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Manual
de
Manual
de Prcticas
Prcticas del
del Departamento
de
Departamento de
Parasitologa.
Parasitologa Veterinaria
Parasitologa.
Este manual est enfocado a los alumnos que cursen esta materia, servir
como apoyo indispensable en las prcticas dentro del departamento.
Pgina 1 de 105
ndice
Autor 2
Prologo ....7
Agradecimientos .8
3. Propsito del Sistema de Practicas ..9
4 .Encuadre de programa ..10
4.1 Niveles de Competencia Laboral ..11
5. Calendario de prcticas ..13
6. Prcticas generales de seguridad 14
Captulo 1. Recoleccin y Envi de Muestras ...16
Capitulo 2. Identificacin de Huevos de Parsitos .19
Capitulo 3. Mtodos Coproparasitoscopicos .23
Capitulo 4. Mtodo de Mc Mster 27
Capitulo 5. Mtodo de Harada y Mori 31
Capitulo 6. Conservacin de Nematodos y Cestodos 36
Capitulo 7. Identificacin de Ectoparsitos .39
Capitulo 8. Tcnica de Raspado Cutneo .45
Capitulo 9. Tcnica de Microhematocrito 50
Capitulo 10. Diagnostico de Microfilarias 53
Capitulo 11. Diagnostico de Babesia y Anaplasma 57
Capitulo 12. Diagnostico de Trypanosoma Cruzi 64
3
1. PROLOGO
Este manual est planeado para que permita que el estudiante aprenda
sistemticamente la parasitologa en sus diversos aspectos, ante todo, la
tcnica que se emplea en el laboratorio para que ayude al diagnostico de
parasitismo; luego, el estudio de los parsitos propiamente dichos,
agrupados en protozoarios, helmintos y artrpodos.
La finalidad es que este enfoque sistemtico de los aspectos prcticos de la
parasitologa, con su consiguiente apreciacin de las tcnicas de laboratorio y
morfologa de los parsitos, reducir la separacin didctica entre las
lecciones dadas en clase y los estudios prcticos.
Se describe, primero, los mtodos de laboratorio comnmente empleados
para detectar parsitos en materiales procedentes del cuerpo de animales,
as como darle al estudiante la oportunidad de practicar dichos mtodos en
nuestro departamento de parasitologa de la FMVZ de la UANL.
2. AGRADECIMIENTOS
Agradezco a todas las personas que contribuyeron con informacin para este Manual de
Practicas, gracias por su tiempo y paciencia, cuya disposicin hizo posible el
desenvolvimiento de una labor creativa, parcialmente resumida de este manual.
Gracias.
M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya
Unidades de Competencia
1.-Uso de la recoleccion y
procesado de muestras
fecales.
2.-Uso del microscopio en
parasitologa.
3.-Morfologia de las formas
de dispersin.
4.-Tcnicas
Coproparasitologicas.
5.-Determinacin de la
carga parasitaria por
exmenes CPs.
6.-Identificacin de
Artropodos.
7.-Diagnostico de parasitos
sanguineos.
8.-Necropsia demostrativa
donde demuestra todo lo
aprendido.
Competencia
Laboral
Tcnico en
Diagnostico
Parasitolgico
Nivel II
Competencia
Profesional
Parasitologa
Veterinaria
motriz
-Habilidad
manejar
para
adecuadamente el
Microscopio y de
muestras biolgicas.
de
Capacidad
para
observacin
distinguir las formas
de
bsicas
dispersin de los
parsitos.
-Capacidad reflexiva
comprender
para
los fundamentos de
tcnicas
las
coproparasitologica
s.
Destrezas
-Responsable
en el uso de
materiales
biolgicos
potencialmente
contaminantes
e infecciosos.
-Respetuoso
los
por
animales en las
de
prcticas
laboratorio.
-Disposicin
adoptar
para
las
todas
de
medidas
e
seguridad
higiene en el
desarrollo de
las prcticas.
Actitudes
10
LUNES
6
13
20
27
7
14
21
28
MARTES
1
8
15
22
29
MIERCOLES
2
9
16
23
30
JUEVES
3
10
17
24
31
VIERNES
4
11
18
25
SABADO
5
12
19
26
VIERNES
1
8
15
22
SABADO
2
9
16
23
Febrero
DOMINGO
LUNES
MARTES
MIERCOLES
JUEVES
3
10
17
24
4
11
18
25
5
12
19
26
6
13
20
27
7
14
21
28
1 Parcial
Marzo
DOMINGO
LUNES
MARTES
MIERCOLES
JUEVES
7
14
21
28
VIERNES
1
8
15
22
29
SABADO
2
9
16
23
30
3
10
17
24
4
11
18
25
5
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26
6
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27
JUEVES
4
11
18
25
VIERNES
5
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19
26
SABADO
6
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JUEVES
2
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30
VIERNES
3
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17
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31
SABADO
4
11
18
25
Abril
DOMINGO
7
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21
28
LUNES
1
8
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29
MARTES
2
9
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23
30
MIERCOLES
3
10
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2 Parcial
Mayo
DOMINGO
LUNES
MARTES
5
12
19
26
6
13
20
27
7
14
21
28
MIERCOLES
1
8
15
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3 Parcial
11
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13
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CAPITULO 1
COLECCIN Y ENVIO DE MUESTRAS.
INTRODUCCION.
Cucharilla Rectal
Bolsa Estril
Asa Coprlogica
Frasco Vacio
Plumn Indeleble
Congeladores
Hielera
PROCEDIMIENTO
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15
RESULTADOS
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DISCUSIN
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REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
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CAPITULO 2
IDENTIFICACION DE HUEVOS DE PARSITOS.
INTRODUCCION
Bata
Porta objetos
Guantes
Cubre objetos
PROCEDIMIENTO
El primer paso es saber a qu objetivo buscar?
