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ANGIOGNESIS:
VEGF/VEGFRs como
Blancos Teraputicos en el
Tratamiento Contra el Cncer
Jos Daro Martnez-Ezquerro 1,2 y Luis A. Herrera 1*
1 Unidad de Investigacin Biomdica en Cncer, Instituto Nacional de Cancerologa-Instituto de Investigaciones Biomdicas.
2 Taller de Biologa Molecular del Cncer, Facultad de Ciencias, UNAM.
Resumen
Correspondencia a:
Luis A. Herrera Montalvo
Instituto Nacional de Cancerologa, Subdireccin de Investigacin Bsica. Av. San Fernando
22, Col. Seccin XVI. CP 14080.
Del. Tlalpan. Mxico, D.F.
e-Mail: herreram@biomedicas.unam.mx
Abstract
Angiogenesis is a process that involves the
growth of new blood vessels from pre-existing vasculature. Angiogenesis is a normal process in growth and development, as well as in
wound healing. However, this is also a fundamental step in the transition of tumors from a
dormant state to a malignant state. Angiogenesis begins with degradation of the basement
membrane, followed by migration of endothelial cells out of the vessel. These cells then
form into a tube which `sprouts from the old
capillary and is extended further as the cells
behind the leading tip begin to proliferate. The
tips of such tubes can branch and eventually
join up with other sprouts to form a closed
loop through which blood can flow. Vascular
endothelial growth factor, or VEGF, is the key
signal used to promote growth of blood vessels. It binds to specialized receptors on the
surfaces of endothelial cells and directs them
to build new vessels. In this paper we have reviewed the important role angiogenesis plays
in malignant tumors development via VEGF
and VEGF receptor, with special interest in
metastasis and therapeutic strategies targeting
these signal transduction pathways.
Key words: Angiogenesis, VEGF, VEGFR
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Introduccin
Angiognesis
Todas las clulas eucariontes requieren del suministro constante de oxgeno y nutrientes. Invertebrados como Caenorhabditis elegans (gusano) y
Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) afrontan esta situacin tomando ventaja de la capacidad de difusin del oxgeno, logrando llegar a
todas las clulas del cuerpo sin la necesidad de
un sistema de entrega especfico (1).
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Figura 1
Angiognesis: crecimiento de nuevos vasos a partir
de los ya existentes Aunque actualmente el concepto
abarca el remodelaje de la red inicial de vasos sanguneos formada durante la embriognesis.
Figura 2
proveer de manera adecuada el oxgeno y los nutrientes requeridos por los rganos en crecimiento
(6), adems de proporcionar seales promotoras
morfolgicas (5) y siendo fundamental para la formacin de hueso endocondral y el crecimiento del
esqueleto (7). A lo largo del desarrollo as como
en la etapa adulta, la angiognesis fisiolgica ocurre
nicamente en el ovario en mujeres menstruantes,
debido a que el crecimiento folicular y el desarrollo
del cuerpo lteo dependen de la proliferacin de
nuevos vasos capilares, y en la placenta durante el
embarazo; tambin est presente en algunos de
los vasos sanguneos que permanecieron quiescentes y que pueden reactivarse durante la reparacin y cicatrizacin de heridas (1, 3). Este
mecanismo fisiolgico implica una estructura y
funcionamiento jerrquico bien ordenado de
la vasculatura corporal. La segunda aparece
cuando se alcanza y sobrepasa el umbral
entre los estimuladores e inhibidores angiognicos. Se pueden distinguir dos tipos
de angiognesis patolgica: angiognesis activada y
angiognesis inhibida, dependiendo de los niveles
dominantes de molculas pro- o anti-angiognicas,
respectivamente (6; Cuadro I). Existen diversas condiciones asociadas a la angiognesis activada como las
