En la espectrofotometra se aprovecha la absorcin de radiacin

electromagntica en la zona del ultravioleta y visible del espectro. La

muestra absorbe parte de la radiacin incidente en este espectro y
promueve la transicin del analito hacia un estado excitado,
transmitiendo un haz de menor energa radiante. En esta tcnica se
mide la cantidad de luz absorbida como funcin de la longitud de onda
utilizada. La absorcin de las radiaciones ultravioletas, visibles e
infrarrojas depende de la estructura de las molculas, y es
caracterstica de cada sustancia qumica.
La espectrofotometra ultravioleta-visible utiliza haces de radiacin del
espectro electromagntico, en el rango UV de 180 a 380 nm, y en el
de la luz visible de 380 a 780 nm, por lo que es de gran utilidad para
caracterizar los materiales en la regin ultravioleta y visible del
espectro.

Ley de Beer[editar]
La Ley de Beer afirma que la cantidad de luz absorbida por un cuerpo
depende de la concentracin en la solucin.
Por ejemplo, en un vaso de vidrio tenemos agua con azcar disuelta y
en otro vaso tenemos la misma cantidad de agua pero con mayor
cantidad de azcar en solucin. El detector es una celda fotoelctrica,
y lo que se mide es la concentracin de la solucin de azcar.
Segn la ley de Beer, si hiciramos que un rayo de luz atravesara el
primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado sera mayor
que si repitiramos esto en el segundo, ya que en este ltimo las
ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos
o/y molculas y son absorbidos por estos.1

Ley de Lambert[editar]
La Ley de Lambert dice que la cantidad de luz absorbida por un objeto
depende de la distancia recorrida por la luz.
Por ejemplo, retomando el ejemplo de los vasos, pensemos que
ambos tienen la misma cantidad de agua y la misma concentracin de

azcar; pero el segundo tiene un dimetro mayor que el otro.

Segn la ley de Lambert, si hiciramos que un rayo de luz atravesara
el primer vaso, la cantidad de luz que saldra del otro lado seria mayor
que si repitiramos esto en el segundo, ya que en este ltimo las
ondas electromagnticas chocan contra un mayor nmero de tomos
o/y molculas y son absorbidos por estos, tal como se explic en la ley
de Beer.

Ley de Bouguer-Beer-Lambert[editar]
Una ley muy importante es la de Bouguer-Beer-Lambert (tambin
conocida como ley de Lambert Bouguer y Beer), la cual es solo una
combinacin de las citadas anteriormente.

Transmitancia y absorcin de las radiaciones[editar]

Por las leyes mencionadas anteriormente, al hacer pasar una cantidad

de fotones o de radiaciones hay una prdida que se expresa con la
ecuacin:
It/Io=T-kdc''
donde It es la intensidad de luz que sale de la cubeta y que va a llegar
a la celda fotoelctrica (llamada radiacin o intensidad transmitida);
Io es la intensidad con la que sale al atravesar la celda (radiacin
intensidad incidente), y la relacin entre ambas (T) es la
transmitancia.
En el exponente, el signo negativo se debe a que la energa radiante
decrece a medida que el recorrido aumenta. El superndice k es la
capacidad de la muestra para la captacin del haz del campo
electromagntico, d es la longitud de la cubeta de espectrofotometra
que recorre la radiacin, y c es la concentracin del soluto en la
muestra ya ubicada en la cubeta.
La ecuacin simplificada de la ley de Beer-Lambert
A = .d.c
comprende la mnima ecuacin que relaciona la concentracin (c), la
absorbencia de la muestra (A), el espesor recorrido por la radiacin (d)

y el factor de calibracin (). El factor de calibracin relaciona la

concentracin y la absorbancia de los estndares.
La absorcin (o absorbancia) es igual a A, que es el logaritmo
recproco de la transmitancia:2
A= log 1/T
lo que es igual a:
A= -log T
Las ecuaciones mencionadas de las leyes son vlidas solo y solo si: 2
la radiacin incidente es monocromtica;
las especies actan independientemente unas de otras durante la
absorcin;
la absorcin ocurre en un volumen de seccin trasversal uniforme.
Bibliografia http://es.wikipedia.org/wiki/Espectrofotometr%C3%ADa