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SORO DE LEITE
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Bioethanol production by Kluyveromyces marxianus using whey
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6 Joice Correia dos Santos2, Andr Oliveira de Gis1, Camila Santos Silva1, Afram Domingos
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Silva de Meneses3, Tnia Maria Brito Ferreira de Oliveira3
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101 Graduando do Curso Tecnlogo em Alimentos, Instituto Federal de Sergipe, So Cristvo,
11Brasil.
122 Tcnica em Alimentos e Laticnios, Instituto Federal de Sergipe, So Cristvo, Brasil.
133 Professor de Ensino Bsico, Tcnico e Tecnolgico, Instituto Federal de Sergipe, So
14Cristvo, Brasil.
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17Resumo
18O presente trabalho tem como objetivo avaliar a produo de bioetanol por Kluyveromyces
19marxianus a partir do soro de leite, em diferentes processos fermentativos, variando-se o
20parmetro agitao. Durante as fermentaes, foi acompanhado o teor alcolico, pH e
21acidez por um perodo de 48h. Em todas as fermentaes, houve decrscimo continuo nos
22teores de pH e acidez. Verificou-se que durante o perodo que antecede s 24 horas de
23fermentao houve diferena significativa entre os experimentos. A fermentao submetida
24 agitao atingiu teor alcolico de 2GL no tempo de 4 horas, enquanto que o experimento
25sem agitao s foi possvel observar o mesmo teor alcolico aps 24h de processo.
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27Palavras-chave fermentao, resduo agroindustrial, bioetanol
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30Introduo
31Os resduos agroindustriais so gerados no processamento de alimentos, fibras, couro,
32madeira, produo de acar e lcool, etc., sendo sua produo, geralmente, sazonal,
33condicionada pela maturidade da cultura ou oferta da matria-prima (MATOS, 2005). Um
34dos mais importantes resduos agroindustriais o soro de leite e, atualmente, novas formas
35de utilizao deste produto vm sendo desenvolvidas pela indstria em geral, entretanto,
36ainda na indstria de alimentos que ele mais empregado (CALDEIRA et al., 2010). O
37soro de leite constitui um grande problema para a indstria de laticnios pelos elevados
38volumes excedentes no processamento do queijo e pela alta demanda bioqumica de
39oxignio dada pela presena principalmente de lactose e protenas. Segundo Panesar et al.
40(2007) e Chaves et al. (2010), cerca de 90 a 95% do volume do leite usado para a
41fabricao de queijos resultam em soro. Alm do volume produzido, o soro de leite tambm
42 considerado um efluente residual que pode acarretar graves problemas ambientais
43associados ao seu alto teor de matria orgnica (BIEGER e RINALDI, 2009). Sendo assim o
44soro de leite apresenta caractersticas favorveis para uso em processos fermentativos, pois
45retm 55% dos nutrientes do leite. Destes os mais abundantes so lactose 45 a 50g/L,
46protenas solveis 6 a 8g/L, lipdios 4 a 5g/L e sais minerais 8 a 10% extrato seco
47(KOSSEVA et al., 2009). Entre os vrios constituintes do soro a lactose (em concentraes
48de 5-6% peso/volume) o principal responsvel pela alta demanda bioqumica,
49apresentando potencial como substrato para uma variedade de microrganismos tais como
50Candida pseudotropicalis, Kluyveromyces marxianus, Kluyveromyces lactis e outros
51(GHALY; KAMAL, 2004). Por ser uma fonte de carboidratos e minerais com grande potencial
52para a produo de diferentes bioprodutos atravs de meios biotecnolgicos o soro de
53queijo tem sido explorado como meio de cultivo para diversos-microrganismos, visando a
54obteno de produtos biotecnolgicos como etanol (DRAGONE et al., 2011; KOUSHKI;
55JAFARI; AZIZI, 2011), biopolimero poli (3- hidroxibutirano) (NIKEL et al., 2005),
56biossurfactantes (RODRIGUES; TEIXEIRA; OLIVEIRA, 2006), goma xantana (SILVA et al.,
572009), acido ltico (GHASEMI et al., 2009), acido ctrico (EL-SAMRAGY et al., 1996), acido
58glucnico (CHATURVEDI; SUBRAMANI; MADAMWAR, 1999), e beta-galactosidade
59(MANERA et al., 2011). Tendo em vista que a produo do bioetanol a partir do soro de leite
60ocorre pela ao de microrganismos atravs da fermentao alcolica pela ao de
61leveduras como Kluyveromyces marxianus, a proposta deste trabalho foi avaliar a produo
62de bioetanol por Kluyveromyces marxianus a partir do soro de leite, em diferentes processos
63fermentativos.
