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Universidad Autnoma de Chiapas

Facultad de Ciencias Qumicas C-IV


Lic. Qumico Farmacobilogo
Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I

Manual de prcticas de
Bioqumica Clnica I
Elaborado por:
Prof. Martn Velzquez Gmez
Maestro en Ciencias en Salud Pblica
Especialista en Bioqumica Clnica y Medicina Transfusional

Vo. Bo por:
Mtro. Miguel ngel Rodrguez Feliciano
Coordinador de la FCQ. Extensin Ocozocoautla

Ocozocoautla de Espinoza, Chiapas; Agosto 2015

CONTENIDO

INTRODUCCIN55555555555555555555555555..

OBJETIVO DEL LABORATORIO5555555555555555555..

EVALUACIN DEL LABORATORIO555555555555555555

PRCTICA 1. EXAMEN GENERAL DE ORINA5555555555555.

PRCTICA 2. DEPURACIN DE CREATININA5555555555555

PRCTICA 3. PERFIL COPROLGICO5555555555555555.

10

PRCTICA 4. GLUCOSA BASAL Y POST-PRANDIAL55555555.......

13

PRCTICA 5. CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA ORAL55555

14

PRCTICA 6. HEMOGLOBINA GLICOSILADA5555555555555

16

PRCTICA 7. PERFIL DE LPIDOS CON RIESGO ATEROGNICO5555

18

BIBLIOGRAFA555555555555555555555555555

19

I. INTRODUCCIN
La base material de la vida est constituida por un conjunto complejo de interacciones y
transformaciones moleculares. La disciplina encargada del estudio de estos procesos es
la Bioqumica o Qumica Biolgica. Est, como cualquier otra disciplina en que se
estudien molculas, sus interacciones y transformaciones, requiere como antecedente
bsico la Qumica.
El laboratorio clnico es un ambiente dinmico que est continuamente cambiando para a
satisfacer las necesidades de salud pblica. El presente manual ser de mucha utilidad
como recurso informativo en la formacin de los alumnos en el rea de Bioqumica
Clnica. El aspecto valioso de la informacin es que tiene un enfoque actual de los
procesos habituales de laboratorio como la tendencia tecnolgica de la automatizacin, lo
que permite enfrentar el reto de manejar pruebas ms sensibles, especficas y efectivas
en el monitoreo de la salud y la enfermedad. Adems, la posibilidad de obtener resultados
a tiempo y el costo-beneficio que representa.
La Bioqumica Clnica es un campo multidisciplinario cuya finalidad es la aplicacin de la
Ciencia Qumica para contribuir a la resolucin de problemas de salud. La funcin del
laboratorio de Bioqumica Clnica es realizar anlisis, tanto cualitativos como cuantitativos,
en fluidos corporales como sangre, orina, lquido seminal, lquido cefalorraqudeo, etc.
Para que los resultados de dichos anlisis sean tiles a los mdicos en el diagnstico,
tratamiento y seguimiento de una enfermedad, stos debern realizarse bajo un estricto
control de calidad logrando niveles ptimos de precisin y exactitud, caractersticas
deseables en cualquier resultado de diagnstico.
Los nuevos mtodos analticos se desarrollan con el fin de mejorar la exactitud y la
precisin de los mtodos existentes, tambin tiene el propsito de permitir el manejo de
equipo automatizado, para reducir los costos de los reactivos o de la mano de obra, o
para medir un compuesto nuevo. En cualquier caso, se debe verificar experimentalmente
el rendimiento analtico en el laboratorio clnico mismo, aun si se cree que el mtodo
nuevo es una mejora con respecto a los mtodos anteriores. La extensin de los
experimentos y la interpretacin de los datos van a depender del propsito de la
evaluacin y de quien la realiza, pero el fundamento bsico y el diseo experimental son
similares en todas las evaluaciones.
El proceso de evaluar un mtodo es distinto del proceso rutinario para el control de
calidad, despus de haber sido introducido en la rutina diaria. El control de calidad
rutinario (diario) es un proceso establecido por medio del cual se detectan los incrementos
en los errores analticos de un mtodo con el fin de evitar la liberacin de datos
incorrectos de los pacientes. El control de calidad rutinario detecta los errores slo cuando
estos son superiores a los errores presentes registrados en el momento que se

establecieron los intervalos para los controles. El uso del control de calidad rutinario no le
permite al investigador determinar la magnitud de los errores inherentes del mtodo o de
decidir si son aceptables.
II. OBJETIVOS DEL LABORATORIO
Que el alumno sea capaz de realizar el anlisis de productos biolgicos incluyendo
una adecuada manipulacin de los especmenes, desde la toma y/o recepcin de
muestras hasta la entrega de resultados.
Que el alumno adquiera una formacin y preparacin en Bioqumica que le permita
afrontar los retos que encontrar en su vida profesional, ante el creciente nmero
de tcnicas que continuamente se estn desarrollando para la deteccin y
cuantificacin de metabolitos de inters en la medicina moderna.
Que el alumno adquiera los elementos formativos que le permitan desarrollar una
actitud y pensamientos crticos, y de independencia en el trabajo.
III. EVALUACIN DEL LABORATORIO
Acreditar el laboratorio corresponde al 20% de la calificacin total de la Asignatura de
Bioqumica Clnica I; la cual se desglosa de la siguiente manera:
Asistencia al laboratorio 5555555.
Informe de prctica 555555555.
Examen de laboratorio (prctica) 555.
1
Buenas prcticas de laboratorio 555...

20%
30%
30%
20%

Total444. 100%
El informe o reporte de prcticas deber contener lo siguiente:
Ttulo de la prctica
Nombre completo y grupo del alumno (a)
Introduccin
Objetivo
Material y mtodo utilizado; describiendo el texto en tiempo pasado.
Resultados obtenidos
Conclusiones
Cuestionario resuelto
Bibliografa consultada
1

Las buenas prcticas de laboratorio son los principios bsicos que se desarrollan para que los estudios se
conduzcan con una buena planeacin, con la ejecucin apropiada y con documentacin completa; adems se
apegan a un conjunto de normas y actividades relacionadas entre s, destinadas a garantizar que los
resultados analticos producidos cumplen con la exactitud, trazabilidad, seguridad, precisin y documentacin.

Nota: Utilizar letra Arial nmero 12 con interlineado de 1.15 y justificado todos
los mrgenes, entregar hojas engrapadas, no engargolar ni usar carpetas o folder,
sin
portada.
IV.PRACTICA 1: EXAMEN GENERAL DE ORINA
Desde el punto de vista del laboratorio clnico una de las pruebas ms solicitadas de
manera rutinaria es el examen general de orina (EGO), en el cual se realiza el anlisis
qumico (pH, glucosa, urobilingeno, etc.), anlisis fsico (color, aspecto) y de manera
conjunta el anlisis microscpico del sedimento urinario (SU) en busca de elementos
formes (eritrocitos, leucocitos, bacterias, cilindros, etc.). Si bien es una prueba
considerada) de rutina es de suma importancia su adecuada interpretacin ya que nos
proporciona datos sumamente importantes.
El anlisis del SU es una de las pruebas de laboratorio ms solicitada para el estudio y/o
valoracin de pacientes con padecimientos renales. De manera general, las
enfermedades renales y de las vas urinarias representan un problema de salud pblica
importante y su diagnstico tardo afecta la calidad de vida del paciente, llegando en los
casos ms severos a incapacidad y/o muerte.
a) Objetivo particular
El alumno describir y determinar los parmetros macroscpicos, fisicoqumicos y
microscpicos de la orina, logrando interpretar y explicar las alteraciones patolgicas
relacionadas con los resultados que se obtienen.
b) Materiales
Muestra de orina recin emitida (mximo 2 horas de recoleccin)
Tiras reactivas para urianlisis
Centrifuga clnica de 1000 a 4000 RPM
Microscopio ptico
Portaobjetos 24 x 55 mm
Cubreobjetos 24 x 24 mm
Micropipeta volumen variable de 5 a 50 uL y 100 a 1000 uL
Puntas amarillas (nuevas o recicladas)
Colorante Sternheimer-Malbin
Tubos de ensaye 13 x 100 mm (plstico o vidrio)
Tapones de hule para tubos de ensaye
Gradilla metlica o plstica
Aplicadores de madera
Sanitas o servilletas

c) Mtodo
Identificar correctamente la muestra de orina anotando en el frasco nombre
completo del paciente, fecha de recoleccin, edad, sexo, nmero de folio y
diagnstico (si se dispone)
Mezclar la muestra por inversin del frasco por 5 veces y depositar en un tubo de
ensaye de 13 x 100 mm aproximadamente 7 mL de orina.
Colocar el tapn de hule y mezclar nuevamente por inversin el tubo de 3 a 5
veces. Observar a contra luz el color y el aspecto de la orina. Anotar los resultados
en el formato de informe.
Colocar el tubo en la gradilla, quitar el tapn, extraer una tira reactiva del frasco
(tapar inmediatamente el frasco contenedor de las tiras), sumergir verticalmente la
tira reactiva dentro de la orina por un tiempo de 5 a 7 segundos, retirar y colocar la
tira sobre una sanita o servilleta para eliminar el exceso de muestra.
Apegarse a los tiempos de reaccin descritos en el inserto del fabricante de las
tiras reactivas.
Anotar resultados de los parmetros fisicoqumicos en el formato de informe.
Colocar el tapn de hule nuevamente al tubo de ensaye que contiene la muestra y
centrifugar a 2500 RPM por 5 minutos.
Pasado el tiempo de centrifugacin, realizar lo siguiente:
Orinas transparentes, decantar todo el tubo eliminando la mayor parte de
sobrenadante
Orinas ligeramente turbias, extraer 500 uL de sobrenadante con una pipeta,
eliminar el resto por decantacin y depositar nuevamente los 500 uL de
sobrenadante extrado y mezclar.
Orinas turbias, lo mismo que el anterior pero con 1000 uL
Colocar 5 uL de colorante Sternheimer-Malbin sobre el portaobjetos y aadir 50 uL
de sedimento urinario.
Mezclar con un aplicador de madera con movimientos circulares hasta mezclar el
colorante con la muestra.
Agregar un cubreobjetos y observar al microscopio. Primero enfocar el campo con
el objetivo 10x y observar rpidamente en busca de cilindros o cilindroides,
despus enfocar con el objetivo 40x.
Observar toda la muestra y reportar lo observado clasificando de la siguiente
forma:
Clulas epiteliales en uretrales o escamosas, uroteliales o de transicin y
renales o tubulares,
Elementos formes en eritrocitos, leucocitos, piocitos (leucocitos reactivos o
destellantes),
Bacterias (cocoides o bacilares),

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Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
Levaduras en gemacin, micelios o pseudo-micelios,
Cristales,
Cilindros,
Entre otros.
d) Informe de resultados
Nombre completo del paciente:
Edad:
Sexo:
Folio asignado:
Aspecto:
Olor:
Color:
Densidad:
pH:
Protenas:
Glucosa:
Sangre:
Bilirrubinas:
Urobilingeno:
Cuerpos cetnicos:
Nitritos:
Esterasa leucocitaria:
Clulas epiteliales:
Leucocitos:
Piocitos:
Eritrocitos:
Bacterias:
Levaduras:
Trichomonas vaginalis:
Cilindros:
Cristales:
Filamentos de muscina:
Observaciones:
e) Cuestionario
Cul es la diferencia entre sedimento y sobrenadante?
Mencione el principio del colorante de Sternheimer-Malbin
Cul es la dilucin final del colorante con el sedimento urinario?
Qu relacin existe entre las protenas y los cilindros?

En que situaciones se pueden encontrar cilindros y eritrocitos en el sedimento


urinario
Qu importancia tienen informar las clulas claves y los espermatozoides del
sedimento urinario?
Cul es el fundamento bioqumico de la presencia de nitritos en la orina?
Qu son los Piocitos y que nos informa su presencia en la orina?
Qu tipo de cristales se pueden encontrar en una orina alcalina?
Cul es el umbral renal de la glucosa?
V. PRACTICA 2. DEPURACIN DE CREATININA
En muchos pacientes, la valoracin de la funcin renal se realiza mediante la
determinacin de la creatinina plasmtica, parmetro que no refleja el mismo grado de
funcin renal en todos los pacientes, al estar influenciada por una serie de factores como
la edad, sexo, raza, superficie corporal, tipo de dieta, el uso de ciertas drogas. Para evitar
estas limitaciones, es necesario recurrir al aclaramiento o depuracin de creatinina (DC)
que refleja con mayor exactitud el filtrado glomerular y puede detectar precozmente el
deterioro de la funcin renal, antes de la elevacin de las cifras de creatinina. Hoy da
existen frmulas alternativas para medir la DC a la frmula utilizada mediante la recogida
de orina de 24 horas, basadas en una estimacin indirecta, a partir de la creatinina srica,
edad, sexo y peso.
La importancia de medir la depuracin, no se debe solo a una mejor valoracin de la
funcin renal, sino para detectar precozmente pacientes considerados normales mediante
la determinacin de creatinina plasmtica.
a) Objetivo particular
El alumno realizar y estimar la depuracin de creatinina de un volumen recolectado por
24 horas de acuerdo a la superficie corporal del paciente.
b) Materiales
Muestra de orina recolectada durante 24 horas
Muestra sangunea en tubo rojo en ayunas del paciente en estudio
Reactivo para determinacin de creatinina en sangre y orina (Jaff cintico)
Centrifuga clnica de 1000 a 4000 RPM
Fotmetro o espectrofotmetro con rango de medicin de 490 a 510 nm
Cronmetro
Probeta graduada de 100 o 1000 mL
Tubos de ensaye de 13 x 75 mm
Celdas para espectrofotmetro
Micropipeta volumen variable de 5 a 50 uL y 100 a 1000 uL

Puntas amarillas y azules (nuevas o recicladas)


Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Sanitas o servilletas
c) Mtodo
Tomar una muestra de sangunea de 3 a 5 mL de sangre en tubo sin
anticoagulante del paciente en estudio, rotulando con los datos de nombre
completo, edad, sexo y folio asignado.
Dejar coagular la muestra de 20 a 30 minutos y centrifugar a 3500 RPM por 5
minutos.
Separar el suero del paquete globular y colocarlo en un tubo limpio y seco
anotando nombre completo, edad, sexo y folio asignado.
Medir la talla (en centmetros) y peso (en kilogramos) del paciente.
Medir el volumen (en mililitros) de la orina recolectada de 24 horas con ayuda de la
probeta graduada.
Despus de medir el volumen, tomar una alcuota de 5 mL y centrifugar a 3500
RPM por 5 minutos.
Colocar 490 uL de agua destilada o tridestilada en un tubo de ensaye y agregar 10
uL de sobrenadante de orina centrifugada (dilucin final 1:50; factor para
concentracin final de creatinina en orina 50)
Determinar la concentracin de creatinina en suero y orina (mg/dL) aplicando el
procedimiento establecido en el instructivo del reactivo en uso.
Calcular el valor de la superficie corporal del paciente mediante la siguiente
frmula:
Superficie corporal (SC) = [(talla-cm)

0.725

x (peso-kg)

0.425

] x 0.0072

Estimar la depuracin de creatinina mediante la siguiente frmula:


Depuracin de creatinina (DC) = (creat. en orina-mg/dL) (volumen de orina 24 hrs-mL)
1.73 (creat. en sangre-mg/dL) (1440 minutos)

SC
Lmites de decisin:
Creatinina en sangre:

Hombres: 0.7 a 1.4 mg/dL


Mujeres: 0.6 a 1.1 mg/dL

Creatinina en orina:

Hombres: 10 a 20 mg/kg/24 horas


Mujeres: 8 a 18 mg/kg/24 horas

Depuracin de creatinina:

Ambos sexos: Mayor a 70 mL/minuto

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d) Informe de resultados
Nombre del paciente:
Edad:
Sexo:
Fecha:
Folio:
Diagnstico presuntivo:
Creatinina en sangre (mg/dL):
Creatinina en Orina (mg/dL):
Volumen de orina de 24 horas (mililitros):
Superficie corporal:
Depuracin de creatinina (mL/min):
e) Cuestionario
Qu es el anlisis de depuracin de creatinina (DC)?
En qu situaciones mdicas es indicada una DC?
Cules son las indicaciones que se le dan al paciente para realizar la colecta de
la muestra?
Cul es el principio o fundamento del mtodo utilizado en la determinacin de la
creatinina?
Qu limitaciones pueden existir al realizar la estimacin de la DC?
VI.PRACTICA 3. PERFIL COPROLGICO
El estudio o anlisis de las heces, comprende la observacin macroscpica, microscpica,
anlisis qumico y parasitolgico de la deposicin. Es importante considerar que las
muestras mal colectadas, conservadas inadecuadamente o muy viejas, no servirn para
observaciones ulteriores e incluso puede conducir a resultados errneos o falsos. La
colecta de este material biolgico se puede verificar de diferentes maneras, pero la
obtenida por expulsin natural es la indicada para realizar este tipo de examen. Debiendo
evitar que se mezcle con orina, agua o tierra. El tamao de la muestra aconsejable es de
unos dos gramos (aprox. el tamao de una nuez) si la muestra es slida y de unos 10 ml
si es lquida.
El examen coprolgico es un perfil en el que se incluyen diferentes tcnicas de anlisis
(fsicas, qumicas y microscpicas) que se mencionan a continuacin, utilizadas para
apreciar la capacidad digestiva del intestino y de gran utilidad para identificar procesos
digestivos que cursan con diarrea por mala absorcin o insuficiente digestin enzimtica.

10
10

a) Objetivo particular
El alumno realizar y valorar la utilidad del perfil coprolgico para apreciar la capacidad
digestiva del intestino.
b) Materiales
Muestra de heces fecales
Microscopio ptico
Aplicadores de madera
Portaobjetos
Cubreobjetos
Tubos de ensaye de 13 x 75 mm
Pipeta graduada de 3 o 5 mL
Encendedor o cerillos
Reactivo para sangre oculta en heces (SOH)
Formalina al 10%
Reactivo de Benedict
Solucin salina 0.9%
Solucin yodo lugol 30%
Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Torundas con alcohol
Sanitas o servilletas
Guantes
Cubreboca
c) Mtodo
Observar las caractersticas fsicas de la muestra: olor, color, consistencias, etc.
Con ayuda de un aplicador de madera colocar una pequea fraccin en una de las
ventanas de la tarjeta para SOH
Agregar una gota de activador y luego de 5 minutos agregar una gota de
revelador. Observar la reaccin
Colocar 1 mL de reactivo de Bennedict en un tubo de 13x100 mm, agregar una
pequea porcin de muestra y mezclar.
Calentar el tubo hasta ebullicin teniendo cuidado de no exceder el calentamiento
del vidrio para evitar rupturas. Observar la reaccin
Colocar 1.5 o 2 mL de formalina al 10% en un tubo de 13x100 mm
Con aplicador colocar una fraccin (lo que logre adherirse a la punta del aplicador)
en el tubo que contiene formalina
Mezclar bien y obtener una gota de la mezcla y colocarlo sobre un portaobjetos y
cubrirlo con un cubreobjeto

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Lic. Qumico Farmacobilogo
Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
Observa al microscopio
d) Informe de resultados
Nombre del paciente:
Edad:
Sexo:
Fecha:
Folio:
Diagnstico presuntivo:
Consistencia:
Color:
Moco:
Sangre macroscpica: Sangre oculta en heces:
pH:
Protenas:
Azcares reductores: Quistes:
Trofozoitos:
Huevecillos:
Larvas:
Levaduras:
Amiba en fresco:
Grasas:
Leucocitos:
Eritrocitos:
Clulas epiteliales: Fibras:
Cristales: Flora bacteriana:
Polimorfonucleares (%): Mononucleares (%):
e) Cuestionario
qu sustancias qumicas son las responsables del olor delas heces fecales?
Cul es la importancia de reportar el color de las heces fecales?
para qu es til identificar la presencia de azcares reductores?
Normalmente un individuo secreta cierta cantidad de sangre a travs del intestino
Cul es ese valor normal y a partir de que concentracin indica una patologa?
para qu es til la presencia de grasa como marcador en un perfil coprolgico?

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VII. PRACTICA 4. GLUCOSA BASAL Y POST-PRANDIAL
Se calcula que 246 millones de personas de todo el mundo tienen diabetes. La diabetes
es una de las principales causas de muerte en la mayora de los pases desarrollados y
existen pruebas slidas de que est alcanzando proporciones epidmicas en muchos
pases en desarrollo y recin industrializados.
Una diabetes mal controlada va asociada al desarrollo de complicaciones tales como
neuropata, insuficiencia renal, prdida de visin, enfermedades macro-vasculares y
amputaciones. En personas con tolerancia normal a la glucosa, la glucemia no suele
sobrepasar los 7,8 mmol/l (140 mg/dl) como respuesta a las comidas y, por lo general,
regresa a los niveles previos a las dos o tres horas.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) define como tolerancia normal a la glucosa
tener <7,8 mmol/l (140 mg/dl) a las dos horas de ingerir una carga de glucosa de 75 g
dentro del contexto de una prueba oral de tolerancia a la glucosa. En esta gua, se define
como hiperglucemia pos-prandial un nivel de glucosa en plasma >7,8 mmol/l (140 mg/dl) a
las dos horas de ingerir alimentos.
a) Objetivo particular
El alumno determinar la concentracin de glucosa en ayunas y despus de 2 horas de
haber consumido alimentos de un paciente.
b) Materiales
Reactivo de qumica clnica para GLUCOSA
Muestra sangunea de un paciente determinado
Centrifuga clnica
Tubos de ensayo 13x150 cc
Jeringas o agujas estriles
Micropipetas semiautomticas
Espectrofotmetro
Tubos de ensaye de cristal de 13x75 cc
Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Torundas con alcohol
Sanitas o servilletas
Guantes
Cubreboca

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Lic. Qumico Farmacobilogo
Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
c) Mtodo
Para glucosa post-prandial, realizar una toma de muestra sangunea en ayunas
del paciente
Enviar a desayunar al paciente con alimentos que normalmente consume en su
vida cotidiana
Exactamente a las 2 horas despus del consumo de alimentos realizar una
segunda toma de muestras
Determinar la concentracin de glucosa de cada muestra de acuerdo al protocolo
del inserto del reactivo de GLUCOSA. Anotar resultados y analizar
d) Informe de resultados
Nombre del paciente:
Edad:
Sexo:
Fecha:
Folio:
Diagnstico presuntivo:
Glucosa en ayunas (mg/dL):
Glucosa post-prandial (mg/dL):
e) Cuestionario
es daina la hiperglucemia post-prandial? Justifique su respuesta
Resulta beneficioso el tratamiento de la hiperglucemia post-prandial?
Cules son los objetivos del control glucmico posprandial y cmo deberan
evaluarse?
VIII. PRACTICA 5. CURVA DE TOLERANCIA A LA GLUCOSA ORAL
La Curva de Tolerancia a la Glucosa Oral (CTGO), es una prueba que mide la capacidad
que tiene el organismo para metabolizar la glucosa, de manera que en los sujetos con
alteraciones en el metabolismo de los carbohidratos, esta capacidad se encuentra
alterada, y en el caso particular de los sujetos con (DM2), esta capacidad se encuentra
disminuida.
a) Objetivo particular
El alumno determinar la curva de concentraciones de glucosa cada 30 minutos despus
de haber ingerido una carga de 75 gr de solucin glucosada.

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Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
b) Materiales
Reactivo de qumica clnica para GLUCOSA
Solucin glucosada de 75 gr
Muestra sangunea de un paciente determinado
Centrifuga clnica
Tubos de ensayo 13x150 cc
Jeringas o agujas estriles
Micropipetas semiautomticas
Espectrofotmetro
Tubos de ensaye de cristal de 13x75 cc
Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Torundas con alcohol
Sanitas o servilletas
Guantes
Cubreboca
c) Mtodo
Para curva de tolerancia de glucosa oral, realizar una toma de muestras en ayunas
del paciente
Dar a consumir 125 mL de solucin glucosada de 75 gr al paciente
Realizar una toma de muestra de sangre cada 30 minutos hasta completar 2 horas
A la tercera muestra de sangre (contando como primera muestra la de ayunas)
solicitar una muestra de orina y determinar la presencia de glucosa mediante tira
reactiva.
Determinar la concentracin de glucosa de cada muestra de acuerdo al protocolo
del inserto del reactivo de GLUCOSA. Anotar resultados y analizar
Graficar los resultados
d) Informe de resultados
Nombre del paciente:
Edad:
Sexo:
Fecha:
Folio:
Diagnstico presuntivo:
Glucosa en ayunas (mg/dL):
Glucosa 30 minutos:
Glucosa 60 minutos:
Glucosa 90 minutos:

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Bioqumica Clnica I
Glucosa 120 minutos:
e) Cuestionario
en qu consiste la CTGO?
Interpreta la siguiente grfica

IX.PRACTICA 6. HEMOGLOBINA GLICOSILADA


En la diabetes mantener los valores de glucemia cercanos a los normales (mximo 110
mg/dl en ayuno de 10 a 12 horas) puede disminuir sustancialmente el riesgo de
complicaciones como retinopata, dao renal o alteraciones nerviosas, o bien retrasar su
progresin en caso de estar ya presentes en cualquiera que sea el tipo de Diabetes.
La hemoglobina glicosilada (HbA1c) es un anlisis de laboratorio muy til en la evaluacin
a largo plazo de los valores de glucemia de pacientes diabticos, aqu la contribucin de
esta prueba en el control de este padecimiento.
La HbA1c es un porcentaje de la hemoglobina (sustancia contenida en los glbulos rojos
o eritrocitos) a la cual se enlaza la glucosa. La glucosa se encuentra en la sangre y los
glbulos rojos que la constituyen no requieren insulina para que sta penetre, por tanto
mientras ms glucosa est presente en la sangre (glucemia elevada) durante ms tiempo,
mayor ser la cantidad de hemoglobina que se glucosila. Una vez que la glucosa se ha
pegado al glbulo rojo no puede desprenderse, por lo que la hemoglobina permanece
glicosilada durante los 120 das de vida promedio del eritrocito.
a) Objetivo particular
El alumno determinar el porcentaje de hemoglobina eritrocitaria ligada a la glucosa de un
paciente diabtico, con la finalidad de analizar el control y seguimiento de la
concentracin de glucosa srica.

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Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
b) Materiales
Kit para determinar hemoglobina glicosilada
Sangre anticoagulada con EDTA
Jeringas o agujas estriles
Micropipetas semiautomticas
Espectrofotmetro
Tubos de ensaye de cristal de 13x100 cc
Agua destilada o tridestilada
Gradilla metlica o plstica
Torundas con alcohol
Sanitas o servilletas
Guantes
Cubreboca
c) Mtodo
Tomar una muestra de sangre en tubo con EDTA de un paciente diabtico
Atemperar el lisante y la resina del kit para determinacin de HbA1c
Medir 500 uL de lisante, colocar en un tubo de 13x75 cc y agregar 100 uL de
sangre total con EDTA y dejar reposar por 5 minutos
Medir 3 mL de resina en un tubo de 13x100 cc, previamente mezclado por
inversin unas 10 veces, y agregar 100 uL de muestra hemolisada
Medir 5 mL de agua destilada en un tubo de 13x100 cc y agregar 100 uL de
muestra hemolisada
Colocar a ambos tubos el pipetor con el filtro interno dejando un espacio de 1 cm
aproximadamente entre la muestra diluida y el filtro de goma
Mezclar por inversin ambos tubos durante 5 minutos
Insertar el pipetor sobre la muestra diluida hasta un momento que ya no permita
insertar ms el pipetor.
Recoger el filtrado en un tubo de 13x75 cc y leer las absorbancias en el
espectrofotmetro, de ambos tubos.
Realizar el clculo correspondiente siguiendo las instrucciones del protocolo del
reactivo
d) Informe de resultados
Nombre del paciente:
Edad:
Sexo:
Fecha:
Folio:
Diagnstico presuntivo:

Universidad Autnoma de Chiapas


Facultad de Ciencias Qumicas C-IV
Lic. Qumico Farmacobilogo
Extensin Ocozocoautla, Chis.
Bioqumica Clnica I
Absorbancia del estndar:
Absorbancia de la Hb glicosilada:
Absorbancia de la Hb Total:
Hemoglobina glicosilada (%):
e) Cuestionario
Qu es la hemoglobina glicosilada?
Por qu es til la hemoglobina glicosilada?
A quin se recomienda practicar un anlisis de hemoglobina glicosilada?
Qu condiciones se requieren para practicar el anlisis?
Cmo se realiza la prueba y cuales con los resultados normales?

X. PRACTICA 7. PERFIL DE LPIDOS Y RIESGO ATEROGNICO


Pendiente su descripcin5

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