INGENIERA GENTICA

La Ingeniera Gentica (en adelante IG) es una rama de la gentica que se

concentra en el estudio del ADN, pero
con
el fin su manipulacin. En
otras
palabras,
es
la
manipulacin
gentica
de
organismos con un propsito
predeterminado.
En
este
punto
se
profundizar el conocimiento sobre
mtodos de manipulacin
con el cual se realizan
manipulaciones se tratar
cuando
se
analicen
los
esta ciencia.

los
gnica. El fin
dichas
ms adelante,
alcances de

De los genes a la ingeniera gentica.

Cuando los cientficos comprendieron la estructura de los genes y cmo la
informacin que portaban se traduca en funciones o caractersticas,
comenzaron a buscar la forma de aislarlos, analizarlos, modificarlos y hasta
de transferirlos de un organismo a otro para conferirle una nueva
caracterstica. Justamente, de eso se trata la ingeniera gentica, que se
podra definir como un conjunto de metodologas que permite transferir
genes de un organismo a otro y expresarlos (producir las protenas para las
cuales estos genes codifican) en organismos diferentes al de origen. El ADN
que combina fragmentos de organismos diferentes se denomina ADN
recombinante. En consecuencia, las tcnicas que emplea la ingeniera
gentica se denominan tcnicas de ADN recombinante. As, es posible no
slo obtener protenas recombinantes de inters sino tambin mejorar
cultivos y animales. Los organismos que reciben un gen que les aporta una
nueva caracterstica se denominan organismos genticamente modificados
(OGM) o transgnicos. A su vez, la ingeniera gentica es lo que caracteriza
a la biotecnologa moderna que implementa estas tcnicas en la produccin
de bienes y servicios tiles para el ser humano, el ambiente y la industria.
Enzimas de restriccin.
Como ya se dijo, la IG consiste la manipulacin del ADN. En este proceso
son muy importantes las llamadas enzimas de restriccin, producidas por
varias bacterias. Estas enzimas tienen la capacidad de reconocer una
secuencia determinada de nucletidos y extraerla del resto de la cadena.
Esta secuencia, que se denomina Restriction Fragment Lenght Polymophism
o RLPM, puede volver a colocarse con la ayuda de otra clase de enzimas, las
ligasas. Anlogamente, la enzima de restriccin se convierte en una "tijera
de ADN", y la ligasa en el "pegamento". Por lo tanto, es posible quitar un
gen de la cadena principal y en su lugar colocar otro.
Vectores.
En el proceso de manipulacin tambin son importantes los vectores: partes
de ADN que se pueden autorreplicar con independencia del ADN de la clula

husped donde crecen. Estos vectores permiten obtener mltiples copias de

un trozo especfico de ADN, lo que proporciona una gran cantidad de
material fiable con el que trabajar. El proceso de transformacin de una
porcin de ADN en un vector se denomina clonacin. Pero el concepto de
clonacin que "circula" y est en boca de todos es ms amplio: se trata de
"fabricar", por medios naturales o artificiales, individuos genticamente
idnticos.
ADN polimerasa.
Otro mtodo para la produccin de rplicas de ADN descubierto
recientemente es el de la utilizacin de la enzima polimerasa. ste mtodo,
que consiste en una verdadera reaccin en cadena, es ms rpido, fcil de
realizar y econmico que la tcnica de vectores.

MANIPULACIN GENTICA:
La ingeniera gentica es la tecnologa del control y transferencia de ADN de
un organismo a otro, lo que posibilita la correccin de los defectos genticos
y la creacin de nuevas cepas (microorganismos), variedades (plantas) y
razas (animales) para una obtencin ms eficiente de sus productos.
La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas,
entre las que destacan:

La tecnologa del ADN

La tecnologa del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un
fragmento de ADN de un organismo para "recombinarlo" con el de otro
organismo.
Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restriccin que
origina en este caso un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN.
Los extremos escalonados de ambas hebras de ADN son complementarios,
una condicin que tienen que tener si se quieren unir. Los dos ADNs as
cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos
cohesivos se aparearn dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con
uniones no covalentes. Las uniones covalentes se forman aadiendo ADN
ligasa y una fuente energtica para formar los enlaces.
Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede
adicionar muchos residuos de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3
de las hebras del ADN. De este modo pueden construirse colas de poli
Guanina en los extremos 3 de una de las hebras de ADN y colas de poli
Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas son
complementarias,

permitirn

que

los

dos

ADNs

se

unan

por

complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por

la ADN ligasa.

