O Gene SRY e a Determinao Sexual em Embries Humanos Reviso

Gene SRY and Sexual Determination in Human Embryos - Review

Nathalie Adamoglu de Mendona1; Marco Aurlio Beltrami Leo2; Carlos
Augusto Bucar Neto2 , Natlia Beltrami2; Paula Silva Arago2, Days Batista
Gomes2; Andr Moreira Rocha2; Josefa Moreira do Nascimento-Rocha3
RESUMO
Objetivo: Os mecanismos da determinao sexual ainda so pouco
explorados do ponto de vista acadmico e sua abordagem na literatura bsica ainda
merece maiores esclarecimentos, portanto esta reviso prev maiores elucidaes
relacionada aos mecanismos moleculares da determinao sexual durante o perodo
embrionrio. Fonte de dados: Os dados foram obtidos em novembro de 2014, a
partir da explorao de publicaes cientficas disponveis no Portal de Peridicos
da Capes, National Center for Biotechnology Information, Scientific Electronic Library
Online, Trip Database, Elsevier Health Sciences Periodicals, Springer Journals e
Google Acadmico, arquivadas no perodo de 1980 a 2014. Sntese dos dados: O
desenvolvimento sexual normal na embriognese regulado por diversos fatores,
quer para a diferenciao sexual feminina ou masculina e este processo esta sujeito
a erros geneticamente determinados. Com o objetivo de promover uma abordagem
sistemtica dos principais mecanismos moleculares de determinao gentica do
sexo, vrios trabalhos foram estudados, catalogados e alinhados de forma que as
definies, caractersticas e mecanismos se tornassem mais claros e evidenciados.
Foi verificado que o desenvolvimento do trato reprodutivo divide-se em duas fases
bastante distintas, as quais correspondem determinao sexual e a diferenciao
sexual. A determinao sexual ocorre com base na expresso de genes, enquanto
que a diferenciao sexual estimulada por protenas sinalizadoras produzidas a
partir da expresso destes genes que, em sua grande maioria esto intrinsecamente
ligados ao cromossoma Y, formando uma verdadeira cascata de ativao. As clulas
germinativas, por sua vez, so envolvidas pelos cordes testiculares onde iniciaro
suas mitoses e se esta no ocorrer, a meiose se iniciar espontaneamente,
direcionando o seu desenvolvimento para clulas germinativas femininas, induzindo
o desenvolvimento do ovrio. Concluso: O SRY (sex-determining region of the Y

chromosome) o principal gene envolvido na determinao do sexo masculino,

precedendo os primeiros sinais do desenvolvimento testicular. No cromossomo Y
gonadal o SRY induz uma cascata de acontecimentos celulares e moleculares que
resultam na organizao final do testculo, porem as evidncias sugerem que estes
processos genticos so muito mais complexos e ainda no se encontram
completamente esclarecidos.
PALAVRAS-CHAVE: Genes SRY, Protena da Regio Y Determinante do Sexo,
Fatores de Transcrio SOX.
ABSTRACT
Objective: The mechanisms of sex determination are still little explored from an
academic point of view and his approach in the basic literature also deserves further
clarification , so this review provides for further clarifications related to the molecular
mechanisms of sex determination during the embryonic period. Data source: Data
were collected in November 2014 from the exploitation of scientific publications
available in the Capes Portal, National Center for Biotechnology Information,
Scientific Electronic Library Online, Trip Database, Elsevier Health Sciences
Periodicals, Journals and Springer Google Scholar, archived from 1980 to 2014.
Summary of the findings: the normal sexual development in embryogenesis is
regulated by several factors, either for female or male sexual differentiation and this
process is subject to genetically determined errors. In order to promote a systematic
approach to key molecular mechanisms of genetic sex determination, several studies
have been studied, cataloged and aligned so that the definitions, characteristics and
mechanisms became more clear and evident. It was observed that the development
of the reproductive tract is divided into two distinct phases, which correspond to the
sex determination and sexual differentiation. The sex determination is based on the
expression of genes, while sexual differentiation is stimulated signaling proteins
produced from the expression of these genes, for the most part are intrinsically linked
to the Y chromosome, forming a veritable cascade activation. Stem cells, in turn, are
surrounded by their testicles cords which initiate mitosis and if this does not occur,
initiate a meiosis spontaneously directing their development for female germ cells,
inducing the development of the ovary. Conclusion: SRY ( sex-determining region of
the Y chromosome ) is the major gene involved in determining male, preceding the