5x, 10x, 40x, 100x?
Muestra
Porta
objetos
Objetivos
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19
19
RESULTADOS
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DISCUSIN
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REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
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CAPITULO 3
Esta
S.A.S.
BATA
PORTA OBJETOS
COLADERA
GUANTES
CUBRE OBJETOS
EMBUDO
MICROSCOPIO
MORTERO
SOLUCION SALINA
PROCEDIMIENTO
Se colocan en el mortero de 8 a 15 gramos de heces (tratar de no exceder en
cantidad), se agregan una gotas de solucin glucosada (S.A.S.) se mancera
hasta obtener una pasta.
Vaciamos en el embudo y con el colador al tubo de ensayo.
Dejamos en el tubo de ensayo una cpula de la muestra.
Aplicamos el cubre objetos sobre la boca del tubo de ensayo.
M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya
21
21
Esperamos de 10 a 15 min.
Retiramos el cubre objetos, observamos que se adhiri a l una capa de la
muestra, despus lo colocamos sobre un porta objetos y observamos al
microscopio la muestra.
DIRECTO
PORCEDIMIENTO
Esta tcnica tiene la ventaja de ser rpida y de utilizar poco equipo, pero la
desventaja de ser poco confiable debido a la pequea cantidad de heces que
se utiliza.
Con una haza coprlogica se obtiene la muestra ya sea directamente del
paciente o de la muestra refrigerada, se depositan 3 a 5 gramos de muestra
fecal sobre el porta objetos.
Con un palillo de dientes se mancera se agrega solucin salina para crear una
pasta homognea.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Manual de Parasitloga
Universidad Nacional Autnoma de Mxico
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Departamento de Parasitologa
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CAPITULO 4
METODO CUANTITATIVO DE MC MASTER.
INTRODUCCION
INTERPRETACIN
Si en 45ml habra 3mgs de heces, (relacin 1 gramo por cada 15 ml) si de los
15ml se usa solo 0.15 (Que es el volumen de cada rea de lectura de la
cmara de Mc Master), Luego el factor de relacin para cada rea de lectura
ser de 100 y si la lectura se realiza en ambas cmaras ser de 50. El
resultado se expresa en HPG (huevos por gramo) es difcil calcular el nmero
exacto de parsitos adultos en un animal basndose en este tipo de
mtodos. Debido a que existen muchos factores que intervienen en la
produccin de huevos as como el nmero de huevos presentes en las heces.
OBJETIVO
Permite el recuento de huevos o formas de dispersin de algunos parsitos
con la finalidad de realizar la estimacin de la carga parasitaria del animal.
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25
MATERIAL
Balanza.
Dos recipientes de 50 ml.
Mortero.
Tubo de ensayo de 15 ml.
Pipetas.
Tamiz (colador o bien doble capa de gasa).
Solucin Saturada de ClNa.
Cmara de Mc Master.
PROCEDIMIENTO
1.- Homogenizar 3gms. de heces en 45ml. de agua corriente, con la
ayuda del mortero.
2.- Tamizar y del filtrado se colocan 15ml en un tubo de ensayo.
3.-Sedimentar por espacio de 30 minutos o si se cuenta con
centrifuga centrifugar a 1000rpm/1 minuto.
4.- Eliminar el sobrenadante y remplazarlo con solucin de Cl Na.
5.- Homogenizar y con un gotero tomar una muestra para con esta
llenar la cmara de Mc Master.
6.- Esperar por espacio de 2 minutos para que los huevos y/o quistes
floten y se ubiquen en el campo de lectura.
7.- Se procede a realizar el conteo esto se facilita si se ubica en el
mismo foco ptico donde se encuentran las micro burbujas de aire.
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Ejemplo:
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
http://www.rvc.ac.uk/Review/Parasitology_Spanish/EggCount/Purpose.htm
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CAPITULO 5
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MATERIAL
Tubos de ensayo de 15 ml de capacidad
Tiras de papel filtro cortadas 2 mm menos anchas que el
dimetro del tubo y 2 cm ms largas, con un extremo ms afinado.
Agua destilada, en una pizeta
aplicadores de madera
Gradilla o soporte para tubos
Guantes
Lpiz de grafito
Porta-objetos
Cubre-objetos
PROCEDIMIENTOS
El cultivo de larvas de heces de un animal infectado se hace en un tubo de
ensayo, una delgada capa de heces de 1 a 2 mm se extiende en el tercio
medio de una pieza de papel filtro.
1. Esta pieza es colocada en un tubo de centrifuga cnico de 15 ml.
2. Se depositan 3 ml de agua destilada.
3. Se deposita el papel filtro con las heces, se debe tener en cuenta que
el extremo inferior sin heces contacte con el agua llegando hasta 1 cm
del fondo del tubo y que el extremo superior sin heces sea sujetado
por un tapn de algodn.
4. El cultivo lleva de 7 a 10 das entre 24 y 28C.
5. Cada da se debe verificar si el agua contacta lo suficiente con el papel
filtro, si no se deber agregar agua.
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Figura 5-1. Variaciones de Harada-Mori. Tomado de: Ash L, and Orihel, 1987.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Mtodos para Laboratorios de
Atencin Primaria de Salud
2da. Edicin, 2003
Rina Girard de Kaminsky, M.Sc
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CAPITULO 6
CONSERVACION DE NEMATODOS Y CESTODOS.
INTRODUCCION.
Esta prctica nos servir para preservar ciertos parsitos que valga la pena
conservar, para investigaciones futuras o simplemente para observacin
inmediata, la prctica de conservacin se da en la necesidad de identificar a
los parsitos una vez estando fuera del animal y el mtodo ms rpido es por
comparacin.
