REPUBLIQUE ALGERIENNE DEMOCRATIQUE ET POPULAIRE

MINISTERE DE LAGRICULTURE ET
DU DEVELOPPEMENT RURAL
INSTITUT TECHNIQUE DES ELEVAGES (ITELV) BABA ALI
DEPARTEMENT MONOGARSTRIQUES

SERVICE APICULTURE

Prsent par : Mlle Zitouni Ghania

Sommaire
Prface
Premire partie : Les Reproducteurs
1 - Le faux bourdon :
1-a- Capture des mles matures et leur transfert au laboratoire :
1-b- La chambre de vol :
1-c- Nombre de males utiliss :
1-d- Anatomie de l'appareil gnital male:
2- La reine :
2-a-Capture des reines et leur transfert au laboratoire
2-b-Traitement de la reine au laboratoire
2-c- Anatomie de l'appareil gnital de la reine:(voir schma)
3- Synchronisation des levages
3- 1- Intrt
3-2- Exemple dun calendrier dlevage
Deuxime partie : Insmination Artificielle
Laboratoire et matriel ncessaire pour insmination
1/ Le laboratoire :
2/ Matriel dinsmination:
2- 1- LAppareil dinsmination
2- 2 - Systme pour anesthsie de la reine
2- 3- Matriel de manipulation des insectes
3/ Les produits chimiques
- Le Srum physiologiques

B- Principales tapes dinsmination

1/ Dsinfection du matriel
2/ Prparation de la seringue
3/Rglage et mise au point de lappareil dinsmination
4/Manipulation des males et Rcolte du sperme :
5/Anesthsi et mise en place de la reine
6/Ouverture de la reine
7/Linsmination
8/Apres linsmination : clipper et marquer la reine
Conclusion

Prface
LApiculture a connu un dveloppement considrable par la modernisation des moyens dlevage et une amlioration des mthodes de conduite du rucher par lintroduction de nouvelles techniques dlevages pour laccroissement des rendements des produits de la ruche.
Nanmoins plusieurs contraintes freinent lessor de lactivit apicole comme celles lies au climat, mais aussi les problmes lis labeille.
En effet, certaines races (exemple de la race locale Apis mellifica intermissa) prsentent quelques
caractres indsirables tels que la forte tendance lessaimage naturel et lagressivit la manipulation.
Afin dattnuer la manifestation de ces caractres indsirables, il est indispensable de choisir dans son
rucher les meilleurs individus et de les multiplier, ainsi, les moindres valeurs sont limins, il sagit de la
slection.
Cependant, la reproduction chez labeille, ne peut tre contrle en raison des accouplements qui
se passent loin de la ruche en vol nuptial, on ne connaitra jamais lorigine ou le nombre des males qui ont
fcond la reine, de ce fait, le seul moyen permettant deffectuer une slection fiable, est la pratique de
linsmination artificielle.
Les premiers succs de la technique de linsmination applique aux reines dabeilles remontent
1927 (PROST.1987), elle consiste prlever du sperme de faux bourdons slectionns et dinsminer la
reine slectionne au laboratoire.
Laboutissement linsmination fait suite un long travail sur le terrain, qui consiste faire
llevage synchronis des reproducteurs (les reines et les faux bourdons) et une concentration au laboratoire (manipulations des reproducteurs et maitrise de lappareil dinsmination).
Linsmination artificielle, est pratique au niveau des instituts de recherche apicoles pour lamlioration de labeille et par certains leveurs professionnels, elle est indispensable aux recherches scientifiques sur la gntique, slection et lhybridation de cette espce.
Bien que ce document sintresse la technique dinsmination, nanmoins quelques rappels sur
llevage des reproducteurs seraient utiles notamment pour llevage des males.
De mme, sont prsents dans ce document, un rsum simplifi des tapes de cette technique
avec des illustrations par des photos, ainsi que quelques rappels sur labeille et la slection.
Les photos de ce document ont t prises au cours de nos manipulations lITELV et du stage de formation donn par des experts franais en insmination, et qui a eu lieu le mois dOctobre 2007 en Algrie.

