UN RELATO HISTORICO DE PARVOVIRUS CANINO

L. E. Carmichael 2005

Resumen
Un breve relato histrico de parvovirus canino tipo 2 (CPV-2) y sus variantes
resumidas con nfasis en la contribucin de las personas que participan en el
reconocimiento inicial de CPV-2 y sus subsecuentes descubrimientos que han
permitido avanzar en el conocimiento de la naturaleza y evolucin de este
nuevo virus canino.
El tiempo ha oscurecido las observaciones de muchos veterinarios mdicos
clnicos e investigadores de todo el mundo quienes detectaron la presencia de
una nueva enfermedad cuando CPV-2 hizo su primera aparicin en 1978 y
luego, dentro de 1-2 aos, se extendi en todo el mundo. Desde 1979, cerca de
600 artculos (tabla 1), ponencias, captulos de numerosos textos y
monografas se han publicado sobre el tema de CPV-2. La temprana historia es
bien conocida por mdicos veterinario especialistas en enfermedades
infecciosas y publicaciones notables que se registran en el Biblioteca Nacional
de Medicina (EE.UU.) sitios web, PubMed y en artculos de revisin. Debido al
gran nmero de publicaciones, no es factible citarlos individualmente; Sin
embargo, se hace referencia a ciertos individuos, crticas y artculos
seleccionados que considero particularmente relevantes para la historia del
progreso en la comprensin de CPV-2 y la enfermedad que causa.
La enfermedad clnica causada por CPV-2 y sus variantes, la respuesta inmune
a la infeccin o vacunas, el rango de huspedes y el desarrollo de pruebas
diagnsticas prcticas fueron anotadas en el contexto histrico. Las
propiedades biolgicas bsicas y la estructura fsica, molecular y antignica de
CPV-2 y sus variantes tambin se discuten brevemente. Por ltimo, los actores
clave que han contribuido a la secuencia antignica y ADN (evolutiva)
relaciones entre CPV-2 y el otro parvovirus autnomos de carnvoros se
observan y respecto a la hiptesis sobre el origen y evolucin de CPV-2 y sus
variantes son mencionadas.

INTRODUCCIN Y DESCRIPCIN GENERAL

Me siento honorado y complacido por la oportunidad que me fue dada por el
profesor Truyen para presentar una historia del parvovirus canino (CPV- 2) Han
pasado unos 30 aos desde que surgi CPV-2; sin embargo, la enfermedad
causada por CPV-2 no fue reconocida hasta que una enfermedad grave o fatal
afecto a un gran nmero de perros y otros cnidos. Desde un punto de vista
personal, ha sido una emocionante y gratificante experiencia ver el progreso
de la investigacin durante un tiempo relativamente corto desde que la
presencia del virus fue revelado y estoy desafiado para hacer justicia a quienes
hicieron el avance rpido en el conocimiento. Cuando uno ha sido empujado a

un lado de la toga vivirilis y asume el papel de laudador temporalis acti, es el

momento apropiado de hablar acerca de la historia y dejar la discusin
cientfica para aquellos quienes su intelecto aun es vigoroso.
En esta presentacin, la historia puede ser vista como esa rea del
conocimiento donde, a travs del tiempo, registros de acontecimientos,
memoria, mitos, e ideologas personales interactan en un intento de registrar
las contribuciones de muchos individuos que han participado en el
reconocimiento de CPV-2 y han hecho importantes descubrimientos que
avanzaron nuestro conocimiento de este nuevo virus canino. Se har un intento
de sealar los aportes ms significativos. Sin embargo, es imposible reconocer
el trabajo de todas las personas que han aadido a la literatura publicada y
espero ser perdonado por los pecados de omisin o error grave.
Tomare fuertemente de mis experiencias as como la de mis colegas,
especialmente de los Dres. Max Appel y Colin Parrish del Instituto Baker. Estoy
consciente, sin embargo, que el tiempo ha oscurecido las singulares
observaciones de muchos veterinarios clnicos e investigadores de todo el
mundo quienes detectaron la presencia de una nueva enfermedad cuando CPV2 hizo su primera aparicin y propagacin en todo el mundo dentro de 1 2
aos. Cerca de 600 artculos, documentos, numerosos captulos de texto y
monografas han sido publicados con el tema de CPV-2 desde 1979.
La historia temprana es bien conocida por especialistas en enfermedades
infecciosas y notables publicaciones se registran en el sitio web de pubmed.
Debido al gran nmero de publicaciones no es factible citarlas todas
individualmente; sin embargo, me referir a ciertos individuos, crticas y
artculos seleccionados que considero particularmente relevantes para la
historia del progreso en la comprensin de CPV-2 y la enfermedad que causa.
La descripcin clnica de la enfermedad causada por CPV-2 y sus variantes,
patologa, patognesis y respuesta inmune a la infeccin o vacuna, su rango de
hospederos y el desarrollo de pruebas diagnsticas prcticas fueron se lograron
rpidamente. Por otra parte abundante literatura est disponible sobre la seroepidemiologa regional de CPV-2. Las vacunas estuvieron rpidamente
disponibles para la proteccin de los perros, pero no sin controversias y
creacin de mitos (Carmichael, 1999). Las propiedades biolgicas bsicas y
estructura fsica, molecular y antignica de CPV-2 y sus variantes estn bien
descrita - Quizs en mayor medida para infecciones virales animales o
humanas ms antiguas. (Rimmelzwaan et al., 1986; Truyen, 1999; Steinel et
al., 2001; Ikeda et al., 2002; Hueffer and Parrish, 2003).