first signs of testicular development. On the Y chromosome gonadal SRY induces a

cascade of cellular and molecular events that result in the final organization of the
testis, however the evidence suggests that these genetic processes are much more
complex and are not yet completely understood.
KEYWORDS: SRY Gene, Sex-Determining Region Y Protein, SOX Transcription
Factors.
INTRODUO
O desenvolvimento de caractersticas particulares para cada sexo
fundamental para estabelecer o comportamento fsico e social entre machos e
fmeas. A diferenciao sexual importante para o sucesso da reproduo tanto a
nveis sociais quanto biolgicos, porem vital que este dimorfismo seja compatvel
aos processos de formao e maturao de espermatozoides e ovcitos viveis
fertilizao.
As Drosophilas, por apresentarem testculos e ovrios to especializados,
constituiram, inicialmente, o modelo ideal para os estudos relacionados s
gonadogeneses, entretanto o entendimento sobre a embriologia do dimorfismo
sexual ainda merece esclarecimentos.
A distino no desenvolvimento das gnadas ocorre graas s informaes
genticas fornecidas pelos genes hometicos que respondem pela identidade sexual
de cada ser vivo. O sexo masculino determinado pelo fator de transcrio
localizado no cromossomo Y, o qual denominado de SRY e expressado na gnada
masculina indeterminada. Este fator de transcrio possui um domnio HMG (Grupo
alta mobilidade) que faz com que seja possvel para a sua ligao com o DNA
promovendo a alterao estrutural neste DNA. Esta alterao da forma permite a
abordagem da cromatina e a interao com fatores de transcrio que, por sua vez,
promovem a expresso de outros genes, iniciando a formao tanto dos testculos,
quanto dos outros rgos sexuais masculinos. Um dos primeiros efeitos da
expresso do SRY induzir a regulao da expresso do gene SOX9 na gnada em
desenvolvimento. Tanto o SOX9, quanto o SRY apresentam um grupo domnio de
alta mobilidade que suficiente para induzir a diferenciao dos testculos em
animais experimentais. Antes da diferenciao sexual, a protena SOX9

inicialmente encontrada no citoplasma das gnadas indiferenciadas de ambos os

sexos, mas a partir da expresso do hormnio anti-Mlleriano, ela transportada
para o ambiente nuclear das clulas gonadais do macho e se torna sub-regulada
nas fmeas, desta forma, a sinalizao nuclear propiciada pela expresso do SOX9
essencial para que a regulao diferenciao sexual masculina especfica seja
reprimida nas fmeas ou desencadeada nos machos. Apesar destes mecanismos
moleculares no estarem totalmente elucidados, importante considerar que a
diferenciao ocorrida entre os gneros acontece atravs de uma cascata de
ativaes do gene e existem ainda outros fatores envolvidos neste processo, tanto
antes como aps a expresso SRY. Esta reviso prope discernir os princpios
embriolgicos, do ponto de vista biomolecular, da determinao sexual em humanos.
METODOS
Foi conduzida uma busca nas bases de dados eletrnicos do Portal de
Peridicos da Capes, National Center for Biotechnology Information, Scientific
Electronic Library Online, Trip Database, Elsevier Health Sciences Periodicals,
Springer Journals e Google Acadmico, englobando o perodo de 1980 a 2014.
Foram utilizados os descritores Genes SRY, Protena da Regio Y Determinante
do Sexo, Fatores de Transcrio SOX, obtidos a partir da lista dos Descritores em
Cincias da Sade (DeCS), que permite o uso de terminologias comuns para
pesquisa, proporcionando a recuperao de contedos similares disponveis em
idiomas distintos. Entre os artigos acessados com estes descritores, foram
selecionadas as publicaes em portugus, espanhol, inglesas e francesas que
apresentaram informaes mais relevantes para o tema e mostraram uma
linguagem mais clara e concisa com melhor sntese dos conhecimentos. Procurouse dar preferncia por artigos que explicassem os mecanismos utilizados pelo gene
SRY na sua expresso e sua relao com outros genes importantes na
determinao sexual gonadal em mamferos e especialmente em humanos.
RESULTADOS E DISCUSSO
O interesse cientfico sobre os mecanismos de determinao sexual vem dos
tempos de Aristteles (384-322 aC), cujos postulados eram fundamentados em que

