TOXICOLOGA

TEMA1:PANORAMAACTUALDELATOXICOLOGA
1.Conceptosyobjetivos
2.Perspectivahistricaysituacinactual
3.Algunasramasaplicadas
TEMA2:ASPECTOSCUALITATIVOSYCUANTITATIVOSDELATOXICOLOGA
1.Txicoeintoxicaciones
2.Cuantificacindelatoxicidad
2.1.Estrategiaparaevaluarlatoxicidadgeneral
2.2.Clasificacinyetiquetadodeproductosqumicos:
2.3.ndicesdetoxicidadcrnica
3.Selectividadysensibilidad
4.ndiceteraputicoymargendeseguridad
TEMA3:FASESDELFENMENOTXICO
1.Exposicin
2.Vasdepenetracinyprocesosdetrnsito
3.Absorcindrmica
4.Absorcininhalatoria
5.Absorcinoral
6.Distribucin
7.Fijacin
8.Excrecin
TEMA4:BIOTRANSFORMACIN
1.Introduccinalabiotransformacin
2.Tiposdereaccionesylocalizacin
3.Reaccionesdeoxidacin
3.1.ReaccionesdeoxidacincatalizadasporelCYP450
3.2.Reaccionesdeoxidacincatalizadasporotrosenzimas
4.Reaccionesdereduccin
5.Reaccionesdehidrlisis
6.ReaccionesdefaseII
TEMA5:FACTORESQUEINFLUYENENLADISPONIBILIDADBIOLGICA
1.Factoresqumicosybiolgicos
2.Diferenciasinterespecficas
3.Diferenciasinterindividuales
TEMA6:MECANISMOSDETOXICIDAD
1.Factorestoxicocinticos
1

2.Toxicidadporcompuestoselectroflicos
3.Toxicidadporradicaleslibres
4.Otroscasosdetoxicidad
TEMA7:PREVENCINYEVALUACINDELATOXICIDAD
1.Principiosgenerales
2.Ensayostoxicolgicos
3.Ensayosdetoxicidadgeneral
4.Reglamentaciones
TEMA8:MTODOSALTERNATIVOSENTOXICOLOGA
1.Estrategiadelas3Rs
2.Conceptodemtodosalternativos
3.Validacindelosmtodosalternativos
4.AplicacindelosmtodosalternativosenI+Ddemedicamentos
5.Conclusiones
TEMA9:ELPACIENTEINTOXICADO
TEMA10:INTOXICACINPORDROGAS
TEMA11:CARCINOGNESIS
1.Cncerymutacin:perspectivahistrica
2.Definicindecarcingeno:tiposdeevidencias
3.Fasesdelprocesocanceroso
4.Tiposdecarcingenos
5.Carcingenosgenotxicos
6.Carcingenosnogenotxicos
7.Evaluacindelacarcinogenicidad
TEMA12:MUTAGNESIS
1.Nacimientoydesarrollodelatoxicologagentica
3.Mecanismosmoleculares
4.Mtodosdeevaluacindelamutagenicidad
5.Clasificacindecompuestosmutagnicos
TEMA13:TOXICIDADDELAREPRODUCCIN
1.Introduccin
2.Perodoscrticosdesusceptibilidad
3.Diferenciasinterespecficas
4.Manifestacionesdelasalteracioneseneldesarrollo
5.Modosdeevaluacin
6.Compuestosteratgenos
TEMA14:EVALUACINDELRIESGO
1.Riesgoypercepcinderiesgo
2.Procesocompletodeevaluacindelriesgo
2

3.Estrategiasdeevaluacindelriesgo
4.Fasesdelaevaluacindelriesgo
TEMA15:TOXICIDADDEMEDICAMENTOS
1.Toxicidadyreaccionesadversas
2.Mtodosysistemasdedeteccin
3.ClasificacindelasRAM
4.Mecanismosdeproduccin
TEMA16:TOXICIDADDEALGUNOSMEDICAMENTOS
1.Antiinflamatoriosnoesteroideos
2.Medicamentoscardiovasculares
2.1.Nitratos
3.MedicamentosdelSNC
3.1.Antipsicticos
3.2.Sedantes
3.3.Antidepresivos
Paraentenderlaleyendadecolores:
(esunaformadeirhacindoseunesquema,mentalmente)
Nivel1

nivel2

nivel3

nivel4

nivel5

estoindicaquesehapreguntadoenclase

2.9.2014

TEMA1:PANORAMAACTUALDELATOXICOLOGA
Xeno es un prefijoque hace alusinaalgoajeno. Un
productoqumico
,quepuedeser
un
contaminante
,un
principioactivo
,etc,esun
xenobitico
paraelserhumano.
Dichoproductoqumicotienelacapacidaddeproducirundeterminado
efectoadverso
.
Nos interesa estudiar ese efecto, que se produce solamente en determinadas
condiciones
. No existen productos que sean o no txicos, sino que un producto
produceunefectoadversoendeterminadascondiciones.
Por tanto, la toxicologa es la ciencia que estudia los efectos nocivos de los
compuestosqumicos.
En el laboratorio tenemos unas condiciones de uso para los productos qumicos(por
ejemplo, el uso de guantes). Tambin necesita una autorizacin de su
comercializacin, en el que seevalala toxicidad y se establecenlos nivelesseguros
de exposicin: muchas cosas tienen productos txicos (aire, comida) perotienen que
estar por debajo de un nivel determinado. Es necesario reducir la presencia de
productostxicosenelmedioambienteoenlosalimentos.
Los medicamentos son los productos donde ms se estudia la toxicidad. En el
medicamento se estudiauna
toxicidadpreclnica(enlaqueseencargalatoxicologa)
y los efectos adversos
postcomercializacin (de losque se encarga la farmacologa
y farmacovigilancia). En un cosmtico es importante estudiar la permeabilidad del
mismo ya quesi atraviesa lapielpuede acceder anivelsistmico.Si noespermeable
entoncesinteresarestudiarsiproducealergiaosiesirritante.
3.9.2014

1.Conceptosyobjetivos
La
toxicologa
es la ciencia que estudia los
efectos nocivos de los compuestos
qumicos.
Los
efectosadversos
,ademsde
afectaralhombre,afectanaotrosseresvivos
.
En toxicologa se impone un sistema de
deteccin
de agentes txicos
(deteccin,identificacinycuantificacin).
Tambin hay sistemas para
evaluar
la toxicidad: por qu mecanismo se
produce?.
Seestudianlosmediospara
contrarrestar
losefectos
adversos.

Seintenta

prevenir
latoxicidad.
Un xenobitico puede ser
sinttico o natural
. Hay que tener en cuenta que
los
compuestos naturales no siempresonlos ms seguros (ni tienenporqu serseguros,
vaselosvenenosdearaa,etc).
El objetivo general de la toxicologa es conseguir un
nivel razonable de seguridad
mediante un
sistema de quimicovigilancia (es un sistema que no se termina nunca
porquesiempreaparecennuevosconocimientosydatos).
Msenconcreto,tiene3
OBJETIVOS
,loscualesson:
Conocerlas
propiedadestxicas
delassustanciasqumicas:
Nuevas sustancias
con distintos usos:
medicamentos
, cosmticos,
aditivos alimentarios
,
plaguicidas
y biocidas,
productos qumicos de uso
industrial).
Contaminantes
(
metales,PCBs,dioxinas
.Seusanmuchoenlaindustriay
no tienen ningn tipo de regulacin porque surgen de un proceso
industrial).
Agentesadictivos

(
alcohol,tabaco,drogas
).
El conocimiento de todas las sustancias anteriormente comentadas se
realiza aunniveldeprofundizacinvariableenfuncinde:requerimientos
segn su uso, las alertas de toxicidad, influencias sociales, inters
cientfico,etc.
Evaluar el
riesgo de efectos adversos en una determinada poblacin teniendo
encuentatantolascondicionesdeexposicincomolatoxicidad.
Aconsejar a la sociedad sobre las medidas que debe tomar para controlar y
prevenir los efectos perniciosos de las sustancias qumicas (tabaco). De esta
parteseencargalasaludpblica.

reasdeactividadprofesionalo
nivelesdeactuacin
enToxicologa(a3niveles):
Descriptivo
:realizacindeensayosdetoxicidadparaestimarlasdosistxicasy
los umbrales de toxicidad, as como para
definirlos
tipos detoxicidad
(irritante,
genotxico producen dao a nivel de ADN, cancergeno). Se puede hacer
inhouse(dentrodelaempresa)oexternamente.
Mecanstico
: profundizacin enel estudio delos
mecanismos detoxicidad yde
losmediospara
contrarrestarla
.
Regulatorio
: revisin de los datos de toxicidad para
autorizar
la
comercializacin
de unproducto para un determinadouso. Incluyelaregulacin
de una
evaluacin de riesgo
(contaminante) as como el establecimiento de
nivelesmximospermisibles
.
5

2.Perspectivahistricaysituacinactual
Lospadresde la toxicologafueronOrfiliay
Paracelso
(14931541).Paracelsodijoque
el efecto txico depende de la dosis (
dosis sola facit venenum
). Un mismobrebaje,
segnladosis,podatenerefectoperjudicialono.

Mateo Jos Buenaventura

Orfila
(17871853) escribi el primer tratado sobre la
toxicologa.Esel
creadordelatoxicologaexperimentalyorganizaelestudiodetxicos
en: accin de los txicos, investigacin en medicina legal, y los antdotos (los
desarrolla).
Enelsiglo
XIX
hayunaseriedeavancesquepermiteneldesarrollodelatoxicologa:
Tcnicas de
anlisis qumico queaplicadas a lostxicossuponen el nacimiento
delatoxicologaforense.
Tcnicas de
experimentacin fisiolgica aplicadas a los txicos (desarrolladas
por Claude Bernard). Bernard estudi los efectos del curare, monxido de
carbono,opio,estricninaydiversosanestsicos.
En el siglo
XX hay una gran expansin en la
industria qumica y agroqumica
, y un
desarrollodelaindustria
farmacuticayalimentaria.
Agenciasreguladoras
Las agencias reguladoras y comits expertos se encargan de regular la
comercializacin de productos qumicos. En funcin del campo y pas, seencuentran
diferentesagencias.Enelcampo:
De
TOXICOLOGA
(sociedades cientficas): en espaa est la
AETOX
o
Asociacin Espaola de Toxicologa. En Europa la
EUROTOX
o European
Toxicologists & EuropeanSocietiesofToxicology.EnU.S.estla
SOT
oSociety
ofToxicology.
De
MEDICAMENTOS
: en espaa est la
AEMPS
: agencia espaola de
medicamentos y productos sanitarios. Aniveleuropeo(
Londres
) sellama
EMA
:
European Medicines Agency. EnU.S.sedenomina
FDA
, que significafoodand
drugadministration.
De
ALIMENTOS
: enespaa estla
AESAN
oAgenciaEspaola de Seguridad
Alimentaria y Nutricin.En Europa(
Parma
,Italia)est la
EFSA
:EuropeanFood
Safety Authority. Y en U.S. est la
JECFA
: Joint Expert Committee and Food
Additives.
De
PRODUCTOS QUMICOS
: En espaa tenemos el
MSPS
: ministerio de
sanidad. En europa (
Finlandia
) esta la
ECHA
: European Chemicals Agency. Y
6

enU.Sestla
EPA
:EnvironmentalProtectionAgency.

3.Algunasramasaplicadas
1. Toxicologa
forense
:
Est vinculadaala
medicina legalyforense
.Proporciona
informacin toxicolgica como apoyo a las actividades judiciales: asesinatos y
homicidios, pruebas de paternidad, alcoholemias, estupefacientes, delito
ecolgico.
2. Toxicologa
clnica
:
Est vinculada ala
medicina intensiva y de urgencias
.Se
ocupadel
diagnsticoytratamiento dela
intoxicacin
,desarrolloyaplicacinde
mtodosde
deteccin
ydesarrolloyaplicacindeterapiasantitxicas
3. Toxicologa
ocupacional o laboral
:
Estvinculada con la
medicinapreventiva
y a la seguridad en el trabajo
. Comprende aspectos mdicos y legales. Su
objetivo es salvaguardar la salud y poner en evidencia las alteraciones
funcionales que se producen en el organismo antes de que lleguen a ser
profundas e irreversibles.Pautalos valoresde concentracin mxima admisible
e intenta buscar indicadores biolgicos de exposicin o de efecto (el indicador
nossirveparamedirlosnivelestxicosdeunamuestra)
4. Toxicologa
alimentaria
:
Seocupadelos
aspectosqumicostoxicolgicosdela
seguridadalimentaria.
5. Toxicologa
ambiental
(ecotoxicologa):
Se ocupa de los
efectos txicos de
losproductosqumicossobrelosseresvivosyecosistemas.

4.9.2014

TEMA2:ASPECTOSCUALITATIVOSY
CUANTITATIVOSDELATOXICOLOGA
1.Txicoeintoxicaciones
Definiciones:
Txico
es toda
sustancia qumica que, incorporada al organismo vivo a una
determinada
concentracin
, produce en virtud de su
estructura qumica y a
travs de
mecanismos fsicoqumicosybioqumicos,
alteracionesmolecularesy
celularestransitoriasopermanentes,quealteranelestadodesalud.
El
xenobitico
eseltrmino
genrico
yelmsutilizado.
El
veneno
sereservacuandohayuna
intencionalidad
deproducirdao
.
El trmino
toxina
se utiliza cuando el origen es
biolgico
(toxinas animales,
vegetales,microbianas).
Unxenobitico,enfuncinde:
Su
estructuraqumica
,puedenser:aminasaromticas,dioxinas,hidrocarburos
aromticospolicclicos(HAP),metales,etc.
Su
mecanismo de accin tenemos los inhibidores de acetilcolinesteresa
(organofosforados)ylosproductoresdemetahemoglobina.
El rgano afectado
: hepatotxicos, nefrotxicos, neurotxicos, inmunotxicos,
mutgeno,cancergenoyteratgeno (a estos3ltimos selesllamaenconjunto
CMR)
La
intoxicacin
es la
alteracin del equilibrio fisiolgico o de salud causada por un
xenobitico.Laintoxicacinpuedeserdiferenteenfuncindel:
Gradodeafectacin
puedeser
leve,moderadaograve
.
Nmero de exposiciones
que son requeridas:
aguda
(una nica exposicin),
crnica
(varias exposiciones),
recidivante
(cuando se ha producido una
intoxicacinaguda,queluegoserepiteeneltiempo).
Tiempo
quetranscurreentre laexposicinylaaparicin delosprimerosefectos
txicos(periodo de latencia):
inmediata
(al poco tiempodehaberseproducidola
exposicin)y
retardada
(cuandoaparecealcabodeuntiempo).
Segnse
restablezcaelestado

desaludpuedeser
reversible
o
irreversible
.
Segn el
dao
:
local
(cuando eldao seproduceenelmismolugardecontacto
conelorganismo)o
sistmica
(cuandonecesitaserabsorbidoporelorganismo).

Segn su
etiologa
pueden ser
voluntarias
(homicidios, suicidios,
drogodependencias y dopaje) y
accidentales
(ambientales, profesionales,
8

medicamentosas,alimentarias,domsticas).
Hay dos
DESASTRES
que hay que conocer: el desastre de
Bhopal
y elde
Seveso
.
Intoxicacin profesional conocida: intoxicacin por amianto. Intoxicacin alimentaria
conocida:desastrede
Minamata.
El desastrede
Bhopal
(
India
)seprodujoen
1984
alproducirseunafugade
isocianato
de metilo en una fbrica de pesticidas. Se cree que el accidente se produjo al no
tomarselas debidasprecaucionesdurantelastareasdelimpiezaymantenimientodela
planta, lo que hizo que diversas impurezas que se arrastraban, entraran en contacto
conel gas almacenado,iniciandouna reaccin exotrmicaqueprovoclaaperturapor
sobrepresin de las vlvulas de seguridad de los tanques, liberando gas txico a la
atmsfera. Este gas se descompuso en cido cianhdrico generando una nube letal
produciendo entre6.000y8.000muertes (total afectados:600.000). Laintoxicacines
ambientalydecarcter
agudo

(grave,con
desenlacefatal
).
El desastre de
Seveso
(Lombarda,
Italia
)
fue un accidente industrial que ocurri en
1976
. El accidenteprodujo laliberacinalmedioambientedecantidadesdela
dioxina
TCDD produciendo gran pnico en la poblacin, sin embargo, no muri nadie ni se
encontraron malformaciones en nios asociadas al accidente. La intoxicacin fue
aguda
ynoletal
.Hubomuchainvestigacindelosefectoscrnicosdelasdioxinas.
El desastrede
Minamata
(costaoccidentaldeKyushu,
Japn
)ocurrien
1930
yfueun
accidente industrialcon cercade900muertosymsde2000afectados.Loqueocurri
fue que la fbrica comenz a utilizar mercurio (se transform en
metilmercurio
, que
produce efectos a nivel del SNC) en los procesos industriales y los residuos se
descargaban en lacosta (mstarde enla Baha deMinamata) yensta zonalagente
se alimentaba bsicamente de pescado. Rpidamente empezaron aaparecerefectos
secundarios y ms tarde sedescubri que haba 81toneladas demercurioenelfondo
de la baha.El casodeminamataesun claro ejemplo de cmo loscontaminantes, en
este caso un metal pesado, abocados al agua, pueden llegar a afectar a los seres
humanos.Esunaintoxicacin
crnica
.

2.Cuantificacindelatoxicidad
La
toxicidad
es la
actividad biolgica
,
vinculada a la estructura qumica de un
xenobitico,queseproducegeneralmenteporsu
interaccin
conmolculasendgenas
yque
dalugaraunefectotxico
.
Lacuantificacineslarelacinentrelosnivelesdeltxicoenelorganismoylosefectos
nocivosqueprovocaenelmismo.
9

La
toxicidad
es, por tanto, un
concepto
relativodedifcil
medidaque
depende
de: la
estructura
y forma qumica del compuesto, las
condiciones
de la exposicin (dosis
interna)ylas
caractersticasindividuales
.
2.1.Estrategiaparaevaluarlatoxicidadgeneral
Paraversiuncompuestonuevoestxicoono,loponemosencontactoconunservivo
(
experimentacinin vivo
). Se prueban
exposiciones cortasaaltasdosisyexposiciones
largasabajasdosis
.

