MICROSCOPA.

1.1 MTODOS DE ESTUDIO UTILIZADOS EN BIOLOGA CELULAR

INTRODUCCIN:
Te has preguntado cmo es que un mdico en la actualidad puede determinar el
tipo de clulas que estn daadas en un organismo, produciendo cncer, diabetes,
sida, y otras enfermedades? Qu mtodos utiliz para emitir un diagnstico
para seleccionar un tratamiento?
Te has preguntado cmo es que un bilogo en la actualidad puede predecir el
tipo de caractersticas genticas de un organismo de su descendencia,? Qu
mtodos utiliz para llegar a ello?
Te has preguntado cmo es que un agrnomo en la actualidad puede determinar
el tipo de clulas que intervienen en el proceso de crecimiento de una planta y
controlar parte de sus caractersticas?
La biologa celular, como disciplina, se ha extendido en muchos campos de
aplicacin en la medicina, gentica, agronoma y otro gran nmero de ciencias.
Para ello, es conveniente

conocer un panorama general de los mtodos de

estudio de las clulas que a travs del tiempo se han desarrollado, para la
observacin de su tamao, forma, color, funcin, peso, textura y otras
caractersticas.
Uno de stos mtodos de estudio, que nos permite acercarnos con un detalle
considerable a la morfologa de las clulas, es la microscopa. El microscopio
es el instrumento de ste mtodo.
Actualmente el microscopio es uno de los instrumentos pticos ms importantes
dentro de un laboratorio. Nos permite observar con detalle el universo
"microscpico" ( visualmente pequeo). Lo usa el investigador, el estudiante, el
cientfico.

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Tiene una larga e interesante historia, y a pesar de que no se sabe con exactitud
cul fu el primero ni por quin y cundo fu inventado, s se conocen algunos
datos de quienes han dejado huella en ste aparato.
Por ejemplo, en 1590, Zachary Janssen, descubri que al observar un objeto
relativamente pequeo por medio de dos lentes de vidrio, su imagen visual
apareca virtualmente ms grande. Despus lo perfeccion con ayuda de una
base y cuatro tubos (para facilitar su uso y poder observar ms objetos), logrando
un aumento 30 veces mayor. As como Janssen, otras personas estn registradas
en la historia como inventores del microscopio. De igual manera, surgieron las
figuras de Robert Hooke, Johannes Hevelius, Anton Van Leewvenhoek, Carl
Zeiss, Abbe y muchos otros que fueron perfeccionando y adems diversificando
ste instrumento hasta hacerlo no slo una necesaria, sino tambin poderosa
herramienta en la observacin del microcosmos.
CONCEPTOS TERICOS:
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos no perceptibles a
simple vista, a travs de un sistema ptico compuesto por lentes de cristal que al
ser atravesadas por la imagen de un objeto se amplifican.
Existen varios tipos de microscopios, los ms comunes son el compuesto,
(tambin llamado ptico o fotnico), el de contraste de fases, el estereoscpico, y
el electrnico.
El microscopio ptico es el ms utilizado, su nombre deriva del hecho de que
depende de alguna fuente de luz para su funcionamiento, consta de tres sistemas:
mecnico, de iluminacin y ptico.
La parte mecnica se compone del pie, brazo, tubo del microscopio, platina,
revolver y tornillos.
El pie es una pieza maciza y pesada, sirve para asegurar la estabilidad del
aparato y para soportar las dems piezas que componen al microscopio; en

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ocasiones esta provisto por una charnela, que permite la inclinacin de la
parte superior del microscopio.
El brazo engrana el tubo principal del microscopio y ayuda al soporte al
momento de transportarlo.
En el tubo del microscopio esta instalado el sistema ptico.
La platina es una pieza metlica, donde se colocan las preparaciones;
tiene en el centro una abertura circular por donde pasan los rayos
luminosos procedentes del sistema ptico.
El revolver permite cambiar los objetivos sin desenfocar considerablemente
ni quitar la preparacin.
El tornillo macromtrico permite enfocar estructuras gruesas sin mucha
precisin,

