La Quimioluminiscencia

RESUMEN
Se han desarrollado sistemas automatizados para el uso de inmunoensayos por
quimioluminiscencia (emisin de luz asociada con la energa) desplazando
aquellas metodologas como el Radioinmunoanlisis (RIA), Inmunoradiometra
(IRMA) y otras, haciendo hincapi que cada vez son ms sencillas las
determinaciones inmunolgicas con esta tecnologa de vanguardia, es un
mtodo de lectura que se basa en el principio de emisin luminosa a travs de
una reaccin (Enzima-Sustrato). La variedad de pruebas que conforman esta
metodologa permite realizar diferentes determinaciones de casi todas las
reas del Laboratorio Clnico tales como: Endocrinologa, Inmunologa,
Virologa, Epidemiologa, Hematologa, Bioqumica Clnica, etc.
Los laboratorios de investigacin que han desarrollado estos ensayos de
quimioluminiscencia han demostrado la excelente correlacin con los ensayos
de referencia, como los automatizados y Radioinmunoanlisis, donde
encuentran precisin, baja reactividad cruzada, gran sensibilidad analtica
sobre el orden de diez veces ms sensible que la mayora de los ensayos de
hoy en da. La mayor parte de los ensayos se determinan en aproximadamente
15 a 30 minutos y por su simplicidad se ha convertido en una opcin muy
propia para evitar los riesgos inherentes en la metodologa del RIA como lo son
la utilizacin de istopos radioactivos.
Este sistema posee una gran especificidad y sensibilidad ya que con este
mtodo radiomtrico se puede determinar una reaccin antgeno-anticuerpo
aunque su concentracin sea del orden de los picogramos y con un mnimo de
desnaturalizacin. Hoy en da los principios del RIA se aplican a otros sistemas
que usan agentes inmunolgicos como receptores de membrana, factor
intrnseco, enzimas (en farmacologa clnica, oncologa, hematologa, etc.), y es
aplicado ampliamente en el campo de la endocrinologa clnica para cuantificar
hormonas con exactitud.
En esta revisin bibliogrfica se mostraran las ventajas del nuevo mtodo de
quimiolumniscencia en comparacin con el RIA a fin de dar una opcin ms al
laboratorista para realizar pruebas de inmunoensayo.
INTRODUCCIN
El descubrimiento de las diferentes tcnicas inmunolgicas se remonta
aproximadamente un poco ms de 100 aos, y ahora una de las tcnicas ms
sensibles y exactas es el radioinmunoanlisis (RIA) que se utiliza para la
determinacin de sustancias de tipo no hormonal y hormonal den sangre u
otros lquidos corporales.
Descubrimiento del RIA

El fenmeno de emisin de luz por molculas orgnicas se ha conocido por ms

de cien aos, desde que Radzis Zenski descubrieron en 1877 compuestos
luminiscentes.
En 1928 Albrech descubri las propiedades de un compuesto emisor de luz
conocido como
luminol. Al ser oxidado con perxido de hidrgeno en un medio alcalino y en
presencia de un catalizador, el luminol emite luz individualmente como
fotones.
El potencial de aplicacin analtica de la quimioluminiscencia no fue reconocido
hasta 1947 cuando se aisl por primera vez la luciferasa de la lucirnaga.
En 1952 Sthreler y Totter descubrieron la aplicacin de de la luciferasa a una
tcnica analtica para la medicin de ATP.
En 1959 el trabajo de Berson y Yalow sobre la hormona insulina desvi la
atencin de las molculas bio y quimioluminiscentes para anlisis y la enfoc
en el uso de radioistopos en una tcnica analtica conocida como
radioinmunoensayo (RIA).
Berson y Yalon fueron los primeros en observar la gran sensibilidad posible
mediante el uso de indicadores radioistopos en la reaccin antgeno
anticuerpo. Adems reconocieron que el antgeno marcado combinado tiene
una relacin cuantitativa con la cantidad de insulina (antgeno no marcado en
la muestra), cuando la concentracin de anticuerpo y antgeno marcado en el
sistema, se mantiene constante.
Esto form la base de la teora de enlace competitivo empleada en la mayora
de las pruebas de RIA.
La precisin, exactitud, simplicidad y todas las dems caractersticas del RIA,
no pudieron ser igualadas por otras tcnicas que se intentaron en el ao
1959.El principio del RIA era inmediatamente aplicable a las hormonas
peptdicas y no peptdicas existiendo una gran sensibilidad y resultados
reproducibles. El RIA es aplicado ampliamente en el campo de la
endocrinologa clnica para medir las hormonas con mucha precisin.
HISTORIA
La luminiscencia ha sido conocida aproximadamente desde 1667, la existencia
de la bioluminiscencia fue reconocida por Boyle en Alemania, la describi como
luz caliente. En 1887, Rad Ziszewki descubri algunos componentes qumicos
que tienen propiedades luminiscentes.
En 1928, Abrech descubri las propiedades del luminol un componente el cual

