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Rev. Invest. Mar.

25(1):57-64, 2004

AISLAMIENTO Y CULTIVO DE DOS ESPECIES DE DIATOMEAS


BENTNICAS.
Yahima Almaguer, Elvira Alfonso y Sylvia Leal
Centro de Investigaciones Marinas, Universidad de La Habana, Calle 16 No. 114, Playa, CP 11300, Ciudad Habana, Cuba.
(*) Autor correspondiente:
RESUMEN
Aislamiento de dos especies de diatomeas bentnicas pertenecientes al gnero Amphora con potencialidad para
ser cultivadas y usadas posteriormente en la alimentacin de las postlarvas tempranas de los camarones marinos.
Ambas especies, y una tercera trada de Brasil, fueron cultivadas en condiciones de laboratorio utilizando los
medios Guillard y A-M para probar su factibilidad para el cultivo. Se calcularon las concentraciones de clorofilas a
y c empleando la tcnica de extraccin con acetona y lectura de la absorbancia a 630 y a 664 nm para cada
especie en cada medio de cultivo durante el perodo de crecimiento. La concentracin de clorofila a en los dos
medios aument con la edad del cultivo, mientras que en el caso de la clorofila c ocurri lo contrario.
Palabras clave: diatomeas bentnicas; microalgas; aislamiento; cultivo; Amphora.
ABSTRACT
In this study two benthic diatoms species to Amphoras genera, with potentials to be cultured and later used in the
nutrition of early postlarvae stage of marine shrimps, were isolated. Both species and a third, brought from Brazil,
were cultured under laboratory conditions using Guillard f/2 and A-M medium to prove their feasibility in
culture conditions. Concentrations of chlorophyle a and c for each culture medium during growing phase were
calculated. Results showed that concentrations of chlorophyle a in the two tested culture mediums raised with
culture age, while in the case of chlorophyle c the opposite results were observed.
Key words: benthic diatoms; microalgae; isolation; culture; Amphora.

Desde la dcada de los noventa del pasado siglo se


ha venido realizando las primeras investigaciones y
cultivos de diatomeas bentnicas en algunos
pases de Latinoamrica con el objetivo de ser
usadas en el maricultivo. Tambin se conoce que
en laboratorios de produccin de larvas de
camarones de Brasil se usan especies de este
grupo como fuente de alimentacin para
organismos de cultivo (Alfonso, comunicacin
personal).

produccin de especies fitoplanctnicas, pero


hasta el momento no se ha estudiado la posibilidad
de incluir microalgas bentnicas autctonas como
suplemento alimentario de las primeras postlarvas.
Los objetivos de este trabajo fueron aislar
diatomeas bentnicas de aguas cubanas para su
posible utilizacin en la alimentacin de las
primeras postlarvas de camarn en cultivo, probar
la factibilidad del cultivo de las especies aisladas
siguiendo el aumento progresivo de volumen hasta
los
niveles
intermedios
y
ensayar
el
comportamiento de las diatomeas aisladas en los
medios de cultivo Guillard f/2 y A-M,
relacionndolo con el de una diatomea bentnica
trada de Brasil.

En la actualidad se consideran un grupo poco


estudiado y muy rico en diversas formas, gneros y
especies, con un alto potencial para ser usado
como fuente de alimento vivo para los organismos
que se cultivan con inters comercial y que
presenten hbitos bentnicos al menos en alguna
fase de su ciclo de vida (mayormente representados
por Navicula y Nitzschia, en proporciones
similares, seguidas de Amphora con poco ms de la
mitad de los taxa (Siqueiros, 1994).

MATERIALES Y MTODOS
Aislamiento
Las muestras de agua utilizadas en la bsqueda de
microalgas bentnicas fueron tomadas de los
estanques de engorde de camarn L. schmitti en la
regin de Santa Cruz del Sur, Provincia Camaguey.