OBJETIVO
Es el de dar las herramientas necesarias a los alumnos para la conservacin
de los parsitos ms frecuentes en esta regin, ya que el mismo alumno con
esta prctica ser capaz de crear una coleccin parasitaria evitando que las
mismas no se vean daadas por una mala muestra guardada.
MATERIAL
Tubos de ensayo
Alcohol al 70%
Termmetros
SSFE
Formaldehido 4%
Acido Actico 10%
Agua
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PROCEDIMIENTOS
NEMATODOS
La cutcula de los vermes es muy gruesa y por ello, es preferible utilizar para
la fijacin lquidos calientes;
1) El alcohol del 70% o la solucin de formalina al 3-5% deben calentarse a
71-82C.
2) Lavar intensamente los vermes agitndolos en dos o tres cambios de suero
salino fisiolgico.
3) Despus introducir en el fijador caliente.
4) Una vez que el lquido se ha enfriado deben incluirse en fijador nuevo. (En
la mayora de los casos es adecuado un fijador compuesto de formaldehido al
4% y cido actico al 10%. Se obtiene aadiendo 10 ml de formalina y 10 ml
de acido actico glacial a 80 ml de agua).
CESTODOS
Antes de proceder a su fijacin debe intentarse lavarlos en solucin salina
fisiolgica, teniendo en cuidado de no romperlos ni dejar que se anuden.
Se fijaran despus en formalina al 5 10%, movindolos con una pinza
mientras se introducen en el liquido fijador o bien sumergindolos repetidas
ocasiones en el liquido y dejando que cuelguen entre las inmersiones
suspendida por una pinza.
Esta ligera traccin los mantiene en posicin extendida correcta y facilita el
examen posterior.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Tcnicas de Diagnostico en Parasitologa Veterinaria
Consuelo Almazn Garca UAT
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CAPITULO 7
IDENTIFICACION DE ECTOPARASITOS
INTRODUCCION
OBJETIVO
En esta prctica los alumnos aprendern a observar e identificar los
ectoparsitos ms comunes (pulgas y garrapatas), ye que son un problema
para los animales domsticos y salvajes y unos de los principales vectores de
enfermedades zoonticas, al finalizar la prctica el alumno tendr el
suficiente conocimiento para identificar y diagnosticar cualquier problema de
ectoparsitos.
MATERIAL
Porta-objetos
Agujas y/o alfileres
Estereoscopio
Cmara fotogrfica
Gua de identificacin
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PROCEDIMIENTO
Los especmenes deben ser colectados de su hbitat, ya sea en fase parasita
o en vida libre.
En el caso de las garrapatas (artrpodos) adheridas a su hospedador, los
ejemplares deben ser desprendidos a contrapelo mediante suaves
movimientos de traccin que debern efectuarse con los dedos, para evitar
el desprendimiento del gnastoma y que este quede adherido a la piel del
husped.
Y en las pulgas, se toman directamente del husped, antes de que esta salte
o se esconda entre el pelo, es importante recomendar tener un tubo con
alcohol para poder procesar las muestras
La muestra debe estar MUERTA y en alcohol.
Posteriormente pasamos a tomar el espcimen y colocarlo junto con
una gota de alcohol en el porta-objetos.
Despus lo colocamos bajo el objetivo del estereoscopio.
Y con la ayuda de la gua tratamos de identificar el ectoparsito.
GARRAPATAS GUIA
Figura 7-1.
Diferentes
garrapatas de la
regin.
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39
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Dermacentor
Amblyoma
Ixodes
Boophilus
Rhipicephalus
Haemaphysalis
PULGAS GUA
40
DOG FLEA
Ctenocephalides
Canis
CAT FLEA
Ctenocephalides
felis
NORTHERN RAT FLEA
Nosopsyllus
Fasciatus
SQUIRREL FLEA
Orchopeas
howardii
HUMAN FLEA
Pulex
irritans
ORIENTAL RAT FLEA
Xenopsylla
cheopis
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Courtesy of US Public Health Service, CDC.
Tcnicas de Diagnostico en Parasitologa Veterinaria
Consuelo Almazn Garca UAT
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CAPITULO 8
TECNICA DE RASPADO CUTANEO
INTRODUCCION
TIPOS DE RASPADO
La profundidad del raspado vara en funcin del parsito que busquemos:
Raspado superficial: para detectar parsitos de los gneros de Cheyletiella
spp., Otodectes spp., Sarcoptes spp. o Notoedres spp.
Raspado profundo (hasta provocar el sangrado capilar): para evidenciar la
presencia de parsitos del gnero Demodex.
MATERIAL
Hoja de bistur
Aceite mineral
Portaobjetos
Cubreobjetos
Hisopo
Solucin Salina Fisiolgica
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PROCEDIMIENTO
Se debe rasurar el pelo de la zona que se va a raspar. Entonces se coloca una
gota de aceite en el porta y desde all se impregna el borde de la hoja de
bistur que se utilizar para raspar. Es necesario pellizcar la zona rasurada y
raspar el pliegue (figura 8-1).
El material recogido con la hoja de bistur se coloca en el portaobjetos, y se
homogeniza con el aceite. A continuacin se tapa con el cubreobjetos para
impedir que el material se seque, y se observa al microscopio (figura 8-2).
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En el caso del odo es diferente ya que hay parsitos donde son especficos
de esta zona (Otodectes cynotis), aqu se usa una tcnica diferente;
utilizamos un hisopo humedecido previamente con S.S.F y se introduce en el
odo, posteriormente sacamos el hisopo y lo frotamos suavemente en el
porta-objetos.
Aadimos una gota de S.S.F a la muestra fijada en el porta-objetos,
colocamos el cubre-objetos y checamos al microscopio.
