INSTITUTO POLITECNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

INGENIERO BIOQUIMICO
FONSECA CHAVEZ PAOLA ANTONIA / RAMIREZ FLORES CESAR DAVID
3IM2 SECC 2

CARACTERIZACION ESPECTROFOTOMTRICA
Y METODO DE PLACA FINA PARA EL DNA
OBJETIVOS

RF segunda columna que corresponde a Citosina

es: 0.18

y RNA por el mtodo de capa fina.

RF tercera columna que corresponde a Guanina es:

0.26

-Calcular la concentracin y pureza del DNA por el

espectro de absorcin que contiene.

RF cuarta columna que corresponde a Adenina es:

0.35

Introduccin

RF quinta columna que corresponde a Uracilo es:

0.86

El ADN o bien cido desoxirribonucleico es una

molcula de gran tamao que est formado por la
unin paralela de dos cadenas, donde cada cadena
est formada por 4 diferentes nucletidos.

RF sexta columna que corresponde a Tiamina es:

0.65

-Identificar que bases nitrogenadas contiene el DNA

El ADN de manera global dirige la sntesis de todas

las protenas, en trminos ms sencillos el ADN es
una acumulacin de genes y cada gen es la clave
para la produccin de una protena.

RESULTADOS

Longitud
de onda
200
205
210
220
225
230
235
240
245
250

Absorbanci
a
.330
.570
.597
.762
.607
.585
.636
.780
.925
1.080

Longitud
de onda
255
260
265
270
275
280
285
290
295
300

absorbanci
a
1.147
1.263
1.235
1.134
.950
.749
.528
.332
.188
.114

espectro de adsorcion de DNA

1.5
1
0.5
0
210 230 250 270 290 310
200 220 240 260 280 300 320

Para calcular RF

RF=

Distancia del la sustancia

Distancia del disolvente

|260|nm
xFD
22500

[ DNA ]=

La primera columna es de DNA, calculando sus RF

de abajo para arriba son:
a) 0.27 b) 0.35 c) 0.56

[ DNA ]=

1.263
3
x 100=5.61 x 10
22500

1.0 Abs -------------50g/mL

1.263 Abs-------------------63.15g/mL

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pureza=

|260|
2.0
|280|

pureza=

1.263
1.68
.749

2
---------------100%
1.68 ---------------84.31%

CONCLUSION
Se puede concluir que para realizar las
cromatografas en capa fina es mejor utilizar DNA y
RNA pool ya que se separa mejor, tambin
demostramos eficazmente la presencia de Guanina
Citosina Adenina y Timina en DNA y Citosina
Adenina
Uracilo
y
Guanina
en
RNA
De la misma forma obtuvimos el espectro general
caracterstico de DNA vegetal observado que no se
encontraba 100% puro

DISCUCIN
Al observar la placa se puede decir que el DNA
contiene Guanina y Adenina esto solo observando
la placa, lo cual se puede decir que falto mayor
separacin ya que el DNA por datos reportados se
sabe que tambin tiene Tiamina y Citosina.
AL realizar el procedimiento se corri la muestra de
RNA de tal manera que no se pudo observar lo que
contiene.
El espectro de absorcin nos representa que la
dilucin contiene protenas y algunas otras
sustancias que se pueden leer a distintas
absorbancias. EN pureza esto tambin nos
representa ya que no es 100 pura si no presenta un
84.31% sin embargo hay una mnima concentracin
de DNA a la solucin

BIBLIOGRAFA
Gerard J.Tortora, Berdell R.Frunke, Christine L.
Case. Bioqumica Experimental Ed. Mdica
Panamericana, 2007. P.123-124