AGO1012_REDVET

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CITOLOGA EXFOLIATIVA VAGINAL EN ALPACAS (Vicugna pacos) Y LLAMAS
(Lama glama): POSIBLES USOS

RESUMEN
La utilizacin de la citologa exfoliativa vaginal esta muy difundida en mascotas y
especies silvestres, mediante esta tcnica se puede revelar los cambio del epitelio
vaginal causados por las oscilaciones hormonales, en especial a las concentraciones
de estrgeno. No existen trabajos previos sobre este tema en camlidos
sudamericanos, pero luego de evaluaciones entre alpacas y llamas vacas y preadas
a diferentes estadios de gestacin, se encontr que las diferencias del ndice de
maduracin podran ser tiles como mtodos de diagnostico de gestacin e incluso
para determinar la dominancia estrognica en programas de biotecnologas
reproductivas.
INTRODUCCIN
La citologa exfoliativa vaginal es una herramienta muy simple, que se viene utilizando
con mucha eficacia para determinar el estado del ciclo estral que presenta en
especies como el perro, gato y otros mamferos ms, se correlaciona este estudio
citolgico con la concentracin de estrgenos sanguneos, los cuales producen
variaciones morfolgicas en las clulas planas del epitelio vaginal (Thrall y Olson,
2003).
La vagina es un rgano muscular cubierto internamente de epitelio estratificado plano
queratinizado (Dellman y Brown 1980), esta compuesta por tres capas: mucosa,
muscular y adventicia; la luz esta revestida por epitelio estratificado plano no
queratinizado, el cual sufre variaciones en el numero de capas que lo conforman
debido a cambios hormonales del animal, estos cambios producen la muerte de las
clulas de las capas superficiales con su consecuente queratinizacion y descamacin
(Feldman y Nelson 2000), puesto que se observ que estrgenos exgenos inducen
queratinizacion epitelial en la vagina, no ocurriendo lo mismo en caso de
progestagenos o andrgenos (Jones, and Edgren, 1973).
La lamina propia esta compuesta por tejido conectivo laxo con abundante riego
sanguneo, la capa muscular esta conformada por dos capas de msculo liso, una
interna circular y una externa longitudinal, por fuera se encuentra una delgada capa de
clulas mesoteliales que conforman la tnica adventicia (Gartner, y Hiatt, 2002;

Xelhuantzi, et al. 2004). Cambios en la estructura histolgica de la vagina suceden a

causa de la edad y la multiparidad del animal, incrementndose tambin la irrigacin
sangunea (Rodriguez, et al. 2004).
La correlacin entre la histologa vaginal a travs del ciclo estral y la citologa
exfoliativa vaginal en ovinos demuestra que ocurren cambios marcados, sobre todo en
l numero de capas del epitelio vaginal, la actividad mittica del estrato basal se
incrementa a medida que se acerca el momento de la ovulacin y luego decrece, as
tambin la descamacin de clulas superficiales, al momento del diestro se
encuentran muy pocas clulas superficiales descamadas y el epitelio no presenta
estrato superficial queratinizado (Hawkins, and Darlow, 1934).
Las clulas encontradas en frotices vaginales han sido clasificadas como clulas
parabasales (Redondas con poco citoplasma), clulas intermedias pequeas y
grandes (clulas mas grandes, ncleo grande, ligeramente ovaladas) y clulas
superficiales (anucleadas y con ncleo picnotico, citoplasma irregular) (Thrall, y Olson,
2003; Pieiro, et al. 1995).
Las dimensiones de los diferentes tipos de clulas encontradas en frotices vaginales
de gatos dieron los siguientes resultados: 68.5, 44.7 y 18.6 de largo para clulas
superficiales, intermedias y parabasales en promedio y 7.8, 10.0 y 8.3 de dimetro
nuclear para clulas superficiales, intermedias y parabasales respectivamente (Mills,
et al. 1979).
El ndice de maduracin es el porcentaje de clulas parabasales, intermedias y
superficiales encontradas en frotices vaginales, los cuales se relacionan a los
diferentes estados del ciclo reproductivo del animal en estudio (Mills et. al. 1979).
El estudio de la colpocitologia se presenta como un mtodo sencillo, barato, no
invasivo y de utilidad en la clnica en caninos, en los cuales se observan clulas
superficiales en valores superiores al 80 % cuando los animales se encuentran en la
fase de estro, disminuyendo este porcentaje a cerca del 20 % en el diestro, en el
anestro se observan solo clulas parabasales e intermedias pequeas (Stornelli et al.
2005), mientras en especies como el pecari de collar (Tayassu tajacu) el porcentaje de
clulas superficiales superiores al 60 % es un indicador del estro (Mayor et al. 2004),
en gatos, el ndice de maduracin se observa con 0.3, 11.6, 88.1 % y de 9.7, 87.4 y 2.9
% de clulas parabasales, intermedias y superficiales para el estro y el anestro
respectivamente (Mills et. al. 1979); durante el puerperio temprano se observa que el
perfil citolgico esta dominado por clulas parabasales en su mayora y existe una alta
presencia de leucocitos