1. Enestudios de
toxicidadagudao dosisnica
,elndicedetoxicidadutilizadoesel
DL50
(dosisletal 50).EstaDL50 sedefine comoaquella cantidadde sustanciaqueen
determinadas condiciones experimentales, produce la muerte del 50% de la especie
animal dada. La
CL50
,
o concentracin letal media o concentracin letal 50, es lo
mismo quela DL50 peroporla
vainhalatoriaoinvitro
.
IC50
oconcentracininhibitoria
mediao concentracin inhibitoria50 es igual quela CL50 pero suponelainhibicindel
crecimiento
celularynolamuertecelular.
2. En estudios de
toxicidadcrnica o dosis repetida
,el ndicedetoxicidadutilizado
esel
NOAEL
o
LOAEL
(ver2.3.)
2.2.Clasificacinyetiquetadodeproductosqumicos
La
clasificacin
y etiquetado de productos qumicos est definida por el real decreto
1272/2008yclasificaalosproductosen3categorasdiferentes:
Muy txico
:
<25 mg/Kg p.c. (
cuanto ms baja es la DL50, ms txico es el
compuesto
).
Txico
:
25200
mg/kgp.c(p.c=pesocorporal)
Nocivo
:
2002000
mg/kgp.c.
2.3.ndicesdetoxicidadcrnica
NOAEL
(No Observed Adverse Effect Level): es la
dosis
sin efecto adverso observable. Es la mayor
dosis de una sustancia, determinada por
experimentacin, que no produce efectos adversos
observables bajo unas determinadas condiciones de
exposicin.(NOael,NOefectoadverso)
LOAEL
(Lowest Observed Adverse Effect Level):
dosis ms baja capaz de producir
efectos adversos
.
Es la menor dosis de sustancia, determinada por
experimentacin, que produce efectos adversos
observables bajo unas determinadas condiciones de
10

exposicin.
Portanto la NOAEL va antes quela LOAEL y ambos definen el
umbral de toxicidad
.
Aquhabra que pedalear unpocoporquesiloquedefineelNOAELyLOAELessihay
o noefectos adversos,cmoes posible queexistaun rango de dosis entre las dosis
queno producen efectosadversosylas ques (esterangoeselumbraldetoxicidad)?
Esto esporqueel estudioesthechoparaunasdosisconcretasynosesabequepasa
entre una dosis y otra,porejemplo, se estudian100,200 y 300 mgyen100nossale
que no es txico y en 200sperocomono sabemos qu pasaenmedio (150mg por
ejemplo) porque no hemos estudiado a esas dosis intermedias, a ese medio lo
llamamos umbral de toxicidad,enel quepuede quehayaefectos adversos o no, pero
nolopodemossabersinestudiaresasdosisdeformaemprica.
Ambas deben ser dosis experimentalmente ensayadas. No se pueden calcular por
extrapolacinynosiempreesposiblecalcularlas.
9.9.2014

3.Selectividadysensibilidad
La
selectividad
tiene que ver con la
forma
con que las
distintas especies pueden
responder
ante la agresin a un mismo xenobitico, lo que da lugar a
diferencias
interespecficas
. Los distintos rganos responden de forma diferente frente a la
agresindeuntxico(existelatoxicidadrganoespecfica).

Por otro lado, la

sensibilidad
es la manera en la que los
distintos individuos deuna
misma especie responden de manera distinta a los efectos txicos, lo que dalugar a
diferencias interindividuales
: personas normales, hipersensibles (a misma dosis, el
efectoesexagerado)ehiposensible(amismadosis,elefectoesmenor).

4.ndiceteraputicoymargendeseguridad
Cuando uno busca un medicamento, busca que sea eficaz y seguro. En la empresa
farmacutica se maneja mucho el concepto de
ventana teraputica (o ndice
teraputico), que da una idea de la
separacin
que existe entre la
dosis txica
(irreversibleoreversible)yla
dosisinefectiva
.

11

IT=DL50/DE50
El
margen deseguridad compara el
lmiteinferiordetoxicidad(dosistxicamnima)y
el margen superior de eficacia
, es decir, busca la
dosis eficaz para el 100% de la
poblacin y que no sea txica para el 100% de la poblacin. Se busca que tanto la
ventanateraputicacomoelmargendeseguridadseanlomsamplioposible.

MS=DT1/DE99

12

TEMA3:FASESDELFENMENOTXICO
1.Exposicin

La
exposicin
es el
conjunto de factores que permiten la
penetracin
de un
xenobitico hasta elinterior delorganismo vivo
ysu
absorcin
.Sinohayexposicinno
hay riesgo de toxicidad. Es uno de los dos elementos de la evaluacin del riesgo(el
otro es la toxicidad).
Cuando la exposicin es no intencionada, resulta muy difcil
cuantificarla
.Paradisminuirelriesgosetomanmedidasdereduccindelaexposicin.
En los
contaminantes ambientales hay una fase de
produccin
que puede ser:
emisin
cuandoel gasvaala atmsfera
descarga
cuando vaaunmedioacutico.El
contaminante tiene una determinada cintica, llamada
cinticaambiental
,quepuede
experimentar fenmenosde
transporte
(sealeja delazonadeproduccin),fenmenos
de
transformacin
(se puede degradar, convertirse en otro compuesto ms txico) o
puede quedar
depositado
(en materia inerte o viva). Todo esto determina que pueda
haber
exposicin
ono.
Enlos
contaminantes alimentarios
,la mecanstica es diferente. Puedenser
metales,
COPs y residuos
. Son compuestos muy resistentes, desde el punto de vista qumico,
quepermanecenen elmedio ambiente y pasanalosanimales,yde stosalaespecie
humana. Existen estudios que hanobservado lapresencia de medicamentos enagua
potable,inclusodespusdehaberpasadolosprocesosdedepuracin.
Existen dos
formas de exposicin
: la
intencionada
(usada en experimentos y en
clnica) y la
no intencionada (en el ambiente, alimentos y mundo laboral
generalmentemsdifcildecuantificar).
La
disponibilidad fsica determina la cantidad de txico en forma activa disponible
para la
penetracin
. Mientras que la
disponibilidad biolgica
es, unavezque se ha
producido la exposicin y en funcin de todos los procesos cinticos, la cantidad de
txicoenformaactivadisponibleparala
accin
.

2.Vasdepenetracinyprocesosdetrnsito
Las
vas naturales
de penetracin son la
oral, inhalatoria y la drmica
. Cuando se
clasificanlos productosqumicosen funcindesutoxicidad
,seestudianestasvas(no
seestudia la intravenosaporejemplo).Las
vasexperimentales
sonla
intraperitoneal,
subcutnea,intramuscular,intravenosa
.
Laabsorcinsuponeelpasodelxenobiticoalasangre.
13

Lo ideal de un
aditivo alimentarioesque no se absorba
(as no habr queestudiarsu
toxicidad).Si se absorbe, puedeser quesealmacene enla bilis, enel hgado,sangre,
rin, en diversos tejidos reservorios como la grasa,huesos y tejidosblandos. Puede
eliminarseporlaorinaypulmones.
La
toxicocintica
/ farmacocintica estudia el compuesto
una vez que se ha
absorbido
. Es el
conjunto de procesos que tienen lugar
dentro del organism
o y que
determinan la cantidad de xenobitico que ser capaz de reaccionar con la molcula
endgena. La toxicocintica estudia, o bien
dosis altas de
medicamentos
en las que
puede cambiar el comportamiento cintico
, o bien la
cintica de
xenobiticos
queson
txicos.
Los procesos que tienen lugar son: absorcin, distribucin, biotransformacin,fijacin
(puedequedarretenido en eltejido esunfactoratenerencuentaporquepuedeser
lacausadelaaltatoxicidad)yeliminacin.
Si un xenobitico es muy txico pero no hay exposicin, no nos afecta. Si no se
absorbenopasa nada. Sise absorbe y se eliminanosimportar en funcindecuanto
seelimine/absorba.Siseabsorbeyquedaretenidoeneltejidoeslomsgrave.
Un xenobitico, en el proceso de trnsito, est continuamente atravesando
membranas. Los
compuestos que ms se absorben son los lipfilos
, como el
metilmercurio,poresoesmuytxico.
Sistemasdetransporte
Difusin simple o pasiva
. Es lo ms
habitual
para los xenobiticos. Lo
caracterstico de este sistema de transporte es queva
afavordegradienteyno
requiere energa. La
velocidad de paso es proporcional al
gradiente
de
concentracin y tambin influye la
liposolubilidad
del xenobitico, el
grado de
ionizacin
.
Losxenobiticospuedenutilizar
sistemasdetransporteproteicos
,aunquetienen
que tener similitud estructural con el receptor. Es el caso de la
difusin
facilitada
(
a favor de gradiente y mediante protena transportadora) y el
transporte activo (
en contra de gradiente
, mediante protena transportadora,
necesitaenerga).Noeslohabitualenxenobiticos.
Tambin pueden presentar fenmenos de
fagocitosisypinocitosis
, en laque
hay una
incorporacin de partculas slidas o lquidas en las clulas. Tiene
mucha importancia en el
pulmn
aunque este tipo de transporte no es muy
habitual.
Ahora vamos a ver las absorciones a travs de las tres vas naturales: drmica,
14

inhalatoriayoral.

3.Absorcindrmica
La
piel
es una
barrera
muyimportante que impide elpaso de sustanciasextraas.De
cara a la absorcin por esta va,
influye
el pH,la temperaturayel usode
disolventes
(DMSO facilita absorcin de muchos xenobiticos a travs de la piel). Hay muchas
diferenciasinterespecficas.
Qu xenobiticos atraviesan la barrera? Los txicos de
pequeo tamao y muy
liposolubles
, como el
tetracloruro de carbono(usadocomo disolvente, aunqueahora
noseutilizaporsutoxicidad),el
gassarn (produjo intoxicacinen elmetrodeTokio),
paraquat
(es un insecticida),
paratin
(insecticida organofosforado),
anilinas y aminas
orgnicas
(utilizadas en sntesis orgnicayque se absorben totalmenteatravs de la
piel). Tambin la atraviesan los txicos
hidrosolubles muy pequeos como la
hidrazina
.
Lasvasderiesgosonlasindustriasqumicasylaslaboresagrcolas.

4.Absorcininhalatoria
El
pulmn
es la va de
penetracin de gases (
CO, NO
, NO, SO
),
vapores lquidos
2
2
voltiles (como el
benceno
, el
tetracloruro de carbono
),
aerosoles y partculas en
suspensin.
La
velocidad de difusin es mayorparagases y vapores ya que sonmuysolubles.Sin
embargo,las
partculas y aerosolespenetranmslentamenteypuedenserabsorbidas
por
pinocitosis
.Muchasvecessonretenidasenlaspartessuperioresdelpulmn.
10.9.2014

5.Absorcinoral
Los xenobiticos se pueden absorber a lo largo del tracto gastrointestinal (medio
externo)perofundamentalmente en el
intestino
,que muestra una
mayor
superficiede
absorcin
. La superficie deabsorcin relativadelos distintostejidos es: esfago 0.02,
estmago0.1,intestinodelgado100,intestinogrueso1,recto0.05.
En la absorcin,
influye el
pH del xenobitico, de modo que los xenobiticos con
caractersticas de cido dbil se absorben preferentemente en el
estmago
, mientras
que las
bases dbiles se absorbern preferentemente en el
intestino
. El pH cido
favorecequeloscidosdbilesseencuentrenensuformanoionizada.
15

Para saberenqu proporcinest laforma no ionizada: pKa pH= log (no ion)/(ion).
El cido benzoico tiene un pKa de 4,portanto:4 2(estmago)= log(noion)/(ion)=
100. Tenemos 100 veces ms la formanoionizada que la forma ionizada. En el caso
delaanilina quetieneunpKade5,nossalequelaforma ionizadatieneunaproporcin
1000 veces superior a la no ionizada (porque es bsica y hay quedarle lavuelta a la
frmula).
Las
enzimas
presentes en el tubo digestivo pueden neutralizaralgunosxenobiticos,
como elveneno deserpiente,ydarlugaranuevoscompuestos
,comolaconversinde
nitratos en nitritos por las nitratorreductasa bacterianas. Los nitritos se utilizan como
conservantes.Estosnitritostienen una posiblereaccin con aminasendgenasdando
lugar a
nitrosaminas
. Todo esto ocurre en el intestino. Las nitrosaminas son
compuestos
cancergenos
.
Lapresenciade
alimentospuedeafectaralaabsorcindexenobiticosfavorecindola
odisminuyndola.

6.Distribucin
La distribucin es el proceso de
trnsito
del xenobitico en el organismo
hasta
alcanzarunequilibriodeconcentracinenlosdistintoscompartimentos
celulares.
Se realiza a travs de la sangre. La
cantidad de xenobitico que llega a un rgano
depende de: la
concentracin plasmtica del xenobitico,
flujo sanguneo
en el
rgano, facilidad de xenobitico para
atravesar
los capilares (liposolubilidad), que
depende de sus propiedades fisicoqumicas y de la
estructura de los
capilares
(capilares ms permeables estn en el hgado),
afinidad
del xenobitico por
componentescelulares.
Algunosoriginaneldaounavezlleganalasangre,porejemplo,elCO.

Muchos xenobiticossetransportan
unidosaprotenasplasmticas
,fundamentalmente
a la albmina. La unin a protenas disminuye su distribucin a tejidos y retrasa su
eliminacindelorganismo.Estosetraduceenuna
elevadasemivida
plasmtica
.
La unin a protenas es una unin reversible mediante enlaces no covalentes y se
puede verse afectada por la presencia de otros xenobiticos con mayor afinidad
(desplazamiento delxenobitico, dandolugar a
fenmenos de desplazamientoque,en
ocasiones, pueden ser causa de
toxicidad
, por aumento brusco de la concentracin
plasmtica.
La
barrera hematoenceflica
constituye un obstculoparala llegadade xenobiticos
16

al SNC. Es un
sistema de proteccin
para los agentes txicos y suponeun problema
para el acceso de determinadosfrmacos.Lascausasanatmicasquehacenqueesta
barreratengaestascaractersticas enconcreto son: las
clulas
endotelialesestnmuy
juntas
(adiferenciadeloscapilaresdelhgado,quesonmuypermeables),
rodeadas
de
clulade
glia
, con
bajocontenidoproteicoenelespaciointercelular.Labarreranoest
deltododesarrolladaenelrecinnacido.
La
barrera placentaria es un
rgano fetomaternocuya funcin es: el
intercambiode
productos metablicosygaseosos entrela circulacinmaterna y lafetal,la
produccin
dehormonasylafuncinde
barrera
.Eldesastredeminamataprodujointoxicacinfetal
grave por metilmercurio.La barrera placentaria es unabarrera menosselectiva(quela
del SNC),muchosxenobiticospuedenatravesarpordifusinsimple,otrospordifusin
facilitadaoporsistemasespecializadosdetransporte.

7.Fijacin
La fijacin es un proceso por el que algunos txicos quedan
retenidos
en ciertos
tejidos. Las principales causas de fijacin son el
transporte activo (el
paraquat
produce una toxicidad sistmica y se almacena en el
pulmn
, produciendo fibrosis
pulmonar),
afinidad
por unaestructuraoprotena(sequedanretenidosenuntejido.El
cadmio
produce toxicidad renal porque se acumula en el
rin
,al haber unaprotena
llamada metaloprotena que lo almacena) y
solubilidad
en unafase(esto ocurrecon
compuestos muy liposolubles como
dioxinas, difenilos policlorados
, etc, que se
almacenanenel
tejidoadiposo
produciendotoxicidad.
Algunosxenobiticosseacumulan enel
rgano/tejidodiana(aquelenelqueeltxico
ejercepreferentemente suaccin).Ej:elparaquatenlos
pulmones
floryestroncioen
los
huesos
cadmio en el
rin
. Otros xenobiticos se acumulan en un tejidodistinto,
como el plomo, que pasa del hgado al hueso, donde no es txico. Los PCBs y las
dioxinasseacumulanenla
grasa
.
En dichos tejidos no ejercen un efecto txico pero se produce un fenmeno de
bioacumulacin y de biomagnificacin,yademsexiste elriesgo de biodistribucindel
txicoenelorganismocomoconsecuenciadecambiosfisiolgicos.

La
bioacumulacin
es el
aumento progresivodela
concentracindexenobiticoenel
tejido de un
determinado organismo
se aplica en particular a los compuestos muy
liposolubleseneltejidograso.
La
biomagnificacin
es lo mismo pero cuando aumenta la concentracin de dicho
xenobitico
amedida que seasciende enla escala filogentica
,esdecir,los
animales
17

mayores
van acumulando msxenobitico ya que ste nuncasedegrada. Supone un
peligro para la propia especie animal y una fuente de transmisin al ser humano a
travsdelaalimentacin.

8.Excrecin
La excrecin es el conjunto de procesos que conducen a la
eliminacin
de la
estructura

primariadelxenobiticoydesus
metabolitos
delorganismo.
Las vas de excrecin son: la urinaria, biliar, pulmonar y las glndulas (mamarias,
sudorparas,salivales,lacrimales).
La
excrecinRENAL
tiene3pasos:
Filtracin glomerular
: los xenobiticos unidos a albmina no pueden ser
filtrados.Elfactorlimitanteeseltamao.
Difusin pasiva tubular
: se dan fenmenos de reabsorcin tanto en el tbulo
proximal como distal que pueden ser modulados variando el pH. Enocasiones
sedanfenmenosdeobstruccintubularporprecipitacin.
Transporte activo
: algunos xenobiticos utilizan sistemas de transporte de
cationes o aniones no muy especficos. Pueden ser sistemas de secrecin y
tambin de reabsorcin, en cuyo caso pueden ser causa de retencin en el
rin.
La determinacin de metabolitos en orina es una forma relativamente sencilla para
demostrar la exposicin a un xenobitico es lo que llamamos:
biomarcador de
exposicin
.
En la
excrecin BILIAR
, la bilis cumple un papel importante. El xenobitico pasa a
travs del conducto biliar para llegar al intestino. Esta excrecin est reservada para
conjugados con el cido glucurnico y elglutatin
.Estosconjugados son reconocidos
por sistemas especializados de transporte. Es
susceptible a los fenmenos de
saturacin y de inhibicin competitiva puesto que operan sistemas especializados de
transporte.Noestcompletamentedesarrolladoenelfeto.
Muchos xenobiticos pueden excretarse a travsde laleche (
excrecinva
glndulas
mamarias
) lo que suponeun riesgo para elrecin nacido (el nio estexpuesto a los
xenobiticosquelamadretomaporladieta,porejemplo).
Los conjugados se hidrolizan por las bacterias intestinales dando lugar al compuesto
libre,elcualpodr
reabsorbersedenuevo
,completndoseel
cicloenteroheptico
.
11.9.2014
18

Ejerciciosdeclase
ParaqueunaDL50estbiendefinidahayquedar:
unidades
(mg/kg),la
especie
yla
vadeadministracin
.
Problema1.
Lacomparacindeladosisletaldeuncompuestosegnlasdistintasvas
depenetracin,informasobrelaabsorcindelmismo.