Por otra parte, las relaciones antignicas y de secuencias de ADN (evolutivo) de CPV-2 y
otros parvovirus autnomos de carnvoros han sido bien documentados en la literatura
(Shackelton et al., 2005).

Vale la pena mencionar que el primer reporte de parvovirus autnomo de perro

es el virus dimituno canino (MVC) que el Dr Leonard Binn aisl en 1968 en
heces normales de perros de ejrcito (?) (Binn et al.,1970).
Sin embargo, los estudios serolgicos retrospectivos revelaron anticuerpos
neutralizadores de la MVC en el suero canino comercia de moquillo / hepatitis
ya en 1956, lo que indica una relacin de larga data entre MVC y perros. Este
nuevo virus, ahora llamado CPV-1 es distinto de CPV-2 y de parvovirus de otras
especies. Originalmente se crea que no era patognico, se demostr que
causa enteritis y diarrea en cachorros neonatos (Harrison et al., 1992;
Carmichael et al., 1994). Tambin se demostr experimentalmente, que CPV-1
causa la muerte de fetos en madre infectadas durante los 30 das iniciales de
la gestacin. Estudios serolgicos indican la alta prevalencia de CPV-1 la
poblacin canina y ha sido aislado de cachorros o fetos abortados en Europa,
USA y Asia. Desafortunadamente se han recibido pocos estudios, solo cerca de
una docena de documentos han aparecido desde la publicacin inicial de Binn
et.al (1970). Al igual que con muchos otros virus, ahora se sabe ms acerca de
la estructura genmica del MVC que otras propiedades de este virus o esta
enfermedad potencial. La secuencia genmica completa se ha logrado en
aislamientos de USA y Korea y el MCV parece estar ms cercanamente
relacionado con el parvovirus bovino (BPV) que con otros parvovirus animales
(Schwartz et al., 2002; Ohshima et al., 2004). Curiosamente, a principios de
1977, Eugster report un parvovirus no cultivable en las heces diarreicas de
cachorros que todos se recuperaron (Eugster y Nairn, 1977). Parece probable
que el virus observado por microscopa electrnica (EM) fue CPV-1 y no el ms
patgeno CPV-2 observada hasta ms de un ao despus.
Hay que reconocer que CPV-2 no se observ primeramente en el instituto Baker, como
es citado en algunos textos. Muchas personas alrededor del mundo, especialmente en
USA, Autralia y Europa, casi de forma simultnea, observaron la repentina aparicin de
esta sorprendente nueva enfermedad canina (Tabla 2). Jezyk et al. (1979) estuvieron entre

los primeros en observar miocarditis de probable origen viral pero la causa no se determin al
tiempo de su reporte.

Nuestro laboratorio fue el primero en tomar conciencia de brotes inusuales de

vmito y diarrea cuando recib una llamada del Dr Max Appel mientras estaba
de vacaciones. El me alerto de que el
Instituto Baker se estaba llenando con muestras fecales del medio oeste y este
de USA y tuve que
regresar rpidamente al laboratorio. En el tiempo de regreso, un gran nmero
de personas llamaron
al instituto, a Appel y sus asistentes quienes intentaban hace frente a los
paquetes de heces que
haban llegado algunos mal empacados y con fugas de fluido que pudieron
haber contribuido a la
diseminacin viral a travs del correo. Appel observo rpidamente, por
electromicroscopia (EM), un
virus similar al virus de la panleucopenia felina (FPV) en varias muestras de
heces; dentro de pocos
das, un virus citopatognico fue aislado en cultivos celulares de gato. El Dr
Fred Scott en el centro
de salud felina Cornells proporcion un antisuero preparado contra
panleucopenia felina (FPV) en gatos libres de patgenos (SPF) (specific
pathogen-free) y el virus de perro mostro tener una fuerte reaccin en una
inunoflorescencia indirecta (Appel et al., 1978).
El pensamiento en ese tiempo fue que una mutacin haba tenido lugar en el
virus de la panleucopenia felina que permiti que infectara a perros y,
eventualmente entrara a la poblacin canina. Esa impresin an persiste, a

