ANTIBIOGRAMA

Utilidad.
Pruebas de sensibilidad a los antimicrobianos
Objetivos.
*Ver la sensibilidad de los antimicrobianos ante algunos antibiticas para poder
diagnosticar correctamente
Introduccin.
Consiste en el estudio de la sensibilidad o resistencia de determinado
microorganismo (o grupo de ellos) a varios antibiticos. Se puede utilizar para
tratar un patgeno, aadir a alimentos, en definitiva para saber como se comporta
un germen frente a determinado antibitico.
Los antibiticos en general pueden ser de amplio espectro o de espectro reducido,
estos ltimos van a matar grmenes ms especficamente. Dependiendo del
origen o localizacin de la infeccin, se va a utilizar uno u otro.
El antibiograma se puede hacer tanto en medio lquido como en medio slido.
Se utilizan para poner los antibiticos, unos discos impregnados que llevan unas
letras que nos indican el antibitico del que se trata y un nmero que indica la
concentracin en mg/ml que tena la disolucin en la que se impregnaron.
El antiograma se usa para establecer de una forma relativamente cuantitativa, la
actividad de un conjunto de antibiticos. El mtodo se basa en la formacin de
halos de inhibicin del crecimiento en una placa inoculada homogneamente por
accin de discos antibiticos de concentracin conocida, la difusin de este hacia
el medio va a originar la inhibicin del crecimiento. Posteriormente se Indira el
dimetro del halo, para comprobar la afectividad del antibiotico
Hiptesis diagnstica.
El medicamento Amicactina reaccionara con el antimicrobiano probando que es el
medicamento que es mas eficaz en este tipo de infeccion
Material

3 placas Petri
Cultivo de la muestra
Caldo TSB
Hisopo de algodn

 Placa de agar de Mueller-Hinton

Antibitico
Agua destilada
Mechero
Micropipeta
Procedimiento:
1. Preparar 3 placas Petri con agar Meller Hinton.
2. A partir de un cultivo fresco de las bacterias que hay que ensayar , inocular 4-5
colonias en un tubo con 5 ml de caldo TSB.Utilizando un hisopo de algodn
sumergirlo en el inculo y eliminar el exceso presionndolo sobre la pared interna
del tubo
3. Inocular la superficie de una placa de agar Meller Hinton con el hisopo
pasndolo uniformemente por toda la superficie en tres direcciones.
4. Por ultimo, pasar el hisopo por el reborde de la placa.
5. Dejar secar 10 min con la tapa algo abierta (junto al mechero).
6. Preparacin de los discos con antibitico.
7. Disolver una cpsula, comprimido, gragea o vial de antibitico en agua
destilada; elegir una presentacin de antibitico fcilmente soluble (Calcular el
volumen de dilucin que precisa cada tipo de antibitico. Preparar un banco de
diluciones con agua destilada
8. Con micropipeta Pasteur impregnar los discos para antibiograma con 1 gota de
micropipeta (32l) de las disoluciones de antibitico (se puede utilizar la misma
pipeta si se realiza de menor a mayor concentracin). Anotar la concentracin y el
volumen de antibitico aadido en cada disco
9. Colocar el disco de antibitico (con pinzas estriles) sobre la superficie del agar
y apretarlo suavemente sobre la superficie del medio. Los discos no deben estar a
menos de 15 mm de los bordes de la placa y a unos 20 mm uno de otro para que
no se superpongan las zonas de inhibicin. (No mover los discos una vez
implantados).

10. Realizar la operacin con: a. Placa 1

(Staphilococcus):3 discos con las diluciones de
Amoxicilina. b. Placa 2 (Staphylococcus): 3
discos con las diluciones de Penicilina Gc. Placa
3 (E.coli): 3 discos con las diluciones de
Amoxicilina,3 discos con las diluciones de
Penicilina G.1. Marcar placas y dejarlas 15' a
temperatura ambiente para que difunda el
antibitico.2. Anotar las concentraciones y el tipo
de antibitico sembrado en cada disco.3. Incubar
la placa en posicin invertida a 37 C durante 24
h.4. Medir los dimetros de las zonas de inhibicin con una regla.
Anlisis de resultados.
Se espera encontrar los siguientes datos para la E. coli ATCC 25922
Antibitico/carga del disco.

E. coli ATCC 25922

Amicactina/
Amoxicilina-clavulanico/20/10
Ampicilina/10
Cefaolina
Cefatoxima/30
Cefaruxima/30
Cloranfenicol/30
Ciprofloxacina/5
Clidamicina/2
Doxiciclinina/15
Eritromicina/10
Gentamicina/10
Imipenem/10
Acido nlidrixico/30
Nitrofurantoina/300
Norfloxacina/10
Oxacilina/1
Penicilina G/10
Piperacilina/100
Tobramicina/100
Trimetoprim sulfametoxazol
Vancomicina/30

30 126
19/25
16/22
23/29
25/32
20/26
21/27
30/40
NA
18/24
NA
19/26
26-32
22-28
20/25
28-35
NA
NA
24-30
18-26
24-32
NA

Conclusin
El antibiograma es un estudio de la sensibilidad in vitro de un microrganismo
patgeno frene a las sustancias microbianas. Si el patogeno que crece por el resto
de la placa no lo hace alrededor del aro con un determinado antibitico, es decir,
se inhibe su crecimiento gracias a ese antibitico, se forma un halo a su alrededor

limpio de grmenes. Este halo ser tanto ms grande en dimetro cuanto ms

sensible sea el patgeno al antibitico. Se estudio la E. coli de mayor intereses ya
que es el patgeno causante de nuestro caso clnico. La E. coli no aplica con
Vancomicina, Penicilina, Oxacilina, Clidamicina y Eritromicin
Bibliografa
Garca Martos Pedro . Microbiologa clnica practica. UCA. 1994. 482
paginas.
Prats Pastor Guillermo. Microbiologa Clinica. Ed. Mdica Panamericana,
2006 - 366 pginas
http://www.slideshare.net/lain_invers/antibiograma