Pentobarbital

Isoniazida

Procana

DFP

DL50

DL50

DL50

DL50

oral

280

142

500

subcutnea

130

160

800

intramuscular

124

140

630

0.85

intraperitoneal

130

132

230

intravenosa

80

153

45

0.34

Va
administracin

ElcompuestomstxicoporvaintravenosaeselDFPporqueeselquemenor
DL50tiene.Elmenostxicoeslaisoniazida.
ElmstxicoporvaoraleselDFPyelmenostxicoeslaprocana.
Por qu va resulta menos txico cada uno de ellos? pentobarbitaloral,
isoniazidasubcutnea,procanasubcutnea,DFPoral.
Qu concluira sobre la absorcin de cada uno de estos compuestos por las
distintas vas? En la isoniazida hayvalores muyparecidos deDL50,podramos
asumir que no hay mucha diferencia entre las distintas vas. La procana sin
embargo, presentadiferentes absorciones ya que los valores dela DL50en las
diferentesvasdeadministracinesmuydiferente.
LaDL50 quesacamosdeun estudio detoxicidadaguda no tienequeserundatomuy
exacto,esundatoaproximadoyorientativo.
Problema 2.
Calcule la concentracin que tiene que preparar para administrar una
dosis de 1 mg/kg a ratas de aproximadamente 250 g de peso si el volumen de
administracin es de10mL/Kg. Obtengaunafrmulageneralysencilla parahacerese
clculo.Quvolumenmnimoprepararasivaaadministraresadosisa10animales?
1mg/kg1kg/1000g250=0.25mg
19

10ml/kg1kg/1000g250=2.5mL
0.25mg/2.5mL=
0.1mg/mL
Elvolumenparalos10animalessera:2.5mL10mL=
25mL
Problema3.
Imaginequetienequeensayarlatoxicidadinvitrodeuncompuestoyque
va a probar las siguientesconcentraciones finales en mediode cultivo: 21 0,50.25
0.1mg/mL.
Supongaqueelensayolorealizaenplacasde96pocillosyqueesaconcentracin final
se alcanza aadiendo 50 microlitros a 200 microlitros de medio de cultivo. De cada
concentracinvaahacer4rplicas(4pocillos).
a) Diga qu concentracin necesitar preparara para conseguir los 2 mg/mL de
concentracinfinalyquvolumenmnimonecesitarpreparardeesaconcentracin
b) haga los clculos para preparar las diluciones seriadas ms bajas a partir de esta
concentracin.
a)2mg/mL1microlitro/1000mL250microlitros=0.5mg
0.5mg/50mL=
10mg/mL

20

16.9.2014

TEMA4:BIOTRANSFORMACIN
1.Introduccinalabiotransformacin
La
biotransformacin
es el
conjunto de cambios qumicos que seproducen en la
estructura del xenobitico y que tienenlugar en elorganismoparahacerlo
mssoluble
y deeste modo poder eliminarlo delorganismo.Dichodeotromodo:esunconjuntode
reacciones
enzimticas
que introducen cambios en las estructuras qumicas de los
xenobiticosconobjetodefavorecersueliminacin.
Participan unagrandiversidaddeenzimas ylasreaccionessontambinmuyvariadas,
detalmaneraqueunmismoxenobiticopuededarlugara
distintos
metabolitos
.
El
tipo de reacciones que experimenta un xenobitico viene
determinado por su
estructura qumica y,si bien sepuedepredecir,esnecesario
estudiarelmetabolismo
casoporcaso
.
El metabolismo es un aspecto clave tanto en el efecto teraputico de los frmacos
comoenelefectotxicodexenobiticosengeneral.
En general el metabolismo facilita la eliminacin del xenobitico delorganismo,porlo
que sera un proceso detoxificador, pero en ocasiones dalugar a metabolitos txicos,
encuyocasosehablade
bioactivacin
.

2.Tiposdereaccionesylocalizacin
Amedidaqueuncompuestose
metaboliza
,sevuelve
mshidrosoluble
.
El xenobitico sufreuna
reaccin deFASEI
para dar lugaral metabolito 1, en elque
pierdelosgrupos:
OH,SH,NH
,COOH
,mediantereaccionesdeoxidacin,reduccine
2
hidrlisis.
En la
reaccin de FASE II
, el metabolito 1pasa a ser metabolito 2 dandolugar a un
conjugando que es mucho ms hidrosoluble y fcil de eliminar. El metabolito se
conjugacon:
glucurnico,glutatin,sulfato,aminocidos,gruposacetiloymetilo
.
Una molcula que no haya pasado la reaccin de Fase I puede experimentar una
reaccindeFaseII(aunquealrevsesmsraro).
Estas reacciones de biotransformacin
ocurren
en
muchos
RGANOS
, pero el
principal es el
hgado
. Otros rganos son: el
pulmn, intestino, rin, piel, msculo,
21

gnadas
y
bacteriasintestinales
.
Dentrode cadaCLULA
, la biotransformacintiene lugarenunos lugaresconcretos:
retculoendoplasmticoliso,mitocondrias,lisosomas,peroxisomas,citosol
.
Si queremos hacer un estudio con enzimas humanas pero no las tenemos, podemos
hacer lo siguiente: extraer y homogeneizar una parte del hgado de un ratn y
centrifugarlo a 9000g para que se depositen en el fondo los rganos enteros.
Recogemoselsobrenadanteytenemosla
fraccinS9
,quesontodo
enzimassolubles
.
Si esta fraccin la centrifugamos a 100.000
(nos hemos pasado con los ceros?)
obtenemoslafraccincitoslicaymicrosomal,quesonmuchomspuras.
Tanto las fracciones S9 como fracciones ms purificadas se utilizan en
sistemas
experimentalesinvitrocarentesdeenzimashumanas
.

3.Reaccionesdeoxidacin
3.1.ReaccionesdeoxidacincatalizadasporelCYP450
El 90% de los xenobiticos sufren reacciones de
OXIDACIN
. Las reacciones de
oxidacin son catalizadas por el
CYP450
, enzimas dependientes de
FAD
o flavn
monooxigenasa,
amino oxidasa
,
alcohol y aldehdo deshidrogenasas
,
ciclooxigenasas
.
El CYP450 se encuentra unido a otras enzimas como la reductasa y otras enzimas
detoxificadoras.TodoformaelcomplejodelcitocromoP450.
El
CYP450
lo que hace es
aadir un nico tomo de oxgeno
. La enzima es una
monooxigenasa mixta,porqueaadeunnicotomodeoxgenoyporqueesmuypoco
especfica.
Se utiliza una molcula de oxgeno y al final de la reaccin se libera una
molculadeagua
.
+
+
Reaccingeneral:SH+O
+NADPH+H
SOH+H
O+NADP
2
2

El sistema citocromoP450 juega un papelfundamentalen:laduracineintensidaddel

efecto
demedicamentos bioactivaciny
detoxificacin
de xenobiticos (en general)
biosntesis
y
catabolismo
de hormonasesteroideas, cidos grasos,cidos biliaresy
vitaminasliposolubles
.
ElCYP450esunahemoprotena.Tieneuntomodehierro,quecuandoestenestado
+
Fe
3 es capaz de incorporar el sustrato formndose el complejo enzima sustrato
+
+
P450Fe
3. El siguiente paso es la prdida de un electrn, quedando P450Fe
2 (se
reduce).Elsiguiente pasode lareaccin consiste enla incorporacindeunamolcula
22

deoxgenoalcomplejoenzimasustrato.Enel siguientepasoseincorporaotroelectrn
(las enzimas slo pueden ceder electrones de uno en uno). Luego se libera una
molcula de agua y por ltimo el SOH se incorpora al xenobitico y lahemoprotena
quedacomoalprincipio(esunciclo).
La
HIDROXILACIN
eslareaccinmsfrecuentecatalizadaporelcitocromoP450.La
reaccin de hidroxilacin se da en:
tomos de carbono (generalmente en
hidrocarburos aromticos: benceno fenol), en
funciones aminas (anilina
fenilhidroxilamina.Aunquelafenilhidroxilaminaesmstxicoquelaanilina).
La hidroxilacin transcurre a travs de la
formacin de
epxidos
, compuestos muy
reactivos con macromolculas endgenas. El cloruro de vinilo da lugar a un
intermediario epxido y ste se convierte en cloracetato (muy txico).El naftalenoda
lugar a un intermediario epxido y el organismo tieneuna enzima especfica (epxido
hidrolasa)quepermiteladetoxificacindelintermediarioydeotrosepxidos.
NomenclaturaCYP450
El citocromo P450 es una familia muy numerosa que cataliza una gran cantidad de
compuestos endgenos y exgenos (medicamentos y otros xenobiticos). Se conoce
bien la secuencia de aminocidos. En funcin de esta secuencia de aminocidos se
agrupan en familias, subfamilias e isoenzimas. Para denominar correctamente a un
citocromo, la nomenclatura es CYP, espacio, nmero, letra, nmero. El nmero nos
determina la familia (de 1a4. Dauna identidad superior al 40%). La letra identifica la
subfamilia (de AaE.Da un 55% deidentidad,esdecir,separecenmsentreslosde
lamismafamiliaquelosdelamismasubfamilia).Ej:CYP2B1,CYP2B2,CYP2B3.
Enel ser humano se handescritomsde18 familiasy43subfamilias.LosCYP1,2,y
3 son responsables de la oxidacin de aproximadamente el 90% de los frmacos y
tambin de algunas reacciones raras de reduccin. Los CYP4, 11, 17, 19 y 21 se
encargandelmetabolismodecompuestosendgenos.
Sehan descrito ms de 57 genesCYPhumanosactivos,58pseudogenesy450alelos
CYP. Algunos son muy polimrficos, como los de la clase 1: CYP 2A6, CYP2B6,
CYP2C9, CYP2D6 y CYP2C19 mientras que los de la clase 2 son poco variables:
CYP1A1,CYP1A2,CYP2E1,CYP3A4.
3.2.Reaccionesdeoxidacincatalizadasporotrosenzimas
LasmonooxigenasasmicrosomalesquecontienenFAD
+
+
Reaccingeneral:
SH
+O
+NADPH+H

SOH
+H
O+NADP
2
2
As como en el CYP450 las reacciones eran de hidroxilacin, aqu se producen
reacciones de oxidacindenitrgeno,azufre y fsforo.Sehanescritovariasisoformas
23

(FMO16).Ladeficiencia en la
isoformaFMO3 da lugaralsndromedelolorapescado
(metabolizalametilamina).
Lasmonoaminoxidasas(MAO)ydiaminooxidasas(DAO
)
Las MAO son enzimas mitocondriales presentes en el sistema cardiovascular.
Metabolizanaminasendgenasyexgenas.LasDAOsonenzimascitoslicas.
Reaccingeneral:R
CH
NH
R
CHO
+
NH
2
2
3
Laaldehdodeshidrogenasa(AIDH)ylaalcoholdeshidrogenasa(ADH)
Esresponsabledel metabolismodel95%delalcoholetlico.Lacapacidaddetoxificante
paraeliminarelalcoholetlicodependedeestaenzima.
Reaccingeneral:RCH
OH
R
CHO
2
Elsiguientepasoesconvertirelaldehdoengrupocarboxlico:R
CHO
R
COOH
Laoxidacinacopladaalasntesisdeprostaglandinas(COX)
La sntesis de prostaglandinas es a partir del cido araquidnico a travs de las
ciclooxigenasas. Hay dos isoformas, la COX1 (constitutiva) y la COX2 (que es
inducible). En elprimerpasosepierdeuntomodeoxgeno,que puedeincorporarseal
xenobitico.
17.9.2014

4.Reaccionesdereduccin
Los principales
agentes reductores son el
FAD, FMN, NAD, NADP y el glutatin
reducido (GSH). Las molculas quepueden experimentar reduccinsonlos
aldehdos,
cetonas,sulfxidos,Nxidos,N=N,NO
.
2
En condiciones debaja concentracindeoxgeno,uncompuesto puede volverse ms
txicodeloqueyaera.
Los
enzimas
que participan en las reduccionesson:el
CYP450, carbonil reductasa,
alcohol deshidrogenasa, NADPH cit. P450 reductasa, enzimas bacterianas,
DTdiaforasa
.

5.Reaccionesdehidrlisis
Se produce una rotura del xenobitico con una molcula de agua dando lugar a un
producto con un grupo carboxilo, que es susceptible de sufrir reacciones de fase 2.
Estasreaccionessuelenserde
detoxificacin
.Ej:
24

R COOR + H
O R COOH + ROH. La enzima es la
esterasa
2
(colinesterasasdelplasmaoacetilcolinesterasasdeeritrocitos).
RCONRR+H
ORCOOH+HNRR.Medianteuna
amidasa
2
RCOSR+H
ORCOOH+HSR.
Tioesterasa
2
Elparatin,porunadesulfuracinoxidativa,dalugaralparaoxn,queesuncompuesto
msactivo(reaccindebioactivacin).

6.ReaccionesdefaseII
Existen varias posibles conjugaciones. De ms a menos frecuente (ver imgenes en
diaposloimportantesonlasenzimas):
Conjugacin con el cido glucurnico mediante laUDPglucuronosiltransferasa
:
afectaa todoslos xenobiticos queen su estructuratengan ungrupo
ROH,RCOOH,
RNH
, RSH
.Elcidoglucurnicosesintetizaapartirdelaglucosa1P,que mediante
2
UTP se forma la UDPD glucosa, quereacciona con aguay2NAD para dar lugar al
cidoUDPD glucurnico, el cual se une al metabolitodando lugaral conjugado.El
conjugado tiene un grupo carboxlico que lo hace ms liposoluble y hace que el
transportadordeanionesdelhgadoyrinpuedanidentificarlo.
Conjugacin con el glutatin (GSH) mediante la glutation transferasa
: afecta a
todos los xenobiticos que en su estructura tengan
epxidos y compuestos
halogenados
. El glutatinesun tripptido constituidopor el cidoglutmico,cistenay
glicina.
Luego puede ocurrir una reaccin de faseII en laque elxenobiticoqueda unido a la
cistena (primero se pierde el cido glutmico). El grupo amino sufre una acetilacin
dandolugaraunconjugadomercaptrico(conNacetilcistena).
Conjugacin con sulfato mediante la sulfatotransferasa
: afecta a todos los
xenobiticos que en su estructura tengan
ROH y RNH
. La cistena mediante 2 ATP
2
da lugar a la sulfurilasa, liberndose una molcula de ADP, y dando lugar a la 3
fosfoadenosin5 fosfosulfato. La reaccinde conjugacinconsisteen laconversin de
CH
CH
OHenCH
CH
OSO
HmediantePAPSsulfotransferasa.
3
2
3
2
3
Conjugacin con aminocidos mediante la aciltransferasa
: afecta a todos los
xenobiticos que en su estructura tengan
RCOOH
. Una vez que tenemos el
xenobitico activado, se produce la acilacin (glicina proporciona el grupo acetato) y
mediantelaaciltransferasaseconvierteenbenzoilglicina(cidohiprico).
Metilacin
:afecta a todos losxenobiticosque en su estructura tengan
ROH, RNH
,
2
25

RSH
.
Acetilacin
: afecta a todos los xenobiticos que en su estructura tengan
RNH
,
2
RNHNH
,RSO
NH
.EldonadordelosgruposacetiloseselacetilCoA.
2
2
2
Preguntas:QueselglutatinqueselCYP450yqureaccionescataliza?.
Sustrato

Conjugadocon

Enzima

OH,COOH,NH2,SH

c.glucurnico

UDPglucuronosiltransferasa

Epxidosyhalgenos

Glutatin

Glutatintransferasa

Sulfato

Sulfatotransferasa

Aminocidos

Aciltransferasa

OH,NH2,SH

Metilo

Metiltransferasa

NH,NHNH2,SO2NH2

Acetilo

Nacetiltransferasa

OH,NH2
COOH

26

23.9.2014

TEMA5:FACTORESQUEINFLUYENENLA
DISPONIBILIDADBIOLGICA
Elefectodeunxenobiticodependedesuestructura.

1.Factoresqumicosybiolgicos
Los
qumicos
son:
lipofilia, pKa, ionizacin, tamao, estructura,quiralidad (puedeser
queunestereoismerotengamsafinidadporunaprotenaqueotro).
Los
biolgicos
son: la
especie
(hay
diferencias interespecficas en los distintos
procesos: absorcin, distribucin, excrecin y biotransformacin). Hay otras que dan
lugara
diferenciasinterindividuales
,comolos
factoresgenticos,edad,sexo,estado
.
Losanimalesengeneraltienenunamayorabsorcinqueloshumanos.

2.Diferenciasinterespecficas
En cuantoa las diferencias interespecficas en la
distribucin
,hayvariaciones en los
tipos y concentracin de protenas plasmticas
, distribucin y proporcin de la grasa
corporal
,
sistemas especializados de transporte
,
velocidad de metabolizacin y
excrecin
.Elmonoyelhombreseparecenmuchoencuantoaladistribucin.
Encuantoa la
excrecinurinaria
:el
volumenurinario cambiamucho(est
regidopor
elpeso
)
En cuanto a la
excrecin biliar
: compuestos con un
peso molecular alto (superior a
300) tienden msaexcretarse por estava. A mayorpeso molecular, mayorexcrecin
vabilis.
En cuanto a la
biotransformacin
: es la
mayor fuente de diferencias tanto
interindividual como interespecfica. Pueden ser
cualitativas
(
perros no acetilan las
aminasaromticas
,
gatos
son deficientesen UDPglucuroniltransferasas
,los
cerdos
no
forman conjugados con el sulfato
, las
cobayas
no forman conjugados con el cido
mercaptrico
, la conjugacin con aminocidos est determinada filogenticamente) o
cuantitativas
(son ms frecuentes. Las
anfetaminassemetabolizandeformadiferente
en el conejo da lugar al al
derivado acetilado

que en el perro da lugar al derivado
hidroxilado
)
Lasdiferencias interespecficas en labiotransformacinsuponen un inconvenienteala
27

hora de extrapolar los resultados

. Hoy en da se pueden estudiar porque disponemos
desistemasinvitrodemetabolismohumanoyotrasespecies.

