ARTIGO DE REVISO/REVIEW ARTICLE

Transduo de sinal: um olhar sobre a insulina

Signal transduction: an overview on insulin

RIALA6/1082
Adriana LUCHS

1*

Endereo para correspondncia:1Seo de Vrus Entricos. Servio de Virologia. Diviso de Biologia Mdica. Instituto Adolfo
Lutz. Av. Dr. Arnaldo, 355 CEP 01246-902 Cerqueira Csar So Paulo SP Fone: 3068-2909
Recebido: 03/03/2006 Aceito para publicao: 18/05/2006

RESUMO
Os esforos de muitos laboratrios tm concentrado no desenvolvimento de pesquisas e na descoberta
de vias moleculares que atuam na mediao da resposta pleiotrpica da insulina. Os estudos sobre o
mecanismo de ao insulnico levaram a descoberta do receptor tirosina quinase e vrias protenas
ligantes que so diretamente ativadas por meio de stios de tirosinas fosforiladas existentes nesses
receptores. A famlia dos substratos do receptor de insulina (IRSs) so as principais protenas envolvidas
na transduo do sinal intracelular desencadeado pela insulina as quais so encontradas em uma grande
variedade de clulas e tecidos. Esse trabalho de reviso versa sobre o tema referente ao complexo do
receptor de insulina e a cascata de sinalizao induzida por esse hormnio.
Palavras-chave. insulina, receptor insulnico, substrato do receptor insulnico (IRSs), sinalizao
intracelular, stios tirosinafosforilados.
ABSTRACT
Several laboratories efforts largely focus on investigating and discovering the molecular pathways that
mediate the pleotropic insulin responses. Studies on the mechanism of insulin action led to the discovery
of the insulin receptor tyrosine kinase, the central role of tyrosine phosphorylation during insulin signaling
and various signaling binding proteins directly activated by phosphotyrosine motifs occurring in the
activated receptors complexes. Insulin receptors substrate family (IRSs) is the main proteins involved
in intracellular signaling pathways, and it is found in a large variety of cells and tissues. This paper is a
review on insulin receptor complex and the signaling cascades induced by this hormone.
Key words. insulin, insulin receptor, insulin receptor substrates (IRSs), intracelullar signaling,
phosphotyrosine motifs.

SUMRIO
Introduo .......................................................................................................................................... 158
A Insulina ........................................................................................................................................... 158
O Receptor de Insulina (IR) ............................................................................................................... 158
Os Domnios SH2 e SH3 ................................................................................................................... 159
Os Substratos do Receptor de Insulina (IRSs) ................................................................................... 160
Fosfatidilinositol 3 quinase (PI3K) .................................................................................................... 161
Protena Homloga ao Colgeno com Domnio SH2 (Shc) .............................................................. 162
Protena Ras ....................................................................................................................................... 162
A Protena Quinase B/Akt (PKB/Akt) ............................................................................................... 162
Protena Tirosina Fosfatase 1D (PTP1D) .......................................................................................... 162
Protena Tirosina Fosfatase 1B (PTP1B) .......................................................................................... 162
Integrinas ........................................................................................................................................... 162
Referncias ........................................................................................................................................ 163
Rev Inst Adolfo Lutz, 65(3): 157-164, 2006

Luchs A. Transduo de sinal: um olhar sobre a insulina. Rev Inst Adolfo Lutz, 65(3): 157-164, 2006