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ACAROS COMUNES
SARNA DEMODESICA
SARNA SARCPTICA
CAROS DE LA OREJA
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
La Clnica Da a Da.
Ateuves No. 8, 2008
Principales caros en perros y gatos.
Bayer. 2002
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CAPITULO 9
TECNICA DE MICROHEMATOCRITO.
INTRODUCCION
Es una tcnica importante ya que por medio de esta podemos saber el nivel
de anemia de nuestro paciente o inclusive detectar parsitos sanguneos, de
cualquier especie.
OBJETIVO
El alumno al terminar esta prctica tendr el conocimiento de poder
desarrollar esta tcnica y poder expresar los valores determinados de esta
prueba y as llevar un tratamiento eficaz.
MATERIAL
Capilares
Micro-Centrifugadora
Tabla de Valores
Muestra
Cera de plstico cinlico
Regla de microhematocrito
PROCEDIMIENTO
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
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CAPITULO 10
DIAGNOSTICO DE MICROFILARIAS.
INTRODUCCION
OBJETIVOS
Que el alumno pueda diagnosticar por varios mtodos la presencia de
microfilarias en sangre, as poder llevar un tratamiento efectivo, en conjunto
con lo aprendido en el saln de clases.
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MATERIAL:
* Sangre problema
* Centrfuga
*Wright colorantes
*Guantes
* Gradilla
*Pipeta Pasteur
*Formalina al 2%
* Bata
*Tubos de centrfuga
* Acido actico al 3%
PROCEDIMIENTO:
METODO DE SUERO
TAMBIEN SE PUEDE UTILIZAR LA TECNICA DE MICROHEMATOCRITO PARA
DETECTAR LA PRESENCIA DE MICROFILARIAS EN LA SANGRE.
Se obtienen mayores resultados en la observacin del suero por la
concentracin de larvas, se prefiere obtener la muestra durante la tarde o
noche para apreciar un intenso movimiento serpenteante.
Se coloca en un tubo de centrfuga 1 ml de colorante de Wright en 5 ml de
sangre, posteriormente se agregan 5 ml de ac. Actico al 3%, se centrifuga
durante 5 minutos a 1500 rpm y se deja reposar, despus con la pipeta se
toma una muestra del sedimento y otra de la superficie y se coloca cada una
en un portaobjetos y se observa al microscopio.
METODO DE GOTA GRUESA
Esta tcnica se recomienda cuando la fase aguda de esta parasitosis se haga
presente
Procedimiento:
Se coloca una gota de la sangre problema en el centro del portaobjetos a
utilizar y esta se tiene que extender en el portaobjetos con movimientos
rotatorios con otro portaobjetos hasta que la gota de sangre se extienda en
un dimetro de 1.25 cm, se deja secar en posicin horizontal, esto puede
durar varios minutos, as mismo se tiene que proteger de los insectos y si se
desea se puede hacer tanto tincin como fijacin de la misma y as nuestra
muestra se encuentra lista para ser observada al microscopio.
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TCNICA DE KNOTT
En un tubo de centrfuga se mezcla 1 ml de sangre con 10 ml de formalina al
2%, este se centrifuga durante 3 a 5 minutos a 1500 rpm, posteriormente se
decanta el sobrenadante y se mezcla el sedimento en partes iguales con azul
de metileno de 1:1000 y se examina el sedimento teido en el microscopio
compuesto con el objetivo de 40X y/o 100X.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
-TECNICAS DE DIAGNSTICO EN PARASITOLOGA VETERINARIA, 1999
UAT
MVZ.CONSUELO ALMAZN GARCA
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
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CAPITULO 11
DIAGNOSTICO DE BABESIA Y ANAPLASMA.
INTRODUCCION
Que es la Babesia?
Comnmente conocido como piroplasma, la Babesia canis y Babesia
gibsoni son parsitos (protozoarios) intracelulares eritrocitarios de los
perros y se trasmiten por picaduras de garrapatas ixdidas.
Miembros de Phylum Apicomplexa Transmitidos por Artrpodos
El perro es hospedador de al menos dos especies de piroplasmas del
genero babesia, es principalmente un parasito de los artrpodos, en
los que se desarrollan y fusionan los gametos. La reproduccin sexual
tiene lugar en el perro.
Una vez en la corriente sangunea, los trifozoitos de babesia canis se
introducen en los eritrocitos y experimentan repetidas divisiones
binarias de modo que un eritrocito puede contener una, dos o
mltiples parejas de parsitos hasta que la membrana celular se
distiende al mximo. La rotura de los eritrocitos parasitados y la
liberacin de su carga de trofozoitos permite la invasin de nuevos
eritrocitos y da lugar a una parasitema transitoria. Des pues de tres o
cuatro das los parsitos desaparecen de la sangre y reaparecen a los
10 das en mucha mayor cantidad para volver a repetir el proceso.
En la naturaleza las garrapatas ixdidas actan como vectores y
reservorios de todas las piroplasmosis incluyendo las de los perros.
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55
Que es Anaplasma?
La Anaplasmosis es una enfermedad infecto-contagiosa de los
bovinos caracterizada por producir una anemia progresiva, asociada
a la presencia de cuerpos de inclusin intracelular.
La Anaplasmosis bovina es causada por la rickettsia ( Anaplasma
marginale, parsito obligado de los eritrocitos. Es la enfermedad
hemoparasitaria de mayor distribucin mundial, afecta a bovinos y
a rumiantes silvestres, ovinos y caprinos rara vez son afectados. La
Anaplasmosis se transmite biolgicamente por garrapatas
infectadas de varios gneros incluyendo Dermacentor,
Amblyomma, Boophilus y mecnicamente, es transmitida por
fmites contaminados (transmisin iatrognica).
Los bovinos afectados desarrollan anemia hemoltica, prdida de
peso, aborto, baja de produccin de leche y mortalidad aproximada
del 36%.
