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Citologa de orina: comparacin de m todo ThinPrep con el mtodo

convencional de centrifugado-extensin
Domingo de Agust n V zquez * , Julio Rodrguez Costa ** , Miguel ngel Sez Garca * , Jos Ram n Ram rez Garc a * ,
ngeles Izquierdo Hern ndez * , Santiago Coca Menchero *
* Hospital Central de la Defensa, Madrid ESPA A
** Hospital General Universitario Gregorio Mara n, Madrid. ESPAA

Resumen
Se compara el m todo ThinPrep (TP) con el m todo convencional (MC) de centrifugado y extensin para el estudio citolgico de la
orina. Se contrastan los resultados globales de casos positivos y sospechosos, as como las muestras no adecuadas para estudio o
diagnstico, y se estudian las posibles diferencias morfol gicas de la celularidad de las muestras (fondo de las muestras, agrupaci n
celular, disposicin celular en los grupos y detalle celular). Se compararon 782 citologas procesadas con m todo TP y 733
procesadas con MC. No se observaron diferencias significativas entre ambos m todos cuando se comparan los casos positivos o
sospechosos: 6,01% de positivos con TP y 5,59% con MC; y 9,72% de sospechosos con TP frente a 10,09% con MC . S hay
diferencias en cuanto a muestras inadecuadas: 5,88% con TP frente a 11,05% con MC. Respecto a la morfolog a de los frotis, los
procesados con TP son m s limpios (el 100% frente al 89,90 del MC), debido a la presencia de sangre en un 8,73% de los
procesados con MC frente al 0% de los procesados con TP. El nmero de clulas uroteliales por frotis, patol gicas o no, es mayor en
las muestras con TP (3750) que en las muestras con MC (1800), y la densidad celular es mayor con MC (8 clulas por campo de gran
aumento) que con TP (5 clulas). La agrupacin celular es similar con ambos m todos, pero las papilas son ms tridimensionales con
el MC (90% frente al 32,47% de las papilas de los frotis procesados con TP). El detalle celular es bueno con ambos m todos, pero es
mejor con TP, ya que el fondo hemtico distorsiona algunas muestras procesadas con MC (97,40 vs 74,28%).

Introduccion
Las nuevas metodologas que procesan las muestras citolgicas en una monocapa, resultan de excelente calidad ptica y permiten un
diagnstico citolgico similar al que se logra con la citolog a convencional. Sin embargo, las diferencias metodolgicas en lo que se
refiere a fijacin y limpieza de material hemtico y mucoide, provocan leves cambios morfolgicos que conviene conocer al
interpretar los frotis. El presente trabajo compara muestras citol gicas de orina con el fin de reafirmar la utilidad diagnstica de la
denominada citolog a l quida y estudiar las variaciones que la nueva t cnica determina en la morfologa celular de las muestras
estudiadas.

Objetivos
comparar el m todo TP con el MC de centrifugado y extensin para el tratamiento de las orinas obtenidas por miccin espontnea.
Se plantean varias lneas de trabajo:
contrastar los resultados globales de casos positivos y sospechosos, as como las muestras no adecuadas para estudio o
diagnstico.
estudiar las posibles diferencias morfol gicas que ofrece la celularidad siguiendo ambos m todos de trabajo.

