VIABILIDAD DE IMPLEMENTAR MTODOS NO NORMALIZADOS EN

LABORATORIOS AMBIENTALES ACREDITADOS EN COLOMBIA

TABLA DE CONTENIDO

JUSTIFICACIN....................................................................................................5
OBJETIVOS............................................................................................................6
General.....................................................................................................................6
Especifico................................................................................................................6
GLOSARIO.............................................................................................................7
MARCO TERICO................................................................................................9
Mtodos Normalizados............................................................................................9
Mtodos no Normalizados.......................................................................................9
Certificacin............................................................................................................9
Acreditacin:............................................................................................................9
Marco Legal Colombiano......................................................................................10
CRITERIOS A CONSIDERAR EN LA ELECCIN DEL MTODO A VERIFICAR O
VALIDAR..............................................................................................................13
Mercado.................................................................................................................13
Demanda................................................................................................................13
Planteamiento de un Caso......................................................................................13
DISCUSIN..........................................................................................................19
CONCLUSIONES.................................................................................................22
BIBLIOGRAFA...................................................................................................23
ANEXO A..............................................................................................................24

NDICE DE TABLAS

TABLA 1 VERIFICACIN VS VALIDACIN..........................................................11

TABLA 2 LMITES DE CUANTIFICACIN ALCANZADOS POR SPME....................16
TABLA 3 VARIABLES EVALUADAS EN LA ROBUSTEZ PARA LA DETERMINACIN DE BTEX CON
SPME........................................................................................................ 17
TABLA 4 LMITE DE CUANTIFICACIN CON HEAD-SPACE.................................17

NDICE DE GRFICOS
GRAFICA 1 HISTOGRAMA QUE EVIDENCIA LA PROPORCIN DE LOS COSTOS.
........................................................................................................................15

JUSTIFICACIN

En la actualidad, los organismos de acreditacin en Colombia, el organismo nacional de

acreditacin (ONAC) y especficamente para las matrices ambientales IDEAM, son los
encargados del desarrollo de este proceso para con las empresas quienes quieran iniciar este
desarrollo.
La acreditacin y junto con ella, la validacin de las tcnicas analticas es un proceso que si bien
no es obligatorio, la dinmica del mercado, las exigencias de la metrologa y la normatividad
estatal, exigen que los laboratorios desarrollen estrategias eficientes y efectivas para su constante
vinculacin en este mbito.
No existen un procedimiento unificado general para el desarrollo de una validacin analtica,
dado que depende de los propsitos especficos para los cuales fue diseado el mtodo, la
matriz, la normatividad que desea cumplir para declarar conformidad, el referente del mtodo,
entre otros.
Por otra parte, el anlisis de BTEX es un indicativo de contaminacin de las efluentes, el mtodo
normalizado aceptado por el referente Estndar Mtodos, requiere extracciones con solventes
antes del anlisis por cromatografa de Gases. El proceso de extraccin eventualmente es
demorado e implica un mayor costo. Actualmente, la microextraccin en fase solida (SPME),
ofrece una alternativa ms econmica para el desarrollo del anlisis pero el mtodo no se
encuentra reportado como normalizado.
Teniendo en cuenta esto, la importancia de este trabajo radica en que mediante un simple
ejercicio de comparacin con un referente normalizado o un mtodo desarrollado anlisis de
BTEX por extraccin lquido lquido, se desea poner en contexto algunas de las
consideraciones requeridas para la forma de abordar este tipo de retos analticos.

OBJETIVOS

General
Identificar los factores que se deben tener en cuenta mediante el uso de un ejemplo analtico de
validacin, al momento de decidir si utilizar un mtodo normalizado o uno no normalizado,
reflexionando sobre las ventajas en trminos de costos y cumplimientos de normatividad
requerida.

Especifico

Definir algunos de los criterios para decidir cundo utilizar un mtodo no normalizado.
Comparar la implicacin experimental entre una validacin y una verificacin
Determinar la factibilidad de implementar BTEX en Colombia por el mtodo no
normalizado a travs de micro extraccin en fase solida (SPME)

GLOSARIO

ILAC:Cooperacin Internacional de Acreditacin de Laboratorios.

IDEAM: Instituto de Hidrologa, Meteorologa y Estudios Ambientales de Colombia.
ONAC: Organismo Nacional de Acreditacin de Colombia.
ISO: Organizacin Internacional de Normalizacin.
ICONTEC: Instituto Colombiano de Normas Tcnicas y Certificacin.
Exactitud: proximidad entre un valor medido y un valor verdadero de un mensurando
(Metrologa, 2012).
Precisin: proximidad entre las indicaciones o los valores medidos obtenidos en mediciones
repetidas de un mismo objeto, o de objetos similares, bajo condiciones especificadas.
(Metrologa, 2012).
Repetibilidad: condicin de medicin, dentro de un conjunto de condiciones que incluye el
mismo procedimiento de medida, los mismos operadores, el mismo sistema de medida, las
mismas condiciones de operacin y el mismo lugar, as como mediciones repetidas del mismo
objeto o de un objeto similar en un periodo corto de tiempo.(Metrologa, 2012).
Reproducibilidad: condicin de medicin, dentro de un conjunto de condiciones que incluye
diferentes lugares, operadores, sistemas de medida y mediciones repetidas de los mismos objetos
u objetos similares.(Metrologa, 2012).
Selectividad: propiedad de un sistema de medida, empleando un procedimiento de medida
especificado, por la que el sistema proporciona valores medidos para uno o varios mensurados,
que son independientes de otros mensurados o de otras magnitudes existentes en el fenmeno,
cuerpo o sustancia en estudio.(Metrologa, 2012).
Robustez: La robustez (robustness) es una propiedad de un mtodo analtico que describe su
capacidad para permanecer inalterado ante las pequeas variaciones inevitables de las

condiciones experimentales, e indica la fiabilidad del mtodo durante su aplicacin rutinaria. Es

por tanto una propiedad que nos da idea de la estabilidad del mtodo de anlisis cuando este se
transfiere a otro laboratorio, instrumento o analista.(Hernndez Revilla, 2013)
Precisin: proximidad entre las indicaciones o los valores medidos obtenidos en mediciones
repetidas de un mismo objeto, o de objetos similares, bajo condiciones especificadas; Es habitual
que la precisin de una medida se exprese numricamente mediante medidas de dispersin, tales
como la desviacin tpica, la varianza o el coeficiente de variacin bajo las condiciones
especificadas.(Metrologa, 2012).
Sesgo: Valor estimado de un error sistemtico

MARCO TERICO
Mtodos Normalizados
Mtodo apropiado para el ensayo dentro de su alcance, publicado por organismos de
normalizacin internacional, nacional o regional (ISO, EN, NM, ASTM, BS, DIN, IRAM, etc.) o
por organizaciones reconocidas en diferentes mbitos (AOAC, FIL-IDF, USP,SM etc.)(Chile,
2010)
El proceso general para la normalizacin de mtodos se encuentra en el anexo A:

Mtodos no Normalizados
Corresponden a mtodos desarrollados por el laboratorio o mtodo nuevos (ejemplo: publicado
en revista cientfica), o bien, a mtodos que tradicionalmente se han utilizado en el laboratorio
pero que no estn normalizados.(Chile, 2010)

Certificacin
La ENAC de Espaa (entidad nacional de acreditacin) en su pgina A diferencia de la
certificacin ISO 9001, que es la confirmacin de que una empresa ha establecido un sistema de
gestin de la calidad conforme a ciertos requisitos, de acuerdo a la Norma ISO 15189 confirma
la competencia tcnica del laboratorio y garantiza la fiabilidad en los resultados de los anlisis y
ensayos
En Colombia ICONTEC, SGS Colombia, BVQI Colombia, International Certification and
Training, Cotecna Certificadora Services, Corporacin Centro de Investigacin y Desarrollo
Tecnolgico entre otros son los entes certificadores.

Acreditacin:
La ENAC de Espaa expone la certificacin como: Slo la acreditacin aporta confianza tanto
en la competencia del laboratorio para emitir resultados fiables, al disponer de los recursos

humanos y materiales y de la experiencia necesaria, como en su capacidad para proporcionar un

servicio adecuado a las necesidades de sus clientes.
IDEAM, ONAC, son los dos entes acreditadores en Colombia en cuanto a la parte ambiental.