OBJETIVO
Que el alumno desarrolle la capacidad de poder identificar y tratar este
parasito y/o bacteria, ya que en esta prctica podrn hacer un diagnostico
sanguneo por medio de un frotis y as poder reconocer este parasito y
bacteria.
MATERIAL
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PROCEDIMIENTOS
1. Utilizar un porta objetos limpios y secos
2. Colocar una gota pequea de sangre en un extremo del porta objetos.
3. Contactar este con otro porta objetos, en un ngulo de 45 y hacerlo
correr hacia el otro extremo.
4. Obtener un frotis fino y homogneo y secar inmediatamente al aire.
5. Teir con Giemsa o Wright.
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57
Procedimiento de la tincin:
1. Sumergir el frotis en la sol. Fijadora 5 veces durante 1 segundo cada
vez, dejar escurrir el exceso.
2. Sumergir el frotis en el Hemocolorante UNO, 5 veces durante 1
segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.
3. Sumergir el frotis en el Hemocolorante DOS, 5 veces durante un
segundo cada vez, dejar escurrir el exceso.
4. Lavar con agua destilada y dejar secar.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
Colaboracin del MVZ. MC. MARCO ANTONIO CANTU MARTINEZ
Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI
61
61
CAPITULO 12
DIAGNOSTICO DE TRIPANOZOMA CRUZI.
INTRODUCCION
OBJETIVO
Que el alumno aprenda a identificar y diagnosticar correctamente esta
enfermedad zoontica, desde aprender a reconocer al insecto vector hasta
Identificar y reconocer este protozoario sanguneo; mediante observacin
directa y el frotis sanguneo, asimismo conocer el grado zoontico que tiene.
MATERIAL
Sangre positiva a Trypanosoma Cruzi
Cubre / Porta objetos
EDTA
Aceite Inmersin
Lentes de proteccin
Cubre boca
Guantes
Bata
62
MODO DE TRANSMISION
La va ms importante es a travs de las heces del insecto, que al picar la piel
del hombre, elimina el tripomastigote metacclico, penetra por la zona de la
picadura o a travs de las mucosas. Otras formas son: por transfusin
sangunea (el tripomastigote se mantiene viable por dos meses en muestras
de sangre refrigerada), trasplante de organos, manipulacin de sangre y de
animales infectados, y por compartir jeringas. Tambin por pasaje
transplacentario (chagas congnito).
UBICACION
Es en el torrente sanguneo como tripomastigotes, y en el interior de las
clulas como amastigotes. En la fase aguda se diseminan por todos los
rganos teniendo preferencia por el msculo estriado, sistema nervioso
central y ganglios del sistema nervioso autnomo.
63
Presenta tres formas distintas: amastigota, epimastigota y tripomastigota.
63
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PROCEDIMIENTOS
OPCIONES PARA EXAMEN MICROSCPICO DE LA SANGRE:
Se puede examinar la sangre por: Tincin gruesa Extendido fino.
El examen ms sencillo es el de examinar una gota de sangre en fresco del
paciente sospechoso entre porta y cubre o coloreada para reconocer
tripanosomas mviles.
PRECAUCIN
Todo personal de laboratorio que trabaja con muestras procedentes de
pacientes sospechosos de tener tripanosomiasis americana o muestras de
cultivos de T. cruzi debe tomar medidas de seguridad y buena prctica de
laboratorio.
Los tripomastigotes son altamente infectantes y algunas cepas del parsito
son ms virulentas que otras.
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
-Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI
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CAPITULO 13
DIAGNOSTICO DE EHRLICHIA CANINA.
INTRODUCCION
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OBJETIVO
El alumno aprender a detectar y diagnosticar la ehrlichiosis canina, por el
mtodo de frotis sanguneo y por el serolgico que es a base de una prueba o
kit donde el mtodo es detectar anticuerpos para la deteccin de E. canis.
MATERIAL
PROCEDIMIENTOS
Muestra de Sangre
1. Primero hacemos un frotis con la sangre problema.
2. Lo teimos.
3. Y buscamos en el microscopio.
El diagnstico se puede realizar observando mrulas o cuerpos de
inclusin de E. canis en el citoplasma de linfocitos y monocitos en un frotis
sanguneo teido con las tcnicas habituales. Desgraciadamente, E.canis
aparece transitoriamente en la sangre y, especialmente, durante la fase
aguda por lo que son muchos los perros con ehrlichiosis en los que no
encontramos estos cuerpos de inclusin. Tambin se puede intentar
establecer un diagnstico etolgico a partir de muestras de mdula sea,
ganglio, etc.
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Prueba serolgica
EL kit de prueba Ehrlichia canis est diseado para detectar anticuerpos
Ehrlichia canis en sangre, suero o plasma. Los resultados de la prueba
aparecen en lneas de control (C) y prueba (T) en los que se usan
principios de inmunocromatografa.
1. Van a depositar una gota de sangre con la pipeta pasteur en la fosa,
van a esperar que se absorba.
2. Y posteriormente aaden una gota de Buffer, esto es hasta que la
primera gota se haya absorbido completamente.
3. Posteriormente va a esperar 10 minutos para el resultado.
Interpretacin de los resultados:
Deber aparecer una banda prpura sobre la lnea control sin importar el
resultado de la prueba. La presencia de otra lnea como lnea de prueba
determina el resultado.
Lnea de control (C): La lnea debe aparecer siempre sin importar la
presencia de anticuerpos Ehrlichia canis. Si no aparece esta lnea, debe
considerar la prueba como no vlida. Y deber ser repetida.
Lnea de prueba (T): La presencia de anticuerpos Ehrlichia canis determina
la presentacin de la lnea de prueba
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
-Manual de parasitologa.