Con el objetivo de optimizar el cultivo del camarn


en nuestro pas se han venido desarrollando
experimentos para mejorar la seleccin y
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Almaguer et al.: Aislamiento y cultivo de dos especies de diatomeas bentnicas.

El aislamiento de las cepas se llev a cabo por la


combinacin de dos mtodos: diluciones sucesivas
y aislamiento en placas. El mtodo de las
diluciones fue el primero en aplicarse (Alfonso y
Leal, 2000). Una vez que apareci coloracin en los
tubos se seleccionaron aquellos cuya muestra
estaba ms diluida, convirtindose en puntos de
partida para la aplicacin del aislamiento en
placas.

La comparacin fue realizada en el ltimo paso del


aumento progresivo de volumen donde se trabaj
con tres rplicas en cada caso. El medio de cultivo
utilizado para los pasos anteriores (75 y 800 mL)
fue el Guillard f/2.
El paso de un volumen a otro se hizo en la fase de
crecimiento exponencial de estos cultivos para
asegurar que las microalgas estuvieran en un
estado fisiolgico ptimo.

El medio de cultivo utilizado para el desarrollo de


las microalgas bentnicas fue el medio Guillard
f/2 (Guillard, 1975): Para las diluciones sucesivas
se utiliz el medio en forma lquida y la siembra en
placa se logr con el mismo medio solidificado con
agar-agar a razn de 20 g/L.

En la Tabla 1 se especifican las cantidades


volumtricas utilizadas en cada paso del
experimento.
Tabla 1. Volmenes utilizados en el aumento
progresivo de los cultivos.

Los cultivos se desarrollaron a temperatura


controlada e iluminacin constante dentro del local
del cepario.

VOLUMEN
FRASCO
100 mL
2 litros
5 litros

Una
vez
aisladas,
las
diatomeas
fueron
identificadas por especialistas en Taxonoma. Para
la descripcin se observaron detalladamente al
microscopio biolgico, se les hicieron
microfotografas bajo el microscopio electrnico y se
efectuaron mediciones de 30 clulas con
micrmetro ocular determinndose la longitud
promedio para cada especie en la fase exponencial
del cultivo.

VOLUMEN
INOCULO
25 mL
75 mL
400 mL

VOLUMEN DE
MEDIO CULTIVO
50 mL
725 mL
4 litros

VOLUMEN
TOTAL
75 mL
800 mL
4,4 litros

La salinidad del agua para el caso de los


volmenes de 75 mL y de 800 mL fue ajustada a
35 y para los de 4,4 litros (expuestos a
temperatura ambiente) fue ajustada a 34, para
amortiguar el aumento de la misma por
evaporacin durante el transcurso del experimento

Aumento progresivo de volumen.

Los cultivos se mantuvieron con iluminacin


constante.

Para la determinacin de la factibilidad del cultivo


de las dos especies aisladas se realizaron tres
experimentos, dos de ellos siguiendo el desarrollo
de las diatomeas aisladas y un tercero con una
diatomea perteneciente al gnero Amphora trada
del Laboratorio de Produccin de Postlarvas de
Camarn AQUATEC Ltd., Rio Grande do Norte de
Brasil a manera de comparacin.

La temperatura estuvo controlada dentro del


cepario a 210C y se mantuvo un registro diario de
la misma para los volmenes de 4,4 litros. El pH
se registr en das alternos para los cultivos de 4,4
litros.
Crecimiento de los cultivos.

Para el desarrollo de los cultivos se utiliz el


mtodo de aumento progresivo de volumen;
partiendo de un inculo de 75 mL y aumentando
progresivamente hasta 4,4 litros con aireacin e
iluminacin constante, a temperatura ambiente.

En estas especies de diatomeas, al ser bentnicas,


resulta muy difcil conseguir una muestra
homognea para cuantificar su crecimiento a
travs de la numeracin directa en cmaras de
conteos. Esto ha hecho que para conocer la
evolucin del cultivo se haya implementado la
tcnica de extraccin de pigmentos con acetona
(Arredondo-Vega et al., 1997) la determinacin de
la absorbancia por medio de espectrofotometra lo
que
permite
la
determinacin
de
las
concentraciones de clorofilas a y c presentes en las
diatomeas.

