UNIVERSIDADE FEDERAL DE CINCIAS DA SADE DE PORTO ALEGRE

CURSO DE FARMCIA
MODELAGEM MOLECULAR

Luana Dimer Hainzenreder

RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR

Porto Alegre
2013

UNIVERSIDADE FEDERAL DE CINCIAS DA SADE DE PORTO ALEGRE

CURSO DE FARMCIA
MODELAGEM MOLECULAR

Luana Dimer Hainzenreder

RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR

Prof. Dr. Rafael Andrade Caceres

Porto Alegre
2013

1. RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR

Em 1946, os primeiros estudos sobre ressonncia magntica nuclear (RMN)
foram publicados acerca de estudos realizados com slidos por Purcell em
Harvard e com lquidos por Bloch em Stanford[1-2]. Deste de ento, o enorme
avano dessa tcnica, principalmente nas ultimas dcadas, permitiu que a
mesma pudesse ser empregada na resoluo de estruturas tridimensionais de
protenas de peptdeos em soluo independentemente de informaes de
cristalografia, alm da crescente aplicao da mesma na resoluo de outras
estruturas, como cidos nuclicos, em substituio as tcnicas anteriormente
utilizadas. No entanto, o elevado custo para implantao da infraestrutura
necessria para a utilizao de RMN e manuteno dessa infraestrutura ainda
uma barreira para sua difuso, fazendo com que seu uso, atualmente, se
restrinja apenas a grupos de excelncia[3].
De modo geral, a RMN uma propriedade fsica apresentada por determinados
elementos quando excitado pela aplicao de campo magntico sobre o
mesmo a determinada frequncia, fazendo com que o mesmo emita um sinal
quando retorna ao estado originrio[3-4]. Assim, a RMN se caracteriza como
uma tcnica de espectroscopia, pois estuda a interao da radiao
eletromagntica (REM) com a matria, no entanto, a particularidade da RMN
em relao a outras tcnicas que tambm utilizam a espectroscopia est no
fato de essa interao com a matria se dar com o campo magntico e no
com o eltrico, sendo utilizadas ondas na regio da radiofrequncia, as quais
podem ser absorvidas pela matria conforme as caractersticas da mesma e
em condies determinadas[3].
Como grandeza fsica, utilizado o spin nuclear, propriedade apresentada por
ncleos que apresentam um nmero impar de prton ou nutrons (ou ambos),
que assumem um comportamento caracterstico de momento angular, capaz
de gerar um momento magntico (representado por ), uma vez que uma carga
em movimento gera um campo magntico. Esses momentos magnticos so
descritos atravs do numero de spin I, que so determinados por clculos da
mecnica quntica e podem ser 0, , 1, 3/2[3, 5]. Quanto aos tomos com

massa atmica e nmero atmico pares, esses no possuem spin, ou seja,

apresentam spin igual a zero e no podem ser detectados por RMN[3].
Na ausncia de um campo magntico, no entanto, os spins nucleares
apresentam orientao aleatria e se cancelam de forma que nenhum
momento magntico detectvel nesse estado, mas quando um campo
magntico externo de alta intensidade e homogneo aplicado, os spins
nucleares tendem a assumir determinadas orientaes e se alinharem no
mesmo sentido do campo magntico aplicado e o nmero de orientaes que
um ncleo pode assumir determinado pelo nmero de spin I, conforme a
relao: nmero de spin I + 1[3-4]. Essas diferentes orientaes representam
diferentes estados energticos, uma vez que um ncleo com um spin cria seu
prprio campo magntico, esse pode estar no mesmo sentido do campo
magntico aplicado ou em sentido contrrio, sendo o primeiro o estado de
menor energia ( ou +) e o segundo o de maior energia ( ou ), menor
ser a energia desse estado e a diferena de energia entre esses nveis esta
associada principalmente a intensidade do campo magntico aplicado (B0), que
quanto maior, maior ser a diferena de energia entre os nveis (Figura 1), iIsso
se torna importante quando ambientes qumicos semelhantes so analisados
por RMN, uma vez que sero necessrios campos muito intensos para a
obteno de uma boa resoluo[3, 5].

Figura 1. Movimentao de spins sob aplicao de campo magntico externo

(B0) (Adaptado de Oliveira, 2008).

A proporcionalidade entre o momento angular e o momento magntico nos d

a constante de proporcionalidade e determina a frequncia de ressonncia do
ncleo, a qual apresenta um valor nico para cada ncleo. Alm disso, esta
constante influencia o acoplamento de spins, a sensibilidade dos ncleos etc[3].
A interao entre um ncleo com um momento magntico e o campo faz com
que o campo magntico precesse em torno daquele eixo, mas esse ncleo
rotaciona a um ngulo do campo magntico, dando origem ao momento
angular (Figura 2), sendo a frequncia desse movimento chamada de
frequncia de Larmor.