3.Diferenciasinterindividuales
Variacionesgenticas
Definiciones
:
salvaje
/agreste(versinmscomn deungen),
variante
(versinpoco
comn deungen)y
polimorfismo
(siest presente en
menosdel1%delapoblacin,
es una
mutacin rara
si est presente en
ms del 1% de la poblacin, es un
polimorfismogentico
).
Posibles
variaciones
:
SNPs o
single nucleotide polymorphisms (variaciones en
un
nico par de base
),
CNV o
copynumber variation (son variaciones enel
nmerode
copiasdeungen
),
delecionesoinsercionesde unnicoo
unospocosparesdebase
,
cambioscitogenticos(
translocaciones,duplicaciones,insercionesydeleciones
).Las
variaciones van de
menor a mayor segmento de ADN afectado
. El
haplotipo
es el
conjuntode
variacionesopolimorfismosquetiendenaheredarse
.
Un
alelo
es
unooms versiones de un gen
.Elserhumanoesunorganismodiploidey
heredaunalelo de cadaunodelosprogenitores.Actualmenteseempleatambinpara
describir la variacin entre secuencias de ADN no codificadoras. Si las copias son
iguales,sehabladehomocigosisysisondistintasheterocigosis.
El
genotipo
es el
conjunto de genes
de una persona. El
fenotipo
es el
conjunto de
rasgos observables de una persona.
Resulta de la expresin de los genes pero los
factoresambientales
puedentenertambininfluencia.
Las
variantes genticas en genes de
protenas enzimticas dan lugar a 4 fenotipos
posibles:
metabolizadores pobres (PM), metabolizadores
intermedios
(IM),
metabolizadores
extensos
(EM),metabolizadores
ultrarrapidos
(UM)
Edad
Con laedad hay ciertas cosas quecambian,porejemplo: el
pH
de los recin nacidos,
la
flora microbiana intestinal en el recin nacido, los
dficits de enzimas en el recin
nacido (
CYP450, glucuroniltransferasas
),
motilidad intestinal y concentracin de
albminaenancianos
.
Sexo
El
metabolismo
est ms
aceleradoen machos
: el
hexo
b
arbital
tiene mayorefecto en
hem
b
ras
mientrasqueel
C
C
l4
esmstxicoen
ma
c
hos
.
Estadosfisiolgicos
28

Ritmoscircadianos
La exposicin a xenobiticos puede producir
induccin enzimtica
, que puede
traducirse en unaumento o disminucin de latoxicidad. Hayalgunosxenobiticosque
son especficos para las familias de citocromos:
HAP
(
CYP1A
, hasta 20 veces),
fenobarbital
(
CYP2B1
>20),
etanol
(
CYP2E1
25),
clorfibratos
(
CYP4A
>40).

29

24.9.2014

TEMA6:MECANISMOSDETOXICIDAD
Dentro deladisponibilidadfsicaybiolgica(vertemasanteriores),labiolgicaengloba
latoxicodinmicaqueesloquevamosaestudiarenestetema.
La
fase
toxicodinmica
es la
sucesin de
hechos que tienenlugar
tras la interaccin
delaestructuraactivadelxenobitico

conunamolculaendgena
.
Por norma general, conocer estos mecanismos es muy complicado, pero su
conocimientoconstituyelabase
para:
Interpretar
losdatosdelatoxicologadescriptiva
Establecer
procedimientospara
prevenir
o
contrarrestar
losefectostxicos
Disearmtodos
complementarios
invitro
Disear modificaciones en las estructuras de los xenobiticos para
reducir o
eliminarsusefectosadversos
,obienparaumentarsutoxicidadselectiva
Hacermejores
estimacionesdelriesgo
.
El
xenobitico
(1)
interacta
con una molcula endgena (primera interaccin):
membrana,ADN, protena
, etc, yestovaaprovocaruna
(2)
lesin
celular
,afectandoa
la
funcin celular (sntesis de ATP, etc) o a la
estructura
. Si esto ocurre en muchas
clulas,aparecen
(3)
manifestaciones
clnicas
.
Durante la
necrosis
celular, las clulas se
hinchan
hasta que se rompen,
vertiendo el
contenido hacia el exterior
, desencadenando una
reaccin
inflamatoria
. Las clulas mueren por
necrosis
si sufren
graves daos o
agresiones repentinas tambin por
isquemia
. El contenido de las clulas
necrosadas se derrama al tejido circundante, generando una respuesta
inflamatoria que puede provocar daos adicionales e incluso la muerte de las
clulas adyacentes. La necrosis suele afectar a grupos de clulas,
zonas
tisulares
yes
fcildeidentificar
.
La muerte celular por
apoptosis
tiene un mecanismocompletamente diferente
al anterior, ya que la clula se
encoge
y el ADN se agrega y se fragmenta y
finalmentees
fagocitada
porlasclulasadyacentes.Lonormalesque ocurraen
clulasaisladas
.
Noprovocarespuestainflamatoriaypuedepasar
desapercibida
enuntejido.
El xenobitico puede producir un efecto local (no es letal) o bienpuede absorberse y
producirunefectosistmico.
La
toxicidad
puede ocurrirporla simple
presencia
del xenobitico
en un
determinado
30

lugar
Enotros casos, latoxicidad puede ser
sistmica,
debida (porejemplo) aunareaccin
qumica (
paracetamol
). La toxicidad sistmica puede ser
reversible
(
tetradotoxina
) o
irreversible
(
CCl4
). Si es reversible se puede reparar (aunque no durante largos
tiempos de exposicin: el tejido se cansa de reparar y aparece necrosis, fibrosis y
tumores).Sulfonamidas secomprobquetenantoxicidadrenalporquecristalizaban
eneltbuloyloobstruan,producindoseunanecrosisrenal.

1.Factorestoxicocinticos
Unos
favorecen
la toxicidad
, como la
absorcin
del xenobitico, la
distribucin
por el
organismo, la
reabsorcin
en los tbulosrenalesointestinoyla
bioactivacin
mientras
queotros
obstaculizan
latoxicidad, como la
excrecin
deltxico(presistmica:efecto
deprimerpaso),
retencinenrganosnodiana
,
detoxificacin
.
Pueden ocurrir tres tipos de situaciones: que se elimine, que se quede fijado o que
produzcaunefectoadverso.
Podemosdistinguirdosgrandes
grupos
detxicos:indirectosydirectos.
Los
directos
sonaquellos que
no
necesitan de un proceso de
biotransformacin
para
ejercersutoxicidad,estossonel
CO,HCN,Pb
.
Lostxicos
indirectos
necesitande un proceso de
biotransformacin
yelresponsable
de la toxicidad es un
metabolito
y no el compuesto original (ej:
paracetamol, CCl4
,
metanol
). Trasla bioactivacin, se formael metabolito,que tiene:
nuevas propiedades
fisicoqumicas (
etilenglicol
),
mayor reactividad (
paratin
) y conversin de molculas
indiscriminadamentereactivas
(electroflicotipo
paracetamol
oradicallibretipo
CCl4
).

2.Toxicidadporcompuestoselectroflicos
Los
compuestos electroflicos son
molculas
que contienen un
tomodeficiente en
electrones
, que
reacciona con molculas nucleoflicas
compartiendo un par de
electrones
.
Forman enlaces covalentes con
ADN
y protenas dando lugar a aductos
.Un
aducto
esun
xenobiticoosu metabolitounido
covalentemente
aunamolculaendgena
.El
aducto, adems, es un
indicativo de la bioexposicin (se pueden medir aductos en
sangreesuna
medidadirectadelatoxicidad
).
Un compuesto electroflico se forma como consecuencia de la oxidacin del
xenobitico, pero tambin por una ruptura heteroltica de un enlace covalente (CO,
31

NO),oapartirdecompuestosqumicosinorgnicos.
La
gravedad del dao producidova a
depender delas
molculasreceptoras
.Algunos
efectos
:
mutagnesis, carcinognesis, necrosis celular,sensibilizacinalrgica
.Loque
determina que el dao inducido persista, incluso despus de que el txico haya sido
eliminado del organismo, es la
irreversibilidad
delos enlaces covalentes
. Por ello,el
factor
tiempo
juega un papel importante en la magnitud del efecto txico (si se
prolonga la exposicin se alcanzar el efecto). Los efectos se pueden poner de
manifiestodespusdeunlargotiempodeexposicinadosismuybajas.
Laintoxicacinporparacetamoles
reversible(silacogesatiempo,sinoesirreversible.
No confundir con losenlacescovalentesformaconlasprotenas,quesonirreversibles)
El paracetamol,en orina,se encuentra
conjugado con sulfato (OHOSO
H),aunque
3
tambin lo podemos encontrar conjugado con el
glucurnico
(OH OC
H
O
). Hay
6
9
6
otrocompuestominoritarioque es elparacetamolconjugadocon
mercaptrico
.Enuna
intoxicacin por paracetamol, a medida que pasa el tiempo, la excrecin del
paracetamol va disminuyendo y su semivida aumenta (se acumula en el organismo).
Un % determinado del metabolito del paracetamol pasa por el CYP2E1, formandoun
metabolitotxicoquesecuestraelglutation.Enlaintoxicacin,ladeplecindeglutation
hace que el metabolitoformeaductoscon protenas hepticas, produciendo lamuerte
del hepatocito. El antdoto es nacetilcistena, que ya tiene grupos cistena como el
glutatin,ycompiteconste.Deestaformasesecuestramenosglutation.

En un estudio se compara el paracetamol con otros antdotos del paracetamol (ej:

nacetilcistena realmente esel antdoto del metabolito delparacetamol: el napqi) y
32

con el fenobarbital, pero se observa quela necrosisheptica no disminuye aunquese

administreel antdotocon estopodemos deducirqueel paracetamolnoeselculpable
del deterioro heptico sino queelculpableesunmetabolitodelparacetamol.Conforme
aumenta la dosis de paracetamol, se produce una disminucin del glutation en el
hgadoyaumentalauninaprotenashepticasdelhgado.

3.Toxicidadporradicaleslibres
Un
radical libre es una molcula o fragmento molecular, que contiene un
electrn
desemparejado en sus orbitales externos y tiende a reaccionar con otras molculas
captando esos electrones que le faltan. Reaccionan con el
ADN produciendo dao
oxidativo, con los
lpidos destruyendo las membranas, con el
oxgeno produciendo
especiesradicalesdeoxgeno.
Los radicales libres se pueden
formar
porgananciade un electrn,porprdida deun
electrnoporunarupturahomolticadeunenlacecovalente.
Por
ganancia
deelectrones:
paraquat,doxorubicina,nitrofurantona
.
Por
prdida
deelectrones:
fenoles,hidroquinonas,aminas,fenotiazinas,tioles
.
Por
fisinhomoltica
delenlace covalente: la reductiva es cuando
secaptaun
electrn, quedando un radical libre + 1 anin (es tpicadel CCl4). La
reaccin
de fenton es una fisin homoltica reductiva del
perxido de hidrgeno
,
produciendounradicalhidroxiloyunaninhidroxilo.
Los radicales libres producen una peroxidacin de lpidos que termina en destruccin
de las membranas lipdicas. En las reacciones radicalarias encontramos3fases: fase
deiniciacin,propagacinyterminacin.
Los
radicaleslibres los podemos
detoxificar
con
:
molculasendgenas(
vitaminaC,E
y glutatin las dosprimeras cedengrupo OH y la ltimacede grupo SO)y
enzimas
(
superxidodismutasa,catalasas,glutatinperoxidasas
).

4.Otroscasosdetoxicidad
Metanol
Efectos adversos
:puedeproducir
ceguera
(slosenecesitan10mL)y
muerte
(30mL).
Al principio aparece una
ligera embriaguez con
somnolencia
. Pasadas las 1224h
aparecen
trastornos GI
nuseas, vmitos, dolor abdominal),
alteraciones visuales
(visinborrosa,restriccincampo),
acidosismetablica
.
La
mortalidad
se relaciona con los niveles de
cido frmico
, queseproducen como
consecuenciadela
ADH
(quedalugaralaformaaldehdo)yla
AIDH
(quedalugarala
33

formacida).LainhibicindelcitocromooxidasaenelnerviopticodisminuyeelATPy
con l el funcionamiento del nervio ptico. El frmico produce acidosis metablica y
penetraenelSNC.
Para
tratar
esta intoxicacin podemos
inhibir las enzimas ADH y AIDH
. Podemos
utilizar
etanol
en unadosisequimolar(reduceel90%elmetabolismodelmetanol,pero
la semivida se alarga a 46h). Tambin se puede usar
4metilpirazo
l (inhibidor de la
ADH)y
bicarbonatosdico
IV(paratratamientodeacidosis).
Etilenglicol
Se necesitan 100 mL para que el etilenglicol sea letal. Produce
nefrotoxicidad
. Al
principio produce
embriaguez
, nuseas, vmitos, convulsiones y coma
. A las 1224h
produce
hiperventilacin, taquicardia y acidosis metablica
. Pasadas las 2472h
aparece
insuficienciarenal
.Antdoto:etanolyfomepizol.
Metahemoglobinemia
Lametahemoglobina esuna
hemoglobina oxidada cuyogrupohemocontieneeltomo
+
de hierro en estado Fe
incapaz de transportar
3 y por lo tanto es un a hemoglobina
oxgeno
. La oxidacin de hemoglobina a metahemoglobina ocurre de manera
fisiolgica y est controlada por una enzimallamada
metahemoglobinareductasa
,que
necesitade NADPH.Estaenzima hace queel nivel de
metahemoglobina no supereel
12%
.Estenivel
puede superarse en
condicionesde hipoxia o por ciertos
compuestos
qumicos
, como la
anilina o el nitrobenceno
(
in vivo
) y otros como el
nitrito sdico,
hidroxilamina y fenilhidroxilamina pueden aumentar los niveles tanto
invitro como
invivo
.
Para
contrarrestar
elaumentodemetahemoglobinasepuedeusarel
azuldemetileno
,
que refuerza la accin fisiolgica de la enzima, reduciendo la metahemoglobina.
Tambinsepuedeusar
vitaminaC
,quereponelasntesisdeNADPH.
HCN
Unos 250325 mg de cianuro potsico o sdico es letal. Apenas 1 microgramo/mL en
sangreesletalyunaconcentracinde0.2microgramos/mLestxico.
Los
sntomas
son:
dolor de cabeza, vrtigo, disnea, prdida de conciencia,
convulsiones,paradarespiratoria
(llevaamuerte).
Elcianuro
interfiereconlacadenatransportadoradeelectrones
.
Los
tratamientos
encaminados a la intoxicacin van dirigidos a reducir lacantidad de
cianuro.Esto sepuede hacer potenciandodeterminadas reaccionesendgenas: como
la del
tiosulfato sdico (
tiosulfato transferasa
),
nitrito sdico (convierte la
34

metahemoglobina en CNmetahemoglobina
) y la
vitamina B12 (
hidroxicobalamina
CNcobalamina
).Todos
secuestranelCN
.
Organofosforados
Los
organofosforados
son los
insecticidas
como el
paratin, malatin y diazinn
y
gasesnervioso
comoel
sarn,tabnysomn
.
Producen dos
efectos txicos
:
inhiben las colinesterasas y produce
neuropata
retardada
. Se produceuna
contraccindelaspupilas,excesodesalivacin,sudoracin
y lagrimeo, nuseas, vmitos y diarrea
. Tambin
fatiga, contracciones involuntarias,
fatigamuscular
.AniveldelSNCproduce
ansiedad,ataxia,convulsionesycoma
.
Laneuropata retardadaapareceporuna degeneracin de losnerviosperifricosenla
parte distal de las extremidades inferiores, pero no ocurre con todos los
organofosforados. Los sntomas tardan 1014 das en aparecer. Ej:
triortocresilfosfato.
El
tratamiento
podra ser con
atropina
, que compite con la acetilcolina por los
receptores muscarnicos y la
pralidoxima
, que rompe el enlace
fsforoacetilcolinesterasa, reaccionadirectamente con las molculas de OPytieneun
efectoanticolinrgicosemejantealaatropina.
30.9.2014
GRUPO

DOSIS

RESULTADOS

100

notoxicidad

200

notoxicidad

300

notoxicidad

La NOAEL sera 300 mg/kg por peso corporal pero la LOAEL no la podemos saber
(estudiomaldiseado).
GRUPO

DOSIS

RESULTADOS

100

notoxicidad

250

levetoxicidad

1000

toxicidadgraveirreversible

35

ElNOAELsera100yelLOAELsera250.

36

TEMA7:PREVENCINYEVALUACINDELA
TOXICIDAD
1.Principiosgenerales
Dependiendo del
uso
de un producto
, requerir de una
mayor o menor
evaluacin
toxicolgica:
medicamento de uso humano, aditivos alimentarios, plaguicidas,
cosmticos,medicamentosdeusoveterinario,productosdeusoindustrial
.
En el campo del medicamento, tenemos unas agencias reguladoras (que ya hemos
visto):eneuropalaEMA,AEMPSenEEUUlaFDAenjapnelministeriodesanidad.
Losestudios de toxicidad son losestudios ms
reglamentados
queexisten.Cadauna
de las agencias tienen sus propias metodologas pero en la prctica se parecen
bastante.Puestoque hay esta
diversidad
de agencias reguladoras, se realizan guas
deconsenso
.

2.Ensayostoxicolgicos
La evaluacin toxicolgica puede realizarse mediante
3 categoras de
informacin
cientfica:
estudios epidemiolgicos,
estudios clnicos, y
toxicologa experimental (que
se diferencia de lasdos anteriores en que nohaydatosen humanos). Noscentramos
enestaltima.
El objetivo que persigue la
toxicologaexperimentales:definirla
capacidadtxicadel
producto en cuestin(relacionar dosiscon efecto)conocerel
peligro de suexposicin
segnsea sta
localizarlos rganosdianaymecanismosfisiopatolgicosy
evaluarla
reversibilidad
delasalteracionesencontradas.
Una
evaluacin toxicolgica completa
consta de: ensayos de toxicidad general,
ensayosde toxicidadespecficay
ensayosde
ecotoxicidad
(riesgomedioambiental
sobretodotieneintersenplaguicidas).
Los
estudios de toxicidad
general
estudian cualquier tipo de efecto sobre
aspectos
funcionales omorfolgicosde losdistintos
sistemasu rganosdelindividuo.Dentrode
este grupo se clasifican en funcin de la duracin del efecto. Dentro de la toxicidad
general,diferenciamostoxicidada
dosisnica
(oagudos)oa
dosisrepetidas
.
Los
estudios de toxicidad
especfica estudian un
efecto determinado
. Cada estudio
tendr unmtodoespecficodecuantificacindelosparmetrosmotivodeestudio.Los
estudiosde toxicidadespecficavan encaminadosa:la
genotoxicidad,tolerancialocal,
37

sensibilizacin, fototoxicidad, conocer los efectos sobre la reproduccin,

cancerognesis,inmunotoxicidad
.