INTRODUO
A Insulina
A insulina uma protena de pequeno peso molecular
formada por duas cadeias polipeptdicas ligadas por pontes
dissulfetos constitudas por 21 e 30 aminocidos,
respectivamente. Essa protena sintetizada nas clulas
pancreticas como uma longa cadeia de polipeptdios
proveniente de um nico gene, recebendo o nome de prinsulina1. A pr-insulina composta por insulina e peptdeo
C2. Esta molcula clivada por ao de uma enzima proteoltica
aps a cadeia protica dobrar-se em um formato especfico. A
exciso de parte da cadeia polipeptdica de pr-insulina provoca
uma perda irreversvel da formao necessria para a protena
dobrar-se espontaneamente em sua conformao normal1.
Desde o seu isolamento, a insulina o hormnio peptdico mais
intensamente estudado quanto a seu mecanismo de ao,
refletindo sua importncia na biologia humana e medicina. Um
entendimento bioqumico claro dos mecanismos insulnicos
de mxima importncia3.
Insulina o agente anablico mais potente
fisiologicamente conhecido4. Em nvel celular, este hormnio
controla o transporte inico, a captao de glicose e substrato
(ex. aminocidos), bem como a fosforilao e desfosforilao
de enzimas, alm de afetar o metabolismo de carboidratos,
protenas e lipdios. Os efeitos desse hormnio variam desde
respostas rpidas de sistemas de transporte e enzimas (de
segundos a minutos) at modulaes lentas, como proliferao
celular, que pode levar horas para ser expressa. Alm dos seus
bem conhecidos efeitos metablicos, h evidncias de que
exera aes sobre componentes da estrutura celular como o
citoesqueleto. Adicionado complexidade da ao insulnica,
h evidncias que sugerem que esse hormnio exera parte de
seus efeitos metablicos via mudanas no volume celular3. Uma
dvida resta: ainda no est claro se as aes metablicas e
mitognicas da insulina compartilham uma via comum ou o
resultado de duas ou mais vias divergentes que emanam de seu
receptor5.
Longe da ativao do receptor, a insulina regula o grau
de fosforilao em serina e treonina, paradoxalmente
estimulando fosforilao de algumas protenas e causando
desfosforilao em outras4. Est claro que algumas, mas no
todas desfosforilaes so efeitos insulnicos que controlam a
elevao de 3, 5- monofosfato cclico de adenosina (AMPc),
sendo a reduo deste nucleotdeo um dos mecanismos
fisiolgicos mais importantes da ao insulnica. bem
estabelecido que a insulina ativa uma, e provavelmente mais,
AMPc fosfodiesterases responsveis pela reduo dos nveis
de AMPc. O hormnio tambm inibe a produo de AMPc
atravs da inibio da adenilato ciclase. Esse efeito faz com
que o AMPc seja um mensageiro secundrio da insulina, embora
no o principal6. Muitas dessas fosforilaes em serina/treonina
so compartilhadas com outros fatores de crescimento. Em
contraste, a desfosforilao de protenas uma caracterstica

158

nica da insulina, incluindo muitas enzimas envolvidas no

metabolismo de glicose e lipdios, tais como piruvato
desidrogenase, glicognio sintetase e lpase sensvel a
hormnio. Portanto essas desfosforilaes parecem ser crticas
para muitos dos efeitos metablicos do hormnio como sntese
de lipdios e carboidratos e inibio de liplise4.
interessante notar que pr-insulina, insulina e fatores
de crescimento semelhantes insulina (IGFs) so peptdeos
intimamente relacionados quanto a sua seqncia de
aminocidos, estrutura tridimensional e atividades biolgicas.
Enquanto a insulina age conhecidamente como um hormnio
endcrino, o fator de crescimento relacionado insulina 1
(IGF-1) classicamente considerado como um regulador
parcrino de crescimento e diferenciao celular. Ambos os
peptdeos se ligam com alta afinidade a distintos receptores
de membrana, os quais compartilham grande homologia. A
pr-insulina capaz de se ligar ao receptor de insulina com
10% menos afinidade que o hormnio original e promove
ativao da sinalizao, mas provavelmente com efeitos
biolgicos diferentes. Em fibroblastos de embrio de frangos
a pr-insulina descrita como mais efetiva que a insulina em
estimular crescimento celular2.
O Receptor de Insulina (IR)
O receptor de insulina (IR) est presente virtualmente
em todos os tecidos dos vertebrados, embora sua concentrao
varie de 40 receptores em eritrcitos circulantes a 200 em
adipcitos e hepatcitos7.
O gene do receptor humano est localizado no brao
curto do cromossomo 19, sendo constitudo por mais de 150
quilobases (Kb) e 22 xons, codificando um cDNA de 4,2 Kb.
Este receptor migra com peso molecular de 300-400 kDa em
eletroforese em gel de poliacrilamida (SDS-PAGE)7. O IR
sintetizado como pr-receptor e sofre uma srie de mudanas
ps-transducionais, incluindo ligao covalente, pontes
dissulfeto, dimerizao e clivagem proteoltica para formar o
tetrmero 228. O IR consiste num heterotetrmero composto
por duas cadeias externas 9, as quais esto localizadas
totalmente fora da membrana e possuem os stios de ligao
insulina7 e duas cadeias transmembrnicas , as quais possuem
o domnio intracelular tirosina quinase9,10 (Figura 1). A Nglicosilao ligada a aspargina presente no receptor uma
modificao necessria para a dimerizao do mesmo,
transporte intracelular e aquisio da capacidade de ligar-se a
insulina. Na subunidade , a glicosilao est envolvida com
transmisso transmembrnica do sinal, enquanto na subunidade
parece promover o processamento do pr-receptor e seu
transporte a partir do retculo endoplasmtico. Pr-receptores
retidos no retculo possuem domnios quinsicos ativos in vitro,
mas so praticamente insensveis s estimulaes insulnicas8.
Uma ou duas molculas de insulina podem se ligar ao
receptor e os stios de ligao exibem um comportamento
cooperativo negativo 7. Esta ligao promove mudanas
conformacionais, movendo os domnios quinsicos para perto,

