CURSO DE BIOQUÍMICA

I UNIDAD
Semestre 2015 – 1

Blgo. Marco Antonio Nuñez Fonseca
Profesor Responsable del curso.

PROFESORA DE MESA: Lucy Callo Balcazar.

ALUMNA: Katia Galindo Torres.

GRUPO N°: 7P
LIMA -PERU
REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO
HEPATICO
Katia Galindo Torres. USMP.
Página 1

Página 2 .ADN: Es un ácido nucleico que contiene instrucciones genéticas usadas en el desarrollo y funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus. y es responsable de su transmisión hereditaria. La función principal de la molécula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de información. USMP. REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.2015 PRÁCTICA DE LABORATORIO N°19 “REPARACIÓN SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCIÓN DE DNA EN TEJIDO HEPATICO” DE LABORATORIO FUNDAMENTO.

HISTONAS Son proteínas básicas. sobre la base de unas unidades conocidas como nucleosomas. GRUPO FOSFATO Tiene un papel estructural. la cromatina está formada por ADN y proteínas. de baja masa molecular. Forman la cromatina junto con el ADN. Página 3 . USMP. la principal proteína REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. muy conservadas evolutivamente entre los eucariotas y en algunos procariotas.Portadora de la información genética. las cuales está formado por una base nitrogenada.Pirimidinas). BASES NITROGENADAS (Purinas..Es una macromolécula helicoidal formada por dos cadenas de desoxiriboncleotidos. azúcar y un grupo fosfato. LOS NUCLEÓTIDOS Son moléculas orgánicas formadas por la unión covalente de un monosacárido de cinco carbonos (pentosa). La cromatina resuelve el problema de restricción de crecimiento de ADN y núcleo. una base nitrogenada y un grupo fosfato.

II. RESULTADOS.son las histonas.- LOS PASOS REALIZADOS PARA LA SEPARACIÓN SUBCELULAR DE NÚCLEOS 1.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 4 .25M (10 MILIMETROS ) ROMPE LA MEMBRANA CELULAR 2.- + SUCROSA 0. USMP.

SOBRENADANTE BOTAR ESTO MILIMETROS) SUSPENSIÓN NO BOTAR + SUCROSA 0.CENTRIFUGAR POR 10 MIN. SDS 25% (ROMPE LA MEMBRANA MUCLEAR) Mezclar alcohol isoamínico (ROMPE PROTEINAS CONTAMINADAS) + Cloroformo (SOLUBILIZA LOS LIPIDOS) 4.34M (10 AYUDA A LIBERAR EL NUCLEO 3.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. USMP. Página 5 .NaCl brinda médio hipertônico Solubiliza.

FASE ACUOSA (CONTIENE EL DNA) FASE PROTEICA (CONTIEN PROTEINAS) FASE CLOROMOFORFICA (CONTIENE LOS LIPIDOS) REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.Verter en el 2 tubo centrifuga. USMP. Página 6 . Centrifugar por 10 min.

USMP.REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 7 .

USMP.REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 8 .

REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. Página 9 . USMP.

- DETERMINACIÓN DE BILIRRUBINA TOTAL Bilirrubina total mg/L= (Abs MP – Abs BM – Abs BR) x (Standard) (Abs St – Abs BR) Bilirrubina total mg/L = (0.  El estándar de la bilirrubina es 100 mg/L  La Absorbancia Blanco Reactivo se resta a la operación por que el reactivo también tiene absorbancia y ayuda a regular la operación o para que los resultados sean más específicos.0.013 x 100 0.- REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.043 – 0.III. USMP. CONCLUSIONES. INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS. Al realizar los cálculos comprobamos cuatro principales cifras que son descritas en el cuadro de cálculos.13 0.023 – 0. Página 10 .393 Bilirrubina total mg/L = 0.007) x (100) (0.  Debemos tener en cuenta que las lecturas deben ser hechas en lectura a cero.007) Bilirrubina total mg/L = 0.400 .393 Bilirrubina total mg/L = 3.31 mg/L IV. para que la operación sea más exacta. V. CALCULOS.

USMP.  En este caso se haría un tratamiento de fotolisis. Página 11 . puede haber una obstrucción masiva o problema hemolítico. sobrealimentación: se aumenta la ingesta de la leche para evacuar más seguido y así se produce la eliminación de bilirrubina atravez de las heces. Nuestro diagnóstico nos dio de 3. sería ponerlos en luz pues la bilirrubina disminuye.  Hidratación. habría un problema a nivel del tejido hepático. con lo cual no tiene ninguna patología con respecto a la bilirrubina. Enfermedades Asociadas Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta:    Anemia hemolítica Síndrome de Gilbert Síndrome de Crigler-Najjar REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.  Si el paciente hubiese estado en el rango mayor al de 10 mg/Dl estaríamos hablando de un caso de hiperbilirrubinemias.  Es normal que los niños nacen teniendo nivel de bilirrubina muy elevado pero se normalizan en el transcurso de la semana.31 mg/L y en un adulto se encuentra dentro del rango dado que es hasta o menor de 10 mg/Dl.

USMP.Hiperbilirrubinemia conjugada o directa: Habitualmente la hiperbilirrubinemia de predominio directo es causada por enfermedades hepáticas en las que hay insuficiente capacidad de excretar la bilirrubina. Esta dificultad puede localizarse en el hígado o en la vía biliar (ictericia obstructiva). Página 12 . REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres.

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