Juan Jos Zarate Ramos
2007
-Parasitologa en clnica canina, 1994
J.R. GEORGI
M.E. GEORGI
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CAPITULO 14
EXAMEN DE ORINA.
INTRODUCCION
MATERIAL:
*Frasco vaco para centrfuga
*Cinta adhesiva
*Lupa
*Pipetas Pasteur
*Sonda de bajo calibre
*Guantes
*Catter vaginal
*Centrfuga
*Bata
PROCEDIMIENTO:
La orina primeramente se examinar ante todo a simple vista o con ayuda de
una lupa para ver si contiene algn verme evacuado espontneamente. Para
realizar el exmen, microscpico se diluye la orina con agua destilada, se
centrifuga durante 3 minutos y el sedimento se lleva con ayuda de una pipeta
al portaobjetos para su examinacin. Tambin se puede dejar que la orina
sedimente en una copa de fondo agudo, para proceder seguidamente al
examen del sedimento de la forma anteriormente descrita.
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M.V.Z. Raymundo Israel Prez Zumaya
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RESULTADOS
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DISCUSION
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REFERENCIAS
L. Nemeseri, F. Hollo. Diagnstico parasitolgico veterinario. Editorial Acribia
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CAPITULO 15
NECROPSIA PARASITOLOGICA.
INTRODUCCION
OBJETIVO
Adquirir el conocimiento y las habilidades necesarias para el reconocimiento
de los parsitos y su localizacin dentro de cada especie animal.
MATERIAL
Animal domestico
Microscopio de luz
Microscopio estereoscpico
Estuche de diseccin
Mesa de trabajo
Gafas de seguridad
laboratorio
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77
de
Marcador indeleble
Jabn lquido
Hilo camo
Cuchillo
Colador
Cubreobjetos
Centrifuga
PROCEDIMIENTO
Los animales se dejaran en jaulas 1-2 das antes del sacrificio
Reunidos los datos referentes a raza, sexo, estado de carnes, edad, peso,
etc., se procede a la recolecta de los ectoparsitos
Los animales se sacrifican mediante mtodos adecuados
La necropsia se realizara incidiendo por lnea media e inmediatamente se
ligaran las uniones: omaso-abomasal, abomaso duodenal e leo-cecal, para
evitar la migracin de nematodos de un rgano a otro.
Despus se extraer el abomaso, intestino delgado e intestino grueso,
trabajndose de la siguiente manera, cada rgano ser incidido
longitudinalmente y lavado perfectamente con agua corriente,
depositndose el contenido en recipientes, los cuales sern aforados a 1, 2,
3 litros.
Dependiendo de su volumen, de este total se obtendr una alcuota de 100,
200 a 300 ml respectivamente, a la que se le agregara formol al 10% como
conservador para su posterior observacin.
Aparato digestivo
Con una tijera se escinde longitudinalmente el esfago, estomago, rumen,
abomaso, intestino delgado y grueso y recto. A continuacin se examina cada
rgano por separado.
Esfago
Se escinde longitudinalmente y se buscan helmintos en la mucosa, la
submucosa y la serosa con cuidado para recoger los vermes que pudieran
encontrarse; se cortaran los ndulos presentes en el esfago. La
identificacin de los parsitos que no son perceptibles a simple vista se lleva
a efecto examinado cortes de la mucosa. El corte se traslada con la punta de
un cuchillo hasta un portaobjetos, se mezcla con agua, se extiende y se
coloca un cubreobjetos; por ultimo, se examina al microscopio, con pocos
aumentos al principio y luego con ms. En los casos con resultado positivo, se
aparta el parasito con una aguja de diseccin o con un pincel; si el corte es de
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Rumen
El rumen se incide y se extrae el bolo ruminal, buscando los helmintos
adultos en la pared del rumen y las glndulas ruminales; al bolo ruminal se le
realizan lavados y pasajes por cedazos para buscar helmintos, los cuales se
colectan en solucin salina fisiolgica.
Estmago
El contenido del estomago se vierte en un recipiente ancho de vidrio,
agregando 10-20 volmenes de agua y mezclando cuidadosamente, tras lo
cual se deja reposar 5 minutos. Se decantan con cuidado 2/3 partes de la
emulsin y el tercio restante se vuelve a disolver en agua, se deja en reposo 5
minutos y acto seguido se vuelven a verter los 2/3 superiores. Esta operacin
se repetir hasta que las partculas vegetales de las haces se hayan eliminado
en su mayor parte. Las vermes presentes en el estomago pueden
reconocerse sin dificultad en el sedimento sobre el fondo o con ayuda del
microscopio. La mucosa gstrica se examina por medio de cortes. En el caso
de hacer la necropsia en aves, se investigaran detenidamente los estmagos
glandular y muscular, se separara la mucosa crnea de la molleja.
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79
Abomaso
El abomaso se coloca en un recipiente de plstico de
aproximadamente de 5 litros de capacidad y se escinde longitudinalmente
por su cobertura mayor, colectando su contenido en un recipiente;
posteriormente se realizan lavados de la mucosa con agua simple, de
preferencia con pizeta y se procede a la coleccin de los especmenes
adheridos a ella, los cuales se depositan en el recipiente; hecho lo anterior, el
contenido del recipiente se afora a 1, 2 o 3 litros, dependiendo del volumen
colectado y se agita uniformemente en forma de cruz para homogeneizar
perfectamente el contenido del cual se obtiene una alcuota del 10%,
pudiendo ser de 100, 200 o 300 ml dependiendo del volumen total aforado.
A esta se le adicionan 10 ml de formol al 10%. En el caso de querer obtener
especmenes vivos, el resto del contenido aforado se pasa por un cedazo de
500 m de dimetro, los cuales se colocan en solucin salina fisiolgica.