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65Material e Mtodos
66A matria prima utilizada no presente trabalho foi o soro de leite resultante da fabricao de
67queijo Tipo coalho cedido pelo setor de Agroindstria do Instituto Federal de Sergipe (IFS
68Campus So Cristvo). Aps obteno, o soro de leite foi aquecido e filtrado. O
69microrganismo utilizado no presente trabalho foi Kluyveromyces marxianus ATCC 46537,
70proveniente da Coleo de Culturas Tropicais da Fundao Andr Tosello de Campinas
71(SP), na forma liofilizada. O inculo inicial foi realizado em frascos de erlenmeyer de 250
72mL, contendo 100 mL do meio de cultivo YM composto por: glicose (1,0 g/L); extrato de
73levedura (3,0g/ L); extrato de malte (3,0g/ L); peptona (5,0g/l). Sendo a levedura inoculada a
74partir de 2 mL da cultura estoque, em seguida estes frascos foram incubado a 35C por 48
75horas. A fermentao consistiu em adicionar 20% do inoculo padronizado no meio de cultivo
76acrescido de sacarose (60g/L). As fermentaes foram conduzidas em incubador rotativo
77com agitao de 150rpm, e sem agitao, ambos com pH inicial de 5,8, com a temperatura
78mantida a 35C. O tempo de acompanhamento das fermentaes foi de 48h, neste perodo
79foram retiradas amostras para determinao do pH, acidez e etanol. A determinao do pH,
80acidez Dornic e etanol foram realizadas segundo o Instituto Adolfo Lutz (2008).
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83Resultados e Discusso
84O comportamento obtido durante a fermentao alcolica para o valor de pH, acidez D e
85etanol, das duas fermentaes, encontram-se apresentadas nas figuras 1, 2 e 3,
86respectivamente. Durante o processo fermentativo alcolico todos os experimentos
87apresentaram comportamentos semelhantes para os valores de pH, verificando-se a
88reduo continua dos mesmos at o tempo de aproximadamente 24 h de fermentao
89(Figura 1). Devido ao termino da fase exponencial, aproximadamente 24h, o experimento
90com agitao apresentou menor intensidade de reduo do pH fato no observado no
91experimento sem agitao o qual apresentou reduo acentuada aps esta fase.
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96Com 48 h de fermentao, o pH, quantificado nos dois experimentos, apresentava valores
97entre 4,08 e 4,27. Valores similares aos encontrados por BATCH et al. (2014) ao estudarem
98a influncia de algumas variveis: agitao, temperatura, concentrao de enzima e glicose,
99durante a produo de bioetanol a partir do soro de leite e utilizando a levedura
100Saccharomyces cerevisae, estes observaram que aps 59 horas de fermentao, o pH dos
101experimentos encontravam-se entre 3,28 e 4,63 e que o ensaio submetido a maior
102temperatura (36C), que no sofreu agitao, acrescido de glicose (45g/L) apresentou-se
103mais cido que os demais.
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Figura 2 Comportamento da acidez D do meio fermentativo alcolico.
