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NOMBRE
Lissette Riveros Zuiga
CURSO
Biologa molecular
FECHA
13/11/2014
PROFESOR
Sebastin Reyes Cerpa
INTRODUCCIN
Por
su
composicin,
puede
definirse
qumicamente
como
un polirribonucletido de adenina, guanina, citosina y uracilo. A esta diferencia
qumica con el ADN, hay que aadir que su estructura molecular
es monocatenaria, es decir, que se trata de una sola cadena de nucletidos unidos
por enlaces fosfodister en sentido 5 -> 3 y siempre de menor tamao que el
ADN.(1)
Existen 3 tipos de ARN; el ARN mensajero es el que se encuentra en menor
proporcin (menos del 5% del ARN celular), pero puede ser el de mayor longitud,
aunque esta es muy variable y depende de la cantidad de informacin que
reproduzca del ADN. (2)
El ARN ribosomal, el cual es el ms abundante (algo ms del 75% del total) y el de
mayor tamao y peso molecular. Se localiza en los ribosomas, a los que da
nombre, pues es su componente mayoritario (en torno al 60%). Est asociado a
protenas y proporciona la estructura a cada una de las dos subunidades de
aspecto de globo de las que constan estos orgnulos. (2)
El otro tipo de ARN corresponde al de transferencia, este se encuentra disperso
por el citoplasma, constituye en torno al 15% del total de ARN y es el de menor
peso molecular, ya que consta de tan solo 70 a 90 nucletidos. Su estructura es
muy caracterstica, pues la cadena se pliega sobre s misma por el emparejamiento de bases complementarias y crea as cuatro zonas o brazos helicoidales,
tres de los cuales terminan en un bucle con bases sin emparejar. El conjunto se
puede considerar como una estructura secundaria y se conoce como estructura
en hoja de trbol; esta sufre otro plegamiento superior y adquiere una estructura
terciaria en forma de L.(2)
La clave de la purificacin de RNA radica en evitar su degradacin poraccin de
las ribonucleasas. De manera que todos los protocolos existentes sebasan en la
rpida inactivacin de dichas enzimas. (3)
Para la extraccin de cidos nucleicos existen procedimientos descritos por
autores como Pfannenstiel et al. (1980),Chomczynski y Sacchi (1987), Palls et al.
(1987), Yang et al.(1992), y Lee (1995).(5)
El mtodo de Chomczynski y Sacchi, en el cual el principio en la base del mtodo
es que el ARN se separa del ADN despus de la extraccin con una solucin
cidaque contiene tiocianato de guanidina , acetato de sodio , fenol y cloroformo ,
seguido por centrifugacin. En condiciones cidas, el ARN total permanece en la
fase acuosa superior, mientras que la mayora del ADN y las protenas
OBJETIVOS
MTODOLOGA
Al mirar bajo luz UV el gel de agarosa con el ARN y la muestra de peso conocido
se puede observar la siguiente imagen.
Figura 1
Muestras ARN luego de
aplicada la electroforesis
encuentra entre los 500 pb y 250 pb. Por otro lado se aprecia que en el extremo
inferior de la columna C2 hay una banda intensa pero difusa muy por debajo de
los 250 pb. Por otro lado, a lo largo de la columna seque hay un difuminado con
intensidad variable a lo largo de la columna.
DISCUSIN
CONCLUSIN
REFERENCIAS