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PRACTICA N 33
ANALISIS MICROBIOLGICO DE PESCADOS Y DERIVADOS
I.
INTRODUCCIN
II.
III.
a.
PREPARACION DE LA MUESTRA
Piel.
Elegir la zona media del cuerpo, midiendo la superficie que se vaya a tomar.
Aspticamente, extraer la piel con mnimo de carne. La muestra se introduce
en un tubo con tapn de rosca que contenga 10 ml de solucin Ringer y un
poco de arena estril. Llevar al Stomacher durante 2 minutos Hacer diluciones.
Carne
Tomar aspticamente, un trozo de tejido sin piel, para evitar contaminacin.
Diez gramos de carne se maceran en 90 ml de solucin de Ringer durante 5
min. Llevar al Stomacher durante 1 minuto. Hacer diluciones.
Branquias
Con material estril, se toma un trozo de branquia y se opera como en el caso
de la piel. Hacer diluciones decimales.
Contenido Intestinal
Aspticamente ligar el intestino en sus extremos con pinzas y extraer en el
contenido intestinal del asa. Las heces extradas se depositan en un tubo con
tampn de rosca y con 10 ml de solucin de Ringer. Homogeneizar en
Stomacher durante 1-2 minutos. Hacer diluciones..
b.
INVESTIGACIN DE E. coli
MTODO: CON CALDO LACTOSA 2% DE BILIS VERDE BRILLANTE, Y
CONFIRMACIN EN MEDIO SLIDO. (ICMSF)
Pasadas las 24 horas, anotar los tubos que muestren produccin de gas.
Volver a la estufa los tubos gas negativos para su incubacin durante 24
horas ms.
Pasadas las 48 horas, anotar los tubos que muestran produccin de gas.
Confirmar los tubos gas positivos de caldo lactosa bilis (2%) , verde
brillante seleccionados en el punto anterior, sembrando por estras un
asa de cada uno de ellos en Agar Bilis lactosa rojo neutro cristal violeta o
Agar Endo . Incubar las placas a 35-37 C. Examinar las placas de Agar
bilis lactosa rojo neutro cristal violeta despus de 24 horas y las de Agar
Endo despus de 48 horas. La presencia de organismos coliformes se
confirma por el crecimiento en el primero de estos medios de colonias de
color rojo oscuro con dimetro mayor de 5 mm y en Agar Endo por la
formacin de colonias rojas rodeadas por un halo tambin rojo.
INVESTIGACIN DE Salmonella-Shigella
Dentro de la sistemtica analtica para el aislamiento e identificacin del gnero
Salmonella se utilizan, habitualmente varias etapas:
Ver practica N 16
INVESTIGACIN DE Staphylococcus aureus
Ver practica N 12
INVESTIGACIN Y RECUENTO DE Clostridium SULFITO REDUCTORES
Ver practica N 6
V.
PROTOCOLO
Se homogeniza
10 10
4-
10
Agar King y /o
Agar GSP.
104- 10
durante 5 das
10
Incubar por 17 C
Hacer lectura
INVESTIGACIN DE Staphylococcus aureus (MTODO DE RECUENTO EN
PLACA
PROTOCOLOS DE AISLAMIENTO:
DE E. coli O157:H7 EN ALIMENTOS (FDA, 2001)
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VI
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
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