cuando se oxida por medio de perxido de hidrgeno emite luz como fotones
individuales. Mientras es recordado que los soldados japoneses en la segunda
guerramundial hicieron uso de esto, mezclando bioluminiscencia de crustceos,
amasados con saliva como fuente cruda de la luz para leer mapas en la noche.
El potencial para aplicaciones analticas no fue reconocido hasta 1947 cuando
apareci la luciferasa y en 1952 Etrehler y Totter publicaron una aplicacin
analtica especfica de la luciferasa en un ensayo para adenosin trifosfato (ATP).
El primer ensayo de quimioluminiscencia fue descrito en 1976 con un reporte
de Schroeder et. al.; reportaron el desarrollo de un ensayo quimioluminiscente,
este ensayo utiliz como indicador el isoluminol, ste requiere la adicin de un
catalizador para que la reaccin de emisin de luz ocurra.
Considerable inters se cre en otras molculas quimioluminiscentes con los
reportes de Mc. Capra, Woodhead, Weeks, Schroeder y otros. En 1978 se
hicieron reportes de muchas publicaciones sobre el uso de otro indicador
quimioluminiscente llamado ster de acridina que ha causado incremento en el
inters y aplicacin de esta metodologa.
El ster de acrinina, no requiere la adicin de un catalizador para que ocurra la
reaccin de emisin de luz, en contraste con la base del sistema de luminol, en
donde una amplia variedad de especies qumicas pueden influenciar la
reaccin.
Las reacciones qumicas que emiten luz y las reacciones biolgicas tienen un
diverso rango de aplicaciones pero muchas no han sido adoptadas para la
rutina de los laboratorios clnicos. Las ventajas de la quimioluminiscencia en los
ensayos incluyen sensibilidad (lmites de deteccin de moles, nanogramos,
picogramos) y velocidad (seal generada en unos pocos segundos y en algunos
casos estable por varias horas), sin residuos peligrosos, y procedimientos
simples. La mayora de las aplicaciones son en inmunoensayos, marcaje de
protenas, ensayos en molculas de DNA. Las molculas quimioluminiscentes
investigadas marcadas incluyen el luminol, isoluminol, steres de acridina,
tioesteres y sulfaminas, y steres de fenantreno. En bioluminiscencia, una
reaccin qumica mediada por enzimas es responsable por la excitacin, y esta
reaccin es siempre emparentando a organismos vivos.
En 1976, una tecnologa semiautomatizada para ensayos de captacin fue
descrita al usar isoluminol como el indicador con el requerimiento de la adicin
de un catalizador para que la emisin de luz ocurra. Con este mtodo
semiautomatizado esta compaa ofrece los inmunoensayos utilizando la
tecnologa de quimioluminiscencia. Aqu la oxidacin de ster de acridina
ocurre rpidamente, con un pico de emisin de luz en un segundo.
Desde 1983, los mtodos de Quimoluminiscencia y Bioluminiscencia han sido
desarrollados con varios marcadores de enzimas tales como fosfatasa alcalina,

