CURSO DE BIOQUÍMICA

I UNIDAD
Semestre 2015 – 1

Blgo. Marco Antonio Nuñez Fonseca
Profesor Responsable del curso.

PROFESORA DE MESA: Lucy Callo Balcazar.

ALUMNA: Katia Galindo Torres.

GRUPO N°: 7P
LIMA -PERU
REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO
HEPATICO
Katia Galindo Torres. USMP.
Página 1

2015 PRÁCTICA DE LABORATORIO N°19 “REPARACIÓN SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCIÓN DE DNA EN TEJIDO HEPATICO” DE LABORATORIO FUNDAMENTO. USMP. Página 2 . REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. y es responsable de su transmisión hereditaria. La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información.ADN: Es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus.

LOS NUCLEÓTIDOS Son moléculas orgánicas formadas por la unión covalente de un monosacárido de cinco carbonos (pentosa). la cromatina está formada por ADN y proteínas. Página 3 . una base nitrogenada y un grupo fosfato..Portadora de la información genética. la principal proteína REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.Pirimidinas). muy conservadas evolutivamente entre los eucariotas y en algunos procariotas. BASES NITROGENADAS (Purinas. GRUPO FOSFATO Tiene un papel estructural. azúcar y un grupo fosfato.Es una macromolécula helicoidal formada por dos cadenas de desoxiriboncleotidos. USMP. sobre la base de unas unidades conocidas como nucleosomas. las cuales está formado por una base nitrogenada. de baja masa molecular. Forman la cromatina junto con el ADN. HISTONAS Son proteínas básicas. La cromatina resuelve el problema de restricción de crecimiento de ADN y núcleo.

USMP. RESULTADOS. Página 4 .son las histonas.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.25M (10 MILIMETROS ) ROMPE LA MEMBRANA CELULAR 2.- LOS PASOS REALIZADOS PARA LA SEPARACIÓN SUBCELULAR DE NÚCLEOS 1. II.- + SUCROSA 0.

USMP.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.NaCl brinda médio hipertônico Solubiliza. SOBRENADANTE BOTAR ESTO MILIMETROS) SUSPENSIÓN NO BOTAR + SUCROSA 0.34M (10 AYUDA A LIBERAR EL NUCLEO 3.CENTRIFUGAR POR 10 MIN. SDS 25% (ROMPE LA MEMBRANA MUCLEAR) Mezclar alcohol isoamínico (ROMPE PROTEINAS CONTAMINADAS) + Cloroformo (SOLUBILIZA LOS LIPIDOS) 4. Página 5 .

USMP. Centrifugar por 10 min. Página 6 .Verter en el 2 tubo centrifuga. FASE ACUOSA (CONTIENE EL DNA) FASE PROTEICA (CONTIEN PROTEINAS) FASE CLOROMOFORFICA (CONTIENE LOS LIPIDOS) REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.

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007) x (100) (0.  Debemos tener en cuenta que las lecturas deben ser hechas en lectura a cero.400 .393 Bilirrubina total mg/L = 3. Al realizar los cálculos comprobamos cuatro principales cifras que son descritas en el cuadro de cálculos.023 – 0.III.31 mg/L IV. para que la operación sea más exacta.007) Bilirrubina total mg/L = 0. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. CONCLUSIONES.0.  El estándar de la bilirrubina es 100 mg/L  La Absorbancia Blanco Reactivo se resta a la operación por que el reactivo también tiene absorbancia y ayuda a regular la operación o para que los resultados sean más específicos. Página 10 . CALCULOS.043 – 0.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.393 Bilirrubina total mg/L = 0.013 x 100 0.13 0. V. USMP.- DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA TOTAL Bilirrubina total mg/L= (Abs MP – Abs BM – Abs BR) x (Standard) (Abs St – Abs BR) Bilirrubina total mg/L = (0.

 Es normal que los niños nacen teniendo nivel de bilirrubina muy elevado pero se normalizan en el transcurso de la semana. Enfermedades Asociadas Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta:    Anemia hemolítica Síndrome de Gilbert Síndrome de Crigler-Najjar REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.31 mg/L y en un adulto se encuentra dentro del rango dado que es hasta o menor de 10 mg/Dl. habría un problema a nivel del tejido hepático. Nuestro diagnóstico nos dio de 3.  Si el paciente hubiese estado en el rango mayor al de 10 mg/Dl estaríamos hablando de un caso de hiperbilirrubinemias. USMP.  En este caso se haría un tratamiento de fotolisis. con lo cual no tiene ninguna patología con respecto a la bilirrubina. sería ponerlos en luz pues la bilirrubina disminuye. puede haber una obstrucción masiva o problema hemolítico. sobrealimentación: se aumenta la ingesta de la leche para evacuar más seguido y así se produce la eliminación de bilirrubina atravez de las heces. Página 11 .  Hidratación.

USMP. Esta dificultad puede localizarse en el hígado o en la vía biliar (ictericia obstructiva).Hiperbilirrubinemia conjugada o directa: Habitualmente la hiperbilirrubinemia de predominio directo es causada por enfermedades hepáticas en las que hay insuficiente capacidad de excretar la bilirrubina. REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 12 .

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