Tcnicasdesembrodemicroorganismo

JohannaCastillo1 AndrsCoronel1 RebecaCuripoma1 ThalaDaz1 FreddyMarcillo1

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EscueladeIngenieraQumica,UniversidadTcnicaParticulardeLoja,Loja,Ecuador

RESUMEN

Enelpresenteinforme,seexponeelmtodofundamentalparaestudiarlosmicroorganismos,estesebasa
ensembrarlosmicrorganismoenunmediodecultivoqueabarquelosdistintosnutrientesqueayudanala
proliferacindelosmismos.Losdiferentesmediosytcnicasdecultivosonesencialesenellaboratoriode
microbiologa,puessirvenparaidentificarlosmicroorganismosyqueproliferanamayorvelocidadbajolas
condicionesadecuadas.Paraestecasoelcultivoadecuadoutilizadofueelagaragar,ungelcoloidalformado
porhidratosdecarbono,deextendidousocomercial,yaquenosedisuelveporelefectodelassales,nise
consumeporlaaccindelamayoradelosmicroorganismosquesepuedensembrarenestetipodemedio.

Palabrasclaves:agaragar,mediodecultivo,bacterias,microorganismos.
ABSTRACT
In this report, the fundamental method set out to study microorganisms, this plant is based on the
microorganisminaculturemediumthatcoversthedifferentnutrientsthathelptheproliferationofthem.
Differentmediaandculturetechniquesareessentialinthemicrobiologylaboratory,sincetheyserveto
identify microorganisms and proliferating faster under the right conditions. For this case the suitable
cultureusedwasagar,acolloidalgelformedbycarbohydrate,inwidespreadcommercialuse,andwhichis
notdissolvedbytheeffectofsaltsorconsumedbytheactionofmostmicroorganismsthatcanbegrown
inthistypeofenvironment.
Keywords:agaragarculturemedium,bacteria,microorganisms.

1INTRODUCCIN

Los microorganismos que se encuentran la naturaleza se encuentran colonizando casi cualquier

superficie apropiada para su desarrollo, casi nunca se encuentran aislados si no que se mantienen en
constantecrecimientoenpoblacionesmixtas[1].Parallevaracaboelestudiodeestosmicroorganismosy
de sus propiedades, es necesario separar unos de otros y trabajar con especies ms selectivas
principalmente en dependiendo de los medios en los cuales se los incuba pues es estos medios los que
facilitanelmayorcrecimientodealgunasespeciesmsespecficas.Lasdenominadastcnicasdeaislamiento,
quefuerondesarrolladasduranteelsigloXIX[2].Enunprincipiolarecoleccindeestosmicroorganismosse
losdademanerameramentesupuestapueselraspadonogarantizasololapresenciadeunasolabacteriay
lapresenciadecontaminacin,esdecir,demicroorganismosnodeseados,dificultaelaislamiento[3].La
finalidad de esta prctica es el familiarizarse con el manejo de microorganismos y con las tcnicas de
aislamientoenplacadePetriademsdeobtenercoloniasseparadas,utilizandodostiposdemtodoscomo
losonelsembradoenestrasypuntosentubosevidenciandounamovilidadbacteriana.
El tipo de medio utilizado para el sembrado fue un medio de cultivo solido porque la principal
diferenciaentreelmediodecultivoslidoyunoliquidoesqueelmediodecultivosolidocontieneun1,5%
2%deagaragar,mientrasqueelmedioliquidonocontieneagar.

2ESQUEMA
Maltosa12,75g
Dextrina2,75g
Glicerol2,35g
Peptona0,78g
Agar15g

Agarextractodemalta
Agua
MediodeCultivo

10ml

10ml

Tubosdeensayo

CajasPetri
Sembrode
microorganismos

Muestras

Muestras

Blanco

Blanco

Pltano

Pltano

Manzana

Aguacate

Aguacate

Zapote

Zapote

Tomate

Sedejreposarauna
temperaturade30Cpor5das
paraquesedelcrecimientode
losmicroorganismos.

3METODOLOGA

La presente prctica de tcnicas de sembro de microorganismo se realiz en los Laboratorios de

biomineradelaUniversidadTcnicaParticulardeLoja,Loja,Ecuador.Paraestudiarmicroorganismosen
cultivospuros,enestaexperimentacinrequerimosdeunaseriedeinstrumentosbsicosdelaboratorioy
laaplicacindetcnicasespecficasqueacontinuacinlaspresentamos:

1. Preparacindelmediodecultivo:
Sesiguilasinstruccionesdelrotulodelmedio(agarextractodemalta)deacuerdoala
cantidadapreparar:maltosa12,75g,dextrina2,75g,glicerol2,35g,peptona0,78g,agar
15g.
Se transfiri el medio a un Erlenmeyer y se agreg una cantidad de agua destilada
establecida, seguidamente se lo llevo a bao mara para disolver los grumos que
pudieronformarseyhastaqueelmediosetornetransparente,secubroelErlenmeyer
conuntapndealgodnenvueltoengasayestecubiertodealuminio.