pesar de que estudios posteriores aclaraban la relacin entre los miembros de

parvovirus felinos. En el momento de los brotes iniciales de CPV-2, estbamos
estudiando un brote de enteritis coronaviral en perros en un show en Kentucky
y estaban, por tanto, en condiciones de hacer frente a los nuevos brotes de la
enfermedad entrica que aparecieron hacia el final de agosto de 1978.
Nuestros estudios iniciales estaban enfocados en el desarrollo en pruebas
diagnsticas prcticas y estrategias de vacunacin.
Entre tanto, los patlogos reconocieron rpidamente que una nueva
enfermedad canina haba aparecido y numerosos reportes siguieron a
reuniones, en informes breves en revistas veterinarias y medios de
comunicacin. Durante el periodo entre 1979 y 1983 la patognesis bsita
estaba determinada (Carpenter et al.,1980; Robinson et al., 1980; Pollock, 1982; Macartney
et al., 1984; Carman and Povey, 1985; Meunier et al., 1985) y la respuesta inmune de
perros a la infeccin natural y cadidatos de vacuna estaba descritos (Chappuis
and Duret, 1980; Pollock and Carmichael, 1982; Carmichael et al., 1983). Afortunadamente el
instituto Baker tenia disponible para el estudio un criadero de beagles SPF mantenidos en
aislamiento estricto.

En 1980, tuvimos la suerte de llamar a Colin Parrish como estudiante de

posgrado. He first become acquainted with CPV-2 in his home country, New
Zealand, and had developed an interest in this novel virus (Parrish et al., 1980).
Desde su arrivo, Colin mir a su alrededor del laboratorio y vio principalmente
perros, equipo para serologa y heces de perro. El rpidamente declar: esto
no es lo que vine a estudiar aqu - Yo quiero conocer acerca del virus, la
relacin entre sus propiedades genticas y estructurales y el mecanismo por el
cual CPV-2 evoluciono para infectar perro y causar enfermedad! Esto requera
usar mtodos de virologa molecular moderna, que ni mi laboratorio ni yo
estbamos equipados para hacer. Es evidente que Colin, junto con sus alumnos
y colegas, lograron una gran parte de su objetivo original, y es ahora, sin duda,
el lder de la manada. El entendi que solo el perro lder del trineo disfruta
del cambio de escenario.
Este comentario que llamo a la memoria la experiencia poco comn de estar
en el umbral del descubrimiento cuando una nueva enfermedad viral
pandmica apareci a la vista, y la sensacin de satisfaccin en el logro de una
comprensin general de su naturaleza y la consecucin de los medios para su
control en un plazo de cerca de 5 aos. Tambin se espera que recordar
algunos de los principales acontecimientos de la historia de CPV-2, y sus
variantes, ilustrar la virologa moderna, as como el espritu colegial que
prevaleci, permitiendo avanzar excepcionalmente rpido en reconocer la
naturaleza del virus causal, el desarrollo de pruebas de diagnstico rpido, la
elucidacin de la modalidad bsica de la patognesis y el desarrollo y
comercializacin de vacunas eficaces. Por otra parte, en un plazo de <5 aos,
se estableci la naturaleza esencial de CPV-2 y su relacin con los otros
parvovirus de carnvoros - en gran parte gracias a los esfuerzos de
investigacin de Colin Parrish y sus estudiantes y colegas en todo el mundo con
quien ha trabajado en estrecha colaboracin. Por supuesto, importante trabajo
se llev a cabo de forma independiente en varios laboratorios diferentes.