3.Ensayosdetoxicidadgeneral
Lo primero que hay que hacer para hacer un estudio de toxicidad es
recolectar y
evaluar los datosexistentes
.Hay quebuscarinformacin previa: sobrelanaturaleza
del
compuesto, su pureza y sus propiedades fisicoqumicas
. Es muy importante
disponer de un
mtodo analtico que permita detectar bajas concentraciones del
compuesto.Tambin hayquebuscardatosde
estabilidad
.Encuantoalaformulaciny
vasdeadministracin:hayunaseriededisolventesrecomendadosquehayquemirar.
Comono sabemos nada del compuesto, se haceun estudio detoxicidadadosisnica
(
obtendremosDL50 y Dosis Mxima Tolerable
)paratener un
conocimientogroserodel
rango de dosis txicas
. Si queremos definir las
propiedades txicas en las
condiciones de uso tendremos que hacer estudios de toxicidad a
dosis repetidas
(obtendremos
NOAELyLOAEL
).
Culesel experimento
ideal
?paraelegirla
especieanima
ltenemosquefijarnosque
el animal, a nivel de metabolismo,
se comporte igual o
parecido al hombre (que
produzca los mismos metabolitos, etc). La
va de administracin adecuada es la
intravenosa
. Hayque estudiar la
dosis
quehayquedar,la
duracin
delosensayosy
qu
parmetros
tenemosquedeterminar.
Las
guas OECD (organizacin para lacooperacinyel desarrolloeconmico) indican
el
protocolo
a seguir en cada uno de los estudios (es el estndar de los ensayos de
toxicidad). Las
guas de consenso nos habla de
estrategias
que hay que seguir (a
diferenciadelosprotocolosdeensayodelasguasOECD).
Los objetivos de los ensayos de
toxicidad general a dosis NICA
sonla indicacin
sobre los
efectos deunaintoxicacinagudaenelserhumano,el
diseo
deestudiosde
toxicidada
dosisrepetidas
yla
clasificacindeloscompuestos
qumicosencategoras.
Son necesariosestudios de dosisque definanuna DMT (dosismximatolerable) enla
especie (si es que no tenemos la informacin disponible). En general estos ensayos
sontilespara
predecirlasconsecuenciasensituacionesdesobredosis
humanas.
La UE dice que necesitamos
dos especies de mamferos (una de ellas no debe ser
roedora),
dos vas de administracin (para humanos y sistmica), y para los
medicamentos no es necesario establecer unDL50
. Observaciones a estudiar: signos
de intoxicacin aguda, causa de la muerte, aproximacin a la dosis letal y
dosisefecto... hay que intentar obtenerla mayorcantidad deinformacinutilizando
38

lamenorcantidadposibledeanimales.
Existen
3 mtodosque permiten
estimar
una
dosis letalmediaaproximadautilizando
entre 5 y 9 animales (
TG420mtododeladosis fija
,
TG423mtododelaclasetxica
aguda
,
TG 425mtodo upanddown
).EnelTG420seadministraladosisenelda0y
se realiza un registro ponderal, se observa la sintomatologa general y se hace un
estudio tanto macroscpico como microscpico. Normalmente se deja un tiempo (14
das)hastaquesesacrificaalanimalparaversilatoxicidadrevierteono.
Los
estudios de
toxicidad general a dosis REPETIDA
tienencomoobjetivo
obtener
informacin sobrela toxicidad delcompuesto trasla exposicinrepetida
. No hay tanta
discusin sobre su necesidad. La estimacin de la primera dosis en humanos es un
elementoclave para laseguridaddelossujetosqueparticipanenlosprimerosestudios
enhumanos.
LaUE tambindarecomendacionessobrelas especiesausar(dosespecies,almenos
unanoroedora,etc).
En este caso los
estudios se denominandeotra forma
TG407 repeated dose 28day
oral toxicity study in rodents

TG408 repeated dose 90 day oral toxicity study in
rodents

TG409 repeated dose90dayoral toxicity studyin nonrodents
. Loque
vara
enestosestudiosesel
nmerodeanimalesylafrecuenciadeobservacin
.
En estos estudios se hace una
evaluacin clnicayde comportamiento
(se registrael
consumodecomida,bebida, sintomatologa,etc.EltestdeIrwinevalalatoxicidaddel
SNC),adems de tomar
medidasanalticas(hematologa,transaminasas,coagulacin,
uroanlisis). Existen diferentes parmetros bioqumicos que nos explican diferentes
toxicidades: en funcin del peso de los rganos o en funcin del nmero de
transaminasas (toxicidad heptica) u otros parmetros. Tambin se realiza un
estudio
oftalmolgicoehistolgico
.
1.10.2014

4.Reglamentaciones
Una
directiva europea sirve para
orientar
las polticas nacionales hacia un objetivo
comnaniveleuropeo.Nuncasondeobligadocumplimiento.
Las
guas de la
EMA son un marco regulatorio que proporciona una base para la
armonizacin prctica (entre los estados miembros y la EMA) de la interpretacin y
aplicacin de los requisitosdetalladosparala
demostracin de lacalidad,seguridad y
eficacia
quefiguranenlasdirectivascomunitarias.
39

Las
guas
ICH
son muy importantes. El nacimiento de la conferencia internacional
sobre la armonizacinde requisitostcnicosparael registro de medicamentos de uso
humano (ICH) se llev a cabo en 1990, en bruselas. Estas guas se encargan de
armonizar losrequerimientos legales necesarios para el registro demedicamentos,as
como lainterpretacinyaplicacinde las directricestcnicasparamejoraryacortarel
proceso,ascomoevitarduplicacindeexperimentos.
Las
guas
OECD
. La organizacin para lacooperacinydesarrollo econmico es una
organizacin intergubernamental que representa a 29 pases. La OCDE da
recomendaciones explicativassobrela
realizacintcnicadelosensayos toxicolgicos.
Tienefuncindecoordinaciny
armonizacindepolticas
.
Las
normas
BPLs
(buenasprcticasdelaboratorio)son un sistema decalidadsurgido
en el mbito de la industria farmacutica. Son un conjunto de reglas, procedimientos
operativos y prcticas establecidas y promulgadas, que se consideran de obligado
cumplimiento para
asegurar la calidad e integridad
(es decir, que lo que decimos es
veraz)
de los datos obtenidos en determinados tipos de estudios de investigacin y
anlisis.
Principios ticos de la experimentacin animal
:Ladirectiva europea 2010/63trata
sobre la proteccin de losanimalesutilizados para fines cientficos.En elreal decreto
53/2013 se establece las normas aplicables para la proteccin de los animales
utilizados en experimentacin. Se ha creado una comisin tica estatal de bienestar
animal y, entre otras cosas, se regulan las personas que tratan conlos animales:los
queloscuidan,losqueexperimentanconellos,etc.

40

TEMA8:MTODOSALTERNATIVOSEN
TOXICOLOGA
1.Estrategiadelas3Rs
La experimentacin animal hay quehacerla siguiendounos
principios llamados delas
3Rs
:
refinamiento, reduccin y reemplazo
. Lo que se intenta es
minimizar el
sufrimientoinnecesario
.
El
refinamiento
es la
disminucin
de la incidencia o severidad del
dolor o estrs
producidoalosanimalesenunprocedimientoexperimental.Estoseconsiguemediante
analgesia y sedacin
. Estonosehaceporelanimalens(quetambin),sinoporqueel
estrspuedeinfluirenelresultado
.
La
reduccin
consiste en la
disminucin del nmero de animales utilizados para
obtener informacin con una determinada precisin. Esto se consigue mediante
estadstica
, haymtodos estadsticosparaestimar el tamaomuestral quedebe tener
nuestroexperimento.
El
reemplazo
es la sustitucin de animales con un nivel alto de conciencia por otros
sistemas que no utilizan animales
. Los mtodos de reemplazo son varios: usar
organismosinferiores no protegidos como
bacterias, hongos,protozoos
,algas,plantas,
animales invertebrados utilizar
modelos in vitro como
rganos aislados
, explantes,
lneas celulares(se pierden ciertas propiedadesde lalnea original),
cultivos primarios
de clulas aisladas
, sistemas libres de clulas y
modelosmatemticos
,que permiten
predecir(
programasparapredecir genotoxicidad.Existe unarelacincuantitativaentre
estructurayactividad).
Todo esto tiene un doble aspecto: uno
humanitario
(hay quehacer las cosas bien)y
otro
cientfico
(si hacemos las cosas bien tendremos datos de calidad). Todo ello
constituye la tica delaexperimentacinanimalyesunanecesidadcientfica.Tambin
es cierto que todo esto ha tenido mucha presin por parte de movimientos sociales
(protectoras de animales,etc).Laproteccin de losanimalesde experimentacinest
reguladaporelrealdecreto53/2013.

2.Conceptodemtodosalternativos
El
mtodoalternativo es elque
sustituyea unotradicionalutilizandolaestrategiadelas
3Rs
.Elmtodoalternativoalaexperimentacinanimaleselmtodoinvitro.
No todoslos mtodos alternativos son mtodos invitro (DL50) ni todoslos mtodosin
41

vitrosonalternativos(testdemutacingnicaenbacterias).

3.Validacindelosmtodosalternativos
La
validacin
es el proceso que establece la
reproducibilidad
(se hace en distintos
laboratorios y salen resultados semejantes) y
relevancia
(sirve para lo que yo quiero)
deunprocedimientoexperimentalparaunfinespecfico.
Las
fases
del proceso son:
desarrollo del test

preevaluacin

validacin
intralaboratorio
y
validacinconorganismos
.
Existenvarios
centrosdevalidacin
:EVCAM,ICCVAM,ZEBET.

4.AplicacindelosmtodosalternativosenI+Ddemedicamentos
Laindustria utiliza sistemas invitro para las fasesinicialesde un estudio, perocuando
estamos en el desarrollo clnico
necesariamente
tenemos que saltar a sistemas
in
vivo
. En esta fase (fasedecribado)serecogendatosdelaactividadfarmacolgica,de
lafarmacocintica,citotoxicidadyelpotencialmutgeno.
Latoxicidadpreclnicaesnecesariahacerlaenmodelosanimales.
Las
estrategias
que se emplean para
disminuir el uso de animales de
experimentacin en la evaluacin preclnica de toxicidad son:
recoger la mxima
informacin
, modelos de
prediccin matemtica
,
mejora en el diseo experimental
,
mtodos in vitro
,
toxicogenmica
(datos de expresin de genes, de protenas, o de
metabolitos si podemos saber qu genes cambian su expresin ante una
determinada toxicidad, cuando estudiemos otra toxicidad con otro compuestos
podramos saber si el tipo de toxicidad es el mismo, viendo si se activanlos mismos
genesono).

5.Conclusiones
La tica de la experimentacin animal supone que sta debe realizarse teniendo en
cuentala
estrategiadelas3Rs
.
Siempre que sea posible debern utilizarse
mtodos in vitro u otros que no empleen
animalesdeexperimentacin
.Demaneragenricasesuelendenominaralternativos.
Son los ensayos de toxicidad con animales de experimentacin los que generan un
mayor rechazo social, en especial en el campo de lacosmtica, por loque la presin
paraencontrarmtodosalternativosvalidadosesmayor.
42

Losmtodos invitrosepuedenaplicarencualquiercampodeinvestigacinbiomdica.
En el proceso de I+D demedicamentos seaplicanfundamentalmente enlas primeras
fases.
Los procedimientos actualesdeevaluacin de la irritacindrmicayocular utilizan los
mtodos in vitro y otros en una estrategia secuencial, de tal manera que los animales
nosesometennuncaatratamientoconproductosmuyirritantesocorrosivos.

43

2.10.2014

TEMA9:ELPACIENTEINTOXICADO
(Estetema,eldeintoxicacinetlicaquenoestenlosapunteseintoxicacinpordrogasesmejor
estudiarlosdelasdiapositivasporqueestnbienexplicadasyseleanenclasetalcual)

Paracelsodeca:todoespotencialmentetxico,incluidoelagua.
La intoxicacin es un sndrome clnico secundario a la introduccin brusca en el
organismo de una sustancia que produce efectos nocivos, de forma intencionada o
accidental.
El 2% de urgenciasmdicas sonpor intoxicaciones(68 pacientes alda). Lamayora
son intencionadas (intoxicacin etlica) pero otras son por sobredosificacin. Despus
delasintoxicaciones,estnlosfrmacos(psicofrmacos)yluegolasdrogasdeabuso.
La sospecha de intoxicacin llega porque lo cuenta un acompaante o el propio
paciente. Tambin cuando vemos un deterioro agudo en un paciente psiquitrico,
cuandohayantecedentesdedrogas,alcoholismoodeteriorocognitivo.
Cuando tenemos una sospechade intoxicacin aguda porcualquiersustanciahayque
hacerunaseriedecosas,comnatodaslasintoxicaciones:
Estabilizacininicial
:asegurarsedeque
respira
bien,quetieneunnivelde
conciencia
adecuado. Cuando hay un coma se administra un coma cctelde:naloxona(contra
opioides),tiamina,glucosahipertnica,flumazenilo(contraBZP).
Exploracin y diagnstico sindrmico
: estudiar
qu
se le ha administrado,
cunto
,
cundo
, por
dnde
, etc.En ellaboratorio podemos realizardiferentes medicionespero
todas ellas son
cualitativas
(dicensi hayonohay una determinada sustancia, perono
nosdice cunto hay deesasustancia).tambinsepuedenmedirensangrenivelesde:
paracetamol,digoxina,metanol,hierro...
La orina tiene de desventaja que es cualitativo y que en algunos compuestos tardan
muchoeneliminarseenorina(elcannabistarda6semanaseneliminarse).
Si hay aumento de secreciones puede haber toxicidad por insecticidas,
organofosforados, fisostigmina, setas (amanita phalloides). Si tenemos lo contrario
(sequedad) puede serporatropina,neurolpticos,antiparkinsonianos,antihistamnicos,
amanitamuscaria. Si hay un sndromehiperactivadoryestimuladorpuedeserdebidoa
cocana,anfetaminas,MDMA,cafena,LSD,ISRS,IMAO.
Descontaminacin y eliminacin
: lo primero es prevenir que se absorba (utilizar
44

vaciado gstrico, carbn activado, extraccin digestiva baja). Esto nos lo planteamos
cuandoeltxicoesmuytxico(cianuro,digoxina,metanol,estricnina),obiencuandoel
txico no es tan txico pero que a elevadas dosis pueden aparecer severas
complicaciones,ocuandonosabemosqutxicoesnisudosis.
No usaremos estos mtodos cuando se hayan ingerido cidos o bases (tampoco se
intentan neutralizar), sustancias corrosivas (para evitar ms lesiones), cuando la
intoxicacinesleveocuandolaabsorcindelcompuestoyaescompleta.
El vaciado gstrico
consiste en introducir una sonda gruesa y aspirar todo el
contenido el estmago, luego se introduce 23 litros de agua y se vuelve a
aspirar, as hasta que el agua salga limpia. Esimportante que el paciente est
conscienteparaprotegerlavaarea.
Otraopcinesinducirel
vmito
peronoserecomienda.
El
carbn activado es el protagonista de la prevencin de la absorcin. Todo
paciente intoxicadoporva oraldebera recibir carbnactivado.Elcarbnactivo
no sirve para etanol, metanol, hierro, custicos, yodo (bote de betadine),
hidrocarburos.
Adems de expulsarlo por arriba, podemos expulsarlo por abajo (
extraccin
intestinal
) aunque no se usa casi nada. Una posibilidad es intentar empujar todo a
basedelquido.Tambinsepuedenusardiarreicos(sulfatodemagnesio).
Tambin podemos usar una
diuresis forzada para eliminar el txico va renal, pero
esto depender del tamao molecular(siesgrande puede empeorar losdaos y esta
tcnica estar contraindicada). Los que se eliminan por va biliar s que se puede
aspirar. En algunos txicos tiene mucho interesa la eliminacin extrarrenal
(hemodilisis).
Antdotos
Esta parte ya no es comn para todoslostxicos.Paraelusoclnicotenemosunos50
antdotos.
Los antdotosespecficosactansobreel mismo receptor queel txico, prevaleciendo
eldemayorconcentracin(naloxona,atropina).
Los especficos actan sobre otro receptor, generando un accin opuesta a la del
txico, acelerando su metabolismo o potenciando su su desintoxicacin endgena
(nacetilcistena).
Losantdotosestnindicadoscuandoexisteunantdotoespecficoparalaintoxicacin,
cuando hay una gravedad real, cuando el beneficio supere el riesgo y cuando no
45

existan contraindicaciones. Los ms usados son: paracetamolNacetilcisteina,

BZPflumazenilo, opiceosnaloxona, metanoletanol, organofosforadosatropina,
anticolinrgicosfisostigmina. sintromvitaminaK. Cada hospital tiene sus propios
antdotos.
Telfonoatencinintoxicaciones:915620420.

46

TEMA10:INTOXICACINPORDROGAS
Los opiceos son drogas depresoras. El motivo de atencin es por intoxicacin o
sndromedeabstinencia.
Laintoxicacin eramuyfrecuente en losaos 80.Los opioides objetodeabusosonla
herona y losagonistas sintticoscomolametadonayeldextropropoxifeno.Laherona
puedeadministrarsedeformaintranasalofumadaeintravenosa.
La intoxicacin aguda produce sobretodosedacin, pero tambin analgesia, cambios
de humor, depresin respiratoria, disminucin de la motilidad intestinal, nuseas y
vmitos.
Hay una trada desntomasmuy caracterstica:miosispuntiforme (pupilascontradas),
depresinrespiratoriaycoma.
Laintoxicacin se trataconnaloxona. SedebemantenerperfusinIVenintoxicaciones
poropiceosdevidamediaolarga.
Complicaciones: hipoxia prolongada, hipotona muscular, hipotensin por liberacin
masivade histamina, convulsiones, edema agudodepulmn,sndromedeabstinencia
pornaloxona.
Al gammahidroxibutirato (GHB) tambin se le denomina xtasis lquido (que no es
xtasis, pero seslquido).Se utilizabacomoanestsicoperoseretir.Eseuforizante,
hipntico y afrodisaco.Se absorbe muy rpidamenteytieneunavidamediamuycorta
(unos 30 minutos). Induce sueo, amnesia y anestesia. Es muy fcil llegara la dosis
txica.Ojo:seutilizaparaagresionessexualesyporabolicindelavoluntad.
Como tratamiento: verificar constantes clnicas y aportar soporte en caso necesario,
colocarlealpacienteenposicindeseguridadporsivomita.
Laketaminaesun anestsicousado tanto enhumanoscomoenveterinaria.Induceun
estado disociativo, produciendo inconsciencia con desconexin de su cuerpo del
entorno o sensacin de estar fuera del cuerpo. Puede inducir ataque de pnico,
delirios, alucinaciones persistentes y suicidio. Tratamiento: bzp para tranquilizarle y
haloperidolsihayconductapsictica.
Las anfetaminas (y xtasis) son estimulantes del SNC. La toxicidad produce
hiperactividad, piloereccin, delirium, alucinaciones, psicosis, HTA, taquicardia,
arritmias,IAM,golpedecalor.Notienenantdoto,slopodemoscontrolarlasfunciones
vitales y valorar lasrepercusiones sobreelSNC,aparatocardiovascular,hgado,rin,
47

msculo.
La cocana es muy peligrosa. Produce una gran estimulacin a nivel del SNC
(midriasis, agitacin, psicosis, ACV isqumico), pero tambin a nivel respiratorio
(edema pulmonar, taquipnea, asma), corazn (taquicardia, arritmias, HTA severa,
rotura artica, IAM), metabolismo (hipertermia, rabdomiolisis, fallo renal,
hepatotoxicidad). El tratamiento es proporcionar medidas de soporte. Si hay agitacin
podemos dar BZP, la hipertermia (que esmaligna y hayque bajarla sos)se puede
bajarconsedacinyhielo.MantenerestrechavigilanciadeHTA.
El LSD esunalucingeno.Engenerallosalucingenostiendenatenervidamediamuy
larga. El tratamiento es tranquilizarloyllevarloa un sitiosilencioso. Sedar siest muy
agitado.SisetomasetasalucingenassiquepodemostratarconBZPyhaloperidol.
La fenciclidina tambin es alucingena y produce rabdomiolisis, rigidez muscular e
hipertermiamaligna.
Elcannabisademsdealucingenoesdepresor.