Marco Legal Colombiano

El cual establece que el nico ente certificador en aguas residuales es el IDEAM (Instituto de
Hidrologa, Meteorologa y Estudios Ambientales de Colombia) de acuerdo a la ley 99 de 1993
del congreso de Colombia y la resolucin nmero 176 de 2003 expedida por el
Instituto de Hidrologa, Meteorologa y Estudios Ambientales, IDEAM donde dicta Que de
conformidad con el pargrafo 2 del artculo 5, del Decreto 1600 de 1994, los laboratorios que
produzcan informacin cuantitativa, fsica y bitica para los estudios o anlisis ambientales
requeridos por las autoridades ambientales competentes, y los dems que produzcan informacin
de carcter oficial relacionada con la calidad del medio ambiente y de los recursos naturales
renovables, debern poseer certificado de acreditacin correspondiente otorgado por el
IDEAM.(Colombia, 1993), estableciendo los motivos por los cuales ste es el nico ente
regulador en el pas.
Y de acuerdo al artculo 2 del decreto 176 de 2003 expedido por el IDEAM establece que
Validacin: Confirmacin a travs del examen y evidencia objetiva del cumplimiento de
determinados requisitos para un uso especfico de un mtodo analtico. En la validacin se
especificarn los siguientes parmetros: lmite de deteccin, selectividad, sensibilidad,
recuperacin, repetibilidad, reproducibilidad, confiabilidad, precisin y exactitud..
Adems de lo que establece la legislacin es importante aclarar que el IDEAM no tiene ningn
reconocimiento internacional, por otra parte la ONAC ha sido reconocida como miembro de la
IAAC (Inter American Acreditacin Cooperation en espaol Cooperacin Inter Americana de
Acreditacin) como organismo de aceptacin de laboratorios de ensayos y calibracin
(ISO/IEC17025).
Para el desarrollo del presente documento es importante aclarar que se validan los mtodos no
normalizados y que se verifican los mtodos normalizados.

En la tabla 1 se muestra la comparacin de las diferencias entre las dos clases de mtodos:
Tabla 1 verificacin vs validacin
Verificacin (mtodos

Validacin (mtodos

normalizados)

no normalizados

SI

SI

SI

SI

SI

SI

Reproducibilidad

SI

SI

Repetibilidad

SI

SI

Si

Si

Exactitud

SI

SI

Precisin

SI

SI

Selectividad

NO

SI

Robustez

NO

SI

Incertidumbre

SI

SI

tems
Lmite de
cuantificacin
Lmite de deteccin
Recuperacin en
matriz

Recuperacin en
matriz

Como lo muestra la tabla 1 la diferencia en cuanto a cantidad de tems a realizar entre

verificacin y validacin son solos dos, selectividad y robustez pero su implicacin es que
conlleva ms tiempo y por lo tanto ms costos para el laboratorio, pero para el caso de la
robustez existen hoy en da modelos matemticos para minimizar los costos y el tiempo.

CRITERIOS A CONSIDERAR EN LA ELECCIN DEL MTODO A VERIFICAR O

VALIDAR
Mercado
Es de suma importancia la identificacin del grupo personas y organizaciones focales, a las
cuales se desea ofrecer un parmetro acreditado para de esta forma no incurrir en inversiones de
difcil recuperacin, debido a que los procesos de acreditacin ante cualquiera de los dos entes
acreditadores en Colombia, en especial el IDEAM son costosos y demorados.

Demanda
Establece los posibles clientes en el sector y la frecuencia del anlisis que cada uno de ellos
requiere de acuerdo a su necesidad; para que el laboratorio pueda recuperar su inversin en un
corto plazo.

Planteamiento de un Caso
Los compuestos orgnicos voltiles (COVs) o por sus siglas en ingls (VOCs) son un amplio
grupo de sustancias de carbono unidos a diferentes elementos como: Hidrogeno, Flor, Bromo,
Cloro, Azufre o Nitrgeno. Estos compuestos son ms comunes de lo que se piensa, ya que se
usan tanto en sectores industriales (cosmticos, farmacuticos, calzado), en el uso domstico
(aerosoles, pinturas, lacas, repelentes); as como pueden ser generados tambin en la quema de
los diferentes combustibles como madera, gasolina, carbn o gas natural.
Son compuestos que pueden causar severas complicaciones a la salud humana y animal, como
por ejemplo: los efectos cancergenos del benceno, por exposicin efectos respiratorios (asma),
hematolgicos (anemia, trombocitopenia, leucopenia, ancitopenia, anemia aplstica),
inmunolgicos, neurolgicos, reproductivos y de desarrollo (ATSDR, 2007) que junto con los
dixidos de nitrgeno presentes en el ambiente y con ayuda de la luz solar forman el smog.

Dentro del amplio grupo de los COVs estn los BTEX (Benceno, Tolueno, Etilbenceno y oXileno, m-Xileno y p-Xileno), que se encuentran principalmente en derivados de petrleo, como
la gasolina o en industrias de calzado por los diferentes pegamentos empleados; causando
grandes riesgos para la salud y el ambiente("Evaluacin de la exposicin a BTEX en la
poblacin del campo Gibraltar," 2008).

Debido a la contaminacin de estos compuestos en efluentes naturales, se pretende evaluar su

determinacin por cromatografa de gases, utilizando un detector FID (Detector de ionizacin de
llama) y aplicando una tcnica de preparacin no normalizada para estos compuestos como
SPME (Micro extraccin de Fase Solida); las tcnicas normalizadas por organismos como la
EPA (EnvironmentalProteccin Agency), APHA (American PublicHealthAssociation), publican
tcnicas como purga y trampa, Head-Space, entre otras que son costosas, no amigables con el
ambiente y perjudiciales para la salud por el uso de solventes en el caso de purga y trampa.
SPME es una tcnica relativamente nueva pero que ofrece un sin nmero de ventajas, no requiere
el uso de ningn solvente resultando beneficioso para la salud del analista, as como al ambiente
pues no hay emisin de solventes y no se genera ningn tipo de residuo lquido peligroso. En un
laboratorio ambiental es importante revisar el costo beneficio de los anlisis ofrecidos al cliente,
la tcnica SPME es una tcnica econmica con respecto a las normalizadas ya que no hay un
gasto energtico por equipos, la fibra tiene un tiempo de vida considerable y su sensibilidad es
similar a la de los mtodos normalizados (APHA, AWWA, WEF, 2012) (EPA, 1996); siendo esta
ltima muy importante porque aunque en la legislacin colombiana no exista un lmite
permisible para los BTEX, si es destacada una alta sensibilidad por los efectos adversos
producidos por estas sustancias.
La demanda para la determinacin de BTEX tiene un continuo crecimiento; debido a que las
estaciones de servicio de gasolina utilizan este parmetro para saber si estn afectando
negativamente el medio ambiente y si tienen perdida del producto por infiltracin; lo cual
permite que el lmite de cuantificacin no sea un impedimento para la utilizacin de mtodos no
normalizados.

Dando lugar a lo relacionado con el costo-beneficio el mtodo no normalizado nos ofrece una
ventaja econmica como lo muestra en la grfica 1 de acuerdo a las entrevistas realizadas a
varios ingenieros que conocen el mercado estos fueron los resultados teniendo en cuenta que el
100% hace referencia al ms alto valor .
Histograma que evidencia la proporcin de los costos.
Grafica 1 Histograma que evidencia la proporcin de los costos.
120.000%
100.000%

100.000%
80.769%

80.000%

61.692%
60.000%
40.000%
20.000%
0.000%
Head Space

Purga y Trampa

Spme

El anterior grfico se construy por medio de apreciaciones de 3 expertos en equipos analticos y

que proporcionaron valores estimados de cada uno de los montajes.
Gracias a que el montaje para SPME es sencillo y consta de materiales esenciales de un
laboratorio a excepcin de la micro fibrilla, arroja una diferencia econmica bastante llamativa
haciendo factible la implementacin de mtodos no normalizados como en este caso.
En cuanto a las desventajas de evaluar cualquiera de los mtodos no normalizados con respecto a
la verificacin que se debe realizar a un mtodo normalizado, debe incluirse la realizacin de
robustez y selectividad, debido a que la robustez entra a evaluar cada variable como temperatura
del ambiente, tiempos de estabilizacin, tiempo de absorcin, tiempo de desorcin, analista,
temperatura de desorcin y se debe realizar a cada una de estas variables al menos diez
repeticiones por analista lo cual conlleva tiempo y dinero, afortunadamente hoy en da existen

modelos matemticos que con el mnimo valor de repeticiones se logra obtener los mismo
resultados tal es el caso del modelo de Taguchi, haciendo que esta desventaja sea menos notoria.
En cuanto a la selectividad este proceso se debe realizar para demostrar que el mtodo es lo
suficientemente especfico para los analitos de inters y que la aparicin de interferencia no
afecte considerablemente el resultado a entregar al cliente.
Es importante evidenciar que para este tipo de compuestos bien sea que se utilice un mtodo no
normalizado o normalizado se debe realizar una confirmacin de los compuestos, para ello lo
mejor es utilizar un cromatgrafo de gases masas o para no incurrir en ms gastos la utilizacin
de una segunda columna de inversa polaridad (o segunda columna).
A continuacin se muestran los resultados obtenidos por un laboratorio en Colombia, el cual
realizo la validacin del mtodo SPMEy que fue solo posible obtener con acceso muy limitado,
donde ellos alcanzaron los siguientes lmites de cuantificacin para BTEX en la matriz aguas
como lo muestra la tabla 2.
Tabla 2Lmites de cuantificacin alcanzados por SPME
Compuestos
Benceno
Tolueno
Etilbenceno
o-Xileno
m-Xileno
p-Xileno

Valor
0,010
0,010
0,010
0,010
0,010
0,010

Unidad
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L

El mayor trabajo realizado por el laboratorio, fue en la robustez ya que en la evaluacin se deben
verificar las diferentes variables que se muestran a continuacin en la tabla No. 3:
Tabla 3 Variables evaluadas en la robustez para la determinacin de BTEX con SPME
Tiempo de pre-equilibrio
Tiempo de equilibrio
Temperatura de pre-equilibrio y

10 minutos
10 minutos
40 C

equilibrio
Longitud de exposicin de la fibra
Longitud de inyeccin de la fibra

3,5 centmetros
4,0 centmetros

El mtodo mostro su mayor robustez a las condiciones anteriormente expuestas.

En cuanto a tiempos de anlisis la comparacin se realiz Head Space vs SPME los datos
obtenidos desde preparacin de la muestra, hasta obtencin del resultado fueron para HeadSpace: 75 minutos y para SPME: 150minutos; en cuanto Purga y Trampa no fue posible
realizaresta prueba pero de acuerdo a una entrevista con un experto en cromatografa de gases es
muy parecido los tiempos a los de Head-Space.
Por otra parte el mismo laboratorio decidi tambin implementar la determinacin de BTEX a
travs de la tcnica de Head-Space y los lmites de cuantificacin que arrojo esta tcnica estn
evidenciados en la Tabla No. 4:
Tabla 4Lmite de cuantificacin con Head-Space
Compuestos
Benceno
Tolueno
Etilbenceno
o-Xileno
m-Xileno
p-Xileno

Valor
0,023
0,023
0,023
0,023
0,023
0,023

Unidad
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L
mg/L

DISCUSIN

Primero que todo, quisiera exhortar frente a que las metodologas publicadas por la EPA no son
mtodos normalizados, ya que no realiza ninguno de los procesos que se muestran en el anexo A
de este trabajo, as como tampoco hay una determinacin de sesgo ni rangos de trabajos, ellos
(EPA) publican metodologas que funcionan muy bien en Estado Unidos, ya que son la Agencia
de Proteccin Ambiental de este mismo pas.
Los mtodos normalizados nos ofrece ventajas a la hora de realizar una acreditacin en un
parmetro en Colombia, ya que la verificacin es corta y es habitual su uso en una gran cantidad
de laboratorios; pero es importante resaltar que los mtodos normalizados son rigurosos en
cuanto a materiales y equipos haciendo en algunos casos que su costo aumente, su rigurosidad se
debe a que durante el desarrollo de estos mtodos se determin la robustez y selectividad,
adems fueron probados en diferentes lugares evidenciando su buen funcionamiento. En
Colombia, no se realiza normalizacin de mtodos ya que la ICONTEC genera normas, que
estudiadas a profundidad son solo traducciones de mtodos normalizados, como es el caso de la
parte ambiental que utilizan el estndar mtodos para la matriz aguas o para la matriz suelos las
normas mexicanas y de la USDA.
Durante la investigacin realizada evidencie la desventaja que tienen los laboratorios en
Colombia, que se acreditan ante el IDEAM; su reportes son reconocidos en el mbito Nacional,
debido a que esta entidad a pesar de toda su trayectoria no tiene un solo reconocimiento
internacional; por otro lado, la ONAC ya se encuentra reconocida ante la IAAC lo cual le otorga
una credibilidad en diferentes partes del mundo, puesto que los datos reportados por un
laboratorio acreditado ante la ONAC, tienen validez internacional ms no nacional, esto es
debido a que como se discuti en la pgina 11 en el Marco legal colombiano, nuestras leyes solo
autorizan al IDEAM como ente regulador nacional, traduciendo lo anterior, el laboratorio
ambiental colombiano que desee competir a nivel regional o internacional tiene que realizar una
doble acreditacin;por lo cual es importante destacar que en el escenario en el cual el IDEAM

