Facultad de Qumica.

UNAM

Alejandro Baeza .2006

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Qumica Analtica Instrumental I

Precisin en espectrofotometra.
Documento de apoyo.
Dr. Alejandro Baeza. Semestre 2007-I

1.0

Fuentes de desviacin causal a la ley de Lambert-Beer-Bouger

La linealidad de la ley lmite que relaciona el pT o absorbancia con la

concentracin, pT = A = l[i], puede perderse si las causas que garantizan dicha linealidad
no se cumplen a presin y temperatura constantes:
a)
b)
c)
d)

falta de monocromaticidad
disoluciones concentradas
variaciones en el ndice de refraccin.
Aplicar correctamente concentraciones analticas, C0,
molares efectivas, [i], de la especie absorbente:

y concentraciones

pT = A = i l [i ]
pT = A = i l i Co
Es muy importante trabajar en condiciones de amortiguamiento simple o mltiple
para asegurar que el valor i es constante y efectuar las diluciones necesarias con
dichos amortiguadores y no solo con agua pura, de esta manera tambin se garantiza
que el ndice de refraccin permanezca controlado.

2.0

Fuentes de desviacin casual a la ley de Lambert-Beer-Bouger.

La linealidad de la relacin pT = A = l[i] se pierde por variaciones aleatorias

asociadas a la instrumentacin y la lectura de absorbancia en los fotocolorimetros y
espectrofotmetros usados. A continuacin se mencionan las posibles causas de
desviacin a la ley de Lambert-Beer-Bouger en cada elemento insrumental.
a)

A nivel de fuente de luz:

- lmparas fundidas o gastadas.
- lmparas inadecuadas.
- paso ptico bloqueado.
- variaciones altas de voltaje

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b)

A nivel del sistema dispersivo:

Para demostrar que la falta de monocromaticidad se consideran dos haces

de luz de diferente longitud de onda 1 y 2 y de intensidades incidentes I01 y I02 a una
celda de longitud de paso ptico l y de concentracin molar efectiva de absorbente [i]. A
la fotocelda llegan sendos haces de luz no absorbidos I1 y I2:

I01

I1

I02

I2

La aborbancia aparente o A o pT esta dada por:

I +I
pT = A = log T = log 1 2
I 01 + I 02
Ya que la relacin entre T y [i] es:

Ti =

I
= 10l [ i ]
I0

La funcin A = f([i]) queda entonces:

I 0110 1l [ i ] + I 0210 2 l [ i ]
pT = A = log T = log

I 01 + I 02

La funcin anterior es exponencial. Si se

monocromaticidad, el ancho de banda = 0 y entonces:

cumple

la

condicin

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1 = 2
= 2 1 = 0
I 01= I 02
I1 = I 2

1 = 2
I 10l[ i ] + I 010l [i ]
2I

pT = A = log T = log 0
= log 0 10l [i ]

I0 + I0
2I0

pT = A = log T = log 10l [i ]

A = l[i ]
Por lo tanto se cumple que:
lim A= l[i]
0

En la medida en que el ancho de banda se acerque a cero se cumplir la linealidad

de la Ley de Lamber-Beer-Bouger.
c)

A nivel de las celdas:

-

material ptico inadecuado

celdas mal colocadas
celdas sucias
absorcin por reflexin de la luz incidente:

La presencia de una interfase ptica (separacin de dos medios de ndice de

refraccin diferente), genera que una fraccin de luz incidente se refleje. Para demostrar
la absorcin aparente por reflexin se considera un haz de luz monocromtico que cruza
una celda vaca.
La fraccin de luz reflejada depende de los ndices refraccin de los medios que
forman la interfase ptica y viene dada por el cociente:

I r (n2 n1 ) 2
f = =
I 0 (n2 + n1 ) 2

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Las prdidas de luz incidente por reflexin se dan en paso por cada interfase
ptica:

fI0
fI0

fI0
fI0

I0

I
n1

I0
n2

I0
n1

I0
n2 n1

La intensidad de luz detectada por la fotocelda es menor a I0 :