Comparacin de los medios de cultivo.


Fueron
aplicados
dos
tratamientos
que
consistieron en poner a crecer a las diatomeas en
dos medios de cultivos diferentes: Medio Guillard
f/2 (Guillard, 1975) y Medio A-M (Alfonso y
Martnez, 1988).
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La cuantificacin del crecimiento se tuvo en cuenta


para la comparacin entre los dos medios de
cultivo en los frascos de 4,4 litros de volumen,
realizndose dos muestreos por cada rplica (seis
muestreos por tratamiento) en das alternos
durante una semana.

Amphora
cf.
marina
tiene
una
valva
semilanceolada,
margen
ventral
ligeramente
arqueado y los pices ligeramente redondos con
13.83 m de longitud, Amphora cf. terroris tiene
valva semilanceolada, margen ventral ligeramente
arqueado y los pices ligeramente capitados con
18.46 m de largo.

A los valores de absorbancia se le aplic las


frmulas propuesta por Arredondo-Vega et al.
(1997) :
Clorofila a = 11,43 (A 664 nm) 0.4 (A 630 nm)
Clorofila c = 27.09 (A 630 nm) 3.73 (A 664 nm)
para determinar las concentraciones ( g/mL) de
clorofilas a y c para cada muestra por da. A los
valores medios de clorofilas se les aplic una
Prueba t con nivel de significacin de 0.05 para
comparar las concentraciones de estos pigmentos
por da de muestreo en los dos tratamientos
aplicados y as conocer el comportamiento de cada
especie en cada tratamiento.

Fig 2. Amphora cf. terroris Ehrenberg 1853

La cuantificacin del crecimiento se tuvo en cuenta


para la comparacin entre los medios de cultivo en
los frascos de 4,4 litros de volumen, tomndose
dos muestras por cada rplica (seis muestras por
tratamiento) en das alternos durante una semana.

En relacin con la identificacin de las especies


aisladas, no fue posible confirmar la clasificacin
hasta especie, siendo nombradas Amphora cf.
marina y A. cf. terroris. Al respecto, Siqueiros
(1994) plantea que an cuando los taxa tienen una
amplia distribucin geogrfica y temporal, a
menudo resulta imposible una determinacin
taxonmica completa. Esto se debe a que cada
estudio debe revisar una flora particular, con
variaciones morfolgicas y quizs subespecies,
segn las condiciones propias de la localidad. En
la mayora de los estudios son referidas solamente
como grupo o en el mejor de los casos, solamente
se determinan a nivel genrico.

RESULTADOS Y DISCUSIN
Aislamiento.
Como resultado del proceso de aislamiento fueron
aisladas dos especies de diatomeas: Amphora cf.
marina (Wm. Smith) Van Heurck 1880-1885 y
Amphora cf. terroris Ehrenberg 1853 (Figs 1 y 2).

Aumento progresivo de volumen.


Tanto las dos diatomeas aisladas como Amphora
sp. importada de Brasil, crecieron en condiciones
de cultivo en volmenes de hasta 4,4 litros,
siguiendo el aumento progresivo desde tubo de
ensayo. Las diatomeas aisladas manifestaron un
comportamiento en cultivo similar a los que se
obtienen en Brasil para Amphora sp. a travs de
los pasos del aumento progresivo de volumen
hasta
los
volmenes
probados
(Alfonso,
comunicacin personal).
Fig 1. Amphora cf. marina (Wm. Smith) Van
Heurck 1880-1885

Amphora sp.
Los registros de temperatura para ambos
tratamientos oscil entre 24 y 26 0C. Los valores de
59

Almaguer et al.: Aislamiento y cultivo de dos especies de diatomeas bentnicas.

pH a lo largo del experimento estuvieron entre 8.38


y 8.99 para el tratamiento 1 y entre 8.17 y 8.75
para el tratamiento 2.

otro, y que de manera general no se encontraron


diferencias
entre
los
medios
para
las
concentraciones de este pigmento excepto para el
ltimo da.

