UNIVERSIDAD AUTNOMA BENITO JUREZ DE OAXACA

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

CARRERA

PLAN DE ESTUDIOS

QFB

2009

PRCTICA
NMERO

CLAVE DE LA
ASIGNATURA

NOMBRE DE LA ASIGNATURA

INMUNOLOGA
NOMBRE DE LA PRCTICA

FECHA Y
DURACIN

5
Reacciones Febriles
1 sesin
1
INTRODUCCIN
Las reacciones febriles son un conjunto de pruebas que sirven como su nombre lo indica para
diagnosticar enfermedades que cursan con fiebre, como Fiebre tifoidea (Salmonella), Brucelosis (fiebre
ondulante, fiebre de Malta) y Rickettsiosis (Fiebre Q, fiebre manchada de las montaas rocallosas).
Las reacciones febriles son pruebas que han venido a caer en desuso, sin embargo en muchos pases
en vas de desarrollo como Mxico se siguen utilizando por ser pruebas baratas y rpidas, pero en
pases desarrollados son cada vez menos utilizadas por su poco valor diagnstico.
Los antgenos febriles se usan para detectar anticuerpos en el suero del paciente contra la Salmonella,
Brucella y Rickettsias (reaccin cruzada con Proteus OX-19).
Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido por agentes
infecciosos, responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos los cuales se ponen de
manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el anticuerpo especfico. El ttulo (valor) del anticuerpo
depende del tipo y curso de la enfermedad. Para que los resultados tengan un valor diagnstico el ttulo
de ellos debe aumentar, por lo que se deben tomar 2 muestras separadas por un periodo de tiempo de 4
semanas para ser comparadas.
El informe del resultado de la prueba se hace tomando en consideracin la dilucin ms alta que se
observe en la reaccin positiva.

2
OBJETIVOS
Determinar y cuantificar a travs de pruebas serolgicas, los ttulos de anticuerpos contra antgenos
bacterianos para evaluar la presencia de enfermedades como fiebre tifoidea, brucelosis, entre otras; que
se caracterizan por provocar en el paciente un sndrome febril.
3
FUNDAMENTO
1. - Reaccin de Widal para diagnstico de la fiebre tifoidea, entrica y ondulante. La reaccin mide el
titulo de anticuerpos (aglutininas) en el suero contra una suspensin de antgenos conocidos de
Salmonella typhi, S. paratyphi A y S. paratyphi B.
2.- Reaccin de Huddleson para la brucelosis (Brucella abortus, B. suis o B. melitensis).
3.- Reaccin de Weil-Felix para el tifo. Las especies de Rickettsias que causan tifo, tienen componentes
antignicos idnticos a Proteus (cepas OX-19, OX-2 y OX- K). En esta prueba se utilizan antgenos de
Proteus para diagnstico de tifo.

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4
A

PROCEDIMIENTO
EQUIPO, MATERIAL Y REACTIVOS NECESARIOS

MATERIAL DE APOYO
Material comn de laboratorio.

REACTIVOS:
Equipo de reacciones febriles que incluye:

Tfico O (Antgeno somtico)

Tfico H (Antgeno flagelar)
Paratfico A (Antgeno flagelar)
Paratfico B (Antgeno flagelar)
Brucella abortus
Proteus OX-19

MATERIALES:

Placa de vidrio para serologa

Aplicadores de madera
Parafilm
Tubos para toma mltiple sin anticoagulante con gel
separador
Agujas para venopuncin
Torniquete
Torundas de algodn

MATERIAL BIOLGICO:

Suero de paciente.

APARATOS E INSTRUMENTOS

Centrfuga.
Pipetas automticas de volumen variable 10 a 100 uL

B
DESARROLLO DE LA PRCTICA
PREPARACIN DE LAS MUESTRA BIOLGICA.
1. Extraccin de una muestra de sangre venosa.
a. Realizar la extraccin de una muestra de sangre total por puncin venosa en un tubo sin
anticoagulante.
b. Esperar 15 minutos para que la muestra coagule completamente.
c. Centrifugar la muestra para obtener el suero durante 5 minutos a 2500 r.p.m.
d. Concluido el proceso de centrifugacin verificar que el gel separador se encuentre entre
las dos fases de la sangre total y que el suero sea transparente y no presente hemlisis.
PROCEDIMIENTO.
1. En una placa de vidrio serolgica marcar 6 crculos del 1 al 6 y agregar a cada uno 80 uL del
suero problema y agregar a continuacin una gota del antgeno que corresponda de acuerdo a

