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Prins Leopold Instituut voor Tropische Geneeskunde

Institut de Mdecine Tropicale Prince Lopold


Prince Leopold Institute of Tropical Medicine
Instituto de Medicina Tropical Principe Leopoldo
Nationalestraat, 155
B 2000 Antwerpen
Stichting van Openbaar Nut 0410.057.701

PARASITOLOGIE
HUMAINE
TROPICALE
___________
(Notes pratiques)

SEPTEMBRE 2008

Philippe Gillet - Idzi Potters - Jan Jacobs


pgillet@itg.be , ipotters@itg.be , jjacobs@itg.be

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

TABLE DES MATIERES

NOTE SUR LA TAXINOMIE UTILISE DANS CES NOTES DE COURS : ....................................................... 6


NOTE SUR LES MESURES DONNES DANS LES NOTES DE COURS : ...................................................... 6
INTRODUCTION A LA MICROSCOPIE ........................................................................................................... 7
DESCRIPTION DU MICROSCOPE : ...........................................................................................................................................7
RGLAGE DE BASE DU MICROSCOPE : ...................................................................................................................................8
OBJECTIF IMMERSION : ......................................................................................................................................................8
ENTRETIEN ET MAINTENANCE DUN MICROSCOPE : ..............................................................................................................9
LOCALISATION DUN LMENT DANS UN CHAMP MICROSCOPIQUE : ...................................................................................10
EXAMEN SYSTMATIQUE DUNE PRPARATION : ................................................................................................................10
CALIBRATION DU MICROSCOPE :.........................................................................................................................................11
HELMINTHES ................................................................................................................................................ 13
TREMATODES ................................................................................................................................................................13
RSUM DES CYCLES POUR LES TRMATODES ........................................................................................................................ 14

Schistosoma mansoni ....................................................................................................................................................15


Schistosoma japonicum.................................................................................................................................................16
Schistosoma mekongi ....................................................................................................................................................17
Schistosoma intercalatum .............................................................................................................................................18
Schistosoma haematobium............................................................................................................................................19
Fasciola hepatica..........................................................................................................................................................20
Fasciola gigantica.........................................................................................................................................................21
Fasciolopsis buski .........................................................................................................................................................22
Clonorchis sinensis (Opisthorchis sinensis) .................................................................................................................23
Paragonimus spp. .........................................................................................................................................................24
CESTODES .......................................................................................................................................................................25
Diphyllobothrium latum................................................................................................................................................26
Taenia saginata.............................................................................................................................................................27
Taenia solium................................................................................................................................................................28
DIAGNOSTIC DIFFERENTIEL ENTRE TAENIA SAGINATA ET TAENIA SOLIUM.......................................................................... 29

Vampirolepis nana ........................................................................................................................................................30


(Hymenolepis nana) ......................................................................................................................................................30
Hymenolepis diminuta...................................................................................................................................................31
Echinococcus granulosus..............................................................................................................................................32
NEMATODES...................................................................................................................................................................33
Ascaris lumbricoides.....................................................................................................................................................34
Anisakis spp. .................................................................................................................................................................35
Toxocara canis..............................................................................................................................................................36
Enterobius vermicularis................................................................................................................................................37
Trichuris trichiura.........................................................................................................................................................38
Capillaria philippinensis...............................................................................................................................................39
Trichinella spp. .............................................................................................................................................................40
Ancylostoma duodenale ................................................................................................................................................41
Necator americanus ......................................................................................................................................................41
Strongyloides stercoralis...............................................................................................................................................42
TABLEAU COMPARATIF DES STADES DE DVELOPPEMENT DES ANCYLOSTOMIDAE ET DE STRONGYLOIDES
STERCORALIS RETROUVS DANS LES SELLES........................................................................................................................... 43
TABLEAU COMPARATIF DE LA TAILLE DES UFS DE STRONGYLOIDES STERCORALIS, DANCYLOSTOMIDAE, DE
TRICHOSTRONGYLUS SPP. ET DACARIENS :............................................................................................................................... 43

Trichostrongylus spp.....................................................................................................................................................44
Wuchereria bancrofti ....................................................................................................................................................45
Brugia malayi................................................................................................................................................................46
Brugia timori.................................................................................................................................................................47
Loa loa ..........................................................................................................................................................................48
Onchocerca volvulus.....................................................................................................................................................49
Mansonella streptocerca...............................................................................................................................................50
Mansonella ozzardi .......................................................................................................................................................51
Mansonella perstans .....................................................................................................................................................52
TABLEAU COMPARATIF DES MICROFILAIRES............................................................................................................................... 53

PROTOZOAIRES ........................................................................................................................................... 54
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AMIBES ............................................................................................................................................................................54
Entamoeba histolytica...................................................................................................................................................54
Entamoeba dispar .........................................................................................................................................................54
Entamoeba hartmanni...................................................................................................................................................54
Entamoeba coli .............................................................................................................................................................54
Endolimax nanus...........................................................................................................................................................54
Iodamoeba butschlii......................................................................................................................................................54
Entamoeba gingivalis....................................................................................................................................................54
Naegleria fowleri ..........................................................................................................................................................54
Acanthamoeba spp. .......................................................................................................................................................54
FLAGELLES.....................................................................................................................................................................54
Dientamoeba fragilis.....................................................................................................................................................54
Giardia lamblia.............................................................................................................................................................54
Chilomastix mesnili.......................................................................................................................................................54
Pentatrichomonas hominis............................................................................................................................................54
Trichomonas vaginalis..................................................................................................................................................54
Trypanosoma brucei gambiense ...................................................................................................................................54
Trypanosoma brucei rhodesiense .................................................................................................................................54
Trypanosoma cruzi........................................................................................................................................................54
Trypanosoma rangeli ....................................................................................................................................................54
Leishmania spp. ............................................................................................................................................................54
CILIES...............................................................................................................................................................................54
Balantidium coli............................................................................................................................................................54
SPOROZOAIRES..............................................................................................................................................................54
Plasmodium falciparum ................................................................................................................................................54
Plasmodium vivax .........................................................................................................................................................54
Plasmodium ovale .........................................................................................................................................................54
Plasmodium malariae ...................................................................................................................................................54
Plasmodium knowlesi....................................................................................................................................................54
TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN FROTTIS SANGUIN :............................................................... 54
TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN GOUTTE PAISSE : ............................................................... 54

Babesia spp. ..................................................................................................................................................................54


Toxoplasma gondii........................................................................................................................................................54
Sarcocystis spp..............................................................................................................................................................54
Isospora belli ................................................................................................................................................................54
Cyclospora cayetanensis...............................................................................................................................................54
Cryptosporidium spp.....................................................................................................................................................54
CHAMPIGNONS ET BACTERIES .............................................................................................................. 54
Pneumocystis jiroveci ...................................................................................................................................................54
Borrelia spp. .................................................................................................................................................................54
CLASSIFICATION INCONNUE ...................................................................................................................... 54
Blastocystis hominis......................................................................................................................................................54
TECHNIQUES USUELLES DE DIAGNOSTIC EN PARASITOLOGIE ............................................................ 54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DES SELLES : ......................................................................................................................54
Fixation des selles (SAF) ..............................................................................................................................................54
Examen macroscopique ................................................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Examen dun frottis pais (technique de KatoKatz modifie) :...................................................................................54
Coloration au lugol :.....................................................................................................................................................54
Coloration rapide de Heine : ........................................................................................................................................54
Coloration de Ziehl-Neelsen modifie : ........................................................................................................................54
Coloration lhmatoxyline ferrique (coloration de Kinyoun) : ..................................................................................54
Techniques de concentration : ......................................................................................................................................54
TECHNIQUE DE CONCENTRATION PAR SDIMENTATION (MTHODE DIPHASIQUE DE RITCHIE MODIFIE) : ................. 54
TECHNIQUE DE CONCENTRATION PAR FLOTTATION (MTHODE DE WILLIS MODIFIE) : ................................................... 54
TECHNIQUE DE CONCENTRATION POUR LARVES DE NMATODES (MTHODE DE BAERMANN) :.................................... 54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUNE BIOPSIE RECTALE :......................................................................................................54
SCOTCH TEST (TAPE TEST OU TEST DE GRAHAM):...............................................................................................................54
DCOLORATION POUR DIAGNOSTIC DIFFRENTIEL DES VERS ADULTES DE TNIA SPP. :.....................................................54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUN LIQUIDE DUODNAL : ...................................................................................................54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DES URINES :..........................................................................................................................54

Technique de sdimentation :........................................................................................................................................54


Technique de filtration :................................................................................................................................................54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUN CRACHAT :....................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Coloration au RAL-555 : ..............................................................................................................................................54
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Coloration au Bleu de toluidine O (Chalvardjian et all, 1963, modifie par Marty et all 1981): ................................54
EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUNE SCRETION VAGINALE : ..............................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DU SANG : ..........................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Frottis sanguin :............................................................................................................................................................54
Goutte paisse :.............................................................................................................................................................54
Woo :.............................................................................................................................................................................54
QBC (Quantitative Buffy-Coat) : ..................................................................................................................................54
Mthode de Knott :........................................................................................................................................................54
Mthode de Strout :.......................................................................................................................................................54
Mini colonne mAECT : .................................................................................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DERMIQUE :........................................................................................................................54
Skin snip (biopsie cutane exsangue): ..........................................................................................................................54
Scarification profonde : ................................................................................................................................................54
Exsudat dune lsion cutane : .....................................................................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN SUC GANGLIONNAIRE :..............................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUNE PONCTION DE MOELLE OSSEUSE : ............................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN TISSU MOU (FOIE, RATE) :..........................................................................................54
EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN LIQUIDE CPHALO-RACHIDIEN : ................................................................................54
Numration des leucocytes : .........................................................................................................................................54
Examen direct : .............................................................................................................................................................54
Examen aprs centrifugation : ......................................................................................................................................54
Examen aprs double centrifugation : ..........................................................................................................................54
Evaluation des protines totales : .................................................................................................................................54
Evaluation des protines par la technique de Sicard et Cantaloube : ..........................................................................54
Evaluation des globulines par la raction de Pandy : ..................................................................................................54
FORMOL GEL TEST : ............................................................................................................................................................54
PREPARATION DES REACTIFS ET DES COLORANTS............................................................................... 54
1.
ACIDE ACETIQUE A 5 % (V/V) (POUR CLAIRCISSEMENT DES PROGLOTTIS) : ......................................................54
2.
ACIDE PICRIQUE (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) :..............................................................54
3.
ACIDE TRICHLOROACETIQUE A 30 % (P/V) (POUR VALUATION DES PROTINES DU LCR) : ...........................54
4.
ALBUMINE DE MAYER (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : ...................................................54
5.
ALCOOL ACIDE DE ZIEHL 3 %(V/V) (POUR COLORATION DE ZIEHL NEELSEN ET L HMATOXYLINE
FERRIQUE) : ........................................................................................................................................................................54
6.
ALCOOL AMMONIACAL (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : .................................................54
7.
BLEU DE METHYLENE (POUR COLORATION DE ZIEHL-NEELSEN) : .....................................................................54
8.
BLEU DE TOLUIDINE 0 (POUR COLORATION AU BLEU DE TOLUIDINE O) : ............................................................54
9.
EAU FORMOLEE A 2 % (V/V) (POUR LA MTHODE DE KNOTT) : ...........................................................................54
10.
EAU PHYSIOLOGIQUE NACL 0,85 % (P/V) (POUR EXAMENS FRAIS) : .......................................................54
11.
EAU PHYSIOLOGIQUE FORMOLEE A 10 % (V/V) (POUR CONSERVATION DES SELLES) : ..............................54
12.
EAU TAMPONNEE (POUR COLORATION DE GIEMSA) :......................................................................................54
PREPARATION A BASE DE POUDRE (selon Sorensen) :..........................................................................................54
13.
EAU TAMPONNEE (POUR COLORATION DE GIEMSA) :......................................................................................54
PREPARATION A BASE DE COMPRIMES : ..............................................................................................................54
14.
ETHANOL A 70 % (V/V) (ANTISEPTIQUE ET COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) :..............................54
15.
FUCHSINE DE ZIEHL (POUR COLORATION DE ZIEHL NEELSEN CHAUD ET LHMATOXYLINE FERRIQUE) : 54
16.
GLYCEROL-VERT DE MALACHITE (POUR K ATO-K ATZ) : ...........................................................................54
17.
HYDROXYDE DE POTASSIUM A 1 % (P/V) : .................................................................................................54
18.
HYDROXYDE DE SODIUM A 1 % (P/V) : ........................................................................................................54
19.
LUGOL FORT SELON DANTONI (POUR EXAMENS DES SELLES) : .......................................................................54
20.
PEPSINE 2 % EN HCL 0.5 % (RECHERCHE DE TRICHINES) : ................................................................................54
21.
REACTIF DE PANDY (POUR MISE EN VIDENCE DES GLOBULINES DANS UN L.C.R.) : .....................................54
22.
REACTIF DE SULFATATION (POUR COLORATION AU BLEU DE TOLUIDINE O) :..............................................54
23.
SAF (SODIUM-ACETATE/ACETIC ACID/FORMALIN POUR FIXATION DES PARASITES DANS LES SELLES) : ..............54
24.
SOLUTION DHEMATOXYLINE FERRIQUE (POUR COLORATION LHMATOXYLINE FERRIQUE) : ............54
25.
SOLUTION SATUREE EN CHLORURE DE SODIUM (WILLIS MODIFIE) :...................................................54
26.
SOLUTION SATUREE EN SULFATE DE ZINC [33% P/V] (WILLIS MODIFIE) : ............................................54
27.
TRCK (LIQUIDE DE DILUTION POUR NUMRATION DES GLOBULES BLANCS) : ...................................................54
ANNEXES : ................................................................................................................................................... 54
ANNEXE 1 : RELATION ENTRE LA VITESSE DE ROTATION DUNE CENTRIFUGEUSE ET LA FORCE CENTRIFUGE.......... 54
ANNEXE 2 : TABLEAU RECAPITULATIF DES UFS DHELMINTHES .......................................................................................... 54
ANNEXE 3 : CARACTERISTIQUES IMPORTANTES POUR LE DIAGNOSTIC DES HELMINTHES PRARASITES (SAUF
FILAIRES).............................................................................................................................................................................................. 54
ANNEXE 4 : TABLEAU RECAPITULATIF DES FORMES VEGETATIVES DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX ...................... 54
ANNEXE 5 : TABLEAU RECAPITULATIF DES KYSTES (OU DES OOCYSTES) DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX ........... 54
ANNEXE 6 : TABLEAU COMPARATIF DES PRINCIPALES MICROFILAIRES HUMAINES ........................................................... 54
ANNEXE 7 : MORPHOLOGIE DES ELEMENTS SANGUINS SUR FROTTIS COLORE AU MAY-GRNWALD-GIEMSA............ 54
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ANNEXE 7 : MORPHOLOGIE DES ELEMENTS SANGUINS SUR FROTTIS COLORE AU MAY-GRNWALD-GIEMSA............ 54

ABREVIATIONS............................................................................................................................................. 54
QUELQUES RESOURCES INTERNET .......................................................................................................... 54

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NOTE SUR LA TAXINOMIE UTILISE DANS CES NOTES DE COURS :


Chaque espce fait partie dun genre. Celui-ci occupe une place dtermine au sein dune famille, dun ordre,
dune classe et dun embranchement (phylum). Les noms donns aux classes et aux familles ne sont pas
toujours ceux recommands par la Nomenclature Zoologique Internationales (Classification du Comit de
Nomenclature, Lvine et al., 1980), mais les dnominations les plus couramment rencontres dans les traits
de parasitologie. Cette classification a t intentionnellement choisie pour des raisons de facilit.
Les Helminthes prsentant une importance mdicale font partie de deux grands embranchements :
Le phylum Plathelminthes [vers aplatis, systme digestif rudimentaire, peau (ou tgument) fine par lequel se
fait une partie importante de labsorption des aliments] qui comporte deux classes trouvant une place dans ce
cours :

les Trmatodes : Corps non segment, hermaphrodites (sauf schistosomes)

et les Cestodes : Corps segment, hermaphrodites, chaque segment est bisexu.

Le phylum Nmathelminthes [vers ronds, non segments, systme digestif complet, sexes spars, peau
(ou cuticule) solide] avec une classe importante :

les Nmatodes.

Pour les Protozoaires [parasites unicellulaires], une classification simplifie, plus pratique pour le diagnostic de
laboratoire mdical est aussi utilise : Cette classification simplifie repose principalement sur le type de
mobilit du parasite :

Le Groupe des Amibes : Dplacement laide de pseudopodes, les formes parasitaires sont
toujours extracellulaires.

Le Groupe des Flagells : Dplacement par un ou des flagelle(s) qui ne sont cependant pas
toujours prsents pour le stade de dveloppement impliqu en pathologie humaine.

Le Groupe des Cilis : Dplacement et capture des aliments par le jeu de cils couvrant tout
lorganisme.

Le Groupe des Sporozoaires : Pas de mode de locomotion vident, les formes parasitaires
sont gnralement intracellulaires.

Pour quelques parasites, une classification nest pas encore bien dfinie.
Quelques autres parasites soit bactriens, soit fongiques sont aussi abord dans ces notes, en raison de
similitudes techniques pour les mettre en vidence.

NOTE SUR LES MESURES DONNES DANS LES NOTES DE COURS :


Les mesures utilises pour les parasites dans les fiches correspondent aux dimensions minimales et maximales
que lon peut observer (Sources OMS et/ou CDC). Dans les tableaux rcapitulatifs des diffrents parasites, les
valeurs moyennes les plus couramment rencontres sont donnes (Les valeurs moyennes sont bien
videmment toujours incluses entres les valeurs maximales et minimales).

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INTRODUCTION A LA MICROSCOPIE
Description du microscope :
Exemple : Olympus, modle CHK
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Oculaires 10x (5x, 8x, 15x,).


Rglage dioptrique de loculaire.
Rvolver mobile porte objectif.
Objectifs sec (4x, 10x, 40 x, )
ou a immersion (100 x,).
Platine porte objet.
Socle du microscope.
Interrupteur lectrique.
Echelle de lajustement interpupillaire.
Tube binoculaire (tte).
Vis de fixation de la tte du
microscope.
Statif.
Chariot pour fixer la prparation
sur la platine et pour la bouger
dans les deux dimensions de la
platine.
Ajustement de la force exercer
sur les vis de rglage micro- et
macro-mtrique.
Vis de rglage macromtrique
(mise au point grossire de
limage).
Vis de rglage micromtrique
(mise au point fine de limage).
Vis de rglage du dplacement du
chariot.
Repose main.
Cordon lectrique.
Rglage de lintensit de la lampe
(Potentiomtre).
Rglage du pr-focus.
Porte fusible.
Rceptacle du cble lectrique.
Vis de rglage de la hauteur du
condensateur.
Vis de fixation du condensateur.
Rglage de louverture du
diaphragme.
Porte filtre.
Condensateur.
Source de lumire : Lampe avec
porte filtre (ou miroir).

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Rglage de base du microscope :


Position du
condensateur

Objectif

10x

Basse

40x

Intermdiaire

100x

Haute

Diaphragme

+/- ferm

+/- ouvert

Ouvert

Huile
immersion

Non

Non

Oui

Position
du Miroir

Limites et usages

Plat

30 - 500 m
Recherche des ufs, des
larves et des cilis.
(Entomologie).

Plat

5 - 30 m
Dtails des ufs, des larves
et des cilis.
Recherche de certains
protozoaires frais.
(Hmatologie frais).

Concave

0.25 - 5 m
Prparations colores, y
compris pour la recherche de
certains protozoaires.

Objectif immersion :
Les rayons lumineux qui traversent le systme optique du microscope rencontrent diffrents milieux (air, verre,
etc.), avec des indices de rfraction diffrents. En passant dun milieu un autre, ces rayons seront dvis et
ventuellement perdus dans le systme. [Le mme phnomne se passe pour un bton partiellement immerg
dans de leau qui apparat comme bris, parce que les rayons lumineux passant dun milieu (eau) lautre (air)
sont rfracts (dvis) de leur chemin original]. Le degr de dviation dpend du pouvoir rfractant du milieu,
appel indice de rfraction, dont le symbole est n . Lindice de rfraction est dtermin par la loi de Snell.
Quelques valeurs typiques sont donnes ci-dessous :

Air : n = 1.000
Eau : n = 1.330
Verre vitre normal : n = 1.500
Huile immersion : n = 1.515
Baume du Canada (milieu de montages microscopiques) : n = environ 1.5

Les grossissements puissants (50x, 100x) ncessitent


une grande quantit de lumire. Pour viter une perte
de lumire, on utilise alors une huile spciale avec un
indice de rfraction lev que lon place entre la
prparation et lobjectif.
La ligne NN reprsente la normale du systme
optique (microscope). Lorsquun rayon lumineux passe
dun milieu un autre avec un indice de rfraction moins
lev que lindice de rfraction prcdent, il scarte de
la normale NN [partie gauche du dessin]. Si le deuxime
indice de rfraction est plus lev, le rayon lumineux se
rapproche de la normale [partie droite du dessin].
Lutilisation dhuile permet ainsi de gagner de la lumire
et damliorer la rsolution optique.
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Entretien et maintenance dun microscope :


Le microscope, mme le plus simple, est un instrument merveilleux, fruit de recherches de nombreux savants
au cours des sicles. Il n'a cess d'voluer pour atteindre aujourd'hui une quasi perfection. Il comprend des
parties mcaniques d'une trs grande prcision et des optiques tout aussi fragiles. Rfrez-vous son mode
d'emploi fourni, pour connatre la manire spcifique de le dplacer et de l'entretenir.
Le microscope est le principal outil de laboratoire en situation disolement. Il permet de diagnostiquer de
nombreuses infections bactriennes (tuberculose, mningites,), parasitaires (trypanosomiases, paludisme,)
et apporte aussi un aide au diagnostic (par la numration et lidentification des cellules dans les chantillons
biologiques par exemple).
Le microscope est galement un instrument relativement coteux qui mrite toute notre attention.
La qualit et la sensibilit des examens de laboratoire dpendent en grande partie de ltat du
microscope. Un microscope bien entretenu permettra donc dobtenir des rsultats de qualit.
Les trois grands ennemis sont la poussire, lhumidit et les chocs. Certains climats sont particulirement
nuisibles linstrument de prcision quest le microscope. La poussire ou les vents de sables peuvent
pntrer les parties les plus dlicates de la mcanique. Par ailleurs lhumidit excessive produira des
moisissures sur les surfaces optiques du verre. Pour viter ces problmes, Il est important de ne pas utiliser
des housses en matire plastique mais en tissu clair pour que le microscope puisse respirer et recevoir
la lumire (en coton par exemple que lon pourra laver rgulirement). Ces housses seront suffisamment
grandes afin de pouvoir border lappareil qui sera plac dans un endroit bien ar, voir ventil. En saison
humide, le rangement des appareils dans des armoires est proscrire si lon veut viter les moisissures, sauf si
ces armoires sont ventiles et chauffes, ou assches par des absorbeurs dhumidit rgulirement rgnrs
(cristaux de silicagel, avec indicateur de saturation). La climatisation nest une solution que si elle est
permanente (condensation avec les sautes de temprature). Rgler la climatisation sur une temprature pas
trop froide pour viter de trop grands carts de temprature lors des arrts ou des coupures de courant.
Quelques rgles de bases permettront de livrer des rsultats de qualit durant de nombreuses annes :

Pour les microscopes lectriques, diminuer lintensit lumineuse au maximum (potentiomtre) avant
dteindre le microscope (interrupteur). Ceci permet de prolonger la dure de vie de la lampe.
Prvoir une (des) lampe(s) de rechange. Conserver prcieusement les caractristiques et les
fournisseurs de la lampe.
A la fin du travail, liminer lhuile de lobjectif immersion laide dun papier doux (un papier
hyginique doux non pelucheux peut tre utilis). Lhuile durci en schant et rend limage trouble.
En cas de dpt dhuile, il est possible de nettoyer lobjectif immersion en imbibant trs
lgrement un papier doux avec trs peu de xylne (ou dun mlange alcool/ther 1/1 v/v) puis
essuyer avec un papier doux sec.
Les autres lentilles seront aussi nettoyes avec un autre papier doux (viter tout contact entre les
autres lentilles et lhuile). Certaines lentilles synthtiques ne rsistent pas aux solvants
organiques : Vrifier le(s) type(s) de solvant(s) utilisable(s) pour chaque microscope dans
leurs notices dutilisation.
Ne jamais laisser le tube sans oculaires : Les poussires et les spores de champignons pourraient
entrer dans le tube.
Eliminer la poussire laide dun petit pinceau et dune poire en caoutchouc.
Recouvrir le microscope de sa housse et ranger le en fonction des conditions locales.
Protger le microscope des chocs. En cas de transport, utiliser une boite prvue cet effet, en y
fixant bien le microscope.

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Localisation dun lment dans un champ microscopique :


Le champ microscopique est limage circulaire observe travers un microscope. En considrant le champ
microscopique comme un cadran de montre, la division des heures permet de localiser un objet :
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Exemples :
Llment au centre est un globule rouge.
A 1 heure se situe une plaquette sanguine entre deux globules rouges.
Llment 2 heures est un neutrophile.
Llment entre 4 et 5 heures est un monocyte.
Llment entre le centre et 10 heures est un lymphocyte.
Llment sur le bord 8 heures est une partie de lymphocyte.

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Examen systmatique dune prparation :


La recherche des ufs et des larves dhelminthes (et des formes vgtative des cilis) se fait lobjectif 10 x.
La totalit de la prparation est systmatiquement examine. Un examen systmatique se fait en regardant
une prparation champ aprs champ, puis bande aprs bande, sans laisser despace entre les champs ou les
bandes.
On commence lexamen dans un coin de la prparation (par exemple le coin suprieur gauche). Aprs avoir
observ ce premier champ, on prend un repre 3 heures. On bouge la prparation latralement jusqu ce
que ce repre se retrouve 9 heures et ainsi de suite jusqu lextrmit de la prparation. On prend alors un
repre 6 heures et lon bouge la prparation en sorte quil se trouve 12 heures et lon repart dans lautre
sens. On continue ainsi jusqu avoir examin toute la prparation.
Pour la recherche de parasites au 40 x (certains protozoaires), le mme principe est utilis, mais en se limitant
3 lignes contigus.
Pour des prparations colores, la prparation entire nest pas examine. La partie examine doit cependant
former une surface contigu sans espace entre les champs examins.

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Calibration du microscope :
Principe :
La taille est un critre important de dtermination de nombreux parasites, tout particulirement lorsqu'il
s'agit de kystes de protozoaires ou d'ufs dhelminthes. Il est possible davoir une premire estimation
de la taille par comparaison avec le diamtre du champ microscopique observ : En divisant le champ
de vision des oculaires par le grossissement des objectifs, on obtient le vrai diamtre du champ
microscopique observ. On ne tient pas compte du grossissement des oculaires, mais on doit tenir
compte du facteur de tube. Le diamtre vrai obtenu doit encore tre divis par le facteur tube pour
obtenir le diamtre du champ observ en mm.
Le champ de vision (field of view) indique le diamtre en mm de limage intermdiaire dans loculaire
(c'est--dire le diamtre du diaphragme circulaire qui limite limage et se trouve approximativement au
milieu de loculaire. Il est indiqu gnralement sur loculaire, juste aprs le grossissement (exemples :
10x/25, 10x/20, 6x/20,). Le facteur de tube est une caractristique du microscope (la plupart du
temps = 1, vrifier dans la manuel dutilisation du microscope).
Exemple : des oculaires 10x/22 sont utiliss avec un objectif 10 x sur un microscope avec un
facteur de tube de 1. Cette combinaison fournit un champ objet de (22 :10 ):1 = 2.2 mm
Soit pour nos microscopes Olympus CH2 (facteur de tube = 1) :
Oculaires
10x 18L
10x 18L
10x 18L
10x 18L

Objectifs
4x
10 x
40 x
100 x

Diamtre du champ
microscopique observ
4.5 mm
1.8 mm
0.45 mm
0.18 mm

Il est galement possible davoir une premire estimation de la taille dun parasite par comparaison
avec un lment de taille connu (parasites comme S. mansoni ou T. trichiura, globules rouges, etc.).
Pour mesurer avec prcision des lments qui se trouvent dans un champ microscopique, il est
ncessaire que loculaire possde une chelle de mesure (micromtre oculaire). Un micromtre
oculaire est un oculaire muni dune lentille portant grave une chelle, le plus souvent divise en 100
graduations. Ces graduations auront une valeur diffrente selon le grossissement de lobjectif du
microscope.
Le micromtre oculaire doit donc tre calibr pour chaque objectif de chaque microscope. La
calibration consiste donner une valeur en m pour chaque graduation et pour chaque objectif par
comparaison avec une mesure de rfrence. La mesure de rfrence est un micromtre objectif (lame
porte-objet en verre portant une graduation longue de 1 2 mm, dont les plus petites divisions sont
distantes de 10 m exactement). Vu le prix et lusage trs limit dun micromtre objectif, il peut tre
remplac, sans grande perte de prcision, par une cellule de numration. Les cellules de numrations
sont utilises en hmatologie pour dnombrer des lments. Elles se retrouvent dans chaque
laboratoire
Matriel ncessaire :
Microscope, micromtre oculaire, (micromtre objectif ou) cellule de numration, papier optique, huile
immersion.
Calibration dun objectif :
1. Placer une cellule de numration (Neubauer double improved par exemple) sur la platine du
microscope, et mettre la partie quadrille de la cellule au centre du champ microscopique.
2. Enlever loculaire dont la dioptrie nest pas rglable et remplacer le par le micromtre oculaire
talonner.

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3. Faire la mise au point.


4. Tourner loculaire jusqu ce que les graduations du micromtre oculaire soient parallles aux lignes de
la cellule de numration.
5. Ajuster le micromtre en dplaant la platine en sorte que le trait 0 du micromtre oculaire se
superpose exactement une ligne du quadrillage central de la cellule de Neubauer. A fort
grossissement, lpaisseur des traits gravs peut tre telle quil faille chercher superposer soit le bord
gauche soit le bord droit des traits.
6. Sans dplacer le quadrillage de la cellule de Neubauer, chercher un autre point lextrme droite du
champ o deux autres traits se superposent exactement. Ce deuxime jeu de trait doit tre le plus
droite possible du trait 0.
7. Compter le nombre de traits du micromtre oculaire entre le trait 0 et le point o le deuxime jeu de
traits se superpose. Exemple pour la figure ci-dessous : 94 divisions du micromtre oculaire.
8. Compter le nombre de carrs de la cellule de Neubauer entre le trait 0 et le point o le deuxime jeu de
traits se superpose. Transformer ce nombre de petits carrs en m.
Exemple pour la figure ci-dessous : 6 carrs de 250 m + 5 carrs de 200 m, soit 2.500 m.
9. Calculer comme suit la longueur correspondant une division de loculaire :
94 divisions du micromtre oculaire = 2.500 m.
1 division du micromtre oculaire = 2.500 / 94 = 26,6 m.
10. Rpter lopration pour tous les objectifs.
11. Ltalonnage na besoin dtre fait quune fois pour chaque microscope. Attention, si le micromtre
oculaire est rglable pour la dioptrie, la calibration nest valable que pour le rglage dioptrique utilis (en
effet, la longueur du tube influence le grossissement).