El siguiente relato de CPV-2 no ser estrictamente cronolgico pero, hasta

cierto punto, tpica desde el descubrimiento no sigue un camino
ininterrumpido.
La enfermedad canina - reconocimiento y control.
Como se seal anteriormente. CPV-2 fue reconocida por primera vez a finales
del verano de 1978. La enfermedad fue reportada por primera vez desde los
EE.UU. (Appel et al., 1978), pero los cientficos australianos y europeos haba
reconocido que casi al mismo tiempo. (. Schwers et al, 1979) Estudios
serolgicos indicaron que el virus estaba presente en Europa en 1976; sin
embargo, Koptopoulos et al. (1986) reportaron que los anticuerpos que
inhibieron la hemaglutinacin y neutralizacin de CPV-2 fueron encontrados en
sueros de perro de Grecia en 1974 Sin embargo, los autores sealaron que sus
resultados fueron muy probablemente no especficos y, posiblemente, debidos
a la infeccin con un parvovirus relacionado de otra especie - tal vez un
antecedente evolutivo de CPV?.
Como ya se ha sealado, en unas pocas semanas tras el aislamiento inicial de
CPV-2 se encontr por serologa convencional de que el nuevo parvovirus de
perro era muy similar a la FPV y otros parvovirus que causan enteritis en
visones, mapaches, as como algunas otras especies de carnvoros.
Los casos iniciales se caracterizan por miocarditis en cachorros y diarrea
mucosa, a veces con sangre. Aunque incontables miles (millones?) de los
perros fueron afectadas en todo el mundo, la mortalidad global parece haber
sido relativamente baja, excepto en cachorros <3-4 meses de edad.
Desafortunadamente, se dispone de datos epidemiolgicos pequeos de base
amplia; si la mortalidad global en los EE.UU. haba sido del 2%, entonces, ms
de un milln de perros muertos fueron observados. No creo que ese fuera el
caso. Nunca lo sabremos.
En 1980, la enfermedad se haba propagado por todo el mundo a causa del movimiento
de los perros, sus dueos, en trnsito por aire, tierra o mar. La fuente principal, aparte de
los perros, era materia fecal en los zapatos y la ropa - los parvovirus son muy contagiosos
y estables. El correo nacional e internacional tambin puede haber servido como un
vector (vehculo dira yo).
El caos prevaleci durante unos 2 aos entre los propietarios y los veterinarios hasta que
la naturaleza de la enfermedad canina y su patognesis se aclaron. Cientficos del Baker
Institute respondieron a ms de 10 000 llamadas telefnicas de los veterinarios y dueos
entre agosto de 1978 y finales de 1980. Also, the news media had a field day reporting
outbreaks,
reports that often created extreme apprehension because of
sensational coverage and fabricated myths.

Muchos investigadores hicieron importantes contribuciones a las bases de la patologa y

la patognesis de CPV-2 dentro de un corto perodo de tiempo tras el reconocimiento de
la enfermedad (Tabla 3).

Se identificaron los sitios principales de crecimiento viral en el perro y estudios de

transmisin revelaron como el principal modo de transmisin las heces. Ms tarde, en los
estudios de hibridacin secuencial in situ (Peters, 1996) demostr que la iniciacin de la
infeccin por CPV en los perros se produce principalmente en las clulas linfoides de la
faringe y no en las clulas intestinales M, como se sugiri anteriormente (Carman y
Povey, 1985).
El control de CPV por la vacunacin procedi a travs de una serie de
estrategias - vacuna heterloga inactivada o viva FPV / enteritis viral visn
(MEV), virus inactivado CPV-2, virus modificado en directo CPV-2 o CPV-2a, -b.
Durante los 3 primeros aos despus de la aparicin de CPV, los intentos de
controlar la enfermedad con vacunas no estaban seguros y el caos prevaleci.
Inicialmente, algunas vacunas proporcionan grados variables de proteccin; Sin
embargo, otros, como las vacunas MEV comerciales, eran generalmente
ineficaces, pero hicieron grandes ganancias para algunos veterinarios. Hubo
una falta de datos de la respuesta inmune, y de la disponibilidad de vacunas
que protegieran e interrumpieran la transmisin viral. Los mitos y las
recomendaciones que florecieron se basaban principalmente en la intuicin
hasta que se entendieron los principales factores que interfieren con la exitosa
vacunacin - en especial, el papel de los anticuerpos maternos y la capacidad
de CPV para mutar durante el paso en cultivos celulares.
Con el temprano reconocimiento de la estrecha relacin entre el CPV-2 y FPV,
vacunas heterologas (FPV / MEV) fueron desplegadas rpidamente; pero el FPV
comercial o vacunas MEV (virus inactivado o vivo) entonces usadas
proporcionaban proteccin poco confiable para los cachorros. Estudios entre
1979 y 1981 revelaron una variacin sustancial en la eficacia de las vacunas
FPV comerciales para perros y gatos (Pollock y Carmichael, 1983). Las vacunas
inactivadas fueron slo marginalmente eficaces y, sobre todo, no lograron
interrumpir la transmisin del virus. Pollock tambin verific la replicacin
restringida de FPV en los perros por va parenteral, pero no la va oral y se
demostr una fuerte respuesta inmune a una vacuna FPV experimental (105,7
TCD50), as como a determinados (pero no todos) los productos comerciales
probados. Se determin entonces que la inmunizacin efectiva de los perros

