INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLOGCAS

BIOQUMICA GENERAL

RODRIGUEZ ELIZARRARAS MIGUEL ANGEL

MONROY XOLALPA JAIRLOVICH
4QM1

SECCIN: 4

SEPARACIN DE FOSFOLPIDOS POR CROMATOGRAFA EN CAPA FINA

Introduccin:

Los lpidos son biomolculas orgnicas

formadas bsicamente
por carbono e hidrgeno y
generalmente tambin oxgeno; pero en
porcentajes mucho ms bajos. Adems
pueden contener tambin
fsforo, nitrgeno y azufre.
Los lpidos cumplen funciones
diversas en los organismos
vivientes, entre ellas la de reserva
energtica (como los triglicridos),
la estructural (como
los fosfolpidos de las bicapas) y la
reguladora (como las hormonas
esteroides).
En cambio los fosfolpidos son un
tipo
de lpidos anfipticos compuestos
por una molcula de glicerol, a la
que se unen dos cidos grasos (1,2diacilglicerol) y un grupo fosfato. El
fosfato se une mediante un enlace
fosfodister a otro grupo de tomos,
que generalmente
contienen nitrgeno,
como colina, serina o etanolamina y
muchas veces posee una carga
elctrica. Todas las membranas
plasmticas activas de las clulas
poseen una bicapa de
fosfolpidos.
Las funciones de los
fosfolpidos son diversas
y entre ellas est la
formacin de una bicapa
lipdica que es una
membrana delgada
formada por dos capas
de molculas de lpidos.

Estas membranas son lminas

planas que forman una barrera
continua y delimitan las clulas.
La membrana celular de todos
los organismos vivos y
muchos virus est compuesta de
una bicapa lipdica, y tambin las
membranas que rodean el ncleo de
la clula y otras estructuras subcelulares.
La bicapa lipdica es la barrera que
mantiene a iones, protenas y otras
molculas compartimentadas e
impide su libre difusin. Las bicapas
son especialmente impermeables a
los iones, lo que permite a las
clulas regular las concentraciones
de electrolitos y pH mediante el
bombeo de iones a travs de sus
membranas mediante el uso de
protenas llamadas canales inicos.
Fig.
1

Fig.
2

Objetivos:
Aplicar la tcnica de cromatografa en
capa fina por la separacin de
fosfolpidos de la yema de huevo.

Resultados:

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Anlisis de resultados:
Fig.
3

Fig.
4

La forma de separacin de estos

fosfolpidos dependi
Fig. 1: Cromatoplaca de Molibdato
Fig. 2: Cromatoplaca de Bismuto
primordialmente de su estructura,
Fig. 3: Cromatoplaca de Ninhidrina pues si son fosfolpidos ms polares,
Fig. 4: Cromatoplaca de Yodo
corrern con menor velocidad sobre
Formula:
el eluyente y viceversa.

Distancia recorrida del compuesto

Distancia recorridadel eluyente

Al revelar las diferentes placas

cromatografcas se observa que en
Yodo esta la presencia de 6
manchas,
las cuales indican que
Tabla 1.1 Resultados de Rf de las diferentes
todos los fosfolpidos presentes en
cromatoplacas.
Fosfolipido
Molibda
Bismuto Ninhidri
la yema de huevo, presentan al
to
na
menos uno o ms dobles enlaces.

Rf:

Lisofosfatidilc
olina

Esfingomielin
a

Fosfatatidilse
rina

1.4
=
5.5

1.1
=
5.5

0.25

0.2

2.6
=
5.5

0.47
Fosfatidilcolin
a

Fosfatidiletan
ol amina

3.6
=
5.5

0.65

0.65
-

0.83
Lpidos
neutros

2.9
=
5.5
0.52

3.6
=
5.5

4.6
=
5.5

4.7
=
5.5
0.85

5.3
=0.96
5.5

Para el caso de Ninhidrina esta

prueba permite demostrar la
presencia de grupos aminos libres,
observando la placa y
comparndola con yodo, podemos
ver que la fosfatidilserina y la
fosfatidiletanolamina dan positiva a
esta reaccin, pues ambos
fosfolpidos presentan en su
estructura al menos un grupo amino
libre.
Lisofostatidilcolina y Fosfatidilcolina
en su estructura presentan un grupo
colina, por ende, en la prueba de
bismuto dan positivas: Resaltando
que en la misma placa, apareci
una mancha muy tenue al final de la
lnea de frente, pudiendo especular
que fueran fosfolpidos neutros
(cidos grasos de ms de 12
carbonos, esteroles, ceras entre
otros).

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Finalmente Molibdato dio positivo a

todos aquellos lpidos que tuvieran
mnimo un grupo fosfato, sin
embargo los lpidos neutros son
apolares (no polares) esto quiere
decir que no tienen un grupo
fosfato, sin embargo la
Esfingomielina es un fosfolpido que
presenta grupos fosfato, el hecho
que no apareciera la mancha puede
ser que al momento de sacarla de la
fase mvil (mezcla de cloroformometanol-cido actico-agua
(68:25:8:4)), el analista no haya
marcado la mancha en la
Cromatoplaca, o bien esta haya sido
muy tenue.
Conclusiones:
La estructura qumica del fosfolpido
depender mucho en una
cromatografa en capa fina, pues su
diferencia de polaridad con respecto
a la fase mvil, nos permitir
caracterizarlos mediante pruebas
especficas.
Preguntas extra:
Cul ser el perfil de fosfolpidos de los
siguientes extractos cuando se
comparan con el huevo de gallina?
1. Huevo de codorniz
2. Huevo de guajolota

3. Huevo de pata
4. Huevo de tiranosaurio Rex
5. Cerebro de ratn
El tiranosaurio Rex antiguamente fue un
reptil en poca prehistrica, ovparo por
su tipo de reproduccin; La materia
siempre se transforma, pero deja parte
de ella, posiblemente generaciones
posteriores, hayan modificado sus
genes y con ello todos los animales de
la lista que son ovparos, excluyendo al
ratn, tengan ciertas similitudes con
respecto a este tipo de biomolcula,
pues la evolucin no solo ocurre a nivel
macroscpico, sino tambin a nivel
molecular.
El ratn al ser un mamfero y por ende
vivparo, puede presentar diferentes
tipos de fosfolpidos, al comparar un
cerebro de ratn con un huevo de
gallina, las estructuras y
funcionalidades de los lpidos cambian
de acuerdo al lugar de origen y las
necesidades biolgicas, donde
posiblemente exista la presencia de
esfingocinas en este mamfero.

Bibliografia:
Lubert Stryer .Bioqumica. Editorial
reverte. Sexta edicin 2008. Pp 617621.
https://es.scribd.com/doc/38154735/
CROMATOGRAFIA-DE-LIPIDOS