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108Com 48 h de fermentao, a acidez D, quantificada nos dois experimentos, apresentava
109valores entre 40,00 e 46,67 D (Figura 2). O experimento sem agitao permaneceu
110apresentando maior acidez (46,67D) e consequentemente o menor pH (4,08).
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172GHALY, A. E.; KAMAL, M. A. Submerged yeast fermentation of acid cheese whey for protein
173production and pollution potential reduction. Water Research, v.38, p.631-644, 2004.
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175GHASEMI, M.; NAJAFPOUR, G.; RAHIMNEJAD, M.; BEIGI,P.A; SEDIGHI, M.;
176HASHEMIYEH,B. Effect of diferent media on production of lactic acid fron whey by
177lactobacillus bulgaricus. African Journal of Biotechnology, Nairbi, v.8, p.81-84, 2009.
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179IAL - INSTITUTO ADOLFO LUTZ. Normas Analticas: Mtodos Fsico-Qumico para Anlise
180de Alimentos. 1. Ed. Digital. So Paulo, 2008.
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182KOSSEVA, M. R.; PANESAR, P. S.; KAUR, G.; KENNEDY, J. F., Use of immobilized
183biocatalysts in the processing of cheese whey. International Journal of Biological
184Macromolecules, v. 45, p. 437- 447, 2009.
185
186KOUSHKI, M.R; JAFARI,M.;AZIZI, M. Comparison of ethanol production from cheese whey
187permeate by two yeast strains. Journal of Food Sciene and Technology, 2011.
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189MANERA, A. P.; ORES, J. C.; RIBEIRO,V. A.;RODRIGUES, M.I.; KALIL, S. J.; FILHO, F.M.
190Utilizao de resduos agroindustriais em processo biotecnolgico para produo de
191betagalactosidase de Kluyveromyces marxianus CCT7082. Acta Scientiarum Technology,
192Maring, v.33, p. 155-161,2011.
193
194MATOS, A. T. Tratamento de Resduos Agroindustriais. Viosa, MG, 2005.
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196MURARI, C. S. et al. Avaliao da reduo na poluio dos laticnios, a partir da
197fermentao do soro de leite em etanol pela levedura Kluyveromyces marxianus 229. Rev.
198Inst. Laticnios Cndido Tostes, Juiz de Fora, v. 68, n. 393, p. 42-50, jul/ago., 2013
199
200NIKEL, P.; PETTINARI, M.; MENDEZ, B.S.; GALVAGNO, M.A. Statistical optimazation of
201culture mdium for biomass and poly (3-hydroxybutyrate) production by a recombinant
202Escherichia coli strain using agroindustrial byproducts. Internacional Microbiology,
203Barcelona, v.8, p.243-250, 2005.
204
205PANESAR, P. S.; KENNEDY, J. F.; GANDHI, D. N.; BUNKO, K. Bioutilisation of whey for
206lactic acid production. Food Chemistry, v. 105, n. 1, p. 1-14, 2007.
207
208RODRIGUES, L. R.; TEIXEIRA,J. A; OLIVEIRA, R. Low-cost fermentative mdium for
209biosurfactant production by probiotic bactria. Biochemical Engineering Journal,
210Amsterdam, v.32, p135-142, 2006.
211
212SILVA, M. F.; FORNARI,R, C. G.; MAZUTTI, M. A; OLIVEIRA, D.; PADILHA, F. F.;
213CICHOSKI, A.J.; CASIAN, R. L.; LUCCIO, M. D.;TREICHEL, H. Production and
214characterization of xantham gum by Xanthomonas campestris using cheese whey as sole
215carbon source. Journal of Food Engineering, london, v.90, p.119-123, 2009.
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218Autor(a) a ser contactado: Joice Correia dos Santos, Instituto Federal de Sergipe, Rodovia
219BR-101, Km 96 Povoado Quissam - So Cristovo/Sergipe, joice.correia@ifs.edu.br.
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