I = (1 f1 2 ) I 0
I 0 = (1 f 2 1 ) I 0
I 0 = (1 f1 2 ) I 0
I 0 = (1 f 2 1 ) I 0
En este caso las fracciones reflejadas en el paso aire-celda (f2-1) y en el paso
celda-aire (f1-2) tienen en mismo valor.
La absorbancia aparente, A, observada al final esta dada por:

I (1 f ) 4 I 0
T =
=
= (1 f ) 4
I0
I0
log T = pT = A= 4[log(1 f )]
e)

A nivel del fotodetector:

La principal causa de desviacin a la linealidad de la Ley de Lambert-BeerBouger a nivel del fotodetector es la luz externa que se filtra, Is, y se suma al haz de luz
no absorbida.

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Is

I0

La luz externa o parsita se reporta como una fraccin de la luz incidente:

S=

Is
I0

La absorbancia aparente, A, observada al final esta dada por:

I + Is
pT = A = log T = log

I0 + Is
Is
I
+
I
I0

pT = A = log T = log 0
I
I
0
s

+
I 0 I 0
T + S
pT = A = log T = log
1 + S

La figura siguiente muestra la influencia de diferentes porcentajes de luz parsita

sobre una sustancia de absortividad molar igual a = 104 mol-1Lcm-1 y de concentracin
Co = [i] =10-5 mol/L.

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influencia luz parsita

1
0.9
0.8
0.7
pT=A

0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0

10

C/Co
S= 0%

S=10%

S=5%

S=1%

S=0.1%

A medida que la concentracin aumenta la luz no absorbida detectada es menor y

se confunde con la intensidad de la luz parsita.
f)

A nivel del sistema de medida.

Los sistemas de medida tienen asociada una incertidumbre. Una lectura de

transmitancia de una i-sima muestra:

T
Ti

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Cada lectura de Ti tiene asociada una incertidumbre: Ti T, que se refleja en una

incertidumbre sobre la concentracin asociada a dicha lectura de transmitancia:
Ci C El valor de T esta determinado de origen en cada instrumento, sin embargo el
valor de C no es constante dada la relacin exponencial entre T y C:

T = 10-lC
T1 T

T2 T

C
C2 C2
C1 C1
Para cada determinacin de T y C es necesario evaluar el error relativo sobre la
concentracin (C/C). Para ello se resuelve la siguiente derivada:

dT
d
=
10lC
dC dC

De la literatura se sabe que la resolucin general para estas funciones es:

d (a u )
du
= a u ln a
dx
dx
Para:

a =10
u = lC
x=C
La resolucin y rearreglo de la derivada para obtener (C/C) = f(T):
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dT
= 10 lc (ln 10 )( lC ) = 2.3T (l )
dC

dC
0.43
=
dT (T )(l )
0.43dT
dC =
(T )(l )
dC
0.43dT
=
C
(T )(lC )
dC 0.43dT
=
C
T log T

Experimentalmente el error relativo esta dado en funcin de incrementos:

C 0.43T
=
C
T log T
La siguiente figura muestra la variacin porcentual del error relativo sobre la
concentracin en funcin del pT o absorbancia, A, determinada para diferentes valores de
T%.
error relativo por lectura del pT=A

C/C 4.4
3.9
3.4
2.9
2.4
1.9
1.4
0.9
0.4
-0.1
0

0.5
dT 10%

1
dT5%

1.5

pT=A

dT 1%

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Se observa que el mayor error se encuentra para valores de absorbancias

extremas, es decir para soluciones muy diludas o muy concentradas y por supuesto para
valores altos de T%. Se observa que la funcin presenta un intervalo de valores de
pT=A, y por tanto de concentraciones, con un error mnimo por lectura. Se puede
demostrar que la funcin presenta un mnimo:

dC
C
= 0
lim
dT

A 0.4343
Las muestras y estndares deben prepararse en un intervalo de concentraciones
que caiga dentro del intervalo de mnimo error por lectura.

3.0

Grficas de Ringbom.