En la Fig. 3 se muestran las curvas de


concentracin de las clorofilas a y c en el tiempo.
Como se puede observar las concentraciones de la
clorofila a en ambos medios tienen un
comportamiento
muy
similar
durante
el
crecimiento del cultivo, las mismas se van
incrementando en el tiempo.

Amphora cf. marina


Los registros de temperatura para ambos
tratamientos oscilaron entre 28 y 30 0C. Los
valores de pH para el tratamiento 1 estuvieron
entre 8.55 y 9.46, para el tratamiento 2 fueron
8.22 y 8.76.
En la Fig 4 se muestran las curvas de
concentracin de las clorofilas a y c en el tiempo.
Como se puede observar las concentraciones de la
clorofila a en ambos medios tienen una tendencia
a incrementarse en el tiempo.

Conc (g/ml)

2.5
2
1.5
1

Clorofila a Guillard
Clorofila a A-M

0.5

Clorofila c Guillard
Clorofila c A-M

0
1

2.5

Conc (g/ml)

Tiempo (das alternos)


Fig. 3. Concentraciones de las clorofilas a y c en
los medios Guillard f/2 y A-M para Amphora sp.

2
1.5
1
Clorofila a Guillard

0.5

Clorofila a A-M

La Tabla 2 muestra el resultado de la Prueba t


para las medias de los dos medios de cultivo
(Guillard y A-M) en cada da de muestreo.

1ro
3ro
5to
7mo

CLOROFILAS

a
c
a
c
a
c
a
c

0,25 n.s.
- 1,59 n.s.
3,35 **
1,61 n.s.
0,10 n.s.
0,65 n.s.
2,61 *
2,89 *

Clorofila c A-M

Tiempo (das alternos)


Fig. 4. Concentraciones de clorofilas a y c en los
medios Guillard f/2 y A-M para Amphora cf.
marina.

Tabla 2. Resultado de la Prueba t para las medias


de los dos medios en cada da de muestreo.
DAS

Clorofila c Guillard

P (UNA
COLA)
0,41
0,09
0,01
0,08
0,46
0,27
0,02
0,02

Haciendo el mismo anlisis para la clorofila c


vemos que de manera general tiene un
comportamiento totalmente diferente a la clorofila
a, se aprecia que la tendencia de las curvas a lo
largo del experimento es a un decremento en las
concentraciones
de
este
pigmento
correspondindose los valores ms bajos con los
ltimos das de muestreo.
La Tabla 3 muestra el resultado de la prueba t
para las medias de los dos tratamientos (Guillard y
A-M) en cada muestreo.

A manera de resumen se puede decir que para esta


especie de Amphora se van incrementando los
valores de clorofila a en la medida que evoluciona
el cultivo. Se encontraron diferencias entre los
medios para este pigmento resultando los mayores
valores de concentracin en el medio Guillard.
Para la clorofila c podemos resumir que se
mantiene en valores bajos durante todo el
experimento tanto para un medio como para el

En general, se puede decir que para esta especie


de diatomea se produce en el inicio del cultivo una
mayor cantidad de clorofila a en el medio de cultivo
Guillard f/2que en el medio A-M, ahora bien,
durante la evolucin del cultivo las mayores
cantidades de clorofila a se obtienen en el medio A-

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M, aunque en ambos medios el crecimiento se


evidenci de manera satisfactoria. Para la clorofila
c, con concentraciones menores que la clorofila a y
tendencia a disminuir en el tiempo, los mayores
valores se obtuvieron en el Medio Guillard f/2en
los primeros das del experimento.