Cellules de Neubauer
(Double improved)

Micromtre oculaire

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Calibration du micromtre

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES

CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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RSUM DES CYCLES POUR LES TRMATODES

Furcocercaires dans leau,


qui traversent le derme

Mtacercaires sur des


plantes aquatiques

ufs dans les


selles, les urines
ou les crachats

Dveloppement des
ufs dans leau* 
miracidium

Dveloppement du
miracidium dans un
mollusque  sporocystes,
rdies, cercaires

Mtacercaires dans
des poissons

Mtacercaires
dans des crustacs

* Sauf pour Opisthorchis spp., Heterophyes spp. et Metagonimus spp., pour lesquels les ufs doivent dabords
tre ingrs par le mollusque, avant de librer les miracidium.

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Schistosoma mansoni
Distribution gographique :

Afrique tropicale
Amrique tropicale
Moyen Orient
Htes dfinitifs :

Homme
Rongeurs (Amrique
principalement)
Singes (Afrique
principalement)

Famille :

Classe :

Schistosomatidae

Trmatodes

Pathologie :

Nom commun :
Schistosome intestinal

Bilharziose intestinale ou rectale (F)


Intestinal or rectal schistosomiasis (En)
Bilarciasis intestinal, Esquistosomiasis intestinal (Es)

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Mollusques deau
douce :

Transcutan par contact avec de leau douce contamine


par des furcocercaires (ou trs exceptionnellement transmuqueuse via de leau de boisson contamine).

Biomphalaria spp.

Localisation de ladulte :
Veines msentriques infrieures (gros intestin).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA)]
Morphologie des ufs :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie svre de lordre de 30 %


(phase dinvasion), puis subnormale voire
normale.
Hyperleucocytose en phase prpatente.
(Bilan des lsions : Bilan hpatique, signes
dhypertension portale).

Dimensions :

110-175 m x 45-70 m.

Forme :

Ovode ou asymtrique en
forme de bouteille.

Coque :

Lisse, trs fine.

Contenu :

Embryonn : miracidium
(parfois mobile).

Couleur :

Gris jaune.

Caractristiques :

Eperon latral au-dessus


du ple arrondi.

NB : ufs alcoolo-acido rsistants (colors en rouge au


Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

ufs des autres espces de Schistosomes.


ufs de Fasciolidae.
Spores de Psorospermum haeckeli (sporozoaire
infestant les crevisses dEurope de lest).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Si lperon nest pas visible, il est possible de retourner luf en appuyant dlicatement sur la lamelle pour le faire apparatre.
Comme les ufs ne se librent pas facilement de la paroi intestinale, des examens de selles rpts ou une biopsie rectale sont envisager.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. mansoni dans les urines (ponte dans les veines vsicales). La coloration de Ziehl-Neelsen
peut alors tre utile.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles 25 60 jours aprs linfestation (priode pr patente). La ponte quotidienne est de lordre de 100 300
ufs par femelle adulte. La dure de vie du ver adulte est estime entre 2 et 18 ans.

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Schistosoma japonicum

Famille :

Classe :

Schistosomatidae

Trmatodes

Distribution gographique :

Nom commun :

Extrme orient
(Chine, Core,
Philippines, Sulawesi, )

Schistosome
Intestinal

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Mollusque amphibie
deau douce :

Transcutan par contact avec de leau douce


contamine par des furcocercaires (ou
trs
exceptionnellement trans-muqueuse via de leau de
boisson contamine).

Homme
Animaux domestiques
(chien, chat, chvre,
porc, cheval, buf,
buffle,)
Animaux sauvages :
(Rongeurs et carnivores)

Pathologie :

Bilharziose artrioso-veineuse (F)


Asiatic schistosomiasis, Katayama disease (En)
Enfermedad de Katayama (Es)

Oncomelania spp.

Localisation de ladulte :
Veines msentriques suprieures (intestin grle).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
[Recherche des ufs dans une biopsie rectale].
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie svre de lordre de 30 %


(phase dinvasion), puis subnormale voire normale.
Hyperleucocytose en phase prpatente.
(Bilan des lsions : Bilan hpatique, signes
dhypertension portale).

Dimensions :

68 100 m x 45 80 m.

Forme :

Rond ou ovale.

Coque :

Trs mince, lisse.

Contenu :

Embryonn : miracidium
(parfois mobile).

Couleur :

Transparent ou jaune clair.

Caractristiques :

Petit peron latral (rarement


visible) localis dans une
dpression.

NB : ufs alcoolo-acido rsistants (colors en rouge au


Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

ufs de Schistosoma mekongi (plus petit).


ufs dAscaris spp. (dcortiqu).
ufs de Paragonimus spp.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

La diffrentiation microscopique de S. mekongi et S. japonicum est trs difficile (distinction gographique).


Les ufs de S. japonicum ont un peron peu rfringent, les rendant peu caractristiques dans un examen microscopique.
La technique de Kato-Katz est peu utilisable pour S. japonicum et S. mekongi (miracidium rapidement invisible et forme gnrale de luf peu
typique).
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. japonicum dans les urines (ponte dans les veines vsicales).
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles environ 30 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 1.500 3.500 ufs par
femelle adulte. Cette production leve rend la biopsie rectale peu utile. La dure de vie du ver adulte est estime plus de 25 ans.

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Schistosoma mekongi
Distribution gographique :
Le long du Mkong (Laos,
Cambodge, Thalande), Malaisie
Htes dfinitifs :

Homme
Animaux domestiques
(chien, chat, chvre,
porc, cheval, buf,
buffle,)
Animaux sauvages :
(Rongeurs et carnivores)

Famille :

Classe :

Schistosomatidae

Trmatodes

Nom commun :
Schistosome intestinal

Pathologie :

Bilharziose artrioso-veineuse (F)


Intestinal schistosomiasis, Katayama disease (En)
Enfermedad de Katayama (Es)

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Mollusque deau
douce :

Transcutan par contact avec de leau douce


contamine par des furcocercaires (ou trs
exceptionnellement trans-muqueuse via de leau de
boisson contamine).

Tricula aperta.

Localisation de ladulte :
Veines msentriques suprieures (intestin grle).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale (peu utile).
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie svre de lordre de 30 %


(phase dinvasion), puis subnormale voire normale.
Hyperleucocytose en phase prpatente.
(Bilan des lsions : Bilan hpatique, signes
dhypertension portale).

Dimensions :

51 73 m x 39 66 m.

Forme :

Rond ou ovale.

Coque :

Trs mince, lisse.

Contenu :

Embryonn : miracidium
(parfois mobile).

Couleur :

Transparent ou jaune clair.

Caractristiques :

Petit peron latral (rarement


visible) localis dans une
dpression.

NB : ufs alcoolo-acido rsistants (colors en rouge au


Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

ufs de Schistosoma japonicum (plus grand).


ufs dAscaris spp. (dcortiqu).
ufs de Paragonimus spp.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

La diffrentiation microscopique de S. mekongi et S. japonicum est trs difficile (distinction gographique).


Les ufs de S. mekongi ont un peron peu rfringent, les rendant peu caractristiques dans un examen microscopique.
La technique de Kato-Katz est peu utilisable pour S. japonicum et mekongi (miracidium rapidement invisible et forme gnrale de luf peu
typique).
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. mekongi dans les urines (ponte dans les veines vsicales).
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles 30 60 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 1.500 3.500 ufs par femelle
adulte. Cette production leve rend la biopsie rectale peu utile. La dure de vie du ver adulte est estime plus de 25 ans.

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Schistosoma intercalatum
Distribution gographique :
Afrique centrale : Congo, Rpublique
Centrafricaine, Gabon, Nigeria,
Cameroun, Burkina Faso, Mali,...
[petits foyers limits quelques
villages].
Htes dfinitifs :

Homme
Rongeurs ?

Famille :

Classe :

Schistosomatidae

Trmatodes

Nom commun :

Pathologie :

Schistosome
intestinal
Htes
intermdiaires :
Mollusques deau
douce :
Bulinus spp.

Bilharziose intestinale ou rectale (F).


Intestinal or rectal schistosomiasis (En).
Bilharziasis intestinal (Es).
Mode de contamination :

Transcutan par contact avec de leau douce


contamine par des furcocercaires (ou trs
exceptionnellement trans-muqueuse via de leau de
boisson contamine).
Localisation de ladulte :
Veines rectales.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
[technique de Kato-Katz : Pour enqutes pidmiologiques].
Recherche des ufs dans une biopsie rectale.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
[Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).]
Morphologie des ufs :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie svre de lordre de 30 % (phase


dinvasion), puis subnormale voire normale.
Hyperleucocytose en phase prpatente.
(Bilan des lsions : Bilan hpatique, signes
dhypertension portale).

Dimensions :

140 240 m x 50 85 m.

Forme :

Symtrique, en losange, un
ple arrondi.

Coque :

Mince, lisse.

Contenu :

Embryonn : Miracidium
(parfois mobile).

Couleur :

Gris jaune, fonc.

Caractristiques :

Grand peron terminal.

NB : ufs alcoolo-acido rsistants (colors en rouge


au Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

ufs dautres espces de schistosomes


(S. haematobium).
ufs de Fasciolidae.
Spores de Psorospermum haeckeli
(sporozoaire infestant les crevisses dEurope
de lest).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Comme les ufs ne se librent pas facilement de la paroi intestinale, des examens de selles rpts ou une biopsie rectale sont envisager.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. intercalatum dans les urines (ponte dans les veines vsicales). La diffrentiation peut se
faire au Ziehl-Neelsen.
Il existe aussi des hybrides naturels entre S. haematobium et S. intercalatum.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les selles 50 60 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 150 400 ufs par femelle
adulte. La dure de vie du ver adulte nest pas connue.

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Schistosoma haematobium
Distribution gographique :
Afrique
Moyen Orient
Indes.
(Portugal : petits foyers ?)
Htes dfinitifs :

Homme
(Singes)
(Porcs)

Classe :

Schistosomatidae

Trmatodes

Nom commun :

Pathologie :

Schistosome vsical
Htes intermdiaires :
Mollusques deau douce :

Famille :

Bulinus spp.

Bilharziose vsicale (F).


Urinary or vesical schistosomiasis (En).
Bilharziasis urinaria (Es).
Mode de contamination :

Transcutan par contact avec de leau douce


contamine par des furcocercaires (ou trs
exceptionnellement trans-muqueuse via de leau de
boisson contamine).
Localisation de ladulte :
Veines du plexus vsicales.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les urines : Technique de concentration par sdimentation ou par filtration.
Srologie (sur base des CAA circulating anodic antigen et des CCA circulating cathodic antigen) :
- Recherche des anticorps (diffrentes techniques).
- Recherche des complexes immuns circulants (diffrentes techniques).
Recherche des antignes dans les URINES (CCA, dtection sur strip lateral flow through ou en ELISA).
Morphologie des ufs :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie svre de lordre de 30 % (phase


dinvasion), puis sub-normale voire normale.
Hmaturie, et protinurie.
Hyperleucocytose en phase prpatente.
(Bilan des lsions rnales).

Dimensions :

112 170 m x 40 70 m.

Forme :

Symtrique, ovode, un ple


bien arrondi.

Coque :

Lisse, trs mince

Contenu :

Embryonn : Miracidium
(parfois mobile).

Couleur :

Gris jaune.

Caractristiques :

Petit peron terminal.

NB : ufs non alcoolo-acido rsistants (colors en


bleu au Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

ufs dautres espces de schistosomes


(S. intercalatum).
Cellules pithliales.
Spores de Psorospermum haeckeli
retrouves dans les selles (sporozoaire
infestant les crevisses dEurope de lest).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Le nombre dufs prsents dans les urines varie au cours de la journe et montre un pic entre 10 et 14 heures.
Les ufs sont plus facilement retrouvs en fin de miction. Un stress de la vessie (mouvements, gonflement) aide au dcollement des ufs.
Mme chez des patients infects massivement, les ufs ne sont pas toujours prsents dans les urines. Il peut donc tre important de rpter
lexamen.
Si les urines ne sont pas examines rapidement, il est possible de retrouver des miracidies trs mobiles.
Les ufs apparaissent dans les urines 6 8 semaines aprs infestation.
Il est parfois possible de retrouver des ufs de S. haematobium dans les selles (ponte dans les veines msentriques, ou fistules). La
diffrentiation peut se faire au Ziehl-Neelsen.
Il existe aussi des hybrides naturels entre S. haematobium et S. intercalatum.
Les tests srologiques sont groupe-spcifiques. Des ractions croises avec dautres trmatodes sont possibles. La combinaison de deux
tests srologiques pour la recherche des anticorps circulant, un test Elisa et un test IHA donne une sensibilit de lordre de 90 %. Les
anticorps peuvent persister des annes aprs un traitement efficace.
Les ufs apparaissent dans les urines 54 84 jours aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 20 300 ufs par femelle
adulte. La dure de vie du ver adulte est estime entre 3 et 7 ans.

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Fasciola hepatica
Distribution gographique :
Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Herbivores
Homme
Rongeurs, porcs
carnivores,

Famille :

Classe :

Fasciolidae

Trmatodes

Nom commun :
Douve du foie

Pathologie :

Distomatose du foie (F)


Fasciolasis, liver fluke infection (En)
Distomatosis hepatica (Es)

Htes intermdiaires :
Mollusques amphibies
deau douce
Lymnea spp.

Mode de contamination :
Consommation de plantes aquatiques contamines
par des mtacercaires (exemple : cresson de rivire).
Localisation de ladulte :
Voies biliaires.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans un liquide de tubage duodnal.
Srologie : Recherche danticorps dirigs contre les produits dexcrtion et de scrtion (ES antigens).
[Recherche de coproantignes (ES antigens)].
Morphologie des ufs :
Dimensions :

120 150 m x 63 90 m.

Forme :

Ovode, symtrique, ples


bien arrondis. Un ple plus
effil.

Coque :

Lisse et fine, double ligne.

Contenu :

Jamais embryonn, masse


de cellules peu nettes.

Couleur :

Jaune ou brun fonc.

Caractristiques :

Opercule (peu visible)

Autres signes biologiques associs :

Phase dinvasion : Hyperosinophilie (jusqu 80 %),


hyperleucocytose.
Phase dtat : Hyperosinophilie, altrations du bilan
hpatique.

Confusions possibles :

ufs de Fasciola gigantica.


ufs de Fasciolopsis buski.
ufs de Schistosoma spp.
ufs dacariens.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

6.

Le nombre dufs prsent dans les selles est souvent limit. Les examens rpts, les techniques de concentration ou le
tubage duodnal sont donc envisager.
La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible. De plus, il existerait
aussi des hybrides naturels de F. gigantica et de F. hepatica. Une rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc
la plus correcte.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle,
confirmant ainsi le diagnostic de Fasciolidae.
Il est possible dobserver des ufs de passage (ufs rsultant non dune infestation, mais de la consommation de foie
danimaux contamins par le ver adulte). Des examens de selles rpts aprs une dite alimentaire peuvent exclure cette
hypothse (pseudo distomatose).
Durant la phase dinvasion (migration des stades larvaires dans le parenchyme du foie [7 11 semaines]), on observe une
pathologie, mais sans prsence dufs dans les selles. Les tests srologiques sont donc trs importants durant cette priode.
Si la sensibilit est bonne (95 % 2 4 semaines aprs linfestation), il existe des ractions croises avec dautres trmatodes.
Des infestations non traites avec des douves dans les canaux biliaires peuvent cependant devenir progressivement
srongative en 1 an, vraisemblablement en raison de la suppression de la stimulation antignique.
Les ufs apparaissent dans les selles 11 17 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 25.000
ufs par adulte hermaphrodite (mais peu arriveraient dans les selles [30 ufs par jours ?]]). La dure de vie du ver adulte est
estime plus de 25 ans.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Fasciola gigantica
Distribution gographique :

Nom commun :

Surtout en Afrique centrale et


du sud.
Plus rarement Pacifique de
louest, Hati et Asie.

Grande douve du foie

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Herbivores
Homme
Rongeurs, porcs
carnivores,

Mollusques aquatiques :

Famille :

Classe :

Fasciolidae

Trmatodes
Pathologie :

Distomatose du foie (F)


Fasciolasis, giant liver fluke infection (En)
Distomatosis gigantica (Es)
Mode de contamination :

Consommation de plantes aquatiques contamines


par des mtacercaires.

Lymnea spp.

Localisation de ladulte :
Voies biliaires.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans le liquide de tubage duodnal.
Srologie : Recherche danticorps dirigs contre les produits dexcrtion et de scrtion (ES
antigens).
[Recherche de coproantignes (ES antigens)].
Morphologie des ufs :
Dimensions :

135 190 m x 68 94 m.

Forme :

Ovode, symtrique, ples


bien arrondis. Un ple plus
effil.

Coque :

Lisse et fine, double ligne.

Contenu :

Jamais embryonn, masse


de cellules peu nettes.

Couleur :

Jaune ou brun fonc.

Caractristiques :

Opercule (peu visible)

Autres signes biologiques associs :

Phase dinvasion : Hyperosinophilie (jusqu 80 %),


hyperleucocytose.
Phase dtat : Hyperosinophilie, altrations du bilan
hpatique.

Confusions possibles :

ufs de Fasciola hepatica.


ufs de Fasciolopsis buski.
ufs de Schistosoma spp.
ufs dacariens.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

7.

Les vers adultes de F. gigantica sont la plupart du temps striles, la recherche des antignes est alors une alternative diagnostique importante.
Si ce nest pas le cas, le nombre dufs prsent dans les selles est souvent limit. Les examens rpts, les techniques de concentration ou le tubage
duodnal sont donc parfois ncessaires.
La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible (Il existerait aussi des hybrides naturels de F.
gigantica et de F. hepatica). Une rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc la plus correcte.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle, confirmant ainsi le diagnostic
de Fasciolidae.
Il est possible dobserver des ufs de passage (ufs rsultant non dune infestation, mais de la consommation de foie danimaux contamins par le
ver adulte). Des examens de selles rpts aprs une dite alimentaire peuvent exclure cette hypothse (pseudo distomatose).
Durant la phase dinvasion (migration des stades larvaires dans le parenchyme du foie [7 11 semaines]), on observe une pathologie, mais sans
prsence duf dans les selles. Les tests srologiques sont donc trs importants durant cette priode. Si la sensibilit est bonne (95 % 2 4 semaines
aprs linfestation), il existe des ractions croises avec dautres trmatodes. Des infestations non traites avec des douves dans les canaux biliaires
peuvent cependant devenir progressivement srongative en 1 an, vraisemblablement en raison de la suppression de la stimulation antignique.
Les ufs apparaissent dans les selles 12 15 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne retrouve dans les selles serait de lordre de 30 ufs
par adulte hermaphrodite. Lesprance de vie du ver adulte est estime plus de 11 ans.

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Fasciolopsis buski
Distribution gographique :

Nom commun :

Chine, Asie du sud et de lest,


continent Indien,
Extrme Orient, Europe centrale

Douve intestinale

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme
Porc
Singe
Lapin
(Chien)

Mollusque deau douce :

Famille :

Classe :

Fasciolidae

Trmatodes
Pathologie :

Distomatose intestinale (F)


Fasciolopsiasis, Busks fluke infection (En)
Distomatosis intestinal (Es)
Mode de contamination :

Consommation de plantes aquatiques contamines


par des mtacercaires (exemple : Chtaigne deau).

Hippeutis spp.,
Segmentina spp.

Localisation de ladulte :
Intestin grle.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Morphologie des ufs :
Dimensions :

130 159 m x 78 98 m.

Forme :

Ovode, symtrique, ples


bien arrondis. Un ple plus
effil.

Coque :

Mince, une seule ligne.

Contenu :

Jamais embryonn, masse


de cellules peu nettes.

Couleur :

Jaune ou brun fonc.

Caractristiques :

Opercule (peu visible).

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie.

Confusions possibles :

ufs de Fasciola gigantica.


ufs de Fasciola hepatica.
ufs de Schistosoma spp.
ufs dacariens.

Remarques :
1. Ces ufs sont trs similaires aux Fasciola spp., mais habituellement prsents en grand nombre dans les selles.
Cette haute production rend les techniques de concentration peu utiles.
2. La distinction microscopique entre F. gigantica, F. hepatica et Fasciolopsis buski est presque impossible. Une
rponse du type prsence dufs de Fasciolidae est donc la plus correcte.
3. Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la
lamelle, confirmant ainsi le diagnostic de Fasciolidae.
4. Les ufs apparaissent dans les selles 12 20 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre
de 16.000 ufs par ver adulte. La survie des vers adultes chez lhomme est estime 6 mois (contre jusqu 25
ans pour F. hepatica). Ces infestations seraient peu (pas) symptomatiques. Dans des cas extrmement rares, les
vers adultes se localisent dans le cerveau ou le myocarde.
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Clonorchis sinensis
(Opisthorchis sinensis)
Distribution gographique :

Douve de Chine.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme.
Mammifres
piscivores.

Classe :

Opisthorchidae

Trmatodes

Nom commun :

Mer de Chine : Japon, Core,


Hong-Kong, Taiwan, Chine,
Kamchatka, ...

Famille :

Pathologie :

Distomatose de Chine (F)


Chinese live fluke disease, Clonorchiasis (En)
Distomatosis hepatica chinesco (Es)
Mode de contamination :

1. Mollusques deau
douce. (Parafossarulus
spp., Alocinma spp.,
Bithynia spp.)

Consommation de poisson infest par des


mtacercaires vivantes.

2. Poissons deau douce.

Voies biliaires.

Localisation de ladulte :

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des ufs dans le liquide daspiration dun tubage duodnal (obstruction des voies biliaires).
Recherche des anticorps sriques (ELISA).
Morphologie des ufs :
Dimensions :

2635 m x 12-14 m.

Forme :

Amphore asymtrique,
(ovode).

Coque :

Lisse, double, lignes fines.

Contenu :

Embryonn (miracidium,
parfois mobile).

Couleur :

Brun jauntre, assez clair.

Caractristiques :

Opercule bien visible avec


une petite protubrance non
centrale au ple oppos.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie (jusqu 20 %).

Confusions possibles :

ufs des autres espces dOpisthorchis spp.


Les Heterophyidae.

Remarques :
1.
2.

3.

4.
5.
6.
7.

Le nombre dufs prsent dans les selles est souvent peu lev, ncessitant des examens rpts et/ou des techniques de
concentration (sdimentation).
Il est trs difficile de distinguer microscopiquement les ufs dOpisthorchis sinensis de ceux dautres espces de douves
hpatiques infectant principalement les animaux : Opisthorchis felineus (tenuicollis) [Sud-est de lEurope, Europe centrale],
Opisthorchis viverrini [Sud-est de lAsie, Malaisie]. La biologie et la pathologie associe toutes ces douves hpatiques sont
comparables. Une rponse du type prsence dufs dOpisthorchidae/Heterophyidae est donc la plus correcte.
Il est trs difficile de distinguer microscopiquement les ufs dOpisthorchis sinensis de ceux dautres douves dont les ufs
se retrouvent dans les selles : Heterophyes heterophyes [bassin mditerranen, Moyen-Orient et Afrique occidentale],
Metagonimus yokogawai [Extrme-Orient, partie orientale de lex-URSS et Espagne (?)] et 13 autres espces dHeterophyidae
dcrites [Sud et Sud-est Asiatique, Australie, les du Pacifique, bassin mditerranen, Sud et Est de lEurope, Afrique
Occidentale]. En raison de la courte dure de vie du stade adulte, de sa localisation et de la faible rponse immunitaire de
lhte, les douves intestinales sont peu pathognes.
La salaison ou la fumaison du poisson ne sont pas toujours suffisantes pour tuer les mtacercaires.
Les ufs apparaissent dans les selles environ 1 4 semaines aprs linfestation. La ponte quotidienne est de lordre de 1.000
4.000 ufs par ver adulte. La dure de vie du ver adulte est estime jusqu plus de 25 ans.
Les tests srologiques sont peu utiles par manque de spcificit.
Clonorchis sinensis est lancien nom dOpisthorchis sinensis.

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Paragonimus spp.
Distribution gographique :
Sudest Asiatique (Japon, Laos,
Core, Taiwan, Chine, Thalande,
Malaisie, Philippines, Indes, Npal, )
Afrique : Cameroun, Libria, Nigeria,
Congo, RDC, Afrique du Sud, )
Amrique latine et du nord.
Htes dfinitifs :

Homme,
Flids, canids,
Singes, mangoustes,
Mustlids (loutres,)

Famille :

Classe :

Troglotrematidae

Trmatodes

Nom commun :

Pathologie :

Douve du poumon,
Douve pulmonaire.

Distomatose pulmonaire (F)


Oriental lung fluke disease (En)
Distomatosis pulmonar, duela
pulmonar (Es)

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

1. Mollusque deau
douce : Oncomelania
spp, Thiaridae spp.

Consommation de crustacs infects par des


mtacercaires vivantes.

Localisation de ladulte :
2. Crustacs deau
douce : Crabes,
Poumons, (cerveau, autres organes).
crevisses, crevettes.
Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les crachats : Concentration par sdimentation aprs liqufaction du crachat.
[Srologie : Recherche des anticorps contre Paragonimus westermani.]
Morphologie des ufs :
Dimensions :

68 118 m x 39 67 m.

Forme :

Irrgulire ou ovode.

Coque :

Epaisseur ingale.

Contenu :

Jamais embryonn, amas


cellulaire de taille variable.

Couleur :

Brun jaune ou gris, fonc.

Caractristiques :

Opercule (trs peu visible).

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :
DANS LES SELLES

Hyperosinophilie (phase invasive).


Crachats sanglants (phase chronique).

ufs dAscaris spp. (non fcond).


ufs de Diphyllobothrium latum.
ufs de Schistosoma japonicum ou
mekongi.
ufs de Fasciolidae.

Remarques :
1.

2.
3.
4.
5.
6.

7.

En raison du risque de production darosols dangereux durant lexamen parasitologique, liminer la possibilit dune
tuberculose avant recherche parasitologique dans un crachat.
La recherche des ufs dans les crachats est assez difficile, rendant la srologie intressante, surtout pour de faibles
parasitmies. Les tests srologiques nont malheureusement pas de protocole standardis.
Les ufs ne se retrouvent dans les crachats que 2 3 mois aprs linfestation. Lesprance de vie du ver adulte est estime
entre 10 et 20 ans.
Il est possible douvrir, sous microscope, lopercule de luf ( uf la coque ) en appuyant dlicatement sur la lamelle,
confirmant ainsi le diagnostic.
Plusieurs parasites font un passage pulmonaire au stade larvaire (Ascaris, Ancylostomes, Strongyloides, ). Un examen de
crachats nest cependant pas indiqu pour retrouver ces parasites.
Une recherche des ufs dans les selles nest pas indique (les ufs ventuellement ingrs sont trop dilus et ressemble
fortement des ufs dAscaris non fconds). Par contre, si les ufs sont retrouvs dans les selles, un examen de crachat
est recommand (surtout pour exclure les confusions possibles).
La distinction morphologique des diffrentes espces de Paragonimus nest pas possible. [P. westermani, P. heterotremus, P.
miyazakii et P. skyrjabini (Asie, Afrique ?, Amrique du sud ?), P. africanus et uterobilateralis (Afrique), P. kellicotti (Amrique
du nord), P. mexicanus (Amrique latine), ]. Une rponse du type Paragonimus spp. serait donc plus correcte.

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HELMINTHES
(mtazoaires)
TREMATODES

CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES

CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Diphyllobothrium latum
Distribution gographique :

Classe :

Diphyllobothriidae

Cestodes

Nom commun :

Cosmopolite. Plus rpandu dans


les rgions froides et tempres.
Europe du nord, Russie, Pologne
Italie, Suisse, Sibrie, Japon,
Taiwan, Philippines.
Amrique du nord et du sud

Tnia du pcheur

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme.
Mammifres piscivores.

1. Petits crustacs :
(Cyclops spp. et
Diatomus spp.).

Famille :

Pathologie :

Bothriocphalose ou diphyllobothriose (F)


Broad fish tapeworm infection (En)
Diphyllobotriasis (Es)

Mode de contamination :
Consommation de poissons deau douce infests par
des larves plrocercodes vivantes.

2. Poissons deau
Intestin.
douce (truites,
saumons,)
Mthodes diagnostiques :

Localisation de ladulte :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
(Identification de segments gravides ventuellement prsents dans les selles).
Morphologie des ufs :
Dimensions :

58 76 m x 40 51 m.

Forme :

Ovode.

Coque :

Mince.

Contenu :

Jamais embryonn, masse


fonce.

Couleur :

Assez fonc.

Caractristiques :

Opercule bien visible, parfois


petite protubrance (mucron)
au ple oppos.

Autres signes biologiques associs :

Anmie mgaloblastique pernicieuse, [avitaminose


B12 (5 % des cas, Finlande principalement)].
Leucopnie, thrombocytopnie et hyperosinophilie
inconstantes (jusqu 30 %).
VS leve, hypoprotidmie, hypoalbuminmie,
hypergammaglobulinmie.

Confusions possibles :

ufs de Paragonimus spp. (dans les selles).


ufs dAncylostomes.
ufs dacariens.

Remarques :
1.

2.
3.
4.
5.

6.

Pas de distinction morphologique possible entre Diphyllobothrium latum, Diphyllobothrium cordatum (Europe du nord, Amrique du nord,),
Diphyllobothrium pacificum (Amrique du sud), qui infestent lhomme. Plus de 50 espces de Diphyllobothrium sont dcrites dont 13 peuvent infeste
lhomme. La rponse parasitologique correcte est donc Diphyllobothrium spp.
Comme les segments gravides du vers sont le plus souvent dcomposs dans lintestin, ils ne se retrouvent quexceptionnellement dans les selles.
Contrairement au Taeniidae, les proglottis mrs ventuellement retrouvs dans les selles sont plus larges que longs (2-4 mm x 10-12 mm).
En raison de la grande production journalire dufs (35.000 100.000 ufs par jours et par ver adulte), les techniques de concentration sont peu
utiles. Lesprance de vie dun vers adulte dans lintestin peut aller jusqu 30 ans.
Les ufs apparaissent dans les selles environ 30 45 jours aprs linfestation.
Les larves plrocercodes sont tues par la conglation du poisson -10 C pendant 24 heures. La salaison et le fumage ne sont pas toujours suffisants
pour tuer les larves.
La sparganose (ou plrocercodose) est une infestation dans laquelle lhomme est infest accidentellement par des larves procercodes ou
plrocercodes despces de Diphyllobothrium nayant que des animaux comme htes dfinitifs (ou des espces apparentes : Sparganum spp. et
Spirometra spp.). Lhomme joue alors le rle dhte paratnique (hte dans lequel le dveloppement du parasite nest pas complet) et les ufs ne sont
jamais retrouvs dans les selles. [Assez frquent en extrme orient ou traditionnellement des grenouilles frachement corches sont appliques sur les
yeux infects ou les plaies].

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Taenia saginata
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite (rare si peu de


consommation de viande de
buf [Hindous] ou contrles
vtrinaires systmatiques)

Ver solitaire
ou
Tnia inerme

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :
Les bovids :

Homme

Famille :

Classe :

Taeniidae

Cestodes
Pathologie :

Tniase (F)
Beef tapeworm infection (En)
Teniasis (Es)
Mode de contamination :

Consommation de viande de buf infeste par des


cysticerques vivants (Cysticercus bovis).

(buf, buffle, zbu)

Localisation de ladulte :
Intestin grle.

Mthodes diagnostiques :

Identification macroscopique de segments gravides limins en dehors des dfcations (ou dans
les selles). [cf. tableau comparatif avec T. solium]
Dcouverte des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Dcouverte des ufs dans un scotch test anal.
(Dtection de coproantignes en dipstick : Bonne sensibilit, pas de diffrentiation despce).
(Srologie : Recherche danticorps spcifiques).
(Recherche dADN spcifique par PCR sur extraits fcaux avec diffrentiation despce).
Morphologie des ufs :
Dimensions :

31 43 m.

Forme :

Rond ou ovode.

Coque :

Trs paisse, lisse, avec


stries radiaires (objectif 40x).

Contenu :

Larve hexacanthe : Masse


granuleuse entoure dune fine
membrane, contenant 3 paires
de crochets rfringents (pas
toujours tous visibles).

Couleur :

Gris fonc

Caractristiques :

Luf est parfois entour dun


sac transparent (membrane
priovulaire).

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie modre (de lordre de 20 %)


durant la phase de maturation.

Confusions possibles :

ufs de Taenia solium.


Bulles dair.
Grains de pollens (Trone).

Remarques :
1.
2.

3.
4.
5.
6.

Lexamen des selles nest pas toujours positif : Les segments gravides (ou proglottis) sont librs intacts (mme entre les dfcations). Ceci
est moins vrai pour Taenia solium. Les ufs ou les segments matures se retrouvent dans les selles environ 10 12 semaines aprs
linfestation (phase de maturation).
La morphologie des ufs ne permet pas de distinguer Taenia saginata de Taenia solium. Dautres cestodes du genre Echinococcus spp. (ver
solitaire du chien,) produisent aussi des ufs morphologiquement identiques. Ces ufs ne sont cependant jamais retrouvs chez lhomme.
Seule lidentification des segments gravides (ou du scolex) permet la distinction despce. La rponse parasitologique correcte pour des ufs
retrouvs dans les selles est Taenia spp.
Un ver adulte est compos de +/- 200 segments. Chaque proglottis contient environ 100.000 ufs. Un adulte peut produire jusqu 600
millions dufs par an.
Les cysticerques sont tus par une cuisson approfondie de la viande ou une conglation de plus de 24 heures -20C.
Le terme solitaire est impropre : Plusieurs vers adultes peuvent infester un homme en mme temps.
La longvit dun ver adulte est estime jusqu plus de 35 ans.

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Taenia solium
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite (rare si peu de


consommation de viande de
porc [Musulmans] ou contrles
vtrinaires systmatiques).

Ver solitaire
ou
Tnia arm

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :
Le porc.
Lhomme (cysticercose)

Homme

Chiens, chats, ovins,


primates.

Famille :

Classe :

Taeniidae

Cestodes
Pathologie :

Tniase, [cysticercose, neurocysticercose] (F)


Pork tapeworm infection, cysticercosis (En)
Teniasis, cisticercosis (Es)
Mode de contamination :

Consommation de viande de porc infeste par des


cysticerques vivants (Cysticercus cellulosae).

Ingestion dufs de Tnia solium (contamination


fcale ou anti-pristaltisme de segments gravides)
 cysticercose.
Localisation de ladulte :

Intestin grle.

Mthodes diagnostiques :
Identification macroscopique de segments gravides dans les selles (cf. tableau comparatif avec T.
saginata).
Dcouverte des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
(Dcouverte des ufs dans un scotch test anal).
(Dtection de coproantignes en dipstick : Bonne sensibilit, pas de diffrentiation despce).
(Srologie : Recherche danticorps spcifiques par Western Blot dans le srum ou le LCR, uniquement
pour la cysticercose).
(Recherche dADN spcifique par PCR sur extraits fcaux avec diffrentiation despce).
Imagerie mdicale (principalement utile pour la cysticercose)
Morphologie des ufs :
Dimensions :

31 43 m.

Forme :

Rond.

Coque :

Trs paisse, lisse, avec


stries radiaires (objectif 40 x).

Contenu :

Masse granuleuse entoure


dune fine membrane,
contenant 3 paires de crochets
rfringents (larve hexacanthe).

Couleur :

Gris fonc
Luf est parfois entour dun
sac transparent (membrane
priovulaire).
Confusions possibles :

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie modre (de lordre de 20 %)


durant la phase de maturation.

ufs de Taenia saginata.


Bulles dair.
Grains de pollens (Trone).

Remarques :
1.
2.

3.
4.
5.
6.

Lexamen direct nest pas toujours positif : Les ufs de Tnia solium sont plus rarement retrouvs libre dans les selles que ceux de Tnia
saginata (segments gravides intacts expulss par groupes de 3 6). Les ufs ou les segments matures se retrouvent dans les selles environ
5 12 semaines aprs linfestation. (phase de maturation).
La morphologie des ufs ne permet pas de distinguer Tnia saginata de Tnia solium. Dautres cestodes du genre Echinococcus spp. (ver
solitaire du chien,) produisent aussi des ufs morphologiquement identiques. Ces ufs ne sont cependant jamais retrouvs chez lhomme.
Seule lidentification des segments gravides (ou du scolex) permet la distinction despce. La rponse parasitologique correcte pour des ufs
retrouvs dans les selles est Tnia spp.
En cas de cysticercose, on retrouve dans 40 % des cas une localisation crbrale (hyperosinophilie). Une localisation oculaire (osinophilie
modre) ou une localisation musculaire ou sous-cutane plus asymptomatique sont aussi possibles. Les tests srologiques peuvent tre
ngatifs, surtout dans le cas danciennes infestations. Leur sensibilit est de lordre de 90 %, pour une spcificit proche de 97 %.
Les cysticerques sont tus par une cuisson approfondie de la viande ou une conglation de plus de 24 heures -20C.
Le terme solitaire est impropre : Plusieurs vers adultes peuvent infester un homme en mme temps.
La longvit dun ver adulte est estime jusqu plus de 25 ans.

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DIAGNOSTIC DIFFERENTIEL ENTRE TAENIA SAGINATA ET TAENIA SOLIUM


Sur base du ver adulte ou de segments (proglottis) gravides

CARACTERISTIQUES
Taille du ver adulte
Scolex

Anneaux gravides : Taille


Utrus (branches unilatrales)
Mobilit des anneaux gravides

Tnia saginata

Tnia solium

De 5 10 mtres de long

De 3 5 mtres de long

Entre 1 et 2 mm de large
4 ventouses
Pas de Rostre, pas de crochets

De lordre de 1 mm de large
4 ventouses
Rostre muni de crochets

De 12 15 mm de long
Trs ramifi :
De 15 32 ramifications unilatrales
Ramifications fines

De 10 12 mm de long
Peu ramifi :
De 7 16 ramifications unilatrales
Ramifications paisses

Mobiles :
(sortent spontanment de lanus)

Immobiles ou peu mobiles :


(expulsion avec les selles)

Bovins
Cysticercus bovis
Peu de cysticerques
Pas de crochets

Porc (et lhomme)


Cysticercus cellulosae
Beaucoup de cysticerques
Crochets

MUSCLES

MUSCLES OU SNC

N.B. :
Cysticerques dans les
muscles
(ou dans le Systme Nerveux
Central)

Remarques :
1. Les ufs ne permettent pas de faire un diagnostic despce.
2. En raison du risque de cysticercose en cas dingestion dufs (Tnia solium), manipuler les
vers adultes ou les segments de vers adultes avec grande prudence. Toujours manipuler les
segments laide dune pince. Lusage de gants doit tre systmatique.
3. Le diagnostic despce se fait sur laspect macroscopique des segments gravides (plus rarement sur le
scolex) :
Des proglottis trs mobiles donnent un diagnostic de certitude de Tnia saginata.
En cas de proglottis immobiles ou peu mobiles, il faut se baser sur les ramifications de lutrus
(aprs dcoloration lacide actique). Peu ramifi pour Tnia solium, trs ramifi pour Tnia
saginata. Pour viter les doutes en cas de 15 ou 16 ramifications unilatrales, examiner si
possible plusieurs segments.
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Vampirolepis nana
(Hymenolepis nana)
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite, principalement
pourtour mditerranen,
Russie, Inde et Amrique.

Tnia nain
Petit ver solitaire

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme

(Rongeurs [?] : Rats,


souris, )

Seul cestode infestant


lhomme sans hte
intermdiaire

Famille :

Classe :

Hymenolepididae

Cestodes

Pathologie :

Hymnolpiase (F)
Dwarf tapeworm infection, hymenolepiasis (En)
Himenolepiasis (Es)
Mode de contamination :

Ingestion des ufs.


(ingestion de vers de farine infests par des larves
cysticercodes ?).
Localisation de ladulte :

Vecteur :
Vers de farine ?

Intestin grle.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
(Ver adulte retrouv dans les selles)
Morphologie des ufs :
Dimensions :

40 60 m x 30 50 m.

Forme :

Ovode ou rond, symtrique.

Coque :

Mince et lisse.

Contenu :

Embryophore avec deux


bouchons polaires et quelques
filaments partant des bouchons.

Couleur :

Transparent, gris trs clair.

Caractristiques :

Larve hexacanthe avec


crochets bien visible

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie modre.

Confusions possibles :

ufs dHymenolepis fraterna.


ufs dHymenolepis diminuta.
Grains de pollen (Orge).

Remarques :
1. Hymenolepis nana est lancien nom de Vanpirolepis nana.
2. Les Hymenolepis sp. du rat et de la souris (Hymenolepis fraterna) sont morphologiquement identiques : Elles ont
cependant besoin dun hte intermdiaire (puces, blattes et vers de farine). Ces souches peuvent aussi infecter
lhomme. Une rponse du type prsence dufs dHymenolepididae serait donc parasitologiquement plus
correcte.
3. En raison de lautoinfestation, on retrouve souvent une intensit parasitaire importante (surtout chez les enfants).
Le nombre dufs retrouv dans les selles est souvent trs important, ne justifiant pas une technique de
concentration.
4. Les segments gravides sont dtruits au niveau intestinal, librant les ufs qui se retrouvent dans les selles.
5. Les ufs se retrouvent dans les selles environ 20 jours aprs linfestation.
6. Le ver adulte est un ver segment de 1,5 4 cm de long avec un scolex muni de 4 ventouses et de nombreux
crochets. Les vers adultes ont une dure de vie estime quelques mois.
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Hymenolepis diminuta
Distribution gographique :

Petit ver solitaire

Rongeurs
Homme (Zoonose)

Hymenolepididae

Cestodes

Pathologie :

Hymnolpiase (F).
rat tapeworm infection, hymenolepiasis (En).
Himenolepiasis (Es).

Htes intermdiaires :
Arthropodes :

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite
mais trs rare (zoonose).
Favoris par un habitat
prcaire augmentant les
contacts entre les rongeurs et
la nourriture humaine.
Htes dfinitifs :

Famille :

Puces des rats, vers de


farines, coloptres,
scarabes.

Mode de contamination :
Ingestion de nourriture contamine par des insectes
infests par des larves cysticercodes de H. diminuta.
Localisation de ladulte :
Intestin grle.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation,
technique de concentration par flottaison.
(Ver adulte retrouv dans les selles).
Morphologie des ufs :
Dimensions :

70 86 m x 60 80 m.

Forme :

La plupart du temps rond,


rarement un peu ovode.

Coque :

Assez paisse, lisse, couronne


de filaments en interne

Contenu :

Embryophore sans bouchon


polaire.

Couleur :

Brun, brun jaune.

Caractristiques :

Larve hexacanthe avec


crochets bien visible

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie modre

Confusions possibles :

ufs dHymenolepis nana.


ufs dHymenolepis fraterna.
ufs dAscaris lumbricoides (ufs non
fconds et semi-dcortiqus)
Grains de pollen (crocus ou laurier)

Remarques :
1. Les segments gravides sont dtruits au niveau intestinal, librant les ufs qui se retrouvent dans les selles.
2. Le ver adulte est un petit ver segment de 20 60 cm de long avec un scolex muni de 4 ventouses (sans
crochets). Les segments sont plus longs que larges.
3. Les ufs se retrouvent dans les selles environ 20 jours aprs linfestation. Lesprance de vie du ver est estime
entre 5 et 7 semaines.
4. Jusquen 2005, moins de 100 cas dinfestation humaine par Hymenolepis diminuta ont t publis.

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Echinococcus granulosus
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite, principalement
dans des rgions o llevage
du mouton est important.

Kyste hydatique

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Les carnivores
(sauf lhomme)

Onguls

Famille :

Classe :

Taeniidae

Cestodes
Pathologie :

Echinococcose, hydatidose (F)


Echinococcosis, hydatid disease, hydatidosis (En)
Hidatidosis , quiste hidatdico(Es)
Mode de contamination :

Ingestion des ufs (contact avec un carnivore [chien], ou


aliments souills)
Localisation des Kystes (stades larvaires):

Homme

Foie (75 % des cas), poumons (10 %),


rate (3 %), reins (2 %), muscles (5 %),
cerveau et moelle pinire (3 %), os (2 %).

Mthodes diagnostiques :
Clinique.
Imagerie mdicale.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques :
 Test de dpistage par Indirect HmAgglutination (IHA), Indirect Fluorescent Antibody Test
(IFAT), ou Enzyme ImmunoAssays (EIA).
 Test de confirmation par immunoblot dmontrant larc 5 en double diffusion
(Identification de protoscolex et de crochets libres dans un liquide de ponction.
lments retrouvs dans un kyste hydatique :

Liquide clair eau de roche contenant de trs nombreux


protoscolex [approximativement 170 m x 110 m] et
crochets libres [approximativement 20 m] formant le
sable hydatique

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie surtout en dbut dvolution

Confusions possibles :

Autres chinococcoses.

Remarques :
1.
2.
3.

4.

5.

Il faut formellement dconseiller la ponction des kystes pour la dtection des protoscolex et des crochets libres
(risque trs important dessaimage). Cette ponction expose aussi le patient un risque de choc anaphylactique.
Les ufs des Echinococcus spp. (identiques ceux de Taenia spp.) ne sont jamais retrouvs dans des selles humaines.
Une srologie ngative nexclu pas le diagnostic (sensibilit de lordre de 90 %) : Anticorps indtectables en fonction de la
localisation, de lintgrit et de la vitalit des larves. La sensibilit est meilleure pour les localisations hpatiques ou osseuses
que pour les autres localisations. Les patients avec des kystes calcifis, morts ou en dgnrescence sont souvent
srongatifs.
La srologie peut tre faussement positive en cas dinfestation par dautres helminthes, de cancer ou de dsordres
immunologiques chroniques. Une raction faussement positive est aussi retrouve dans 5 25 % des patients avec une
neurocysticercose (Taenia solium) et pour des patients atteints par Echinococcus multilocularis, Echinococcus vogeli et
Echinococcus oligarthrus.
Dautres chinococcoses avec des cycles presque identiques peuvent se retrouver plus rarement chez lhomme : E.
multilocularis (chinococcose alvolaire, hmisphre nord (Suisse, France, Allemagne, Autriche), Taenia du renard avec
comme htes intermdiaires les rongeurs [homme] 8 cas humains en Belgique (Wallonie) entre 1998 et 2005, affection
gravissime, localisation hpatique et plus rarement pulmonaire, rnale ou mninge). E. vogeli (chinococcose polykystique,
Amrique centrale et du sud, Taenia du chien sauvage avec comme htes intermdiaires des rongeurs [homme], localisations
principales hpatiques ou pulmonaires). E. oligarthrus (chinococcose extrmement rare, Amrique centrale et du sud,
Taenia des flids avec comme htes intermdiaires des rongeurs [homme], localisation variables).

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES

NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES

CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Ascaris lumbricoides
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite.

Ascaris.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme.
Porc
Autres espces
animales ?

Sans hte intermdiaire

Super Famille :
Ascaridoidea

Nmatodes
Pathologie :

Ascaridiase (F)
Giant Roundworm infection, Ascariasis (En)
Ascaridiasis (Es)
Mode de contamination :

Fco-oral : Ingestion des ufs embryonns.


Localisation de ladulte :

Et
sans vecteur

Classe :

Intestinale (intestin grle).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, (technique de concentration par sdimentation).
Identification macroscopique de vers adultes dans les selles ou les vomissements.
Radiographie (principalement pour des infestations par des vers adultes mles).
Srologie : recherche danticorps spcifiques (pour le stade larvaire ou les infestations par des vers adultes mles).
Morphologie des ufs fconds:
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :

45-84 m x 35-58 m.
Ovalaire et symtrique,
(sphrique)
Lisse, incolore, paisse, en gnral
entoure dune couche albumineuse
mamelonne, brune ou grise.
Masse centrale granuleuse unique et
ronde (zygote).
Brun jauntre, moins colors si
semi-dcortiqus.

Caractristiques :  Existence dufs semidcortiqus, sans couche externe (albumine).


Morphologie des ufs non fconds:
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :

78-105 m x 38-55 m.
Ellipsodale ou irrgulire
Lisse, incolore, paisse en gnral
entoure dune couche albumineuse
mamelonne, brune ou grise.
Granulations (gouttes) trs
rfringentes (cellules vitellines).
Brun jauntre, moins colors si semidcortiqus.

Caractristiques :  Existence dufs semidcortiqus, sans couche externe (albumine).

Autres signes biologiques associs :

Hyperleucocytose et hyperosinophilie svre (stade


larvaire) ou modre (stade adulte) [courbe de
Lavier].

Confusions possibles :
ufs de Schistosoma japonicum ou S.
mekongi.
Cellules vgtales ou spores (carie du bl,
lycopode, ascospore de truffe,)
Pollens (Safran, artichaut,).
Ancylostomidae (ufs dcortiqus).
ufs de Fasciolidae.
ufs de Paragonimus spp.
ufs dAscaris suum (ascaris du porc).
Dioctophyma spp (dans les urines ?).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Il doit sagir de luf le plus difficile identifier en raison de sa grande variabilit morphologique et de sa ressemblance avec des cellules vgtales.
Les ufs napparaissent dans les selles que 2 3 mois aprs linfestation (migration somatique et maturation sexuelle).
Les ufs ncessitent une maturation avant de devenir infestants : Dure variable en fonction de la temprature et de lhumidit (minimum 18 jours).
Le nombre dufs retrouvs dans les selles est souvent trs important (un ver femelle pond environ 200.000 ufs par jour). Les techniques de concentration sont
donc peu utiles.
Des formes larvaires dAscaris lumbricoides peuvent tre retrouves dans les crachats (technique non indique comme diagnostic).
Les Ascaris adultes, principalement les mles sont trs sensibles au stress (variation de temprature corporelle, prise de mdicaments, ) : Ils quittent le corps
par tous les orifices possibles. La dure de vie dun vers adulte dans lintestin est estime maximum 2 3 ans (20 ans ?).
Lascaris du porc (Ascaris suum) peut infester lhomme, mais il narrive gnralement pas maturit. Cette infestation se manifeste donc habituellement par une
larva migrans viscrale. Dans ce cas, les ufs ne sont jamais retrouvs dans les selles.

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Anisakis spp.
Distribution gographique :

(li la consommation de
poisson de mer crus)

Ascaris du hareng

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mammifres marins :
phoques, marsouins,

Classe :

Ascaridoidea

Nmatodes

Nom commun :

Cosmopolite

Super Famille :

1. Crustacs
2. Poissons de mer
(HOMME)
(hte paratnique)

Pathologie :

Anisakidose larvaire, Anisakiase (F).


Herring worm disease, Anisakiasis (En).
Anisaquis (Es).
Mode de contamination :

Ingestion de poisson de mer infest par des larves L3


vivantes (macroscopiquement bien visible dans le
hareng, la sardine, le maquereau,).
Localisation des larves :
Impasse parasitaire, seules les larves peuvent survivent
transitoirement dans le tube digestif de lhomme.

Mthodes diagnostiques :

Clinique.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques.
Mise en vidence de larves dans les tissus : Endoscopie, gastroscopie, biopsie sous endoscope).
Morphologie des ufs :
Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie.

Confusions possibles :

Autres larva currens (Strongyloides stercoralis).


Autres larva migrans (Ancylostoma spp.,
Toxocara spp., ).

Remarques :
1. Comme le parasite ne se dveloppe pas jusquau stade adulte chez lhomme (hte paratnique), les ufs
ne sont jamais retrouvs dans des selles humaines.
2. Le diagnostic srologique bien que peu sensible reste dintrt diagnostique.
3. Les larves peuvent survivre basse temprature (-5C), au saumurage et la fumaison jusqu 50 C. Une
conglation de 24 heures 20 C tue les larves.
4. Anisakis simplex et Anisakis marina rencontr trs rarement aux Pays-Bas depuis que lon congle suffisamment
et systmatiquement le poisson (maatjes).
5. Contracoecum, Phocanema et Pseudoterranova provoquant aussi des anisakiases sont frquents au Japon, mais
galement retrouvs rarement aux Belgique, au Chili, en Belgique, en Belgique et en Belgique.

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Super Famille :

Classe :

Ascaridoidea

Nmatodes

Toxocara canis
Distribution
gographique :

Nom commun :

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Canids

(Homme, en tant
quhte paratnique)

Pathologie :
Larva migrans viscrale ou oculaire, Toxocarose (F)
Visceral or ocular larva migrans, Toxocariasis (En).
Larva migrans visceral o ocular, Toxocariasis (Es).

Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire

Mode de contamination :
Ingestion dufs embryonns.

Et

Localisation des larves :

Sans vecteur

Larves dans le sang et les tissus. Pas de dveloppement


jusquau stade adulte.

Mthodes diagnostiques :

Clinique.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques par diffrentes techniques.
(Mise en vidence de larves fixes dans lil).
Morphologie des ufs :
UNIQUEMENT DANS LES SELLES DE CANIDES
Dimensions :

75 90 m. (65 75 pour T. cati)

Forme :

Ovode.

Coque :

Epaisse, un peu mamelonne.

Contenu :

Non embryonn, une seule cellule


granuleuse.

Couleur :

Bruntre, fonc.

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie.

Confusions possibles :

Autres larva currens (Strongyloides stercoralis).


Autres larva migrans (Ancylostoma spp., Anisakis
spp., ).

Remarques :
1. Comme le parasite ne se dveloppe pas jusquau stade adulte chez lhomme, les ufs ne sont jamais
retrouvs dans des selles humaines. La prsence dautres ufs dhelminthes dans les selles du patient,
comme des ufs dAscaris spp. ou de Trichuris spp., indique cependant une exposition fcale, augmentant la
probabilit de Toxocara spp. dans les tissus en cas de suspicion clinique.
2. Toxocara cati (ascaris du chat) et Baylisascaris procyonis (ascaris du raton laveur) peuvent aussi produire des
larva migrans viscrales ou oculaires (moins frquent).
3. La srologie nest utile quen confirmation dun diagnostic clinique. Les tests srologiques bass sur les TES
(Toxocara Excretory-Secretory antigens) seraient prfrables (meilleure spcificit). Des ractions croises avec
dautres nmatodes existent cependant. Lvaluation de la sensibilit (de lordre de 90 %) et de la spcificit de
ces tests nest pas facile en raison du manque de mthodes parasitologiques pour mettre en vidence Toxocara.

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Enterobius vermicularis
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite, plus frquent en


zone tempre.

Oxyure

Homme

Oxyuroidea

Nmatodes

Oxyurose (F).
Pinworm infection, threadworm infection,
enterobiasis (En).
Enterobiasis, Oxiuriasis humana (Es).

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Classe :

Pathologie :

Htes dfinitifs :

Super Famille :

Mode de contamination :
Ingestion des ufs (auto infestation aussi possible).

Et
sans vecteur

Localisation de ladulte :
Colon, appendice.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs par scotch test (tape test ou Test de Graham).
Observation des vers adultes sur la peau pri-anale (principalement la nuit)
(Dcouverte des ufs dans selles : Examen direct ou technique de concentration par sdimentation)
Morphologie des ufs (en scotch test) :
Dimensions :

50 60 m x 20 32 m.

Forme :

Asymtrique, ovode ou en
forme de tranche de pain.

Coque :

Lisse, transparente, double


ligne.

Contenu :

Embryonn (masse granuleuse


ou petite larve replie).

Couleur :

Transparent.

Caractristiques :

Trs transparent et sans


couleur ou rarement roseverdtre trs ple.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie modre avec de faibles


oscillations durant linfestation.

Confusions possibles :

Bulles dair (ufs).


Fibres vgtales non digres (adultes).

Remarques :
1. Le scotch test doit tre ralis le matin, avant dfcation ou toilette matinale. Trois tests raliss sur une semaine
permettent de dceler 95 % des infestations.
2. Des ufs de Taenia spp sont aussi parfois retrouvs en tape test.
3. Les ufs dEnterobius spp. sont rarement retrouvs dans les selles.
4. Les vers adultes (8 15 mm pour la femelle) doivent tre diffrencis de fibres vgtales (dbris alimentaires) ou
de petits morceaux de papier hyginique.
5. Il est assez frquent de retrouver les ufs doxyure dans les urines (principalement chez les fillettes, localisation
ectopique vaginale de loxyure femelle).
6. Ce parasite se dveloppe entirement dans la lumire de lintestin en 3 semaines. Il ny a donc pas de migration
somatique. Si la dure de vie des adultes est infrieure 55 jours, les auto-infestations expliquent un portage
prolong. Un ver femelle adulte produit environ 10.000 ufs durant sa vie (soit une production journalire de
lordre de 500 ufs).
7. Une seconde espce, Enterobius gregorii est dcrite pour lEurope, lAsie et lAfrique. Sa morphologie, son cycle,
sa prsentation clinique et son traitement sont identiques.
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Trichuris trichiura
Distribution gographique :

Nom commun :

Cosmopolite,
surtout dans les pays
Chauds et humides

Trichocphale

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Super Famille :

Classe :

Trichuroidea

Nmatodes
Pathologie :

Trichocphalose, trichuriase (F)


Whipworm infection, Trichuriasis (En)
Tricocefalosis (Es)
Mode de contamination :

Fco-oral : Ingestion dufs embryonns

Homme

Sans hte
Intermdiaire
Et
sans vecteur

Localisation de ladulte :
Caecum, (colon, appendice).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Dcouverte de vers adultes la surface des selles.
Morphologie des ufs :
Dimensions :

49 65 m x 20 29 m.

Forme :

En forme de citron.

Coque :

Epaisse, lisse sans structure


interne, bruntre.

Contenu :

Non embryonn, granuleux

Couleur :

Brun jaune ou brun orange,


fonc.

Caractristiques :

A chaque ple, bouchon


transparent, arrondi et saillant.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie de lordre de 15 %.
Anmie hypochrome ferriprive (charge parasitaire
importante).

Confusions possibles :

ufs de Trichuris vulpis ou de Trichuris suis.


ufs de Capillaria spp. (hepatica,
philippinensis, aerophila).
Pollen diris.

Remarques :
1. Des ufs de plus grande taille, ayant une forme ou une paisseur de coque anormale se retrouvent parfois dans les
selles. Cette dformation se prsente sous antihelminthiques ou lors de lingestion de Trichuris vulpis (parasite du
chien, ufs de passage [70 90 x 32 41]).
2. Trichuris suis, parasite du porc est tudi comme traitement non conventionnel pour les colites ulcratives ou la maladie
de Crohn. Dans le cadre de ces traitements, un dveloppement en adultes matures avec production dufs chez
lhomme a t dcrit.
3. La maturation des ufs ncessite de 10 jours plusieurs mois en fonction de la temprature et de lhumidit du milieu
extrieur.
4. Les ufs napparaissent dans les selles que 30 90 jours aprs linfestation (maturation du ver adulte). Certaines
tudes donnent une priode prpatente pouvant aller jusqu 130 jours.
5. Ponte quotidienne entre 3.000 et 20.000 ufs par femelle adulte. Comme la svrit des symptmes est lie la
charge parasitaire, un comptage des ufs peut-tre utile (certaines personnes seraient cependant hypersensibles).
6. Ce parasite ce dvelopperait compltement dans la lumire intestinale. Il ny a donc pas de migration somatique.
7. Le ver adulte de 3 5 cm de long une forme trs typique : La partie antrieure du corps est trs effile et ressemble
un fouet. La dure de vie de ladulte est estime entre 1 4 ans en moyenne (avec des extrmes publis allant jusqu
20 ans).
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Capillaria philippinensis
Distribution gographique :

Classe :

Trichuroidea

Nmatodes

Nom commun :

Philippine et Thalande
(endmique), rarement Asie,
Colombie et Moyen orient.
Htes dfinitifs :

Super Famille :

Pathologie :

Capillariose intestinale (F).


Intestinal capillariasis (En).
Capillariasis intestinal (Es)

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :
Ingestion de poisson infest par des larves.

Oiseaux piscivores

Homme (rare)

Poissons deau douce


Localisation de ladulte :
Intestin grle.
Mthodes diagnostiques :

Recherche ufs ou des larves dans les selles : Examen direct, technique de concentration par
sdimentation.
Dcouverte des vers adultes dans les selles.
Morphologie des ufs :

Dimensions :

50 60 m x 20 30 m

Forme :

Ovode, en forme de tonneau.

Coque :

Epaisse, structure dense,


souvent radiale.

Contenu :

Non embryonn, granuleux.

Couleur :

Brun jaune, brun gris.

Caractristiques :

Deux bouchons polaires ne


dpassant pas le bord externe
de la coque.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie.

Confusions possibles :

ufs de Trichuris trichiura.


ufs des autres Capillaria
(C. hepatica ou aerophila)

Remarques :
1. Il est impossible de distinguer microscopiquement les diffrentes espces de Capillaria : Capillaria
philippininensis, Capillaria aerophila (cosmopolite, sans hte intermdiaire, ingestion des ufs embryonns,
infestant les chiens, chats, renards et mustlids et exceptionnellement lhomme), Capillaria hepatica
(cosmopolite, sans hte intermdiaire, ingestion des ufs embryonns, infestant diffrents animaux dont les
rongeurs et exceptionnellement lhomme). Pour ces deux dernires espces, moins de 100 infestations humaines
ont t dcrites dans la littrature. La rponse parasitologique correcte pour des ufs retrouvs dans les selles
est donc Capillaria spp.
2. Les femelles pondent des ufs non embryonns dans lintestin. Certains dentres eux peuvent sembryonns et
librs des larves qui peuvent ainsi causs une auto-infestation, entranant une infestation massive.
3. Les vers adultes sont des petits nmatodes de 2,5 4,3 mm.
4. Lesprance de vie du ver adulte est estime entre 1 et 4 mois pour Capillaria hepatica et environ 1 an pour
Capillaria aerophila. Les ufs apparaissent dans les selles 2 3 semaines aprs linfestation (Capillaria hepatica)
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Trichinella spp.
Distribution gographique :
Cosmopolite
sauf Australie
Htes dfinitifs :

Mammifres (Homme).

Classe :

Trichuroidea

Nmatodes

Nom commun :
Trichines

Pathologie :

Trichinose, Trichinellose (F).


Trichinosis, Trichinellosis (En).
Triquonosis, Triquinosis (Es).

Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire

Super Famille :

Mode de contamination :
Ingestion de viande contenant des larves
(trichines) vivantes.
(Localisation des adultes :)

Et
Sans vecteur

(Intestin grle).
Localisation des larves :
Larves enkystes dans les muscles stris.

Mthodes diagnostiques :
Clinique suggestive.
Recherche des larves dans des biopsies musculaires.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques contre les antignes ES,
(Identification des adultes ou des larves dans les selles).
Morphologie des trichines :
BIOPSIE MUSCULAIRE
Dimensions :

400 500 m x 250 m.

Forme :

Ovodes, parallle aux


fibres musculaires.

Contenu :

Larves enroule

Caractristiques :

Larves typiques enkystes


dans les muscles stris.
Calcification possible.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie de lordre de 50 % (principalement


durant la phase de migration).
Elvation des enzymes musculaires (PK, LDH, Aldolase)

Confusions possibles :

Autres Trichinella spp.

Remarques :
1. Les vers adultes (1 - 4 mm x 60 75 m) ou les larves (80 120 m) peuvent exceptionnellement se retrouver
dans les selles. Les vers adultes survivent peu de temps dans lintestin (maximum 4 mois). Durant leur vie, les
vers adultes femelles produisent entre 1.000 et 2.000 larves qui vont senkyster dans les muscles stris. Les
larves intracellulaires dtournent le fonctionnement cellulaire leur profit (Nurse cell).
2. Les trichines sont tues par une conglation de la viande de plus de 10 jours -18C, par une cuisson prolonge
(10 minutes 80 C) ou par une saumure importante (6 semaines dans 19 % de NaCl).
3. Trichinella spiralis (Cosmopolite, mammifres et omnivores) est le plus souvent incrimine dans les infestations
humaines. [En 2004, un sanglier tu Mettet (Belgique) tait infest]. Dautres espces de Trichinella sont
parfois retrouves chez lhomme : Trichinella pseudospiralis (Cosmopolite, infectant les mammifres et les
oiseaux), Trichinella nativa (Ours arctiques), Trichinella nelsoni (Prdateurs africains), Trichinella britovi
(Carnivores dEurope et de louest asiatique), ...
4. Pour les tests srologiques, lantigne ES TSL-1 serait prfr. Il est en effet conserv au sein des diffrentes
espces de Trichinella. La srologie ne se positive habituellement que 3 5 semaines aprs linfestation.
5. La biopsie musculaire est examine entre deux lames faible grossissement. Il est possible de faire un
enrichissement par digestion de la biopsie (digestion par pepsine 2 % en HCl 0,5 %, pendant 2 heures 37 C,
puis sdimentation sur gaze pour liminer les gros dbris).
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Ancylostoma duodenale
Necator americanus
Distribution gographique :

Homme

Ver du mineur
Htes intermdiaires :
Sans hte Intermdiaire

Pour A. duodenale :
Singes, porcs, flids
et canids.

Classe :

Ancylostomatoidea

Nmatodes

Nom commun :

Ancylostoma duodenale :
Europe, Afrique du nord, Asie.
Necator americanus :
Amriques, Afrique, Chine,
Indonsie, Australie.
Htes dfinitifs :

Super Famille :

Et

Pathologie :

Ankylostomiase (F).
Ancylostomiasis, Hookworm infection (En).
Uncinariasis, anemia de los mineros (Es).

Mode de contamination :
Transcutane par contact avec de la boue contamine par
des larves infestantes. (+ voie orale pour A. duodenale).
[transmission verticale possible de la mre son enfant
pour A. duodenale].
Localisation de ladulte :

Sans vecteur

Jjunum, duodnum (caecum).

Mthodes diagnostiques :
Recherche des ufs dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
(Identification de larves strongyloides ou rhabditodes dans les selles.)
Morphologie des ufs :
FORME FREQUENTE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)
Dimensions :
60 80 m x 35 40 m.
Forme :
Ovode, symtrique
Coque :
Mince, simple
Contenu :
de 4 (Ancylostoma sp.) 8
(Necator sp.) blastomres.
Couleur :
Incolore.
Caractristiques :
En gnral contient des
blastomres, parfois une
morula ou un embryon
Morphologie des larves rhabditodes :
Morphologie des larves Strongyloides (filariformes ) :
FORME RARE dans les selles
FORME TRES RARE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)
(cf. tableau comparatif avec S. stercoralis)

Dimensions :

200 300 m. x 14 17 m.

Cavit buccale longue (aussi


longue que la largeur du corps
de la larve.
sophage avec un bulbe.
Queue pointue.
Autres signes biologiques associs :

Caractristiques :

Hyperosinophilie de lordre de 30 %.
Anmie hypochrome microcytaire, diminution du
fer srique (atteinte chronique).

500 700 m. x 20 24 m.

Dimensions :

Cavit buccale longue (aussi


longue que la largeur du corps
de la larve.
sophage sans bulbe.
Queue pointue.
Confusions possibles :

Caractristiques :

Strongyloides stercoralis (ufs et larves).


Trichostrongylus spp. (ufs).
Acariens (ufs).
Enterobius vermicularis. (ufs).
Ascaris lumbricoides semi dcortiqu (ufs).
Heterodera marioni (ufs) [nmatodes des plantes]
Poils vgtaux (larves).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Il est impossible de distinguer microscopiquement A. duodenale, A. ceylanicum N. americanus. Les ufs seront rapports comme ufs dAncylostomids.
La distribution gographique nest pas un critre de distinction des espces : En effet, la rpartition des deux espces se chevauche suite des importations. Les
tempratures optimales de dveloppement sont cependant un peu diffrentes (21 27 C pour Ancylostoma spp., 25 35 C pour Necator sp.).
Oesophagostomum bifurcum, parasite zoonotique retrouv au nord du Togo et au Ghana, responsable de la multinodular disease , produit aussi des ufs indistinguables
microscopiquement des ancylostomids.
Les stades larvaires ne sont retrouvs que dans des chantillons de selles qui sont examins longtemps aprs mission (plus de 12 heures).
La quantit de sang absorbe ou gaspille quotidiennement par A. duodenale est estime 0.2 ml par ver adulte (0.02 ml pour N. americanus).
Ponte journalire de 5.000 22.000 ufs par jours et par femelle adulte (3.000 6.000 pour N. americanus.).
Les ufs napparaissent dans les selles que 15 40 jours aprs linfestation (migration somatique du parasite et maturation sexuelle). Des formes larvaires peuvent tre
retrouves dans les crachats durant la phase pulmonaire (technique non indique pour le diagnostic).
La dure de vie de ladulte est estime entre 4 20 ans pour N. americanus et entre 1 et 9 ans pour A. duodenale.
Dautres espces dAncylostomes infectant normalement les animaux peuvent aussi parasiter lhomme : A. ceylanicum [hamster] qui est morphologiquement et
pathologiquement identique A. duodenale, et dautres espces du type A. braziliense qui ne peuvent se dvelopper compltement et provoquent des larva migrans cutane.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Strongyloides stercoralis
Distribution gographique :
Pays tropicaux ou subtropicaux
Sporadique en zone froide ou
tempre (mines, tunnels, )
Htes dfinitifs :

Homme
Chimpanz, chien,
chats.

Classe :

Rhabdiasoidea

Nmatodes

Nom commun :
Anguillule

Pathologie :

Anguillulose (F)
Threadworm infection, strongyloidiasis (En)
Estrongiloidiasis (Es)

Htes intermdiaires :
Sans htes intermdiaire
Et
sans vecteur

Super Famille :

Mode de contamination :
Transcutane par contact avec de la boue contamine
par des larves strongyloides infestantes.
Auto-infestation trans-intestinale ou trans-pri-anale.
Localisation de ladulte :
Duodnum.

Mthodes diagnostiques :
Recherche des larves dans les selles : Examen frais, technique de concentration par sdimentation,
technique de concentration spcifique de Baermann, culture en agar.
(Recherche des larves dans un liquide dintubation duodnale ou dans un Enterotest ).
Identification des ufs prsents dans les selles.
Srologie : Recherche danticorps spcifiques (antignes provenant de larves filariformes).
Morphologie des larves rhabditodes :
FORME TRES FREQUENTE dans les selles
(cf. tableau comparatif avec A. duodenale)
200 - 300 m. x 16 20 m.

Dimensions :

Morphologie des ufs :

Cavit buccale courte ( - de


la largeur du corps de la larve).
sophage avec un bulbe.
Queue pointue.
Morphologie des larves Strongyloides (filariformes):

FORME TRES RARE dans les selles


(cf. tableau comparatif avec A. duodenale)

FORME RARE dans les selles


(cf. tableau comparatif avec A. duodenale)

Caractristiques :

50 76 m x 35 47 m.
Ovode, symtrique
Mince, simple, lisse.
Embryonn.
Incolore.
En gnral contient un embryon,
rarement une morula.
Autres signes biologiques associs :

Dimensions :
Forme :
Coque :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :

Hyperosinophilie oscillante de 5 30 %.
Prsence frquente de cristaux de Charcot-Leyden
dans les selles.

Dimensions :

450 - 550 m. x 20 24 m.

Caractristiques :

Cavit buccale courte ( - de


la largeur du corps de la larve).
sophage sans bulbe.
Queue bifide.

Confusions possibles :

Ancylostoma spp. (ufs)


Trichostrongylus spp. (ufs).
Acariens (ufs).
Enterobius vermicularis (ufs).
Ascaris lumbricoides semi dcortiqu (ufs).
Fibres et poils vgtaux (larves).

Remarques :
1.
2.

3.
4.
5.
6.
7.
8.

Les ufs ne se retrouvent habituellement quen cas de diarrhe profuse.


Dans des selles fraches, les larves observes sont gnralement rhabditodes, aprs plus de 12 heures, ces larves peuvent mues en strongylodes. La
prsence de larves strongylodes (aussi appeles larves filariformes) dans des selles fraches peut tre lindication dune hyper infestation gnralise (autoinfestation chez des personnes immuno dprimes).
Les larves apparaissent dans les selles 2 3 semaines aprs linfestation. Si la dure de vie des adultes assez est courte, les auto-infestations expliquent un
portage prolong (> 25 ans).
Des formes larvaires peuvent tre retrouves dans les crachats (technique non indique pour le diagnostic).
En cas dauto-infestation trans-pri-anale, le passage sous la peau des larves danguillule provoque une forme particulire de larva migrans cutane : la larva
currens qui se caractrise par une reptation de quelques centimtres par heures (rgion pri-anale puis lombes et abdomen).
Dautres espces de Strongyloides infestant les Chimpanzs et les babouins [S. fuelleborni] peuvent aussi infester lhomme, mais avec une pathologie plus limite.
On retrouve alors plutt les ufs au stade de blastomres. Le mode de contamination chez lanimal est aussi trans-mammaire (aussi pour lhomme ?).
Dautres espces de Strongyloides infestant les animaux peuvent seulement voluer en larva migrans cutane chez lhomme.
La srologie offre une sensibilit de lordre de 90%. En cas de traitement efficace, on observe une diminution importante du titre en 9 12 mois.

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TABLEAU COMPARATIF DES STADES DE DVELOPPEMENT DES ANCYLOSTOMIDAE ET DE


STRONGYLOIDES STERCORALIS RETROUVS DANS LES SELLES

Stades

ufs

Strongyloides stercoralis

Ancylostoma duodenale
Necator americanus

Forme TRES RARE dans les selles

Forme FREQUENTE dans les selles

< 1 heure

Larves
rhabditodes

12 heures

Gnralement entre 50 - 55 m
(minimum 50 m, maximum 76 m)
Gnralement embryonn

Gnralement entre 60 - 65 m
(minimum 60 m, maximum 80 m)
Gnralement blastomres ou morula

Forme FREQUENTE dans les selles

Forme RARE dans les selles

10 jours

qq heures

Gnralement 225 m de long sur 18 m


(minimum 200 m, maximum 300 m)
CAVITE BUCCALE COURTE
Bulbe
Queue peu pointue

Gnralement 250 m de long sur 16 m


(minimum 200 m, maximum 300 m)
CAVITE BUCCALE PROFONDE
Bulbe
Queue trs pointue

Forme RARE dans les selles

Forme TRES RARE dans les selles

Gnralement entre 500 m sur 22 m


(minimum 500 m, maximum 550 m)
CAVITE BUCCALE COURTE
Sans bulbe
Queue bifide

Gnralement 700 m de long sur 22 m


(minimum 500 m, maximum 700 m)
CAVITE BUCCALE PROFONDE
Sans bulbe
Queue pointue

Larves
strongylodes
Ou
Larves
filariformes

80 m

60 m

50 m
Strongyloides stercoralis

Ancylostoma spp.

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> 100 m

TABLEAU COMPARATIF DE LA TAILLE DES UFS DE STRONGYLOIDES STERCORALIS,


DANCYLOSTOMIDAE, DE TRICHOSTRONGYLUS spp. ET DACARIENS :

Trichostrongylus spp.

Acariens
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Trichostrongylus spp.
Distribution gographique :

Trichostrongyloidea

Nmatodes

Pathologie :

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Ovins, caprins, bovins


Camlids, Cheval, porc

Sans hte intermdiaire

Homme (Zoonose)

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite

Super Famille :

Trichostrongylose (F)
Trichostrongyliasis (En)
Trichostrongiliasis (Es)
Mode de contamination :

Ingestion de larves Strongyloides infestantes.


Localisation de ladulte :

Et
Sans vecteur

Lumire Intestinale.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des larves dans les selles : Examen frais, technique de concentration par sdimentation.
Morphologie des ufs :
(cf. tableau comparatif avec
A. duodenale et S. stercoralis)

Dimensions :

79 100 m x 40 50 m.

Forme :

Ovode, ples ingaux, un ple


plus arrondi que lautre.

Coque :

Mince, lisse.

Contenu :

Nombreux blastomres ou
une morula, gristre.

Couleur :

Incolore.

Caractristiques :

Une des parois latrales est


souvent aplatie.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie.
Anmie hypochrome microcytaire, diminution du fer
srique (atteinte chronique).

Confusions possibles :

Ancylostoma spp. (ufs).


Strongyloides stercoralis (ufs).
Enterobius vermicularis (ufs).
Ascaris lumbricoides semi dcortiqu (ufs).
Acariens (ufs).

Remarques :
1.
2.

Aprs linfestation orale, il ny a pas de migration somatique. Les vers adultes stablissent et se dveloppent dans lintestin.
Les espces de cette super famille infestant lhomme sont toutes zoonotiques. Certaines dentre-elles ninfestent quoccasionnellement
lhomme, dautres peuvent tre responsables dinfestations de masse. Il sagit dun parasite peut pathogne pour lhomme.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Wuchereria bancrofti
Distribution gographique :

Nom commun :

Rgions tropicales et
subtropicales (sauf dsert).
Turquie (petit foyer rsiduel ?).

Filariose de Bancroft.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs : Culicids :

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves mtacycliques infestantes
dposes lors de la piqre par un vecteur infect.

Homme.

Culex spp.,
Aedes spp.,
Mansonia spp.,
Anopheles spp..

Pathologie :

Wuchereriase (F)
Bancroftian filariasis, lymphatic filariasis (En)
Wuchereriasis, filariasis linftica (Es)

Localisation de ladulte :
Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :
Sang.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des microfilaires dans le sang

- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).

Recherche dantignes filariens dans le sang (dipstick, sensibilit proche de celle du Knott).
Recherche des anticorps sriques [principalement IgG4].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Dtection des vers adultes et des dilatations lymphatiques anormales par imagerie mdicale.

Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :

Dimensions :

240 300 m.

Diamtre :

7.5 10 m.

Gaine :

Oui, mais trs rarement


colore en rose au Giemsa.

Queue :

Effile, pointue, sans noyaux,


souvent replie.

Espace cphalique :

Court (Aussi long que large).

Caractristiques :

Noyaux bien individualiss,


petits, sauf premiers et
derniers noyaux trs ovodes,
queue pointue et vide.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Ces microfilaires sont priodicit nocturne ou parfois sub-priodiques. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et
4 heures du matin (pour les personnes ayant une activit diurne).
Les microfilaires napparaissent dans le sang que 8 12 mois aprs linfestation maturation (jusquau stade adulte). Les vers adultes peuvent
survivre plus de 25 ans chez lhomme et les microfilaires plus de 70 jours.
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche
les jambes, elle affectera le dessus et le dessous des genoux.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines (chylurie).
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Brugia malayi
Distribution gographique :

Nom commun :

Asie (sud et est)


Inde

Filariose malaise.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs : Culicids

Pntration transcutane active (gnralement via


la piqre) des larves infestantes dposes lors de la
piqre par un vecteur infect.

Homme.

Pathologie :

Filariose Brugia (F)


Malayan filariasis (En)
Filariasis de Malaia (Es)

Localisation de ladulte :

Certains singes.
Chats ?

Mansonia spp.
Anopheles, spp.

Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :

Sang.
Mthodes diagnostiques :

Recherche des microfilaires dans le sang

- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).

Recherche dantignes filariens dans le sang.


Recherche des anticorps sriques [principalement IgG4].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Dtection des vers adultes et des dilatations lymphatiques anormales par imagerie mdicale.

Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :


Dimensions :

175 230 m.

Diamtre :

5 6 m.

Gaine :

Oui, souvent (sauf subpriodiques) colore en rose


au Giemsa (fines ponctuations).

Queue :

Effile, souvent replie, avant


dernier et dernier noyaux trs
espacs.

Espace cphalique :

Long : 2 x plus long que


large.

Souvent fort replie dans la


prparation (sauf Knott).
Confusions possibles :

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.)

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Ces microfilaires sont priodicit nocturne. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et 4 heures du matin (pour les
personnes ayant une activit diurne). Sauf dans certaines parties de lIndonsie, de la Malaisie, des Philippines et de la Thalande (subpriodicit
nocturne).
La gaine se perd dans 50 % des microfilaires du type sub-priodique. Elle est gnralement visible pour les microfilaires du type priodique. La gaine
empche parfois la coloration correcte des noyaux.
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche les jambes
cela affectera le dessous des genoux.
Le dveloppement jusquau stade adulte ncessite entre 67 et 98 jours. Les vers adultes ont une dure de vie estime plus de 15 ans.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E. granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Brugia timori
Distribution gographique :

Nom commun :

Archipel indonsien : De
Timor Bali et aux petites les
de la Sonde.

Filariose

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs : Culicids

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves infestantes dposes lors de la
piqre par un vecteur infect.

Homme.

Pathologie :
Filariose du Timor (F)
Timorean filariasis (En)
Filariasis de Timor (Es)

Localisation de ladulte :
Anopheles, spp.

Organes lymphatiques.
Localisation des microfilaires :
Sang.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des microfilaires dans le sang

- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).

Recherche dantignes filariens dans le sang (dipstick disponibles).


Recherche des anticorps sriques [principalement IgG4].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Dtection des vers adultes et des dilatations lymphatiques anormales par imagerie mdicale.

Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :


Dimensions :

265 325 m.

Diamtre :

4.4 6.8 m.

Gaine :

Oui, (non colore au Giemsa).

Queue :

Effile, souvent replie, avant


dernier et dernier noyaux trs
espacs.

Espace cphalique :

Trs long : (2) 3 x plus long


que large.

Caractristiques :

Souvent fort replie dans la


prparation (sauf Knott). Sur
1/3 du corps, noyaux peu
colors donnant une impression
de vide .

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.)

Remarques :
1.
2.
3.

4.

Ces microfilaires sont priodicit nocturne stricte. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 23 heures et 4 heures du matin (pour les personnes
ayant une activit diurne).
En cas dlphantiasis (symptme tardif), il est presque impossible de retrouver des microfilaires dans le sang. Si cette lphantiasis touche les jambes affectera le
dessous des genoux.
Il est aussi possible de retrouver des microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E. granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Loa loa
Distribution gographique :

Nom commun :

Pathologie :
Loase (F).
Loiasis, eye worm disease (En).
Loasis (Es).

Afrique centrale,
Afrique de louest.
(zone forestire)

Filariose

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Homme.

Vecteurs : Taons

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves infestantes dposes lors de la
piqre par un vecteur infect.

Primates.

Chrysops spp.

Localisation de ladulte :
Tissus sous-cutans et conjonctives.
Localisation des microfilaires :
Sang.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des microfilaires dans le sang

- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification de lespce).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification de lespce).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).

Visualisation du ver adulte dans lil (et identification aprs extraction). [Jusqu 7 cm de long].
Recherche des anticorps sriques.
Recherche dADN spcifique PCR.
Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :
Dimensions :

230 250 m.

Diamtre :

5 7 m.

Gaine :

Oui, mais non colore au


Giemsa

Queue :

Effile et arrondie, avec


noyaux jusqu lextrmit.

Espace cphalique :

Court (aussi long que large).

Caractristiques :

Prsence de 2 hernies parfois


rostres, presque toujours
visibles, noyaux ovodes
jusqu lextrmit.

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.)

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Ces microfilaires sont priodicit diurne. Les prlvements sanguins doivent tre effectus entre 11 heures et 16 heures.
Le dveloppement dans lhomme jusquau stade adulte ncessite de 6 12 mois. La longvit des vers adultes est estime entre 4 et 7 ans
(jusqu 25 ans pour certains auteurs).
La microfilarmie est alatoire. La recherche de microfilaires est assez souvent ngative (principalement durant les premires annes
dinfestation).
Il est aussi possible de retrouver exceptionnellement ces microfilaires dans les urines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Onchocerca volvulus
Distribution gographique :
Afrique centrale et de louest,
Ymen.
Amrique centrale, nord-est du
Brsil, nord-est du Venezuela.
Htes dfinitifs :

Homme.

Nom commun :
Ver des aveugles

Pathologie :

Onchocercose, ccit des rivires (F)


River Blindness, onchocerciasis (En)
Oncocercosis (Es)

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs :

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves infestantes dposes lors de la
piqre par un vecteur infect.

Simulium spp.

Localisation de ladulte :
Derme, tissus sous-cutans. Soit libres soit dans des
nodules.
Localisation des microfilaires :
Peau.

Mthodes diagnostiques :

Recherche de microfilaires dans une biopsie cutane exsangue (Skin snip) frais ou aprs coloration
au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi].
Recherche de microfilaires dans une scarification dermique profonde aprs coloration au Giemsa.
Test de Mazzotti (essai pathognomique, technique contre indique, risque de ractions allergiques).
Visualisation des microfilaires dans lil (lampe fentes)
Recherche des filaires adultes dans les nodules (biopsie ou ponction). La ponction est cependant
contre indique en raison dun risque de raction allergique.
Recherche des anticorps sriques, principalement IgE.
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie de la microfilaire (Giemsa) :
Dimensions :

280 320 m.

Diamtre :

5 9 m.

Gaine :

Non

Queue :

Effile, pointue, sans noyaux,


souvent recourbe.

Espace cphalique :

Long (plus long que large


[2/1]).

Noyaux ovodes peu visibles


individuellement ou rarement
bien visibles, premiers et
derniers noyaux presque
toujours visibles et ovodes,
queue pointue et vide.
Confusions possibles :

Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Microfilaire apriodique.
Il est aussi possible de retrouver O. volvulus dans les urines et dans le sang (surtout en cas dutilisation de Diethylcarbamazine Citrate (DEC),
non en cas dutilisation divermectine) ou dans les liquides dhydrocle.
Le dveloppement jusquau stade adulte ncessite plus de 6 mois. La longvit des vers adultes est estime plus de 15 ans. Les
microfilaires peuvent survivre jusqu 2 ans dans la peau
Les scarifications profondes sont toujours contamines par du sang. Il est donc aussi possible dy retrouver des microfilaires sanguines.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Mansonella streptocerca
Distribution gographique :

Nom commun :

Pathologie :

Afrique de louest,
Afrique centrale
(fort).

Filariose

NON (PEU) PATHOGENE.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs : Maringouins

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves infestantes dposes lors de la
piqre par un vecteur infect.

Homme.

Localisation de ladulte :
Certains singes.

Culicoides spp.

Derme, tissus sous-cutans.


Localisation des microfilaires :
Peau.

Mthodes diagnostiques :

Identification de microfilaires retrouves dans une biopsie cutane exsangue (Skin snip) frais ou aprs
coloration au Giemsa.
Identification de microfilaires retrouves dans une scarification dermique profonde aprs coloration au
Giemsa.
Morphologie de la microfilaire (Giemsa) :
Dimensions :

180 240 m.

Diamtre :

5 6 m.

Gaine :

Non.

Queue :

Arrondie, noyaux jusqu


lextrmit.

Espace cphalique :

Trs court (moins long que


large).

Caractristiques :

Minimum 8 noyaux en file


indienne lextrmit
caudale. La queue est
presque toujours recourbe
en crosse dvque .

Autres signes biologiques associs :


NON (PEU) PATHOGENE

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Microfilaire non priodique.


Les deux microfilaires dermiques (M. streptocerca et O. volvulus) ne se situent pas toujours dans la mme zone du corps.
Microfilaire non recherche [puisque non (peu) pathogne, mais diffrencier des microfilaires pathognes].
Souvent rencontre en prsence dautres microfilaires.
Dipetalonema est lancien nom pour Mansonella.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Mansonella ozzardi
Distribution gographique :

Nom commun :

Pathologie :

Amrique centrale, Amrique


du sud, les du pacifique,
Carabes.

Filariose

NON (PEU) PATHOGENE

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteur :

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves mtacycliques infestantes
dposes lors de la piqre par un vecteur infect.

Homme
Certains singes

1. Maringouins
(Culicoides spp.)

Localisation de ladulte :
Cavit msentrique, tissus sous pritonal.

2. Simulium spp.

Localisation des microfilaires :


Sang.

Mthodes diagnostiques :

Identification des microfilaires retrouves dans le sang :


- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
Morphologie de la microfilaire (GE, Giemsa) :
Dimensions :

160 205 m.

Diamtre :

3 5 m.

Gaine :

Non.

Queue :

Effile, pointue, sans


noyaux (parfois peu ou pas
bien visible).

Espace cphalique :

Trs court : Moins long


que large.

Caractristiques :

Queue vide, noyaux en


mosaques.

Autres signes biologiques associs :


NON (PEU) PATHOGENE

Hyperosinophilie constante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.).

Remarques :
1.
2.
3.
4.

Microfilaire non priodique.


Microfilaire non recherche [puisque non (peu) pathogne, mais diffrencier des microfilaires pathognes].
Dipetalonema est lancien nom pour Mansonella.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres
nmatodes et E. granulosus.

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Super Famille :

Classe :

Filarioidea

Nmatodes

Mansonella perstans
Distribution gographique :

Nom commun :

Pathologie :

Afrique tropicale et du nord,


Amrique centrale
Amrique du sud

Filariose

NON (PEU) PATHOGENE.

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteurs : Maringouins

Pntration transcutane active (gnralement via la


piqre) des larves mtacycliques infestantes dposes
lors de la piqre par un vecteur infect.

Culicoides spp.

Localisation de ladulte :

Homme

Certains singes

Cavit abdominale, cavit pleurale, (pricarde).


Localisation des microfilaires :
Sang.
Mthodes diagnostiques :

Identification des microfilaires retrouves dans le sang :


- frais dans une goutte de sang (peu sensible, pas didentification).
- en goutte paisse colore au Giemsa [hmatoxyline ou Carazzi] (identification de lespce).
- en Woo frais (pas didentification).
- en Knott color (technique de concentration, tirement des microfilaires).
- aprs filtration sur membrane et coloration (trs sensible. Usage plus pidmiologique).
Morphologie de la microfilaire (Giemsa) :
Dimensions :

150 200 m.

Diamtre :

3 5 m.

Gaine :

Non.

Queue :

Arrondie, noyaux jusqu


lextrmit.

Espace cphalique :

Trs court (moins long que


large).

Caractristiques :

Noyaux angulaires, maximum 4


noyaux en file indienne
lextrmit caudale. Dernier
noyau plus gros ou plus fonc.

Autres signes biologiques associs :


NON (PEU) PATHOGENE

Hyperosinophilie persistante durant linfestation.

Confusions possibles :

Autres microfilaires sanguines ou dermiques.


Fibres vgtales (coton, ).
Larves dhelminthes durant leur migration
somatique.
Champignons (Helicosporium).
Zoonose (Dirofilaria spp, Microfilaria spp.).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Microfilaire non priodique.


En goutte paisse sur du sang prlev sans anticoagulant, ces microfilaires sont fortement enroules. Elles sont souvent tires en prsence
dun anticoagulant.
Microfilaire non recherche [puisque non (peu) pathogne, mais diffrencier des microfilaires pathognes].
Souvent rencontre en prsence dautres microfilaires.
Le dveloppement jusquau stade adulte ncessite quelques mois.
Dipetalonema est lancien nom pour Mansonella.
Les tests srologiques ne permettent pas de faire une distinction despce. Il existe des ractions croises avec dautres nmatodes et E.
granulosus.

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TABLEAU COMPARATIF DES MICROFILAIRES


Espces
Caractristiques
Distributions
gographiques

Vecteurs
Pathogncit
Localisation de
Ladulte
Localisation de la
microfilaire
Diagnostic
Priodicit

Wuchereria
bancrofti

Brugia
malayi

Brugia
timori

Loa
loa

Mansonella
ozzardi

Mansonella
perstans

Mansonella
streptocerca

Onchocerca
volvulus

Rgions tropicales
et subtropicales
(sauf dsert),
Turquie (petit foyer
rsiduel ?)

Asie du sud-est,
Inde

Archipel indonsien
De Timor Bali
et aux
petites les de la
sonde

Afrique centrale
Afrique de l'ouest
(zone forestire)

Amrique centrale
Amrique du sud
Pacifique (les)
Carabes

Afrique
Amrique centrale
Amrique du sud

Afrique de l'ouest
Afrique centrale
(forts)

Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)

Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)

Moustiques
(Culicids)
Signes
lymphatiques
(dmes,
Elphantiasis)

Taons
(Chrysops spp.)

Moucherons
(Mouches noires)

Moucherons
(Culicoides spp.)

Moucherons
(Culicoides spp.)

Afrique centrale
Afrique de l'ouest
Ymen
Amrique centrale
N-E Brsil
N-E Vnzula
Mouches noires
(Simulium spp.)

Dermite
Ccit

Lymphatique

Lymphatique

Lymphatique

Tissus sous
cutans

Msentre

Msentre

Derme

Derme

Sang

Sang

Sang

Sang

Sang

Sang

Derme

Derme

Examen du sang

Examen du sang

Examen du sang

Examen du sang

Peau

Peau

Nocturne

Diurne

Apriodique

Apriodique

Apriodique

Apriodique

Examen du sang
1

Gaine
Diamtre
Longueur
Frottis et GE
Formol
Biopsie
Queue

Espace cphalique

Caractristiques

Nocturne

Examen du sang
Nocturne

Prurit
dme fugace
Cardiaque

Oui

Oui

Oui

Oui

Non

Non

Non

Non

7,5 - 10 m

5 6 m

4,4 6,8 m

5 7 m

3 5 m

3 5 m

5 6 m

5 9 m

260 [240 - 300]


300 [275 - 320]
Effile
Sans noyaux

220 [175 230]


270 [240 300]
Effile
Avant dernier et
dernier noyaux trs
espacs

290 [265 325]


360 [330 385]
Effile
Avant dernier et
dernier noyaux trs
espacs

240 [230 250]


280 [270 300]
Effile, lgrement
arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit

180 [160 205]


225 [200 255]
Pointue
Sans noyaux

195 [150 200]


200 [180 225]
Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit

210 [180 240]


Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit
crosse
dvque

310 [280 320]


Effile
Sans noyaux
Recourbe

Court : 1/1
Aussi long que
large
Noyaux bien
individualiss se
terminant avant
lextrmit
Gaine rarement
colore en rose au
Giemsa

Long : 2/1
2 x plus long que
large
2 noyaux
lextrmit caudale
Gaine souvent
colore en rose au
Giemsa (sauf subpriodiques)

Trs long : 3/1


(2) 3 x plus long
que large
2 noyaux
lextrmit caudale
Gaine non colore
au Giemsa

Court : 1/1
Aussi long que
large
Hernies
Range simple de
noyaux jusqu
lextrmit
Gaine non colore
au Giemsa

Trs court

Trs court

Trs court

Queue vide

4 noyaux en file
indienne
lextrmit
Noyaux angulaires.
Dernier noyau plus
gros ou plus fonc

8 noyaux en file
indienne
lextrmit

Long
Plus long que large
Queue pointue et
vide

Si les microfilaires sont retrouves uniquement durant la nuit, il sagit dune microfilaire priodicit nocturne [maximum entre 23 heures et 4 heures], Si les microfilaires ne circulent dans le sang que durant la journe, il sagit de
microfilaires priodicit diurne [maximum entre 11 heures et 16 heures]. Les microfilaires subpriodiques sont retrouves tant le jour que la nuit, mais avec une augmentation significative soit le jour (subpriodicit diurne) soit la
nuit (subpriodicit nocturne).
2
Subpriodicit diurne en Nouvelle Caldonie et en Polynsie, subpriodicit nocturne en Thalande.
3
Subpriodicit nocturne dans certaines parties de lIndonsie, de la Malaisie, des Philippines et de la Thalande.
1

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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54 / 138

Entamoeba histolytica
Distribution gographique :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :

Cosmopolite

Htes dfinitifs :

Famille :

Amibiase (F).
Amebiasis (En).
Amibiasis (Es).

Htes intermdiaires :

Homme

Sans hte intermdiaire

Primates

et

Autres animaux :
(Chiens, chats,).

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Contacts sexuels : Kystes et trophozotes

Localisation des trophozotes et des kystes :


Forme magna :

Muqueuse et sous-muqueuse intestinale, (foie,


poumon, systme nerveux central, etc.).

Forme minuta :

Lumire intestinale (Colon).

sans vecteur

Mthodes diagnostiques :
Recherche des formes vgtatives hmatophages dans les selles, (dans des pus dabcs, dans des biopsies rectales ou dans
les crachats) : Examen direct.
Recherche des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration par sdimentation.
Recherche de coproantignes en Elisa (galactose adhesins : N-acetyl-D-galactosamine-binding lectin).
Recherche dADN spcifique par PCR (diffrents prlvements)
Srologie : Recherche danticorps sriques. (IFAT, ELISA, IHA, agglutination directe).
Diffrentiation entre E. histolytica de E. dispar sur diffrents prlvements: PCR, ELISA (galactose adhesins).
Morphologie des trophozotes :

10 60 m. > 20 m pour les


formes invasives.
Mouvements :
Pseudopodes fins et arrondis,
dplacement orient et vif.
Noyau :
Peu visible, caryosome central,
grains de chromatine priphrique
rguliers.
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
Globules rouges ingrs pour
les formes hmatophages.
Morphologie des kystes :
Dimensions :

Forme magna
20-60 m

Forme minuta
10-60 m

10 20 m.
Sphrique ou ovode.
Mince.
Maximum 4 noyaux, le plus souvent
1 2, caryosome souvent central.
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
Kyste jeune 1 noyau, parfois
corps chromatode extrmits
arrondies et une masse diffuse
de glycogne.
Confusions possibles :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
Noyaux :

Autres signes biologiques associs :

Amibiase extra intestinale : Hyperleucocytose


neutrophiles, VS augmente.
Diarrhe sanglante sans fivre.

Entamoeba dispar (kystes et formes vgtatives).


Autres kystes de protozoaires.
Autres formes vgtatives damibes
Macrophages mobiles (formes vgtative).
Leucocytes (kystes).

Remarques :
1.
2.
3.

4.
5.
6.
7.
8.

9.

La distinction morphologique sur base des kystes et des trophozotes entre une forme jamais pathogne (E. dispar) et une forme parfois pathogne (E. histolytica) nest pas
possible : seule la prsence de trophozotes hmatophages (forme magna) donne un diagnostic de certitude damibiase. Une diffrentiation par PCR ou par ELISA peut aussi
tre envisage.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de
Mdecine Tropicale, environ 94 % des infestations E. histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
Les trophozotes hmatophages ne sont retrouvs que dans les selles glairo-sanglantes. Les selles doivent tre examines trs rapidement aprs mission (immobilisation rapide des
trophozotes, qui deviennent alors introuvables). Les formes hmatophages apparaissent 2 4 semaines aprs linfestation. Les formes hmatophages (magna) peuvent aussi tre
retrouves dans des pus (gnralement colors : jaunes, bruns ou chocolats). Lexamen parasitologique dun pus est cependant souvent ngatif puisque les trophozotes se trouvent la
priphrie du kyste et que la ponction se fait souvent au centre.
E. histolytica (forme minuta) vit dans la lumire du caecum, du clon et du rectum. Le parasite devient parfois pathogne (forme magna ou histolytica) avec invasion de la muqueuse et de la
sous muqueuse du clon et du rectum. Un essaimage vers le foie, les poumons, le systme nerveux central et dautres organes est alors possible. E. dispar nest jamais pathogne. Seuls
les trophozotes E. histolytica minuta et E. dispar peuvent senkyster. En cas damibiase intestinale, les kystes ne seront jamais prsents dans les selles.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de Mdecine
Tropicale, plus de 97 % des infestations E. histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
La srologie nest utile que dans les amibiases invasives : la sensibilit est de lordre de 95 % pour les amibiases extra intestinales, de lordre de 70 % pour les amibiases intestinales
invasives et de lordre de 10 % pour des porteurs asymptomatiques de kystes dE. histolytica. La spcificit est de lordre de 95 %. Aprs gurison, la srologie reste positive quelques mois.
La distinction entre E. histolytica et E. dispar par ELISA (galactose adhsines) aurait une sensibilit de lordre de 70 % et une spcificit de lordre de 97 %.
E. moshkovski et E. dispar, morphologiquement identique seraient soit le mme protozoaire soit des espces diffrentes. E. moshkovski, tout comme E. dispar ne serait jamais pathogne.
Les kystes ne sont pas dtruits par le niveau de chlore habituellement utilis pour la purification de leau potable (la filtration est donc ncessaire).

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55 / 138

Entamoeba dispar
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Homme

Primates,

Autres animaux.

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire intestinale (Colon).

Mthodes diagnostiques :
Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.
Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Diffrentiation entre E. histolytica et E. dispar dans les selles: PCR, ELISA (galactose adhesins).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
Mouvements :
Noyau :

10 60 m
Pseudopodes fins et arrondis,
dplacement orient et vif.
Peu visible, caryosome central,
grains de chromatine priphrique
rguliers.

Granuleux.
Jamais de globules rouges
ingrs.
Morphologie des kystes :

Contenu :
Caractristiques :

10 20 m.
Sphrique ou ovode.
Mince.
Maximum 4 noyaux, le plus
souvent 1 2.
Contenu :
Granuleux.
Caractristiques :
Kyste jeune 1 noyau, parfois
prsence dun corps
chromatode extrmits
arrondies et une masse diffuse
de glycogne.
Confusions possibles :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
Noyaux :

Autres signes biologiques associs :


NON PATHOGENE

Entamoeba histolytica. (kystes et trophozotes).


Autres kystes de protozoaires.
Macrophages mobiles.
Autres formes vgtatives damibes.
Leucocytes (kystes).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.

La distinction morphologique sur base des kystes et des trophozotes entre une forme jamais pathogne (E. dispar) et
une forme parfois pathogne (E. histolytica) nest pas possible : seule la prsence de trophozotes hmatophages
donne un diagnostic de certitude damibiase. Une diffrentiation par PCR ou par ELISA peut aussi tre envisage.
Entamoeba dispar est largement plus rpandue chez lhomme quEntamoeba histolytica : Parmi les infestations
observes pour les patients de la polyclinique de lInstitut de Mdecine Tropicale, environ 94 % des infestations E.
histolytica/ ou dispar sont en fait des infestations E. dispar).
Les trophozotes ne se retrouvent que dans des selles diarrhiques. Comme la mobilit est un lment du diagnostic,
lexamen doit tre ralis le plus rapidement possible aprs mission des selles.
Les kystes ne se retrouvent que dans des selles non diarrhiques.
La distinction entre E. histolytica et E. dispar (ELISA, galactose adhsine) aurait une sensibilit de lordre de 70 % et une
spcificit de lordre de 97 %.
E. moshkovski et E. dispar, morphologiquement identique seraient soit le mme protozoaire soit des espces diffrentes. E.
moshkovski ne serait cependant jamais pathogne.

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56 / 138

Entamoeba hartmanni
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Homme

et
sans vecteur

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.

Mthodes diagnostiques :

Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.


Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

5 12 m.

Mouvements :

Pseudopodes arrondis,
dplacement orient.

Noyau :

Peu visible, caryosome central,


petits grains de chromatine
priphrique rguliers.

Contenu :

Granuleux.

Caractristiques :

Jamais de globules rouges


ingrs.

Morphologie des kystes :


Dimensions :

5 10 m.

Forme :

Sphrique ou ovode.

Paroi :

Fine.

Noyaux :

En gnral 1 2, maximum 4
noyaux.

Contenu :

Granuleux, parfois prsence


dun corps chromatode
extrmits arrondies et dune
masse diffuse de glycogne.

Caractristiques :

Petit histolytica

Autres signes biologiques associs :


NON PATHOGENE

Confusions possibles :

Autres trophozotes damibes.


Autres kystes de protozoaires.
Macrophages mobiles (trophozotes).
Leucocytes (kystes).

Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.
2. La diffrentiation entre les kystes dE. histolytica/dispar et les kystes dE. hartmanni ne peut se faire que sur base
de la taille (utilisation dun micromtre oculaire).
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57 / 138

Entamoeba coli
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Homme
Primates
Chiens
Porcs

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :

et

Lumire du clon.
sans vecteur
Mthodes diagnostiques :

Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.


Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

15 50 m.

Mouvements :

Pseudopodes larges,
dplacement non orient et lent

Noyau :

Caryosome le plus souvent


excentrique, grains de
chromatine irrguliers contre
la membrane nuclaire.

Contenu :

Granuleux.

Caractristiques :

Jamais de globules rouges


ingrs.

Morphologie des kystes :


Dimensions :

10 35 m.

Forme :

Sphrique ou ovode.

Paroi :

Epaisse, double .

Noyaux :

De 1 16 noyaux bien visibles


(le plus souvent de 4 8).

Contenu :

Granuleux (mais moins que


E. histolytica/dispar), glycogne
diffus, parfois prsence dun
corps chromatodes extrmits
effiles (aiguilles peu visibles).

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
NON PATHOGENE

Confusions possibles :

Autres trophozotes damibes.


Autres kystes de protozoaires.
Macrophages mobiles (trophozotes).

Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.

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58 / 138

Endolimax nanus
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Hommes.
Primates.
Porcs.
Chiens.

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.

Mthodes diagnostiques :

Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.


Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

6 12 m.

Mouvements :

1 pseudopodes la fois,
dplacement non orient et lent

Noyau :

Grand caryosome compact et


irrgulier, pas de chromatine
priphrique.

Contenu :

Granuleux.

Caractristiques :

Jamais de globules rouges


ingrs.

Morphologie des kystes :


Dimensions :

5 10 m.

Forme :

Ovode, parfois sphrique.

Paroi :

Trs mince.

Noyaux :

Maximum 4 petits noyaux, peu


visibles (points rfringents).

Contenu :

Cytoplasme uniformment
color (trs ple).

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :

NON PATHOGENE

Confusions possibles :

Autres amibes (trophozotes et kystes).


Autres protozoaires (kystes).
Macrophages mobiles (trophozotes).
Champignons (Geotrichum spp).
Levures.

Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE.
histolytica/dispar.
2. Lancien non de cette amibe tait Endolimax nana.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Iodamoeba butschlii
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Homme
Primates
Porcs

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
et
sans vecteur

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes mrs.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Lumire du clon.

Mthodes diagnostiques :

Identification des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.


Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

8 20 m.

Mouvements :

Pseudopodes transparent,
dplacement non orient et lent

Noyau :

Peu visible, trs grand


caryosome, pas de chromatine
priphrique.

Contenu :

Granuleux.

Caractristiques :

Jamais de globules rouges


ingrs.

Morphologie des kystes :


Dimensions :

5 20 m.

Forme :

Tr s variable.

Paroi :

Mince.

Noyaux :

1 seul noyau dense.

Contenu :

Vacuole de glycogne bien


dlimite.

Caractristiques :

Vacuole de glycogne bien


visible et fortement colorable
en brun par le lugol.

Autres signes biologiques associs :


NON PATHOGENE

Confusions possibles :

Autres trophozotes damibes.


Autres kystes de protozoaires.
Macrophages mobiles (trophozotes).

Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci dE. histolytica.
2. Le contact des selles avec du formol ou de lther (lors de la fixation ou de techniques denrichissements) limite
trs souvent la colorabilit de la vacuole de glycogne par le lugol.
3. Lancien non de cette amibe tait Pseudolimax butschlii.

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Entamoeba gingivalis
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Entamoebidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Homme.
Chien.
Cheval.

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Mode de contamination :
Contact oral oral (baiser).

et
sans vecteur

Localisation des trophozotes :


Cavit buccale.

Mthodes diagnostiques :

(identification des formes vgtatives dans la salive ou dans des frottis dentaires : Examen direct).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

10 25 m.

Mouvements :

Plusieurs pseudopodes larges,


dplacement orient

Noyau :

Petit caryosome central,


chromatine en anneau autour
de la membrane nuclaire.

Contenu :

Granuleux, vacuoles avec


dbris, bactries et parfois
leucocytes.

Caractristiques :

Jamais de globules rouges


ingrs.

Morphologie des kystes :

PAS DE FORME KYSTIQUE

PAS DE FORME KYSTIQUE

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :

NON PATHOGENE

E. histolytica (amibiase pulmonaire).


Macrophages mobiles.
Autres amibes (trophozotes).

Remarques :
1. Amibe non pathogne vivant dans la cavit buccale, qui se nourrit de cellules pithliales mortes, de bactries et
dautre dbris.
2. E. gingivalis ne doit pas tre confondue avec des trophozotes dE. histolytica ventuellement prsents dans le
crachat en cas damibiase pulmonaire. Les trophozotes dE. histolytica contiennent cependant toujours des
globules rouges ingrs.
3. Les trophozotes avals sont dtruits dans lestomac. Et comme cette amibe ne forme pas de kyste, elle nest
jamais retrouve dans les selles.
4. La prsence dE. gingivalis dans la salive indique le plus souvent un manque dhygine buccal.

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Naegleria fowleri
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Vahlkampfiidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :

Exceptionnelle
Cosmopolite

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Organisme libre dans la nature


Accidentellement : Homme

Mningo-encphalite amibienne primitive (F).


Primary amebic meingoencephalitis (En).
Menigoencefalitis amibiana primaria (Es).
Mode de contamination :

Contact nasal avec de leau contamine.


Localisation des trophozotes amibodes :

et
sans vecteur

Systme nerveux central.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des trophozotes amibodes dans le LCR : Examen frais, coloration de Giemsa, culture.
Identification des amibes par immunofluorescence (Anticorps spcifiques marqus).
[biopsie crbrale].
Morphologie des trophozotes amibodes :
Liquide Cphalo-Rachidien
10 20 m.
Trs actifs, pseudopodes
arrondis explosifs .
Noyau :
Un grand noyau avec un grand
caryosome.
Contenu :
Nombreuses vacuoles.
Caractristiques :
Mouvements explosifs .
Morphologie des trophozotes flagells :
Eau [LCR]
Dimensions :
10 20 m.
Mouvements :
Noyau :
1 noyau.
Contenu :
Caractristiques :
2 4 flagelles
Dimensions :
Mouvements :

FORME LIBRE DANS LEAU


[et EXCEPTIONNELLEMENT DANS LE LCR]

FORME NON RENCONTREE CHEZ LHOMME


UNIQUEMENT LIBRE DANS LEAU

Autres signes biologiques associs :

Morphologie des kystes :


Eau
Dimensions :
10 20 m.
Forme :
Ovode.
Paroi :
Double, paisse, lisse.
Noyau :
1 seul noyau.
Contenu :
Caractristiques :
Confusions possibles :

Acanthamoeba spp.
Balamuthia mandrillaris.
Macrophages mobiles.
Autres trophozotes damibes (contaminants).

Remarques :
1.

2.
3.
4.

Naegleria spp. et les amibes du genre Acanthamoeba spp. sont des organismes libres trouvs habituellement dans leau (lacs, piscines, eau
de distribution, eau des systmes de chauffage ou de conditionnement dair,). Leur temprature optimale de multiplication est de 35 C.
Naegleria fowleri, seule espce occasionnellement pathogne pour lhomme, se retrouve plus dans les eaux chaudes (20-25C), les
Acanthamoeba supportent des tempratures plus basses. Balamuthia mandrillaris na jamais t retrouve dans lenvironnement.
La mningo-encphalite amibienne primitive a tendance apparatre comme une petite pidmie chez des individus qui simultanment ont eu
un contact avec de leau contamine (piscine,).
Naegleria fowleri est une amibe particulire puisquelle prsente 3 formes dans son cycle volutif : le trophozote amibode (forme parasitaire),
le trophozote flagell (forme libre qui se multiplie, exceptionnellement retrouv dans le LCR) et le kyste (forme rsistante dans le milieu
extrieur). Les kystes rsistent bien la dessiccation, mais mal au chlore (sensibles 4 ppm).
Dans une mningo-encphalite amibienne primitive, on retrouve un liquide cphalo-rachidien purulent, avec prdominance de polynuclaires
(500-20.000 cellules/mm de LCR), une hyperalbuminorachie, un glycorachie normale ou abaisse, des examens bactriologiques ngatifs et
la prsence damibes trs mobiles.

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Acanthamoeba spp.
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Hartmanellidae

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :

Encphalite trs exceptionnelle


Cosmopolite

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Organisme libre dans la nature

Sans hte intermdiaire

Accidentellement : Homme

Mode de contamination :
Contact cutan (oculaire) avec de leau contamine.
Localisation des parasites :

et
sans vecteur

Ulcre cornen amibien, [Encphalite


granuleuse amibienne] (F).
Keratitis and corneal amebic ulcer, [Chronic
granulomatous amebic encephalitis] (En).
Ulceras corneales amibiana [Encefalitis
amibiana granulosa] (Es).

Cutane, oculaire, [Systme nerveux central].

Mthodes diagnostiques :
Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans des frottis cornens : Examen frais,
coloration au Giemsa,
Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans des biopsies (peau, corne, tissus crbral) :
Examen frais, coloration au Giemsa,
Identification des amibes par immunofluorescence (Anticorps spcifiques marqus).
[Culture].
[Recherche des trophozotes amibodes et des kystes dans le LCR : Examen frais, coloration au
Giemsa, ].
Morphologie des trophozotes amibodes :
10 40 m.
Lent, pseudopodes spiculs.
Un grand noyau avec un grand
caryosome.
Contenu :
Nombreuses vacuoles
alimentaires.
Caractristiques :
Pseudopodes effils ou
filamenteux.
Morphologie des kystes :
Dimensions :
Mouvements :
Noyau :

Dimensions :
Forme :
Paroi :

Autres signes biologiques associs :

10 20 m.
Ovode.
Double, paroi extrieure
plisse.
1 seul noyau, pas/peu visible.

Noyau :
Contenu :
Caractristiques :
Kystes daspect polygonal.
Confusions possibles :

Naegleria spp.
Balamuthia mandrillaris.
Macrophages mobiles.
Autres amibes (kyste ou trophozotes contaminants).
Spores vgtales (kystes).

Remarques :
1.

2.
3.
4.
5.

Naegleria spp. et les amibes du genre Acanthamoeba spp. sont des organismes libres trouvs habituellement dans leau (lacs, piscines, eau de distribution, eau
des systmes de chauffage ou de conditionnement dair,). Leur temprature optimale de multiplication est de 35 C. les Acanthamoeba (lacs, etc.) supportent
des tempratures plus basses que Naegleria fowleri (piscines etc.). Diffrentes espces dAcanthamoeba sont parfois pathognes (opportunistes) : A. polyphaga,
A. castellani, A. culbertsoni, A. astronyxis, A. hatchetti, A. rhysodes, Balamuthia mandrillaris na jamais t retrouve dans lenvironnement.
Contrairement Naegleria fowleri, B. mandrillaris et les amibes du genre Acanthamoeba nont que deux formes : une forme amibode et une forme kystique.
Les amibes du genre Acanthamoeba et Balamuthia sont morphologiquement identique en microscopie optique.
Ces deux amibes provoquent des kratites, suite des lsions ou des irritations de la cornes (greffe, traumatisme, lentilles de contacts,) ou des encphalites
(opportunistes, suite une dficience immunologique).
Dans une encphalite granuleuse amibienne, on retrouve un liquide cphalo-rachidien clair, avec prdominance de mononuclaires, une hyperalbuminorachie, un
glycorachie normale ou abaisse, des examens bactriologiques ngatifs et la prsence damibes mobiles (trs difficiles) et de kystes polygonaux.

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES

FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Dientamoeba fragilis
Distribution gographique :

Hommes.

Classe :

Monocercomonadidea

Rhizopodea

Nom commun :

Pathologie :
Pas de nom spcifique pour la pathologie (encore
hypothtique) cause par ce parasite.

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Super Famille :

Htes intermdiaires :

Sans hte intermdiaire


Et
sans vecteur

Mode de contamination :

Fco-orale : Ingestion des trophozotes ?

Transmission hypothtique via les ufs des


helminthes intestinaux (en particulier les ufs
dEnterobius vermicularis) ?
Localisation des trophozotes :

Lumire du clon.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des trophozotes dans les selles : Colorations permanentes (hmatoxyline ferrique, noir de chlorazol,
).
[Identification des trophozotes dans les selles : Examen frais, suivi dune coloration permanente].
[Culture sur milieux xniques (Robinson par exemple)].
[Srologie : Recherche danticorps spcifiques dans le srum].
Recherche dADN spcifique par PCR dans les selles.
Morphologie des trophozotes :
(coloration permanente)
Dimensions :

4 20 m.

Mouvements :

Trs mobile frais, [immobile


aprs fixation et coloration], les
pseudopodes sont cependant
parfois encore visibles.

Noyau :

1 ou 2 noyaux parfois relies par


un centrodesmosome, chromatine
fragmente en 4 8 masses
, pas de chromatine priphrique.

Caractristiques :

Prdominance des formes binucles (+ /- 60 %), noyaux


fragments caractristiques.

Morphologie des kystes :


PAS DE FORME KYSTIQUE

PAS DE FORME KYSTIQUE

Autres signes biologiques associs :


Pathologie encore hypothtique
Diarrhe muqueuse non sanglante ?

Confusions possibles :

Autres amibes (trophozotes).


Macrophages mobiles (examen frais).
Endolimax nanus (kystes et trophozotes, dans les
colorations permanentes).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Le pouvoir pathogne exact de ce protozoaire nest pas encore prouv.


Comme ce parasite ne forme pas de kyste et que les trophozotes sont trs fragiles, lchantillon de selles doit tre fix immdiatement aprs
mission (par du SAF par exemple).
Seule la morphologie typique des noyaux aprs coloration permanente permet lidentification de ce flagell.
Lexamen microscopique (grossissement de 1.000 x) des prparations aprs coloration permanente (hmatoxyline ferrique par exemple) est
fastidieuse et ncessite une grande exprience.
Cet organisme, class dans les flagells sur base dtudes gntiques, ne possde cependant pas de stade flagell. Par son mode de
locomotion et sa morphologie, il ressemble cependant plus une amibe.

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Giardia lamblia
Distribution gographique :

Hommes (rservoir)
Primates
Rongeurs (rservoir ?)
(Porc ?)

Classe :

Hexamitidae

Zoomastigophorea

Nom commun :

Pathologie :

Cosmopolite.
Htes dfinitifs :

Famille :

Giardiase ou Giardiose (F).


Giardiasis (En).
Giardiasis (Es).

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire
Et
sans vecteur

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes.
Localisation des trophozotes et des kystes :
Duodnum et premier quart de lintestin.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des formes vgtatives dans des selles diarrhiques : Examen direct.
Recherche des kystes dans des selles moules : Examen direct, coloration au lugol, technique de
concentration par sdimentation.
Recherche des trophozotes dans le produit du tubage duodnal (ou sur le fil dun stringtest du type
Entrotest) : Examen direct.
Recherche de coproantignes spcifiques (GSA 65 par ELISA).
[Srologie : Recherche danticorps spcifiques dans le sang (IFAT)].
Recherche dADN spcifique par PCR (sur les selles).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

10-20 m x 6-8 m x 1-4 m.

Forme :

Piriforme, en forme de cuillre.

Mouvements :

Comme une chute de feuille,


dans une direction.

Noyau :

2 noyaux ovodes, en position


antrieure.
8 flagelles (4 paires), prsence
dune ventouse ventrale.
Morphologie des kystes :

Caractristiques :

Dimensions :

8-19 m x 7-10 m.

Forme :

Ovode.

Paroi :

Epaisse.

Noyau :

2 4 noyaux, regroups en
position antrieure.
Axostyle en forme de S, corps
parabasaux en forme de
virgule, cytoplasme souvent
rtract donnant une paroi
double ligne.
Confusions possibles :

Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :


Souvent asymptomatique.
Diarrhe aqueuse non sanglantes et non glaireuse.
[Hypovitaminose suite une malabsorption des
graisses (enfant)].
Remarques :

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Autres flagells intestinaux [tous non


pathognes] (trophozotes).
Autres protozoaires (kystes).

Seuls les kystes sont retrouvs dans des selles moules. Les trophozotes ne se retrouvent que dans des selles diarrhiques.
Les selles diarrhiques doivent tre examines rapidement aprs mission (immobilisation rapide des trophozotes, qui deviennent alors introuvables).
La sensibilit dun seul examen de selles est de lordre de 75 % (expulsion intermittente des kystes). La rptition des examens de selles sur 3 jours conscutifs
est donc parfois ncessaire pour mettre en vidence ce parasite.
La coloration au lugol tue immdiatement les trophozotes, ne les rendant plus identifiables par leurs mouvements Cette coloration rend cependant la structure des
kystes mieux visible.
La recherche des coproantignes prsente une trs bonne sensibilit et une trs bonne spcificit.
Giardia intestinalis, Giardia duodenalis, Lamblia intestinalis sont des anciens noms pour Giardia lamblia.
Les kystes sont rsistants aux doses de chlore habituellement utilises dans le traitement de leau potable (mais dans les systmes dpuration des eaux uses).

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Chilomastix mesnili
Distribution gographique :

Super Famille :

Classe :

Retortamonadidea

Retortamonadea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Hommes.
Singes.
Porcs.

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion de kystes.

Et
sans vecteur

Localisation des trophozotes et des kystes :


Commensal de la lumire du clon et du caecum.

Mthodes diagnostiques :

Identification des trophozotes dans les selles : Examen direct.


Identification des kystes dans les selles : Examen direct, coloration au lugol, technique de concentration
par sdimentation.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

6 20 m x 4 7 m.

Forme :

Piriforme avec une extrmit


pointue, torsad.

Mouvements :

En spirale dans une direction.

Noyau :

1 noyau en position antrieure,


ct des 4 flagelles.

Contenu :

Granuleux.

Caractristiques :

Piriforme, 5 flagelles, dont 4


dirigs vers lavant.

Morphologie des kystes :


Dimensions :

7 10 m x 4 6 m.

Forme :

Piriforme.

Paroi :

Epaisse.

Noyaux :

1 noyau central.

Contenu :

Quelques petites lignes courbes


(flagelles atrophis).

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
NON PATHOGENE

Confusions possibles :

Giardia lamblia (trophozotes).


Autres flagells non pathognes (trophozotes).
Autres kystes de protozoaires.

Remarques :
1. Comme ce protozoaire nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci des amibes ou des
flagells pathognes.
2. Retortamonas (ou Embadomonas) intestinalis (non pathogne, cosmopolite, retrouv chez lhomme et le singe) et
Enteromonas hominis (non pathogne, cosmopolite, retrouv chez lhomme, le singe mais aussi le porc, les
rongeurs et les amphibiens) ont une morphologie identique mais sont lgrement plus petits (4 - 10 m).

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Pentatrichomonas hominis
Distribution gographique :

Super Famille :

Classe :

Trichomonadidae

Parabasalea

Nom commun :

Pathologie :
NON PATHOGENE

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Hommes.
Singes.
Porcs.
Chien.
Chat.
Rongeurs

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :
Fco-orale : Ingestion des formes vgtatives.

Sans hte intermdiaire


Localisation des trophozotes :

Et
sans vecteur

Commensal de la lumire du clon et du caecum.

Mthodes diagnostiques :

Identification des trophozotes dans les selles : Examen direct.


Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

8 15 m x 4 6 m.

Forme :

Ovode ou rond, avec deux


ples pointus.

Mouvements :

Tourbillonne et tourne dans


tous les sens, semble vibrer.

Noyau :

1 noyau antrieur, peu visible.

Caractristiques :

Membrane ondulante, dun ct


seulement. 4 flagelles antrieurs
et 1 postrieur, axostyle
traversant tout le cytoplasme et
dpassant en une extrmit
pointue.

Morphologie des kystes :

PAS DE FORME KYSTIQUE

PAS DE FORME KYSTIQUE

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :

NON PATHOGENE

Giardia lamblia (trophozotes).


Autres flagells non pathognes (trophozotes).

Remarques :
1. Comme ce flagell nest pas pathogne, il nest pas rechercher, mais doit tre diffrenci des flagells
pathognes que lon peut retrouver dans les selles.
2. Pentatrichomonas hominis est un des flagells les plus rsistants (pas de forme kystique). Il reste donc mobile
assez longtemps dans des selles.
3. Trichomonas hominis et Trichomonas intestinalis sont les anciens noms de ce protozoaire.
4. Trichomonas tenax (anciens noms : Trichomonas elongata ou Trichomonas buccalis) a une morphologie
identique. Cet autre flagell non pathogne pour lhomme se retrouve au niveau de la cavit buccale, sur les
gencives, entre les dents ou dans la salive.
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Trichomonas vaginalis
Distribution gographique :

Classe :

Trichomonadidae

Parabasalea

Nom commun :

Pathologie :

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Famille :

Trichomoniase (F).
Trichomonosis (En).
Trichomoniasis urogenital (Es).

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :
Par contact sexuel.

Sans hte intermdiaire

et

Par contact intime avec des objets humides contamins


(serviettes de toilette, eau du bain, instruments
gyncologiques,)

sans vecteur

Localisation des trophozotes :

Hommes.

Systme urognital.
Mthodes diagnostiques :

Recherche des formes vgtatives dans les scrtions vaginales ou dans un exsudat urtral (examen direct
[ou aprs coloration de gram]).
(Recherche des formes vgtatives dans les urines : examen direct du culot de centrifugation).
[Recherche des antignes (dans lurine ou dans une scrtion vaginale) : ELISA ou IFAT].
[Culture].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :

5-19 m x 3-12 m.

Forme :

Ovode ou ronde, souvent avec


un ou deux ple(s) pointus
(axostyle).

Mouvements :

Trs mobile, dans toutes les


directions.

Noyau :

1 noyau antrieur, souvent peu


visible.

Caractristiques :

4 flagelles antrieurs,
membrane ondulante, axostyle.

Morphologie des kystes :

PAS DE FORME KYSTIQUE

PAS DE FORME KYSTIQUE

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :

Leucorrhe malodorante mousseuse , prurit


vaginal intense.
Souvent asymptomatique (homme).

Autres Trichomonas spp.


Autres flagells (contamination fcale,
contamination de leau physiologique,).

Remarques :
1. Dans les examens directs, la recherche du parasite est base sur son mouvement. Comme le parasite
simmobilise trs rapidement en dehors de son milieu naturel, les chantillons doivent tre examins trs
rapidement.
2. Comme le parasite se retrouve dans lurtre, lexamen des premires gouttes durines, rcoltes aprs absence
de miction durant 4 ou 5 heures, est la mthode recommande pour rechercher le parasite dans lurine (hommes).
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Trypanosoma brucei
gambiense
Distribution gographique :

Nom commun :

Afrique de louest et centrale


(entre 15 latitude nord et 25
latitude sud)

Maladie du sommeil
ouest africaine

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

(animaux domestiques :
porcs ?,).
(animaux sauvages :
buffles, etc.).

Trypanosomatidae

Mastigophorea

Trypanosomiase chronique ouest africaine (F).


West African sleeping sickness (En).
Enfermedad del sueo forma Gambiana (Es).
Mode de contamination :

Injection de salive contenant des formes mtacycliques


lors du repas sanguin dun vecteur infest.
Transfusion sanguine.
(Transmission congnitale rare).
(transmission mcanique exceptionnelle par un
insecte hmatophage)

Homme.

Classe :

Pathologie :

Galerie forestire et fort quatoriale

Famille :

Vecteur :

Mouche ts-ts

Glossina
Groupe palpalis

En Stade I : Lymphe et sang.

Localisation des parasites :


En Stade II : (lymphe, sang), compartiment extravasculaire : Systme nerveux central.

Mthodes diagnostiques :

Srologie : CATT (pour dpistage de masse), latex (pour le Nigeria principalement), ELISA, immunofluorescence,
Recherche des formes trypomastigotes dans la lymphe (ganglions cervicaux : signe de Winterbottom)
Recherche des formes trypomastigotes dans le sang :
frais dans une goutte de sang.
(en frottis sanguin ou) en goutte paisse colore au Giemsa.
en Woo frais.
en QBC frais.
en mini colonne mAECT.
Recherche des formes trypomastigotes dans le liquide cphalo-rachidien : diagnostic et dtermination du stade :
frais dans la cellule de numration.
- simple ou double centrifugation.
Recherche dADN spcifique par PCR.

Morphologie des trypomastigotes :


(dans le sang, aprs coloration au Giemsa)

1525 m.
Fusiforme, avec un flagelle et une
membrane ondulante (bleut).
Contenu :
Noyau assez gros, souvent
central et petit kintoplaste
(rougetre).
Caractristiques :
Membrane ondulante partant du
kintoplaste (sub-terminal) et se
terminant par le flagelle.
Confusions possibles :
Dimensions :
Cytoplasme :

Autres signes biologiques associs :

Stade I : VS (IgM) fortement augmente, (anmie


leucocytose modre, thrombocytopnie,)
Stade II : Idem + perturbation de diffrents
paramtres du LCR.

Trypanosoma brucei rhodesiense.


Trypanosomiases animales (Trypanosoma brucei brucei,)..
Bactries mobiles (Borrelia spp. ou contaminant de leau) ou
exflagellation des Plasmodium (pour les examens frais).
Trypanosoma cruzi (Amrique du sud).
Trypanosoma rangeli (Amrique du sud).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

8.

Il nexiste aucune diffrence morphologique entre T. b. gambiense et T.b. rhodesiense. Les deux espces sont dimorphes avec des formes longues (en
multiplication) et des formes courtes (infestantes pour le vecteur). Le diagnostic despce est donc clinique et gographique.
En raison de la toxicit des traitements (entre 5 et 10 % de mortalit suite au traitement pour des patients en stade 2), la srologie nest pas suffisante pour faire un
diagnostic. Les parasites doivent obligatoirement tre mis en vidence. De plus, la confirmation du diagnostic microscopique par une seconde personne est utile.
Suite laction immunitaire de lhte, on observe une succession de vagues de parasitmie correspondant des variants antigniques. Il peut donc tre utile de
rpter les examens parasitologiques et dutiliser des techniques de concentration.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes diminue
drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi immobiliss par le soleil.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
Aprs coloration au Giemsa, au moins 4 des 5 caractristiques dune forme trypomastigote doivent tre prsentes pour avoir un diagnostic de certitude de
trypanosomiase : 1 : taille, 2 : noyau, 3 : kintoplaste, 4 : cytoplasme, 5 : membrane ondulante et flagelle. Comme Trypanosoma brucei se divise par scission
binaire, il est possible dobserver des formes en cours de division avec deux noyaux, deux kintoplastes etc.
Le diagnostic du stade de la maladie repose sur linvasion du systme nerveux central. Diffrents paramtres sont utilisables sur le liquide cphalo-rachidien :
nombre de leucocytes, prsence de trypanosomes, augmentation des protines totales, augmentation anormale des IgM, prsence de cellules de Mott, prsence
danticorps spcifiques, Comme il ny a pas de relation troite entres ces paramtres, lOMS recommande dutiliser au moins les 3 paramtres suivants (le
nombre de leucocytes, la prsence de trypanosomes et la protinorachie) pour dterminer le stade de la maladie.
Trypanosoma brucei gambiense provoque une forme chronique de la maladie, toujours fatale sans traitement. La souche de Trypanosoma brucei gambiense de
type II, que lon retrouve en Cte dIvoire provoque cependant une maladie volution plutt aiges.

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Trypanosoma brucei
rhodesiense
Distribution gographique :

Nom commun :

Afrique de lest
(entre 15 latitude nord et 25
latitude sud)

Maladie du sommeil
est africaine

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

(Homme).

Glossina
Groupe morsitans

Mastigophorea

Trypanosomiase aigue est africaine (F).


East African sleeping sickness (En).
Enfermedad del sueo forma Rodesiana (Es).

Mode de contamination :
Injection de salive contenant des formes
mtacycliques lors du repas sanguin dun vecteur
infest.
(Transfusion sanguine).
(transmission mcanique exceptionnelle par un
insecte hmatophage)
Localisation des parasites :

Vecteur :
Mouche ts-ts

Trypanosomatidae

animaux sauvages.
(animaux domestiques).

Classe :

Pathologie :

Savane

Famille :

En Stade I : Lymphe et sang.


En Stade II : (lymphe, sang), compartiment extravasculaire : Systme nerveux central.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des formes trypomastigotes dans le sang :


frais dans une goutte de sang.
(en frottis sanguin ou) en goutte paisse colore au Giemsa.
en Woo frais.
en QBC frais.
en mini colonne mAECT.
Recherche des formes trypomastigotes dans la lymphe (moins utile pour T.b. rhodesiense)
Recherche des formes trypomastigotes dans le liquide cphalo-rachidien : diagnostic et dtermination du stade :
frais dans la cellule de numration.
- simple ou double centrifugation.
Recherche dADN spcifique par PCR.
[Examens srologiques (peu utiles car ils sont pris de vitesse par les symptmes cliniques et la recherche des parasites).]

Morphologie des trypomastigotes :


(dans le sang, aprs coloration au Giemsa)
Dimensions :
Cytoplasme :
Contenu :
Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

Stade I : VS (IgM) fortement augmente, (anmie


leucocytose modre, thrombocytopnie).
Stade II : Idem + perturbation de diffrents
paramtres du LCR.

1525 m.
Fusiforme, avec un flagelle et une
membrane ondulante (bleut).
Noyau assez gros, souvent
central et petit kintoplaste
(rougetre).
Membrane ondulante partant du
kintoplaste (sub-terminal) et se
terminant par le flagelle.

Confusions possibles :

Trypanosoma brucei gambiense.


Trypanosomiases animales (Trypanosoma brucei brucei,).
Bactries mobiles (Borrelia spp. ou contaminant de leau) ou
exflagellation des Plasmodium (pour les examens frais).
Trypanosoma cruzi (Amrique du sud).
Trypanosoma rangeli (Amrique du sud).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

8.

Il nexiste aucune diffrence morphologique entre T. b. gambiense et T.b. rhodesiense. Les deux espces sont dimorphes avec des formes longues (en
multiplication) et des formes courtes (infestantes pour le vecteur). Le diagnostic despce est donc clinique et gographique.
En raison de la toxicit des traitements (entre 5 et 10 % de mortalit suite au traitement pour des patients en stade 2), les parasites doivent obligatoirement tre mis
en vidence. De plus pour augmenter la spcificit, la confirmation du diagnostic microscopique par un second technicien est utile.
Suite laction immunitaire de lhte, on observe une succession de vagues de parasitmie correspondant des variants antigniques. Il peut donc tre utile de
rpter les examens parasitologiques. Globalement, la parasitmie est plus leve que celle observe avec Trypanosoma brucei gambiense.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes diminue
drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi immobiliss par le soleil.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
Aprs coloration au Giemsa, au moins 4 des 5 caractristiques dune forme trypomastigote doivent tre prsentes pour avoir un diagnostic de certitude de
trypanosomiase : 1 : taille, 2 : noyau, 3 : kintoplaste, 4 : cytoplasme, 5 : membrane ondulante et flagelle. . Comme Trypanosoma brucei se divise par scission
binaire, il est possible dobserver des formes en cours de division avec deux noyaux, deux kintoplastes etc.
Le diagnostic du stade de la maladie repose sur linvasion du systme nerveux central. Diffrents paramtres sont utilisables sur le liquide cphalo-rachidien :
nombre de leucocytes, prsence de trypanosomes, augmentation des protines totales, augmentation anormale des IgM, prsence danticorps spcifiques,
prsence de cellules de Mott, Comme il ny a pas de relation troite entres ces paramtres, lOMS recommande dutiliser au moins les 3 paramtres suivants
(nombre de leucocytes, la prsence de trypanosomes et la protinorachie) pour dterminer le stade de la maladie.
Trypanosoma brucei rhodesiense provoque une forme aigue de la maladie, toujours fatale sans traitement. La souche de Trypanosoma brucei rhodesiense de type
Zambia, que lon retrouve en Zambie et au Malawi provoque cependant une maladie volution plutt chronique.

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Trypanosoma cruzi
Distribution gographique :

Nom commun :

Amrique latine
Du sud des USA jusquau nord
de largentine

Trypanosomiase
amricaine

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Homme.

animaux domestiques.

animaux sauvages.

Vecteur :
Punaise hmatophage
(kissing bug)
Triatominae

Classe :

Trypanosomatidae

Mastigophorea

Pathologie :

Maladie de Chagas (F).


Chagas disease (En).
Enfermedad de Chagas (Es).
Mode de contamination :

Pntration transcutane active (gnralement via la piqre ou


les yeux [syndrome de Romaa]) des formes mtacycliques
provenant des selles dun vecteur infest.
Transfusion sanguine (transplantation dorganes)
Transplacentaire (et allaitement).
(via de la nourriture ou de leau contamines par des vecteurs
infests ou leurs selles ; ou ingestion de viande infeste
insuffisamment cuite ?).
(transmission mcanique exceptionnelle par un insecte
hmatophage).

Famille :

Localisation des parasites :

Dans le sang : formes trypomastigotes.


Dans les tissus : formes amastigotes.

Mthodes diagnostiques :

Examens srologiques : immunofluorescence indirecte, agglutination, fixation du complment, Dot Blot, ELISA,
(Recherche des formes amastigotes dans une ponction ganglionnaire ou dans une biopsie).
Recherche des formes trypomastigotes dans le sang (phase aigue ou congnitale) :
frais dans une goutte de sang.
(en frottis sanguin ou) en goutte paisse colore au Giemsa.
en Woo frais.
en QBC frais.
Mthode de Strout.
Recherche dADN spcifique par PCR.
[Recherche des parasites aprs mise en culture du sang (KIVI : Kit for in vitro isolation, NNN-medium [Novy-Nicolle-McNeal agar],...).
[Xnodiagnostic : Recherche du parasite dans les selles dune nymphe de Triatoma infestans, entre 15 et 60 jours aprs un repas
sanguin sur un patient].

Morphologie des formes trypomastigotes :


(dans le sang, aprs coloration au Giemsa)
1525 m.
Fusiforme, avec un flagelle et une
membrane ondulante (bleut).
Contenu :
Noyau assez gros, souvent
central et gros kintoplaste
(rougetre)
Caractristiques :
Souvent en forme de C, U [ou S].
Morphologie des formes amastigotes :
(biopsie, aprs coloration au Giemsa)
Dimensions :
Cytoplasme :

46 m.
Ovode ou arrondi (bleut).
Noyau assez gros et kintoplaste
(rougetre).
Caractristiques :
Intra- ou extra-cellulaires
Confusions possibles :
Dimensions :
Cytoplasme :
Contenu :

Autres signes biologiques associs :

Signe de Romaa (oculaire) ou Chagome


(cutan) pour la forme aigue (chez +/- 5 % des
patients).
Perturbation du bilan hpatique pour la forme
chronique.

Leishmania spp. (pour les formes amastigotes).


Trypanosoma rangeli (pour les formes trypomastigotes).
Bactries mobiles (Borrelia spp. ou contaminant de leau) ou
exflagellation des Plasmodium (pour les examens frais).
Trypanosoma brucei rhodesiense (Afrique).
Trypanosoma brucei gambiense (Afrique).
Trypanosomiases animales (Trypanosoma brucei brucei,).

Remarques :
1.
Trypanosoma rangeli, espce non pathogne infestant aussi lhomme dans les mmes rgions doit tre diffrencie de Trypanosoma cruzi. La
diffrence de taille du kintoplaste est un bon critre de diffrentiation.
2.
La dtection des trypanosomes frais doit tre faite le plus rapidement possible aprs prlvement. La probabilit de dtecter les trypanosomes
diminue drastiquement en fonction du temps (immobilisation des trypanosomes lorsquils ont consomm le glucose). Les trypanosomes sont aussi
immobiliss par le soleil.
3.
Lanticoagulant de premier choix utilisable pour la recherche des trypanosomes frais dans le sang est lhparine.
4.
Les trypomastigotes sont principalement retrouvs dans le sang durant la phase aigue de la maladie (mais avec plus de difficults que pour la
trypanosomiase africaine). En phase chronique, le diagnostic repose principalement sur la srologie (la culture, le xnodiagnostic ou la PCR).
5.
Les formes trypomastigotes de Trypanosoma cruzi ne se divisent pas. Seules les formes amastigotes se multiplient par division binaire.
6. Dans des prparations tissulaires, en plus des formes amastigotes, on peut aussi retrouver des formes intermdiaires epimastigotes (entre amastigotes
et trypomastigotes).
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Trypanosoma rangeli
Distribution gographique :

Famille :

Classe :

Trypanosomatidae

Mastigophorea

Nom commun :

Pathologie :

Amrique latine
NON PATHOGENE

(Brsil, Vnzula, El Salvador,


Colombie, Equateur, Panama,
Guatemala).
Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteur :

Homme.

animaux domestiques.

animaux sauvages.

Punaise hmatophage
(Rhodnius spp.)

Triatominae

Injection de salive contenant des formes mtacycliques lors du


repas sanguin dun vecteur infest.
Plus rarement pntration transcutane active (gnralement
via la piqre ou les yeux [syndrome de Romaa]) des formes
mtacycliques provenant des selles dun vecteur infest.
Transfusion sanguine.
Transplacentaire.
(via de la nourriture ou de leau contamines par des vecteurs
infests ou leurs selles ?)
(transmission mcanique exceptionnelle par un insecte
hmatophage).

Localisation des parasites :


Dans le sang : formes trypomastigotes.

Mthodes diagnostiques :

Identification des trypanosomes retrouvs dans un examen du sang (coloration de Giemsa).


Identification dADN spcifique par PCR.
Morphologie des formes trypomastigotes :
(dans le sang, aprs coloration au Giemsa)
Dimensions :

30 35 m.

Cytoplasme :

Fusiforme, avec un flagelle et une


membrane ondulante (bleut).

Contenu :

Noyau assez gros, souvent


central et petit kintoplaste
(rougetre).

Caractristiques :

Membrane ondulante partant du


kintoplaste (sub-terminal) et se
terminant par le flagelle.

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :

NON PATHOGENE

Trypanosoma cruzi.
Bactries mobiles (Borrelia spp. ou contaminant de leau) ou
exflagellation des gamtocytes de Plasmodium (pour les
examens frais).
Trypanosoma brucei rhodesiense (Afrique).
Trypanosoma brucei gambiense (Afrique).
Trypanosomiases animales (Trypanosoma brucei brucei,).

Remarques :
1. Trypanosoma rangeli, espce non pathogne infestant aussi lhomme dans les mmes rgions doit tre
diffrencie de Trypanosoma cruzi. La diffrence de taille du kintoplaste est un bon critre de diffrentiation.
2. Il nexiste que peu de diffrences morphologiques ( lexception de la taille) entre Trypanosoma brucei gambiense,
Trypanosoma brucei rhodesiense et Trypanosoma rangeli. Les trois espces sont dimorphes avec des formes
longues et des formes courtes. Le diagnostic despce est donc principalement clinique et gographique.
3. A la diffrence de Trypanosoma cruzi, Trypanosoma rangeli ne se retrouve chez lhomme que sous forme
trypomastigote (dans le sang).
4. Il nexiste pas dimmunit de protection croise entre Trypanosoma cruzi et Trypanosoma rangeli.

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Leishmania spp.
Distribution gographique :

Homme

Chiens, rongeurs et
divers animaux
(selon lespce de
Leishmania)

Trypanosomatidae

Mastigophorea

Pathologie :

Htes intermdiaires :
Vecteur :

Classe :

Nom commun :

Cette maladie existe, sous une


ou plusieurs de ses formes,
dans les pays du bassin
mditerranen et dans les
pays tropicaux ou
subtropicaux.
Htes dfinitifs :

Super Famille :

Mouches des sables


Phlebotomus spp.
(ancien monde)
Ou
Lutzomyia spp. et
Psychodogylus spp.
(nouveau monde)

Leishmaniose [cutane, muco-cutane ou


viscrale] (F).
[Cutaneous, mucocutaneous or visceral]
Leishmaniasis (En).
Leishmaniasis [cutaneas, mucocutaneas o
visceral] (Es).

Mode de contamination :
Dpt sur la peau ou injection de formes
mtacycliques lors du repas sanguin dun vecteur
infest.
Contact direct avec des plaies contenant des
Leishmania.
Transfusion sanguine.
[Ecrasement dun vecteur contamin sur la peau
(abime) ou sur les muqueuses].
[Exceptionnellement par contact avec des selles dun
vecteur contamin].
Localisation des parasites :
Sous formes amastigotes dans les macrophages, les
monocytes ou les histiocytes.

Mthodes diagnostiques :

Recherche microscopique, aprs coloration au Giemsa des formes amastigotes dans les exsudats ou les biopsies de
lsions superficielles (formes cutanes ou muco-cutanes), dans des ponctions [splniques, hpatiques], dans la
moelle osseuse ou dans les ganglionnaires (formes viscrales), ou dans un buffy coat (formes viscrales).
Mise en culture des parasites prsents dans des biopsies sur des milieux spcifiques (toutes formes de
leishmanioses) Nogushi Wenyon, Tobie Sang Lapin + Locke, etc.
Intradermo-raction de Montngro ( vise principalement pidmiologique pour les formes muco-cutanes et
cutanes).
Srologie : recherche danticorps spcifiques par tests rapides, IFAT, ELISA, DATS,
Recherche dADN spcifique par PCR (diagnostic des espces et des sous-espces).

Morphologie des amastigotes (coloration au Giemsa) :


Dimensions :

1,5 3 m x 2,5 6,5 m

Cytoplasme :

Ovode ou arrondi (bleutre).

Contenu :

le cytoplasme bleut (pas


toujours visible) contient un
gros noyau rond (rougetre) et un
petit kintoplaste allong
(rougetre, mais plus fonc que le
noyau).
Les amastigotes peuvent tre
tant intra- quextra-cellulaires.
Confusions possibles :

Caractristiques :
Autres signes biologiques associs :
En cas de leishmaniose viscrale on observe gnralement
une pancytopnie importante : abaissement des globules
blancs, des plaquettes et des globules rouges (anmie).
Perturbation des tests de coagulation et des tests hpatiques,
augmentation des globulines sanguines [IgG] (V.S. augmente,
formol gel test positif) et une diminution de lalbumine srique.

Bactries (principalement des diplocoques).


Trypanosoma cruzi (amastigotes).
Toxoplasma gondii.

Remarques :
1.
2.
3.

4.

Les diffrentes espces de leishmanies sont microscopiquement identiques. La distinction despces, importante cliniquement, peut se faire par anticorps
monoclonaux, iso-enzymes ou par PCR. Lorigine gographique est aussi indicative.
Pour le diagnostic de la leishmaniose viscrale, la sensibilit de la mise en vidence des parasites aprs coloration au Giemsa dpend du type de prlvement : de
lordre de 95 % pour la ponction splnique, 50 85 % pour la ponction sternale, 70 % pour la ponction hpatique et 65 % pour la ponction ganglionnaire. Les
ponctions splniques et hpatiques sont souvent vites en raison de leurs dangers.
Les tests srologiques sont principalement utiles pour les formes viscrales. En cas de leishmaniose viscrale, les anticorps sont mme prsents avant lapparition
de signes cliniques. La sensibilit est bonne, du moins pour les personnes non immunodprimes. Pour les autres formes de leishmanioses, la srologie est peu
sensible et le test est souvent ngatif. Il existe des ractions croises avec les autres Trypanosomatidae. Le formol gel test, test non spcifique de mise en
vidence dune augmentation importante des gammaglobulines srique peut tre utile.
Sans traitement, la leishmaniose viscrale est mortelle.

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES

CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Balantidium coli
Distribution gographique :

Parasite rare
(leveurs de porc)

Homme (zoonose).

Balantidiae

Listomatea
Pathologie :

Porc,
Singes, rats, chiens,

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite.

Htes dfinitifs :

Famille :

Balantidiose, balantidiase, dysenterie


balantidienne (F)
Balantidiasis (En)
Balantidiasis (Es)

Htes intermdiaires :
Sans htes intermdiaire

Mode de contamination :

Localisation des trophozotes et des kystes :

ET
Sans vecteurs

Fco-orale : Ingestion des kystes mrs.

Lumire du colon.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des formes vgtatives dans les selles : Examen direct.


Recherche des kystes dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
(Rectoscopie : recherche des formes vgtatives dans une biopsie des lsions).
Morphologie des trophozotes :
Dimensions :
Forme :
Paroi :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :

50 200 m x 40 70 m.
(le plus souvent 60 et 70m).
Ovode ou sphrique.
Recouverte de trs nombreux
cils courts anims de
battements rapides, cytostome
Deux noyaux (micro - [arrondi]
et macro-nuclus [rniforme]) et
deux vacuoles contractiles.
Gris bruntre.
Trs mobile, direction
marque. Cytostome souvent
bien visible.

Morphologie des kystes :


Dimensions :
Forme :
Paroi :
Contenu :
Couleur :
Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

40 65 m.
Sphrique ou ovode.
Double , irrgulire, floue.
Macronuclus rniforme bien
visible, micronuclus arrondi
parfois visible.
Gris bruntre.
Un cytostome rudimentaire et
les cils accols la paroi sont
parfois visibles.

Confusions possibles :

Autres cilis non pathognes: Paramecium spp,


infusoires, opalines, (contaminants de leau).
Cellules vgtales (kystes).

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

Les kystes sont retrouvs principalement dans des selles moules tandis que les formes vgtatives sont retrouves dans des
selles diarrhiques. Les formes vgtatives sont rapidement dtruites, une fois lextrieur du colon. Comme le mouvement
est un lment important du diagnostic, les chantillons diarrhiques doivent tre observs le plus rapidement possible.
Il existe un trs grand nombre de cilis non pathognes que lon retrouve dans leau ou le sol. Une contamination doit donc
toujours tre envisage (eau physiologique utilise pour la suspension des selles, )
Les formes vgtatives sont mises de faon intermittente dans les selles. Des examens rpts sont donc envisager.
Ni les formes vgtatives, ni les kystes ne se colorent bien liode ou aux colorants permanents.
Des localisations non intestinales (poumon, foie, cur) ont aussi t rapportes (rarissime, mais B. coli aurait un pouvoir
invasif tissulaire).

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES

SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Plasmodium falciparum
Distribution gographique :

Nom commun :

Tropiques

Paludisme

Afrique, Amrique, Asie


Htes dfinitifs :

Homme.

Classe :

Plasmodiidae

Haemosporidea
Pathologie :

Malaria

(Aroport)

Famille :

Fivre tierce maligne, fivre pernicieuse (F).


Falciparum malaria (En).
Tertiana maligna, fiebre perniciosa (Es).

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteur :

Moustiques femelles

Genre
Anopheles spp.

Injection de salive contenant des sporozotes


lors du repas sanguin dun vecteur infect.
Transfusion sanguine.
Congnitale.
Localisation des parasites :

Intracellulaire dans les cellules hpatiques.


Intracellulaire dans les globules rouges.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des parasites dans le sang :


en frottis sanguin (diffrentiation des espces, quantification).
en goutte paisse (pr-diffrentiation des espces, quantification).
en QBC (pr-diffrentiation des espces, quantification).
Srologie :
Recherche des antignes de Plasmodium : pLDH, aldolase, HRP-II (tests rapides).
Recherche danticorps spcifiques (IFA, ELISA) [usage pidmiologique].
Recherche dADN spcifique par PCR.
(Dtection du pigment malarien ou/et de laltration des globules rouges parasits : automates hmatologiques).

Morphologie trophozotes en frottis sanguin :

Morphologie trophozotes en goutte paisse :

Morphologie schizontes en frottis sanguin :

Morphologie schizontes en goutte paisse :

Morphologie gamtocytes en frottis sanguin :

Morphologie gamtocytes en goutte paisse :

Caractristiques principales en frottis sanguin :

Caractristiques principales en goutte paisse :

Hmaties parasites de taille normale.


Pas de schizontes dans le sang priphrique (sauf
infestations graves).
Trophozotes fins, en forme de bague, forme accole,
polyparasitisme frquent ( 1 trophozote/globule rouge).
Gamtocytes en forme de banane (si prsents).
Taches de Maurer possible ( pH = 8, et uniquement pour
des trophozotes gs).

Normalement pas de schizontes dans le sang


priphrique (sauf infestations graves).
Trophozotes fins, en forme de bague.
Gamtocytes en forme de bananes (si prsents).
Image uniforme.