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permitindo a fosforilao cruzada da tirosina 1.162 e tirosinas

adjacentes presentes na ala de ativao. Depois da fosforilao,
a tirosina 1.162 deslocada do stio ativo e presume-se que ir
estabilizar a nova conformao. Essas mudanas permitem a
ligao do adenosina trifosfato (ATP) e estimulam intensamente
a atividade cataltica do receptor9.
A ativao da tirosina quinase presente na subunidade
do receptor resulta numa imediata autofosforilao de seis
resduos de tirosina, onde a mutao em um dos trs resduos
do domnio quinsico do receptor causa reduo na magnitude
do sinal insulnico e mutao nos trs stios inativa
completamente o receptor. Carel et al11 relatou em fibroblastos
Rat-1 que a deleo de 43 aminocidos do domnio C-terminal
do receptor resulta na dissociao entre efeitos metablicos e
mitognicos da insulina.
Protenas quinases so enzimas que catalisam a
transferncia de grupos fosfatos para resduos de aminocidos
das protenas. No caso do receptor de insulina h uma reao
de autofosforilao, levando a incorporao de grupos fosfatos
dentro da subunidade do receptor. A insulina estimula a
fosforilao do receptor em 3-5 resduos de tirosina, sendo
que esse efeito mximo em 1 minuto. A quinase uma vez
ativada parece manter o estado fosforilado mesmo na ausncia
da insulina3. O receptor de insulina fosforila diretamente
inmeras protenas, incluindo a famlia dos substratos do
receptor de insulina (IRSs), protena homloga ao colgeno
com domnio SH2 (Shc) e protena ligante de fator de
crescimento 2 (Grb-2)12 (Figura 1).
Uma vez ativado, o receptor no sofre desfosforilao
ou desativaes espontneas, sendo necessrio um processo
catalisado por uma protena tirosina fosfatase celular para
reverter os receptores ao seu nvel basal, ou seja, no estado de
quinase inativa. A principal tirosina fosfatase do IR uma
protena integral de membrana chamada LAR (protena integral
de membrana relacionada a antgeno de leuccito)13.
Entre as tirosinas quinases especficas, o grande grupo
dos receptores quinsicos ocupa um lugar especial devido a
sua natureza transmembrnica, pois so capazes de interpretar
diretamente o sinal extracelular e iniciar a cascata de sinalizao
dentro da clula14. Embora, saiba-se que esses receptores
possuam um papel decisivo na tumorignese, importante
enfatizar que eles tambm so reguladores cruciais do
desenvolvimento, crescimento e diferenciao tanto no adulto
quanto no embrio9. Anlises moleculares de tumores humanos
mostram que algumas malignidades esto associadas ao
aumento da expresso ou amplificao de certos protoncogenes
de receptores tirosina quinase. Para esses tumores nota-se uma
forte relao estatstica entre amplificao/superexpresso e o
prognstico clnico. Esses dados suportam a hiptese de que
esses genes esto envolvidos, pelo menos, em estgios tardios
do processo de transformao maligna, com a progresso
tumoral e metstase. O gene humano codificador para o receptor
de fator de crescimento epidrmico (EGFR) encontrado
amplificado em clulas de carcinoma de cabea e pescoo e

