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UNIVERSIDADE FEDERAL DE ALFENAS

CAMPUS POOS DE CALDAS


FUNDAMENTOS DE MICROBIOLOGIA
Prof.: Gunther Brucha

Discentes:
Amanda Mendes Marciano
Daniel Heitor Tardelli de Oliveira
Guilherme Andrade de Pdua Paula
Thais Paiva Lounine

CINTICA DA MORTE BACTERIANA: EXPOSIO RADIAO UV

Poos de Caldas
2014
1 - INTRODUO
No final do sculo XIX, o efeito germicida da luz solar foi reportado pela
primeira vez por Downs e Blunt e por volta de 1955, foram realizadas as primeiras
aplicaes de radiao ultravioleta para desinfeco de gua, na Sua e na ustria [01].
A radiao ultravioleta um tipo de radiao eletromagntica, cujo comprimento
de onda pode variar entre 100 e 400 nm. A principal fonte de radiao UV o sol,
porm tambm pode ser emitida artificialmente atravs de arcos e lmpadas
incandescentes.
A desinfeco se d atravs da exposio dos microrganismos a radiao UV,
sendo o comprimento de onda de 260 nm o mais efetivo. A letalidade desse mecanismo
resultado dos danos causados ao material gentico das bactrias, impedindo-as de se

multiplicar. A radiao UV rompe as ligaes que mantm os tomos de DNA juntos,


afetando exclusivamente as bases piramdicas (timina e citosina), que interferem na
replicao e transcrio do DNA [01].
A extenso dos danos causados aos microrganismos depende do tempo de
exposio radiao UV, portanto, para eliminar totalmente as bactrias, a exposio
deve ser longa [02].
2 OBJETIVOS
O objetivo do presente trabalho consiste na exposio radiao UV da bactria
escherichia coli para avaliao da cintica de morte deste grupo de microrganismo.
3 PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
Para a realizao do procedimento experimental, foram realizadas as seguintes
etapas:

Retirou-se 1 ml da suspenso da bactria escherichia coli, realizando 5 diluies


decimais sucessivas (10-1, 10-2, 10-3 ,10-4), inoculando-se por espalhamento

superfcie 0,1 ml as diluies 10-3 e 10-4, fazendo 2 repeties.


Colocou-se 10 ml da mesma soluo numa placa de Petri, expondo a radiao

UV durante 10 min.
Retirou-se 1 ml da suspenso da bactria escherichia coli, realizando diluies
decimais sucessivas (10-1, 10-2, 10-3), inoculando-se por espalhamento

superfcie 0,1 ml as diluies 10-2 e 10-3, fazendo 2 repeties.


Exps se novamente a placa de Petri a radiao UV durante mais 10 min (total

de 20 min).
Repetiu-se esse procedimento at a diluio decimal de 10-1.

A tabela 1 exemplifica o procedimento descrito anteriormente at a ltima diluio:


Tabela 1 Procedimento experimental
Grupo
1
2
3
4

Tempo de exposio
Radiao UV (min)
10
20
30
40

Diluies
preparadas
10-1, 10-2, 10-3 ,10-4
10-1, 10-2, 10-3
10-1, 10-2
10-1

Diluies
inoculadas
10-3 ,10-4
10-2, 10-3,
10-1, 10-2,
10 0, 10-1,

Aps tais procedimentos, foram identificadas as placas de Petri com a repetio,


o tempo de exposio e diluio inoculada. Depois as placas foram incubadas a 28 C
por 24 horas.
No dia seguinte, deveriam ser realizadas as seguintes etapas:

1. Contagem das UFC nas placas de Petri que apresentassem um nmero contvel
(30 300 colnias).
2. Fazer uma mdia das 2 repeties e calcular o nmero de clulas/ml da diluio.
3. Calcular o nmero de clulas na suspenso original (sem diluies).
4. Calcular a porcentagem de morte de acordo com a seguinte expresso:
% Morte = 100 [(nmero de UFC no tempo de exposio / nmero de UFC no
tempo de exposio 0) x 100].
5. Fazer grfico que mostre a diminuio do nmero de clulas da suspenso
original de microrganismos em funo do tempo de exposio radiao UV.
6. Descrever a cintica de morte microbiana em funo do tempo de exposio
radiao UV.
4 RESULTADOS
Aps a realizao do procedimento experimental no qual as amostras bacterianas
ficaram na estufa pelo perodo de 24 horas, foi observado pelo grupo toda serie de
placas, sendo que estas se encontraram com excesso de colnias em algumas destas,
fato que inviabilizou a contagem das mesmas e em algumas placas foi observado a
ausncia de tais colnias, fatos estes que tornaram impossvel a realizao da segunda
parte do experimento, ficando o grupo sem dados concretos para apresentar.
5 CONCLUSO
A partir do presente relatrio conclumos que o experimento no apresentou
resultados satisfatrios, podendo estes serem devido a sucessivos erros sistemticos e
possvel contaminao em parte do processo.
6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
[01] AGUIAR, A. M. S. Avaliao do Emprego da Radiao Ultravioleta na
Desinfeco De guas Com Cor e Turbidez Moderadas. Disponvel em: <
http://www.smarh.eng.ufmg.br/defesas/233M.PDF>. Acesso em: Dezembro de 2014.
[02] PROSAB. Mtodo Alternativos de Desinfeco de gua. Disponvel em: <
http://www.finep.gov.br/prosab/livros/LuizDaniel.pdf>. Acesso em: Dezembro de 2014.