Existen diversos mtodos de tincin de frotices vaginales, mono, bi y tricromicas, de

todos estos la tcnica mas fcil, barata y efectiva es la tincin monocrmica de Wright
(Tala, 2002)
La crianza de alpacas es una actividad importante para el poblador andino, pero dicha
crianza se ve afectada por la baja eficiencia reproductiva en condiciones de altura
(Novoa y Leyva, 1996). Existen muchos mtodos de diagnostico de gestacin, pero los
nicos mtodos que pueden ser utilizados tempranamente son la ecografa y la
determinacin de progesterona (Bravo, 2002), estas tcnicas aun que muy efectivas,
resultan difciles de aplicar por su alto costo y la necesidad de contar con equipo y
personal necesario, lo cual reduce su accesibilidad al criador promedio.
La fisiologa ovrica en alpacas demuestra que luego de la dominancia ovrica y la
ovulacin, el cuerpo lteo inicia su crecimiento y es dominante recin al da 4 post
copula, y si no existe gestacin este cuerpo lteo regresiona a partir del da 11, por lo
que al da 12 existe un cuerpo lteo de gestacin verdadera, con la consiguiente
dominancia de la progesterona (Bravo, 2002).
El diagnostico de gestacin mediante colpocilologia exfoliativa esta reportado en
especies de laboratorio como en monos del genero Aotus sp., donde se reporta que
los animales con mas de 70 % de clulas superficiales estn vacas y en fase folicular
(Rios, et al. 1999) y Callitrix sp. (Mitchell and Jones 1975) as como tambin en la
chinchilla y el hurn (> 90 % de clulas superficiales en estro), donde las diferencias
entre los ndices de maduracin de hembras vacas y preadas es evidente (Bekyrek,
et al. 2002; Williams, et al. 1992). La diferencia del epitelio vaginal entre hembras
vacas y preadas se puede determinar al encontrar 4 o menos capas de clulas en el
epitelio vaginal de marranas a los 25 das de gestacin, mayor cantidad de capas
indica que el animal no se encuentra gestante (Diehl, and Day, 1973).
En alpacas el mtodo del ultrasonido revela una seguridad del 89 % a partir de los 70
das de gestacin (Alarcn, et al. 1989) y de 92 % a los 80 das (Ampuero, et al.,
1989), por el mtodo de la ecografa con un transductor de 5 MHz se puede encontrar
la vescula embrionaria desde el da 17 y la presencia del embrin desde el da 30 en
llamas (Crdenas, et al 2003).
En los camlidos sudamericanos, en especial en las alpacas no se han realizado
investigaciones ni existen reportes relacionados a la colpocitologia exfoliativa, Una
alternativa de diagnostico temprano de gestacin podra constituir la utilizacin de la
colpocitologia exfoliativa.
1. Descripcin citologica de clulas vaginales de alpacas y llamas

Las muestras fueron tomadas de 10 alpacas y 10 llamas vacas, adultas y durante la

estacin reproductiva de la especie; fueron tomadas utilizando un hisopo de 10 cm, el
cual se introdujo a la vagina aproximadamente 7 cm y se realiz raspajes rotatorios a
la pared vaginal, inmediatamente despus se hizo rodar suavemente el hisopo en una
lamina portaobjetos, se fijo con alcohol de 90 y se dejo secar, posteriormente se
traslad al laboratorio donde se realiz la tincin con colorante Wright por 5 min., luego
se adicion agua tamponada por 3 minutos y se lavo con agua corriente, se dejo secar
y se llevo a su observacin en microscopio ptico a diferentes aumentos. La medicin
de las clulas se realiz utilizando un microscopio de proyeccin a 400 aumentos. El
anlisis estadstico se realiz mediante la prueba de Ji-Cuadrado (X2)
Se revel la existencia de formas celulares similares a las reportadas en otras
especies como en gatos y perros (Thrall, y Olson,. 2003; Pieiro, et al. 1995).
Las clulas parabasales se observan de forma redondeada, con un ncleo de gran
tamao y escaso citoplasma, estas clulas generalmente se encuentran formando
columnas celulares agrupadas, se puede observar algunas clulas parabasales
multinucleadas (Fig. 1).
Clula parabasal

clula intermedia pequea

Fig. 1.- Clulas parabasales e intermedia pequea

Las clulas intermedias pequeas se presentan como clulas de forma redondeada,
de mayor tamao que las clulas parabasales y con mayor cantidad de citoplasma
pero con el ncleo de igual tamao que estas ltimas, (Fig. 1).
Las clulas intermedias grandes se muestran como clulas de mayor tamao que las
clulas intermedias pequeas, son de forma ovalada y la presencia de mayor cantidad
de citoplasma es notorio al poseer un ncleo mas pequeo, en algunas clulas se
observa inicio de picnosis, pudindose confundir con clulas superficiales de ncleo
picnotico (Fig. 2).

Clula
intermedia
pequea

Clula intermedia
grande

Fig. 2.- Clulas intermedias pequeas y grandes.

Las clulas superficiales se presentan como clulas grandes de forma irregular,

angulosas y en algunos casos se muestran plegadas, pueden ser clulas superficiales
con ncleo picnotico, en este caso el ncleo se encuentra fragmentado, dbilmente
teido y en franca degeneracin, tambin existen clulas anucleadas, en este caso la
tincin es menos intensa por estar altamente queratinizada (Fig. 3).
Clula
superficial
anucleada

Fig 3.- Clulas superficiales

Tambin se encontraron clulas blancas en los frotices, generalmente neutrofilos, (Fig
4), se observo muy pocas clulas rojas.
neutrofilos

Clula superficial
con ncleo
picnotico

Fig. 4.- clula superficial y neutrofilos

En frotices de dos llamas se encontr un tipo singular de clula, se trata de clulas
pequeas, redondeadas y con la presencia de varios ncleos y/ de ncleos
polimorfos, se asume que se trate de clulas parabasales en mitosis, (fig 5).

Fig. 5.- Clulas multinucleadas y con ncleos polimorfos.

Las dimensiones encontradas de las clulas del epitelio vaginal de alpacas y llamas se
encuentran en la tabla 1.

Tabla 1.- Dimetros celulares encontrados en clulas y ncleos epiteliales de

alpaca y llama (m)

ESPECIE

Clula parabasal

Clula

Clula

intermedia

intermedia

pequea

grande

Clula
superficial

clula

ncleo

Clula

ncleo

clula

ncleo

clula

Alpaca

15.8

9.8

20.4

9.0

33.67

11.6

51.4

Llama

15.2

9.6

20.8

9.6

29.33

11.33

47.0

Las dimensiones celulares encontradas para alpacas y llamas llevadas a un anlisis

de Ji-cuadrado (X2) demuestran que no existe diferencia significativa (P0.05) entre
ambas especies de camlidos domsticos; estas dimensiones son inferiores a las
dimensiones reportadas en frotices vaginales en gatas (Mills, et al. 1979).
2. Citologa exfoliativa vaginal de la alpaca (vicugna pacos) en diferentes
estados reproductivos
Las muestras fueron tomadas de 10 alpacas vacas (5 aceptan la copula y 5 rechazan
la copula), 10 alpacas preadas y 12 alpacas de post parto temprano (2-5 das PP),
adultas y durante la estacin reproductiva de la especie; se realizo la tincin utilizando
la tcnica descrita anteriormente.
El ndice de maduracin indica un comportamiento similar a otras especies, con
incremento de clulas superficiales durante la dominancia estrogenica (Tabla 2),
presentando un porcentaje de 66.8 %, similar a lo descrito en pecaris pero inferior a lo
reportado en gatos, el comportamiento de las alpacas frente al macho es atribuido al
nivel de estrgenos presentes en la hembra (Bravo, 1997), este comportamiento
podra explicar la diferencia entre alpacas con conducta de aceptacin al macho y
rechazo durante la cpula, siendo esta diferencia no significativa (P 0.05).
Tabla 2.- ndice de maduracin en alpacas hembras vacas.

Promedio
Promedio
Promedio
general

Clulas
superficiales

Clulas
intermedias

Clulas
parabasales

Glbulos
blancos

Glbulos
rojos

54.08
79.52

29.14
15.42

8.04
1.86

5.94
0.0

2.68
0.0

Comportamiento.
rechaza
acepta

66.8

22.28

4.86

2.97

1.34

100

TOTAL

El porcentaje de clulas superficiales disminuye mientras el porcentaje de clulas

parabasales e intermedias se incrementa durante la gestacin (Tabla 3), presentando
valores similares al anestro en otras especies (Stornelli, et al. 2005; Mayor, et al. 2004;
Mills, et. al. 1979), donde se puede observar que las clulas superficiales muestran un
porcentaje inferior al 20 %, este dato podra ser utilizado en diagnostico de gestacin.
Tabla 3.- ndice de Maduracin en alpacas hembras preadas

promedio

Clulas
superficiales
%
12.6

Clulas
Intermedias
%
58.4

Clulas
parabasales
%
26.86

Glbulos
blancos
%
2.14

Glbulos
rojos
%
0.0

Durante el post parto temprano, el epitelio vaginal presenta un alto porcentaje de

clulas intermedias (Tabla 4), con muy bajos porcentajes de clulas superficiales,
indicando la no existencia de niveles estrogenicos que permitan la maduracin de
estas clulas (Mills, et. al. 1979), se puede observar la alta cantidad de neutrofilos
presentes en la vagina al segundo da post parto, debido probablemente a la
inflamacin del canal de parto, los cuales disminuyen bruscamente a partir del tercer
da post parto (Arthur, et al. 1991)
Tabla 4.- ndice de maduracin en alpacas hembras de post parto temprano
Das postparto
Da 2
Da 3
Da 4
Da 5

Clulas
superficiales
%
18.76
21.03
21.4
27.7

Clulas
intermedias
%
14.57
63.62
67.1
67.56

Clulas
basales
%
1.48
7.96
6.65
4.06

Glbulos
blancos
%
64.9
7.04
5.4
0.64

Glbulos
rojos
%
3.3
0.3
0.0
0.0

Se observan clulas similares a las reportadas en otras especies, por lo que los
protocolos de tincin y evaluacin de otras especies se pueden utilizar tambin en
evaluaciones de frotices vaginales en alpacas; tambin podemos concluir que los
datos obtenidos a partir de frotices vaginales en alpacas nos indican el estado del
epitelio vaginal, el cual cambia marcadamente de acuerdo al estado reproductivo del
animal, observando marcadas diferencias entre alpacas vacas y alpacas preadas,
pudiendo ser til como un mtodo complementario de diagnostico de gestacin,
puesto que al ser una tcnica no invasiva, no produce estrs en el animal, tambin nos
permite encontrar diferencias entre alpacas con comportamiento de rechazo y
aceptacin al macho, lo cual podra servir en empadre controlado as como en
inseminacin artificial donde no se cuente con macho detector; en cuanto a las
observaciones post parto, observamos que existe una gran cantidad de neutrofilos en

Total
%
100

los frotices y esto estara indicando la inflamacin que se produce en el canal de parto
hasta en segundo da, desde donde se observa una dominancia de clulas
intermedias.
3. Citologa exfoliativa vaginal en llamas (lama glama) en diferentes estados
reproductivos
Las muestras fueron tomadas de 10 llamas vacas y 10 llamas preadas, adultas y
durante la estacin reproductiva de la especie Se evaluaron los frotices de acuerdo a
la tcnica anteriormente descrita. La evaluacin estadstica fue hecha mediante la
prueba de t de Student (SAS).
Se encontr en frotices vaginales de llamas preadas y vacas, clulas parabasales,
intermedias y superficiales, similar a lo reportado en otros mamferos (Thrall, y Olson,.
2003; Pieiro, et al. 1995).
El ndice de maduracin en llamas vacas en fase folicular demuestra una dominancia
de clulas intermedias, con un promedio de 65.3 % superior a las clulas superficiales,
las cuales solo se encontraron en 28 % (Tabla 5), este comportamiento es diferente a
lo reportado en pecaria, gatos, hurones y alpacas (Mayor, et al. 2004; Mills, et al. 1979;
William, et al. 1990), en dichas especies, existe una dominancia de clulas
superficiales durante la dominancia estrogenica, lo cual no sucede en caso de llamas,
pero este comportamiento es similar a lo reportado en ovejas (Porto, et. al. 2007), en
donde se encuentra solo un 29.56 % de clulas superficiales durante el estro, la
diferencia entre clulas superficiales y las clulas intermedias es significativa (P<
0.05); las clulas parabasales se encuentran en un 6.3%, superior a lo reportado en
ovejas, los eritrocitos estuvieron ausentes y los leucocitos solo estuvieron en un 0.4%.
Tabla 5.- ndice de maduracin en llamas hembras vacas.

Promedio

Clulas
Clulas
superficiales intermedias
%
%
28
65.3

Clulas
parabasales
%
6.3

Leucocitos

Eritrocitos

%
0.4

%
0.0

TOTAL
%
100

En llamas preadas existe una dominancia de clulas intermedias (Tabla 6), siendo
esta diferencia estadsticamente significativa (P<0.05), este comportamiento es similar
a lo reportado en otras especies de mamferos, en los cuales se indica que el epitelio
vaginal detiene su crecimiento y no permite la maduracin y el incremento de clulas
superficiales durante la gestacin (Mayor, et al. 2004; Mills, et.al. 1979; William, et al.
1990), estos datos concuerdan con lo reportado en alpacas, donde se indica que
existe dominancia de clulas intermedias durante la gestacin, las clulas parabasales

se encuentran incrementadas en relacin a las llamas vacas y no se encontraron

leucocitos ni eritrocitos en frotices vaginales.
Tabla 6.- ndice de Maduracin en alpacas hembras preadas

promedio

Clulas
superficiales
%
4.4

Clulas
Intermedias
%
81.2

Clulas
parabasales
%
14.4

leucocitos
%

eritrocitos
%

Total
%

0.0

0.0

100

El anlisis estadstico de t de Student para clulas superficiales de llamas vacas y

llamas preadas presenta alta diferencia significativa (P < 0.05), lo que nos indica que
estas clulas estn incrementadas durante la fase folicular, pero que este ndice
disminuye durante la fase lutea; mientras la misma prueba para clulas intermedias no
evidencia diferencia estadstica significativa (P > 0.01), este comportamiento es
diferente a lo reportado en alpacas, en las cuales esta diferencia es altamente
significativa, pudindose diferenciar alpacas preadas de alpacas vacas mediante la
evaluacin de frotices vaginales y la observacin del ndice de maduracin, lo que no
sucede en llamas.
La evaluacin del ndice de maduracin de clulas epiteliales obtenidas por frotices
vaginales en llamas evidencian una dominancia continua de las clulas intermedias,
mientras que las clulas superficiales a pesar de ser diferentes entre ambos estados
fisiolgicos, no se encuentran mas all del 28 %, este comportamiento podra estar
indicando que las concentraciones de estrgenos sanguneos durante la fase folicular
no son suficientes para lograr un incremento de la cornificacion y descamacin de
clulas superficiales, as como sucede en otras especies en las cuales estas
diferencias posibilitan utilizar esta tcnica para determinar la fase del ciclo estral o del
estado fisiolgico en que se encuentra, e incluso ser utilizado como una tcnica de
diagnostico de gestacin, por lo que esta tcnica no tendra importancia clnica en esta
especie.
4. Modificaciones estructurales en vagina de alpacas (vicugna pacos) en
diferentes estadios reproductivos
Las muestras histolgicas fueron tomadas de 2 hembras vacas y 2 hembras preadas
post mortem, realizando la fijacin con Paraformaldehido y luego se realizaron cortes
histolgicos de 7 micras, coloreadas con Hematoxilina y Eosina y evaluadas en
microscopia ptica.
Las observaciones de cortes histolgicos de vagina (fig. 6) en hembra vaca revelan la
presencia de la mucosa cubierta con epitelio plano estratificado homogneo con

apariencia pavimentosa en la mayor parte de su extensin (Feldman, y Nelson, 2000),

con 7 capas o ms de clulas, observndose zonas con descamacin celular, las que
estaran siendo influenciadas por los altos niveles de estrgenos circulantes, puesto
que se observo la presencia de un folculo preovulatorio en dichos animales, mientras
que el numero de capas celulares estara confirmando la dominancia estrognica
(Jones, and Edgren, 1973; Hawkins, and Darlow, 1934; Diehl, and Day, 1973), posee
pliegues, algunos pronunciados a manera de criptas, la submucosa esta organizada
en fibras regulares y de manera laxa con bastante irrigacin y presencia de
acumulaciones linfociticas (Gartner, y Hiatt, 2002; Xelhuantzi, et al. 2004; Rodrguez,
et al. 2004), la capa muscular se encuentra organizada en dos capas delgadas y
cubiertas por clulas mesoteliales al exterior(Gartner, y Hiatt, 2002).
Fig 6.- Corte histolgico de vagina de hembra vaca
En el caso de hembra preada (Fig. 7), se observa la mucosa con epitelio estratificado
plano (Feldman, y Nelson, 2000) con una notoria disminucin del numero de capas
celulares a 5 o menos indicando la ausencia de estrgenos capaces de producir
proliferacin celular (Jones, and Edgren, 1973; Diehl, and Day, 1973), pero en algunas
zonas se observa la apariencia de un epitelio pseudoestratificado con clulas
cilndricas y zonas con engrosamiento con clulas cbicas hipertrofiadas y pocas
clulas descamadas queratinizadas, lo cual seria un comportamiento celular sui
generis en esta especie; el epitelio se observa delgado, con numerosas criptas o
pliegues a manera de rugosidades (Xelhuantzi, et al. 2004; Rodrguez, et al. 2004),
existen clulas grandes y globosas y clulas caliciformes, la submucosa tiene tejido
conectivo poco vascularizado y con contenido linfocitarios delgado, la capa muscular
se encuentra aumentada en grosor y la disposicin de las fibras se observa
desordenada, posiblemente debido a que fueron hembras preadas multiparas
(Gartner, y Hiatt, 2002; Rodriguez, J. et al. 2004).

Fig 7.- Corte histologico de vagina de hembra preada.

La relacin entre la evaluacin histolgica y los frotices vaginales en hembras vacas y
preadas es evidente, siendo consistente con lo mencionado en otras especies, en las
cuales, los frotices vaginales reflejan la accin estrognica sobre el epitelio vaginal y a
su vez se estara reflejando la actividad ovrica, estos resultados podran permitirnos

10

utilizar la tcnica de la colpocitologia y la determinacin del ndice de maduracin para

ser utilizada como una tcnica alternativa de diagnostico de gestacin en alpacas,

5. Diagnostico de gestacin mediante frotices vaginales y ecografa en alpacas

(vicugna pacos)
Se realizo el muestreo de 15 alpacas (3 por da) con diferentes das post copula (0, 3,
6, 9 y 12 das), comparndose luego a la necropsia mediante los hallazgos de
presencia de cuerpo lteo, embrin o hembra vaca (experimento I).
Se realizo el diagnostico de gestacin mediante ecografa, utilizando un ecgrafo
Medical con transductor transrectal de 5 MHz, se dividi en dos grupos de alpacas, el
primer grupo de 22 alpacas gestantes con 3 meses post copula y el segundo grupo de
37 alpacas gestantes con 4 meses post copula, al mismo tiempo se obtuvo los frotices
vaginales y luego se compar los resultados contrastndolos con los resultados de
ecografa (experimento II).
El anlisis estadstico se realiz mediante un diseo completamente al azar y se
obtuvo las medidas de tendencia central y la prueba de Chi-Cuadrado para determinar
la diferencia entre los resultados entre los dos tiempos de muestreo y las dos tcnicas
utilizadas.
Al da 0 las tres alpacas estuvieron vacas, a los 3 y 6 das

todas las alpacas

presentaron cuerpo lteo por lo que estaban en fase ltea, a los 9 y 12 das, todas las
alpacas tuvieron la presencia de embrin adems de la presencia de cuerpo lteo, los
resultados promedio hallados se resumen en la tabla 7:
Tabla 7.- Porcentajes de los ndices de maduracin en promedio encontrados en
alpacas a los 0, 3, 6, 9 y 12 das post copula.
Tipos celulares

Da 0

Da 3

Da 6

Da 9

Da 12

Superficiales

32.3

65.3

56.9

42.4

28.0

Intermedias

60.9

32.8

37.6

52.2

59.4

parabasales

6.8

1.9

5.5

5.4

12.4

Total (%)

100

100

100

100

100

De acuerdo a estudios previos, el ndice de maduracin de clulas del epitelio vaginal

refleja la actividad ovrica de fase folicular, presentndose un alto porcentaje de
clulas superficiales en hembras vacas (>60%) y valores menores a este
corresponden a hembras preadas o en fase lutea; el comportamiento de este ndice

11

en este experimento I demuestra una baja cantidad de clulas superficiales al da 0,

donde se hallo folculos preovulatorios (> a 7 mm), y se estara debiendo a que estas
alpacas tuvieron a esa fecha un promedio de 20 das post parto y que el mayor
porcentaje de clulas intermedias encontradas corresponden a un cambio epitelial de
una gestacin anterior y que aun no existi el recambio celular completo de la mucosa
vaginal; al da 3 las clulas superficiales llegan a su mas alto nivel, pero tomando en
cuenta que al da 3, el cuerpo lteo esta aun en crecimiento y no es dominante (Bravo,
2002), podra estar reflejando una descamacin acelerada debido a la alta
concentracin de estrgenos producidos por el folculo que ovul 3 das antes, estas
clulas van descendiendo gradualmente en los das 6, 9 y 12 de muestreo,
demostrando al da 12 una dominancia de las clulas intermedias, lo cual es
compatible con un estado de gestacin. las clulas parabasales se encuentran en baja
cantidad durante todos los das de observacin.
Luego de la realizacin de la evaluacin colpocitologica en 22 alpacas de 3 meses
post copula las cuales fueron determinadas como gestantes mediante ecografa, los
resultados obtenidos se muestran en la tabla 8 y en alpacas de 4 meses post copula
se muestran en la tabla 10:
Tabla 8.- Comparacin de diagnsticos de gestacin hallados mediante citologa
exfoliativa vaginal y ecografa a los 3 meses post copula.
condicin
preadas

diagnostico por
ecografa
22 (100 %)

diagnostico por
citologa exfoliativa vaginal
19 (86.4 %)

De los resultados encontrados, se encontr 22 alpacas preadas mediante ecografa,

de estas 22 alpacas, 19 hembras fueron diagnosticadas como gestantes mediante la
tcnica de citologa exfoliativa vaginal, las cuales tuvieron 30.67 % de clulas
superficiales en promedio, y las tres alpacas vacas tuvieron como promedio 75.3 % de
clulas superficiales (Tabla 9); lo cual representa el 86.4 % de confiabilidad de esta
nueva tcnica propuesta; las 3 alpacas que restan representan un 13.6 % de error de
esta tcnica.
Tabla 9.- ndices de maduracin para alpacas vacas y preadas encontradas
mediante frotices vaginales en alpacas a los 3 meses post monta.
clulas
superficiales
intermedias
parabasales

alpacas vacas alpacas preadas

(%)
(%)
75.3
30.67
23.4
66.8
1.3
3.25

12

Tabla 10.- Comparacin de diagnsticos de gestacin hallados mediante

citologa exfoliativa vaginal y ecografa de 4 meses post copula.
diagnostico
por
ecografa
37 (100 %)

condicin
preadas

diagnostico por
citologa exfoliativa vaginal
27 (73.0 %)

De los resultados hallados, se encontr 37 alpacas preadas mediante ecografa, de

estas 37 alpacas, 27 hembras fueron diagnosticadas como gestantes mediante la
tcnica de citologa exfoliativa vaginal, las cuales presentaron un promedio de 27.8 %
de clulas superficiales, mientras que las alpacas vacas tuvieron 74.03 % de clulas
superficiales (Tabla 11), lo cual representa el 73.0 % de confiabilidad de esta nueva
tcnica propuesta; las 10 alpacas que restan representan un 27.0 % de error de esta
tcnica.
Tabla 11.- ndices de maduracin para alpacas vacas y preadas encontradas
mediante frotices vaginales en alpacas a los 4 meses post monta.
clulas
superficiales
intermedias
parabasales

alpacas vacas
(%)
74.03
24.7
1.27

alpacas preadas
(%)
27.8
68.8
3.4

Luego de realizar una prueba de Ji-cuadrado con correccin de Yates entre los
porcentajes encontrados a los 3 (86.4 %) y 4 (73.0 %) meses, no se encontr
diferencia estadstica entre ambos resultados (P>0.05), lo cual nos indica que estos
resultados son consistentes con un comportamiento similar en ambos meses de
muestreo.
Estos resultados son ligeramente inferiores a los porcentajes de gestacin obtenidos
por ecografa reportados por Alarcn, et al 1989 y por Ampuero, et al 1989, puesto que
estos autores realizaron el diagnostico de gestacin de manera mas temprana, a los
70 y 80 das respectivamente.
En todos los casos, las alpacas vacas presentaron mas del 60 % de clulas
superficiales, similar a lo reportado en otras especies, existiendo antecedentes de
utilizacin de la colpocitologia exfoliativa para el diagnostico de gestacin en otras
especies (Rios, et al. 1999; Callitrix sp; Mitchell and Jones 1975), estos resultados
representan una nueva posibilidad de realizar el diagnostico de gestacin en la alpaca,
as como se realiza en especies como la chinchilla y el hurn (Bekyrek, et al. 2002;
Williams, et al. 1992).

13

Se puede concluir que existe un cambio del epitelio vaginal en alpacas preadas, lo
cual puede ser evaluado mediante frotices vaginales y teidos con Whrigt para obtener
el ndice de maduracin en estadios tan tempranos como en los primeros 12 das de
gestacin; en el experimento II, en ambas observaciones a los 3 y 4 meses de
gestacin, comparando con la tcnica de ecografa, se puede concluir que el
porcentaje de confiabilidad para la tcnica de diagnostico de gestacin mediante
frotices vaginales es aceptable, puesto que en promedio de las dos observaciones se
tiene un 79.7 %, por lo cual se podra recomendar esta tcnica como una alternativa
de diagnostico de gestacin.

BIBLIOGRAFA
1. Alarcon, V.; Plasencia, A. y Sumar, J. 1989. Diagnostico de Gestacin por ultrasonido
en la Alpaca. (Lama pacos) y la Llama (Lama glama). Resmenes de Investigacin
1980-1989. Direccin de Investigacin. FMVZ-UNA Puno Per.
2. Ampuero, E., Alarcon, V. y Alpaca, J. 1989. Evaluacin de diferentes mtodos de
diagnostico de gestacin en alpacas. Bol. DIV. N 02 CER UNSAAC. Cusco Per.
3. Bekyrek, T; Liman, N. and Bayram, G.. 2002. Diagnosis of cycle by means of vaginal
smears method in the chinchilla (Chinchilla lanigera) lab animals. Vol 4: 11-13
4. Bravo, W. 2002. The process reproductive of south american camelids. Printed by
Seagull Printing, Salt Lake City, UT. USA.
5. Bravo, W., Fowler, M.E., Stabenfelt, G.H and Lasley, B.L. 1990. Ovarian follicular
dynamics in the llama. Biol of reprod. 45, 579-585.
6. Cardenas, O., Ratto, M., Cordero, A., y Huanca, W., 2003. Evaluacin de prdida fetal
Temprana en llamas mediante ultrasonografa. Libro de resmenes del III Congreso
Mundial sobre Camlidos. Potos. Bolivia
7. Dellman, H. y Brown, E. 1980. Histologa Veterinaria. Cuarta Edicin, Editorial ACRIBIA
Espaa.
8. Diehl, J.R. and Day, B.N. 1973. Utilization of frozen sections with the vaginal biopsy
technique for early pregnancy diagnosis in swine. J. Anim. Sci. Volo 37, n 1; pp: 114117.
9. Feldman, E.C. y Nelson, R. W., 2000. Endocrinologa y Reproduccin en perros y
gatos. Segunda Edicin. Editorial McGraw-Hill Interamericana. Mxico.
10. Gartner, L. y Hiatt, J. 2002. Texto Atlas de Histologa. Segunda Edicin. Editorial
McGraw-Hill Interamericana. Mxico.

14

11. Hawkins, L.E. and Darlow, A.E. 1934. Hystology of the reproductive tract in the ewe
during the oestrous cycle. J. Anim. Sci. pp: 274-277.
12. Jones, R.C. and Edgren, R.A. 1973. The effects of various steroids on the vaginal
histology in the rat. Fertil. Steril., 24 (4), pp: 284-291.
13. Mayor, P.; Galvez, H.; Guimaraes, D. A. y Lopez-Bejar, M. 2004. Caractersticas del
estro de la hembra de pecari (Tayassu tajacu) del este amaznico. Memorias: Manejo
de Fauna Silvestre en Amazonia y Latinoamrica.
14. Mills, J. N.; Valli, V.E. and Lumsden, J.H. 1979. Cyclical changes of vaginal cytology in
the cat. Can. Vet. J. 20: 95-101.
15. Mitchell, S. and Jones, S.M. 1975. Diagnosis of pregnancy in marmosets (Callitrix
jachus). Laboratory animals, n 9:46-56.
16. Novoa, C., y Leyva, V. 1996. Reproduccin el alpacas y llamas. Pub. Cient. IVITA n 26.
E.E. La Raya-Marangani. FMV. UNMSM. Lima Peru.
17. Pacheco, J.I. y Barcena, E. 2008. Citologa Exfoliativa Vaginal de la Alpaca (Vicugna
pacos) en diferentes estados reproductivos. Memorias del XIX Congreso Nacional de
Ciencias Veterinarias. Puno. Per.
18. Pacheco, J.I.; Barcena, E. y Mollisaca, A. 2008. Descripcin citologica de frotices
vaginales de alpaca (Vicugna pacos) y Llama (Lama glama). Memorias del XIX
Congreso Nacional de Ciencias Veterinarias. Puno. Per.
19. Pacheco, J.I.; Barcena, E. y Portocarrero, A. 2008. Modificaciones estructurales en
vagina de alpacas (Vicugna pacos) en diferentes estadios reproductivos. Memorias del
I Simposium Internacional en Camlidos Sudamericanos. Avances de Investigacin
Cientfica y Tecnolgica. Cusco, Per.
20. Pieiro, C.; Gorraiz, J.M.; Martin, N. y Amigo J.M. 1995. Green Book del Veterinario. 2
Edicin. Editorial Marban. Madrid Espaa.
21. Porto, R.R.; Vasconcelos, T.; Ferreira, F.; Moreira, J. and Torres de Souza, J. 2007.
Perfil citologico vaginal de ovelhas da raca Santa Ins no acompanhamento do ciclo
estral. Ciencia Animal Brasileira. V 8; n 3; p:521-527.
22. Rios, P.; Echevarria, L, Santillan, G. Y Galvez, H. 1999. Imagen citologica vaginal
durante el ciclo ovarico en monos nocturnos Aotus Nancymae y A. vociferans. Rev. Inv.
Vet. Per. 10 (2): 17-21.
23. Rodriguez, J.; Garcia, M.; Fajardo, V. Y Martinez, M. 2004. Histologa del tracto
urogenital inferior de la coneja domestica: relacin con la edad y numero de partos.
Resmenes del XXVIII Congreso Nacional de Histologa, Mexico D.F.
24. Stornelli, M.A.; Savignone, C. A.; Tittarelli, M. C. y Stornelli, M. C. 2005. Citologa
vaginal en caninos: relacin con diferentes procesos fisiolgicos y patolgicos.
Aspectos Reproductivos de la Hembra. FCV-UNLP. Argentina.
25. Tala, R. 2002. Citologa exfoliativa del epitelio vaginal de la perra (Canis familiaris) en la
altura durante el ciclo reproductivo. Tesis FMVZ UNA-Puno. Per.

15

26. Thrall, M.A. y Olson, P.N. 2003. La Vagina, en: Citologa y Hematologia Diagnostica en
el Perro y el Gato, por: Cowell, R.; Tyler, R.D. y Meinkoth, J. 2 Edicin. Editorial Mosby,
Barcelona Espaa.
27. William, E.; Thorne, T.; Kwiatkowski, D.; Lutz, K. And Anderson, S. 1990. Comparative
vaginal cytology of the estrous cycle of black-footed ferrets (Mustela nigripes), siberian
polecats(Mustela eversmanni)band domestic ferrets (Mustela putorius furo) J Vet Diagn
Invest. 4: 38-44.
28. Xehuantzi, N.; Rodriguez, J.; Pacheco, P. Y Martinez, M. 2004. Estudio histologico de la
vagina pelvica de la coneja domestica. Resmenes del XXVIII Congreso Nacional de
Histologa, Mexico D.F.

16