Intestino delgado
El intestino delgado se coloca en un recipiente de plstico y se escinde
longitudinalmente, cuidado de que el contenido se colecte en el recipiente
posteriormente se lava la mucosa del intestino. El contenido colectado se
afora a 1, 2, 3 o 4 litros. Se agita vigorosamente para la homogeneizarlo
perfectamente, de este se obtiene una alcuota del 10% del total pudiendo
ser de 100, 200, 300 o 400 ml, a la alcuota se le adicionan 10 ml de formol a
10% para su conservacin.
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Intestino grueso
Expuesto el intestino grueso se procede a hacer una incisin
longitudinal desde el ciego hasta el recto, cuidando que todo el contenido se
vierta sobre un recipiente, debido a la consistencia del contenido de las
heces, es preciso agregar agua, hasta hacerlo lo mas fluido posible. De
acuerdo con las caractersticas morfolgicas de los helmintos localizados con
este rgano se procede de dos maneras: la primera, es mediante la
obtencin de una alcuota del 10%, tal y como fue sealado para el abomaso
e intestino delgado. La segunda requiere la observacin de la totalidad del
contenido, utilizando cedazos, ya que los helmintos se pueden observar
macroscpicamente. Cuando se hace el homogeneizado es necesario
desbaratar todas las materias solidas para evitar que algunos helmintos
pasen desapercibidos. Es recomendable adicionar formol al 10%, tanto a la
alcuota como a la coleccin de helmintos para su conservacin.
Hgado
Se realiza una minuciosa diseccin del hgado, el contenido de la
vescula biliar se vierte en una placa de petri o en un plato de cristal y la
vescula se examina en capa fina. Los capilares biliares se cortan con tijera en
direccin a la periferia y luego se fragmenta el hgado en pequeos trozos;
los ndulos parasitados hallados se colocan y presionan entre dos portas y se
examinan al microscopio. Luego se introducen los fragmentos de hgado del
tamao de terrones de azcar en un recipiente lleno de solucin salina
fisiolgica, para a continuacin proceder al examen del sedimento.
81
81
Aparato respiratorio
Expuesto el aparato respiratorio, se hace una observacin de la laringe
para bsqueda de helmintos. Posteriormente se escinde longitudinalmente la
trquea y bronquios, recogindose los vermes apreciados a simple vista; se
examinara al microscopio la secrecin traqueal. Para reunir los vermes
localizados en las vas respiratorias mas finas se cortan los pulmones en
fragmentos pequeos, se depositan en un recipiente con solucin salina
fisiolgica y el total se deja en estufa 1-2 horas, en cuyo tiempo los vermes
ascienden a la superficie de la porcin liquida. Los ndulos pulmonares
tambin se examinaran en fresco al microscopio; se cortaran con un cuchillo
bien afilado o con tijera, comprimiendo luego con los dedos que como
consecuencia de esta accin se examina con estereomicroscopio o se prepara
una extensin con el liquido o secrecin; o bien se hace un corte del ndulo,
se humedece con unas gotas de agua y se examina con cubreobjetos.
Aparato circulatorio
El contenido del corazn y de los grandes vasos sanguneos se
estudiara por el mtodo de la sedimentacin; la sangre se examinara en
busca principalmente de microfilarias y el musculo cardiaco se revisara
despus de trocearlo finalmente.
Figura 15.5 Vista de Dirofilaria immitis
en corazn de perro.
(FOTO TOMADA POR M.V.Z. RAYMUNDO ZUMAYA)
82
Aparato genito-urinario
El contenido de la vejiga se vierte en un vaso o en una placa de petri
para su examen. Se seccionaran los riones, as como la pelvis renal, y se
estudiaran con minuciosidad. Se har lo mismo con las secreciones de los
rganos sexuales y cortes de la mucosa. Se comprobara si el oviducto de las
aves contiene Prosthogonimus.
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83
Intestino
delgado
Intestino
grueso
Hgado
Sistema
Ovicaprinos
Haemonchus
contortus
Ostertagia
trifurcata
Ostertagia
circuncincta
Teladorsagia
davtiani
Trichostrongylus
axei
Cooperia
oncophora
Cooperia curticei
Nematodirus
filicollis
Nematodirus
battus
Nematodirus
spathinger
Trichostrongylus
colubriformis
Trichostrongylus
vitrinus
Bunostomun
Trigonocephalum
Strongyloides
papillosus
Moniezia spp.
Oesophagostomum
Venulosum
Trichuris ovis
Chabertia ovina
Dicrocoelium
lanceatum
Fasciola heptica
Dictyocaulus filaria
Bovinos
Haemonchus
contortus
Ostertagia
ostertagi
Ostertagia lyrata
Ostertagia
crimensis
Trichostrongylus
axei
Caninos y felinos
Cooperia
oncophora
Cooperia
mcmasteri
Cooperia punctata
Nematodirus
helvetianus
Trichostrongylus
Longispicularis
Bunostomum
phlebotomum
Strongyloides
papillosus
Toxocara vitulorum
Moniezia spp.
Capillaria putorii
Ancylostoma
caninum
Uncinaria
stenocephala
Toxascaris
leonina
Toxocara cati
Toxocara canis
Apophallus
donicus
Mesostephanus
spp.
Dipylidium
caninum
Taenia pisiformis
Strongyloides
stercoralis
Oesophagostomum Trichuris vulpis
radiatum
Trichuris serrata
Dicrocoelium
lanceatum
Fasciola heptica
Dictyocaulus
Capillaria
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respiratorio
Protostrongylus
rufescens
Muellerius
capillaria
Sistema
circulatorio
Sistema
urinario
viviparus
aerophila
Aelurostrongylus
abstrusus
Angiostrongylus
vasorum
Dirofilaria
immitis
Dioctophyma
renale
Capillaria plica
RECOMENDACIONES
Antes de iniciar la colecta de los vermes es importante tener preparados
recipientes de plstico o de vidrio.