48

TEMA11:CARCINOGNESIS
1.Cncerymutacin:perspectivahistrica
El cncer y losprocesoscancerosos tienenuncomponenteencomnqueeslaclula.
Hayuncrecimientomasivocelular.
Se sabe que, en cuanto a su
origen
, hay unacierta
predisposicin gentica
, tambin
sesabeque las
radiacionesionizantespuedenproduciruntumor (lesionanlasclulas),
algunos
viruscomo el papiloma favorecenla aparicin decncerdecrvix,
sustancias
qumica
s y potenciales agentes inductoresdelos procesoscancerososcomola
dieta
,
ambiente
,
hbitos (tabaco), determinados trabajos. Nos interesan las sustancias
qumicascomoagentespotencialesdelacarcinognesis.
Algunos
hitos histricos de lacarcinognesisqumica:lasprimerasobservacionesde
sospecha de que determinados agentes qumicos eran capaces de producir cncer
eran detipo
epidemiolgico
(observaciones).Laprimeraobservacinprovienede1775,
en la que el mdico
Pott
asoci el cncer de escroto a los deshollinadores. El holln
contiene sustancias cancergenas y se ha demostrado su efecto cancergeno por
contacto con el holln. En 1895el mdicoalemn
Rehn
asoci elcncerdevejiga en
industrias del tinte con la exposicin a los compuestos que manejaban estos
trabajadores.
Desde el punto de vista experimental, los primeros
estudios experimentales en
animales fueron en 1915 en el que se descubri el tumor de piel. Despus de la
segunda guerra mundial, en 1945 y hasta 1960 destac elestudio de los
Miller
en el
quefueron capacesde diferenciarlosefectoscancergenosendostiposdegrupos:los
iniciadores
(provocan cncer) y los
promotores (fomentan el cncer, pero no
necesariamenteloprovocan).
El test de Ames se descubre en 1975 y consiste en un sistema experimentalsencillo
por elque se demuestraque un compuestotienecapacidaddemutar.Amesdescubri
que la gran mayora de los compuestos carcinognicos eran tambin mutagnicos.
Demostrlacorrelacin:carcinognesismutagnesis.
Ms tarde se demostr que la mutacin est implicada en el proceso canceroso
mediante el descubrimiento de los
oncogenes
por
Barbacid
en 1985 (esta mutacin
hace que la clula no funcione de manera correcta y hace que el crecimiento de la
clula se descontrole). Posteriormente se descubrieron los genes supresores de
tumores.

49

2.Definicindecarcingeno:tiposdeevidencias
Un
carcingeno
esuncompuestocapazde
inducirneoplasias
.Estadefinicinsebasa
enunaseriedeevidenciasdetipoexperimental.
Los
estudios
que nos dicen que un compuesto tiene la capacidad de producir
neoplasias son: los ensayos de carcinognesis (siempre en animales de
experimentacin), estudios epidemiolgicos (en la especie humana) y ensayos de
mutagnesis(variossistemasexperimentales nos permitenpredecirsi uncompuesto
produce mutacin o no). Una mutacin a veces puede ser origen o a veces
consecuencia.
Si el
ensayo de
carcinognesis
da positivo, quiere decir que el compuesto en
animales de experimentacin produce un
aumento estadsticamente significativodela
incidenciadeneoplasias
deunoomstiposhistolgicos.
Si el
estudio
epidemiolgico
da positivo podemos decir que tenemos
evidencia
suficientede su vinculacin con eldesarrollo detumoresespecficosenelserhumano
(es un carcingeno humano). No es fcil demostrar que hay una evidencia suficiente
epidemiolgicamentehablando.
Los
ensayos de
mutagnesis
nos permiten etiquetar el compuesto y ver si el
compuesto es carcingeno a travs de un mecanismo genotxico, es decir, si el
compuestoqumico
interaccionaconelADN
dandolugaramutaciones.

Hay unas
agencias
que se dedicanaclasificarloscompuestosqumicosenfuncinde
su
riesgo carcinognico, la ms importante es la clasificacin de la
IARC
(agencia
internacional de investigacin contra el cncer). En funcin del riesgo cancergeno
clasifica los compuestos en
5 clases de mayor a menor riesgo:
clase 1 (
carcingeno
humano evidencia suficiente entreexposicin alcompuesto y aumento delriesgo de
cncer),
clase 2A y (
probable carcingeno humano),
clase 2B (
posible carcingeno
humano losmaticesentre unayotra son difcilesdeexplicar),
clase3(
noclasificable
encuantoasucarcinogenicidad),
clase4
(
probablenocarcingeno
humano).
A la hora de clasificar un compuesto como carcingeno humano, los
estudios
epidemiolgicos
son los quetienen
mspeso
.La
evidencia
epidemiolgicadebeser
suficiente
. Los tipos de evidencia en estos estudios son: suficiente (relacin causal
demostrada), limitada (relacin causal creble), inadecuada (escasos datos
pertinentes).

3.Fasesdelprocesocanceroso
50

El
proceso
carcingeno se clasifica en
3 partes
: fase de iniciacin (transformacin
neoplsica), fase de promocin (expansin clonal) y la fase deprogresin (invasiny
metstasis).
1. El
fenmeno de
iniciacin
esunfenmeno
irreversible
,poco frecuente,
rpido
,
requiere de replicacin celular y requiere de mutacin o genotoxicidad.Lo que
ocurre es quehayuncambioanivelgenticoenlaclulaquesuponeun
cambio
funcional
.
2. El
fenmeno de
promocin
, por el contrario, es
reversible
, necesitaun
tiempo
largo de exposicin, se produce la estimulacin del crecimiento celular, los
fenmenos de genotoxicidad no son necesarios, se ve modulada por factores
fisiolgicos como la edad y ladieta(hipercalricas), se requiere dosis elevadas
del promotor, tiene especificidad respecto del rgano diana (el fenmeno de
iniciacin es ms indiscriminado en cuanto a tejido). En la fase de promocin
hayuna
multiplicacin
oexpansinclonaldelaclula.
3. El
fenmeno de
progresin
presenta una multiplicacin y expansin
exacerbada, confenmenos demutacinyseleccin(sefavorecenlosfenotipos
ms agresivos), es una fase degraninestabilidadgenmica(p53).Enlafasede
progresinla
multiplicacin
esmasivay
desordenada
.
Es muy difcil detectar un cncer en la fase de iniciacin o promocin. Siempre lo
detectamos en la fase de progresin. Las clulasque estn en fasede promocin se
denominan clulas preneoplsicas (iguales genticamente entre s y distintas de la
clulaoriginal normal). Enel proceso dedivisin de lasclulaspreneoplsicaspueden
aparecer modificaciones en el ADN y cada vez las clulas tienen un
fenotipo ms
agresivo
(mayorcapacidaddedivisin).

4.Tiposdecarcingenos
En funcin del
mecanismode accin
, loscarcingenos pueden sergenotxicos y no
genotxicos.
Los que son
GENOTXICOS
son compuestos
mutagnicos (dan lugaramutaciones:
cambios en el genoma transmisibles a la descendencia) y sus efectos podran
predecirse mediante ensayos de genotoxicidad (Ej: test de Ames). Se considera que
NO tienen efecto umbral respecto a ladosis (en toxicologasiemprehemosdicho que
la dosisesclave: a mayordosis,mayor toxicidad.Tambin definimos ladosisNOAEL,
sinefectosadversos,yLOAELconefectosadversos.Yloquehayentreunayotraest
el umbral de toxicidad.Si noexisteesteumbral, quieredecirquenohayningunadosis
seguradeexposicin y queportantohayqueevitarlaexposicin,pormnimaquesea,
atodacosta).Tambinsecaracterizaportener
efectosobrevariosrganosyespecies.
51

A partir de la
estructura
de estos compuestos (determinados grupos que van a
interactuarconelADN)podemospredecirla
actividad
tendr.
Los que
NO
son
GENOTXICOS
tambin se denominan epigenticos, y
no son
mutagnicos
. Los mecanismos de accin de estos compuestos son bastante
particulares y no se puede hacer generalizaciones. En estos compuestos si que
tenemos un
efecto umbral con respecto a la dosis
. Adems, el efecto que producen
est limitado a un rgano o una especie.
No se puede relacionar laestructuraconla
actividad
.
En funcin de la
va metablica de biotransformacin
, podemos distinguir los
carcingenos directos y los indirectos (procarcingenos). El
carcingeno
directo
es
aquel que
no necesita de un proceso de bioactivacin mientras que los
carcingenos
indirectos

snecesitandeunprocesodebioactivacin
.
El benzoapireno sufre un proceso de bioactivacin por el CYP450, formndose el
7,8diol9,10epxido, compuesto electrfilo que establece uniones covalentes con el
ADN (convirtindose en un aducto), produciendo mutaciones y provocando una
transformacinmalignadelasclulas.

5.Carcingenosgenotxicos
Lamayoradeloscarcingenosgenotxicosson
orgnicos
.
Hidrocarburosaromticospolicclicos(HAP)
Estn constituidos por varios anillos aromticos y es una familia muy numerosa. Su
origen es la
combustin
de materia orgnica
, comoel humo detabaco, humo de los
coches, alquitrn de hulla y petrleo y derivados tambin se generan en el proceso
quesuponeel
tratamientotrmicodelosalimentos(cuandolastemperaturassuperan
los300400Cseencontr
benzoapireno
enaceite).Tienen
efectolocalosistmico
.
LosHAPsebioactivanporepoxidacinmediantelaenzima
CYP1A1ysedetoxificapor
laepxidohidrolasayelGSH.
Aminasaromticas
Son estructuras con grupos amino, responsables de los efectos carcingenos. Los
trabajadores de la industria del tinte estaban sometidos a estos compuestos. Tienen
efectos sistmicos aunque con diferencias interespecficas: en roedores produce
cncer de hgado, de vejiga y mama en la especie humanaseproduceel metabolito
2naftilamina que produce cncer de vejiga. Los acetiladores lentos tienen mayor
predisposicinaestetipodetumores.
52

El metabolismo delas aminasseproduce poracetilacin delasNATs,ademsdeuna

Noxidacinpor
CYP1A2
,quedalugaraunahidroxilamina(mutagnica).
Compuestosalquilantes
No necesitan deactivacinmetablica y son carcingenos directos.Son las
mostazas
nitrogenadas,nitrosoureasyalquilsulfonatos
.
NitrosaminasycompuestosNnitroso
Son compuestos con un potencial cancergeno muy potente. Unas son de origen
natural, otros sintticos y algunas se producen de forma endgena.En elorganismo,
los nitratos se pueden convertir en nitritos, que reaccionan con aminas endgenas
produciendo
Nnitrosaminas
.
Necesitandeactivacinmetablica
AflatoxinaB1
Producetumoreshepticosyesmuypotente.
Otroscompuestosnaturalessonlacicasina,safrolyalcaloidesdepirrolizidina.

6.Carcingenosnogenotxicos
Actan a travs de
distintos mecanismos
. Pueden ser compuestos con
actividad
hormonal,conactividadcitotxica,promotorestumoralesoinmunosupresores
.
Los
promotores
son sustancias que, sinsercancergenasporsmismas,aumentanla
incidencia de tumores
, despus de exposicin a una sustancia carcinognica
(iniciadora).Ej:
dioxina,sacarinasdica
.
Son sustancias con un efecto txico conducente a muerte celular y posterior
regeneracin,lo que puede aumentar elpotencialcancergenode otrassustancias.Ej:
limoneno
. Interacta con la 2microglobulina, que se acumula en la nefrona
produciendo una necrosis tubular (el organismo reacciona con proliferacin y
regeneracincelular.Conestofavorecemoslafasedepromocin).

7.Evaluacindelacarcinogenicidad
Los
ensayos de carcinognesis son ensayos de toxicidad de muy larga duracin ya
que transcurren prcticamente durante toda la vida del animal, elcual es expuestoal
xenobitico a diario. Para estos ensayos nicamente se utilizan
roedores
(ratas o
ratones) porque tienen una duracin de vida relativamente corta, tienen unbajo coste
de mantenimiento, las
estirpes
estn bien
caracterizadas
, y adems se utilizan en
estudiosfarmacolgicosytoxicolgicos
.
En el diseo estndar del National Toxicology Program se emplean3 grupos:control,
53

1/2 de la dosis del carcingeno, y una dosis alta del carcingeno. En cada grupo se
emplean 50 machos y 50 hembras. Se realizan necropsias completas y estudios
histolgicos (35 tejidos por animal). En los ensayossiemprese utiliza laMDT o dosis
mximatolerable.
No todoslos estudiosde toxicidadhay que hacerloscon BPLperos quelos estudios
de
carcinognesis
hay que
hacerlosconBPLs
:controlarladietadelosanimalesyla
purezadelcompuesto.
Otros modelos animales
: modelos animales
transgnicos (se ha insertado un
determinado gende inters generalmenteoncogenesparaqueaparezcaeltumor)y
modelos animales
knockout (no hay genes supresores de tumores, de forma que las
probabilidades de aparicin de tumor aumentan). Con estos animales se reduce el
tiempodetratamiento.
Estudios epidemiolgicos
: son estudios de la distribucin de la enfermedad en las
poblaciones y los factores que intervienen en la aparicin de la misma. Los ms
empleados son los de casos y controles y estudios de cohortes. En un estudio
epidemiolgicoseconsidera quehay
evidencia suficientecuando la
relacincausales
demostrada
.
Compuestos cancergenos:
4aminobifenilo, aflatoxina, benceno, cloruro de vinilo,
2naftilamina,cadmio,arsnico,berilio,cromo,nquel,gasmostaza
.

54

TEMA12:MUTAGNESIS
1.Nacimientoydesarrollodelatoxicologagentica
La
toxicologa gentica es la rama de toxicologa que trata de: identificar aquellos
compuestos cuya toxicidad se dirige hacia los
componentes hereditarios del ser vivo,
analizar su
modo deaccin y evaluar el riesgo derivadodela exposicindelhombrea
dichoscompuestos.
Loscompuestos quetienen lapropiedad dealterar elADNsedenominanmutagnicos
ogenotxicos(losdostrminosseempleandemaneraindistinta).
Este rea surge en los aos 70 con la EMS (Environmental Mutagenicity Society) y
EEMS (European environmentalmutagenicity society).Estas
sociedades
secreancon
dos fines paralelos, por un lado
identificar
los agentes potencialmentecancergenosy
por otro
determinar el impacto de los agentes genotxicos en el conjunto de genes
humanos.

Por qu surge la preocupacin por el efecto mutagnico

de los productos
qumicos?
Por un lado debido al
desarrollo industrial
, que implica la exposicin a
muchos nuevos compuestos qumicos. Por otro lado se empieza a
conocer el
fenmeno de la mutacinyloqueimplicaanivelmolecular:pocadeorodelabiologa
quecomienzaconeldescubrimientodelaestructuradelADN(1953).
Los
primeros estudiosde mutacin inducida
: radiacin
MLLER
(1927conbacterias)
y
RUSSELL
(1951ratn).
Por qusepensabaque estudiando los efectosmutagnicossepodraprevenir
el cncer
? porque se vieron indicios de
asociacin mutacincncer
:
alteraciones
cromosmicas en leucemias y tumores

sndromes de inestabilidad cromosmica
(Bloom) y de
deficiencia en la reparacin delDNA con elevado riesgodecncer
alta
correlacin mutagenicidad y carcinogenicidad de compuestos qumicos
. Ms tardese
descubrieronlos
oncogenes
.
A qu se debi su rpido desarrollo en la dcada de los 7080
? Por un lado
porque disponamos de
sistemas experimentales in vitro para
detectar este tipo de
efectos (test de ames) y adems la
capacidad de reproduccin del metabolismo en
mamferos mediante la utilizacin de fracciones enzimticas (muchos compuestos
necesitan de metabolismo para ser carcingeno, y con estas fracciones enzimticas
podemosactivarlossinnecesidaddeunorganismovivo).

55

2.Tiposdemutaciones
La
mutacin
eselcambioenlasecuencianormaldenucletidosenelADN.Puedeser
espontnea, inducida (por radiaciones, productosqumicosovirus). Lo normalesque
la mutacin se produzca a dosis subtxicas (si seproduceporproductos qumicos) y
este efectoenlos ensayosde toxicidadgeneral pasadesapercibido.Puede haber una
alteracin a nivel delgenotipoyademsdelfenotipo,quepodrserbeneficiosa,neutra
operjudicial.
Lamutacinesnaturalperoesalgonodeseable.
Enfuncin del
TAMAO
distinguimosdos grandes grupos de mutaciones: lasgnicas
opuntualesylasquesoncromosmicas(aberracionescromosmicas).
I.

II.

En las
GNICAS
o puntuales slohay una
mutacin enunnicopar debases
mientras que enlascromosmicas,laafectacinesaniveldecientosomilesde
nucletidos. Este tipo de alteraciones cromosmicas se detectan mediante
tcnicashabitualesparaestudiarelgenomahumano
oconeltestdeAmes.
A. Lasmutacionesgnicasafectan a unoounospocosnucletidos.Pueden
ocurrir
sustituciones
:
transiciones
(A G, T G) o
transversiones
(AT,AC,GCGT). La mutacinpuede serdirectaoreversaenfuncin
delsentido.
B. Los
desfases
son
inserciones
o
deleciones
, en estos casos cambia la
lectura(puedeaparecerunaprotenanueva).
Dentrodelas
ABERRACIONESCROMOSMICAS
,tenemos:
A. Las
estructurales
:
que pueden ser
cromatdicas
o
cromosmicas
en
funcin del momento del ciclo en el que se ha producido la mutacin.
Dentro delas cromosmicas,pueden ser
estables
o
inestables
anulares,
dicntricos y acntricos. Y tambin se clasifican en:
delecin,
duplicacin,inversinytranslocacin
.
B. Las
numricas
:
aneuploida (algunas son compatiblesconlavida,como
latrisoma21)yla
poliploida
.
Las aberraciones cromosmicas se estudianmediantetcnicascitogenticas
,
semejantesalasutilizadasparaobtenerloscariotipos

En funcin del TIPOCELULAR en quetenganlas mutaciones, puedentener lugaren

clulas
germinales
(encargadas de la transmisin del material gentico a la
descendencia)oenclulas
somticas
(posibleorigendeneoplasia).