glucosa 6 fosfato deshidrogenasa, peroxidasa del rbano, la luciferasa de la

renilla, y la xantina oxidasa. En estos ltimos aos se introdujeron al mercado
de la comunidad cientfica inmunoensayos, los cuales consistan en una fase
slida como mtodo de separacin. ste grupo de ensayos usan partculas
paramagnticas (PMP) como fase slida. La separacin es perfeccionada al
colocar los tubos en una banda magntica. Ambas fracciones ligadas se
agregan en el rea magntica y la fraccin libre es decantada, eliminando la
necesidad de centrifugacin.
Ciba Corning fue el primero en ofrecer inmunoensayos utilizando esta
tecnologa quimioluminiscente con el equipo Magic Lite semiautomatizado. La
compaa abbot crea el Axsyn totalmente automatizado, la compaa Sanofi
Pasteur crea el sistema Access, totalmente automatizado tambin. La
compaa Ciba corning (ahora llamada Bayer) no se queda atrs y crea el
sistema ACS 180 totalmente automatizado, de ah el ACS plus con capacidad
de ms pruebas despus crea el Centauro otro equipo tambin automatizado
pero con mayor capacidad y velocidad. Todos ellos utilizando la tecnologa de
quimioluminiscencia.
El RIA es un sistema que est relacionado con la cuantificacin in vitro de
trazas de sustancias no hormonales y hormonales existentes en la sangre y
otros lquidos corporales.
El RIA aprovecha la respuesta inmunitaria para obtener anticuerpo especfico y
sensible por lo que se puede usarse en la determinacin de cualquier
compuesto capaz de actuar como inmungeno que induzca la produccin de
anticuerpos en animales.
El RIA es una tcnica analtica de referencia con calidad incomparable, adems
son un sin nmero de pruebas y aplicaciones que se pueden realizar mediante
este.
El procedimiento del RIA funciona de esta manera: a una sustancia X marcada
radioactivamente (X+) que es el antgeno, que reacciona con el anticuerpo
especfico fijndose aproximadamente un 70% de X+. Diversas cantidades
conocidas de X no marcada son aadidas a la mezcla X+ anti-X,
establecindose una competicin por la unin del antgeno con el anticuerpo
que va a ser regido por la ley de accin de masas. Despus de una incubacin,
X+ que se encuentra fijada al anticuerpo, es separada de X+ libre. De la
cantidad de X+ fijada a diferentes concentraciones se hace una curva que
permite encontrar cualquier concentracin de X que sea desconocia.
El istopo ms utilizado para marcar hormonas es el I125, I131. Son usados en
el marcaje de hormonas esteroides y drogas. La vida media es de 60 das y de
8 das respectivamente.
Los medios de separacin que utiliza el RIA son: separacin

cromoelectrofortica, cromatografa, difusin en gel, electroforesis en el papel

o acetato de celulosa, absorcin, protena A-estafilococcica. Estos medios
separan de la hormona libre y del complejo, eliminando la presencia de
sustancias no especficas y no alterando el equilibrio antgeno anticuerpo
conseguido en la incubacin, son rpidos, cmodos y baratos. Las
automatizaciones han disminuido el error inherente de las tcnicas manuales
como lo era la influencia de la temperatura, medio ambiente inico, el pH, la
presencia de varios contaminantes que pueden interferir o degradar una
molcula o su porcin radiactiva del componente del componente final del
sistema RIA ser la separacin de la fraccin marcada ligada al complejo y la
fraccin que se encuentra libre, seguida por la cuantificacin de la actividad de
ambas fracciones ya sin interferencia por la automatizacin.
FUNDAMENTO DEL RIA.
El RIA es una tcnica de anlisis en el que una pequea cantidad de sustancia
marcada radioactivamente, es desplazada de su unin especfica por otra
similar no marcada que va a competir con la sustancia marcada
radioactivamente
Al sistema de fijacin elegido se le agrega una cantidad x de antgeno
marcado, posteriormente se le agrega una cantidad x de antgeno sin marcar o
sea el suero problema, as se establece la competencia por los sitios de unin
del anticuerpo, sigue la incubacin a 37 grados Celsius, procediendo a los
lavados mediante los cuales se realiza la separacin del antgeno unido y del
libre, de la cantidad de antgeno marcado fijado a diferentes concentraciones
se hace una curva que permite encontrar cualquier concentracin de antgeno
no marcado que sea desconocido.
Reactivos de anlisis.
Es necesario contar con una forma muy purificada del antgeno en cuestin
para el marcaje. Las formas menos purificadas de antgeno no pueden servir
perfectamente para usar como inmungeno y estndar. Los requerimientos de
pureza del material a marcar son muy estrictos, porque en ltima instancia lo
que se mide es la radioactividad. Si sta ltima se asocia en grado significativo
con especies moleculares ajenas a la que va a medirse, en ese grado el anlisis
ser no especfico y quizs intil. Por otra parte, siempre que el antgeno sea
inmungeno puede estar contenido en una mezcla relativamente muy impura,
pues la especificidad de la inhibicin de unin observada depende
exquisitamente de la pureza de la especie marcada con ligando presente. El
requerimiento ms crtico del ligando a usar como estndar es un anlisis es
que se comporte en el sistema de anlisis en forma idntica al
comportamientodel ligando de inters en el lquido biolgico analizado.
Tambin un agente de unin con caractersticas apropiadas es indispensable
para un buen anlisis. Para sustancias de peso molecular bajo, especialmente
aquellas en las que puede introducirse tritio por vas biosintticas en niveles