con vacunas vivas FPV requeran al menos 1000 veces la dosis mnima
infecciosa en gatos; las diferentes cepas tambin parecan tener importancia.
No obstante, con carcter experimental, se estableci para el uso de la FPV,
mientras que las vacunas homlogas (CPX-2) se estaban elaborando. Los
numerosos estudios durante el perodo 1979-1980 mostraron que FPV era
seguro para perros y no se abandon (was no shed??).
El uso de vacunas de FPV a virus vivos no estuvo exenta de polmica ya que
varias personas se opusieron firmemente a su uso para variadas razones.
Algunos se opusieron en el principio general de que las vacunas a virus vivo
eran inherentemente peligrosas; otros alegaron que CPV-2 haba evolucionado
a partir de las vacunas FPV y que su uso irresponsable en perros podra crear
consecuencias indeseables adicionales.
Un investigador distinguido afirm que FPV administrado a los perros podra
mutar, lo que implicaba que los humanos podran finalmente infectarse. Esto
colocaba una presin importante en los que participaban en el desarrollo de
vacunas seguras y eficaces. Una gran parte del trabajo se realiz para abordar
esas preocupaciones, pero la incertidumbre persista. Afortunadamente, en la
Plenitud de los tiempos se prob que esas preocupaciones eran infundadas
pues Truyen, ms tarde, de forma inequvoca demostr que CPV-2 no surgi
directamente de FPV o de una vacuna FPV (Truyen et al., 1998).
Los casos de CPV-2 disminuyeron durante el perodo de 1980 a 1981, como
consecuencia de la inmunidad de grupo resultante de la infeccin natural y el
uso generalizado de vacunas. Cabe sealar que el principal virus circulando en
la poblacin de perros en ese momento era CPV-2. La vacunacin de los perros
era abundante durante ese perodo y, sin duda, tuvo un efecto beneficioso. Las
vacunas a virus vivo fueron recomendadas por la mayora de los especialistas
ya que haban demostrado ser seguras en los ensayos de laboratorio y de
campo, y se inmunizaron cachorros a una edad ms temprana que hizo
vacunas inactivadas (and immunized pups at an earlier age than did inactivated vaccines.).
Es importante destacar que las vacunas de virus vivos interrumpieron la
transmisin de virus virulento. no obstante, varias vacunas a virus vivo (CPV-2)
demostraron tener poca eficacia en los perros. A continuacin, la razn
principal fue descubierta la rpida mutacin de CPV se produjo durante el
paso de virus de siembra en cultivos celulares (se utilizaron comnmente
clulas de gato) con la consiguiente acumulacin de mutantes que no pudieron
replicarse eficientemente en perros y provocar una respuesta inmunitaria
adecuada (Carmichael, 1999).
Algunas vacunas homlogas con ttulos excepcionalmente altos (en clulas
felinas) tenan dosis mnimas inmunizantes superiores a 10 5 dentro de un ao
de su concesin de licencias para su uso en perros. As, el ttulo viral de una
vacuna, per se, tena poco significado con respecto a la capacidad de
inmunizar. Afortunadamente, las vacunas han mejorado mucho y los
veterinarios han tomado conciencia del papel fundamental de los anticuerpos
maternos que interfieren con la infeccin natural, y la vacunacin.