enfermedades malignas, adems de estar implicada
en obesidad, asma, diabetes, cirrosis, esclerosis mltiple, endometriosis, SIDA, infecciones bacterianas y
enfermedades auto-inmunes (1, 7). Por el contrario,
cuando el interruptor de la angiognesis se encuenCuadro I
TIPOS DE ANGIOGNESIS PATOLGICA
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Figura 3
TIPOS DE VEGF Y RECEPTORES
estudiada, adems de ser el transductor de seales ms fuerte entre los distintos tipos del VEGF;
fue originalmente descubierto como un potente
factor de permeabilizacin vascular (3), esta isoforma es principalmente secretada; sin embargo,
una fraccin significativa permanece unida a la
superficie celular y a la matriz extracelular. Adems de unirse al VEGFR-2, esta protena puede
unirse a la neuropilina 1 (NRP-1), incrementando su afinidad al receptor VEGFR-2 hasta 10 veces, aproximadamente (2). El VEGF-A121 es una
protena soluble que no se une a la heparina y
que difunde libremente en los tejidos, sirviendo
como una seal gua de larga distancia para la
migracin direccional. El VEGF-A189 es una protena unida a la matriz extracelular que se une a
la heparina con mayor fuerza que el VEGF-A165
y funciona en la atraccin celular en un rango
de accin corto. Finalmente, la isoforma 206 se
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VEGF-E. Fue descubierto en el genoma del parapoxivirus Orf (cepa NZ-7), que es un virus de
cadena lineal doble de DNA que causa dermatitis
pustular contagiosa en ovejas, cabras y ocasionalmente en seres humanos, histolgicamente caracterizada por lesiones vasculares y edematosas (4,
17). Este miembro de la familia del VEGF tambin
referido como VEGForf que carece del dominio
de unin a heparina encontrado en el VEGF-A,
se une y activa especficamente al VEGFR-2 (2),
resultando en un efecto mitognico y en actividad
de permeabilidad vascular similar al producido por
el VEGF-A165 (4), aunque hasta el momento se
desconocen los residuos de aminocidos que median esta unin (18). Adems, induce la expresin
del factor tisular (TF) y la angiognesis (14). Interesantemente, el VEGF-E contiene un dominio
carboxi-terminal rico en treonina y prolina cuya
funcin se desconoce y el cual no se encuentra en
ninguna otra forma del VEGF de mamferos (17).
Por otro lado, la cepa NZ2 expresa otra protena tipo VEGF llamada ORFV2-VEGF o VEGForf2,
con una potencia mitognica entre 4-5 veces menor que la del VEGF-A165 (4).
Receptores del VEGF
El proceso de sealizacin que resulta en la angiognesis se encuentra mediado por uniones de alta
afinidad de los VEGFs con receptores especficos
de actividad tirosina cinasa (RTKs) (10; Figura 3),
localizados tanto en la superficie de las ECs vasculares y en clulas derivadas de la mdula sea (7),
como en forma soluble en circulacin (2, 3, 10).
Todas las isoformas del VEGF son capaces de unirse a alguno de estos tres receptores: VEGFR-1
(tambin conocido como Flt-1), VEGFR-2 (KDR
o Flk-1) (13) y/o VEGFR-3 (Flt-4) (7, 10); estos
receptores contienen siete dominios homlogos a
inmunoglobulina (Ig) en su parte extracelular, una
regin transmembranal, un dominio yuxtamembranal y un dominio intracelular de sealizacin
tirosina cinasa interrumpido por un inserto de cinasa de 69 aminocidos y la regin carboxi-terminal (4, 7, 10). El segundo y tercer dominio de Ig
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Por s misma, la Nrp-1 puede mediar la sealizacin que resulta en migracin celular, aunque no
en proliferacin. Al igual que el VEGFR-2, la Nrp-1
se encuentra particularmente expresada en algunas
clulas tumorales, adems de ECs, probablemente
estimulando el crecimiento y la migracin de la
clula tumoral (3, 4). Interesantemente, la unin
tanto de la NRP1 como de la NRP2 con las semaforinas, activa la seal de repulsin del axn (7).