em 40% dos gliomas malignos. Rearranjos do DNA nesse gene

amplificado levam a delees no domnio extracelular do
receptor. Esses receptores truncados no se acoplam ao ligante
extracelular, mas exibem uma atividade de fosforilao
constante. Como a formao tumoral geralmente considerada
um processo constitudo de mltiplos passos difcil avaliar
em tumores humanos qual o papel dessas alteraes na
expresso de protoncogenes ou estruturas que poderiam estar
envolvidos na iniciao do tumor, progresso e metstase, ou
seja, qual seria a conseqncia bioqumica e fisiolgica e como
poderiam contribuir para o fentipo neoplsico. Um exemplo
de superexpresso gnica de receptor tirosina quinase como
responsvel na formao de um tumor fornecido pelo modelo
de gnese de melanoma em peixe, onde o agente transformador
identificado foi um novo membro da subclasse I (receptores
relacionados ao fator de crescimento epidrmico-EGF) dos
receptores tirosina quinsicos, o Xmrk (receptor tirosina
quinase do peixe Xhiphophoros semelhante ao receptor de
fator epidrmico)14.
O IR intimamente relacionado com o receptor do fator
de crescimento 1 relacionado insulina (IGFR-1)15, chegando
a exibir 70% de homologia. Sabe-se que concentraes
suprafisiolgicas de insulina ligam-se ao IGFR-1, o qual regula
a proliferao das clulas in vivo e in vitro, atravs de trs
mecanismos diferentes: mitognese, estabilizao e manuteno
do fentipo transformado e proteo das clulas contra
apoptose16. O mecanismo de autofosforilao quinsico
similar ao que ocorre com receptores tirosina quinase
monomricos de fatores de crescimento, como os receptores
para fator de crescimento derivado de plaqueta (PDGFR) e de
fator de crescimento fibroblstico (FGFR) e EGFR 15. A
interao dos ligantes com receptores tirosina quinase
geralmente faz com que receptores monomricos se
oligomerizem no plano da membrana e se autofosforilem atravs
de uma reao intermolecular. Autofosforilao nos resduos
de tirosina dentro do domnio cataltico est associada com
ativao enzimtica, enquanto fosforilaes em regies no
catalticas do domnio citoplasmtico providenciam stios de
ligao para protenas sinalizadoras9. A transfosforilao de
receptores monomricos gera stios que reconhecem protenas
efetoras detentoras de domnios SH2, as quais se associam
diretamente com os respectivos receptores. J a autofosforilao
de receptor de insulina geralmente causa a ativao do seu
substrato, o qual funciona como uma protena de ancoragem
para outras molculas SH215.
O IR tambm fosforilado em resduos de serina e
treonina no estado basal e em resposta a estimulao das clulas
por steres de forbol, anlogos do AMPc e pela prpria insulina.
Algumas fosforilaes em serina diminuem a atividade tirosina
quinsica estimulada pela insulina7.
Os Domnios SH2 e SH3
Vrios componentes da via de transduo do sinal
intracelular contm regies conhecidas como SH2 e SH3. Os

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domnios SH2 e 3 so regies homlogas aos stios no

catalticos da famlia de tirosina quinase Src e, portanto,
respectivamente denominados: homlogo 2 a Src (SH2) e
homlogo 3 a Src (SH3). Os domnios SH2 so formados por
uma cadeia lateral de arginina que interage com grupos fosfotirosina dos receptores tirosina quinsicos e outras protenas
citoplasmticas. Os domnios SH3, por sua vez, apresentam
grande afinidade por resduos de prolina17 e so encontrados
em vrias protenas que se associam ao citoesqueleto e a
membrana. As protenas do citoesqueleto no possuem SH2,
indicando que esses dois domnios no so obrigatoriamente
inseparveis. O papel dos domnios SH3 parece estar envolvido
com localizao subcelular. Sugere-se ento que os domnios
SH2 e 3, quando combinados, confiram aos complexos
multiproteicos, localizao subcelular apropriada para a
ativao de vias de transduo do sinal especficas18.
Os Substratos do Receptor de Insulina (IRSs)
O substrato 1 do receptor de insulina (IRS-1), foi
originalmente descoberto em clulas de hepatoma Fao como
sendo uma ampla banda que surgiu durante a eletroforese em
SDS-PAGE com uma massa molecular de aproximadamente
185 kDa, sendo chamada pp185. Foi subseqentemente
identificado em vrias outras clulas e tecidos estimulados pela
insulina com peso variando de 160 a 190 kDa, sugerindo que
sua fosforilao pode variar ou ser uma mistura de vrias
fosfoprotenas diferentes. O IRS-1 imediatamente fosforilado
aps estimulao insulnica, indicando que exera um papel
importante nos passos iniciais da transduo do sinal psreceptor19 (Figura 1).
A partir de clulas mielides foi descoberta e clonada uma
protena chamada 4PS, a qual exibia grande semelhana com o
IRS-1, sendo posteriormente identificada como substrato 2 do
receptor de insulina (IRS-2) e principalmente expressa no msculo,
pulmo, crebro, fgado, rins, corao e bao20 (Figura 1).
Em adipcitos de ratos a insulina induz a fosforilao
de uma protena de 60 kDa, chamada pp60, a qual pode se
associar a Fosfatidilinositol 3 quinase (PI3K)21. Posteriormente,
essa protena ficou conhecida como substrato 3 do receptor de
insulina (IRS-3)22 (Figura 1).
O substrato 4 do receptor de insulina (IRS-4) foi
identificado por Lavan et al23 sob a denominao de PY160.
Esse novo membro da famlia das protenas IRSs sofria
fosforilao em tirosina aps estmulo com insulina e IGF-1
em clulas HEK293, mas era imunologicamente distinta do
IRS-112 (Figura 1).
As protenas IRSs so compostas por um domnio
terminal NH2 de homologia pleckstrin (PH) e um domnio
ligante a fosfotirosina (PTB), seguido por uma cauda terminal
COOH contendo mltiplas regies fosforiladas em tirosina. Os
domnios PH e PTB so bem conservados em cada uma das
protenas IRSs e possuem uma estrutura quaternria comum,
mas funcionam de maneira diferente quando acoplados ao IR.
Estudos indicam que o domnio PH se ligue a fosfolipdios de

