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Analyse par Chromatographie en phase gazeuse couple la

spectromtrie de masse (GC/MS) d'huiles essentielles


Dubois Lucie - Pourquet Virginie
Master 2 Professionnel "Chimie Analytique et Instrumentation"
Objectifs

Promotion 2006

Dmarche exprimentale
Prparation de lchantillon dhuiles essentielles :

Les huiles essentielles sont trs utilises dans lindustrie des cosmtiques ou de la parfumerie.
Deux huiles essentielles issues du citron et de la mandarine sont analyses par GC-MS.

1 10mL

Peser environ 30 mg
dhuiles essentielles ( 1 goutte)

- Analyse qualitative des armes contenus dans ces huiles


- Analyse quantitative par talonnage externe de larme prdominant dans les agrumes: le limonne

Solution mre
6 mg/mL

5mL Hexane

Solution dilue
1/10

Gamme dtalonnage utilise : partir dune solution mre de limonne 1000 g/ml

Principe du couplage GCGC-EIEI-MS

200, 300, 400, 500 et 600 g/ml dans lhexane

Paramtres GC-MS :
Four
Temprature dinjection
Temprature de linterface
Temprature initiale
Monte en temprature
Temprature finale

Principe du couplage GC-EI-MS


SPECTROMETRIE
DE MASSE
MASSE
SPECTOMETRIE DE

250C
250C
70C
20C/min
250C

Colonne

GC

Caractristiques : Elite 5MS 30mx0.25mmx0.25m (95%dimthyl / 5%phnylpolysiloxane)


Gaz vecteur : hlium
Dbit : 1 ml/min
Split : 20
Spectromtre de masse
Scan m/z : 30 350
Dlai dallumage du filament : 3min
Energie de collision : 70 eV

source
lectronique

Volume dinjection : 1 L

Figure 1: Schma de montage dun appareil GC-EI-MS

Rsultats

La CPG permet de sparer des mlanges de composs volatiles ou susceptibles dtre vaporiss par suite
dquilibres entre une phase gazeuse mobile et une phase stationnaire.

Analyse qualitative
Les solutions dhuiles essentielles de citron et mandarine ont t analyses par GC-MS

Chromatographie en phase gazeuse: 3 parties

- Linjecteur : Lchantillon est introduit avec une microseringue, travers un septum en lastomre,
dans la chambre de vaporisation. Linjecteur a une double fonction : il porte lchantillon ltat de vapeur,
puis il lamne dans le flux gazeux en tte de colonne.

limonne
-pinne
-terpinne

- La colonne : elle est place dans une enceinte temprature rgule. Elle de prsente sous la forme
dun tube de silice, enroule sur lui-mme et de longueur allant de 1 plus de 60 m.
Entrans par un gaz vecteur inerte, les analytes tudis sont spars en fonction de leur capacit
dinteraction avec la phase stationnaire.

-pinne

- Le dtecteur : il sagit du module qui va permettre de dtecter voire didentifier les composs en
sortie de colonne.
Figure 2: (A ) Chromatogramme dhuile essentielle de citron, (B) Spectre de masse du limonne

Lordre dlution de composs de structures proches est dtermin par leur diffrence de temprature
dbullition. En effet, la molcule ayant le plus faible point dbullition sera lue en premier et
inversement. La sparation de ces composs prsente une bonne rsolution de part le mode de
programmation de temprature appliqu.

Mode de dtection : la spectromtrie de masse (3 parties)


-Chambre dionisation : en sortie de colonne, lintgralit des analytes entrent dans la chambre
dionisation. Le mode dionisation est limpact lectronique (EI)
M + e-

Fragmentation du limonne

M+ + 2e-

Ces ions forms dans la source sont ensuite acclrs et focaliss par une lectrode charge
positivement (le repousseur) vers lanalyseur : le quadriple.
- Analyseur quadripolaire : Ltude des trajectoires suivies, dans une enceinte o rgne le vide, permet
de dterminer le rapport masse sur charge (m/z) de lion. En balayant les amplitudes U et V, la trajectoire
des ions peut-tre stabilise ou dstabilise en fonction de leur rapport m/z. Seuls les ions qui ont une
trajectoire stable vont pouvoir traverser le quadriple et arriver au dtecteur, les autres tant jects.

- Dtecteur : Le dtecteur recueille alors ces ions spars par lanalyseur en fonction de leur
rapport m/z. Puis un micro-ordinateur va assurer le traitement des donnes et fournir un spectre de
masse. LEI est un procd reproductible qui permet des comparaisons spectrales laide de
bibliothques de spectres (NIST).

Analyse quantitative
Lanalyse quantitative du limonne a t ralise par talonnage externe.
Citron : m = 26,2 mg Csolution mre= 5,24 mg/mL

Conclusion
La mthode dveloppe permet la sparation des armes avec une bonne rsolution et un temps
danalyse court. La bibliothque NIST fournit une identification aise et sans ambigut des composs.
Les rsultats obtenus pour le dosage du limonne sont en accord avec les donnes du fabricant
(www.aromazone.com - citron: 69,10% ; mandarine: 88,8%). Ils pourraient tre amliors par lutilisation
dun talon interne tels que le myristate de mthyle ou le tridcane.

Aire pic limonne (106ua)

Droite dtalonnage du Limonne

C limonne calcule= 3,85 0,32 mg/ml

60

73,4 % de limonne dans lhuile de citron

40
20

A = 85300 x Climonne
R2 = 0,993

0
0

100

200

300

400

500

600

Concentration en limonne (g/ml)

Rfrences bibliographiques
Sawamura M., Son U.S., Choi H.S., Kim M.S.L., Phi N.T.L., Fears M. and Kumagai C.: Compositional changes in commercial lemon essential oil for aromatherapy. Journal of Aromtherapy 14, 27-36. (2004)
Smith D.C., Forland S., Bachanos E., Matejka M. and Barrett V.: Qualitative Analysis of Citrus Fruit Extracts by GC/MS : An Undergraduate Experiment. Chem. Educator 6, 28-31. (2001)
Deng C., Wang A., Shen S., Fu D., Chen J. and Zhang X.: Rapid analysis of essential oil from Fructus Amoni by pressurized hot water extraction followed by solid phase microextraction and gaz
chromatography-mass spectrometry. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 38, 326-331. (2005)

Mandarine : m = 28,6mg Csolution mre= 5,72mg/mL


C limonne calcule= 5,08 0,4 mg/ml
88,8 % de limonne dans lhuile de mandarine

Prix PerkinPerkin-Elmer
GC
Turbomass
Bibliothque NIST
Informatique

11180 euros
79778 euros
2450 euros
4790 euros
98798 euros