Premire partie : Les Reproducteurs

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1 - Le faux bourdon (le male) :

1-a- Capture des mles matures et leur transfert au laboratoire :
Les males commencent voler partir de 7 10 jours aprs la naissance, ils deviennent
matures partir du 12me au 14 me jour de leur naissance.
La rcolte des males matures se fait par le moyen dune hausse dpose sur la ruche males et dont le trou de vol est ferm (voir photo), ce qui les empche de quitter leur ruche, on connaitra ainsi leur ge et leur origine.

Ruche males : hausse vide ferme au dessus par une grille,

on laisse une ouverture en plastique pour ramasser les males.

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Trou de vol ferm par une grille

Un lger tapotement sur le corps de ruche, pousse les males monter vers la hausse
sur laquelle est dpose une grille reine afin dempcher leur sortie (voir photo), on peut
aussi capturer les males directement sur les cadres (voir photo).
Les males sont attraps et mis dans des cagettes, la rcolte doit tre abondante afin de
rcolter suffisamment de semence, car certains peuvent avoir peu de sperme, dautres peuvent tre striles (voir photo), pour une seule insmination, on ramasse environ une cinquantaine de male.
Il est trs souhaitable que la colonie leveuse de males soit proximit du laboratoire d'insmination.
Grace llevage de male et la maitrise du facteur ge, la majorit des males capturs
seront matures.
Si la ponte sur le cadre male na pas lieu le mme jour, certains males seront immatures, on se rendra compte de cela au laboratoire par la couleur du sperme distincte, les males
sont transfrs dans une cagette are (voir photo).

Rcolte des males dans la hausse

Rcolte des males sur un cadre

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Cage male
1-b- La chambre de vol :
Enceinte ferme et are dpose au laboratoire pour dposer les males et leur
permettre de voler avant leur utilisation.
Il est bien connu que la scrtion du sperme est plus compacte chez les mles
ayant eu la possibilit de voler, la dfcation avant la capture permet un travail propre
et diminue les dangers dinfection, la chambre de vol est confectionne cet effet.
On ouvre la cagette male lintrieur de la chambre de vol, les males sont
librs, ils sortent et dfquent aprs un court vol (voir photo)

Chambre de vol

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1-c- Nombre de males utiliss :

La rcolte des males doit tre abondante, en thorie 08 males fournissent la dose
suffisante de sperme pour insminer une reine, cependant en pratique, il faut sacrifier un
nombre important de males tantt immatures, tantt souills, tantt striles.
Les meilleurs males utiliss sont ceux gs entre 16 et 23 jours
1-d- Anatomie de l'appareil gnital male:
Les mles possdent des organes sexuels plus volumineux en proportion des
dimensions de leur corps par rapport ceux des autres animaux. (Voir schma)
D'aprs P.Schley et J.Guth, 1990, les organes gnitaux du males comprennent:
- 02 Testicules.
- 02 Vsicules sminales.
- 02 Glandes mucus.
- 01 Canal jaculateur.
- 01 Bulbe de lEndophallus avec lobe pliss.
Les deux testicules situs dans la partie suprieure abdominale sont de forme
approximativement triangulaire. Ils sont constitus par des faisceaux de tubes sminifres
(270 275 par testicule).
Les tubes sminifres dbouchent, la base du testicule, au canal dfrant qui aboutit
la vsicule sminale.
La vsicule sminale labore le liquide sminal devant servir de nourriture et de produit de conservation aux spermatozodes.
Chaque vsicule dbouche la base de la glande mucus.
Les glandes mucus dans le canal jaculateur; lequel; simple conduit, aboutit au
bulbe ou pnis.
Les glandes sminales et mucus sont fermes par une membrane trs mince.