diferencia

del

tornillo

micromtrico

que

enfoca

detalladamente.
El sistema de iluminacin se compone de una lmpara o espejo, un condensador y
un diafragma; tiene la misin de iluminar los objetos por medio de luz transmitida.
El espejo es redondo, con una cara plana y otra cncava, los expertos
sugieren usar la parte plana para objetivos de poco aumento y fuentes de
luz directa, y la parte cncava para objetivos con gran aumento y fuentes de
luz indirecta; el espejo se puede mover y adaptar a diferentes posiciones
segn la fuente luminosa.
El condensador consta de un sistema de lentes de gran abertura sujetos a
una montura, colocados entre la platina y el espejo, puede subirse y bajarse
a voluntad y tiene la finalidad de concentrar los rayos de luz para dirigirlos
hacia la preparacin.
El diafragma se encuentra unido al condensador y regula la cantidad de
rayos luminosos que inciden sobre la preparacin.
El sistema ptico se compone de oculares y objetivos, es decir, esta constituido
por diferentes lentes que se encargan de corregir las aberraciones de la luz y de
desviar correctamente los rayos luminosos para lograr una imagen amplificada.

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El ocular se encuentra montado en la parte superior del tubo del
microscopio, por medio de esta lente se observa la imagen amplificada.
Los objetivos son los elementos ms importantes del microscopio, de ellos
depende la mayor o menor ampliacin con que se pueda observar, son
planoconvexas de foco muy corto, mientras mayor sea el aumento ms
pequeo es el dimetro de la lente, existen diferentes tipos de objetivos
segn el numero de aumentos que proporcionen por ejemplo:
-Lupa: Aumenta en dimetros de 2.5 a 5 X
-Objetivos en seco: Son los que se emplean ms frecuentemente,
entre la lente y el cubreobjetos solo hay aire, pueden ser de dos
tipos: seco dbil que aumenta en dimetros de 10 a 20 X y seco
fuerte que aumenta en dimetros de 40 a 60 X.
-Objetivos de inmersin: Se llaman as porque para poder observar
se debe interponer entre la lente y la preparacin un lquido que por
su ndice de refraccin permita una mayor luminosidad; estos
objetivos tienen gran poder de aumento (hasta 100 X) y definicin.
Para saber cual es el aumento en dimetros que un microscopio tiene se aplica la
siguiente frmula:
Aumento del microscopio = (Aumento del Ocular) x (Aumento del objetivo)
Ejemplo:
Ocular = 10X
Objetivo = 60 X
Aumento del microscopio = 10 x 60
Aumento del microscopio = 600X
Por lo tanto para este ejemplo el aumento corresponde a 600X en
dimetros.
Los objetivos adems deben contar con tres cualidades: Definicin, Penetracin y
Resolucin.

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La definicin consiste en poder presentar con limpieza y correccin los contornos
de la imagen.
La penetracin es la propiedad de presentar, sin variar el enfoque, perfectamente
detallados varios planos de espesor de una preparacin.
El poder de resolucin permite apreciar delicados detalles de la estructura.

Fig.1 Microscopio compuesto

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Fig. 2 Objetivo de inmersin
Adems de los microscopios compuestos existen otros que se construyen para
observaciones microscpicas especiales, como el microscopio de contraste de
fases que hace posible la observacin de material en vivo ya que no hay
necesidad de tincin.
El funcionamiento de este sistema esta basado en las diferentes densidades que
una clula

tiene, a consecuencia de la variacin de la densidad el ndice de

refraccin de cada zona es igualmente diferente, por lo tanto la luz que atraviesa
la clula pasa a diferentes velocidades retractndose o desvindose en diferente
ngulo, producindose un contraste entre el objeto enfocado y sus contornos,
dando como resultado un aumento notable en el contraste y relieve del objeto.