160

membrana ou regies cidas de vrias protenas10,24 e embora

no interajam diretamente com os receptores, esses domnios
aparentemente so necessrios para uma eficiente fosforilao
em tirosina promovida pelo receptor12. O domnio PTB interage
com regies NPEY (N = asparagina; P = prolina; E = glutamato;
Y = tirosina) fosforiladas na regio de justamembrana da
subunidade do IR24. Os domnios PH e PTB do IRS-1 e 2
possuem uma similaridade de 69 e 75%, respectivamente23. O
domnio PH do IRS-4 exibe um alto grau de homologia com o
domnio presente no IRS-1, -2 e 3, sendo de 49, 50 e 43%,
respectivamente. Por sua vez, o domnio PTB do IRS-4 tambm
exibe um alto grau de homologia com o mesmo domnio dos
IRS-1, -2 e 3, sendo 66, 62 e 43%, respectivamente23. A poro
C-terminal dos domnios PH e PTB recebe o nome de domnios
SAIN tambm conhecido por ligante NPXY (N = asparagina;
P = prolina; X = qualquer aminocido; Y = tirosina) de Shc e
IRS-1, sendo que o IRS-1 possui um e o IRS-2 dois. Os
domnios SAIN, tambm chamados domnios no-PTB, so
importantes para a interao com o receptor e esto pouco
conservados entre as diferentes molculas de IRSs12. Esses
resduos so as regies que se ligam s protenas contendo
domnios SH2, incluindo as subunidades regulatrias da PI3K
(p85, p55, p50, p83 e p55 PIK ), Grb-2, protena
multiadaptadora com estrutura de domnios SH3-SH3-SH3SH2 (Nck), protena tirosina quinase citoplasmtica (c-fyn),
fosfatase 2 que contem domnios de homologia SH2 (SHPTP2 ou PTP1 D)24 e fosfolipase C (Plc)12 (Figura 1).
Portanto, os IRSs podem ser vistos como protenas com
mltiplos stios, os quais aps a fosforilao em tirosina ativam
vrias vias sinalizadoras atravs da interao com protenas
contendo domnios SH2. Conseqentemente, vrios efeitos
biolgicos da insulina poderiam ser separados na altura da
fosforilao desses substratos, e mesmo por diferentes stios
presentes nos IRSs. Alternativamente, o tempo de durao e
magnitude do sinal poderia ser um importante fator de
discriminao entre respostas biolgicas diferentes5.
A ocorrncia de quatro IRSs levanta uma questo que
versa sobre a regra fisiolgica de cada uma dessas protenas.
Apesar de similares, as IRSs possuem estruturas, padres de
fosforilao em tirosina pelo IR (e outros receptores) e
associao com protenas contendo domnios SH2 distintos,
inclusive diferenas em relao a sua localizao dentro da
clula, onde o IRS-1/2 esto comumente associados a estruturas
intracelulares, enquanto o IRS-3/4 esto associados membrana
plasmtica25. Muitos estudos sugerem que o IRS-1 medeia
preferencialmente os efeitos mitognicos da insulina e do IGF1, enquanto o IRS-2 parece estar mais envolvido com a gerao
da resposta metablica da insulina26. Outros dados indicam que
in vivo o IRS-1 talvez seja responsvel pela sinalizao de
receptor de IGF-I e o IRS-2 pela sinalizao do receptor de
insulina12. Dados evidenciam que IRS-1/2 compartilham efeitos
biolgicos, uma vez que no decorrer da estimulao insulnica
o IRS-1 e 2 medeiam antiapoptose e sntese de DNA24, mas
exercem papis tecido-especficos, onde o IRS-1 poderia