Todos los recipientes debern estar etiquetados con bolgrafos indelebles,
conteniendo la especie animal, raza, identificacin, rgano o
compartimiento, cantidad del contenido y conservador empleado.
REFERENCIAS
L. Nemeseri, F. Hollo. Diagnstico parasitolgico veterinario. Editorial Acribia;
Pg. 75-78
MVZ. Consuelo Almazn Garca. Tcnicas de diagnstico en parasitologa
veterinaria. Primera edicin. Universidad Autonoma de Tamaulipas (1999);
Pg. 40-43
85
85
Datos generales
Titular:
_______________________________________________Tutor:______________
___
Practica:
_____________________________________________
Fecha:
_______________
Alumno: _____________________________________________
Matricula:
_____________
Material
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Identificacin del Animal
Especie:
_____________Raza:_______________Sexo:_______________Edad:_________
_
Estado fsico del animal
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Apertura del Cadver
Sistema respiratorio
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Sistema cardiaco
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
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Sistema Digestivo:
Lengua, esfago y estomago
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Intestino Delgado
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________
Intestino grueso
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________
Hgado
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
Bazo
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________
__________________________________________________________________
________
Sistema Urinario y Reproductor
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
__________________________________________________________________
________
Sistema Nervioso
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________
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87
Conclusiones
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
________________________________________
REGION
_________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_______________?
R=_______________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
_________________________________________
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Anexo I
Valores normales del microhematocrito para cada especie.
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89
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Anexo II
Volmenes aproximados de sangre circulatoria en las diferentes especies
de animales de laboratorio.
91
91
Anexo III
Esquema de cmo entregar los reportes, se entregara un reporte por cada
practica, sea la practica tomada en el laboratorio o fuera de el, sin
excepcin.
92
Anexo IV
REGIONES
Despus de cada prctica tendrn 5 das hbiles para dar las regiones con
sus tutores, al pasar los 5 das y al haber una prctica nueva, no se
aceptaran regiones pasadas, as como tambin les daremos el formato a
firmar por los tutores despus de cada regin aceptada. Este formato le
sacaran copia, cortaran y entregaran a sus tutores.
93
93
Anexo V
Reglamento General del Departamento de Parasitologa
Veterinaria
ARTCULO 1. El presente Reglamento es aplicable en todos aquellos de la
Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia en donde se realice trabajo
experimental, sea de docencia o de investigacin. Estos sitios, para efectos del
presente Reglamento, sern denominados laboratorios.
Su observancia es obligatoria para el personal acadmico alumnos y trabajadores
administrativos y no excluye otra reglamentacin que resulte aplicable.
ARTCULO 2. Es necesario que el personal que trabaja en cada laboratorio
conozca el sistema de alertamiento, las zonas de seguridad, las rutas de
evacuacin, el equipo para combatir siniestros y las medidas de seguridad
establecidas en cada laboratorio.
ARTCULO 3. Los laboratorios debern estar acondicionados, como mnimo con
lo siguiente:
a) Un control maestro para energa elctrica
b) Un botiqun de primeros auxilios
c) Extintores
d) Un sistema de ventilacin adecuado
e) Agua corriente
f) Drenaje
g) Un control maestro para suministro de gas h) Sealamientos de proteccin Civil
segn sea el caso.
ARTCULO 4. Todas las actividades que se realicen en los laboratorios debern
estar supervisadas por un responsable. La Direccin de la Facultad nombrar a
dicho responsable en sus reas correspondientes.
ARTCULO 5. Al entrar al laboratorio cada estudiante deber colocarse en el lugar
asignado por el responsable, permaneciendo ah durante el desarrollo de la
prctica en orden y en silencio.
94
95
95
acceso.
cia. Avisar de
inmediato al encargado de la Seguridad del rea.
ARTCULO 20. Los lugares en que se almacenen reactivos, disolventes, equipos,
materiales, medios de cultivo, y todo aquello relacionado o necesario para que el
trabajo en los laboratorios se lleve a cabo, estarn sujetos a este Reglamento en
su totalidad.
ARTCULO 21. Queda prohibido desechar sustancias al drenaje o por cualquier
otro medio sin autorizacin del responsable del rea correspondiente. Los
manuales de prcticas correspondientes debern incluir la forma correcta de
desechar los residuos.
ARTCULO 22. En cada laboratorio de la Facultad deber existir, de manera clara,
visible y legible, la informacin acerca de los telfonos de emergencia a los cuales
llamar en caso de requerirlo.
ARTCULO 23. Todas aquellas cuestiones que no estn especficamente
sealadas en el presente Reglamento, debern ser resueltas por la Direccin de la
Facultad con la opinin de la Coordinacin de Seguridad, Prevencin de Riesgos y
Proteccin Civil.
ARTCULO 24. Las personas a quienes se sorprenda haciendo mal uso de
equipos, materiales, instalaciones, etc. propias de los laboratorios, de todo aquello
mencionado en el artculo 2 del presente Reglamento, o de las sealizaciones
instaladas para proteccin civil, sern sancionadas conforme a la Legislacin
Universitaria, segn la gravedad de la falta cometida.
ARTCULO 25. En el caso de los alumnos, las sanciones aplicables sern las que
decida el H. Consejo Tcnico, conforme a las disposiciones de la Legislacin
Universitaria.
ARTCULO 26. Tratndose de personal acadmico y administrativo, se levantarn
las actas correspondientes y se dictarn las sanciones conforme a las
disposiciones de la Ley Federal del Trabajo.
96
Anexo VI
Lista de Helmintos patgenos.
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97
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99
99
100
101
101
102
103
103
104
105
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