muy altos de actividad especfica, este istopo puede ser apropiado para usar
en anlisis de unin competitiva, aunque el marcador de eleccin es el I125, la
vida media es de alrededor de 60 das y permite gran actividad especfica pero
no requiere uso inmediato de anlisis. Para la eleccin del agente de unin se
tiene que tomar en cuenta diversos factores. Si el ligando en cuestin es un
inmungeno potente, la produccin de antisuero puede no ser difcil y ste
puede ser el mtodo de eleccin. Si hay inters especial en medir la porcin
biolgicamente activa de un grupo heterogneo pero estrechamente
relacionado de molculas, un anlisis radiorreceptor que emplea un receptor
tisular puede ser el mtodo de eleccin. Casi todos los anlisis de unin
competitiva son satisfactorios con valores de pH aproximados de 7.0 a 8.6 pero
hay excepciones, y cuando se emprende un anlisis es conveniente hacer por
lo menos un experimento de dependencia del pH para asegurarse de que no
habr prdida de tiempo experimental siguiente. Tambin
se necesitan diversas sustancias recolectoras o limpiadoras que se emplean
para saturar y limpiar sitios de absorcin fsica y minimizar las prdidas de
reactivos crticos en plstico o vidrio. Tambin se debe incluir los inhibidores de
proteasa para eliminar la susceptibilidad de glucagn y ACTH a las protelisis
por enzimas normalmente presentes en el plasma.
En los servicios de medicina nuclear se han realizado tcnicas de RIA desde su
instauracin, ya que en ellos ha existido la instrumentacin necesaria, los
especialistas calificados y, adems, acreditan la condicin de instalacin
radiactiva como imperativo legal imprescindible para la utilizacin de istopos
radiactivos.
Los especialistas en medicina nuclear y la acreditacin docente para los
hospitales que pueden impartirla exige la existencia de laboratorios en los
servicios de esta especialidad mdica, en los que se deben realizar tcnicas de
RIA.
LA QUIMIOLUMINISCENCIA
La luminiscencia es definida como la emisin de luz asociada con la disipacin
de energa con una sustancia electrnicamente excitada.
Si los electrones de un componente luminiscente son estimulados por una luz
en estado normal, estos dan energa en forma de luz cuando ellos regresan al
estado.
Tipos de luminiscencia.
Hay diferentes formas de luminiscencia, distinguindose por el mecanismo que
causa la
En fotoluminiscencia tambin conocida como fluorescente la sustancia es