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Material y m todos
Respecto a los resultados globales, se comparan las citolog as de cuatro a os, los dos primeros (2001 y 2002) procesados con
m todo TP y otros dos (2003 y 2004) procesados con el MC de centrifugado -extensin. Todo el material evaluado corresponde a
muestras de orina espont nea, procedente de pacientes a los que, en los casos sospechosos o positivos, se les realiz estudio
histol gico en nuestro centro hospitalario. Se consider el nmero global de muestras sospechosas o positivas informadas as durante
el periodo de estudio. Las muestras catalogadas como inadecuadas son las que presentan exclusivamente celularidad pavimentosa no
urotelial y las muestras con rasgos degenerativos intensos.
La diferencias morfolgicas fueron encaminadas a reconocer variaciones tanto en cuanto al fondo de las muestras como a la propia
celularidad individual, en casos normales y patol gicos. Estas diferencias fueron evaluadas por dos de los autores (DAV y JRC)
valorando: fondo de las muestras, nmero de c lulas, agrupacin celular y detalle celular. El fondo de las muestras se valor como
necr tico, hem tico o limpio. El n mero de clulas del frotis se valor en n mero de c lulas por campo de gran aumento (ocular x10
y objetivo x40) y en nmero de clulas total de frotis, en una media obtenida tras la observacin de 10 campos aleatorios en 100
frotis seleccionados al azar de cada uno de los m todos de procesado. La agrupacin celular s lo se estudi en los casos sospechosos
o positivos, sealando si la celularidad maligna o sospechosa de malignidad se dispon a en forma de clula suelta, formando papilas
grandes (con ms de 10 clulas), papilas pequeas (de menos de 10 clulas) o papilas de tamao intermedio (de entre 5 y 10
clulas). La morfologa de la papila y el detalle celular se evalu exclusivamente en las muestras, positivas o sospechosas, en las que
la celularidad se encontraba predominantemente formando papilas; en la morfolog a se estudi si la disposicin celular era plana o
tridimensional , y el detalle celular se evalu, de forma sencilla, como bueno o malo.

Resultados
Durante el periodo en que se trabaj con m todo TP , se realizaron 782 citolog as de orina correspondientes a 178 pacientes. De ellas
fueron positivas 47 (6,01 %), correspondientes a 21 pacientes, sospechosas 76 (9,72 %), correspondientes a otros 21 pacientes, e
inadecuadas 46 (5,88%). Con el m todo convencional de centrifugado y extensin se procesaron 733 muestras correspondientes a
146 pacientes. De ellas fueron positivas 41 (5,59 %), correspondientes a 19 pacientes, sospechosas 74 (10,09 %), correspondientes
a otros 19 pacientes, e inadecuadas 81 (11,05 %) (Tabla 1).
Tabla 1: resultados globales de ambos m todos
periodo
cit. / pacientes
01 -02 (TP)
782 / 178
03 -04 (MCl)
733 / 146

malignidad
47 (6,01%) / 21
41(5,59%) / 19

sospechoso
76 (9,72%) / 21
74 (10,09%) / 19

inadecuadas
46 (5,88%)
81 (11,05%)

Las diferencias morfol gicas fueron llamativas por lo que respecta a la valoraci n global de la muestra, ya que desapareci el fondo
hemorrgico (hemtico) utilizando el mtodo TP (Tabla 2) ( Figura 1 ).
Tabla 2: Fondo de las muestras.
Fondo
Necr tico
Hem tico
Limpio
Total:

TP
0 (0%)
0 (0%)
782 (100%)
782

MC
10 (1,36%)
64 (8,73%)
659 (89,90%)
733

La densidad celular es menor y m s dispersa con el m todo TP , permitiendo una observacin ms cmoda ( Figura 2 ). El n mero de
clulas por frotis es mayor con el m todo TP que con el MC, aunque tambin el campo a observar es mayor (Tabla 3).
Tabla 3: nmero de c lulas (clculo de la media tras el estudio de 100 frotis de cada m todo)
TP
MC
C lulas totales por frotis
3750
1800
C lulas por campo de gran
5
8
aumento (x400)
No se observan grandes diferencias en cuanto a la presentacin de las c lulas neoplsicas, aunque s son m s frecuentes las papilas
pequeas con el TP que con el MC, con el que son algo m s frecuentes las papilas grandes (Tabla 4) ( Figuras 3 a 6).
Tabla 4: disposicin celular predominante en casos sospechosos y positivos
Disposici n celular
TP
C lula suelta
46 (37,40%)
Grupos grandes
25 (20,32%)
Grupos medianos
12 (9,76%)

MC
45 (39,13%)
35 (30,43%)
15 (13,04%)

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Grupos pequeos
Totales

40 (32,52%)
123 (100%)