3.Mecanismosmoleculares
56

Las mutaciones por

desfase
ocurren por
formacin deaductos, intercalacin o
roturascromosmicas.
Las
aberraciones cromosmicas se originan por
formacin de aductos,
interferenciaconladivisincelularoroturascromosmicas
.
Lasmutacionespor
sustitucin
se producenpor:
incorporacindeanlogosde
las bases nitrogenadas alteracin qumica de las bases nitrogenadas o por
formacin de aductos
.Cuandose incorpora un anlogodela base, lamutacin
seproduce
unavezsehareplicadoelmaterialgentico
.
Alteracin qumica de las bases nitrogenadas: es el caso del cido nitroso y la
hidroxilamina
.

Formacin de aductos: son mecanismos particulares. Dentro de los

aductos
,
tenemos varios tipos: los de pequeotamao y losde gran tamao. Dentro de losde
pequeo tamao
: gruposalquilo(
metiloyetilo
)ycompuestosalquilantes(
gasmostaza,
mostazas nitrogenadas, nitrosureas, alquilsulfonatos
). Dentro de los de
gran tamao
:
hidrocarburosaromticospolicclicos,aflatoxinas
,otrosmuchos.
Enla
intercalacin
, losagentesintercalantessedisponenentrelasbasesalolargo
del ADNy
afectana suestructura
,alterandoelbuenfuncionamientodelaspolimerasas
y otras protenas que se unen al ADN. El resultado es la
inhibicin de la sntesisdel
ADNydela transcripcinascomola
induccindemutaciones
.Ej:
naranjadeacridina,
bromurodeetilo
.
28.10.2014

4.Mtodosdeevaluacindelamutagenicidad
Hay ensayos especficos quesehan diseado para detectar especficamenteestetipo
detoxicidad(mutagenicidad/genotoxicidad).
Segn el
modeloexperimental
,sedividen en ensayos
in vitro (
bacterias, levaduras o
clulaseucariotasen cultivo
) yensayos
invivo(conmodelos
animales
:exclusivamente
roedores rata o ratn). Los ensayos in vitro pueden realizarse en bacterias,
levaduras y clulas eucariotas en cultivo (clulas con una membrana nuclear), que
puedenserlneascelularesocultivoprimario.
Segn el
tipo de efecto que detectan (recordar que hay 3 tipos de mutaciones):
tenemos los que detectan
mutaciones gnicas
(que pueden ser
in vitro o in vivo
como lasmutaciones puedenrevertirse,sonensayosdereversin.Fundamentalmente
se utilizan in vitro), los que detectan
alteraciones cromosmicas (alteraciones tanto
estructurales como numricas. Hay 2 tipos de ensayos: los que verdaderamente
57

detectan alteraciones porque se ven clulas en metafase y otro ensayo llamado de

microncleo, que est sustituyendo al de alteraciones cromosmicas porque desdeel
punto de vista tcnico es ms sencillo de realizar y es ms fcil identificar un
microncleo que unaalteracin cromosmica,ademsdequeelensayoessusceptible
de automatizacin) y por ltimo el ensayo de interaccin con el ADN (que detecta
aductos, la
sntesis no programada de ADN y
lesiones del ADN
. Son ms
complicados).
Las
caractersticas
de los ensayos que estn validados son: que
identifican
compuestos compuestos con afinidad especfica por el ADN
, que tienen una
capacidad adecuada de transformacin metablica (el compuesto electroflicocon
actividad para pegarse al ADN se suele generar como producto de una
biotransformacin los sistemas invitro carecen de un sistema de transformacin
metablica),son
reproducibles
yfcilmentetransferiblesaotroslaboratorios.
En los
ensayos de genotoxicidad se incluye siempre, adems del
control negativo
(disolvente o vehculo), un
control positivo con una sustancia que se sabe resulta
mutagnica en el sistema experimental y que adems presentar el mximo nivel de
mutagenicidad. Encontramos niveles basales de mutacin (la mutacin es una
actividad espontnea, siempre hay) y si el compuestos es mutagnico se
incrementarnesosniveles.
EnlasguasOCDEsepuedenencontrarestosensayos.
Para evaluar la genotoxicidad de un nuevocompuestosesuele aplicar unaestrategia
que consiste en utilizar una batera de ensayos (ningn tipo de ensayoescapaz de
detectar por s solo todos los tipos de mutacin que hay). Estas bateras de ensayo
constan de:
una
fase I
(son dos ensayos
in vitro
:
mutacin gnica
en bacteriasyotro
de
aberraciones cromosmicas o microncleoslas bacterias no tienencromosomas y
no podremos detectar sus mutaciones) y una
fase II
(ensayo
in vivo
:
test del
microncleo
enratn).
ParalosmedicamentosexisteunaguaICH.
Enel
testdeAmes
seconsideraqueelcompuestoesmutagnicosihayunincremento
significativodecualquieradelasestirpesyencualquiercondicin.
En el
ensayo de aberraciones cromosmicas se ensayan al menos tres
concentraciones delproducto en presencia y en ausenciadeactivacinmetablica.Se
considera que el resultado es positivo si se produce un incremento estadsticamente
significativoen el porcentajede clulas con aberracionesenlasclulastratadasconel
58

producto,respectodelcontrolnegativo.
Un
microncleo es una masa de cromatina que aparece enel citoplasmade la clula
interfsicaycontiene fragmentos cromosmicoso cromosomas enteros quenosehan
orientado correctamente en la anafase. Se produce como consecuencia de un
compuesto que produce alteraciones cromosmicas tanto numricas como
estructurales. Cuando las cromtidas se separan, un cromosoma queda suelto, y
cuando se divida la clula quedar en una de las dos clulas generando un ncleo
pequeoaislado(microncleo).
En el
ensayo invivo de la fase II tenemos un vehculo, unasustancia de ensayoyun
control positivo, se deja el tratamiento durante 24, 48 y 72h y se extrae
mdula sea
(tejidoqueespontneamenteseestdividiendo)apartirdelfmur.

5.Clasificacindecompuestosmutagnicos
Sedistinguencompuestos:genotxicos,mutagnicos,clastognicosyaneugnicos.
Un compuesto
genotxico
es aquel queproduceuna
respuestapositivaencualquier
ensayo biolgicoque mida cualquier parmetro degenotoxicidad, bien sea reactividad
para DNA, reparacin del DNA, mutacin gnica o alteraciones cromosmicas. Es el
trmino ms amplio
. Si un compuesto da positivo en un ensayode genotoxicidad,no
quiere decir queesecompuestoseamutagnico (aunque es lo msprobable).Habra
querealizarunensayodemutagenicidadparacomprobarlo.
Mutagnico
: produce una
respuesta positiva en cualquier ensayo de mutagenicidad
(losquehemosvistoexceptolosqueproducenunaducto).
Un compuesto es
clastognico
cuando da lugar a
alteraciones cromosmicas
estructurales
.
Un compuestos es
aneugnico
cuando da lugar a
alteraciones cromosmicas
numricas
.
Si da + en la sntesis no programada de ADN el compuesto es genotxico pero no
mutagnico. Si da + en alteraciones in vitro: mutagnico, genotxico, clastognico o
aneugnico.

59

TEMA13:TOXICIDADDELAREPRODUCCIN
1.Introduccin
La
toxicologa del
desarrollo
es una parte de la toxicologa que se encarga de: la
identificacin de aquellos
compuestos que alteran el desarrollo normal embrionario,
estudiar su
mecanismo de accin y evaluar el riesgo derivadode laexposicin (hace
referencianicamentealdesarrolloembrionario)
Dentrodeestereaseencuentrala
teratologa
(alteracionesdelfetotera=monstruo).
La
toxicologa de la
reproduccin
incluyetambin las
fasespreviasdelareproduccin
(haymuchodebatesobreladisminucindelafertilidad).
La
teratognesis
esel
proceso fisiopatolgico porel cualseproducela
malformacin
.
Se emplea el trmino de teratgeno para aquellos compuestos que tienen esas
propiedades.
En la mayor parte de los casos no se sabe a qu se debe la
causa
(
etiologa
desconocida
), aproximadamente un 1525% se debe a
defectos genticos
, el4% por
condiciones maternas
(dficit de cido flico), el 3% por
infecciones
maternas
(rubeola), 12% por
causas
mecnicas
durante el parto, y por
productos qumicos
menos del 1% (es muy
difcil atribuir el efecto de un compuesto qumico a la
malformacin
).
En los 60 se encontraron malformaciones en el hombre por talidomida. La clnica
hamburgoencontr0casosen1940yenelao61haba154casos(aunqueseestima
que hubo ms de 6000 afectados) de amelia y focomelia (malformaciones en el
tamao).
La talidomida tiene accin sedante y la peculiaridad de aliviar los vmitos. Apartir de
este momento se empiezan a realizar ensayos especficos para detectar este tipo de
toxicidadfetal.

2.Perodoscrticosdesusceptibilidad
La
susceptibilidad
ala teratognesis
varasegn lafase del desarrollodel embrinen
el momento de producirse la exposicin a la influencia adversa. Es un proceso muy
complejoquehaevolucionadomuchoenlosltimosaos.
Los
perodos crticos de susceptibilidad son los fenmenos de
postimplantacin y
organognesis
(3primerosmeses).
60

En la fase de preimplantacin encontramos el cigoto, mrula y blstula. Una vez

implantado encontramos la gstrula con sus 3 partes que darn lugar a todas las
estructuras.La fasede preimplantacinson46das,lapostimplantacin 620dasyla
organognesis2156das.Apartirdelda56comienzaelperiodofetal.
En el periodo de preimplantacin se pueden producir fenmenos de letalidad
embrionaria (efecto no detectable se podratraducircomounretrasoenlaregla).Las
dos siguientes fases son las ms susceptibles en las que se pueden producir
alteracionesmorfolgicasyderetrasoenelcrecimiento
.

3.Diferenciasinterespecficas
Las
diferencias interespecficasesunproblemaalahoradeestudiarlatoxicidad.Estas
diferencias se traducen en cambios en los
das de gestacin (es diferente en rata,
conejo,mono,etc,aunqueratayconejoseparecenbastante).
Estas diferencias interespecficasse debenporunladoal
metabolismo
quetengalugar
en la especie (es algo comn a todos los efectos txicos) y la
accesibilidad
, tanto la
accesibilidad
al embrin (placenta lo protege: depende del flujo sanguneos de la
placenta, el metabolismo que haya en la placenta y la edad de la madre) como del
xenobitico (depende de su capacidad de unin a protenas plasmticas y las
propiedadesfsicoqumicasquetenga).

4.Manifestacionesdelasalteracioneseneldesarrollo
Los 4 tipos de
manifestaciones
de un desarrollo anormal son:
muerte
del embrin,
malformaciones
fsicas,
retraso
enelcrecimiento,
dficitfunciona
l
.
Las manifestaciones de desarrollo anormal aumentan en frecuencia y grado conforme
aumenta la
dosis
, desde no efecto hasta efecto totalmente letal. Si tiene un efecto,
podr consistir en una malformacin fsica, en un retraso en el crecimiento o en la
letalidad.Elefectomximoseraletalidadcompleta.

El
efectoteratognicoesunefectotxico
conumbralydependientemuypronunciada
(haypocadiferenciaendosisnotxicasytxicas).
En los estudios con animales a dosis no txicas para la madre se han identificado 3
patronesderespuesta
:
PatrnA (
poco frecuente es tpico de compuestos con
potencialteratognicoalto
):a
dosis estndar lo normal es encontrar malformaciones fsicas y retardo en el
crecimientoperoadosismuyelevadasapareceletalidad.
61

PatrnB (
msfrecuente tpicodecompuestos
citotxicos
metotrexato):existeuna
dosisenlaquepodemostenerfetosconretraso,malformacionesyletalidad.

PatrnC (tpicode
compuestosquealteran losprocesoscelularesfundamentales):no
aparecemalformaciones,sloretraso,yadosisaltasapareceletalidad.

Muy importante: loscompuestos conunpotencialteratgenoaltoproducensuefectoa

dosisnotxicasparalamadre
.
La comparacin de la dosis umbral de toxicidad (NOAEL) materna y fetal constituye
una aproximacin. El
cociente NOAELmadre/NOAELfeto debe ser alto si el
compuesto es muy teratgeno
. Si es inferior a uno, elcompuesto espocopeligroso.
Si es mayor de 23 ya es peligroso (talidomida =60). Silas dosis son txicas para la
madre,lo normal es quetambinlo seanparael embrin,mientrasquesilasdosisno
son txicas para la madre habr un porcentaje pequeo que s sea txico para el
embrin.

5.Modosdeevaluacin
Los mtodos de evaluacin de latoxicidaddela reproduccinse realizanen modelos
animalesderoedorodeotrasespecies,sedebedetenerencuentatodoelciclosexual
desdeantesdelafecundacinhastalamaduracinsexualdeladescendencia.
62

En la OECD hay una serie de ensayos diseados especficamente para este tipo de
estudios. Tambin hay una gua ICH donde consultar la toxicidad de la reproduccin
(se hace cuando el medicamento est en fase 3 diseo de estrategia de ensayo
abierta basada en laaplicacinyusodel medicamento, vadeadministracinprevista
enhumano,farmacodinamia,farmacocintica).
En los ltimos aos ha habido bastante proyectos europeos destinados a estos
estudios y se han llegado a validar muy pocos experimentos. Hay varios modelos
validadosporECVAMperonosonaceptadosanivelregulatorio.
Losestudios epidemiolgicos soncomplicadosdehacerporquesenecesitaunnmero
demuestraselevado(queno hay), requiereevaluar laexposicin (casi nuncasesabe
cual es), evaluar las alteraciones,yporque hay un elevado porcentajealtode abortos
enpreimplantacin(pasandesapercibidos).

6.Compuestosteratgenos
Los productos qumicos que son
teratgenos
son:
talidomida, tetraciclina,
ciclofosfamida, cido valproico, dietilestilbestrol (cncer de vagina en mujeres muy
jvenes),
cido cis13retinoico, sales de litio, metilmercurio, plomo, etanol, cocana,
humodetabaco
.
Condiciones teratgenas: radiacin, infecciones (rubola, varicela, HIV, megalovirus,
virus de la encefalitis equina, toxoplasmosis, sfilis), desequilibrios metablicos
maternos(hipertermia,alcoholemia,diabetes,deficienciadecidoflico,

63

TEMA14:EVALUACINDELRIESGO
La
evaluacin del riesgo tienecomo objetivo final
estimar la probabilidadque tiene un
producto qumico para producir efectos txicos
. La incertidumbre sobre este riesgo
disminuye cuando se pasan de tener pocos datos a tener datos en animales y en
humanos. Esta evaluacin se puede realizar para todos aquellos compuestos que
puedan representar un riesgo para la salud como los aditivos alimentarios,
medicamentos,plaguicidas,contaminantes,etc.
Parahacereste tipodeevaluacin necesitamos dos
tiposdedatos
:datosdel
producto
qumicoydatosde
exposicin
.
En la medida que tengamos pocos datos, la incertidumbre ser ms alta. Cuando
hacemos un experimento con animales, miramos tanto datos de exposicin como de
toxicidad.Cuandonos vamosa humanos,los datos estn dispersos ynohaydatosde
exposicinyenfermedaddeformasimultnea.

1.Riesgoypercepcinderiesgo
Riesgoypercepcinderiesgonoeslomismo.Lapercepcinderiesgoes la
sensacin
o impresin que puede tener una determinada sociedad
sobre lo que representa un
riesgo para su salud
. Esto puede estar sobrevalorado o infravalorado. La percepcin
del riesgo es variable segn las sociedades, pases, puede variar a lo largo del
tiempo...
El riesgo cero no existe. La investigacin en toxicolgica lo que hace es mejorar las
prediccionesderiesgo pero lasociedadesla quedecideelnivelderiesgodispuestaa
asumir.

2.Procesocompletodeevaluacindelriesgo
La evaluacin del riesgo siempre ha estado presente en los medicamentos, aditivos
alimentarios (se utilizan ndices como el IDA o ingesta diaria admisible, o el IDT o
ingestadiariatolerable),plaguicidas, productosqumicosycontaminantes. Engeneral,
la poblacin no est expuesta a los productos qumicos (o lo est en fracciones muy
bajas).
El proceso de la evaluacin de riesgo consta de
3 fases
: la
evaluacin del riesgo
(la
que establece las condiciones de exposicin seguras), la
gestin del riesgo y la
comunicacindelriesgo
.
La evaluacin del riesgo incluye una serie de factores econmicos, factores legales,
64

factores polticos, sensibilidad social, costebeneficio, posibilidades reales. Ej: se

prohbefumarenunbarcerradoparaprotegerlasaluddelosnofumadores.

3.Estrategiasdeevaluacindelriesgo
Existen dos mtodosque son mutuamente excluyentes: la caracterizacin del riesgo y
losnivelesdeexposicinaceptables.
Para
caracterizar el riesgo se necesitan
datos experimentales en animales y datos en
humanos
(estudiosepidemiolgicos). Haymuy pocoscasos en losque tenemosdatos
enhumanos.
Hay muchos compuestos qumicos de los que tenemos datos experimentales en
animales y lo que se haceesestablecer losnivelesdeexposicinaceptable(mediante
NOAEL). Se intenta asegurar que los niveles de exposicin est muy por debajo de
aquellos niveles que dan efectos adversos en animales experimentales. Estos niveles
de
exposicinaceptable
seestimanmedianteel
NOAEL+datosenanimales
.

