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INTRODUCCIN

La cromatografa fue inventada por el botnico ruso Mikhail Tswett a principios del siglo
XX, empleando esta tcnicapara separar algunos pigmentos de las plantas, el nombre de
este mtodo viene del griego choma (color) y graphein (escritura); el cual es un mtodo de
separacin, identificacin y determinacin de los componentes qumicos demezclas
complejas ocupando dos fases inmiscibles entre ellas. En la cromatografa en capa fina, se
utiliza una placa(generalmente de aluminio) que se recubre con fase estacionaria que puede
ser almina o silica gel, en la cual sepresentara un fenmeno de adsorcin selectiva. La fase
mvil ascender por capilaridad por la placa arrastrando a supaso los componentes de la
mezcla (o tambin llamados solutos) logrando separarlos; las fases involucradas en estetipo
de cromatografa son: solido-liquido, las separaciones estn basadas en las diferencias en la
velocidad demigracin entre los componentes de la fase mvil, polaridad (generalmente la
fase estacionaria ser ms polar que lafase mvil, de forma que los componentes menos
polares se desplazaran con una mayor velocidad) , tamao de lapartcula, temperatura,
pureza de los disolventes, entre otros.
La cromatografa bidimensional, se basa en desarrollar un cromatograma con dos fases
mviles distintas en diferentes direcciones.

FUNDAMENTO
En la cromatografa, en general se fundamentan en las velocidades de migracin de las
distintas sustancias que se quieren separar, que estn gobernadas por sus solubilidades
relativas en la fase estacionaria polar y la fase mvil no polar. En un solo paso de
separacin cada soluto se distribuye entre ambas fases de acuerdo con su coeficiente de
particin ( es una constante de equilibrio definido) .Para n sistema de solventes y un tipo de
papel determinado , cada sustancia tiene un valor de Rf caracterstico.
Una mezcla compleja que no se separa por completo en un solo cromatograma en papel usa
la cromatografa bidimensional en papel. Basada en el principio anterior, con la diferencia
en la tcnica.
La muestra se aplica en una esquina y el cromatograma se corre en forma paralela a uno de
los bordes del papel, al terminar el primer cromatograma la hoja se rota 90 y se realiza una
cromatografa paralela al segundo borde utilizando otro sistema desolventes. Dado que cada
compuesto migra a una velocidad caracterstica en un sistema de solventes determinado, la
segunda cromatografa debera incrementar en grado sustancial la separacin de la mezcla
de componentes.
Concepto: Cromatografa bidimensional es una variante de la cromatografa en papel
empleada para separar mezclas complejas, donde a muestra se cromatografa primero en
una direccin, se seca el papel, y despus se cromatografa en direccin perpendicular con
otro disolvente. De este modo se obtiene un mapa bidimensional de los componentes de la
mezcla separados.
Una vez separados los componentes de la muestra, parte de ellos o todos se someten a
etapas adicionales de separacin bajo diferentes condiciones, en otra columna o, en el caso
de la cromatografa plana, en direccin perpendicular.
APLICACIN DE LA CROMATOGRAFA
1) Huellas dactilares estudio de protenas.

2) Mezclas complejas como los aminocidos: El papel se atomiza con una solucin
de Ninhidrina y se seca en la estufa para que este compuesto reaccione de la
siguiente

forma:

Esta reaccin de coloracin, muy sensible, es capaz de detectar cantidades tan


pequeas como 1 g de aminocido. La reaccin de la Ninhidrina es especfica
para los aminocidos y se puede emplear tanto cualitativamente como
cuantitativamente.

3) Separaciones 2D se han aplicado al anlisis de la gasolina y otras mezclas de


petrleo, y ms recientemente a las mezclas de protenas.
Ventajas de la cromatografa bidimensional
Ofrecen un gran aumento en su mxima capacidad, sin requerir separaciones
extremadamente eficientes en cualquiera de las columnas. (Por ejemplo, si la primera
columna ofrece una capacidad de pico (k1) de 100 para una separacin de 10 minutos, y la
segunda columna ofrece una capacidad mxima de 5 (k2) en una segunda separacin 5, a
continuacin, la capacidad mxima combinada puede acercarse k1 k2 = 500, con el
tiempo de separacin total todava de ~ 10 minutos).