estimulada por fotones de luz, la emisin de la luz con un trazador fluorescente

es diferente.
En bioluminiscencia, una reaccin qumica medida por enzimas es responsable
por la excitacin, y esta reaccin est siempre emparentada a organismos
vivos.
En quimioluminiscencia, la emisin de luz es causada por los productos de una
reaccin especfica qumica, en la cual se involucran las siguientes sustancias
segn el sistema automatizado que sea utilizado: ster de acridina, perxidocido, hidrxido de sodio, fosfatasa alcalina. En el caso de esta reaccin el
agente quimioluminiscente es el ster de acridina que es oxidado por el
perxido-cido y el hidrxido de sodio.
FUNDAMENTO DE CLIA.
Es la cuantificacin de una sustancia, utilizando una reaccin antgeno
anticuerpo, un marcador como indicador de la reaccin que puede se el ste de
acrinina u otro. Que en combinacin con los reactivos: perxido-cido e
hidrxido de sodio, en contacto con la muestra y el analizador proporcionan la
reaccin quimioluminiscente. El perxido-cido provee el agente oxidante para
el ster de acridina. El hidrxido de sodio, proporciona el cambio de pH
necesario para que la reaccin de oxidacin ocurra.
La emisin de luz es causada por los productos de una reaccin qumica
especfica, involucran. Los ensayos de separacin y no separacin que han sido
proyectados, han sido basados en la con la marcacin de ster de acridina. La
combinacin de las propiedades de aplicacin de una enzima y una reaccin de
deteccin usando quimiluminiscencia o bioluminiscencia proporciona una alta
sensibilidad analtica.
Los sistemas que la llevan a cabo esta reaccin fueron especialmente
diseados para realizar inmunoensayos de una automatizada con tecnologa de
vanguardia como lo es la quimilumiscencia, mtodo de lectura con mayor
sensibilidad en la actualidad la cual se basa en el principio de emisin de
energa luminosa a travs de una reaccin qumica (Enzima Sustrato). La
gama de pruebas que conforman su men permite realizar diferentes perfiles
de casi todas las reas del laboratorio clnico, empleando reactivos de alta
calidad que permiten obtener resultados muy confiables.
En la luminiscencia, el antgeno en la muestra del paciente compite
covalentemente unido a las partculas paramagnticas para limitar los sitios
sobre al anticuerpo marcado con ster de acridina. Una relacin inversa existe
entre la concentracin del anticuerpo unido marcado al antgeno, y el antgeno
en la muestra del paciente.
El ensayo CLIA es de tipo sndwich, el cual el antgeno en la muestra del

paciente es sometido en la reaccin sndwich, el anticuerpo covalentemente

unido a las partculas paramagnticas y el anticuerpo marcado con ster de
acridina. Una relacin directa existe entre la concentracin de antgeno en el
muestra del paciente y la cantidad de luz emitida durante la oxidacin de el
ster de acridina en la cubeta.
Para cuantificar el antgeno en la muestra, el sistema inyecta automatizado un
reactivo 1 y despus el reactivo 2 en las cubetas conteniendo la mezcla de
reaccin. Esto dispara la reaccin que resulta en la emisin de fotones de luz.
El fotomultiplicador (PMT), un fotodetector, detecta los fotones de luz emitida y
los convierte en pulsos elctricos. Los sistemas cuentan estos pulsos elctricos,
leen y los resultados comparando con una curva maestra definida para cada
ensayo, calculando la concentracin.
A continuacin se mencionan algunas caractersticas y beneficios generales de
estos sistemas:
* Los inmunoensayos por quimioluminiscencia evitan los desechos txicos y los
resultados que se obtienen son equiparables con Radioinmunoanlisis.
* Estos sistemas cuentan con refrigeracin integrada (menos el ACS 180 plus
de Bayer) conservando los reactivos en buen estado con el mnimo de
manipulacin por parte del operador, evita la necesidad de reinicializar el
equipo para las pruebas con lo que se puede disponer del equipo en cualquier
momento.
* Tambin pueden trabajar directamente con tubo primario en el cual se
recolecta la sangre sin necesidad de copas especiales.
* Cuenta con lector de cdigo de barras para identificar muestras y reactivos
permitiendo un mejor control de los mismos evitando confusiones y
disminuyendo el tiempo de programacin.
* Estos equipos trabajan al menos 5 perfiles de pruebas a una misma muestra
sin necesidad de medir o de montar 5 veces la misma muestra lo que
disminuye considerablemente el tiempo de trabajo de rutina en el laboratorio.
* Capacidad para trabajar de urgencia sin interrumpir el trabajo ya programado
en proceso obtenindose el resultado de la urgencia en el mnimo de tiempo
independientemente de las otras muestras programadas.
* Cuentan con acceso continuo de muestras y reactivos necesarios en forma
constante sin necesidad de interrumpir el trabajo que se est realizando y as,
disminuye y optimiza el tiempo de trabajo de rutina.
* Tienen capacidad en el refrigerador para 24 reactivos diferentes permitiendo
realizar 24 pruebas de manera simultnea a una sola muestra.
* Todas las pruebas se realizan bajo el mismo principio facilitando con lo cual
no importa el orden o tipo de prueba que se le programe a las muestras.
* El rango de tiempo para la obtencin de los resultados de los perfiles va de
15 a 50 minutos, por ejemplo: un perfil tiroideo se obtiene en 20 o 40 min.,
perfil ginecolgico igual, un VIH en 20 minutos, una GCH en 17 minutos, etc.
* La estabilidad de las calibraciones es de 28 das optimizando el costo por
prueba (no en todas las pruebas por ejemplo cido flico en el sistema ACS 180