Durante el periodo de 1891 1982 veterinario en USA, y otros pases,

reportaron brotes de una enfermedad excepcionalmente severa en perros
vacunados y no vacunados. Los cachorros colapsaban de repente en un estado
similar al shock y moran, con o sin signologa entrica. Muchos cachorros
tambin desarrollaron una enfermedad rpida y progresiva con una
excepcional enteritis hemorrgica la cual no fue comnmente observada en los
brotes iniciales. Adicionalmente, los veterinarios reportaron respuestas pobres
al tratamiento con fluidos intravenosos, una tratamiento bastante efectivo
durante el periodo de 1979 1980. Por otra parte los perros SPF enfermaron
severamente despus de la exposicin oro-nasal a un virus aislado por el Dr.
Ron Schultz (Universidad de Wisconsin) de un brote en 1981. Este virus fue
subsecuentemente identificado como CPV-2a. Un problema significativo fue
encontrado por quienes estudiaron fue la gran dificultad para producir la
enfermedad clnica en cachorros SPF con el virus original ya que desarrollaron
una enfermedad relativamente leve o no la desarrollaron despus de la
inoculacin con los aislados originales en 1978 1979. En contraste, la
enfermedad causada por el virus de 1981, y sus subsecuentes aislamientos,
fueron significativamente diferentes en diferentes formas a las producidas por
el virus original. Los cachorros moran en un estado semejante al shock
despus de un periodo de incubacin increblemente corto (4 -5 das).
Sorprendentemente, los ttulos infectantes en heces (TCD50) de perros
enfermos infectados con los aislamientos de 1981 (infected with the 1981 ff
isolates) fueron mucho ms bajos que los titulos en heces de perros infectados
con el virus original; sin embargo, los ttulos de hemaglutinacin (HA) de heces
fueron mucho ms altos. Los ttulos de la hemoaglutinacin de heces del CPV-2
original eran raramente las altos que 1:5000. En contraste, los ttulos de HA
de heces de perros infectados con el virus de 1981 1982 fueron comnmente
mayor o igual a 1 milln en el pico de la diseminacin viral. (however, faecal
haemagglutinin (HA) titres were much higher. Faecal HA titres of the original
CPV-2 were rarely higher than 1 : 5000. In contrast, faecal HA titres of dogs
infected with the 19811982 viruses were commonly 1 million at the peak of
viral shedding.)
Fue por aquella poca que la primera mutacin de CPV-2 a CPV-2 ocurri un
cambi que fue confirmado en 1984, despus de haberse desarrollado un panel
de anticuerpos monoclonales (MABS)
(Parrish and Carmichael, 1983).
Posteriormete los Mabs sirvieron a cientficos de todo el mundo para identificar
los tipos de CPV que emergan en torno a 1980; que tambin han sido muy
valiosos para determinar la estructura antignica de CPV y sus variantes, as
como para trazar la historia evolutiva de CPV.
Varias pruebas de diagnstico se han desarrollo durante el perodo de 1978 a
travs de la actualidad para la deteccin de virus y para la serologa. Son
demasiado numerosos para discutir aqu, pero los ms comunes son la
hemaglutinacin, membrana comercial kits de ELISA y, para los laboratorios
especializados, la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) Tabla (4). La
inhibicin de la hemaglutinacin (HI) y pruebas de IFA (inmunoflorescencia
indirecta) son comnmente utilizadas por los mdicos para la serologa; Sin
embargo, la prueba IFA es menos sensible y no esta correlacionada con la
inmunidad. Una prueba de ELISA para su uso en clnicas para determinar los

ttulos de anticuerpos (Galed Labs, Kibbutz Galed, Israel; simbiticos, San

Diego, CA, EE.UU.) ha tenido alguna aplicacin ya que los resultados de las
pruebas se correlacionaron con la prueba de HI. Sin embargo, muchos
consideran que la prueba cuantitativa de ELISA para anticuerpos (BioGaled,
Kibbutz Galed, Israel) toma mucho tiempo, al menos para las muestras
individuales. El TiterChek (simbiticos) ELISA es rpida y fcil de realizar, pero
slo da resultados Positivo o negativa.
Propiedades bsicas de CPV
En 1978, la mayora de los investigadores no tardaron en darse cuenta de que
el parvovirus fue la causa de los brotes generalizados en los perros. El
Parvovirus eran bien conocidos en el momento y el nuevo virus del perro, como
Humpty Dumpty, fue reconocido inicialmente por su tamao y forma.
Poco despus, se iniciaron los estudios de las propiedades bsicas de CPV-2 y
su relacin con el FPV / MEV en una serie de artculos publicados entre 1981 y
1985. En esa serie de informes,
el ADN de CPV-2 y los tres grandes
polipptidos () estructurales fueron descritos (Paradiso et al., 1982), pero los
transcripciones NS-2 () no se caracterizaron hasta 10 aos ms tarde (Wang et
al., 1998). Solon Rhode tercero fue el primero en determinar la secuencia
completa de nucletidos del gen principal protena de la cpside (nucleotide
sequence of the major capsid protein gene ) (Rhode, 1985), que ms tarde fue
confirmado y modificado por otros (Reed et al, 1988;.. Parrish et al, 1991). El
mapeo inicial de sitios de restriccin tambin demostr la cercana relacin
entre CPV-2, FPV y MEV (mink enteritis virus); sin embargo, el anlisis de los
mapas de restriccin y las comparaciones serolgicas indicaron que CPV difiere
de esos virus (McMaster et al, 1981;.. Tratschin et al, 1982). se apareci a
varios individuos que exista una relacin ms estrecha entre el CPV-2 y FPV
vacunal (it appeared to several individuals that a closer relationship existed
between CPV-2 and vaccinal FPV). Una gran controversia surgi sobre si CPV-2
haba evolucionado como un mutante directa del FPV, o de una vacuna contra
el FPV. Como se menciona antes, esto no se resolvio hasta que los documentos,
publicados entre 1995 y 1998, demostron que CPV-2 no surgi como una
variante directa del FPV o un virus de la vacuna FPV (Truyen et al., 1998).
Desarrollos importantes y rpidos se produjeron despus de 1984. Parrish
haba desarrollado un gran nmero de Mabs para CPV-2, FPV y MEV que
revelaron eptopos nicos y compartidos entre los virus (Parrish et al., 1984).
Uso de recombinacin genmica en conjunto con el mapeo de eptopos, y
luegola comparacin de las propiedades biolgicas y la gama de la clula
husped de los recombinantes, los sitios de restriccin que indicaban
diferencias entre CPV y FPV / MEV se determinaron (Parrish y Carmi- Chael,
1983). En estudios posteriores se encontraron mayora de los cambios en, o
dentro de un aminocido de la superficie de la cpside. Esta metodologa se
us tambin, en conjunto con mutantes de escape, para mapear los sitios
funcionales importantes en la cpside viral, por ejemplo, determinantes de las
clulas huesped, la unin de los glbulos rojos (hemaglutinacin) y el tropismo
de la clula husped, que proporciona informacin sobre el mecanismo de la
evolucin de CPV-2.

