CURSO DE BIOQUÍMICA

I UNIDAD
Semestre 2015 – 1

Blgo. Marco Antonio Nuñez Fonseca
Profesor Responsable del curso.

PROFESORA DE MESA: Lucy Callo Balcazar.

ALUMNA: Katia Galindo Torres.

GRUPO N°: 7P
LIMA -PERU
REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO
HEPATICO
Katia Galindo Torres. USMP.
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REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información. y es responsable de su transmisión hereditaria. Página 2 .2015 PRÁCTICA DE LABORATORIO N°19 “REPARACIÓN SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCIÓN DE DNA EN TEJIDO HEPATICO” DE LABORATORIO FUNDAMENTO. USMP.ADN: Es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus.

sobre la base de unas unidades conocidas como nucleosomas. Página 3 . de baja masa molecular. HISTONAS Son proteínas básicas.Pirimidinas). las cuales está formado por una base nitrogenada. Forman la cromatina junto con el ADN. la cromatina está formada por ADN y proteínas. azúcar y un grupo fosfato.Portadora de la información genética. BASES NITROGENADAS (Purinas. la principal proteína REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. una base nitrogenada y un grupo fosfato. muy conservadas evolutivamente entre los eucariotas y en algunos procariotas. LOS NUCLEÓTIDOS Son moléculas orgánicas formadas por la unión covalente de un monosacárido de cinco carbonos (pentosa). GRUPO FOSFATO Tiene un papel estructural. USMP..Es una macromolécula helicoidal formada por dos cadenas de desoxiriboncleotidos. La cromatina resuelve el problema de restricción de crecimiento de ADN y núcleo.

- + SUCROSA 0.son las histonas.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.25M (10 MILIMETROS ) ROMPE LA MEMBRANA CELULAR 2. Página 4 . USMP. RESULTADOS. II.- LOS PASOS REALIZADOS PARA LA SEPARACIÓN SUBCELULAR DE NÚCLEOS 1.

NaCl brinda médio hipertônico Solubiliza. Página 5 .- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. SDS 25% (ROMPE LA MEMBRANA MUCLEAR) Mezclar alcohol isoamínico (ROMPE PROTEINAS CONTAMINADAS) + Cloroformo (SOLUBILIZA LOS LIPIDOS) 4. SOBRENADANTE BOTAR ESTO MILIMETROS) SUSPENSIÓN NO BOTAR + SUCROSA 0. USMP.CENTRIFUGAR POR 10 MIN.34M (10 AYUDA A LIBERAR EL NUCLEO 3.

Página 6 . FASE ACUOSA (CONTIENE EL DNA) FASE PROTEICA (CONTIEN PROTEINAS) FASE CLOROMOFORFICA (CONTIENE LOS LIPIDOS) REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.Verter en el 2 tubo centrifuga. USMP. Centrifugar por 10 min.

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Página 8 .REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. USMP.

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13 0. V. Al realizar los cálculos comprobamos cuatro principales cifras que son descritas en el cuadro de cálculos.  El estándar de la bilirrubina es 100 mg/L  La Absorbancia Blanco Reactivo se resta a la operación por que el reactivo también tiene absorbancia y ayuda a regular la operación o para que los resultados sean más específicos.- DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA TOTAL Bilirrubina total mg/L= (Abs MP – Abs BM – Abs BR) x (Standard) (Abs St – Abs BR) Bilirrubina total mg/L = (0.  Debemos tener en cuenta que las lecturas deben ser hechas en lectura a cero. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS.0.III. CONCLUSIONES. para que la operación sea más exacta.400 .007) Bilirrubina total mg/L = 0. USMP.393 Bilirrubina total mg/L = 3.31 mg/L IV.007) x (100) (0.013 x 100 0.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. CALCULOS. Página 10 .023 – 0.393 Bilirrubina total mg/L = 0.043 – 0.

USMP. con lo cual no tiene ninguna patología con respecto a la bilirrubina.  En este caso se haría un tratamiento de fotolisis. sobrealimentación: se aumenta la ingesta de la leche para evacuar más seguido y así se produce la eliminación de bilirrubina atravez de las heces. habría un problema a nivel del tejido hepático.  Si el paciente hubiese estado en el rango mayor al de 10 mg/Dl estaríamos hablando de un caso de hiperbilirrubinemias.  Es normal que los niños nacen teniendo nivel de bilirrubina muy elevado pero se normalizan en el transcurso de la semana. sería ponerlos en luz pues la bilirrubina disminuye.  Hidratación. Enfermedades Asociadas Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta:    Anemia hemolítica Síndrome de Gilbert Síndrome de Crigler-Najjar REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Nuestro diagnóstico nos dio de 3.31 mg/L y en un adulto se encuentra dentro del rango dado que es hasta o menor de 10 mg/Dl. puede haber una obstrucción masiva o problema hemolítico. Página 11 .

USMP.Hiperbilirrubinemia conjugada o directa: Habitualmente la hiperbilirrubinemia de predominio directo es causada por enfermedades hepáticas en las que hay insuficiente capacidad de excretar la bilirrubina. REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 12 . Esta dificultad puede localizarse en el hígado o en la vía biliar (ictericia obstructiva).