Analizando el comportamiento de la clorofila c,


pigmento que se mantiene estable para ambos
medios de cultivo, se encontr que los valores se
mantienen en concentraciones muy bajas si se
compara con los de la clorofila a para los mismos
perodos de tiempo.

Tabla 3. Resultado de la Prueba t para las medias


de los dos tratamientos en cada da de muestreo.

Para esta especie no se observan diferencias


significativas entre las dos curvas de la clorofila c
para los medios de cultivo comparados durante los
siete das de duracin del experimento. Aunque en
el grfico se observa un ligero incremento de la
clorofila c en los cultivos en el Medio Guillard para
el sptimo da de muestreo, la prueba estadstica
no arroj tampoco diferencia entre las medias ese
da.

DAS

CLOROFILAS

1ro

a
c
a
c
a
c
a
c

4,08 **
3,57 **
-1,41 n.s.
2,28 *.
-2,40 *
-0,97 n.s.
-2,81 *
-3,11 *

3ro
5to
7mo

P (UNA
COLA)
0,005
0,008
0,11
0,04
0,03
0,19
0,02
0,01

La Tabla 4 muestra los resultados de la Prueba t


para las medias de los dos tratamientos para cada
da de muestreo.

Amphora cf. terroris

Tabla 4. Resultados de la Prueba t para las medias


de los dos tratamientos para cada da de uestreo.

Los registros de temperatura para ambos


tratamientos oscilaron entre 28 y 30 0C. Los
valores de pH para el tratamiento 1 estuvieron
entre 8.33 y 9.29, para el tratamiento 2 fueron
8.15 y 8.70.

DAS
1ro
3ro

La Fig. 5 nos muestra las curvas de concentracin


de las clorofilas a y c en el tiempo. Las curvas de la
clorofila a durante los siete das de duracin del
experimento tienen un comportamiento similar ya
que muestran una tendencia al incremento, claro
est que una curva respecto a la otra tiene sus
particularidades segn el medio de cultivo donde
se desarrollaron las microalgas.

5to
7mo

Conc (g/ml)

a
c
a
c
a
c
a
c

1,00 n.s.
0,51 n.s,
8,10 **
-0,60 n.s
-2,60 *
-1,06 n.s.
-2,59 *
2,00 n.s.

P (UNA
COLA)
0,18
0,31
2,3E-04
0,29
0,02
0,17
0,02
0,05

Resumiendo, durante los primeros das de


desarrollo del cultivo los mayores valores de

clorofila a se encuentran en el medio Guillard


y a medida que va evolucionando el cultivo los
valores mayores de concentracin de clorofila
a se observaron en el Medio A-M. La clorofila
c, con poca variacin a travs del
experimento, mostr que las concentraciones
en el medio Guillard y en el A-M fueron muy
similares.

2.5
2
1.5
1

CLOROFILAS

Clorofila a Guillard

Clorofila a A-M

0.5

Una vez analizados los resultados de los tres


experimentos, se considera en este trabajo
que los niveles de clorofila a resultaron
indicadores de crecimiento del cultivo, aunque
no exista una relacin directa de la
concentracin
de
clorofila
a
con
la
cuantificacin en trminos numricos de las
clulas, es decir, no se puede establecer una
relacin:
concentracin
de
clorofila/

Clorofila c Guillard

Clorofila c A-M

Tiempo (das alternos)


Fig. 5. Concentraciones de las clorofilas a y c en
los medios de cultivo Guillard f/2 y A-M para
Amphora cf. terroris.
61

Almaguer et al.: Aislamiento y cultivo de dos especies de diatomeas bentnicas.

concentracin celular. Se afirma que la


correspondencia
entre
la
concentracin
celular y las determinaciones de la cantidad
de pigmentos y otros componentes, no es
constante ya que estos dependen de diferentes
factores como el estado fisiolgico de la clula
y la fase de crecimiento del cultivo, as como
de las condiciones fsico-quimicas a que estn
sometidas las clulas (Alfonso, 1999).