El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que acte como vehculo

para introducirlo en una clula hospedadora que lo replique, los vectores o
transportadores ms utilizados son los plsmidos y el ADN del fago lambda.

La secuenciacin del ADN

Es un conjunto de tcnicas que permiten conocer el orden en que aparecen
los nucletidos en el ADN, que es la base de la informacin gentica de los
organismos. Mediante esta tcnica tiene aplicaciones mdicas, como la
bsqueda

de

algn polimorfismo

gentico que

se

asocie

con

una

enfermedad; bsicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o

forenses.

La reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)

La tcnica de la PCR aprovecha la actividad enzimtica por la que
se replica el ADN en las clulas para conseguir una gran cantidad de copias
de ADN a partir de cantidades pequeas. Se utiliza una polimerasa o una
mezcla de varias que puedan resistir temperaturas elevadas, siendo la ms
comn la polimerasa taq.
La tcnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para
conseguir la desnaturalizacin del ADN y temperaturas ms bajas para la
amplificacin del ADN desnaturalizado mediante la polimerasa.

BIOTECNOLOGA GENTICA
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de
las biotecnologas gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que
permiten llegar directamente al material que est en el origen de todas las
caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de
tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de
ingeniera gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN
as modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del
material hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas
procedencias, por ejemplo, la fraccin de ADN humano regula la sntesis de
insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a formar
parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la capacidad de
elaborar insulina.

 Terapia gentica
La terapia gentica consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia
normal de la regin defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer
la funcin alterada, evitando el desarrollo de enfermedades de origen
gentico, como por ejemplo la facultad defensiva ante las enfermedades
infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado a trabajar son,
entre otras, la deficiencia de la enzima ADA (adenosina desaminasa),
conocida como la de los nios burbuja y la DMD o distrofia muscular de
Duchenne.
La posibilidad de curar las enfermedades genticas con un tratamiento
especfico justifica los esfuerzos que se estn realizando en este sentido.

Implicaciones ticas
La ingeniera gentica tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de
los ms importantes son la medicina y la creacin de nuevas especies o
mejora de las existentes. El progreso en estos mbitos puede aportar
resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia, pero
no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas
requeridas slo est al alcance de unas pocas empresas multinacionales.
Como era de esperar, la tradicional dependencia econmica de los pases
subdesarrollados tiene en la ingeniera gentica un nuevo elemento de
desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede plantear
graves problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de
situarse los lmites de manipulacin del material que est en la base de
todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores
mostraron su preocupacin por los riesgos que se pueden realizar con
dichas tcnicas. En varios pases se crearon comits para discutir el uso y la
aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.
Ingeniera gentica en seres vivos.

Ingeniera gentica en bacterias

Son los seres vivos ms utilizados en Ingeniera Gentica. La ms utilizada
es la Escherichia coli. Se usa prcticamente en todos los procesos de I.G.

Otra de las aplicaciones ms actuales

que se han hecho, ha sido modificar
genticamente bacterias que vivan en el
sistema digestivo del ser humano en un
lapso mnimo de 6 meses a 1 ao, con el
objetivo de disminuir el apetito. Esta
investigacin

se

basa

fosfatidiletanolamina,
etanolamina,
seales

encargadas

alhipotlamo,

en
y

N-acilN-acil-

de
que

mandar
es

el

encargado de la ingesta de alimentos.

