THIS FINAL CHAPTER ON THE PROCESSES of early development extends our survey of vertebrate development to include the amniotesthose

vertebrates whose
embryos form an amnion, or water sac (i.e., the reptiles, birds, and mammals).
Birds and reptiles follow a very similar pattern of development (Gilland and
Burke 2004; Coolen ct al. 2008), and birds are considered by modern taxonomists
to be a reptilian clade. Cleavage in bird and reptile eggs, like that of the bony
fishes described in the last chapter, is meroblastic, with only a small portion of
the egg cytoplasm being used to make the cells of the embryo. In mammals, however, holoblastic cleavage is modified to make a placenta, which enables the
embryo to develop inside another organism. Although methods of cleavage and
gastrulation differ among the vertebrate classes, certain underlying principles
are common to all vertebrates.

My dear fellow ... life is infinitely

stranger than anything which the
mind of man could invent. We ivould
not dare to conceive the things which
are really mere commonplaces of
existence.
A. CONAN DOYLE (1891)

Between the fifth and tenth days the

lump of stem cells differentiates into
the overall building plan of the
[mouse] embryo and its organs. It is a
bit like a lump of iron turning into the
space shuttle. In fact it is the profoundest wonder we can still imagine
and accept, and at the same time so
usual that we have to force ourselves
to wonder about the wondrousness of
this wonder.

Desarrollo temprano de aves y mamferos

EARLY DEVELOPMENT IN BIRDS

Cleavage
Ever since Aristotle first observed and recorded the details of its 3-week-long
development, the domestic chicken (Gallus gallus) has been a favorite organism
for embryological studies. It is accessible year-round and is easily raised. Moreover, at any particular temperature, its developmental stage can be accurately
predicted. Thus, large numbers of embryos can be obtained at the same stage.
Chick organ formation is accomplished by genes and cell movements similar to
those of mammalian organ formation, and the chick is one of the few organisms whose embryos are amenable to both surgical and genetic manipulations (Stern 2005). Thus, the chick embryo has often served as an inexpensive surrogate for human embryos.

MIROSLAV HOLUB (1990)

Fertilization of the chick egg occurs in the oviduct, before the albumen
and shell are secreted to cover it. Like the egg of the zebrafish, the chick egg
is telolecithal, with a small disc of cytoplasmthe blastodiscsitting atop a
large yolk. Like fish eggs, the yolky eggs of birds undergo discoidal meroblastic cleavage. Cleavage occurs only in the blastodisc, which is about 2-3 mm
in diameter and is located at the animal pole of the egg. The first cleavage
furrow appears centrally in the blastodisc; other cleavages follow to create a
single-layered blastoderm (Figure 8.1). As in the fish embryo, the cleavages
do not extend into the yolky cytoplasm, so the early-cleavage cells are continuous with one another and with the yolk at their bases (see Figure 8.IE).
Thereafter, equatorial and vertical cleavages divide the blastoderm into a

Amniotes

(A) Relacin logen<ca de los amniotes. (B) El huevo con chascara permite el desarrollo externo a la
madre del animal. En mamferos este arreglo se modica para adquirir nutrientes e intercambiar gases va
placenta

Ventajas del modelo pollo

-
-
-
-

Gran nmero de embriones

Accesibles todo el ao
Fciles de criar
Se puede predecir precisamente el estado del desarrollo
segn temperatura
- La formacin de rganos es dirigida por la expresin de
genes y movimientos celulares muy parecidos a la formacin
de rganos en mamferos.
- Uno de los pocos organismos donde es fcil pracCcar tanto
cirugas como manipulacin genCca.

Fer<lizacin

-
-
-
-

Ocurre en el interior de la hembra (oviducto).

previo a que se rodee de albnina y la cscara.
Huevo telolecithal.
El blastodisco se ubica en la parte superior del vitelo (yolk),
2-3 mm de dimetro.
- Cleavage es discoidal meroblsCco.

Cleavage

El primer cleavaje aparece central en el blastodisco, los otros cleavages que siguen forman una capa de clulas
simple, el blastodermo. Posteriormente cleavages ecuatoriales y verCcales dividen el blastodermo en un tejido
de 5-6 clulas de espesor. Cavidad subgerminal: entre el blastodermo y el yolk.