respectivamente. Tambin se presentaron


diferencias en los niveles de concentracin de
ambas clorofilas entre los dos medios de
cultivo utilizados.
En el presente trabajo con el gnero Amphora
se observ que al evolucionar el cultivo se
fueron incrementando las concentraciones de
clorofila a y disminuyendo las de clorofila c.
Sin embargo, en un estudio realizado a una
especie de diatomea planctnica, en este caso,
Skeletonema costatum, se encontr que al
avanzar la edad del cultivo fue decreciendo la
concentracin de clorofila a, a la vez que
aumentaba la de clorofila c (Castellv, 1963).
Esta diferencia pudiera estar relacionada con
el taxa o con las condiciones del cultivo, como
pudiera ser la composicin del medio en
trminos de tipos y cantidades de sus
componentes, o quizs con la combinacin de
estos y de otros factores.

Tambin Brown et al. (1997) ha planteado que


la composicin bioqumica de las microalgas
puede estar sustancialmente alterada por
otras condiciones de los cultivos, tales como,
la longitud de onda de la fuente de luz que se
utilice y el fotoperodo al que se sometan as
como por la fase de crecimiento del cultivo.
Tratndose de un proceso productivo continuo
y a gran escala, en nuestro pas debido a los
problemas econmicos y la escases de
recursos a la que se tiene que enfrentar no es
prctico
realizar
determinaciones
de
pigmentos u otras tcnicas de colorimetra
como fueron ejecutadas en este trabajo de
investigacin
para
poder
comparar
el
desarrollo de las especies en cultivo. Tampoco
es prctico utilizar otras tcnicas ms
sofisticadas para la dispersin de las clulas
para despus contarlas, como la expuesta por
Voltolina (1991) de aplicacin de ultrasonido
de baja frecuencia que no daa las clulas,
pero se hace incosteable a nivel comercial.
Ante este reto de la cuantificacin de las
microalgas bentnicas que forman grumos,
consideramos que en la produccin de
cultivos masivos para la alimentacin de
larvas a nivel comercial el desarrollo de los
mismos debe estimarse por la intensidad de la
coloracin que van adquiriendo en el tiempo,
realizando pruebas previas y con el
correspondiente entrenamiento del cultivador,
as como seguir probando e implementando
nuevos mtodos que se ajusten a las
necesidades reales del centro de produccin
dnde sean utilizadas estas especies como
alimento vivo para organismos de cultivo.

Las diferencias en los niveles de clorofila a y c


que se establece como patrn en las tres
especies cultivadas, as como las diferencias
de cada pigmento entre los medios pueden
deberse a muchos factores como son:
iluminacin; composicin del medio del cultivo
donde influyen tanto los componentes
iniciales
del
mismo,
como
productos
secundarios que se forman del propio
metabolismo de las clulas; la edad del
cultivo; las caractersticas de la especie en
cuestin, as como la edad de la cepa en
cultivo.
Abalde et al. (1995) plantean que los diversos
nutrientes tienen un marcado efecto sobre la
formacin de clorofilas en microalgas y que
deficiencias de hierro, nitrgeno y magnesio
inhiben la sntesis y acumulacin de clorofila.
La abundancia de carbono orgnico en el
medio y la alta intensidad luminosa inhiben
tambin la formacin de clorofilas en algunas
microalgas.
Aplicando
el
planteamiento
anterior de Abalde et al. a este trabajo se debe
considerar
que
algunas
diferencias
encontradas en las concentraciones de
clorofilas en los dos medios de cultivo
utilizados pudieran estar relacionadas con el
hecho de que el medio Guillard contiene en su

Las tres especies estudiadas tuvieron un


comportamiento diferente en el tiempo en las
concentraciones de las clorofilas a y c,
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Rev. Invest. Mar. 25(1):57-64, 2004

formulacin hierro y magnesio, mientras que


el A-M slo tiene hierro como micronutriente.
Guillard f/2 es mundialmente utilizado por
ser un medio completo e idneo para el
mantenimiento de las cepas en el laboratorio,
e incluso para la produccin en grandes
volmenes, mientras que el medio A-M no es
tan completo como el Guillard aunque ha
ofrecido buenos resultados en el crecimiento
de los cultivos de diatomeas del plancton,
siendo menos costoso.