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la siguiente tabla:
Crculo
1
2
3
4
5
6

Vol de suero (uL)

80
80
80
80
80
80

Antgeno (1 gota)
Tfico O
Tfico H
Paratfico A
Paratfico B
Brucella abortus
Proteus OX-19

Ttulo
1:20
1:20
1:20
1:20
1:20
1:20

2. Mezclar inicialmente con aplicadores de madera y despus con movimientos circulares durante
7 min. Verificar que prueba te da positiva; es decir cual prueba manifiesta franca glutinacin.
3. Una vez que establezcas que antgenos dan positivo, solo a estos les realizaras las pruebas
con los siguientes volmenes de suero. Por ejemplo, si te dieron positivo los antgenos O y
H :
Suero (uL)
40
20
10
5

Tfico O
1 gota
1 gota
1 gota
1 gota

Suero (uL)
40
20
10
5

Tfico H
1 gota
1 gota
1 gota
1 gota

Ttulos
1:40
1:80
1:160
1:320

4. Mezclar inicialmente con aplicadores de madera y despus con movimientos circulares durante
7 min. y observar la presencia de aglutinacin para reportar el resultado final de cada prueba.
C
EXPRESIN DE RESULTADOS E INFORME DE LA PRUEBA.
La siguiente tabla te ayudar a realizar la interpretacin de los resultados.
Suero
problema
(uL)
80
40
20
10
5

Antgeno

Ttulos

1 gota
1 gota
1 gota
1 gota
1 gota

1:20
1:40
1:80
1:160
1:320

5
INTERPRETACIN Y CONCLUSIONES
Se elaboraran de acuerdo a los resultados obtenidos y la importancia diagnstica de las pruebas.
6
ANEXOS
CUESTIONARIO.
1. Describe brevemente las enfermedades: fiebre tifoidea, paratifoidea, brucelosis, infeccin por
Rickettsias.

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2. Por qu se dice que las reacciones febriles son poco especficas?

3. Cmo podemos determinar si la infeccin esta activa o es por la presencia de anticuerpos de
memoria?
4. Qu resultados se espera en las pruebas si un paciente?
a. Padeci anteriormente una infeccin por tifoidea.
b. Recibi tratamiento con antibiticos.
c. O fue vacunado anteriormente
5. Qu otras pruebas se puede realizar en el paciente para verificar estas enfermedades, y que
adems sean pruebas ms especficas?
7

REFERENCIAS
Bolio Salazar, Emilia E. Manual de Prcticas de Anlisis Clnicos III. Universidad de Colima, 2009.
Bejar Lozano, Carlos. Evaluacin de la utilidad de las reacciones febriles de aglutinacin: estudio comparativo
de resultados entre poblaciones con y sin manifestaciones clnicas de enfermedades infecciosas febriles.
Disponible en http://www.contactoquimico.com/htm/Articulos/Inmunologia/Inmunologia6Evaluacion.htm

8
MECANISMO DE EVALUACIN
Puntualidad y asistencia
40%
Bitcora
20%
Reporte
20%
Conocimientos previos
20%
9

MEDIDAS DE SEGURIDAD Y SALUD OCUPACIONAL

1. Se deber utilizar antifaz de seguridad.
2. Se deber tener el cuidado respectivo al manejo de material a altas temperaturas, materiales
corrosivos y txicos.
3. Al pesar o medir reactivos evite tirarlo o derramarlos en el sitio donde se encuentre, en caso de
hacerlo limpiar perfectamente el lugar.
4. Al medir las muestras biolgicas evite tirarlas o derramarlas y sigue los procedimientos
generales de manipulacin para evitar cualquier riesgo biolgico.
5. Cubrir las medidas de seguridad bsicas para el laboratorio.
En caso de accidente (por pequeo que este sea) debe comunicarse de inmediato al maestro
responsable del laboratorio.

10

DISPOSICIN DE DESECHOS QUMICOS, FSICOS Y BIOLGICOS.

1. Los recipientes que tengan residuos de naturaleza lipdica, se limpiarn con papel absorbente
antes de lavarlos en la tarja y estos papeles se tirarn en el bote de basura del laboratorio.
2. Los residuos de origen orgnico se tiraran en el bote de basura respectivo.
3. Los RPBI se desecharn en los contenedores destinados para ello.