la calibracin dura slo 24 horas). As mismo la estabilidad de los reactivos va

de 8 a 12 meses.
* Tiene capacidad para procesar 60 muestras simultneamente con opcin a
seguir programando por medio del software del sistema, el cual reporta los
horarios exactos para la obtencin de los resultados.
* tienen disponibilidad de procesar 294 pruebas sin intervencin del operador e
incubar 60 pruebas al mismo tiempo creando horarios exactos para cada
prueba. Por lo tanto optimizan los tiempos de rutina.
* Los sistemas cuentan con deteccin ultrasnica para las muestras y reactivos
facilitando la planeacin del trabajo y requerimientos.
* Asimismo, los equipos monitorean la cantidad de reactivos disponibles a
bordo del sistema suministrando datos importantes para la estadstica interna
del laboratorio.
* El sistema reporta los resultados tanto de muestra impresa como en pantalla
y se puede consultar momento aunque se encuentre trabajando. Se puede
obtener de la memoria resultados de das anteriores ya que posee una
memoria para 100 resultados.
* Las curvas de calibracin pueden ser consultadas en cualquier momento y
obtener su reporte impreso, lo que constituye un soporte para la confiabilidad
de los resultados.
Los sistemas cuentan adems con una funcin especial para el control de
calidad de todas y cada una de las pruebas que realiza con la posibilidad de
obtener un reporte impreso diario, semanal, mensual, por lotes de reactivos de
manera especfica, etc., as como la curva de levey-Jennins y datos estadsticos
correspondientes.
Estas y otras caractersticas y ventajas ms ofrecen estos sistemas para la
realizacin de este tipo de ensayos dentro del laboratorio clnico.
MEN DE PRUEBAS PARA LOS SISTEMAS ANTES MENCIONADOS
El men de pruebas para estos sistemas se encuentra en continuo crecimiento
y las pruebas que se mencionan a continuacin podran variar de sistema a
sistema:
Perfil Tiroideo Perfil ginecolgico
TSH BHGC
T4 Total LH
T4 Libre FSH
TU uptake Prolactina
T3 Total Progesterona
T3 Libre Estradiol
Alergia Marcador metablico
IgE Cortisol
Perfil de anemia Enfermedades infecciosas
Vitamina B12 Toxoplasma IgG e IgM