realizado
y
facilitado
las
electrnicas de las especies.

fotografas

REFERENCIAS
Abalde, J., A. Cid, P. Fidalgo, E. Torres y C.
Herrero
(1995):
Microalgas:
Cultivo
y
Aplicaciones.
Espaa, Universidad de La
Corua, Monografas 26, 210 pp.
Alfonso, E. y L. Martnez (1988): Medio de
cultivo para microalgas marinas. Rev. Invest.
Mar. 9(1). 69-76 pp.

CONCLUSIONES
1. Las especies aisladas son factibles de
cultivar en volmenes de hasta 4,4
litros, siendo viables para su uso
potencial en la alimentacin de
postlarvas de camarn en cultivo.

Alfonso, E. (1999): Cultivo de Alimento Vivo:


actualidad
y
perspectivas.Congreso
NATURAMIGOS 99, Cancn, Mxico, del 24 al
27 de Junio de 1999 (Conferencia Magistral).
Alfonso, E. y S. Leal (2000): Creacin y
mantenimiento de un cepario de microalgas
marinas. Universidad de la Habana, Centro de
Investigaciones Marinas, 22 pp.

2. Tanto las dos especies aisladas como la


importada de Brasil se desarrollaron
exitosamente en los medios de cultivo
(Guillard y A-M).

Arredondo-Vega, B., B. Cordero, C. Herrero y


J. Abalde (1997): Manual de tcnicas
bioqumicas aplicadas a ficologa. CICESE,
Universidad de la Corua, Espaa, 41 pp.

3. Las concentraciones de clorofila a tanto


en el medio Guillard como en el medio
A-M tienen una tendencia a aumentar a
medida que envejece el cultivo,
mientras que las concentraciones de
clorofila c tanto en el medio Guillard
como en el medio A-M tienen una
tendencia a disminuir a medida que
envejece el cultivo.

Brown, M.R., S.W. Jeffrey, J.K. Volkman y


G.A. Dunstan (1997): Nutritional properties of
microalgae for maricuture. Aquaculture 151,
pp: 315-331.

4. Los valores medios de concentracin de


clorofila a fueron muy superiores a los
de clorofila c independientemente del
medio donde se cultiv.

Castellv, J. (1963): Pigmentos de la diatomea


marina Skeletonema costatum (Grev.) en su
dependencia de los factores ambientales y de
la dinmica de las poblaciones. Inv. Pesq.
24:129-137.

5. Las concentraciones de clorofila a


sirven como indicador para evaluar el
crecimiento de estas especies, no
ocurriendo
lo
mismo
con
las
concentraciones de clorofila c.

Guillard,
R.R.L.
(1975):
Culture
of
phytoplankton
for
feeding
marine
invertebrates.
In:
Culture
of
Marine
Invertebrates Animals (W.L. Smith and M.H.
Chanley, eds.), pp: 29-60.

AGRADECIMIENTOS

Siqueiros,
D.
(1994):
Asociaciones
de
Diatomeas Bentnicas Marinas; Anlisis de su
estructura y aplicacin. Tpicos Selectos
sobre Microalgas, Universidad Autnoma de

Las autoras desean agradecer al Dr. Sergio


Licea del Instituto de Ciencias del Mar y
Limnologa de la UNAM, Mxico, el haber
63

Almaguer et al.: Aislamiento y cultivo de dos especies de diatomeas bentnicas.

Baja California Sur, Serie Cientfica. 2(1): 5971.


Voltolina, D. (1991): A Comparison of methods
for the dispersion of cultures of benthic
diatoms. Cryptogamie Algol. 12(3):183-187.

Aceptado: 15 de diciembre del 2003

64