4
0,25

2/16
1

64/>512
0,25

16/512
0,5

0,5/0,5
0,5

2,0/32
0,125

0,5/0,5
0,5

0,5/1
0,25

CIM50 /CIM90
S.a 29213

CFL- Cefalotina; CFO- Cefoxitina; CLI- Clindamicina; ERI- Eritromicina; GENGentamicina; PEN- Penicilina; VAN- Vancomicina; TEI- Teicoplanina; S. aStaphylococcus aureus; S. e- Staphylococcus epidermidis; S. sa- Staphylococcus
saprophyticus.
3.3 Determinao da produo de substncias bioativas

Pode-se observar na Tabela 2 que das 25 bactrias isoladas 15 (57,69%)

foram capazes de inibir o crescimento das cepas de Staphylococcus spp,
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destacando-se as bactrias P01, P02, P03 e P09 que mostraram amplo espectro de
ao, sendo que a bactria P09 foi ativa contra todas as cepas clnicas e as
bactrias de referncia testadas. relevante ressaltar que esses bacilos produziram
substncias antagonistas contra cepas clnicas de S. aureus MRSA, sendo que a
bactria de referncia S. aureus 33951 (MRSA) foi inibida apenas pelos bacilos P03
e P09.
Quanto relao entre a produo de substncia bioativa e os meios de
cultivo (gar Mueller Hinton e infuso crebro corao) observou-se que no houve
diferena (Tabela 2), no entanto, quanto aos fatores umidade e pH, evidenciou-se
que as bactria com atividade antibacteriana foram isoladas de reas com menor
percentagem de umidade e com variao de pH entre 5,50 a 6,11 (dados no
mostrados).

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Tabela 2- Produo de substncias bioativas pelas bactrias teste em gar MH e BHI, pelo mtodo de camada dupla com
clorofrmio.

Bactrias indicadoras
S002

S005

S007

S008

S009

S010

S011

S012

S013

S014

S015

S016

S017

Sa
29213

Sa
33591

Se
12228

Ssa
15305

Classificao
Taxonmica

S001

Bactrias
teste
P01

NI

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

P02

NI

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

++

P03

NI

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

P04

B. cereus

P05

Bacillus sp.

P06

Bacillus sp.

P07

NI

P08

Bacillus sp.

P09

Bacillus sp.

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

+++

++

+++

+++

+++

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Bacillus sp.

++

P14

B. cereus

++

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++

++

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NI

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NI

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B. cereus

++

P23

NI

++

P24

B. cereus

++

P25

Bacillus sp.

++

P26

Bacillus sp.

P27

Bacillus sp.

++

P28

NI

++

P29

NI

ATCC 11778

B. cereus

Sa-Staphylococcus aureus; Se-Staphylococcus epidermidis; Ssa-Staphylococcus saprophyticus; NI- no identificado; ( + )- halo inibitrio 12 mm; (++)- halo
inibitrio 20 mm; (+++)- inibiu toda placa; ( - )- ausncia de halo inibitrio.

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4. DISCUSSO

A emergncia de bactrias resistentes aos antibiticos convencionais gerou

um crescente interesse na pesquisa de micro-organismos produtores de substncias
bioativas com atividade antimicrobiana. No presente estudo, as bactrias isoladas do
solo foram identificadas como bacilos Gram positivos, sendo a maioria pertencente
ao gnero Bacillus. Os bacilos Gram positivos, em especial, os desse gnero, so
cosmopolitas tendo como habitat primrio o solo (DIAS et al., 2008). Alm disso,
inclui uma gama de espcies bacteriocinognicas, tais como, Bacillus subtilis,
produtor da subtilina e subtilosina, B. coagulans, produtor da coagulina, e B.
megaterium, produtor da megacina (CHERIF et al., 2001).
A maioria das bactrias Gram positivas testadas produziram substncias
bioativas

com

diferente

grau

de

ao

antibacteriana

contra

cepas

de

Staphylococcus, sendo que o Bacillus sp. (P09) mostrou amplo espectro de ao,
tanto contra Staphylococcus coagulase negativo (SCoN), quanto cepas de
Staphylococcus aureus MRSA. Dado de grande relevncia, por serem bactrias de
interesse clnico, responsveis por infeces, muitas vezes, de difcil tratamento,
principalmente, devido ao problema da resistncia, limitando os recursos
teraputicos vigentes.
Staphylococcus SCoN

tem sido responsvel por infeces hospitalares,

como bacteremia, apresentando resistncia oxacilina ou meticilina (ARCHER;