o dimorfismo sexual surgia de diferenas na temperatura do smen no momento da

copulao (DAMIANI, DICHTCHEKENIAN e SETIAN, 2000). No incio do sculo XX,
foi admitido que os fatores nutricionais fossem os determinantes do sexo (FRANCIS,
SOMA e FERNALD, 1993), mas a partir de 1950 o papel do cromossomo Y neste
processo comeou a ser ressaltado (GUBBAY et al, 1990) at que, por tcnicas de
biologia molecular, foi detectada uma regio no brao curto do cromossomo Y que
finalmente desvenda o locus de determinao testicular - o SRY, h tempo muito
procurada (DAGOSTINI et al, 2005).
O gene determinante do sexo masculino o SRY (MACLAUGHLIN e
DONAHOE, 2004), o qual expresso pelas clulas somticas da crista genital e
atua em parceria com FGF9, SOX9, DMRT1e SRY (SHE e YANG, 2014), enquanto
os principais genes envolvidos na determinao sexual feminina so os DAX1
(NR0B1), FOXL2, RSPO1, e WNT4. As gnadas dos mamferos so inicialmente
bipotenciais e apresentam a capacidade natural de se transformarem em um ovrio
ou testculo (DAMIANI et al, 2001). Assim que o destino dos testculos determinado
pela expresso do gene SRY, inicia-se a diferenciao de clulas de Sertoli e a sua
organizao estrutural como envoltrio das clulas germinativas primordiais dentro
dos cordes testiculares (YAO, DINAPOLI e CAPEL, 2003). No desfecho deste
processo, as clulas germinativas sob controle das clulas de Sertoli devem
permanecer na fase G1 do ciclo celular, sem sofrerem meioses.
O gene SRY humano se localiza prximo regio pseudoautossomal do
brao curto do cromossomo Y (Yp 11.3) (MKINEN et al, 2001). O gene consiste de
um nico xon e codifica uma protena de 204 aminocidos que exibe alta
similaridade com protenas nucleares no histnicas HMG1 e HMG2 (protenas
nucleares do grupo de alta mobilidade), esta possui um domnio central de ligao
ao DNA denominado HMG box homlogo ao ncleo de ligao das protenas
nucleares da alta mobilidade (DOMENICE et al, 2002).

O SRY compreende trs diferentes domnios: 1- o domnio N-terminal (NTD);

2 - domnio HMG box; e 3 - C-terminal do domnio (CTD). O domnio HMG
altamente conservado entre espcies e consiste de 79 cidos amino-polipeptdeo
(Fig. 1).

Figura 1 - No diagrama do SRY, o HMG box um domnio do DNA ligante com 80

aminocidos e dois locais de sinalizao nuclear (NLS) em cada
extremidade: o cam (constitudo por calmodulina) e o imp- (constitudo
por -importin). Os ltimos sete aminocidos do SRY podem ligar-se a
qualquer um dos domnios PDZ encontrados em SRY, os quais
interagem com a protena 1 ( SIP - 1 ). Os locais de possveis mutaes
da protena que afetam o desenvolvimento testicular esto agrupadas
no box HMG. No diagrama do SOX9 verificado um HMG box com
dois locais de sinalizao nuclear semelhantes estrutura do SRY,
entretanto o SOX9 codificado por trs exos que se ligam protena
termosensvel 70 ( HSP70 ) e tem um domnio de transactivao no
final do terminal carboxila, ao contrrio SRY (Adaptado de

KRONENBERG et al, 2008, p. 810).

.

Este domnio compreende trs -hlices que interagem com a sequncia de

consenso (A/T) ACAA (T/A) apresentado o sulco menor do DNA com uma afinidade
significativamente

elevada,

promovendo

uma

acentuada

curvatura

de

proximadamente 658-808nm, para a ligao local; as demais regies fora do

domnio HMG de SRY so mal conservadas (DE FELICI et al, 2013). Este gene
codifica a sntese da protena que recebeu a sua mesma denominao SRY. Esta,
formada por 79 aminocidos e atua como fator de regulao da transcrio,
atuando direta ou indiretamente na diferenciao das clulas de Sertoli.

