CURSO DE BIOQUMICA

I UNIDAD
Semestre 2015 1

Blgo. Marco Antonio Nuez Fonseca

Profesor Responsable del curso.

PROFESORA DE MESA: Lucy Callo Balcazar.

ALUMNA: Katia Galindo Torres.

GRUPO N: 7P
LIMA -PERU
REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO
HEPATICO
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2015

PRCTICA DE LABORATORIO N19

REPARACIN SUBCELULAR DE
NUCLEOS Y EXTRACCIN DE DNA
EN TEJIDO HEPATICO

DE LABORATORIO
FUNDAMENTO.ADN: Es un cido nucleico que contiene instrucciones genticas usadas en
el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y
algunos virus, y es responsable de su transmisin hereditaria. La funcin principal
de la molcula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de informacin.

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Es una macromolcula helicoidal formada por dos cadenas de

desoxiriboncleotidos, las cuales est formado por una base nitrogenada, azcar y
un grupo fosfato.

BASES NITROGENADAS
(Purinas- Pirimidinas).- Portadora de
la informacin gentica.

GRUPO FOSFATO
Tiene un papel estructural.

LOS NUCLETIDOS
Son molculas orgnicas formadas por la
unin covalente de un monosacrido de
cinco carbonos (pentosa), una base
nitrogenada y un grupo fosfato.

HISTONAS
Son protenas bsicas, de baja masa
molecular, muy conservadas evolutivamente
entre los eucariotas y en algunos procariotas.
Forman la cromatina junto con el ADN,
sobre la base de unas unidades conocidas
como nucleosomas. La cromatina resuelve
el problema de restriccin de crecimiento de
ADN y ncleo, la cromatina est formada por
ADN y protenas, la principal protena
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son las histonas.

II. RESULTADOS.-

LOS PASOS REALIZADOS PARA LA

SEPARACIN SUBCELULAR DE
NCLEOS
1.-

+
SUCROSA 0.25M (10 MILIMETROS )
ROMPE LA MEMBRANA CELULAR

2.-

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CENTRIFUGAR POR 10 MIN.

SOBRENADANTE
BOTAR ESTO
MILIMETROS)
SUSPENSIN
NO BOTAR

SUCROSA 0.34M (10

AYUDA A LIBERAR EL NUCLEO

3.NaCl brinda mdio hipertnico

Solubiliza.
SDS 25%
(ROMPE LA MEMBRANA

MUCLEAR)

Mezclar alcohol isoamnico

(ROMPE PROTEINAS CONTAMINADAS)
+
Cloroformo
(SOLUBILIZA LOS LIPIDOS)

4.-

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Verter en el 2 tubo centrifuga.

Centrifugar por 10 min.

FASE ACUOSA (CONTIENE EL DNA)

FASE PROTEICA (CONTIEN PROTEINAS)
FASE CLOROMOFORFICA (CONTIENE LOS LIPIDOS)

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III. CALCULOS.-

DETERMINACIN DE BILIRRUBINA TOTAL

Bilirrubina total mg/L= (Abs MP Abs BM Abs BR) x (Standard)
(Abs St Abs
BR)
Bilirrubina total mg/L = (0.043 0.023 0.007) x (100)
(0.400 - 0.007)
Bilirrubina total mg/L = 0.013 x 100
0.393
Bilirrubina total mg/L =

0.13
0.393

Bilirrubina total mg/L = 3.31 mg/L

IV. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.

Al realizar los clculos comprobamos cuatro principales cifras que son descritas en el
cuadro de clculos.

El estndar de la bilirrubina es 100 mg/L

La Absorbancia Blanco Reactivo se resta a la operacin por

que el reactivo tambin tiene absorbancia y ayuda a
regular la operacin o para que los resultados sean ms
especficos.
Debemos tener en cuenta que las lecturas deben ser hechas
en lectura a cero, para que la operacin sea ms exacta.

V. CONCLUSIONES.-

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 Nuestro diagnstico nos dio de 3.31 mg/L y en un adulto

se encuentra dentro del rango dado que es hasta o
menor de 10 mg/Dl; con lo cual no tiene ninguna
patologa con respecto a la bilirrubina.
Si el paciente hubiese estado en el rango mayor al de
10 mg/Dl estaramos hablando de un caso de
hiperbilirrubinemias; habra un problema a nivel del
tejido heptico, puede haber una obstruccin masiva o
problema hemoltico.
Es normal que los nios nacen teniendo nivel de
bilirrubina muy elevado pero se normalizan en el
transcurso de la semana.
En este caso se hara un tratamiento de fotolisis, sera
ponerlos en luz pues la bilirrubina disminuye.
Hidratacin, sobrealimentacin: se aumenta la ingesta
de la leche para evacuar ms seguido y as se produce la
eliminacin de bilirrubina atravez de las heces.

Enfermedades Asociadas
Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta:

Anemia hemoltica
Sndrome de Gilbert
Sndrome de Crigler-Najjar

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Hiperbilirrubinemia conjugada o directa:

Habitualmente la hiperbilirrubinemia de predominio directo es causada por enfermedades
hepticas en las que hay insuficiente capacidad de excretar la bilirrubina. Esta dificultad puede
localizarse en el hgado o en la va biliar (ictericia obstructiva).

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