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microorganismos
Diversidade Microbiana
Anlises de Comunidades
microbianas
Menos de 1% de todas as espcies
de microorganismos existentes so
cultivveis
Desenvolvimento de tcnicas de
isolamento e caracterizao
Tcnicas de enriquecimento
A caracterizao aprofundada de um
organismos depende do seu cultivo
em culturas puras.
Isolamento e Identificao de
microorganismos
Isolamento
Tcnicas de assepsia
Cultura pura
Tcnicas de
enriquecimento
Coleta, transporte e
armazenamento das
amostras
Tcnicas de
isolamento
Seleo do meio de
cultura
Identificao
Caractersticas de
cultivo
Morfologia
Caractersticas
antignicas
Caractersticas
patognicas
Caractersticas
bioqumicas
Caractersticas
genticas
Tcnicas de Esterilidade ou
Assepsia
Tcnicas de Esterilidade ou
Assepsia
Luz UV
Filtro HEPA
Fluxo laminar
Coleta e Processamento da
Amostra
Cultura Pura
http://www.temple.edu/dentistry/adm
issions/course_descriptions.html
Tcnicas de Isolamento
Plaqueamento de Culturas
Semeadura em superfcie
Semeadura em profundidade
Plaqueamento de Culturas
Meios Seletivos/Diferenciais
Staphylococcus. aureus
No inoculado
Salmonella
Staphylococcus epidermidis
Serratia marcescens
E. colic
E. coli
gar Verde Brilhate contendo lactose,
sacarose e indicador de pH
gar MacConkey
(fermentao de
lactose)
http://www.microbelibrary.org
Meios enriquecidos
gar chocolate: contm sangue
cozido. Usado para o
isolamento de N. gonorrhoeae.
Identificao de Microorganismos
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Identificao de Bactrias
Organimos so
identicados atravs
de chaves
dicotmicas
Anlise dos
resultados de vrios
testes
Normalmente feitos
simultaneamente
Caractersticas de Cultivo
Plaqueamento
Crescimento em meios enriquecidos,
seletivos, diferenciais, etc
Aerobiose, anaerobiose,
pH, temperatura
Crescimento rpido/lento
Floculao
Mtodos morfolgicos
Observao ao microscpio
Morfologia da clula,
Tamanho
colorao simples ou diferencial
Presena de determinadas estruturas
(grnulos de armazenamento, endosporos,
cpsula, flagelo, etc).
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Morfologia da colnia
Imagens da pgina
microbelibrary.org
Mtodos Microscpicos
Microscopia
Microscopia de luz
Microscopia eletrnica
De campo escuro
De contraste de fase
Fluorescncia
Confocal
Mtodos de colorao
Colorao simples;
Colorao diferencial
(Gram,
colorao lcool cido resistente)
Colorao especial (colorao
negativa, para esporos, ou para
flagelos)
Caractersticas Morfolgicas
Morfologia microscpica
Tamanho e forma
Rapidamente feita ao
microscpio (com ou sem
colorao)
Pode determinar se
amostra de procariotos,
fungos ou protozorios
Muitas vezes suficiente
para diagnstico clnico
Morfologia Microscpica
Agregados celulares
As clulas se aderem aps a diviso
binria formando arranjos especficos
Morfologia Microscpica
Colorao diferencial
Colorao de Gram
gram-positivas e gram
negativas
Limita a identidade de um
microorganismo
Insuficiente para
identificao
isoladamente
Ex. E. coli and Salmonella so
semelhantes aps a colorao
Colorao de Gram
Morfologia Microscpica
Corantes especiais
Nanquim para cpsula
Ex. Cryptococcus neoformans
Testes Bioqumicos
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Fermentao de
Carboidratos
fermentao observada
pela formao de cido
(mudana de cor do meio)
e produo de gs (bolha)
Tubo
de ensaio contendo
um tubo de Durham para
coletar as bolhas de gs
Amostras:
1. Controle no inoculado
Testes Rpidos
positive
negative
Alguns patgenos
No podem ser isolados
Crescem muito devagar
Isolamento pode ser demorado ou
impossvel
Testes Imunolgicos
Interao de um antgeno microbiano com
um anticorpo
Testar a presena de um antgeno pode ser
mais fcil do que testar a presena do
microorganismo
Existem kits de laboratrio para a
identificao de diversos microorganismos
.
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Sorologia
Protenas e polisacardeos podem
funcionar como identificadores
Cpsula, glicoclice, flagelo, pili
Reao antgeno-anticorpos
Ex. Deteco rpida de Streptococcus pyogenes
Sorologia
Combina-se um
antisoro conhecido
com um
microorganismos
desconhecido
Exemplos:
Aglutinao em
lmina
ELISA
Mtodos Genotpicos
Anlises do material gntico de
microorganimos revolucionou a
identificao e classificao de
microorganismos
Incluem:
Sumrio
O isolamento e identificao de
microorganismos requer o uso
sistemtico de diversas tcnicas
microbiolgicas, bioqumicas e
genticas
Importncia no estudo de
microorganismos ambientais, indstria
farmacutica, e de alimentos e no
tratamento de doenas infecciosas.