2. Siembrademicroorganismo:
Sedesinfectoelreadetrabajoconalcohol.
Secolocaproximadamente10mldelmediodecultivoenlascajasPetriyenlostubos
deensayo,sinquesellenecompletamente,selosmantuvosemicerradosparaevitar
contaminacinmientrassesolidifica,enelcasodelostubosenformainclinada.
Procedimos a sembrar con el asa de platino en las cajas y tubos, previamente
esterilizado. En cada caja y tubo se realiz un sembro de las muestras: pltano,
manzana,aguacate,zapoteytomate.
Para la tcnica del sembro se raspaba con el asa el rea con mayor presencia de
contaminacinydescomposicindelamateriaorgnicaenlamuestra,estasecolocaba
enelmediodecultivoenformadezigzagporunmtododecuadrantes.
Elasadeplatinodebaseresterilizadoantesydespusdesembrarunanuevamuestra,
esto se realizaba, primeramente desinfectndolo con alcohol y seguidamente
sometindoloalfuegohastaquesetornerojaelreadetrabajo.
SedejunblancoparalastcnicasdecajaPetriytubosdeensayo,esdecirunacajay
untubosinsembrar.
Sesellconparafilmlosbordesdelascajasylostubosconuntapn.Sedejreposara
una temperatura de 30C por 5 das para que se d el crecimiento de los
microorganismosenelagar.

4RESULTADOSYDISCUSIN
Enelcrecimientomicrobianorealizadomediante2tiposdiferentesdetcnicas,peroconunmismo
mediodecultivoqueson,agarinclinadoentubosdeensayoeinoculacinencajasPetri,seobservquelos
resultadoseransimilares.
Deacuerdoalaincubacinrespectivade96horasaunatemperaturade30C,selogrobservarun
crecimientodecoloniasmicrobianasyhongos.Estosedebealaquemuestrafueinoculadadirectamente
sinhacerningunadilucin.Ademslasiembrasehizoporcuadrantescubriendoensutotalidadlasuperficie

delagartantodelascajasPetricomodelostubosdeensayo,esporesoqueseobtuvouncrecimiento
bastanteproporcionado,endondesepudodivisarclaramenteestecrecimiento.
Enlaprcticasepartideunamuestra,blanco,esdecirdeunacajaPetriyuntubodeensayosin
sembrar,estonosayudaadeterminarquenuestromediodecultivoestlibredecontaminacinynodeber
crecerningntipodemicroorganismo,apartirdelsembroqueserealiceenlascajasyenlostubos,el
crecimientodemicroorganismossoloserdelamuestraelegida,esdecirdecadafrutaqueseencuentra
endescomposicin.Losresultadosasimplevistanosdemuestranquelasmanchasblancasyalgunasde
estas poseen un pelaje corresponde a un crecimiento de hongos, mientras que los puntos que se
encuentranagrupados,sonlascoloniasbacterianas.Losresultadosobtenidossemuestranenlasiguiente
Tabla1.

Tcnicasdesembrodemicroorganismos
Muestra

CajasPetri

TubosdeEnsayo

Blanco

Pltano

Hongos100%

Hongos100%

Manzana

Hongos50%
Bacterias50%

Aguacate

Hongos75%
Bacterias25%

Hongos90%
Bacterias10%

Zapote

Hongos20%
Bacterias80%

Hongos90%
Bacterias10%

Tomate

Bacteria100%

Tabla1.Cuadrocomparativodetcnicasdesembro

5CONCLUSIONES

Elcrecimientobacterianosedioenunamayorproporcindebidoaquealatcnicadesembrado
serealizenformadezigzagyporunmtododecuadranteselcualseesparceportodalasuperficiedel
mediodecultivo,posterioralprocesodeincubacinseanalizaronlasmuestrasdndonoscomoresultado
uncrecimientodehongosybacteriasconunadistribucinhomognea,procesorealizadoenuntiempode
96horasaunatemperaturade30C.
Porloqueconcluimosquedebidoaunabuenapreparacinycuidadodelmediodecultivosepudo
obtener un blanco y las muestras libres de contaminacin del ambiente. Las cuales se encontraban en
ptimascondicionesparaunabuenatcnicadesembrodemicroorganismos.
Ademssepusoconcluirquemediantelasdostcnicasdesembro,incubacinencajaPetriypor
medio de tubos de ensayo, se obtuvieron resultados similares en cuanto al crecimiento de los
microorganismos.

6REFERENCIABIBLIOGRFICA

[1]Restrepo,A.(2002).Enfermedadesinfecciosas6.Ed.Madrid:CorporacinparaInvestigaciones
Biolgicas.
[2]Collins,C.,&Lyne,P.(2006).MetodosMicrobiologicos.Zaragoza:Acribia.
[3]Pascual,M.,&Calderon,V.(1999).MicrobiologiaAlimentaria:MetodologiaAnaliticaparaAlimentos.
Chile:EdicionesDazdeSantos.

7ANEXOS

PREPARACIONDEMEDIODECULTIVO:

MUESTRASDEALIMENTOS:

Aguacate

Banano

Zapote

Tomate

Manzana

SIEMBRADEMICROORGANISMOS:

InoculacindeCajaPetri

AgarinclinadoenTubodeensayo

RESULTADOSDELSEMBRIODEMICROORGANISMOENCAJASPETRIYTUBOSDEENSAYO

TcnicadeCajasversusTcnicadeTubos

Blancodemuestra

MicroorganismospresentesenelPltano:

MicroorganismospresentesenlaAguacate:

MicroorganismospresentesenelZapote:


MicroorganismospresentesenlaManzana:

MicroorganismospresentesenelTomate: