Prctica No.

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Reacciones Enzimticas de Oxido-Reduccin.
Lactato Deshidrogenasa.
Introduccin.
El sistema de transporte electrnico mitocondrial es poco ms que una secuencia de reacciones de oxidacinreduccin. Se entiende por reaccin de xido-reduccin a la transferencia de uno ms electrones de una
molcula a otra .La partcula que en una reaccin cede electrones, se oxida, mientras que la otra partcula o
molcula recibe los electrones y por tanto se dice que se redujo.
Aquellas molculas que tienen un potencial ms positivo tienden a retener sus electrones intercambiables, por
tanto los que tienen un potencial ms bajo o ms negativo tienden tendencia a cederlos. Las reacciones de
xido-reduccin llevadas a cabo por clulas son catalizadas por enzimas que actan como intermediarios
hasta llegar al aceptor final de electrones que es el oxgeno.
La lactato deshidrogenasa, es una enzima que se encuentra en muchos tejidos del cuerpo, pero es mayor su
presencia en el corazn, hgado, riones, musculos, globulos rojos, cerebro y pulmones. Su funcin es
interconvertir el piruvato y el lactato.La LDH tiene una gran variedad de isoenzimas con leves diferencias en
su estructura que sugieren diferentes orgenes por cada tejido.

Objetivo.
Realizar una serie de experimentos en los que se demuestra la actividad de la lactato deshidrogenasa que
participa en reacciones de xido-reduccin as como ver la importancia del cofactor NAD y el efecto de
algunos inhibidores.

Resultados.
Tiempo/Tubo 1
Observacin
Azul
0 min
2 min
+++
5 min
++++
7 min
+++++
10 min
++++++
15 min
+++++++
30 min
++++++++
Nota.- + Grado de Decoloracin

2
Azul

3
Azul

4
Azul

5
Azul

+
++
+++
+++
+++
++++

+
++
+++
++++
+++++
++++++

Azul
Azul
Azul
Azul
Azul
Azul

+
++
+++
+++
++++
+++++

Anlisis de Resultados.
Tubo 1.- La decoloracin se lleva a cabo muy rpidamente, debido a que presenta sustrato, enzima,
cofactor, y el desplazador del equilibrio de la reaccin (KCN).
Tubo 2.- Si hay reaccin solo que es demasiado lenta debido a que no presenta cofactor NAD, ms
que solo el NAD endgeno en LDH.
Tubo 3.- Si hay reaccin pero es ligeramente lenta a diferencia del tubo 1, debido a que no presenta
sustrato ms que solo el que contena el musculo de la rata que fue sacrificada.
Tubo 4.- No hay reaccin, este tubo funge como testigo negativo debido a que no presenta enzima
que haga que se lleve a cabo la reaccin.
Tubo 5.- Si hay reaccin pero lenta debido a que no contiene KCN que ayuda a que se desplace el
equilibrio de la reaccin enzimtica de lactato a piruvato de una manera ms rpida.

Anlisis de Reactivos.
Lactato.- Es el sustrato con el que interacta la enzima y el cofactor.
KCN.- Es la sustancia que hace que se desplace el equilibrio de la reaccin de lactato a piruvato.
Azul de Metileno.- Es un colorante que funge como el aceptor final de los protones.
Agua.- Es un ajustador de volmenes.
Coenzima NAD.- Es la coenzima que transporta los protones de la reaccin para producir piruvato.
LDH.- Es la enzima que interviene en la reaccin de lactato para producir piruvato.
Aceite Vegetal.- Evita que entre oxgeno al sistema y tome los protones del azul de metileno y como
consecuencia se vuelva a colorear nuestro tubo.