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Le bulbe est trs globuleux et fortement muscl. Il se situe entre les 6eme et 7eme
segments abdominaux ; sur le bulbe, on peut remarquer le champ spiral, le lobe pliss et,
avec la base, la bourse et les coronules ou pneumophyses qui serviront la fixation des organes males lors de l'accouplement.
Les males, leur sortie de l'alvole ont des testicules non fonctionnels et d'une taille
rduite au tiers de celle qu'ils possdent l'tat nymphal.
Les spermatides migrant par le canal dfrant samassent dans les parois, ils mrissent
et se transforment en spermatozodes.
Les spermatozodes sont mrs partir du 12me jour de la vie du male.

Figure N1 : Lappareil gnital mle.

2- La reine
2-a-Capture des reines et leur transfert au laboratoire :
Les reines vierges naissent dans des ruchettes dont le trou de vol est ferm par une grille
reine, pour les empcher de sortir saccoupler naturellement.
Les reines insminer (reines slectionnes) doivent tre mature sexuellement, elles le
sont une semaine aprs leur naissance.

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2-b-Traitement de la reine au laboratoire

La reine est capture 24 heures avant linsmination, elle est transfre au laboratoire
dans une cagette reines et anesthsi puis rendue et rintroduite dans sa ruchette, cette
opration est ncessaire pour faciliter louverture des organes de reproduction le jour suivant ou acclrer sa maturit.
Quelques temps avant linsmination, la reine est de nouveau capture puis transfre
au laboratoire dinsmination, elle est libre dans une enceinte ferme pour dfquer, ensuite elle est anesthsie 10minutes avant dtre insmine.
Remarque :
Parmi les critres de slection que lon apprcie lors de linsmination, laspect taille
est important, une reine de taille rduite, glisse dans le tube de contention lors de son ouverture et rend difficile sa manipulation sous lappareil dinsmination,
2-c- Anatomie de l'appareil gnital de la reine:(voir schma)
D'aprs A.REGARD et ALL, 1977; l'appareil gnital de la reine comprend 4 parties
principales:
Organes gnrateurs: Deux ovaires.
Organe conducteurs: Deux oviductes latraux.
Un oviducte mdian.
Une cavit vaginale.
- Organes annexes: Spermathque avec la glande en Y.
- Organes d'accouplement: La chambre de l'aiguillon ou poche copulatrice.
Chaque ovaire est constitu par 150 180 tubes ovariens ou varioles dbouchant dans
un oviducte latral.

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Les deux oviductes latraux se rejoignent pour former un court oviducte mdian,
celui-ci, en se dilatant, constitue la cavit vaginale, spare transversalement en deux par
un repli muqueux situ au-dessous de l'orifice du canal de la Spermathque.
La spermathque est une sphre creuse o s'emmagasinent les spermatozodes aprs
l'accouplement, elle est surmonte d'une glande en Y dont le rle est l'activation des spermatozodes au repos dans la spermathque.
La cavit vaginale est spare de la chambre de l'aiguillon par un repli circulaire. De
chaque cote de l'ouverture vaginale deux autres cavits (les bourses copulatrices).
La chambre de l'aiguillon est situe au-dessous de l'appareil vulnrant au niveau du
6eme segment.
Les ovaires de la reine relativement rduits sa naissance, se dveloppent de faon
trs importante aprs la fcondation.
Les tubes ovariens constituant les ovaires sont alors en mesure d'laborer les cellules
germinatives qui sont l'origine de la formation des ovules, lesquels en se dveloppant
formeront les ufs.

Figure N 2 : Lappareil gnital femelle.