desapareciera los laboratorios ambientales colombianos estaran en una inmensa desventaja

tecnolgica frente a los laboratorios extranjeros.
Ilustracin 1 reconocimientos mutuos mbitos regionales

Fuente: OAA
Por otra parte, en cuanto a seleccin de la tcnica a trabajar son importantes los lmites de
cuantificacin como lo hemos estudiado, ya que una variable fundamental son los mximos
permitidos de acuerdo a las normas cuando exista.
Los lmites de cuantificacin entre las diferentes tcnicas que se propusieron para la
determinacin de BTEX fueron diferentes, es desconcertante que la tcnica a travs de SPME
sea ms sensible que Head-Space y su explicacin se debe a que la micro fibrilla tiene un tiempo,
de contacto lo cual le permite capturar la mayor cantidad de molculas volatilizadas, pero a la
vez es una desventaja en SPME en concentraciones altas ya que puede saturarse y no absorber la
totalidad de las molculas, haciendo que su rango de trabajo sea ms limitado.

En cuanto a las tres tcnicas propuestas la mejor de ellas es purga y trampa ya que es una tcnica
exhaustiva que tiene propiedades de las tcnicas de Head-Space en cuanto a volatilizacin y de
tiempo de absorcin como SPME.

CONCLUSIONES

Con este trabajo evidencie y determine los criterios con los cuales se debera regir un
laboratorio ambiental en Colombia, al momento de optar por un mtodo para el proceso
de acreditacin teniendo en cuenta criterios como: La demanda, la normatividad, lmites

permisibles, lmite de cuantificacin, materiales y equipos.

Es importante resaltar, que cuando los laboratorios planean realizar validaciones o
verificaciones, se debe tener identificado la naturaleza del mtodo (normalizado y no
normalizado),determinando la eleccin del mismo un estudio adecuado, desarrollando
diseos experimentales que pueden incluir en su desarrollo la sensibilidad y la robustez,
lo cual implica mayores costos y tiempos. Por este motivo esta decisin debe ser

cuidadosamente evaluada para el desarrollo del mismo.

No existe una regla general para la eleccin de un mtodo normalizado o no normalizado.
Se debe evaluar la factibilidad econmica, relacin de costos, impacto ambiental, tiempo,
capacidad operativa para la realizacin del anlisis, as como tambin tener en cuenta las
consideraciones analticas que vengan al caso. En la discusin se evidencio por ejemplo
como el anlisis de determinacin de BTEX por SPME, proporciono una mayor

sensibilidad, lo cual incrementa la fiabilidad del resultado para el cliente.

Se evidencia lamentablemente, que la acreditacin en Colombia an requiere la
participacin ante diferentes organismos de acreditacin del orden nacional, los cuales
cumplen con la normatividad del pas, ms an no cuenta con el reconocimiento
internacional; el deber ser, es que el sistema de acreditacin de Colombia proporcionar
procesos nicos y de reconocimiento Internacional, puesto que esto se est constituyendo
en una limitante econmica para los laboratorios de ensayo del pas al no poder ofrecer
sus servicios fuera del mismo.

BIBLIOGRAFA

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ICONTEC. (2012). REGLSAMENTO DEL SERVICIO DE NORMALIZACION NACIONAL
DEL ICONTEC. 12.

ANEXO A
PROCESO DE NORMALIZACION DE UN METODO DE ACUEROD A LA AOAC