A expresso do RNAm nas clulas somticas da crista genital XY precede aos

primeiros sinais do desenvolvimento testicular. O SRY (sex-determining region of the
Y chromosome) o gene-chave que inicia a determinao do sexo masculino em
quase todos os mamferos, exceto em monotremados, como o ornitorrinco (SHE e
YANG, 2014). Entretanto ele no atua sozinho, mas em combinao com outros
genes envolvidos em eventos regulatrios da diferenciao testicular (Quad. 1). Os
genes envolvidos nesta cascata so WT1 (Wilms tumor gene), GATA4 (GATA
binding protein 4), GATA2, SF1(steroidogenic factor 1 ) e SOX9 (MACLAUGHLIN e
DONAHOE, 2004; DAMIANI et al, 2001). O WT1 (Ckts) responsvel pela alta
expresso do gene SRY durante a formao da gnada masculina, ele se liga
diretamente regio promotora do SRY e promove a transativao da expresso de
SRY. O GATA4 e seu co-fator, em parceria com GATA2/Fog2 (GATA binding protein
2), esto envolvidos na diferenciao gonadal e suas caractersticas fsicas, esta
interao entre GATA4 e Fog2 necessria para que ocorra a expresso normal e
SRY, ocasionando a maturao das clulas de Leydig e diferenciao de clulas de
Sertoli. Trs genes so especificos para a diferenciao das clulas de Sertoli,
SOX9, AMH (Anti-Mllerian hormone) e Dhh (desert hedgehog) (JAUCH et al, 2012).
O gene GADD45g (Growth arrest and DNA-damage-inducible, gamma) se liga a
regio ao N-terminal de MAP3K4 e medeia a ativao de MAP3K4 (Mitogenactivated protein kinase 4), ento MAP3K4 ativa p38a e p38b atravs MAP2K,
resultando finalmente na regulao direta ou indireta do gene SRY. O GADD45g e
MAP3K4 tambm interagem com GATA4 fosforilando-o, depois de fosforilado GATA4
reconhece e se liga regio promotora do SRY (SHE e YANG, 2014).
Gene (Loco) Mutaes
WT1 (11p13)
SF-1 (9q33)
SOX-9 (17q24)
DHH (12q12-13.1)
DAX-1 (Xq21.3)
SRY (Yp11)

Protena relacionada e possvel funo

Fator de transcrio
Fator de transcrio, receptor nuclear
Fator de transcrio high-mobility-group
Protena sinalizadora
Regulador de transcrio, receptor nuclear
Fator de transcrio high-mobility-group

Quadro 1 - Genes Envolvidos na ativao e regulao do SRY (Adaptado de MACLAUGHLIN e

DONAHOE, 2004).

No sexo masculino aps ter ocorrido o desenvolvimento dos testculos, as

clulas primordiais germinativas (PCGs) passam a se denominar goncitos e se
isolam em cordes sexuais seminferos, a partir disto a expresso do gene SRY
induz a transformao destes precursores em clulas de Sertoli (MACLAUGHLIN e

DONAHOE, 2004). Assim, em volta das clulas de Sertoli os precursores das clulas
esteridicas desenvolvem-se em clulas de Leydig e as clulas germinativas em
espermatognias. O SOX9 um gene inicialmente expresso na face lateral do cume
genital bipotencial e um regulador de precursores das clulas de Sertoli, agindo
imediatamente aps o incio da expresso de gene SRY. Alm do SOX9 estar
envolvido na determinao do sexo, tambm est relacionado na formao do
sistema esqueltico.
Pode ocorrer uma interao entre o SRY e o gene SF1 para regular o SOX9.
SF1 recruta o SRY atravs de uma protena de interaes fsicas direta para os trs
stios do SRY, depois de ligados o complexo SRY-SF1 causa regulao positiva da
expresso de SOX9 nas gnadas masculinas, quando o nvel de expresso de
SOX9 chega a um limite crtico, ele pode reconhecer e ocupar os locais de ligao
ao SRY assim sinergicamente interagindo com o CTD da SF1 para promover o
manuteno de auto-regulao por SOX9. Mutaes no gene SRY podem causar
disgenesia gonadal com fentipo feminino nas clulas somticas (CHEN et al, 2013),
por outro lado, a perda de funo do gene SRY pode resultar em sndrome de Turner
com XO/XY ou mosaicismo (SHE e YANG, 2014) (Quad. 2).