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exercer um papel proeminente no msculo esqueltico,

enquanto o IRS-2 poderia ser dominante no fgado26.
Enquanto IRS-1 e -2 so expressos ubiquamente, a
expresso de IRS-4 praticamente restrita glndula pituitria
e ao crebro24, principalmente telencfalo e mesencfalo. O
hipotlamo regula o comportamento de fome, acasalamento,
nutrio, crescimento e controla respostas desencadeadas pelo
baixo nvel de glicose no sangue. Essa regio do crebro
contm receptores de insulina, bem como outros receptores
que podem potencialmente requerer o IRS-4 para a transduo
do seu sinal 25. O IRS-4 expresso em clulas humanas,
enquanto sua expresso em tecidos de camundongos est
abaixo do nvel de deteco12.
Fantim et al 25 trabalhando com camundongos
demonstrou que animais desprovidos de IRS-1 so menores
do que os controles e so levemente resistentes insulina,
exibem altos nveis plasmticos desse hormnio e fraca
tolerncia a testes de glicose e insulina. Entretanto, seus nveis
sanguneos de glicose so normais no estado alimentado e no
alimentado. Em contraponto, camundongos carentes em IRS-2
apresentam um tamanho semelhante aos seus respectivos
controles, mas desenvolvem diabetes devido a uma combinao
de resistncia insulina e incapacidade de proliferao das
clulas pancreticas. Camundongos sem IRS-3 no
apresentam defeitos no crescimento e nem na homeostase de
glicose. Por fim, camundongos deficientes em IRS-4 no
exibem resistncia insulina e apresentam tamanho
ligeiramente menor. Por esses dados, pode-se inferir que o IRS1 exerce um papel importante no crescimento, enquanto o IRS2 desempenha uma funo admirvel na proliferao das clulas
pancreticas e ambos cumprem ao na responsividade a
insulina dos tecidos mais importantes. Por outro lado, IRS-3 e
4 parecem no ter um papel muito importante em nenhum
desses processos. A falta do IRS-3 pode ser suprida pela
presena de IRS-1 e 2. A ausncia de um fentipo marcante
devido falta de IRS-4 no surpresa, visto que sua expresso
baixa em camundongos12.
Sabe-se que o IRS-4 interage com protenas contendo
domnios SH2 como a PI3K, Grb-2, protena adaptadora II
(Crk-II) e a protena adaptadora semelhante a Crk (CrkL)12,
alm disso, observaes feitas em clulas 32D em relao s
diferenas na transduo do sinal mostraram que o IRS-1 e
4 se ligam fortemente a Grb-2 e aumentam a ativao de
protena quinase ativada por mitgeno (MAPK) durante a
estimulao insulnica. O IRS-4 no possui os stios de ligao
SH2 na terminao COOH, portanto esta protena promove
uma fraca ativao da PI3K devido inabilidade do receptor
de insulina em fosforilar suas regies YXXM (Y = tirosina;
X = qualquer aminocido; M = metionina). Entretanto, os
sinais mediados pelo IRS-4 so suficientes para estimular a
atividade da PI3K e ativar a protena quinase B/Akt (PKB/
Akt), mas falham em promover a ativao da protena quinase
de frao ribossomal S6 (p70s6k). Na presena de interleucina
3 (IL-3), o IRS-4 promove apoptose atravs de um mecanismo