Autres signes biologiques associs :

Fivre.
Thrombocytopnie.
Anmie (hmolytique).
Bilirubine (surtout directe) et LDH leve.
Haptoglobine basse.
Hypoglycmie.

Confusions possibles :

Autres Plasmodium spp.


Plaquettes sanguines.
Corps de Howell-Jolly.
Babesia spp. et Theileria spp.
Toxoplasma gondii (pour les gamtocytes).

Remarques :
1.
2.
3.
4.

5.

En goutte paisse, laspect uniforme et monotone de Plasmodium falciparum facilite son diagnostic diffrentiel.
Exceptionnellement, en cas dinfestation grave, les parasites ne sont pas retrouvs dans le sang priphrique (squestration des parasites par cyto-adhrence des globules
rouges infests au niveau de lendothlium des capillaires).
La prsence de schizontes de Plasmodium falciparum dans le sang circulant et la prsence de pigment ingr dans les leucocytes sont des signes de gravit de linfestation.
Les gamtocytes apparaissent une dizaine de jours aprs linvasion initiale. Exceptionnellement, les gamtocytes peuvent tre ronds ou en exflagellation.
Parasitmie pouvant atteindre plus de 50 % des globules rouges infests (ou plus de 2.500.000/l de sang).

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Plasmodium vivax
Distribution gographique :
Isotherme de min 16C en
saison chaude
Afrique, Amrique, Asie,
Htes dfinitifs :

Homme.

Classe :

Plasmodiidae

Haemosporidea

Nom commun :

Pathologie :

Paludisme
Malaria
Htes intermdiaires :

Moustiques femelles
Genre
Anopheles spp.

Fivre tierce bnigne (F).


Vivax malaria (En).
Tertiana benigna (Es).
Mode de contamination :

Vecteur :

Famille :

Injection de salive contenant des sporozotes lors


du repas sanguin dun vecteur infect.
Transfusion sanguine.
Congnitale.
Localisation des parasites :

Intracellulaire dans les cellules hpatiques (hypnozotes).


Intracellulaire dans les globules rouges.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des parasites dans le sang :


en frottis sanguin (diffrentiation des espces, quantification).
en goutte paisse (pr-diffrentiation des espces, quantification).
en QBC (pr-diffrentiation des espces, quantification).
Srologie :
Recherche des antignes de Plasmodium : pLDH, aldolase (tests rapides).
Recherche danticorps spcifiques (IFA, ELISA) [usage pidmiologique].
Recherche dADN spcifique par PCR.
(Dtection du pigment malarien ou/et de laltration des globules rouges parasits : automates hmatologiques).

Morphologie trophozotes en frottis sanguin :

Morphologie trophozotes en goutte paisse :

Morphologie schizontes en frottis sanguin :

Morphologie schizontes en goutte paisse :

Morphologie gamtocytes en frottis sanguin :

Morphologie gamtocytes en goutte paisse :

Caractristiques principales en frottis sanguin :

Caractristiques principales en goutte paisse :

Hmaties parasites agrandies et dformes.


Tous les stades volutifs sont possibles.
Forme amibode typique pour les trophozotes gs.
Schizontes mrs 16 noyaux ou plus.
Granulations de Schffner fines, mais absentes pour
les formes jeunes.
Autres signes biologiques associs :

Fivre.
Thrombocytopnie.

Tous les stades volutifs sont possibles.


Forme amibode typique pour les trophozotes gs.
Schizontes mrs 16 noyaux ou plus.
Granulations de Schffner fines, souvent visibles dans
les fantmes des globules.
Confusions possibles :

Autres Plasmodium spp.


Plaquettes sanguines.
Corps de Howell-Jolly.
Babesia spp. Et Theileria spp.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.

En goutte paisse, laspect nuageux des trophozotes de Plasmodium vivax facilite son diagnostic diffrentiel.
Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
En raison de la raret du groupe sanguin Duffy positif (porte dentre du parasite dans le globule rouge), ce parasite se rencontre peu en Afrique centrale.
Les hypnozotes (schizontes hpatiques persistant pendant plusieurs mois ou annes aprs linfestation) expliquent la possibilit de rechutes tardives.
Parasitmie nexcdant pas 4 % des globules rouges infests (soit 200.000 parasites par l de sang).

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Plasmodium ovale
Distribution gographique :

Nom commun :

Afrique tropicale et
subtropicale, Partie ouest du
Pacifique, Amrique du sud

Paludisme

Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

(petits foyers)

Homme.

Classe :

Plasmodiidae

Haemosporidea
Pathologie :

Malaria

Fivre tierce bnigne (F).


Ovale malaria (En).
Fiebre tertiana (Es).
Mode de contamination :

Vecteur :

Moustiques femelles

Genre
Anopheles spp.

Famille :

Injection de salive contenant des sporozotes lors


du repas sanguin dun vecteur infect.
Transfusion sanguine.
Congnitale.
Localisation des parasites :

Intracellulaire dans les cellules hpatiques (hypnozotes).


Intracellulaire dans les globules rouges.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des parasites dans le sang :


en frottis sanguin (diffrentiation des espces, quantification).
en goutte paisse (pr-diffrentiation des espces, quantification).
en QBC (pr-diffrentiation des espces, quantification).
Srologie :
Recherche des antignes de Plasmodium : pLDH, aldolase (tests rapides).
Recherche danticorps spcifiques (IFA, ELISA) [usage pidmiologique].
Recherche dADN spcifique par PCR.
(Dtection du pigment malarien ou/et de laltration des globules rouges parasits : automates hmatologiques).

Morphologie trophozotes en frottis sanguin :

Morphologie trophozotes en goutte paisse :

Morphologie schizontes en frottis sanguin :

Morphologie schizontes en goutte paisse :

Morphologie gamtocytes en frottis sanguin :

Morphologie gamtocytes en goutte paisse :

Caractristiques principales en frottis sanguin :

Caractristiques principales en goutte paisse :

Hmaties parasites variables en volume; dformes


(ovodes ou effiloches).
Tous les stades volutifs sont possibles.
Parasites moyennement compacts.
Schizontes mrs 8 noyaux en moyenne, n'occupant
pas toute l'hmatie.
Granulations de Schffner videntes.
Autres signes biologiques associs :

Fivre.

Tous les stades volutifs sont possibles.


Parasites moyennement compacts.
Schizontes mrs 8 noyaux en moyenne.
Granulations de Schffner trs souvent videntes
dans les fantmes des globules.
Confusions possibles :

Autres Plasmodium spp.


Plaquettes sanguines.
Corps de Howell-Jolly.
Babesia spp. et Theileria spp.

Remarques :
1.
2.
3.

Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
Les hypnozotes (schizontes hpatiques persistant pendant plusieurs mois ou annes aprs linfestation) expliquent la possibilit de rechutes tardives.
Parasitmie nexcdant jamais 4 % des globules rouges infests (soit 200.000 parasites par l de sang).

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Plasmodium malariae
Distribution gographique :
Presque cosmopolite
Frquent en Afrique et en Asie,
Moins frquent en Amrique

Htes dfinitifs :

Homme.

Famille :

Classe :

Plasmodiidae

Haemosporidea

Nom commun :

Pathologie :

Paludisme
Malaria
Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteur :

Moustiques femelles

Genre
Anopheles spp.

Fivre quarte bnigne (F).


Malariae malaria (En).
La cuartana (Es).
Injection de salive contenant des sporozotes lors
du repas sanguin dun vecteur infect.
Transfusion sanguine.
Congnitale.
Localisation des parasites :

Intracellulaire dans les cellules hpatiques.


Intracellulaire dans les globules rouges.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des parasites dans le sang :


en frottis sanguin (diffrentiation des espces, quantification).
en goutte paisse (pr-diffrentiation des espces, quantification).
en QBC (pr-diffrentiation des espces, quantification).
Srologie :
Recherche des antignes de Plasmodium : pLDH, aldolase (tests rapides).
Recherche danticorps spcifiques (IFA, ELISA) [usage pidmiologique].
Recherche dADN spcifique par PCR.
(Dtection du pigment malarien ou/et de laltration des globules rouges parasits : automates hmatologiques).

Morphologie trophozotes en frottis sanguin :

Morphologie trophozotes en goutte paisse :

Morphologie schizontes en frottis sanguin :

Morphologie schizontes en goutte paisse :

Morphologie gamtocytes en frottis sanguin :

Morphologie gamtocytes en goutte paisse :

Caractristiques principales en frottis sanguin :


Hmaties parasites normales ou rduites.
Tous les stades volutifs sont possibles.
Forme en bande typique pour les trophozotes (rare).
Schizontes mrs 6 - 12 noyaux, situs la priphrie du
parasite avec pigment rassembl au centre (forme de
marguerite).
Les parasites sont petits, compacts, foncs
Pigment prcoce.

Caractristiques principales en goutte paisse :

Tous les stades volutifs sont possibles.


Schizontes mrs 6 - 12 noyaux, situs la priphrie du
parasite avec pigment rassembl au centre (forme de
marguerite).
Les parasites sont petits, compacts, foncs
Pigment prcoce.

Autres signes biologiques associs :

Fivre.

Confusions possibles :

Autres Plasmodium spp.


Plaquettes sanguines.
Corps de Howell-Jolly.
Babesia spp. et Theileria spp.

Remarques :
1.
2.
3.
4.

En goutte paisse, laspect sale des parasites de Plasmodium malariae facilite son diagnostic diffrentiel.
Il est possible de rencontrer tous les stades en mme temps dans le sang priphrique.
Parasitmie nexcdant jamais 1 % des globules rouges infests (soit 50.000 parasites par l de sang).
Plasmodium knowlesi, une espce de Plasmodium infestant le singe et sporadiquement lhomme en Malaisie et Borno, montre une
morphologie comparable P. malariae, mais avec une parasitmie beaucoup plus leve (jusqu plus de 10% des globules rouges infects
ou plus de 500.000 parasites par l de sang. Comme P. knowlesi se rplique toutes les 24h, un traitement rapide et efficace est essentiel.
Quelques cas ont aussi t dcrits en Thalande, au Myanmar, Singapour et au Philippines. Tout patient en provenance du sud-est
asiatique et prsentant limage dune hyper-parasitmie P. malariae doit tre trait comme un accs svre de P. falciparum.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN FROTTIS SANGUIN :

Caractristiques

Plasmodium falciparum

Plasmodium vivax

Plasmodium malariae

7 - 21 jours
Moyenne 12
Non
Non, mais exceptionnellement
recrudescence possible jusqu 1
an aprs linfestation

8 - 31 jours
Moyenne 14
Oui

19 - 37 jours
Moyenne 28
Non

Oui (entre 6 mois et +/- 4ans)

Possible aprs une longue priode


(recrudescence jusqu 52 ans)

Possible, mais normalement


suppression spontane

24-48 heures

48 heures

72 heures

48 heures

Aspect des hmaties


parasites

Taille normale (infeste tous les types


de globules rouges)

Grands globules ples (infeste


principalement les jeunes globules
rouges)

Taille normale ou rduite (infeste


principalement les vieux globules
rouges)

Agrandie, normale ou rduite;


ovodes ou effiloches

Granulations dans les


globules parasits

Taches de Maurer (pH=8): en petit


nombre dans les hmaties avec des
trophozotes mrs

Granulations de Schffner :
ponctuation abondante trouve dans
les hmaties plus ges

Priode d'incubation
Hypnozotes
Rechutes
Dure schizogonie
rythrocytaire

Stades prsents
Parasitmie

Le plus souvent uniquement des


trophozotes et/ou des gamtocytes.
Exceptionnellement, en cas
d'infestation grave des schizontes et
de jeunes gamtocytes
Jusqu plus de 2.500.000/l

Non

Plasmodium ovale
11 16 jours
Oui

Granulations de Schffner :
ponctuations abondantes et
videntes, trouves dans presque
toutes les hmaties.

Tous les stades possibles

Tous les stades possibles

Tous les stades possibles

Maximum 200.000/l

Maximum 50.000/l

Maximum 200.000/l

Forme de bague, fine, souvent situ


la priphrie des hmaties

Forme de bague assez large

Anneau compact

Anneau assez compact

1 2 grains de chromatine

Assez volumineux, parfois 2 grains


de chromatine

Normalement 1 grain lourd de


chromatine

1 grain lourd

1/5 1/3 du diamtre

1/4 2/3 du diamtre

1/4 2/3 du diamtre

1/4 2/3 du diamtre

Bien visible
Non
Souvent

Grande
Non
Parfois

Pas ou trs peu visible


Parfois
Pratiquement jamais

Pas ou peu visible


Non
Pratiquement jamais

Amibode, fragment, occupant toute


l'hmatie
1 ou 2 noyaux dvelopps
1 ou plusieurs, grandes
Petits grains bruntres, parfois une
grosse masse dans le cytoplasme

Compact, parfois amibode


Forme typique en bande
1 ou 2 noyaux volumineux
Non visible

peu amibode, n'occupant pas toute


l'hmatie
1 ou 2 noyaux lourds
Petites, visibles ou non

Oui (gros grains noirtres)

Trs rare

Dvelopp, irrgulier
2 ou plusieurs, variables en taille
Parfois jusque 4 petites vacuoles
Ponctuations sombres disperses
sur le parasite

Compact
24
Non
Ponctuations sombres abondantes
sur le parasite

Compact
2-4
Non
Ponctuations sombres disperses
sur le parasite

Trophozotes jeunes :
Cytoplasme
Noyau
Taille du trophozote par
rapport au diamtre du
globule rouge
Vacuole
Pigment
Polyparasitisme

Trophozotes gs :
Cytoplasme

Peu amibode, taille moyenne

Noyau
Vacuole(s)

1 ou 2 noyaux tirs
1 ou plusieurs, variables en taille
Exceptionnellement prsent, en 1
grain noir

Pigment

Schizontes jeunes :
Cytoplasme
Noyaux
Vacuole(s)

Peu dvelopp, irrgulier


24
Non

Pigment

Concentr sur le parasite

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN FROTTIS SANGUIN (SUITE):

Caractristiques
Schizontes mrs

Plasmodium falciparum

Plasmodium vivax

Plasmodium malariae

Plasmodium ovale

Occupe 2/3 de l'hmatie


8 - 24, parfois plus
disperss irrgulirement

Occupe presque toute l'hmatie


12 24
Gnralement 16
Concentr en 1 ou 2 masses sur
le parasite

Occupe toute l'hmatie


6 -12, gnralement 8
situs la priphrie
Concentr en une masse, parfois
situ au centre du parasite

N'occupe pas toute l'hmatie


Concentr en 1 ou 2 masses sur
le parasite

Gris-bleu, arrondi ou ovalaire,


occupe pratiquement toute
l'hmatie

Gris-bleu, arrondi, occupe


pratiquement toute l'hmatie

Gris-bleu, arrondi, n'occupe pas


toute l'hmatie

1 grain de chromatine bien


dlimit

1 grain de chromatine bien


dlimit

1 grain de chromatine bien


dlimit

Ponctuations bruntres
disperses sur le parasite

Ponctuations sombres
disperses sur le parasite

Ponctuations sombres
disperses sur le parasite

Rostre incolore, arrondi ou


ovalaire; occupe pratiquement
toute l'hmatie

Rostre incolore, arrondi ou


ovalaire; occupe pratiquement
toute l'hmatie

Rostre incolore, arrondi ou


ovalaire; n'occupe pas toute
l'hmatie

1 grande tache de chromatine


diffuse

1 grande tache de chromatine


diffuse

1 grande tache de chromatine


diffuse

Granulations brunes noirtres


disperses sur le parasite

Ponctuations sombres
disperses sur le parasite

Ponctuations sombres
disperses sur le parasite

Cytoplasme
Noyaux
Pigment

Concentr sur le parasite

4 - 16

Macrogamtocytes (gamtocyte femelle) :


Cytoplasme
Noyau
Pigment

Gris-bleu, en forme de croissant,


exceptionnellement arrondi ou
ovalaire; l'hmatie parasite est
souvent invisible
1 grain de chromatine bien
dlimit
Granulations sombres en forme
de grains de riz noirs ou jaune or,
situs sur le noyau

Microgamtocytes (gamtocytes mle) :


Cytoplasme
Noyau
Pigment

Rostre en forme de croissant,


exceptionnellement arrondi ou
ovalaire; l'hmatie parasite est
souvent invisible
1 grande tache de chromatine
diffuse
Granulations sombres, noires ou
jaune-or, en forme de grains de
riz, disperses sur le parasite

Caractristiques les plus importantes :








Hmaties parasites normales.


Normalement pas de schizontes
dans le sang priphrique,
except en cas d'infestation
grave.
Trophozotes fins, en forme de
bagues; formes accoles; image
uniforme, polyparasitisme.
Gamtocytes en forme de
bananes; une dizaine de jours
aprs l'invasion initiale des
hmaties.
Taches de Maurer possible
(pH=8).
Fortes parasitmies possibles
pouvant atteindre plus de 50 %.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale







Hmaties parasites agrandies


et dformes.
Tous les stades volutifs sont
possibles.
Forme amibode typique pour
les trophozotes gs.
Schizontes mrs 16 noyaux ou
plus.
Granulations de Schffner fines,
mais absentes chez les formes
jeunes.
Parasitmie n'excdant pas 4%.










Hmaties parasites de taille


normale ou rduite.
Tous les stades volutifs sont
possibles.
Forme en bande typique pour
les trophozotes (mais rare).
Schizontes mrs 6 - 12
noyaux, situs la priphrie du
parasite avec pigment
rassembl au centre.
Les parasites sont petits,
compacts, foncs
Pigment prcoce.
Parasitmie n'excdant jamais 1
%. (sauf si infestation par
P. knowlesi)









Hmaties parasites variables


en volume; dformes.
Tous les stades volutifs sont
possibles.
Parasites moyennement
compacts.
Schizontes mrs 8 noyaux en
moyenne, n'occupant pas toute
l'hmatie.
Granulations de Schffner
videntes.
Parasitmie n'excdant jamais 4
%.

TABLEAU COMPARATIF DES ESPCES DE PLASMODIUM EN GOUTTE PAISSE :

Caractristiques

Plasmodium falciparum

Plasmodium vivax

Plasmodium malariae

Plasmodium ovale

Non

Granulation de Schffner :
ponctuation abondante trouve
dans "fantmes" des hmaties.

Non

Granulation de Schffner :
ponctuations abondantes et
videntes trouves dans les
"fantmes" des hmaties.

Le plus souvent uniquement des


trophozotes et/ou des
gamtocytes.
Exceptionnellement, en cas
d'infestation grave des
schizontes et de jeunes
gamtocytes

Tous les stades possibles

Tous les stades possibles

Tous les stades possibles

Petits

Petits moyens

Annulaire arrondie, compacte

Annulaire arrondie, compacte

Rgulier et dense
Normalement 1 grain de
chromatine
Dispers, abondant,

Assez rgulier et charnu

1 2 grains de chromatine
Exceptionnel, concentr

Petits grands
Anneau ouvert ou forme
irrgulire
Irrgulier et fragment
Assez volumineux, parfois 2
grains de chromatine
Rarement, dispers et fin

Petit, compact
8 24, parfois plus
Concentr en 1 masse

Grand
12 24, gnralement 16
Masse diffuse

Petit, compact
6 - 12, gnralement 8
Concentr, parfois central

Moyen
4 - 16, gnralement 8
Concentr

Banane
(exceptionnellement arrondie)

Ronde, grande

Ronde, compacte

Ronde, moyenne

1 tache bien dfinie

1 tache bien dfinie, souvent


priphrique

1 tache bien dfinie (sauf pour


des parasites gs, pour
lesquels le noyau est souvent
masqu par le cytoplasme fonc)

1 tache bien dfinie

Granulation sombre en forme de


grains de riz, dispers

Dispers, fin

Dispers en gros grains

Dispers en gros grains

Granulations autours des


parasites (fantmes des
globules rouges)

Stades prsents

Trophozotes :
Taille
Forme
Cytoplasme

Petits moyens
Forme de bague, couramment en
virgule
rgulier, fin, charnu

Noyau
Pigment

1 grain lourd
Dispers en gros grains

Schizontes :
Taille
Noyaux
Pigment

Gamtocytes :
Forme
Noyau
Pigment

Caractristiques les plus importantes :







Normalement pas de
schizontes dans le sang
priphrique, except en cas
d'infestation grave.
Trophozotes fins, en forme
de bagues; image uniforme.
Gamtocytes en forme de
bananes.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale






Tous les stades volutifs


sont possibles.
Forme amibode typique pour
les trophozotes gs.
Schizontes mrs 16
noyaux ou plus.
Granulations de Schffner
fines, souvent visibles dans
les "fantmes" des globules.







Tous les stades volutifs


sont possibles.
Schizontes mrs 6 - 12
noyaux, situs la priphrie
du parasite avec pigment
rassembl au centre.
Les parasites sont petits,
compacts, foncs
Pigment prcoce.






Tous les stades volutifs


sont possibles.
Parasites moyennement
compacts.
Schizontes mrs 8 noyaux
en moyenne.
Granulations de Schffner
trs souvent videntes dans
les fantmes des globules.

Babesia spp.
Distribution gographique :

Diffrents animaux
domestiques.
Diffrents animaux
sauvages.
(Homme).

Babesiidae

Piroplasmidea
Pathologie :

Amrique, Europe, Asie


Afrique ?

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite ?

Htes dfinitifs :

Famille :

Babsiose, piroplasmose (F).


Babesiosis, piroplasmosis(En).
Babesiose, piroplasmose (Es).

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Vecteur et rservoir :

Tiques dures / molles

Genre
Ixodes spp.(dures),
Ornithodoros spp.(molles)

Injection de salive contenant des sporozotes


lors du repas sanguin dun vecteur infest.
Transfusion sanguine.
[Transplacentaire] ?.
Localisation des parasites :

Intracellulaire dans les globules rouges, (les


monocytes).

Mthodes diagnostiques :

Recherche des parasites dans le sang (goutte paisse, frottis sanguins).


Srologie : Recherche danticorps spcifiques de type IgM et/ou IgG (IFAT, ELISA,).
Recherche dADN spcifique par PCR.
[Recherche des parasites aprs inoculation lanimal].
Morphologie des trophozotes :
(en frottis sanguin color au Giemsa)
Dimensions :

Variable, de 1 5 m.

Localisation :

De 1 4 trophozotes par
globule rouge (extracellulaire)

Forme :

Rond, ovode, piriforme.

Cytoplasme :

Color en bleu, sans pigment.

Noyau :

1 petit noyau rouge (puis 2, 3 et


4 noyaux)
Multiplication par
bourgeonnement qui restent
accols par leur extrmit
pointue, donnant une image en
trfle 2,3 ou 4 feuilles (croix
de Malte). Jamais de pigment.
Confusions possibles :

Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

Fivre.
Anmie
Thrombocytopnie.

Trophozotes de Plasmodium spp.


(principalement P.falciparum).
Plaquettes sanguines.
Corps de Howell-Jolly.
Theileria spp.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Plus de 110 espces sont dcrites en mdecine vtrinaire mais seulement quelques unes comme infestant aussi lhomme : Babesia microti, Babesia
WA, Babesia MO1 (Amrique), Babesia divergens, Babesia bovis (Europe),
Pathologie rare. La majorit des infestations humaines devraient tre asymptomatiques, comme le laisse supposer les rsultats de surveillance
srologique en zone endmique. Limmunodpression, la splnectomie et aussi le grand ge, confrent lhomme une sensibilit particulire.
Babesia divergens (Europe) serait cependant plus dangereuse mais heureusement aussi plus rare.
Le diagnostic diffrentiel par rapport des trophozotes de Plasmodium falciparum est difficile, ce qui pourrait tre lorigine dattribution errone de
malaria ces infestations (surtout en zone o la malaria est endmique). Ceci pourrait expliquer le peu de cas diagnostiqus en Afrique.
La coinfection avec Borrelia burgdorferi (maladie de Lyme, mode de contamination identique, vecteurs coinfests frquents et transmission
exprimentale possible des deux agents pathognes durant un mme repas sanguin) est bien dcrite en Amrique (jusqu 89 % des cas babsioses).
Une autre famille de bactrie (Ehrlichia spp.) transmise aussi par des tiques au Etats-Unis et au Japon, provoque lehrlichiose granulocytique humaine
(EGH). Il sagit dune pathologie rare avec un tableau biologique assez similaire. Son diagnostic est srologique.
Il existe une transmission transovarienne des parasites chez les tiques. Lhte vertbr nest donc pas indispensable la survie du parasite. La
terminologie d hte dfinitif pour le vertbr est donc impropre.
Une autre famille de parasites assez similaires Theileria spp. infeste les animaux. Il naurait cependant pas t dcrit dans des infestations humaines.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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Toxoplasma gondii
Distribution gographique :

Classe :

Sarcocystidae

Coccidea

Nom commun :

Pathologie :

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Famille :

Toxoplasmose (F).
Toxoplasmosis (En).
Toxoplasmosis (Es).

Htes intermdiaires :

Mammifres

Oiseaux

Flids (chats,)

Mode de contamination :

Transplacentaire (+ transfusion, greffe dorgane).

Ingestion doocyste sporuls [via les chats].


Ingestion de viande contamine (bradyzotes ou
plus rarement tachyzotes) [via les moutons].
Ingestion de bradyzotes aprs manipulation de
viande crue.
Localisation des tachyzotes :

Homme

Variable (cerveau, yeux, cur, gnralise,).


Mthodes diagnostiques :

Indirect : srologie (Ig M, Ig G, Ig A, [Ig E]). Presque uniquement dans le cadre dinfestations
congnitales.
Recherche des tachyzotes (placenta, liquide amniotique, L.C.R., moelle osseuse, ganglions, empreinte
dorganes, ) aprs coloration au Giemsa. Dans le cadre de patients immunodprims, on peut aussi
retrouver des tachyzotes dans les monocytes du sang priphrique.
Recherche de bradyzotes ou tachyzotes dans les coupes histologiques (P.A.S.)
[Recherche des parasites aprs culture cellulaire ou inoculation lanimal].
Recherche dADN spcifique par PCR.
Radiographie, scanner, chographie, fond de lil,
Morphologie des tachyzotes (Giemsa) :
(homme)
5 -12 m x 2 4 m, intracellulaires (macrophages)
[ovode] ou extracellulaires [en forme de goutte deau
un peu arque], cytoplasme bleut avec un noyau
central granuleux rougetre.
Morphologie des kystes :
(homme animal)
(principalement dans le cerveau et dans les muscles)
Jusqu 200 m, sphriques ou ovodes, entours
dune membrane paisse, contenant de 50
quelques milliers de bradyzotes.
Morphologie des oocystes :
(excrments de chats)
10 15 m, ovodes. Les oocystes non sporuls (non
infectants) contiennent une masse granuleuse
lintrieur, alors que les oocystes sporuls contiennent
2 sporocystes composs chacun de 4 sporozotes.
Autres signes biologiques associs :

Variables, monocytose frquente.


[Immunodpression].

Confusions possibles :

Leishmania spp., Pneumocystis spp.,


Sarcocystis spp..
Gamtocytes de Plasmodium falciparum.

Remarques :
1.
2.
3.

La recherche parasitologique est assez difficile en raison de la raret des tachyzotes dans les prlvements.
La srologie, principalement utilise dans le cadre des infestations congnitales peut aussi tre utile dans le cadre de patients
immunodprims. Son interprtation est nanmoins difficile.
Les oocystes non sporuls excrts ncessitent une maturation de 1 5 jours (en fonction des conditions extrieures) avant de devenir
infestants. Ces oocystes sont trs rsistants.

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

86 / 138

Sarcocystis spp.
Distribution gographique :
Cosmopolite

Carnivores.
Omnivores.

(Homme).

Classe :

Sarcocystidae

Coccidea

Nom commun :

Pathologie :

Htes dfinitifs :

Famille :

Htes
intermdiaires :

Sarcocystose (intestinale ou musculaire),


Sarcosporidiose. (F).
(Intestinal or muscular) Sarcocystosis (En).
Sarcocystosis intestinal o muscular (Es).
Mode de contamination :

En ingrant de la viande mal cuite, de porc ou de


buf (hte intermdiaire) contenant des kystes
(forme intestinale).

Fco-oral : Ingestion de sporocystes provenant


des excrments dun hte dfinitif infest. (forme
musculaire).

Herbivores.
Porcs.

Localisation des parasites :


(Homme)

Forme intestinale : Schizogonie dans les cellules pithliales du


duodnum et du jjunum, limination des oocystes dans les
selles.
Forme musculaire : Courte double schizogonie dans
lendothlium vasculaire, enkystement dans les muscles
(sarcocystes).

Mthodes diagnostiques :

Forme intestinale :

Recherche des oocystes sporuls dans les selles : examen direct, technique de concentration par sdimentation ou
par flottation.

Recherche dADN spcifique par PCR.


[Forme musculaire :

Identification des kystes (sarcocystes) dans des biopsies musculaires]

Morphologie des oocystes :


(dans les selles)
Dimensions :
11 17 m x 10 16 m.
Forme :

Ovode ou variable.

Paroi :

Trs fine et trs fragile, souvent


casse entranant la libration des
2 sporocystes.

Contenu :

2 sporocystes sporuls ovodes,


contenant 4 sporozotes en forme
de bananes.
Sporocystes toujours sporuls,
contenant la plupart du temps
une masse granuleuse
rfringente.
Confusions possibles :

Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

Diarrhe aqueuse non sanglante (forme intestinale).


Eosinophilie frquente.
Prsence frquente de cristaux de Charcot-Leyden
dans les selles.

Kystes de Giardia lamblia.


Certaines coccidies animales en transit.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Les deux formes dinfestation, tant intestinales que musculaires, seraient la plupart du temps asymptomatiques. Ces parasites seraient plus des opportunistes
(immunodprims).
Dans la forme intestinale, les oocystes apparaissent dans les selles 2 semaines aprs linfestation. Le nombre de parasites prsents dans les selles est souvent
trs bas, ncessitant des techniques denrichissement.
Lorsque lhomme est lhte dfinitif (Sarcocystis bovi-hominis, avec un herbivore comme hte intermdiaire ; ou Sarcocystis sui-hominis, avec un porc comme hte
intermdiaire), on obtient une sarcocystose intestinale. Lorsque lhomme est lhte intermdiaire (diffrentes autres espces de Sarcocystis, diffrents htes
dfinitifs), on obtient une sarcocystose musculaire.
Les oocystes prsents dans les selles humaines ne seraient pas infectieux pour lhomme.
Les oocystes de sarcocystis spp. sont majoritairement Alcoolo-Acido rsistants. Aprs coloration de Ziehl-Neelsen, la majorit des oocystes seront colors en rose
ple pourpre intense sur un fond bleu. Certains oocystes resteront cependant incolores.
Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou en bleu 436 nm). Cette
technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par sdimentation).
Durant la courte partie sanguine du cycle de ce parasite chez lhomme (pour la forme musculaire uniquement), les rares sporozotes prsents dans le sang peuvent
tre confondus avec des gamtocytes de P. falciparum ou avec des toxoplasmes.
Isospora hominis est lancien nom pour le parasite de la forme intestinale humaine de Sarcocystis spp.