Quadro 2 - Fluxograma dos genes envolvidos na determinao gonadal (Adaptado de DAMIANI et

al, 2001).

CONSIDERAES FINAIS
A biologia molecular tem avanado de forma considervel no esclarecimento
de passos cruciais na embriognese. A determinao sexual baseada numa
sucesso de eventos e nos mamferos existe um gene, o SRY, que regula a cascata
de expresso gnica direcionando a crista genital bipotencial a se diferenciar em
testculo ou ovrio. Este gene atuar crucialmente em parceria com o SOX9 para a
diferenciao da linhagem de clulas de Sertoli e determinao especfico do sexo

masculino. Evidncias sugerem que estes processos genticos so muito mais

complexos e ainda no se encontram completamente elucidados, sendo mais
dinmicos do que se retratou at o momento.
BIBLIOGRAFIA
CHEN, Y.S.; RACCA, J.D.; PHILLIPS, N.B.; WEISS, M.A. Inherited human sex reversal due
to impaired nucleocytoplasmic trafficking of SRY defines a male transcriptional threshold.
PNAS - Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. v.
110, n. 38, 2013, p.E3567-3576.
DAMIANI, D. et al. Genitlia ambgua: diagnstico diferencial e conduta. Arq Bras Endocrinol
Metab. v.45, n.1, p. 37-47, 2001.
DAGOSTINI, C.; GUS, R.; CAPP, E.; CORLETA, H.V.E. Gonadal cytogenetic analysis in
patients with primary amenorrhea. Rev Bras Ginecol Obstet. v. 27, n. 3 2005, p. 125-129.
DE FELICI, M.; COTICCHIO, G. et al. Origin, Migration, and Proliferation of Human
Primordial Germ Cells, (eds.). Oogenesis. n. 19, 2013. p. 19-37.
DOMENICE, S.; COSTA, E.M.F.; CORRA, R.V.; MENDONA, B.B. Aspectos Moleculares
da Determinao e Diferenciao Sexual. Arq Bras Endocrinol Metab. v. 46, n. 4, 2002,
p.433-443.
FRANCIS, R.C.; SOMA, K.; FERNALD, R.D. Social regulation of the brain-pituitary-gonadal
axis. Proc Natl Acad Sci . v. 90, 1993, p. 7791-7798.
GUBBAY, J.; COLLIGNON, J.; KOOPMAN, P.; CAPEL, B.; ECONOMOU, A;
MNSTERBERG, A. et al. A gene mapping to the sexdetermining region of the mouse Y
chromosome is a member of a novel family of embryologically expressed genes. Nature. n.
346, 1990, p. 245-250.
KRONENBERG, Henry M.; MEMED, Shlomo; POLONSKY, Kenneth S.; REED LARSEN, P.
Williams Textbook of Endocrinolog. 2008, 1936p.
MACLAUGHLIN, D.T. e DONAHOE, P.K. Sex Determination and Differentiation Mechanisms of Disease: Review Article. The new england journal of medicine. v. 350,
2004 p.367-78
JAUCH, R.; NG, C.K.; NARASIMHAN, K.; KOLATKAR, P.R. The crystal structure of the
SOX4 HMG domainDNA complex suggests a mechanism for positional interdependence in
DNA recognition. Biochemical Journal. v. 443, p. 3947, 2012.
MKINEN, A.; SUOJALA, L.; NIINI, T.; KATILA, T.; TOZAKI, T.Y.I.; MIYAKE, T.
HASEGAWA, T. X chromosome detection in an XO mare using a human X paint probe,
and PCR detection of SRY and amelogenin genes in 3 XY mares. Equine Veterinary
Journal. v. 33, n. 5, 2001, p. 527530.
SHE, Z.Y. e YANG, W.X. Molecular mechanisms involved in mammalian primary sex
determination. J Mol Endocrinol. n. 53, v. 1, 2014, p. 21-37.
YAO, H.H.; DINAPOLI, L.; CAPEL, B. Meiotic germ cells antagonize mesonephric cell
migration and testis cord formation in mouse gonads. Development. v.130, n. 24, p. 58955902, 2003 Dec.