Colin Parrish tuvo un encuentro fortuito con Michael Rossmann en Reunin de

la Sociedad Americana de Virologa de 1986; a partir de entonces, el efoque
bidimensional de Parish tomo una tercera dimensin, podra ser mapeado en
una estructura tridimensional del virus. Esto tomo cerca de una ao hasta que
un mtodo fuera perfeccionado para cristalizar CPV con el fin de obtener
imgenes cristalogrficas de rayos-x (Luo et al., 1988). Las condiciones que
arrojaron los cristales fueron muy exactas y tomarn cerca de 2 semanas para
crecerlas. En 1991, la estructura anatmica tridimensional de CPV y el
(structural motif of the major capsid protein VP-2) motivo principal de la
protena principal de la cpside (VP-2) fueron decritas en un documento clsico
por Jun tsao y sus colegas (Tsao et al., 1991). )The canyons, dimples and
spikes)que forman la superficie topografa fueron ilustrados y un road map
bidimensional de residuos de aminocidos que conforman la superficie del
virus dentro de una sola unidad icosadrica fue construido. El roadmap
ilustrado por Jean- Yves Sgro (Institute of Molecular Virology, University of
Wisconsin, Madison, WI, USA) se convirti en el logotipo para el laboratorio de
Parrish y embelleci las camisetas usadas por los tcnicos y estudiantes. La
hoja de ruta era fundamental en relacin de los cambios genmicos a los
cambios en la estructura de aminocidos de la cpside viral y la identificacin
de los eptopos de superficie. Posteriormente, otros investigadores utilizaron la
roadmap para estudiar CPV- 2 y sus variantes. El roadmap tambin fue una
herramienta importante que facilit la construccin de la va evolutiva tomada
por CPV-2 CPV-2a y las otras variantes que surgieron posteriormente.
Cambios evolutivos en CPV-2 y su significado
Con la excepcin del virus de la Enfermedad Aleutiana del Visn y el MVC, los
parvovirus que infectan y causan enfermedad en los carnvoros son
aproximadamente 99% homlogos en sus secuencias genmicas y todos ellos
estn estrechamente relacionados antignicamente. La principal diferencia
est en el rango de hospedadores in vivo e in vitro. Estos virus se han
agrupado de manera informal dentro del subgrupo parvovirus felino,
probablemente porque FPV fue el primer miembro reconocido. Aunque los virus
dentro del subgrupo pueden infectar a ms de una especie, son nombrados por
el husped en el que se producen la enfermedad natural. Cuando un rbol
filogentico que engloba todos los virus dentro del subgrupo sea finalmente
completado, un nombre ms adecuado podra ser el subgrupo de parvovirus de
los carnvoros.
La variante antignica (CVP-2a) que surgi alrededor de 1979 difiere de la
original CPV2 en tres cambios de AA informticos en la protena de la cpside
(in three informative AA changes in the capsid protein). Los cuales resultadon
en cambios antignicos (Parrish et al., 1988a,b). Los efectos biolgicos de los
cambios genmicos fueron extraordinarios, como se menciona anteriormente.
No slo era la patognesis y el modo de crecimiento viral en los perros
afectados, pero CPV-2 el cual originalmente no infectaba perros, mut a CPV-2
y, cerca de 1984, a CPV2b por una sustitucin de nucletidos que resulto en un
cambio antignico adicional (Parrish et al., 1991; reviewed in Steinel et al.,
2001). Aquellos dos virus
son ahora los tipos predominantes, pero su
localizacin geogrfica difiere. El CPV-2 original desapareci alrededor de 1981.