Ingeniera gentica en levaduras y hongos

Son junto con las bacterias los sistemas ms utilizados. El Saccharomyces
cerevisiae fue el primer sistema eucariota secuenciado completamente.
Otra levadura importante es P. pastoris, utilizada para conseguir proinsulina
en cultivo discontinuo y quitinasa en cultivo continuo. En el campo de los
hongos destaca por su labor mdica el Penicillium.
Otra aplicacin ha sido la levadura P. pastoris se ha usado para producir
grandes cantidades de protenas, gracias a que es capaz de crecer en los
reactores hasta alcanzar muy altas densidades celulares. Por ejemplo, se ha
utilizado para producir quitinasa humana en cultivo continuo (0,3 g/L/da) o
proinsulina humana en un sistema discontinuo (1,5 g/L).

Ingeniera Gentica en animales

La manipulacin gentica de los animales persigue mltiples objetivos:
aumentar el rendimiento del ganado, producir animales con enfermedades
humanas para la investigacin, elaborar frmacos, etc.
- Produccin animal por ingeniera gentica:
Peces transgnicos: las principales aplicaciones en animales se han
realizado en peces, debido a que la fecundacin es externa, lo cual permite
la introduccin del gen en el cigoto antes de que se unan el ncleo del
espermatozoide y el del vulo. Se han producido carpas transgnicas que
crecen mucho ms rpido, debido a la incorporacin del gen de la hormona
del crecimiento de la trucha, y salmones transgnicos, que resisten mejor
las bajas temperaturas. Mamferos: se han obtenido ratones transgnicos,
con distintos genes modificados. Sin embargo, todava su aplicacin para la

mejora de especies es preliminar, enfocndose el estudio desde un punto de

vista ms bien puramente cientfico.

Ingeniera Gentica en plantas

Actualmente se han desarrollado plantas transgnicas de ms de cuarenta
especies.

Mediante

ingeniera

gentica

se

han

conseguido

plantas

resistentes a enfermedades producidas por virus, bacterias o insectos. Estas

plantas son capaces de producir antibiticos, toxinas y otras sustancias que
atacan a los microorganismos. Tambin se han conseguido otro tipo de
mejoras, como la produccin de distintas sustancias en los alimentos que
aumentan su calidad nutricional, mejorar las cualidades organolpticas de
un producto o que ciertas plantas sean ms resistentes a determinados
factores ambientales, como el fro.
Las tcnicas de ingeniera gentica tambin permiten el desarrollo de
plantas que den frutos de maduracin muy lenta. As, es posible recoger
tomates maduros de la tomatera y que lleguen al consumidor conservando
intactos su sabor, olor, color y textura. La mejora de la calidad de las
semillas es tambin un objetivo.
Las aplicaciones farmacuticas son otro gran punto de inters. La
biotecnologa permite desarrollar plantas transgnicas que producen
sustancias de inters farmacolgico, como anticuerpos, ciertas protenas y
hormonas, como la hormona del crecimiento.

APLICACIONES DE LA INGENIERA
INDUSTRIA FARMACUTICA

GENTICA

EN

LA

 Obtencin de protenas de seres vivos

Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento,
factores de coagulacin, etc., tienen un inters mdico y comercial muy
grande. Antes, la obtencin de estas protenas se realizaba mediante su
extraccin directa a partir de tejidos o fluidos corporales.
En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan
los genes de ciertas protenas humanas en microorganismos adecuados
para su fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina
que se obtiene a partir de la levadura Sacharomyces cerevisae, en la cual se
clona el gen de la insulina en humanos.

Obtencin de vacunas recombinantes

El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos
patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial. Muchas vacunas,
como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por ingeniera gentica.
Como la mayora de los factores antignicos son protenas lo que se hace es
clonar el gen de la protena correspondiente.

Vacunas atenuadas: Se eliminan los genes de virulencia de un agente

infeccioso para provocar una respuesta inmune. El organismo modificado
genticamente puede usarse como lo que es llamado una vacuna viva sin
que exista riesgo de que se revierta al tipo virulento. Actualmente se est