Fig 3 Microscopio de contraste de fases

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El microscopio estereoscpico, es utilizado para hacer disecciones, cuenta con
una platina muy grande que permite manipular con facilidad los organismos,
algunos cuentan con un sistema de acercamiento para detallar la imagen.
El microscopio electrnico es una de las herramientas ms modernas con las que
cuenta la biologa, puede lograr aumentos hasta de 200 mil dimetros, por lo que
permite hacer estudio sumamente detallados, su uso esta restringido a centros de
investigacin, ya que son aparatos muy costosos que solo deben ser manejados
por personal calificado. Tiene el mismo fundamento que el microscopio ptico, slo
que en vez de trabajar con rayos luminosos se utilizan rayos electrnicos
propagados en el vaco, que concentrados y refractados por campos magnticos
se pueden fotografiar o revelar en una pantalla especial para poder observarse.
Existen dos tipos de microscopios electrnicos: de transmisin y de barrido.
El microscopio electrnico de transmisin (MET) se basa en hacer
pasar un haz de electrones sobre el espcimen que se quiere observar,
estos se acumulan en ciertas zonas del ejemplar, pero tambin dejan zonas
vacas, al tomar fotografas electrnicas del espcimen se distinguen reas
claras y obscuras, delimitando el perfil y la forma general de una partcula.
El microscopio electrnico de barrido (MEB) permite analizar con mucho
detalle la topografa general de un espcimen o partcula, tiene un poder de
resolucin de 30 A, requiere un tratamiento previo del material a observar,
pues es necesario cubrirlo con una fina capa de oro, ya que el haz de
electrones debe reflejarse en la superficie de la muestra, produciendo
emisiones secundarias de electrones que se pueden captar en una pantalla,
generndose una imagen tridimensional de lo observado.

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Fig.4 Microscopio electrnico

Adems de los tipos de microscopios ya mencionados existe muchos ms,
diseados con fines muy particulares como por ejemplo el microscopio polarizado,
el de fluorescencia, ultramicroscopio, e incluso otros que se utilizan en la industria
metalrgica y textil.
Como ya se ha mencionado los microscopios son un equipo costoso y adems
indispensable en el estudio de la biologa por lo que se deben tener ciertos
cuidados al manejarlo.
1 Debe ser guardado en un lugar seco y protegido del polvo.
2 Para su traslado deber ser tomado con una mano del brazo y con la otra
por abajo del soporte o pie.
3 Debe cerciorarse de que las lentes estn limpias entes de su uso; si no es
as limpiarse usando nicamente papel seda para evitar el rayado de las
lentes.
4 Cuando se utiliza aceite de inmersin, el exceso debe limpiarse con papel
seda impregnado con una solucin de ter-acetona-alcohol, teniendo
cuidado de no usar la solucin en exceso, puesto que el pegamento con el
que se fijan las lentes es soluble en esta solucin.
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5 Se prescindir de desarmar el microscopio, ya que esto implica desajustes
o daos en sus partes, esto se reserva a las personas especializadas en su
mantenimiento.
6 Las partes del soporte podrn ser limpiadas con una franela y agua
destilada, ocasionalmente la cremallera del tormillo macromtrico se
limpiar con aceite o grasa especial; el tonillo micromtrico no requiere
aceite.
7 Las preparaciones a observar debern estar siempre limpias de aceite o
grasa de las manos, deben limpiarse al terminar de usarse.
8 No enrollar el cable del microscopio alrededor de ste, se debe enrollar
sobre s mismo.
9 Al finalizar las observaciones, los microscopios deben quedar con el
objetivo de menor aumento en el eje ptico.
10 En caso de alguna falla mecnica u tica deber consultarla con el asesor.
EJERCICIOS PRCTICOS COMPLEMENTARIOS:
1. Responde el siguiente cuestionario
Qu es un microscopio?
Para que sirve un microscopio?
Menciona algunos tipos de microscopios, sus funciones y diferencias.
Describe brevemente el fundamento en que se basa cada tipo de microcopio.
De cuntos sistemas consta el microcopio ptico? En que consiste cada
sistema?
Cmo se calcula el aumento de imagen en un microscopio?
Cules son los pasos a seguir para poder enfocar y observar con claridad una
imagen en el microscopio?

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Con tus propias palabras explica, Qu propiedades estudiaras de una clula
contando con la ayuda de la microscopa?
2. Realiza los siguientes ejercicios.
Lee el tema relacionado con microscopa en el libro de Fundamentos de Biologa
Celular (Bibliografa 4)
y selecciona por lo menos 3 bibliografas ms de la referencia que tu profesor te
facilite.
Elabora un resumen en tu cuaderno de notas acerca del tema.
http://www.cecyt6.ipn.mx/Academia/Basicas/Biologia/MICRO1.HTM

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