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20 (17,39%)
115 (100%)

La celularidad tumoral se dispone de forma m s suelta y plana con TP que con las muestras procesadas de forma convencional y el
detalle celular es mejor, en t rminos globales, con TP (Tabla 5) (Figuras 7 y 8).
Tabla 5: morfologa de las papilas y detalle celular
TP

MC

Plana
Tridimensional

52 (67,53%)
25 (32,47%)

7 (10%)
63 (90%)

Bueno
Malo

75 (97,40%)
2 (2,60%)
77 casos

52 (74,28%)
18 (25,72%)
70 casos

Morfolog a papilar

Detalle celular

Totales

Por otra parte, la celularidad inflamatoria, bacterias, hongos, espermatozoides y rasgos degenerativos pueden verse con ambos
m todos sin variaciones relevantes.

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Figura 3.

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Figura 7.

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Figura 8.

Discusi n
El dato ms significativo es la disminucin de las muestras inadecuadas, reducidas desde un 11 a un 6 %,
dato sealado tambin por otros autores (1). Probablemente, la facilidad de realizar un centrifugado inicial
y posterior fijacin del sedimento en los recipientes de TP , deriva en un procesado ms precoz de las
muestras que con el MC, evitando retrasos en el manejo de estas muestas, lo que deriva en menos frotis
inadecuados para diagnstico.
La utilidad de ambos mtodos para el diagnstico de lesiones urolgicas malignas es pareja, sin diferencias
significativas entre ellos, lo que tambi n han sealado otros autores (2). No obstante, el nmero de
pacientes evaluados es pequeo, por lo que los resultados deben ser considerados ms una estimacin
que un verdadero resultado estadstico.
Respecto a las diferencias morfolgicas, la desaparicin del fondo hemorrgico, que dificulta la valoracin
de muestras, con el mtodo TP , puede resultar un factor de ayuda en la valoracin de estas. Sin
embargo, aparentemente, aun no ha podido demostrarse ese supuesto beneficio. Por otra parte, en ambas
series el nmero de casos con lesiones de alto y bajo grado, tras la comprobacin quirrgica, fue similar
(37 m s 10 con TP vs 34 ms 7 con MC), y ninguno de los dos mtodos mostr mejor sensibilidad que el
otro para el diagnstico de las lesiones de bajo grado, verdadero problema diagnstico en este campo,
aunque algunos autores ya han demostrado las ventajas de la citologa l quida en esta faceta ( 3).

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Probablemente este sea un punto que requiera un estudio ms profundo, aprovechando la mejor calidad
de los frotis para disminuir los falsos negativos y para limitar el nmero de muestras sospechosas a favor
de muestras con diagnstico de malignidad, en un mtodo diagnstico que sigue siendo el gold standard
para el seguimiento de pacientes con carcinoma urotelial (4).
La celularidad neoplsica presenta una descamacin similar, aunque los grupos papilares son m s
pequeos con el m todo TP y estos grupos muestran una celularidad ms plana. Este factor, junto al
hecho de que no hay un fondo hemtico distorsionador, permite que el detalle celular sea, globalmente,
mejor con el mtodo TP que con el MC, aunque evaluando cada caso de forma individual ambos mtodos
permiten una morfologa celular correcta.

Bibliografa
1. - Real O. Estudo comparativo da Citologia Urinria em meio liquido (ThinPrep Method) versus m todo de concentrao celular por
centrifugao. 21 Congreso de la Sociedad Espaola de Anatoma Patol gica. Mesa Redonda: ThinPrep como M todo Diagn stico en
Citologia Lquida, 29 de mayo de 2003.
2. - Wright RG, Halford JA. Evaluation of thin-layer methods in urine cytology. Cytopathology 2001; 12:306-313.
3. - Caldarella A, Buccoliero AM, Taddei GL. Thin -layer cytology in urinary diagnosis. Pathologica 2003; 95:37 -41. (Abstract).
4. - Brown FM. Urine cytology. It is still the gold standard for screening? Urol Clin North Am 2000; 27:25-37.

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