QUMICA ANALTICA II 2014

Trabajo Prctico N3:

CUANTIFICACIN DE DOS SOLVENTES EN UNA MUESTRA POR CROMATOGRAFA GASLQUIDO CON PATRN INTERNO
Introduccin
En cromatografa existen ciertos parmetros difciles de reproducir de experimento en
experimento, entre los que pueden mencionarse las variaciones del caudal del gas
transportador y del volumen de muestra que se inyecta en el cromatgrafo.
Por otra parte, una curva de calibracin es vlida para la determinacin de muestras incgnita
si se mantiene el conjunto de condiciones experimentales bajo las cuales se obtuvo. Por lo
tanto, para eliminar el efecto producido en la seal debido a estas pequeas variaciones
involuntarias, se recurre al mtodo de patrn interno.
Se llama patrn interno al compuesto, diferente del analito, que se aade a la muestra
incgnita. Cuando se realiza una curva de calibracin con patrn interno se introduce en cada
estndar y en la muestra una cantidad exactamente medida del mismo. De este modo, la
relacin de las reas entre analito y patrn interno sirve como parmetro analtico. Esto se
debe a que la respuesta relativa del detector, tanto para el analito como para el patrn interno,
es prcticamente constante en un amplio intervalo de condiciones.
En la aplicacin de este mtodo es necesario que el patrn interno tenga una estructura
qumica similar a la del analito y que los tiempos de retencin entre ambos sean cercanos.
Es importante destacar la diferencia que existe entre el mtodo de patrn interno y el mtodo
de adicin de patrn. En el primer caso, la sustancia patrn que se introduce es diferente al
analito. En el segundo, la sustancia patrn adicionada es igual al analito
En este trabajo prctico, como parte del proceso de control de calidad, se desea cuantificar los
componentes activos de un quitaesmalte de uas como acetona y acetato de etilo, aplicando
cromatografa gaseosa y realizando curva de calibracin con patrn interno.
Objetivo
Cuantificar dos de los componentes de un producto cosmetolgico utilizando cromatografa
gas-lquido con patrn interno.
Parte experimental
Instrumento: Cromatgrafo Perkin Elmer Autosystem XL. Columna: capilar PE 1. Longitud: 30
m. Dimetro interno: 0.25 mm. Temperatura mxima (en condicin isotrmica): 280 C,
Temperatura mxima (con rampa): 300 C. Detector: FID. Gas transportador: N2.
Parmetros establecidos: Temperatura detector: 200 C. Temperatura del inyector: 170 C.
Temperatura del horno: 35 C. Volumen de inyeccin: 1 L. Relacion de split: 99/1. Tiempo de
anlisis: 4 a 5 minutos por muestra.

Reactivos y materiales
Estndares de calibracin: acetona, acetato de etilo (en frascos
rotulados)
Patrn interno: metil etil cetona (en frasco rotulado)
Muestras de quitaesmalte: Cutex, contiene especialmente acetato de
etilo
Algabo: contiene especialmente acetona
Agua destilada

Matraces de 5,00 mL
Micropipeta y tips
Pipeta par enrasar
Microjeringa
Hamilton

Procedimiento
Preparar los estndares de calibracin y la muestra de quitaesmalte segn se indica en la
siguiente tabla:
(%V/V)

E1
E2
E3

2,50
0,00
0,50

Acetona
Vol. a
rea
pipete
integrada
ar
acetona
(L)
125
0
25

Acetato de Etilo
Vol. a
rea
(%V/V
pipete
integrada
)
ar
acetato
(L)
0,00
0
2,50
125
0,50
25

(%V/V
)

1,50
1,50
1,50

MeEtCe (pi)
Vol. a
rea
pipete
integrada
ar
MeEtCe
(L)
75
75
75

E4
E5
E6

quitaesmal
te Cutex
quitaesmal
te Algabo

1,00
1,50
2,00

50
75
100

1,00
1,50
2,00

50
75
100

Vol. a pipetear
de muestra
(L)
200

MeEtCe
(pi)
(%V/V)
1,50

Vol. a
pipetear
(L)
75

200

1,50

75

1,50
1,50
1,50
rea
integrada
MeEtCe

75
75
75

rea
integrada
acetona

rea
integrada
acetato

Todas las soluciones se llevan a volumen final de 5,00 mL.

Realizar la cromatografa de cada uno de los estndares y de las muestras de quitaesmalte.
Tomar registro del rea.
Procesamiento de datos
Construir las curvas de calibracin (una curva para acetona y otra para acetato de etilo). Se
grafica (AE/Api) vs. (CE/Cpi), en donde:
AE: rea de pico de solvente para cada estndar
Api: rea de pico del patrn interno (metil etil cetona)
CE: concentracin de solvente para cada estndar
Cpi: concentracin del patrn interno (metil etil cetona)
Realizar el ajuste lineal de cada curva y en base a ello determinar las concentraciones de los
analitos (acetona y acetato de etilo) en la muestra incgnita. Informar los resultados en % V/V.