Cabe sealar que no hay conocimiento de las consecuencias en lo que respecta

a las inmunizaciones. - no fueron requeridas nuevas vacunas para proteger a
los perros debido a los cambios antignicos (new vaccines were not required to
protect dogs because of the antigenic changes) (Carmichael, 1999). No
obstante, algunos productores comerciales de vacunas de CPV falsamente
utilizan los datos evolutivos para dar cuenta de la pobre eficacia de las
vacunas.
As, dentro de unos 8 aos despus de que emergi, CPV-2 haba sufrido
cambios evolutivos, incluyendo una gama de huspedes extendida adquiri
la habilidad de infectar gatos. El CPVs con una sustitucin nica de nucletido
ha sido reportado en Asia y Europa (CPVs with additional single nucleotide
substitutions have been reported in Asia and Europe) (Mochizuki et al., 1996;
Horiuchi et al., 1998; Ikeda et al., 2000; Truyen et al., 2000; Battilani et al.,
2001; Martella et al., 2004). Los nuevos tipos antignicos tambin han sido
encontrados en ciertos carnvoro salvajes (Steinel et al., 2001).
En un reciente y significativo documento, Shackelton et al. (2005), analizo un
gran nmero de aislamientos colectados de varios pases durante el periodo
en el que CPV-2 emergi. Sus datos sugieren que CPV emergi al menos 10
aos antes de que la enfermedad clnica fuera reconocida. Se dedujo que las
mutaciones benficas (para el virus) se haban acumulado dutante ese periodo
hasta que el virus emergi de una fuente desconocida que infecto a un nuevo
husped (el perro) y adquiri la habilidad de propagarse. Despus de un
periodo de adaptacin, el virus se volvi altamente infeccioso para los perros,
resultando en la pandemia que se hizo evidente en 1978 a 1979.
La
recombinacin no pareci jugar un rol evolutivo; en cambio, el lento proceso
evolutivo particip en una alta tasa de acumulacin de sustitucin de
aminocidos crticos en el gen de la cpside principal, algunos de los cuales
eran benficos para la supervivencia del virus. Adicionalmente, el estudio de
Shachelton ilustr la rapidez con que los parvovirus acumulan mutaciones in
vivo-similar a las observaciones realizadas en estudios de CPV-2 del virus
vacunal, donde se encontr que las mutaciones se acumulan rpidamente
durante el pasaje en el cultivo de tejidos (Badgett et al., 2002). Las
sustituciones de nucletidos en CPV siguen observando, pero su significado
biolgico no se conoce. Parece claro (however) que el principal impacto en
perros el cambio de 5 o 6 aminocidos que ocurri durante la evolucin de
CPV-2 a CPV-2
Finalmente, en una serie de documentos importante John Parker, Colin Parrish,
Karsten Huefffer y mas recientemente Laura Palermo demostraron que el
receptor de la transferrina (TfR) juega un papel decisivo en la determinacin de
si un animal se infecta, o no (Parker et al, 2001;. Hue ff er et al, 2003;. Hue er ff
y Parrish, 2003; Palermo et al. , 2003).
Conclusin
Esta breve revisin de la historia de CPV-2 ha sido un relato del desarrollo de
conocimiento del ms reciente virus canino emergido, CPV-2. Debido a las
limitaciones del tiempo , He evitado extensa discusin de vacunas , La zona en

la que haba sido la ms activa, y omit la discusinde la epidemiologa y el

impacto de CPV-2 sobre las especies de vida salvaje. En lugar de, he tratado de
sealar algunos de los principales descubrimientos y acontecimientos que han
llevado a nuestro conocimiento general de CPV-2, la enfermedad que causa y
su evolucin. Como se dice en el comienzo de este relato, muchos cientficos y
veterinarios que no han sido citados han hecho contribuciones significativas;
sin embargo, ningn individuo ha proporcionado tan amplio conocimiento y
como consecuencia la comprensin del virus y su evolucin como lo ha hecho
el doctor Colin Parrish y sus alumnos y colegas.
Colin ha seguido una enseanza de Schiller, que vivi brevemente en Leipzig
(1785). Shiller cree que la ciencia debe ser una cava en produccin (useful
cow) la cual provea un poco de mantequilla y no una vaca sagrada.
Dem einem ist sie die ho chste, die alles beherrsc- hendende Go ttin, dem
anderen eine tu chtige Kuh, die ihn mit Butter versorgt
Creo que la historia parvovirus ilustra lo que puede lograrse en un breve
perodo por los esfuerzos concertados tanto de aplicar y cientficos bsicos
cuyos objetivos comunes son de entender una enfermedad, idear medios para
su control, caracterizar la naturaleza del agente causal y trazar el mecanismo
de su evolucin.
Por ltimo, deseo expresar mi reconocimiento a los colegas que han hecho
importantes contribuciones a la biologa de CPV-2, la enfermedad que causa y
a su control (Tabla 5).
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