no conhecido. Esse dado uma demonstrao clara da

diferente capacidade sinalizadora do IRS-4 quando comparado
a IRS-1 e -224.
Os IRS-1 e 2 foram encontrados como componentes
da via de sinalizao de outros receptores como o hormnio de
crescimento (GH), interleucina-9 (IL-9), interferon (INF),
interferon (INF) e o fator inibidor de leucemia (LIF). Esses
receptores de citocinas utilizam vrios componentes da famlia
da Janus quinase (JK) para mediar a fosforilao de IRS-1 e
215. Os outros fatores de crescimento podem ativar os mesmos
intermedirios sinalizadores (geralmente em um grau maior que
a insulina), mas no so capazes de mimetizar os aspectos
metablicos da ao insulnica27.
A via de sinalizao regulada pelo IRS-1 que inibe a
apoptose durante estimulao insulnica talvez seja
independente da PI3K. H ainda estudos que sugerem que os
produtos da PI3K amplificam o sinal antiapopttico
independente da fosfotirosina atravs do recrutamento de
elementos essenciais para a membrana plasmtica24.
Fosfatidilinositol 3 quinase (PI3K)
Fosfatidilinositol 3 quinase (PI3K) um efetor da via
de sinalizao usada por vrios receptores tirosina quinase,
incluindo o IR e o IGF-IR28 (Figura 1).
A PI3K uma enzima heterodimrica sinalizadora
composta por uma subunidade cataltica (p110) associada a
uma subunidade regulatria (p85)24. A p85 formada por um
domnio SH3, domnio que contm homologia regio de
quebra (BCR), flanqueada por duas seqncias ricas em prolina,
dois domnios SH2 e uma regio inter-SH2 que contm o stio
de ligao com a subunidade cataltica p110. A interao dos
domnios SH2 da subunidade reguladora da PI3K com regies
especificas YXXM (Y = tirosina; X = qualquer aminocido; M
= metionina) fosforiladas em tirosina presentes nos prprios
receptores e nas protenas sinalizadoras intermedirias, tais
como IRS-1 e IRS-2, induz a atividade enzimtica da
subunidade cataltica, p11028. Os produtos lipdicos da PI3K
medeiam a ativao de vrias serina/treonina quinases,
incluindo a quinase 1 e 2 dependentes de fosfolipdio (PDK1/
PDK2), PKB/Akt, protena quinase C (PKC), protena
quinase C (PKC), p70s6k, entre outras. Essas serina/treonina
quinases desempenham funes na regulao de vrias
respostas biolgicas decorrentes da ativao de PI3K,
incluindo ativao do transporte de glicose, sntese de
glicognio, sntese de protenas, lipognese, antiliplise,
mitognese e antiapoptose24.
Sabe-se que IR e IGF-1R ativados podem se associar
diretamente com a subunidade p85 da PI3K, a qual interage
com a regio C-terminal dos receptores, portanto, deve
existir um mecanismo de ativao da PI3K independente
dos IRSs. Embora ambos os receptores sejam capazes de
interagir a subunidade p85, isso ocorre de uma maneira
distinta, onde o IR mais eficiente nessa interao,
resultando em respostas diferentes28.

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Protena Homloga ao Colgeno com Domnio SH2 (Shc)

A protena Shc recebeu esse nome devido presena
do domnio SH2 e sua homologia ao colgeno (Fig. 1). Existem
mltiplas protenas Shc, as quais so implicadas na sinalizao
mitognica de vrios receptores tirosinas quinases, incluindo
PDGFR e EGFR, interleucina-2 (IL-2), interleucina-3 (IL-3),
fator estimulador de colnia em macrfago e granulcito (GMCSF) e insulina29.
Protena Ras
A fosforilao em tirosina dos IRSs ou protenas Shc
pelo receptor tirosina quinase induz sua associao com o
domnio SH2 da pequena protena adaptadora Grb-24. O
domnio SH2 da Grb-2 flanqueado por dois domnios SH3,
os quais medeiam a sua ligao com o SOS (Son of
Sevenless). A estimulao de clulas com agentes como
insulina e fator de crescimento derivado de plaqueta (PDGF),
resultam na fosforilao em serina/treonina de SOS e sua
dissociao do complexo Grb2-SOS (Fig. 1). O SOS
responsvel pela troca de guanosina difosfato (GDP) por
guanosina trifosfato (GTP) na protena Ras (codificada pelo
proto-oncogene ras). Uma vez ligada o estado ligado ao GTP,
a Ras se associa com membros da famlia de protenas
quinase Raf (uma quinase de serina/treonina), ativando esta
ltima30. A Raf ativada pode fosforilar a protena quinase
quinase ativada por mitgeno (MAPKK ou MEK), uma
quinase especfica de ao dupla que catalisa a fosforilao
em treonina e tirosina da protena quinase ativada por
mitgeno (MAPK ou ERK), promovendo sua ativao. A
MAPK por sua vez fosforila inmeros fatores de transcrio
nucleares e protenas citoplasmticas envolvidas na
regulao de sntese macromolecular e mitognese, tais como
fosfolipase A2 (PLA2), p70S6K e a quinase S6 ribossomal p90
(p90Rsk)4 (Figura 1). Dessa forma, Ras funciona como uma
molcula chave na converso de sinais antecedentes para
eventos posteriores envolvendo fosforilaes de serina/
treonina quinases 30 . H evidncias que indicam que as
protenas IRSs aparentemente no esto envolvidas com a
ativao da Ras, pois tal ativao ocorre em clulas
desprovidas de IRSs ou expressando um mutante, portanto,
a ativao da Ras deve ser mediada pela fosforilao exclusiva
de Shc. Entretanto, a ativao de Ras insuficiente para
desencadear a mitognese em clulas deficientes em IRSs,
indicando que este tambm deve ser responsvel pelo
acoplamento de outra via independente de Ras, mas importante
para a mitognese dependente de estimulao insulnica15.
A Protena Quinase B/Akt (PKB/Akt)
A regulao da protena quinase B (PKB/Akt) envolve
o recrutamento de vrias quinases para a membrana plasmtica
(Fig. 1). O domnio PH da PKB/Akt interage com os produtos
da PI3K, recrutando a PKB/Akt para a membrana plasmtica e
expondo-a para quinases dependentes de fosfolipdios
associadas membrana. A PDK1 tambm se associa