ensayando una vacuna de cepas estables del Vibrio cholerae, ste se

encuentra desprovisto del gen que codifica para su enterotoxina, la cual
provoca la enfermedad. Otro ensayo existente ha sido en la Salmonella, a la
cual se le han quitado ciertos genes que aunque no son virulentos,
convierten a la cepa en atenuada una vez desaparecidos, es decir que
disminuyen su virulencia 1, 000, 000 de veces. Su efectividad ha logrado
demostrarse en ovejas, bovinos, pollos y hasta en humanos recientemente
Vacunas de organismos recombinantes vivos: Para estas se utilizan
microorganismos no patgenos a los cuales se incorporan genes de agentes
patgenos que codifican para los antgenos que desencadenan la respuesta
inmune. El virus vacunal tiene un genoma amplio y secuenciado que
permite acomodar varios genes forneos en su interior por lo que es un
vector recombinante muy utilizado. A partir de ste mtodo se ha logrado
desarrollar la vacuna contra la rabia insertando el genoma del virus,
provocando la respuesta inmune en el organismo del hospedador. De igual
manera se han ensayado las expresiones de genes que codifican para
antgenos de virus de la hepatitis B, de la gripe y del herpes simple. Con
este mtodo, se podra lograr el desarrollo de vacunas que inmunicen
simultneamente

para

varias

enfermedades,

insertando

en

el

virus

recombinante varios genes de distintos organismos patgenos a la vez.

Vacunas de subunidades: Para agentes infecciosos que no se pueden

mantener en cultivo, se aslan los genes que codifican para las protenas
causantes de la respuesta. Dichos genes se pueden clonar y expresar en un
husped alternativo tales como bacterias, levaduras o lneas celulares de
mamferos. Luego de insertado el gen de inters, la bacteria o levadura
recombinante inicia con la produccin de subunidades de protenas en
grandes cantidades, mismas que son recolectadas y purificadas para
utilizarlas como vacunas. La vacuna contra la hepatitis B fue la primera
puesta en el mercado y siendo producida por este mtodo.

Vacunas de ADN: Consisten en plsmidos en los que se introduce tan slo

una diminuta cantidad del material gentico del patgeno contra el que se
pretende. Al inyectar el plsmido en el msculo o la piel, ste penetra
dentro de la clula y llega al ncleo, comandando entonces la produccin de
los antgenos del patgeno que desencadenarn la respuesta inmune. As,
se traslada la fbrica de la vacuna a los tejidos del husped. En la
actualidad se realizan ensayos de diversas vacunas de este tipo, algunos
ejemplos son la vacuna para la hepatitis B, para la malaria, para la gripe,
para el herpes simple y para el SIDA.

Diagnstico de enfermedades de origen gentico

Conociendo la secuencia de nucletidos de un gen responsable de una
cierta anomala, se puede diagnosticar si este gen anmalo est presente
en un determinado individuo.
Hasta ahora ha sido posible la localizacin de los genes responsables de la
fibrosis qustica, la distrofia muscular, la hemofilia o el Alzheimer. Para
identificar estos genes se usan sondas de ADN.
La clonacin de genes puede rendir dos tipos de productos: el DNA clonado,
til como reactivo especfico en ensayos de diagnstico por hibridacin o
bien los productos proteicos de los genes clonados (antgenos purificados
para inmunodiagnostico en produccin de vacunas). Hay descritas cerca de
500 enfermedades hereditarias producidas por mutaciones recesivas. Las
tcnicas de ingeniera gentica han servido para diagnosticar algunas de
ellas, por ejemplo, la anemia flaciforme.

Obtencin de anticuerpos monoclonales

Este proceso abre las puertas para luchar contra enfermedades como el
cncer y diagnosticarlo incluso antes de que aparezcan los primeros
sntomas.
El interfern fue el primer medicamento producido por ingeniera gentica.
Es utilizado como medicamento complementario a la quimioterapia para la
cura del cncer. Su produccin era cara hasta 1980, pero genes de
interfern

fueron

introducidos

en

bacterias

usando

tecnologa

de

recombinacin del ADN permitiendo as el cultivo masivo y purificacin de

las emisiones bacterianas.

BIBLIOGRAFIA:

Sandel, Michael J. (2007). Contra la perfeccin: la tica en la poca de la

ingeniera gentica. Marbot Ediciones SCP

Marta Izquierdo Rojo (1999). Ingeniera Gentica y Transferencia Gnica.

Pirmide.