Para determinar el intervalo de concentraciones adecuado para una curva de

calibracin pT=A=f(C) con el menor error por lectura, se ha reportado el uso de las curvas
de Ringobm (A. Ringbom, Z. Anal.Chem. 115(1939)333), que consisten en la
representacin grfica de la absortancia, 1-T , en funcin del log C.
Grfica de Ringbom

1-T
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0

-6

-5

-4

-3

-2

-1

log C

La zona lineal corresponde al intervalo de concentraciones de mnimo error, C/C,

por lectura y el punto de inflexin corresponde al valor de:
1-T=0.63; T = 0.37; pT = A = 0.43
que corresponde al valor de mnimo error.
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4.0

Ajustes ordinarios y diferenciales.

Ajustes ordinarios.

La determinacin del pT o de la absorbancia A de un analito en solucin requiere

de dos ajustes ordinarios:

1)

Ajuste a T = 0, A = (con bloqueo del paso ptico) para

compensar luz parsita, Is.

2)

Ajuste a T = 1, A = 0, (con el medio de reaccin o blanco) para

compensar absorcin del medio y prdidas por reflexin.

Una vez ajustados ambos lmites de la escala de T y de A, se determinan los

valores de los estndares, Ts, y de la muestra, Tx , de concentracin a medir, cuantificar o
valorar, Cx.
Tx

Ts

A
As

Ax

Ajustes diferenciales.
Cuando la concentracin del analito es muy baja o muy alta su determinacin por
espectrofotometra conlleva un error relativo C/C muy alto. Para evitar operaciones
analticas previas de concentracin o de dilucin, es posible modificar la lectura de Tx con
reajustes de T = 0 y T = 1 efectuados con disoluciones estndar para ajustar la lectura de
transmitancia de la muestra en un valor dentro del intervalo de mnimo error.

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a) Ajuste diferencial para valores bajos de pT = A: Mtodo de bajas absorbancias.

Si Cx, pT=Ax, Tx, se ajusta T=1 de manera ordinaria y T = 0 se reajusta con un
estndar de Cs1 un poco mayor que Cx. Una vez hecho este reajuste se vuelve a medir
Tx en la escala expandida:

Ts1 Tx
0

Ts

Tx

De esta manera se expande la escala en f . El factor de expansin es:

f =

1
1 Ts1

El valor de Tx queda en la nueva escala:

Tx=

b)

Tx Ts1
1 Ts1

Ajuste diferencial para valores altos de pT = A: Mtodo de altas

absorbancias.

Si Cx, pT=Ax, Tx, se ajusta T = 0 de manera ordinario y se reajusta

T = 1 con un estndar de Cs2 un poco mayor que Cx:
Tx Ts2
0

Tx
0

Ts
0

De esta manera se expande la escala en f . El factor de expansin es:

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f =

1
Ts 2

El valor de Tx queda en la nueva escala:

Tx=

c)

Tx
Ts 2

Mtodo de mxima precisin.

En este mtodo se realizan ambos reajustes T = 0 con Ts1 y T = 1 con
Ts2:
Ts1 Tx Ts2
0

Ts1

Tx

Ts2

De esta manera se expande la escala en f . El factor de expansin es:

f =

1
Ts 2 Ts1

El valor de Tx queda en la nueva escala:

Tx=

d)

Tx Ts1
T s 2 Ts1

Error relativo (C/C) para Tx (la lectura de Tx en la escala expandida).

En general el error relativo depende del valor del factor de expansin y ste
a su vez de los valores de Ts1 y Ts2.

C 0 . 43 T 1

=

C Tx log Tx f

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La formula anterior incluye al ajuste ordinario:

Ts1 = 0
Ts 2 = 1
f =

Ts 2 Tx 1 Tx
=
= Tx
T s1 Ts 2 0 1
Tx= Tx

C 0.43T 1 0.43T
=

C TxlogTx 1 Tx log Tx

Una demostracin mas completa requiere resolver la siguiente derivada:

dC dT dC
=

dT dT dT

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