CLIMO, 1994; GARCA et al., 2004). S. aureus causador de importantes infeces
nosocomiais, tem adquirido papel de destaque pela sua multirresistncia aos
antimicrobianos convencionais, alm de sua fcil disseminao intra-hospitalar,
apresentando como agravante o surgimento de casos de infeces por MRSA na
comunidade (MARK et al., 2002; LLARRULL; FISHER; MOBASHERY, 2009).
Dischinger et al. (2009) verificou a inibio de MRSA pela substncia bioativa,
lichenicidina, produzida pelo B. licheniformis. Outra substncia semelhante a
bacteriocina, isolada dessa mesma bactria foi ativa contra B. cereus, S. aureus,
Listeria monocytogenes, Micrococcus luteus, Streptococcus equi, Escherichia coli e
Salmonella spp. (GUO et al., 2012). Estudos mostram a atividade inibitria da
substncia antagonista thuricina 7 sintetizada pelo B. thuringiensis contra L.
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monocytogenes, Streptococcus pyogenes, e bactrias produtoras de bacteriocinas,

B. cereus (CHERIF et al., 2001).
O estudo mostrou que no houve diferena quanto produo de substncias
bioativas em meio simples, gar Mueller Hinton, e em meio complexo, gar infuso
crebro corao. Pesquisas mostram que a composio do meio de cultura
influencia na sntese de substncias antagonistas dos Lactobacillus (SARIKA;
LIPTON; AISHWARYA, 2010). Todorov e Dicks (2005) observaram que houve
diminuio da atividade da bacteriocina isolada do Lactobacillus plantarum no meio
constitudo de caldo BHI, leite de soja e melao. Cavalcante et al. (2013), verificou
que a Pseudomonas sp. apresentou produo de substncia antagonista mais
elevada em sabo lquido do que em gar BHI.
Vrios fatores influenciam a produo de substncias bioativas, dentre as
quais se destacam o valor de pH e o teor de umidade. Os resultados referentes a
esses fatores (dados no mostrados) comprovam que as bactrias produtoras de
substncias bioativas foram isoladas de amostras de solo que apresentavam pH
com valores entre 5,50 6,11 e com teores de umidade na percentagem de 0,73% 5,53%. Sendo que, as melhores condies de produo associadas ao inibitria
ocorreram na faixa de pH timo de 5,63 e valor de teor de umidade de at 2,02%.
Esse resultado corrobora com outros estudos que apontam que os microorganismos do solo por sofrerem fortes influncias decorrentes das alteraes do pH
e da umidade (PEREIRA, 2000), apresentam um crescimento considervel,
aumentando

significativamente

densidade

microbiana

no

perodo

seco,

comportamento que est associado ao estresse provocado pela deficincia hdrica

do solo, devido baixa umidade resultante da ausncia de chuvas. Acredita-se que
a produo desses metablitos por micro-organismos desempenhe diversas funes
no meio ambiente, como comunicao e proteo, assegurando a sua sobrevivncia
em condies de estresse ambiental (OVERBYE; BARRET, 2005).
A produo de substncias com ao antimicrobiana por Bacillus spp. j
conhecida . Na indstria farmacutica, muitos antibiticos peptdicos importantes so
produzidos por espcies de Bacillus, como bacitracina, polimixina, gramicidina,
tirocidina, subtilina e bacilisina (TEIXEIRA, 1994). Considerando-se a atividade
inibitria da substncia produzida pelo Bacillus sp. (P09), por agir contra linhagens
de Staphylococcus spp. de interesse clnico, relevante o seu estudo como
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alternativa teraputica. No entanto, necessria a caracterizao dessa substncia

antagonista, identificando-a quanto origem gentica, peso molecular, propriedades
bioqumicas, composio e estrutura qumica, e provvel mecanismo de ao
(APOLNIO et al., 2007).

5. CONCLUSO

A bactria P09 obtida do solo do Rio Pitimbu/RN produziu substncia

antibacteriana com espectro de ao considervel contra diferentes linhagens de
Staphylococcus spp., incluindo linhagens MRSA, bactrias de grande interesse
clnico, responsveis por inmeros casos de infeces hospitalares e comunitrias.
Diversas razes justificam a busca urgente por novos agentes com ao
antimicrobiana, porm as altas taxas de resistncia microbiana revela-se a mais
relevante, o que torna esse achado de grande interesse, sendo importante o
aprofundamento do estudo dessa substncia para o seu uso como alternativa
teraputica.

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