Angiognesis en Cncer
y Metstasis
Teniendo en cuenta que el oxgeno debe ser distribuido por la sangre a todas las clulas del cuerpo
de un organismo, es necesario que las clulas estn localizadas (por lo menos en los vertebrados)
entre 100 a 200 m de un vaso sanguneo para
poder sobrevivir (22, 23), por lo que si un grupo
de clulas tumorales necesita evadir la inanicin,
requieren promover el proceso normal de la angiognesis para formar su propia fuente sangunea
mediante el desarrollo de nuevos vasos sanguneos
y as, superar la falta de distribucin de oxgeno y
nutrientes y evadir una muerte certera (12, 24).
Esta activacin de la angiognesis conduce a la neovascularizacin del tumor, dando como resultado
su crecimiento rpido (22). En contraste, los tumores latentes no tienen la capacidad de expandirse ms
all de un tamao microscpico menor a 0.5 mm
(25). Se ha propuesto el bloqueo de la angiognesis como el mecanismo para explicar este comportamiento, ya que se ha observado que pueden
permanecer latentes por meses, hasta que ocurre
la activacin de la angiognesis (25) cuando los
reguladores pro-angiognicos sobrepasan el balance contra los reguladores anti-angiognicos. De
hecho, la angiognesis no participa en la carcinognesis pero si promueve la progresin tumoral (1) y
es un elemento esencial para la formacin de metstasis al proveer un sitio de entrada a la circulacin de los vasos sanguneos, as como de oxgeno
y nutrientes por la neo-angiognesis (24). Adems,
el tumor puede secretar factores que promueven
reacciones linfticas de manera similar a la produccin de factores angiognicos, influyendo en
Figura 4
TERAPIA ANTI-ANGIOGNICA
91
arrestar la proliferacin de las ECs, prevenir el crecimiento de los vasos e inducir la regresin de vasos
pre-existentes. Estas estrategias pueden dividirse de
la siguiente manera:
Anticuerpos para el VEGF o inhibidores del
VEGF. En virtud de que el VEGF es uno de los factores clave en la promocin de la angiognesis, se
han llevado a cabo distintos esfuerzos para inhibirlo, mediante anticuerpos. En el 2004 se aprobaron
los siguientes compuestos inhibidores del VEGF: el
avastin (bevacizumab), que es un anticuerpo monoclonal recombinante humanizado contra el VEGFA165 (rhu Mab VEGF), as como el pegaptinib, un
aptmero que bloquea al mismo factor, para el
tratamiento de cncer colorectal metastsico en
combinacin con regimenes de quimioterapia basada en 5-fluorouracilo y, el ranibizumab, que es un
fragmento molecular de un anticuerpo monoclonal
(Fab) que neutraliza a todas las isoformas del VEGF,
para el tratamiento de la forma hmeda (neo-vascular) de la degeneracin macular relacionada con
la edad (AMD) (26). Con respecto a los resultados
obtenidos con avastin, se ha visto que no provee
beneficios al ser suministrado como monoterapia,
mientras que cuando se combina con la terapia
convencional sensibiliza y aumenta la eficacia de
esta al inducir citotoxicidad en algunas clulas malignas, activar respuestas inmunes anti-tumorales y
suprimir la actividad pro-angiognica de clulas hematopoyticas (1). Sin embargo, se ha encontrado
tambin que las estrategias que emplean anticuerpos anti-VEGF no siempre previenen el crecimiento
de tumores slidos (13), probablemente debido a
la dificultad para bloquear todos los VEGF circulantes (4). Por otro lado, los VEGF-C y D median la
diseminacin metastsica cuando son liberados por
las clulas tumorales (27), por lo que resulta importante analizar si la inhibicin de estos factores tiene
beneficios teraputicos en pacientes con cncer.
Anticuerpos contra VEGFRs. La sealizacin del
VEGFR-1 ha sido ligada a la induccin de MMP9 y
a la facilitacin de la metstasis por lo que es considerado como un blanco de inhibicin en la terapetica anti-tumoral (7). De hecho, se ha observado
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Concusin
Agradecimientos:
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