4.Fasesdelaevaluacindelriesgo
Consisten en: identificacin del peligro, evaluacin de la exposicin, evaluacin dela
dosisrespuesta,caracterizacindelriesgo.
Hay que distinguir dos conceptosqueno son igualesentoxicologa:peligro(hazard)y
riesgo(risk).El
peligro
eslacapacidaddeunasustancia qumicaparaproducirefectos
adversos en condiciones apropiadas. Es una expresin cualitativa (produce tumores,
malformaciones). El
riesgo
es la incidencia de un efecto adverso definido bajo unos
determinadosnivelesdeexposicin.Esunaexpresincuantitativa.
En cuanto a la
identificacin del peligro
, se establecen prioridades en funcin de la
toxicidad del compuesto y la exposicin humana. La prioridad ms alta la tienen los
compuestos con unaexposicin humana alta y queseanmuytxicos.Laidentificacin
serealiza medianteestudios:invitro(citotoxicidad,mutagnesis),ensayosenanimales
(agudos, crnicos, mutagnesis, carcinognesis), estudios QSAR (relacin
estructuraactividad),clnicos,epidemiolgicos...
La
evaluacin de la exposicin es muy difcil de realizar y es la faseque aportams
incertidumbre. Para evaluar la exposicin hay que determinar el contacto de la
poblacin con elcompuesto: averiguar su origen, va de contacto,magnitudyduracin
del contacto. Lo que se hace con todo este proceso es definir el escenario de
exposicin, en el que se concreta cules son las vas de exposicin posibles (oral,
drmica, inhalacin.Si hablamosdeproducto alimenticioserlaoral.Siesunproducto
65

qumicoserinhalatoriaodrmica,etc),eltiempodeexposicin(horas,das,aos)yla
frecuencia(unavezalda,cada2h).Laobtencindelosdatosseconsiguenapartirde
valoracionesdirectasdeconcentraciones,cuestionarios,apartirdemuestrasbiolgicas
(sangre,orina,salivacin)
La evaluacin de larespuestaseobtiene a partirde datos en humanos o enanimales
(que sonms exactos,perotienenvariosinconvenientes:extrapolacininterespecfica,
extrapolacin a dosis bajas se realizan a dosis muy altas, poblaciones sensibles la
poblacin animal es muy homognea y lo normal es que tengamos poblaciones
heterogneas)
Una vez realizadas las3fasesanteriores,secaracteriza elriesgo
,esdecir,seintegran
los datos de identificacin del peligro, evaluacin de la exposicin y evaluacin de la
relacindosisrespuestapara
cuantificar
elriesgo.Sin embargo,slositenemosdatos
en humanos y potentes herramientas estadsticas podremos cuantificar el riesgo y el
grado de incertidumbre. Si no tenemos datos en humanos, tendremos que tomar
medidaspreventivasdedisminucindelriesgoydelaexposicin.
Apartir delos NOAELse estimanloslmitesdeexposicintolerablesparahumanosen
cualquier medio. El NOAEL es la mayor concentracin o cantidad de una sustancia,
determinada experimentalmente, que no produce efectos adversos observados bajo
unas condiciones de exposicindefinidas. Detodoslos NOAEL que obtenemos de un
estudio, escogemos el de la especie ms sensible, el de la exposicin ms larga y
efectomssensible.
La
IDA
(ingesta diaria admisible) se emplea en aditivos y plaguicidas (JECFA,
FAOOMS). El
IDT
(ingesta diaria tolerable)seempleaencontaminantes(UE,EFSA)y
elRfDseempleaencontaminantes(EPA).
El IDA esla ingestadiaria deuncompuestoqumico, que durante una vida entera, no
representa un riesgo apreciable para la salud humana sobre la base de los datos
conocidoshastaelmomento.
A partir de las IDA o equivalentes, se estiman las
concentraciones mximas
permisibles
(la mxima que se permite en un medio determinado). Para calcular la
CMPsemultiplicaelIDTporelpesoysedivideentrelatasadeingestin.
Los valores del NOAEL se pueden utilizar para otros clculos de riesgo, como por
ejemploparaelmargendeexposicin(
MOE
)utilizavaloresdeexposicinhumana.

66

TEMA15:TOXICIDADDEMEDICAMENTOS
1.Toxicidadyreaccionesadversas
Una
reaccin adversa
estodarespuesta lesiva,ynodeseada
,quesepresentaenlas
dosisutilizadashabitualmente en laespeciehumanaparaeltratamiento,laprofilaxis
oeldiagnsticodelasenfermedades.
Las RAM no se distinguen de efectos secundarios (aquel que se deriva del efecto
principal)oefectoscolaterales.
Caso distinto es la toxicidadque se produce por
sobredosificacin
(dosisporencima
de las teraputicas). La sobredosificacin puede ser
absoluta
(cuando realmente el
sujeto est expuesto a una
dosis ms altaquela teraputica,bienaccidentalmente o
intencionadamente)o
relativa
(sobretodo por
causasgenticas
,tenemos
alteraciones
enla farmacocintica delcompuestoyenlasdosis internas.Estascausasrelativasson
particularidadesdecadasujeto
).
A partir de la tragedia de la talidomida,la sociedad se concienciamuchoms deeste
tipodeproblemas:seprofundiz en losestudios precomercializacinysecomenzaron
los sistemasde farmacovigilancia.Enespaacomienzaelprogramainternacionaldela
farmacovigilanciadelaOMSen1982.

2.Mtodosysistemasdedeteccin
Para
prevenir
y poder anticiparnos a problemas de toxicidadexisten varios mtodos.
Enla fase
preclnica
tenemos los
estudios preclnicosdetoxicidad
. Unavez pasamos
la barrera preclnica, pasamos a los
estudios
clnicos
(
Fase I, Fase II, Fase III
), en
donde los compuestos se retiran bienporfalta deeficacia o por toxicidad.Una vez se
comercializa
, la
farmacovigilancia
se encarga de losposibles problemas detoxicidad
quepuedanaparecer.
Los estudios de Fase I se hacen con un nmero de pacientes relativamente bajo
(20100). No es representativo de la poblacin. Porotra parte, estos estudios defase
clnica son de
corta duracin(slo unos meses enladiapoponeaos)ademsde
quese excluyen anios,embarazadas, ancianos y pacientes con enfermedadesmuy
gravesoconmltiplesafecciones.
Existen variosmtodos defarmacovigilancia:revisin debibliografacientfica

registros
estadsticos de morbimortalidad

estudios postcomercializacin (Fase IV loshace
la propia empresa farmacutica)
notificacin espontnea (se informa de la sospecha
67

diagnstica a travs de la tarjeta amarilla.Cadacomunidad autnoma tiene supropio

centro de farmacovigilanciaSEFV, ytodoslosdatosseintegranenlabase dedatosde
laAEMPS)
estudiosepidemiolgicos
.
El objetivo de la notificacin espontnea es identificar los riesgos, perfilar la toxicidad
de los medicamentos y caracterizar los grupos de riesgo. Ventaja: es un sistema
universal. Inconvenientes: hay una infracomunicacin y dificultad para calcular una
incidenciareal.

3.ClasificacindelasRAM
Lasdosclasificacionesms
importantes
sonlas
tipoAytipoB
.
A. Las
tipo
A (Augmented)dependendela dosis y son
previsibles
. Son
frecuentes
pero
nograves
.
B. Las
tipo
B (Bizarre) son
poco frecuentes pero son las ms graves
. Son
reacciones de
idiosincrasia
(factores genticos implicados) y
reacciones
alrgicas
C. Las de
tipo
C (Chronic, crnica) aparecen como consecuencia de tratamientos
prolongados
D. Lasde
tipo
Docurreen
tiempodespusdelaexposicinalfrmaco.Estpicoen
carcingenos
.

4.Mecanismosdeproduccin
Las
causas farmacuticasdan lugar alas
tipoA
:
cantidad
demedicamento(definida
por condiciones de registro y controlada por las normas de correcta fabricacin),
velocidad de
liberacin
del medicamento (
efecto
local
como el efecto irritante de los
AINES en el tubo digestivo
, o
efecto
sistmico
como la
alteracin enlos sistemas de
liberacin retardada
),
anomala
en la prestacin farmacutica (principio activo
caducado.Ej:
tetraciclinascaducadasdanlugaralsndromefanconi
).
En la
reaccin de tipo I
, durante la
primera exposicin del frmaco
se produce IgE
,
que
se une a los mastocitos
. En la
segunda exposicin
, el sistema inmune ya est
preparado y
se une directamente a los mastocitos
,
liberando mediadores de la
inflamacin
(producenreaccionescutneas,bronquialesyanafilcticas).
En la
reaccin de tipo II
, durante la
primera exposicinse
produce IgG e IgM
. Enla
segunda exposicin
se une a la membrana de los eritrocitos, leucocitos, plaquetas y
endotelio
, producindose una
citotoxicidad mediada por las clulas NK o el
complemento
, producindose
hemlisis, leucopenia, trombocitopenia y vasculitis (en
68

funcindeadndesehayaunido).
Enla
reaccinde tipoIII
,durantela
primeraexposicinhay
produccindeIgGeIgM
.
Pero en la
segunda exposicin
hay
formacin decomplejosAgAc circulantes
, que se
depositanenlostejidos
Enla
reaccinde tipoIV (celular), el
frmaco sensibilizaaloslinfocitosT
,queliberan
linfocinas,queactivanalosmacrfagos,queasuvezliberanmediadoresinflamatorios.
Las personas que tienen un
dficit en la Glucosa6P DH tienden a tener anemia
hemoltica
. Los frmacos primaquina, quinina, sulfamidas y nitrofuranos son
frmacos oxidantes
. Los que tienen un
dficit de metahemoglobinareductasa
tiendenatener
metahemoglobinemiaycianosis
.

69

12.11.2014

TEMA16:TOXICIDADDEALGUNOSMEDICAMENTOS
1.Antiinflamatoriosnoesteroideos
Las
RAM
son:intolerancia y ulceracin gstrica,
bloqueodela agregacinplaquetaria
,
inhibicin de la motilidad uterina
,
alteraciones de la funcin renal
, reacciones de
hipersensibilizacin
.
Los
mecanismosde lesin gstrica
se producenpor: un efectodirecto,
inhibicin dela
sntesisdePGE2yPGI2
,ypor
inhibicindelaagregacinplaquetaria
.
Sntomas de la
sobredosificacin
:
sntomas digestivos (los + frecuentes:
nuseas y
vmitos
),
neurolgicos
(infrecuentes, excepto en
nios y ancianos
, como estupor,
cefalea
, nistagmus,
diplopia
, acfenos, discinesias,
delirio
, desorientacin,
alucinacionesycoma),
renales
(msbiolgicasqueclnicas).
Para el
tratamiento
se recomienda siempre la
descontaminacin digestiva con carbn
activado
. En general
no est recomendado forzar la diuresis
. S que est justificado
disminuir la absorcin
. Conviene
controlar hemograma y funcin renalal cabodeunos
das.
La
semivida
de eliminacin de estos frmacos es, con excepcindel piroxicam,
corta
(<12h), por loque es de prever la
desaparicinde lasmanifestaciones en<24h
,salvo
lasqueafectanalhgado,rinymdulasea.

2.Medicamentoscardiovasculares
Son frmacos con
margen de seguridad estrecho
. Podemos tener dos situaciones:
intoxicacincrnicayaguda.
La
intoxicacin crnica es la ms
frecuente
.Sueleafectarapacienteshabitualmente
mayores de 60 aos, cardipatasyque llevan meses o aos en
tratamientodigitlico
.
Posibles causas:
alteraciones en la posologa
,
potenciacin por otros frmacos
(antiarrtmicos e hipotensores),
alteraciones farmacocinticas por otros frmacos
(calcioantagonistas),
insuficiencia renal
, estados de
deshidratacin
,
abuso de
diurticos
,hipopotasemia,hipomagnasemia,hipercalcemia.
El
sntoma
principal es la
bradicardia
(<40),aunque tambin hay
lipotimias
,
sncopes
.
A veces
anorexia, nuseas, vmitos y diarrea
. Excepcionalmente
trastornos en la
visin
.
70

El
tratamiento
adecuadosera
suspender el tratamiento
,monitorizarelECGycorregir
los trastornos hidroelctricos
. El
pronstico
general de esta intoxicacin crnica es
buena
y
noseeshabitualusaranticuerposantidigital
.
La
intoxicacin aguda esmucho
menosfrecuenteperomsgrave
.Los
sntomas
que
aparecenson:
trastornos digestivos
(diarrea,vmitos, nuseas).A veces
trastornosde
la visin
. Los trastornos del ECG pueden provocar una paradacardiaca en menos de
6h.
El
tratamiento
indicado es la
evaluacindelas alteraciones hemodinmicas y ECG
y
correccindelasmismas,
descontaminacindigestiva
y
anticuerposantidigital
(IV).
2.1.Nitratos
En este caso podemos tener
varias posibilidades
:
sobredosificacin por va oral o
transdrmica
,
sobredosificacinporvaIVhospitalaria
,
intoxicacinindustrial
.
Los
sntomas
de una
intoxicacin
son:
metahemoglobinemia
(porque oxidan la
hemoglobina,dandolugarafenmenosdecianosis).
Tratamiento
:
descontaminacindigestiva
en casodemetahemoglobinemiatratamiento
con
azuldemetileno

tratamientosintomtico
.
Porva oral
senecesitandosis relativamente altas
(25comprimidos)parallegarala
dosistxica.

3.MedicamentosdelSNC
3.1.Antipsicticos
Losantipsicticostienenunndiceteraputicoalto.
Las
RAM
son:
distona aguda (espasmos msculos, lengua, cara, cuello, espalda),
parkinsonismo (bradicinesia, rigidez, temblor, facies de mscara),
acatisia
(sensacin
subjetiva de necesitarmoverse continuamente),
temblor perioral(despus de meses o
aos de tratamiento),
disquinesias tardas (despus demeses oaosde tratamiento).
Enalgunoscasospuedeaparecer
eosinofilia
Los
sntomas
de la
intoxicacin
:
disminucin de conciencia
, ausencia de depresin
respiratoria, conservacin del tono muscular pueden mostrarse
agresivos
si se les
estimula pueden tener
signos anticolinrgicos
(midriasis, sequedad de boca,
hiperperistaltismo) slo las grandes sobredosis o las asociaciones con otros
psicofrmacos producen
coma
,
hipotensin
e
hipotermia
los
cambios
electrocardiogrficos
sonfrecuentes(lamuerteseproduceporfallocardaco?)
71

Tratamiento
:
descontaminacindigestiva
,
tratamiento sintomtico y de soporte
,
nohay
antdoto
,lasmanifestacionesanticolinrgicaspuedencorregirsecon
fisostigmina
.
El sndrome neurolptico maligno es un sndrome muy grave y se da tanto en
intoxicacin crnica como aguda. Es ms frecuente en hombres jvenes, con mal
estado general,enlos queseasocia aalcoholismo o una toxicomana.Estesndrome
debe sospecharse siempre que se presenta: disminucin de la conciencia, rigidez
muscular,hipertermia(>40),rabdomiolisis.Esidiosincrsicaypuedeserfatal.
Tratamiento:interrumpir cualquier administracinmedicamentosa,refrigeracinexterna
ehidratacin,tratamientoespecfico(mirarfrmacos).
3.2.Sedantes
Las
RAM
tpicasdelasBZPsonel
aumentodelahostilidadeirritabilidad
,estadosde
confusinmentalenancianos
,
aumentodepesoydeapetito
.Otros
erupcincutnea,
nuseas,agranulocitosis
.
Los
sntomas
dela
intoxicacin
sontpicosdeladepresindelSNC:
estupor,disartria
(dificultadparahablar),
somnolencia,obnubilacin,coma
,
hipotona
el
comaprofundo
oladepresinrespiratoria
sonexcepcionaleslaasociacinconalcoholetlicoesmuy
frecuente,loquepuedepotenciarmanifestacionesdedepresindelSNCalgunos
pacientesdesarrollan
bradicardia
,sinrepercusinhemodinmica.
Tratamiento
:
descontaminacindigestiva
,ensituacinagudatratamientosintomtico
flumazenilo
esantdotoespecfico.
3.3.Antidepresivos
Podemos distinguir 4 grandes grupos de medicamentos utilizados para tratar los
estados depresivos: antidepresivos cclicos, inhibidores de la recaptacin de
serotonina,inhibidoresdelamonoaminooxidasa,lassalesdelitio.
ATC
RAM
los tpicos son
efectos antimuscarnicos
(sequedad de boca, gusto metlico o
amargo, distrs epigstrico, estreimiento, discinesia, taquicardia, palpitaciones),
debilidad y fatiga
,hipotensinortosttica
,toxicidadcardiaca
,transicinhaciaunestado
de
excitacin manaca
,
problema de memoria y concentracin
,aumentodel riesgode
convulsiones
.
Sobredosificacin
: es la causams
comn
deingresos por txicos en los serviciosde
urgencias,slopordetrsdelacombinacindealcoholydrogas.
Sntomas
de
intoxicacin
: breve fase de
agitacin e inquietud
,
afecciones
72

cardiovasculares
y
sndromeanticolinrgico
.
Tratamiento
: medidas para
disminuir la absorcin, tratamiento y soporte
en la fase
inicial no suele hacer falta tratamiento, sin embargo, a partir de las 12h las
manifestacionespuedenvolversemsproblemticaselantdotoesla
fisostigmina
ISRS
Sonlosmssegurosdelmercado.
Sntomas
de la
intoxicacin
: producen un
sndrome serotoninrgico
, que puede ser
leve,moderadoograve. Enel
leve
hay
temblor, nuseas, vmitos,cefaleas,midriasis,
confusin, sudoracin
. En el
moderado
hay
inquietud, incoordinacin en la marcha
,
taquicardia y HTa, agitacin
. Enel
grave
hay
trastornoselectrocardiogrficos
,castaeo
dedientesyrigidezmuscular
.
El
tratamiento
es
descontaminacin digestiva
,
sintomtico y de soporte
,
no existe
ningnantdotoespecfico
IMAO
Sntomasde
intoxicacin
:lomscaractersticoeslacrisishipertensiva,
Tratamiento
:
descontaminacin digestiva
,
perodode observacinprolongado(mnimo
12h),con
controldeECGyhemodinmico

noexisteantdoto
.
Dosis txicas
: aproximadamente
100200 mg producen
intoxicaciones graves y
250400 mg podran resultar
mortales
. La coingesta de ATC o de inhibidores de la
serotoninapotencianlagravedaddelaintoxicacin.
Salesdelitio
Tienen un bajo ndice teraputico. Hay amplias diferencias interindividuales en la
absorcinoral,loqueobligaalamonitorizacindelosnivelesplasmticos.
Dosis txicas
:
50 mg/kg 100mg/kg (918pastillas de PLENUR) segn siel paciente
estonotratado.
RAM
:
nuseas,vmitos
Sntomas
de la
intoxicacin
: dependen de si el paciente estaba en tratamiento con
sales de litio o sila intoxicacinescrnica.Sielpaciente
noestabaentratamientocon
sales de litio
: debuta con
nuseas, vmitos y diarrea
,
sntomas neurolgicos
caractersticos. Si el paciente
estaba en tratamiento
: debuta con
nuseas, vmitos y
diarreas
.
Intoxicacin crnica
: por
aumento de dosis o por
concomitancia con otros
frmacos
.
73

Tratamiento
:
descontaminacindigestiva
,
noeseficazelcarbnactivado
,
sintomtico
y
de
soporte
,
nohayantdoto
,
moderadadiuresisforzada
neutradealmenosde2h.

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