Ferritina Rubola IgG e IgM

Folatos Chlamydea Ag
Virus sanguneos Drogas teraputicas
HIV 1+2 3 generacin Teofilina
HBs Ag Digoxina
HBs Ag confirmatoria
Diabetes Cardiovascular
Insulina CK-MB
Mioglobina
Troponina 1
CONCLUSIONES.
Ante la posible y previsible tendencia a cierta unificacin de laboratorios y
sustitucin de tcnicas de RIA por otras de tipo alternativo como lo es la
quimioluminiscencia, se requiere que se disponga de un documento que
contemple algunas caractersticas del RIA y sus ventajas frente a otras tcnicas
analticas.
En la mayora de los hospitales las tcnicas de RIA estn slidamente
establecidas desde hace muchos aos. Recientemente en las direcciones de los
mismos se observa una tendencia a plantearse la sustitucin del RIA por otras
tcnicas de ms reciente introduccin. Estas pretenden como mximo objetivo
igualar la calidad del RIA. Ofrecen como mayor aportacin real, facilidad y
velocidad en la obtencin de resultados. Su argumentacin la basan en la
automatizacin de los equipos y en la informacin incorporada a los mimos. En
esta situacin los responsables de las direcciones hospitalarias, de forma
aislada o dirigidas por decisiones superiores, parecen intentar el cambio del
RIA por aquellas tcnicas sin que se conozcan los criterios utilizados para
justificarlo. Cabe la posibilidad de que no dispongan de una informacin
completa sobre las ventajas e inconvenientes de cada una de ellas, de los
distintos procedimientos y de su ptima utilizacin. Una de las causas que
potencian la desviacin de determinaciones analticas hacia otras tcnicas no
RIA es la informacin errnea sobre la peligrosidad radiante y contaminante del
RIA. Sin embargo, esta potencial peligrosidad est totalmente reglamentada y
controlada, cosa que no sucede con los residuos biolgicos y qumicos de otras
tcnicas alternativas.
El RIA es una tcnica analtica de referencia cuya calidad, en general, an no
ha sido superada por ninguna otra. Se puede decir que cualquier otra es
comparada con los resultados obtenidos por el RIA. Posteriormente aquellas
solamente se introducen en el mercado cuando sus parmetros de calidad se
acercan a los determinados por RIA. El RIA es una tcnica tradicional en la
mayora de nuestros hospitales, con una dotacin completa de recursos
materiales y humanos. Actualmente, en general, los costos del RIA son
inferiores a los de otra tcnicas alternativas en las que hay que considerar,
adems del precio del reactivo propiamente dicho, otros costos adicionales por

materiales accesorios (calibradores, controles, cubetas, buffers, otros reactivos,

etc.
En relacin con tcnicas automatizadas alternativas al RIA merecen destacarse
los siguientes puntos:
* Slo se pueden realizar un determinado tipo de tcnicas.
* Son equipos cerrados, de tal forma que estn diseados para ser utilizados
exclusivamente con reactivos de un nico fabricante. Ello conlleva un
compromiso entre institucin y laboratorio suministrador cuyo perodo de
tiempo puede ser muy dilatado e importante.
* La informacin est en la actualidad incorporada al RIA igual que cualquier
otra tcnica analtica. Ahora bien, esta incorporacin se ha realizado como algo
natural, sin que se haya planteado como negociable. Se trata sencillamente de
un avance comn que alcanza a todos los campos de la tecnologa. Por tanto,
en este sentido, el RIA se encuentra en la misma situacin que otras tcnicas
alternativas. Adems, la tarjeta de presentacin del RIA es su mayor calidad y
su menor costo, por lo que no es necesario recurrir a otras caractersticas para
defender la necesidad y utilizacin de esta tcnica.
* Los servicios deberan evaluar anlisis detallados de los costos reales tanto
en tcnicas de RIA como en las alternativas, delimitando lo que son costos fijos
de costos variables y que se modifican de forma importante en funcin del
nmero de determinaciones realizadas.
* Aun cuando el RIA es altamente sensitivo, exacto, y preciso, hay algunas
desventajas en este mtodo, estas incluyen la vida media corta de los
radioistopos usados como marcadores, y los problemas relacionados con la
exposicin del usuario a los compuestos radioactivos.
* Por lo contrario en quimioluminiscencia el hecho de no utilizar material
radioactivo. El costo para realizar inmunoensayos por mtodo es ms
econmico tericamente.
* Debido que el mtodo de quimioluminiscencia es un mtodo automatizado el
tiempo de elaboracin de la prueba es mucho ms corto y mucho menos
tedioso. Disminuyendo as el riesgo de efectos operadores en las
determinaciones inmunolgicas.
* Se presenta como un alternativa este nuevo mtodo, por que adems de
poseer las ventajas mencionadas anteriores, se pueden realizar muchas
pruebas al igual que con el RIA y algunas otras ms.
* Y no se necesita licencia especial para poder establecer un laboratorio de
medicina nuclear las determinaciones slo la persona con el permiso
correspondiente.
* Con esto tericamente puede decir que el CLIA es un mtodo alternativo para
aquellos laboratorios grandes y pequeos que deseen
* montar estos inmunoensayos sin mayor complicacin como lo es el RIA.
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Fuente: http://www.monografias.com/trabajos11/quimilu/quimilu.shtml