Figura 2. Movimento de precesso - momento angular (Adaptado de Freitas)

Em RMN, um segundo campo aplicado perpendicularmente ao campo B0.
Esse segundo campo aplicado na forma de pulsos eletromagnticos e faz
com que os ncleos que permaneciam em equilbrio sob a aplicao do
primeiro campo sejam excitados. Aps, cessada a aplicao do campo
eletromagntico, os ncleos tendem a voltar aos seus estados de equilbrio e
do origem ao sinal FID (Free Induction Decay), o sinal de RMN. Mas como
uma substncia apresenta vrios ncleos, vrios sinais so gerados e se
sobrepem, dificultando a interpretao desse resultado, assim, para facilitar a
extrao de informaes utilizada a transformada de Fourier para os
diferentes sinais de FID e d origem ao espectro de RMN que consiste em uma
serie de frequncias denominadas deslocamentos qumicos[3].

Com base nos princpios aqui j descritos, esperaria-se que um mesmo tipo de
ncleo deveria absorver a uma mesma frequncia, no entanto, o que ocorre
experimentalmente so diferentes absores a diferentes frequncias apesar
de se tratar de um mesmo tipo de ncleo, isso ocorre em funo da
blindagem termo que se referente aos ncleos e eltrons da vizinhana do
ncleo analisado. Isso ocorre uma vez que essas partculas carregadas geram
um campo magntico induzido que pode se opor (efeito de blindagem) ou no
(efeito de desblindagem) ao campo externo e, assim, a intensidade do campo
magntico externo apresenta um valor efetivo diferente, conforme a vizinhana
de cada ncleo analisado. Desta forma, essa diferena de frequncia de
absoro de um ncleo analisado em relao a um ncleo tipo como padro
chamado deslocamento qumico[3].
Outro fenmeno observado no espectro de RMN o acoplamento spin-spin,
atravs da formao de sinais que aparecem como dupletos, tripletos,
quartetos etc, e isso ocorre quando ncleos que esto em diferentes ambientes
eletrnicos esto prximos entre si, sendo que a intensidade destes picos no
a mesma e pode ser obtida pelo tringulo de Pascal[3].
1.1.

RESSONNCIA MAGNTICA NUCLEAR EM DUAS DIMENSES

O desenvolvimento da ressonncia magntica nuclear em duas dimenses

aumentou o poder de resoluo desta tcnica. Para sua realizao, algumas
vezes, dependendo da tcnica, faz-se necessrio um tempo de preparao, no
qual pulsos ou apenas um perodos de tempo aplicado para que um sistema
de spins alcance o equilbrio trmico, o RMN propriamente dito chamado de
tempo de evoluo, constituindo a diferena ente o RMN uni e bidimensional,
uma vez que na tcnica unidimensional esse tempo apenas funo do tempo
de deteco, perodo em que se adquire o sinal do FID, que nos fornece um
espectro de RMN, sendo que a aplicao da transformada de Fourier nos FIDs
obtidos nos fornece espectros unidimensionais, sendo necessria a aplicao
de outra transformada de Fourier ao longo do tempo de evoluo para a
obteno de um espectro bidimensional[3].
O espectro obtido pode ser observado atravs do grfico superposto, chamado
de stacked, e o grfico de contorno, que um corte horizontal do grfico

superposto, este ltimo sendo mais utilizado, embora menos fcil de visualizar,
devido a obteno de um diagrama mais claro e fcil de analisar[3].
2. CONCLUSO
O desenvolvimento da RMN possibilitou a resoluo de vrias estruturas
tridimensionais e avanos no estudo de dinmica molecular entre outros
avanos, tendo sido aplicada no estudo de proteomas como forma mais
eficiente de determinar as estruturas tridimensionais das protenas.

3. REFERNCIAS
1.

BLOCH, F.; HANSEN, W.W.; PACKARD, M. The Nuclear Induction

Experiment. Physical Review, 1946. 70(7-8): p. 474-485.

2.

PURCELL, E.M. Ressonance absorption by nuclear magnetic moments

in a solid. Physical Review, 1946. 69(1-2): p. 37-38.

3.

NASCIMENTO, C.J.B., C. J., Ressonncia Magntica Nuclear: Gradus

Primus.
Biotecnologia,
Cincia
e
Desenvolvimento,
2001.
21(julho/agosto): p. 52-62.

4.

OLIVEIRA, S.C., Reviso Bibliogrfica Acerca dos Prinpios de

Ressonncia Magntica Nuclear. Departamento de Engenharia Eltrica.
Faculdade de Tecnologia. 2008, Universidade de Braslia: Braslia. p. 97.

5.

MAZZOLA, A.A., Ressonncia magntica: princpios de formao da

imagem e aplicaes em imagem funcional. Revista Brasileira de Fsica
Mdica, 2009. 3(1): p. 117-129.