Formacin del blastodermo en pollo

Izq. Diagrama seccin medio sagital. Med. Vista ventral. Der. Vista dorsal

Lnea primi<va (primi%ve streak)

La lnea primiCva se forma por acumulacin de clulas en la capa media, seguida por el engrosamiento del epiblasto en la
zona marginal posterior, anterior al la hoz de Koller. El surco primiCvo es el equivalente al brastoporo

Migracin del endodermo y mesodermo por la lnea

primi<va

Las clulas que migran a travs del ndulo de Hensen haci anterior forman la placa precordal y notocorda, las que
migran anterior a estas migran lateralmente para formar la notocorda y somitos, las que migran por la lnea media
forman mesodermo intermedio y lateral

Intercalacin medio lateral en la formacin del surco

primi<vo

(A) estadio XII, previa a la formacin de la lnea primiCva. (B) Estadio 2, poco despus de la formacin
de la lnea primiCva. Flechas muestran en desplazamiento de las clulas hacia el surco

Gastrulacin en pollo 24-28 hpf

(A) Extensin total de la lnea primiCva (24h). (B) Estado de dos somitos (25h) Endodermo farngeo, notocorda. (C)
Estadio 4-somitos (27 h). (D) Regresin del la lnea primiCva a la porcin caudal del embrin (28 h). (E) Regresin de la
lnea primiCva deja en su rastro la notocorda.

Especicacin eje antero-posterior por gravedad

(A) Rotacin en la galndula de la chascara resulta en (B) que los componente ms livianos del vitelo empujan hacia arriba el
blastodermo. (C) Esa regin ms elevada se convierte en la regin posterior del embrin.

Formacin de nodo de Hensen desde la hoz de Koller

(A) Diagrama del borde posterior de un embrin temprano (pre-lnea). (B) Previo a la gastrulacin, las clulas en el borde
anterior de la hoz de Koller (epiblasto y capa media) marcados en verde, las clulas posteriores del la hoz de Koller marcadas
en rojo. Al migrar las clulas, las anteriores forman en nodo de Hensen y los derivados de la notocorda. Las clulas formadas
en posterior forman la regin posterior del surco primiCvo

Induccin

(A) Transplante de un nodo de Hensen de pato a un embrin de pollo. (B) Se induce un embrin secundario. (C) Grac de
nodo de Hensen de un embrin en la periferia de un hospedero. Hibridacin in situ de Otx2 (rojo) cabeza y Hoxb1 (azul)
tubo neural troncal

Establecimiento del eje izquierda-derecha

(A) En el lado izquierdo del nodo de Hensen, Shh acCva Cerberus el que esCmula BMP para inducir la expresin de Nodal. En
presencia de Nodal se acCva el gen Pitx2 que determinar el lado izquierdo. En el lado derecho del embrin se expresa
acCvina que a su vez acCva Fgf8, una protena que bloquea la expresin del gen Cerberus. (B) Hibridacin in situ de Cerberus
mRNA. (C) Hibridacin in situ de Nodal mRNA. (D) Hibridacin in situ de Pitx2

320

CHAPTER

STAGE

Zebrafish
Danio rerio

Frog
Xenopus laevis

Chicken
Gallus gallus

Mouse
Mus musculus

Early
cleavage

\_y

Area pellucida

Late
cleavage

Areaopaca

Extra- embryonic

ectoderm

Epiblast
Primary
hypoblast

Early
gastrula

Late
gastrula

Secondary
hypoblast

Hypoblast

NC, Nieuwkoop center;

SMO, Spemann-
Mangold organizer.
Endodermo (amarillo),
ectodermo
(azul,
SMO
Mesodermo (rojo)

Epiboly

Epiboly -

Prechordal plate
mesoderm
Epidermis

Prechordal
Forebrain
pliic mesoderm
\ Midbrain
Hindbrain

Prechordal
plate mesoderm

Epidermis
Forebrain

Forebrain Epidermis Epiblast

Somite Midbrain-

Presomitic
mesoderm
SMO
SMO

mesoderm

Gut
endoderm

SMO
Somite

Spinal
cord

Pharyngula

Desarrollo de embrin humano desde fer<lizacin al

implante

Desarrollo de embrin humano desde la ferClizacin al estado de implantacin. La compactacin del embrin
ocurre al da 4, al estado de 10 clulas. El embrin eclosiona desde la zona pelcida una vez que alcanza el
tero. La zona pelucida previene que el embrin se adhiera al oviducto

Cleavage temprano en equinodermos y mamferos

Cleavage radial en equinodermos y anbios (A), cleavage rotacional en mamferos

Lectura (30 min)

Cleavage de un embrin de ratn in vitro

(A) Estados de 2 clulas. (B) Estado de 4 clulas. (D) Estado de compactacin 8 clulas. (E) Mrula.
(F) Blastocisto. (G) Micrograla electrnica a travs del centro de blastocisto de ratn.

Eclosin de zona pelcida, implantacin de blastocisto

(A) Eclosin de blastocisto de ratn desde la zona pelcida. (B) Blastocisto de ratn
ingresando al tero. (C) Implantacin inicial de blastocisto en mono rhesus

Gastrulacin

El primer evento morfogenCco en la gastrulacin de Drosophila es la invaginacin de las 16 clulas ms ventrales del
embrin. Sealizacin de Dorsal especica ests clulas.

Formacin de la capa germinal y tejidos

Das 5-9: implantacin de blastocisto. Las clulas de la masa celular interna delanima las clulas del hipoblasto que recubren
el blastocele, formando el endodermo extraembrionario del saco vitelino primiCvo y el blastodisco (epiblasto e hipoblasto).
Das 10-12: el trofoblasto de divide en citotrofoblasto (formar el vili) y el sinciciotrofoblasto, que ingresa al tejido uterino
para formar el corion. Das 12-15: gastrulacin y formacin de la lnea primiCva

Embrin de ratn al da 3,5

Blastocisto temprano mostrando la expresin de Nanog (azul, epiblasto) y Gata6 (rojo, endodermo visceral) , en la masa
celular interna. Estos tejidos luegoo de 24h se localizarn: hipoblasto cercano al blastocele y el epiblasto entre el hipoblasto
y el trofoblasto

Estructura del amnion y movimientos celulares durante la

gastrulacin

(A,B) Embrin humano y conexiones uterinas al da 15 de gestacin. (A) Seccin sagital a travs de la lnea media.
(B) Vista dorsal de la supercie del embrin. (C) Al da 14 y 15 el ingreso del epiblasto reemplaza el hipoblasto, al
da 16 las clulas que ingresan forman la capa del mesodermo

Embrin humano

(A) embrin humano y placenta a 6 semanas de gestacin. (B) Asociacin de las vellosidades
corinicas con el suplemento sanguneo de la madre

Formacin d ejes y notocorda en ratn

(A) Embrin de ratn da 7, la supercie dorsal del epiblasto (ectodermo embrionario) en contacto con la cavidad amniCca.

Patrn antero-posterior en embrin de ratn

(A) Gradiente de concentracin de BMPs, Wnts y FGFs en gstrula tarda del embrin de ratn. (B) Gradiente de FGF8
expresado en la regin del tailbud al da E9, (alto, rojo). (C) RA, Wnt3a y FGF8, contribuyen al paoerning posterior, ellos
unteractan con protenas de la familia Cdx que regulan la acCvidad de genes Hox

Conservacin evolu<va de la organizacin y el patrn de

expresin de los genes Hox

Cluster Hom-C en Drosophila (Chr3), comparado con cuatro clusters de genes Hox en el genoma de ratn. Los genes con
estructura similar ocupan la miosma posicin relaCva en cada cromosoma. Los grupos de genes parlogos presentan
patrones de expresin similares

Patrn de vrtebras de pollo y ratn

(A) Esqueletos axiales de pollo y ratn de estadios comparables (alcian blue). Pollo Cene el doble de
vrtebras cervicales que ratn. (B) Los lmites de expresin de ciertos genes parlogos Hox (Hox5/6 y
Hox9/10) han sido mapeados segn el dominio de las vtebras

Knockouts

(A) ratn silvestre. (B) Knockout (KO) de parlogos de Hox10 (Hox10aaccdd) convierte las vrtebras lumbares en vrtebras
torxicas. (C) KO de parlogos de Hox11 (Hox 11aaccdd) tranforman las vrtebras sacras en lumbares

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Desarrollo
temprano
en cuatro
vertebrados

Concepto de clula troncal

(A) Divisin asimrica. (B) Poblacin asimtrica. (C) Clula troncal de linaje

Clulas troncales hematopoy<cas (HSCs)

(A) Clulas HSCs de mdula humana. (B) HSCs inyectadas en un huesped (ratn) se localizadas en el bazo, generan
glbulos rojos, glbulos blancos y plaquetas

Potencialidad de las clulas troncales

Nichos de clulas troncales en humanos

Nicho de HSCs en mdula sea

Las HSCs se generan en los nichos del endosteum (la mdula sea ms cercana al hueso). La designacin de una HSC a
un Cpo parCcular de clula sangunea implica el contacto entre la clula troncal y las clulas de la matriz del hueso

Nicho de clula troncal en tes\culo de Drosophila

(A) La regin apical est compuesto de aporro. 12 clulas somCcas al que estn adjuntas 5-9 clulas troncales
germinales. (B) Expresin de -galactosidasa para revelar las clulas de la regin apical. (C) Patrn de divisin celular
de la lnea germinal troncal.

Nicho de clula troncal de intes<no y diferenciacin

(A) Diagrama representando una cripta de intesCno delgado. (C) Seccin longitudinal de una cripta intesCnal. (C)
Microscrograla confocal del fondo de las criptas intesCnales, clulas troncales (verde, Lgr5)

Loop cervical

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula

Eje izquierda-derecha

(A) Secciones abdominales de embrin humano . (B) Movimiento del corazn y venas (cava). (C) Asimetra de las
ramicaciones en elos pulmones izquierdo y derecho. (D) Clulas ciliadas del nodo de ratn con cilios orientados
hacia la regin posterior-ventral de la clula