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Synchronisation des levages :
Intrt :
Il est trs important aussi pour mener bien linsmination artificielle de synchroniser
la maturit sexuelle des deux castes (males et reines). En effet les males sont maturit
sexuelle 12 14 jours aprs lclosion et cette dernire se fait 24 jours de la ponte de
luf, alors que chez la reine ce cycle est beaucoup plus court (denvirons 17 jours), elle
nat 16 jours aprs la ponte et devient mature environ une semaine aprs.
Linsminateur, doit suivre un calendrier dlevage pour synchroniser ses levages.
Calendrier dlevage synchronis des reproducteurs : Exemple simplifi daprs
(Eigil Holm, 1986)
Stade de dveloppement

Les males

Les reines

Ponte des ufs

1er Mai

17 Mai

Stade larvaire

3-10 Mai

20-25 Mai

Nymphe

10-25 Mai

26 Mai- 02 Juin

Eclosion

25 Mai

02 Juin

Maturit sexuelle

08 Juin

08 Juin

Remarque : la date choisie est prise au hasard pour montrer lcart quon doit respecter
entre les deux levages

Cadre dlevage de male

cadre dlevage de reine

Deuxime partie : Insmination Artificielle

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A- Laboratoire et Matriel ncessaire pour lInsmination
1/ Le laboratoire :
Le laboratoire doit tre propre et sain, afin dliminer tout risque dinfection de
la reine si fragile louverture, ainsi que du matriel utilis par des germes
pathogne, il est fortement recommand de pratiquer une dsinfection du laboratoire
et du matriel avant chaque manipulation.
2/ Matriel dinsmination artificielle :
1-LAppareil dinsmination :
Lappareil dinsmination artificielle comprend :
Un organe de contention de la reine : Tube do seule lextrmit de labdomen
peut sortir.
Des carteurs (crochet ventral, crochet dorsal, et une sonde) pour ouvrir la chambre
dudard et tirer en arrire la valvule vaginale.
Une micro seringue : Lappareil dispose dune seringue avec cylindres interchangeables.
Des accessoires : -Support des organes prcdents.
Loupe binoculaire : La loupe binoculaire produit deux faisceaux lumineux spars
pour chaque il.
Lampe : lclairage dune lampe halogne rfracteur est dirig sous un angle dfini
aux conduits flexibles.
Remarque : il existe actuellement plusieurs marque dappareils
dinsmination, avec certains outils modifis pour faciliter linsmination, mais le
principe reste le mme : exemple des crochets carteurs ou le crochet dorsal en
cuillre est remplac par un crochet perfor o le dard doit tre introduit
lintrieur, dautres modles remplacent le crochet dorsale perfor par une pince qui
tire le dard plus facilement.

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Appareil dinsmination

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2/ Un systme danesthsie de la reine :
Lors de linsmination, la reine est immobilise par anesthsie, ce systme
comprend : Une bouteille de CO2, avec un dispositif reli au tube de contention
avec rglage du dbit, la fiole reoit le CO2 et le renvoie travers un autre tuyau
vers le tube de contention.
Grce ce systme, un contrle du dbit visuel et auditif est effectu travers
lobservation des bulles dair mises dans la fiole et de leur rythme.

Systme danesthsie de la reine

3/ Une tuve :
Pour conserver les reproducteurs si ncessaire.
4/Matriel de manipulation des insectes :
Ciseaux, et pince pointus

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Sur la paillasse de travail, et pour la manipulation, il faudrait avoir :
Leau distille, lalcool, et le srum physiologique, du coton tige et des compresses

Matriel et produits
Prparer pour chaque manipulation

3-Les produits chimiques :

Produits ncessaires pour la prparation du srum physiologique, eau distille, alcool.
Le srum est un liquide destin :
- La nutrition des spermatozodes.
- Au remplissage et fonctionnement de la seringue.
- A empcher la dessiccation du sperme dans la pointe capillaire par laspiration dune
goutte dobturation.
Quelques exemples de srums physiologiques:
1/ Tampon - TRI : daprs Verma1973 et 1978, William et Harbo,1982
1.1g NACL
0.1g Glucose
0.01g L-Arginin-HCL
0.01g L-Lysine

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Les additifs : - 0,02g de Sulfate-Dyhydrostreptogycine

- 0,012g de Pnicilline-C-Sodium
Dilu dans 100ml 0.05 TRIS mlare pH 8.7.
2/ Kiev : sa composition daprs Paufler 1974, est :
- 2.43g citrate de sodium hydrate
- 0.21g bicarbonate de sodium hydrate
- 0.04g chlorure de potassium
- 0.30g sulfanilamide
- 0.30g glucoses
- Solution dilue 90C dans 100ml deau distille
Un additif de 20% de katals accroit la mobilit des spermatozodes de sorte que
davantage de spermatozodes pntrent dans la spermatique.
Il existe aussi un diluant fabriqu dans les laboratoires de chimie et commercialise
sous forme dune poudre dissoudre dans leau double distille avant lutilisation (Eigil
Holm 1986)
Cette solution contient :
74,07% trinatriumcitrate-2-hydrate
9,15% D(+)-glucose (monohydrate)
6,40% sodium hydrogne carbonate
1,22% potassium chloride
9,15% sulfanilamide
Chauffer 90 une fois refroidie, ajout 1ml de streptomycine (dlivr sous forme
de solvant) et une pince de pnicilline.
Remarque :
Dans la prparation du srum, rajouter un antibiotique pour viter linfection du
sperme, lantibiotique inhibe le dveloppement des microorganismes.
Les produits sont conservs au rfrigrateur trois jours au maximum

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B- Principales tapes dinsmination
1/ Dsinfection du matriel :
Avant linsmination, Vtement, lieu de travail, appareil dinsmination doivent
tre dsinfects.
- Nettoyage au dtergent spcial pour laboratoire :
Plaque de travail, bloc de logement de la reine, tube de contention, corps de seringue, crochets.
- Strilisation par la chaleur : elle concerne les objets qui peuvent
transmettre des germes pathognes la reine, ils doivent tre dument dsinfects et
striliss.
Dans la cocotte-minute placer pour une dizaine de minutes :
Seringue, cylindres et pistons, points capillaires avec joint dtanchit, laxe mobile, capsule de verre, pincettes, sonde main.
Avant chaque manipulation :
- Passer tous les instruments dans leau savonneuse, lalcool 70 (sauf
instruments en plastique), puis leau strilise
- Nettoyage non prolong leau savonneuse des instruments mtalliques,
passer rapidement lalcool puis leau strilise.
- Les instruments en plastique ne doivent pas tre nettoys lalcool, ils
sont directement mis dans leau strilise
- Les capillaires sont passs au savon, alcool puis leau strilise
Important :
Un capillaire bouch par du mucus est nettoy dans de leau chaude dans
laquelle on rajoute des cristaux de soude, laisser le temps ncessaire
puis rincer de nouveau leau distille, l alcool puis leau strilise.
Les capillaires sont trs fragiles, on risque facilement de casser la pointe
capillaire, pour cela il faut manipuler avec prudence.

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2/Prparation de la seringue :
Le circuit de la seringue est rempli par du srum, la manipulation de la seringue par
la vis du bouton molet (9) permet dliminer lair et une fois le capillaire plac, permet
de pousser le sperme du capillaire dans le sens dsir

Schma dune seringue

Remplissage de la seringue

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Refoulement du srum pour chasser les bulles dair

Elimination de lair contenu dans le capillaire par injection de srum

Position verticale

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Mise en place de la seringue

Fixation de la seringue
Important :
***Avant leur remplissage par le srum physiologique, les capillaires sont rincs
la seringue avec leau distille, puis lalcool et enfin avec du srum physiologique
*** sil nest pas utilis de suite, le capillaire une fois remplis de sperme doit tre dument conserv dans une compresse imbib de srum pour viter le desschement de la
pointe du capillaire (voir photo).

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capillaire conserv dans une compresse imbibe de

srum Physiologique en attendant la manipulation.

3/Rglage de lappareil dinsmination :

Trs important avant de mettre en place la reine de vrifier les paramtres suivants :
1/ Rglage de linclinaison du systme de contention par rapport au plan horizontal :
Inclinaison 70, une fois rgle laide dun gabarit, serrer la vis pour la fixer (voir photo)

Fixation du systme de contention, viter le risque de bouger pendant la

manipulation

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2/Rglage de la seringue : pointe du capillaire positionn sur louverture du tube de
contention, seringue bien fixe (voir photos)

Fixation de la seringue
Si la seringue bouge pendant linsmination, la reine est blesse est perdue de suite.

Position du Capillaire par rapport au tube de contention

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3/Rglage de tout le systme sous la binoculaire : position bien centre

4/ Rglage des crochets : la position des crochets doit tre horizontale par rapport la reine ouverte
(voir photo).

Position des crochets avant louverture de la reine

5/ Rglage de la luminosit : les fibres optiques de la lampe froide doivent tre bien diriges vers la reine ouverte et bien viser lorifice vaginal, sous cette lumire et avec un bon
cartement, lorifice vaginal est visible.
6/Rglage du dbit de CO2 et Vrification du fonctionnement du systme danesthsie :
On rgle le dbit du CO2 qui doit tre rgulier, ni lent, ni rapide, on vrifie que le CO2
atteint le tube de contention, les bulles dair et leur bruit mis permettent de contrler le
dbit.
Remarque
On insiste sur cette tape car un appareil non ou mal rgl avant la mise en place de la
reine, risque la blessure et la perte de celle-ci et lchec de linsmination.

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4/ Manipulation des males et Rcolte du sperme :
Pendant la prparation du matriel, on ramne les males et on les laisse voler
dans la chambre de vol.
On introduit la main dans la chambre de vol, et on saisit les males un un pour
rcolter le sperme.
En tenant le mle de la main gauche entre le pouce et lindex, et on caresse
doucement la partie abdominale jusqu lversion de lappareil gnitale, Lorsque
lrection est complte, on termine on appuyant sur le cot abdominal jusqu
apparition du sperme (couleur beige clair, se trouvant sur le mucus celui ci est de
couleur blanchtre) (voir photo)
Eversion, Ejaculation et collecte du sperme :

Positionnement de mle et lversion de lappareil gnital

Ejaculation de sperme.

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A fin prt pour collecter le sperme, en approchant lendophallus du capillaire, sous
la binoculaire, jusqu ce que sa pointe touche le sperme.

Goutte de sperme aspire par le capillaire

Sperme aspir dans le capillaire

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Une fois la pointe du capillaire touche le sperme, Il se produit une tension superficielle qui colle le sperme la pointe. On recule alors un peu le mle, sans rompre le contact, et lon pompe le sperme.
Il faut viter de pomper le mucus, ce dernier est un obstacle rel, il est pais,
bouche facilement le capillaire, on prend ensuite le mle suivant.
On opre ainsi plusieurs mles jusqu obtenir une dose (08 microlitre ou
12,5 mm de la longueur du capillaire).
On peut remplir 03 doses spares par des bulles dair, on pose une bande de
carton ajust pour dlimiter chaque dose.
La quantit de sperme varie dun male un autre (de 1,5 1,75 microlitre), mais
gnralement on ne rcolte quentre 0,5 1,25microlitre.
Chez le male adulte, mucus et sperme sont spar, le contraire chez le male immature la sparation nest pas complte, le sperme est plus claire.
Remarque : une dose reprsente 10 fois le volume de la spermathque, cela dit, un
dixime de ce volume migre vers la spermathque, le reste est inutilisable.
Lorsque le capillaire est rempli, on fait remonter le sperme de 4 5 mm, et lon
pompe un bouchon du srum pour viter que le sperme ne sche au contact de
lair, le sperme se trouve entre deux bulles dair et deux bouchons de srum.

Schma de mesures dune pointe capillaire

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Remarques importantes :
Il faudrait liminer les bulles dair contenues dans la dose de sperme au fur et
mesure de la rcolte, en refoulant le sperme vers la sortie chaque fois.
Le sperme circule facilement dans le capillaire ds quon tourne la vis, signe
dune rcolte russi, si a bloque cela veut dire quil ya du mucus mlang dans le
capillaire, cest rat, on refoule le mucus avant quil ne bouche le capillaire, si le
mucus persiste, on arrte la rcolte, on nettoie le capillaire et on refait.
essuyer la pointe du capillaire continuellement avec le srum afin dviter le
desschement du sperme
On peut anesthsier les males au chloroforme, lversion se produit partiellement sous leffet de lanesthsie.
le male qui dfque lors de la manipulation est limin pour risque de souiller le
sperme.
Pour tre mieux organis dans le travail, une personne soccupe de manipuler les males, tandis quune autre est concentr avec la rcolte sous la binoculaire.
ltape de la rcolte du sperme est la plus difficile et la plus longue, pour mieux
sorganiser, il serait prfrable de leffectuer le matin puis insminer laprs midi,
le capillaire conserv dans une compresse imbib de srum.
5/ Anesthsi et Mise en place de la reine
Auparavant tout aura t dsinfect : les crochets, la sonde vaginale, et la
pointe de capillaire sont dsinfectes laide dun coton-tige strile imbib de dsinfectant, puis rinc avec un autre coton-tige imbib deau distille.
La table de travail sera passe au dsinfectant, ainsi que le tube de contention qui sera ensuite rinc leau strilise.
Pour que la reine y soit en position daccueil de la semence elle doit y pntrer reculons, on lui introduit la tte la premire dans un autre tube, que lon appelle tube de transfert , et dans lequel elle pntre volontiers (voir photo)

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Introduction de la reine dans le tube de contention

Une fois la reine lintrieur, on relie le tube de contention au tuyau de CO2 et on

dclenche le CO2 pour anesthsier la reine ; quelques instants aprs, la reine est immobile, on passe alors la mise en place sur le support du systme de contention.

Systme dAnesthsie reli au tube de contention

Page 26

Anesthsie de la reine

Anesthsie de la reine

Le CO2 nest pas dangereux pour la reine, mais il ne faut pas exagrer dans lanesthsie, car la reine risque de perdre de sa vitalit.

Page 27

Mise en place de la reine anesthsie sur le support du tube de

contention

Mise en place de la reine anesthsie sur le systme de contention

Remarque :
Le dbit est diminu au minimum lorsque la reine est immobile, mais si la reine se
rveille et commence bouger ; il faut relancer le CO2 et contrler le dbit chaque
fois, ce sont les bulles dair formes dans la fiole qui indiquent le rythme ou le dbit
du CO2

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Positionnement des crochets :

La crmaillre portant la seringue dinjection, doit tre releve

pour ne pas

heurter la pointe du capillaire qui risquerait dtre souille, ou casse.

Les deux crochets seront mis la position zro, cest--dire que, se mouvant
dans les trois dimensions, leur axe doscillation verticale doit passer par le centre du
tube de contention, et les deux axes horizontaux doivent diviser le champ visuel selon deux droites nord-sud et est-ouest, passant par le centre du mme tube.
Cest donc sur laxe est-ouest que lon amnera les deux crochets dans un
mme alignement passant par laxe mdian dorsal-ventral de la reine. Cette position
est capitale (voir photo)

Ajustement en douceur de la reine

Seuls, les trois derniers anneaux de labdomen doivent dpasser du tube de

contention. Aucune des deux pattes arrire ne doit y paratre. La reine aura le dos
tourne droite, donc labdomen gauche (voir photos)

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Position de la reine dans le tube de contention avant son ouverture