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membrana plasmtica atravs da interao com o domnio PH

dos produtos da PI3K, catalizando a fosforilao da PKB/Akt30.
Protena Tirosina Fosfatase 1D (PTP1D)
Protena tirosina fosfatase 1D (PTP1D), tambm conhecida
como SH-PTP2, SH-PTP3, PTP2C e Syp, uma enzima
citoplasmtica com dois domnios Src (domnios de tirosina
fosforilas) de homologia 2 (SH2), sendo expressa numa grande
variedade de tipos celulares (Figura 1). Aps estimulao das
clulas com vrios fatores de crescimento distintos, PTP1D tornase fosforilada em tirosina e associa-se com receptores ativados ou
tirosina quisases citoplasmticas via seus domnios SH2. Estudos
demonstraram que a PTP1D necessria para a transduo do
sinal gerado pela ativao do receptor de PDGF e de insulina,
sendo capaz de ligar-se ao IRS-1 (Figura 1). Em contraste com o
que ocorre com a via do receptor de PDGF, a ativao do receptor
de insulina no resulta na fosforilao em tirosina dos resduos do
PTP1D, impedindo sua ligao ao complexo Grb2-SOS, indicando
que o efeito positivo dessa fosfatase na sinalizao insulnica deve
ser mediado por outro mecanismo. Sabe-se que seu envolvimento
crtico na sinalizao da insulina esta relacionada com a regulao
da captao de glicose31.
Protena Tirosina Fosfatase 1B (PTP1B)
A protena tirosina fosfatase 1B (PTP1B) esta
predominantemente localizada na superfcie citosslica do
retculo endoplasmtico. Essa tirosina fosfatase exerce o
principal papel na regulao da atividade do IR32, sendo
considerada um regulador negativo da sinalizao insulnica,
aps sua fosforilao direta por esse receptor33 (Figura 1). A
PTP1B no somente desfosforila o IR ativado pela ligao
com a insulina, mas tambm regula o percussor do IR durante
a sua biossntese 32 . Esse fato bem evidenciado em
camundongos knockout, pois mostra que a falta de PTP1B
esta associada a um aumento na sensibilidade insulnica, como
tambm na resistncia obesidade. Esses estudos mostram
que a inibio da PTP1B prove uma via atrativa para a
utilizao desse processo como uma terapia contra o diabetes
tipo 2 e a obesidade34.
Integrinas
Estudos prvios demonstraram a existncia de uma
ligao entre as vias de sinalizao utilizadas pelas integrinas
e aquelas empregadas pelos fatores de crescimento. Acreditase que adeso seja necessria para que os fatores de crescimento
induzam completamente seus efeitos intracelulares. Por
exemplo: integrinas 5 1 exercem sinergia com o sinal
insulnico em clulas ovarianas de hamster chins. Esses efeitos
podem ser mediados atravs do aumento da fosforilao em
tirosina do receptor e de seus substratos, pois as integrinas
podem potenciar a via de sinalizao da insulina e do IGF-1,
atravs da regulao da expresso de IRS-1 (Figura 1). Uma
falha na adeso induz uma rpida diminuio do RNAm do
IRS-1. Sabe-se que as integrinas induzem o recrutamento e

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ativao de tirosina quinases como a protena quinase ativadora

de c-jun (JNK), protena quinase de adeso local (FAK), Src e
a via das MAPK. Alm disso, h evidncias de que as integrinas
podem regular a transcrio do gene que codifica para IRS-1
(Figura 1) via ativao de JNK mediada pela FAK. Tambm
foi demonstrado que FAK interage diretamente com o IRS-1,
levando a fosforilao em tirosina deste ltimo e sua
conseqente interao com protenas que possuem o domnio
SH2, tais como p85, Grb-2 e PTP1 D, alm de ativar a PI3K26.

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Figura 1. Insulina atua via receptores do tipo tirosina quinase presentes na

membrana celular, estimulando a fosforilao dos substratos do receptor
insulnico (IRSs). A fosforilao das protenas IRS(s) em seus resduos de
tirosina inicia uma complexa cascata de transduo de sinal, envolvendo a
captao de glicose, metabolismo, sntese de protenas e sobrevivncia celular.

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