6/ Ouverture de la reine
On commence par le crochet ventral (gauche) le lever, lavancer et le baisser
dans la chambre de laiguillon. Sous lanesthsie, la reine souvre presque toujours
delle-mme ; si cela ntait pas, nous louvririons de la main droite tenant la sonde
vaginale, en cartant sternite et tergite pour y passer le crochet ventral.
On tire ce dernier vers la gauche, puis approchant le crochet dorsal, en le ramenant vers la droite on achve douvrir la reine en arrtant ce mouvement un stade
bien prcis (voir photo), lorsque le crochet est perfor, y introduire le dard et tirer
droite.

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Etapes dOuverture de la reine

Etapes dOuverture de la reine

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Etapes dOuverture de la reine

Reine ouverte : vue travers lobjectif de la binoculaire

Sur cette photo, la position nest pas lidale, mais nous la montrons
pour mettre en relief le crochet perfor dans lequel une partie du dard fut
introduite

Page 30
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Schma de la Position de la reine ouverte vue sous la binoculaire

7/Linsmination
Dcente du capillaire :
Avant cette descente, il convient dliminer, en refoulant sur un coton-tige strile, la
goutte de
diluant fermant le capillaire, ainsi que la bulle daire qui spare sperme et diluant.

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On agit donc sur la micro vis de la pompe jusqu ce que le sperme apparaisse la
pointe du capillaire.
On descend ensuite lentement ce dernier jusqu toucher les tguments de lorifice
vaginal en agissant sur les micros vis de commande en est-ouest ou en nord-sud,
pour bien centrer le capillaire.

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Pntration de la reine :
La main droite reste la commande du capillaire.
On approche le capillaire que lon prsente lorifice vaginal, puis dune lgre pression sur le piston de la pompe on ne refoule une microgoutte de sperme
pour lubrifier le passage.
Insmination
Lorsque le capillaire est la profondeur voulue (1,5mm), il est sous la
valvule vaginale.
On procde alors linsmination proprement dite : en agissant sur la vis
on va faire descendre le piston et refouler la dose de sperme contenu dans la pompe.
On injecte doucement toute la dose en une fois, soit 12,5mm de longueur, qui correspond 8microlitres.
Libration de la reine :
On coupe le CO2, on libre ensuit la reine en enlevant dabord le crochet
ventral pour dtendre la reine, puis le dorsal. On sort alors la reine du tube de
contention, en la secouant au-dessus de la main en vitant de la toucher ou
dappuyer sur son
abdomen.

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8/ Apres linsmination :
Clipper et marquer la reine
Une fois la reine est retire du tube, on profite de son immobilit, qui va durer
encore 10 15 minutes, pour la clipper et la marquer avant de la remettre dans sa
cage dintroduction.
Remarque : certains chercheurs prconisent une nouvelle anesthsie de la reine au
lendemain de son insmination, lanesthsie permet un dbut de ponte plus rapide
entre 2 et 6 jours, alors que cette dure peut tre plus longue sans anesthsie.
Entretenir le matriel :
A la fin le matriel doit tre de nouveau dsinfect et rang, pour la prochaine insmination.

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Conclusion
La technique dinsmination ncessite la runion de lensemble des conditions
cites, une seule faille dans ce systme mnerait un chec certain.
Aboutir linsmination passe par plusieurs tapes commenant par le terrain,
llevage doit tre men au temps opportun.
De mme la rcolte du sperme constitue le maillon principal dans cette
chaine, sa maitrise demande beaucoup de pratique et de patience.
Le sucs de la technique dinsmination dpend dune longue pratique, car
malgr toutes les prcautions prises, un pourcentage dchec est enregistr, seules
la manipulation et lexprience permettent la maitrise de tous les paramtres cits
dans ce guide, sa russite par contre permettra de lancer une slection plus efficace
pour lamlioration de labeille.

2014

Institut Technique des Elevages

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Tel: 023 57 01 79