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Isospora belli
Distribution gographique :

Homme.

Eimeriidae

Coccidea
Pathologie :

Isosporose (F).
Isosporiasis (En).
Isosporiasis (Es).

Htes intermdiaires :
Sans hte intermdiaire

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite
Plus commun en rgions
tropicales ou subtropicales
Htes dfinitifs :

Famille :

Mode de contamination :

Fco-oral : en ingrant des oocystes sporuls.

Et

Localisation des parasites :

sans vecteur.

Schizogonie intracellulaire dans les cellules pithliales


du duodnum et du jjunum.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des oocystes dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation
ou par flottation.
Recherche des parasites dans un produit daspiration duodnal (ou dans des biopsies duodnales).
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(dans les selles)
Dimensions :

25 - 33 m x 12 16 m.

Forme :

Ellipsode, en double obus.

Paroi :

Trs mince et trs transparente.

Contenu :

1 puis 2 sporoblastes non


sporuls (masse granuleuse).

Caractristiques :

Paroi trs transparente

Autres signes biologiques associs :

Diarrhe aqueuse non sanglante.


Eosinophilie frquente.
Prsence frquente dacides gras dans les selles.
Prsence frquente de cristaux de Charcot Leyden
dans les selles.

Confusions possibles :

Coccidies en transit : Eimeria stiediae ou E.


perforans (viande de lapin), E. sardinae, E.
clupearum (sardines, hareng, maquereaux), ...

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Parasite exclusivement humain, normalement peu pathogne, il devient plus agressif en cas dimmunodpression (parasite
opportuniste).
Malgr sa grande taille, ce parasite nest que peu visible sous un grossissement de 100 x (paroi fine et transparente). Sa recherche
doit donc tre faite avec un grossissement 400 x. Les examens rpts sont parfois utiles pour les mettre en vidence.
Les oocystes ne sont jamais sporuls lors de lmission. Ils ncessitent une maturation dans le milieu extrieur avant de devenir
infestants. Cette maturation dure de quelques jours quelques semaines, en fonction de la temprature et de lhumidit. A la fin de la
maturation, un oocyste contiendra deux sporocystes forms chacun de 4 sporozotes.
Les oocystes sont trs rsistants (ils restent viables durant plusieurs mois dans des milieux liquides). Ils rsistent certains
dsinfectants (crsyl, iode, hypochlorites, soude caustique et produits base daldhydes). Ils sont cependant rapidement tus par
lammoniaque ou le formol).
Les oocystes dIsospora belli sont majoritairement Alcoolo-Acido rsistants. Aprs coloration de Ziehl-Neelsen, la majorit des
oocystes seront colors en rose ple pourpre intense sur un fond bleu. Certains oocystes resteront incolores. La forme typique en
double obus sera toujours visible.
Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou
en bleu 436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs
concentration par sdimentation).

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Cyclospora cayetanensis
Distribution gographique :

Coccidea

Cyclosporose (F).
Cyclosporosis (En).
Cyclosporosis (Es).

Htes intermdiaires :

Homme.
Autres animaux ?

Eimeriidae
Pathologie :

Sans hte intermdiaire

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite

Htes dfinitifs :

Famille :

Mode de contamination :

Fco-oral : en ingrant des oocystes sporuls.

Et

Localisation des parasites :

Sans vecteur.

Schizogonie intracellulaire dans les cellules pithliales


du duodnum et du jjunum.

Mthodes diagnostiques :

Recherche des oocystes dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation.
Recherche des oocystes dans un produit daspiration duodnal (ou dans des biopsies duodnales).
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(Dans les selles)
Dimensions :

8 10 m.

Forme :

Rond.

Paroi :

Mince et transparente mais


bien visible.

Contenu :

Nombreux corps sphriques


rfringents ( morula ).

Caractristiques :

Transparent, aspect en lentille


de verre.

Autres signes biologiques associs :

Diarrhe aqueuse non sanglante.

Confusions possibles :

Cryptosporidium spp. (aprs coloration de ZiehlNeelsen).


Coccidies animales en transit.

Remarques :
1. Parasite normalement peu pathogne, il devient plus agressif en cas dimmunodpression (parasite opportuniste).
2. Les oocystes retrouvs dans les selles sont gnralement non sporuls. La sporulation qui se droule dans le
milieu extrieur, ncessite de quelques jours quelques semaines (en fonction de la temprature et de lhumidit).
Un oocyste sporul contient deux sporocystes contenant chacun deux sporozotes.
3. Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
4. Aprs coloration au Ziehl-Neelsen modifie, ils apparaissent colors en rose violet sur un fond bleu. Tous les
oocystes de C. cayetanensis ne sont cependant pas Alcoolo-Acido Rsistants.
5. Aprs coloration rapide de Heine, les oocystes apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
6. Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm,
en vert 436 nm ou en bleu 436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches
(examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par sdimentation).
7. Les oocystes de C. cayetanensis ne prennent pas le lugol.

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Cryptosporidium spp.
Distribution gographique :

Homme.

De trs nombreux
animaux.

Cryptosporiidae

Coccidea
Pathologie :

Cryptosporidiose (F).
Cryptosporidiosis (En).
Cryptosporidiosis (Es).

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :

Classe :

Nom commun :

Cosmopolite.
Htes dfinitifs :

Famille :

Fco-oral : en ingrant des oocystes sporuls.


(Arienne ?)

Sans hte intermdiaire

Localisation des parasites :

et

Schizogonie intracellulaire dans les cellules pithliales


de lintestin grle.

sans vecteur.

[plus rarement dans lpithlium pulmonaire, ou les


cellules hpatiques ou pancratiques].

Mthodes diagnostiques :

Recherche des oocystes dans les selles : coloration rapide de Heine, de Ziehl-Neelsen modifie, soit
directement sur les selles, soit aprs concentration par sdimentation.
[Recherche des oocystes dans les aspirations bronchiques, lavages broncho-alvolaire ou biopsies.]
Recherche de coproantignes : EIA, ELISA,
[Recherche danticorps spcifiques (IFAT, )]
Recherche dADN spcifique par PCR.
Morphologie des oocystes :
(Aprs coloration spcifique)
Dimensions :

3 - 6 m.

Forme :

Rond ou lgrement ovodes.

Contenu :

Quelques petites structures


en forme de lunes (sporozotes)
Les oocystes, plus particulirement leurs priphries, sont
Alcoolo-Acido rsistants (rouge
rose aprs Ziehl-Neelsen).
Confusions possibles :

Caractristiques :

Autres signes biologiques associs :

Diarrhe aqueuse non sanglante.


Prsence frquente de cristaux de Charcot-Leyden
dans les selles.

Levures (roses trs ple aprs Ziehl-Neelsen).


Cyclospora cayetanensis.

Remarques :
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

La cryptosporidiose est principalement une infestation opportuniste : Si chez un patient immunocomptent, lpisode dpasse rarement 10
jours et rgresse spontanment, chez un sujet immunodprim, lvolution na aucune tendance la rmission.
Les auto-infestations sont possibles (oocystes directement infectants).
Les selles des malades tant trs infectantes, il est important de prendre des prcautions drastiques dans les services o sjournent des
personnes immunodprimes.
Les oocystes ne sont identifiables ni dans un examen direct ni aprs coloration au lugol (les oocystes ne prennent pas le lugol). Ils sont
indistinguables des levures et dautres lments ovodes. Une coloration spcifique est donc indispensable.
Aprs coloration au Ziehl-Neelsen modifi, les oocystes apparaissent rose violet sur un fond bleu. Aprs coloration rapide de Heine, ils
apparaissent incolores et trs rfringents sur un fond rougetre.
Les oocystes peuvent aussi tre identifis sur base de leur auto-fluorescence : Ils fluorescent en violet 405 nm, en vert 436 nm ou en bleu
436 nm). Cette technique nest utilisable que sur des prparations fraiches (examen direct ou aprs SAF fixation ou aprs concentration par
sdimentation).
Cryptosporidium parvum et Cryptosporidium hominis (regroups en C. parvum genotype 1) seraient les principaux agents de linfestation
humaine. Des infestations humaines par C. felis (flins), C. meleagridis (oiseaux), C. canis (canids), C. nasorum (poissons), C. muris
(rongeurs), etc. ont aussi t rapportes. La spcificit dhte ne serait pas rigoureuse.
Les Cryptosporidium sont retrouvs dans leau potable et dans les eaux de baignade (piscines, jacuzzis, lacs, rivires, sources, etc.)
contamines par des excrments. Comme les oocystes sont trs rsistants aux dsinfectants base de chlore, une filtration est ncessaire.
Labsence actuelle de traitement efficace, limite lintrt de la recherche des Cryptosporidium spp.

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES

CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Pneumocystis jiroveci
(Pneumocystis carinii)
Distribution gographique :

Htes dfinitifs :

Classe :

Pneumocystidaceae

Archiascomycetes

Nom commun :

Pathologie :
Pneumonie Pneumocystis carinii (F)
Pneumocystis carinii pneumonia (En)
Neumonia Pneumocystis Carinii (Es)

Cosmopolite

CHAMPIGNONS

Famille :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :
Arienne ?

Htes intermdiaires

Homme.

Jeunes enfants avec srologie souvent positive

 rservoir ?
 infection (infestation) latente ?

vecteur
?

Localisation du parasite :
Pulmonaire
(Possibilit de dissmination extra pulmonaire).

Mthodes diagnostiques :

Radiographie pulmonaire.
Recherche des parasites dans une expectoration induite, un lavage alvolaire ou une empreinte de biopsie
pulmonaire (Bleu de toluidine O, Giemsa, ou RAL 555).
Recherche dADN spcifique par PCR sur biopsie pulmonaire ou L.B.A.
Morphologie des diffrentes formes
Trophozotes :

Soit petite forme ovale,


Uni nucl,
de 2 4 m (jeunes).
Soit amibode,
Uni nucl,
de 4 10 m (gs).

Pr kystes :

2 6 noyaux,
paroi paissie,
de 3 6 m.

Kystes :

contenant 8 parasites,
paroi paisse,
de 4 8m.

Kystes vides :

de 4 8 m,
Paroi paisse.

Autres signes biologiques associs :

Immunodpression.

Confusions possibles :

Histoplasma capsulatum

Remarques :
1. La paroi des kystes et des pr-kystes est colore en bleu au bleu de toluidine O.
2. Les trophozotes et les corps intra kystiques sont colors en bleu avec un noyau rouge au Giemsa. La plupart du
temps, seul le noyau est color. La paroi nest jamais colore.
3. Pneumocystis carinii est lancien nom pour Pneumocystis jiroveci.

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Famille :

Borrelia spp.

Spirochataceae

[toutes les Borrelia spp. sauf Borrelia burgdorferi]


Distribution gographique :

Nom commun :

Pathologie :
Fivres rcurrentes poux ou tiques,
Borrliose (F).
Relapsing fever, louse or tick borne
Borreliosis(En).
Borreliosis, fiebre recurrente por piojos o por
garrapatas (Es).
Mode de contamination :

Ou

Localisation rgionale et
5
endmique

Htes intermdiaires :

Vecteurs :

Homme .
Animaux et Hommes

Poux :

Vecteurs et Rservoir :

Pediculus humanus corporis


5

Pntration transcutane (via une excoriation ou les


conjonctives) des Borrelia aprs crasement dun pou
4
infest .
Injection de salive ou de liquide coxal contenant des
5
Borrelia lors du repas sanguin dun vecteur infest.
(Transfusion sanguine, rare).
(Congnitale, exceptionnelle).

Localisation de la bactrie :

Tiques molles :
Ornithodorus spp,

Classe :
Spirochaetes

Cosmopolite et pidmique .

Htes dfinitifs :

BACTERIES

Sang, (L.C.R.).

Mthodes diagnostiques :

Recherche de la bactrie dans le sang : examen direct, Woo, goutte paisse colore au Giemsa.
(recherche des bactries dans le LCR ou lurine : examen direct, coloration au Giemsa).
(tests srologique, peu tudis, peu disponibles, raction croises avec Treponema spp.)
Morphologie de la bactrie
(aprs coloration au Giemsa)
Fine et longue bactrie 10 20 m x 0,5 m
Hlicodale,
Colore en Bleu (au Giemsa)
Trs mobile (examen frais)
Autres signes biologiques associs :

Thrombocytopnie et altration des paramtres de


coagulation frquente.
Anmie frquente.
Leucocytose (neutrophiles) importante (30 % des
cas), ou leucopnie.

Confusions possibles :

Trponmes.
Leptospires.
Exflagellation des gamtocytes de
Plasmodium spp.

Remarques :
1.

Cette bactrie se retrouve dans des notes de parasitologie en raison de lutilisation de techniques de parasitologie pour la mettre en vidence
(examen frais du sang, Woo, goutte paisse, etc.), mais aussi en raison de son diagnostic diffrentiel de la malaria.
Les Borrelia sont des spirochtes hlicodaux trs mobiles Gram ngatif qui peuvent aussi tre colors au Giemsa. Toutes les espces de
Borrelia ont la mme morphologie et sont indistinguables au microscope. La culture nest pas une mthode de diagnostic de routine.
Le prlvement du sang devrait concider avec le pic fbrile (bactrimie maximale, sensibilit optimale).
Les fivres rcurrentes poux sont causes par Borrelia recurrentis (frquentes sur les haut plateaux africains : Ethiopie, Rwanda, Burundi ;
moins frquente en Afrique du nord-ouest et de lest, au Prou, en Bolivie et en Indes.
Les fivres rcurrentes rgionales tiques sont causes par : B. duttoni (Madagascar, Afrique centrale et La runion) ; B. hispanica (Afrique
centrale et du nord, Espagne, Grce) ; B. persica (Egypte, Iran, Afghanistan), B. turicatae, B. parkeri, et B.hermsii (USA) ; B. venezuelensis
(Amrique du sud), ... Dans ces cas, les bactries sont aussi transmisses dune gnration de tiques lautre (transmission transovarienne).
Les tests srologiques non standardiss sont peu tudis et peu disponibles pour les fivres rcurrentes.
Borrelia burgdorferi, agent causal de la maladie de Lyme est aussi transmis par des tiques dures, sans cependant provoquer de fivre
rcurrente. La coloration au Giemsa nest daucune utilit dans ce cadre (bactrimie trop basse pour tre dtecte). Des tests srologiques
sont cependant disponibles.

2.
3.
4.
5.
6.
7.

4
5

Pour Borrelia recurrentis, agent de la fivre rcurrente poux.


Pour les espces de Borrelia responsables des fivres rcurrentes rgionales tiques.

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HELMINTHES
(Mtazoaires)
TREMATODES
CESTODES
NEMATODES

PROTOZOAIRES

AMIBES
FLAGELLES
CILIES
SPOROZOAIRES
CHAMPIGNONS
ET
BACTERIES

CLASSIFICATION
INCONNUE

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Groupe : Protozoaires ?

Blastocystis hominis
Distribution gographique :

incertae sedis

Famille :

Classe :

Opalinidae

Nom commun :

Blastocystea
Pathologie :

Incertaine ?

Cosmopolite
Htes dfinitifs :

Htes intermdiaires :

Mode de contamination :
? fco-oral ?

Homme

Sans hte intermdiaire


Vecteur ?

Localisation des pseudokystes :


Muqueuse du colon et dans lpithlium entre les
cellules.

Mthodes diagnostiques :
Recherche des parasites dans les selles : Examen direct, technique de concentration par sdimentation (sur selles
formoles).

Morphologie des pseudokystes :


Dimensions :

3 40 m.

Forme :

Vacuole, [multi-vacuolaire,
granuleuse, kystique ou
amibode].

Caractristiques :

Les noyaux sont comprims


contre la membrane externe
par une grande vacuole. La
membrane peut tre trs
paisse.

Autres signes biologiques associs :

Confusions possibles :

Kystes de protozoaires.

Remarques :
1. Ce parasite reste bien des gards une nigme : tant pour son cycle et son pouvoir pathogne que pour sa
taxonomie. Aprs avoir t classs parmi les champignons puis les algues, il serait un protozoaire (CavalierSmith, 1998). Sa pathogncit ventuelle dpendrait de lintensit dinfestation (Plus de 5 Blastocystis par
champ microscopique [examen direct, grossissement 400 x]) ou dune association avec dautres organismes.
2. Le parasite nest plus retrouv aprs concentration par sdimentation (sauf si les selles ont t formoles ou
fixes au pralable).
3. Il existe aussi des formes multi-vacuolaires, kystiques ou amibodes. Ces morphologies ne sont cependant pas
reconnaissables lexamen direct.
4. Lusage du lugol de DAntoni peut tre utile.

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TECHNIQUES USUELLES DE DIAGNOSTIC EN PARASITOLOGIE


Par ces techniques, on essayera de mettre en vidence le (ou les) parasite(s) dans un ou plusieurs de ses
stades de dveloppement. Pour cela, un examen macroscopique et /ou un examen microscopique peuvent
tre utiles.

EXAMENS PARASITOLOGIQUES DES SELLES :


L'examen parasitologique des selles permet de mettre en vidence des helminthes et des protozoaires. Il
donne ainsi le diagnostic de certitude d'un grand nombre de parasites qui quittent leur hte dans les selles.
Les conditions de prlvement dterminent la qualit du rsultat de lexamen. Elles tiennent la fois au
malade, au parasite recherch et au matriel. Lors de la dfcation et du prlvement des selles, il ne faut pas
de contact entre lurine et les selles (altration des formes vgtatives des protozoaires). Le prlvement doit
tre ralis avant la mise en route dun traitement spcifique (cette rgle gnrale est applicable tous les
prlvements). Eviter les mdicaments gnant lexamen coprologique ou prtant confusion (charbon, huiles
laxatives, ultra levures, etc.). Eviter les examens complmentaires empchant lexamen coprologique : la
bouillie baryte en transit ou en lavement se retrouve dans les selles pendant une semaine environ.
Lchantillon doit tre dpos au laboratoire dans un emballage correct. Les selles ne peuvent pas tre
recueillies (ou conserves) sur du matriel absorbant (boites d'allumettes, cartons, papiers, langes, etc.) et ce
pour viter la dessiccation. Lidal est dutiliser des petits pots en pastique large ouverture. En zone
tropicale o se matriel nest pas toujours disponible, un morceau de feuille frache de bananier peut
ventuellement tre utilise. La conservation des selles larrive au laboratoire et avant examen, si celui-ci
doit tre diffr, doit se faire de prfrence au rfrigrateur + 4C.
Si lexamen doit tre diffr (envoi par la poste, etc.) et que le dlai risque dtre long, il est recommand
dajouter un produit bloquant les fermentations sans trop altrer les lments parasitaires (formol, merthiolate et
mieux merthiolate iode formol [MIF] ou Sodium acetate/Acide actique/formol [SAF]).
Lexamen parasitologique des selles a ses limites :

Lmission des lments parasitaires peut tre discontinue. Dans ce cas, il faut rpter les
examens et ne pas se contenter dun seul examen ngatif.
Il ny a pas dmission dufs, sil ny a que des vers adultes mles (rare).
Il ny a pas dmission dlments parasitaires pendant la phase de latence qui peut
correspondre la maturation in situ du parasite ou/et la phase de migration interne.
Tous les parasites du tractus digestif et de ses annexes ne donnent pas dlments parasitaires
dans les selles, do la ncessit de bien connatre la biologie du parasite (exemples : ufs
doxyures pondus la marge de lanus, embryophores de certains grands tnias vacus avec
et dans les proglottis entiers, etc.).
Certains ufs prsents dans les selles peuvent indiquer non une infestation, mais
contamination par des ufs de passage (Fasciola spp. par exemple).

Fixation des selles (SAF)


Cette technique permet dviter la dgnrescence des parasites ventuellement prsents dans les selles, sans
modifier leur morphologie. Le but principal est de fixer la morphologie des trophozotes ventuellement
prsents dans les selles, pour pouvoir les identifier aprs coloration permanente (coloration lhmatoxyline
ferrique par exemple). Dans un pot chantillon, ajoutez aussi vite que possible aprs mission, 1 volume de
selles 3 volumes de fixateur SAF. Aprs lajout des selles, mlangez immdiatement et vigoureusement
durant plus ou moins 20 secondes. Prvoyez sur le pot chantillon une tiquette de danger et une indication
du niveau de liquide final [selles + SAF].

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Examen macroscopique
Il est important de raliser l'examen macroscopique ds l'arrive de l'chantillon au laboratoire. Celui-ci
consiste dterminer la consistance (selles moules, molles, diarrhiques, aqueuses, dysentriques), la
prsence ventuelle de sang et de glaires et la prsence de segments de vers ou de vers adultes. Les selles
liquides et/ou sanglantes doivent avoir la priorit pour l'examen microscopique direct (Certains lments,
comme les formes vgtatives des amibes, vont se dcomposer ou se modifier assez rapidement aprs
l'mission des selles et ne seront donc plus identifiables).

Examen direct :
Lexamen direct consiste faire un examen microscopique des selles son arrive au laboratoire, sans
manipulation pralable, aprs adjonction tout au plus deau physiologique ou dun colorant (Lugol, MIF [colorant
fixateur pour les formes vgtatives des protozoaires, bleu de mthylne tamponn, etc.).

Si les selles sont liquides, placez une goutte de celles-ci sur une lame porte-objet. [Pour des selles
muqueuses et/ou sanglantes, prlevez la partie muqueuse]. Recouvrez le tout d'une lamelle couvreobjet (20mm x 20mm). Examinez compltement et systmatiquement l'objectif 10 x la prparation
pour la recherche des ufs, des larves (et des formes vgtatives de Balantidium coli), puis examinez
3 lignes l'objectif 40 x pour la recherche des protozoaires. Les dtails ventuels des ufs seront
observs au 40 x.

Les selles de consistance normale ou presque normale sont mises en suspension sur la lame porteobjet dans une goutte d'eau physiologique. Recouvrez le tout d'une lamelle (20 mm x 20 mm) et
examinez systmatiquement l'objectif 10 x pour la recherche des ufs, des larves et des formes
vgtatives, puis examinez 3 lignes l'objectif 40 x pour la recherche des protozoaires. Les dtails
ventuels des ufs seront observs au 40 x.

L'examen systmatique d'une lamelle 20 mm x 20 mm reprsente plus ou moins 2 mg de selles.


Nombre d'ufs
par prparation
12
39
10 19
20 29
30 et plus

Notation semi-quantitative
des rsultats
Rares
+
++
+++
++++

Le nombre d'ufs trouvs dans l'examen systmatique d'une prparation, permet d'valuer trs grossirement
la charge parasitaire. Cette valuation peut cependant tre utile en clinique. Le nombre d'ufs trouvs
dpend du parasite et de son mode de reproduction, de la consistance et du volume des selles, de lge du
patient, etc. Pour certains parasites, comme les Tnia spp., cette quantification na pas de sens. Pour les
protozoaires, une valuation de la charge parasitaire est peu utilise en raison de sa faible corrlation la
gravit de l'atteinte clinique.

Examen dun frottis pais (technique de KatoKatz modifie) :


Une relative grande quantit de selles est dpose sur une lame. Cette couche paisse doit cependant tre
transparente pour pouvoir tre observe au microscope. La prparation est donc recouverte dun papier
cellophane pralablement imbib de glycrol-vert de malachite (des petits morceaux de 30 mm sur 20 mm de
cellophane sont tremps pendant au moins 24 heures dans la solution glycrine).
La prparation est aplatie par pression, puis aprs un temps dclaircissement de 30 minutes 24 heures,
examine systmatiquement au microscope. (Le temps dclaircissement dpend du type duf recherch et
de la concentration en glycrol).

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Cette mthode est uniquement indique pour la recherche des ufs dhelminthes. En fonction du temps de
contact, les ufs deviennent de plus en plus transparents sous laction de la glycrine. Cet claircissement
dpend de lpaisseur de la coque des ufs. Si la lecture se droule trop longtemps aprs prparation,
certains ufs coques minces deviennent invisibles. Cette mthode nest donc pas indique comme examen
de routine (qui doit permettre de retrouver tous les parasites). Elle reste toutefois une bonne technique lorsque
lon travaille sur un sujet bien dtermin (enqute pidmiologique de dpistage pour Schistosoma mansoni par
exemple). Le temps dclaircissement doit tre adapt aux ufs dhelminthes mettre en vidence. La
mthode peut tre rendue quantitative en prenant une quantit donne de selles (de 20 50 mg, usage dun
gabarit en matire plastique).

Coloration au lugol :
Cette technique permet de reprer plus facilement les kystes des protozoaires, en soulignant leurs
caractristiques morphologiques. Dans une solution iode, le cytoplasme des kystes se colore en jaune ou en
brun clair et les noyaux en brun fonc. Cette technique peut tre combine un examen direct ou un
examen aprs enrichissement.
Sur une lame porte objet, mettez en suspension une petite quantit de selles dans une goutte de lugol de
D'Antoni (Attention, cette solution est plus concentre que celle utilise en bactriologie). En raison de la taille
des lments observer, examinez la prparation un grossissement de 400x. Un micromtre oculaire est
ncessaire pour permettre de mesurer la taille des kystes. Cette technique peut aussi tre utilise pour la
coloration des ufs de Schistosoma haematobium dans la technique de filtration des urines.

Coloration rapide de Heine :


Cette technique de coloration ngative permet de dtecter les oocystes de Cryptosporidium spp. dans les
selles. Mlangez sur une lame porte objet une goutte de selles (frache ou une goutte du culot de centrifugation
aprs enrichissement de Ritchie) avec deux ou trois gouttes de Fuchsine de Ziehl-Neelsen. Ralisez un ou
deux talements minces de ce mlange. Aprs schage lair (maximum 30 minutes), examinez ltalement
au microscope sous immersion lobjectif 100x (ou lobjectif 50 x). Les oocystes de Cryptosporidium spp.
apparaissent comme des lments arrondis ou ovode de 3 6 m, incolores et fortement rfringents sur un
fond rostre ou rougetre. Il est galement possible dobserver la prparation avec un objectif 40 x (mettez une
goutte dhuile sur la prparation, recouvrir dune lamelle et observez au microscope 40 x).

Coloration de Ziehl-Neelsen modifie :


Cette technique permet de dtecter les structures Alcoolo-Acido rsistantes dans les selles soit principalement
les oocystes de Cryptosporidium spp. Etalez les selles en frottis mince sur une lame porte-objet
(ventuellement aprs dilution dans un peu deau physiologique). Le culot aprs enrichissement de Ritchie
peut aussi tre utilis pour prparer un frottis. Aprs schage complet lair, fixez la prparation soit par un
passage travers la flamme dune lampe alcool, soit par recouvrement avec du mthanol pendant 3 minutes.
Recouvrez la prparation avec une solution de fuchsine de Ziehl-Neelsen et laissez agir au moins 10 minutes
(le chauffage de la solution de fuchsine nest pas ncessaire dans le cadre de la recherche de
cryptosporidies). Eliminez la Fuchsine, rincez leau et dcolorez la prparation lalcool acide jusquau
moment o le dcolorant nentrane plus de fuchsine. Rincez leau et contre colorez au bleu de mthylne
pendant 30 secondes. Rincez leau, laissez scher et examinez au microscope sous immersion lobjectif
100x (ou lobjectif 50 x). Les oocystes de Cryptosporidium spp. apparaissent sur un fond bleu comme des
lments arrondis ou ovode de 3 6 m rouge-violet, contenant souvent quelques petites taches colores en
rouge plus intense. Certains oocystes sont cependant ross ou incolores. Ne pas confondre les oocystes avec
des levures.
Cette mme technique utilise sur des selles ou des urines permet de faire une distinction despces pour les
Schistosomes.

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Coloration lhmatoxyline ferrique (coloration de Kinyoun) :


Cette technique de coloration permanente permet de dtecter et didentifier les formes vgtatives et les kystes
des protozoaires intestinaux. Elle est principalement utilise pour la recherche des formes vgtatives de
Dientamoeba fragilis dans les selles. Il sagit dune excellente technique mais dexcution longue et dlicate,
ncessitant de nombreux produits chimiques.
Cest une coloration rgressive. Le mordanage et la surcoloration (imprgnation excessive des structures par
le colorant) sont suivis dune dcoloration (enlvement du colorant des structures qui le retiennent le moins).
Placez 1 goutte de selles (prserves sur SAF) et une goutte dalbumine de Mayer sur une lame porte-objet.
Ralisez un frottis mince de ce mlange laide dun btonnet. Laissez scher lair jusqu ce que le frottis
soit opaque (approximativement 20 minutes, maximum 2 heures). Fixez la prparation par une immersion de
10 minutes dans de lalcool 70 %, puis rincez dans un bain deau pendant 2 minutes. Immergez la lame 20
minutes dans une solution de fuchsine de Ziehl puis rincez la lame leau courante pendant 1 minute.
Dcolorez la lame pendant 2 minutes lalcool acide, puis rincez la lame leau courante pendant 1 minute.
Immergez la lame pendant 8 minutes dans la solution de travail dhmatoxyline ferrique, puis rincez la lame
leau pendant 1 minute. Immergez la lame dans la solution de travail dacide picrique pendant 4 minutes, puis
rincez la lame leau courante pendant 10 minutes. Immergez la lame 3 minutes dans la solution dalcool
ammoniacal, puis dshydratez la prparation par deux bains successifs dalcool absolu (5 minutes par bain).
Immergez la lame dans 2 bains successifs de xylne (5 minutes par bain). Ajoutezr une goutte de liquide de
montage (Entellan Merck 1.07960), recouvrez dune lamelle et laissez scher pendant au moins 10 heures
avant lecture. Examinez microscopiquement la lame sous immersion (objectif 100 x ou 50 x). 150 200
champs microscopiques doivent tre examins avant de donner une rponse ngative. La prparation doit
avoir un fond gris-bleu. Le cytoplasme des protozoaires apparat bleu gris moyen alors que les noyaux
apparaissent bleu intense-gris. Les kystes sont souvent plus colors que les trophozotes. Les corps
chromatodes, les globules rouges ingrs et les cristaux de Charcot-Leyden sont colors en bleu-gris intense
ou parfois en noir. Les ufs dhelminthes et les larves prennent la plupart du temps trop de colorant et ne
seront pas identifiables. Les organismes Alcolo-Acido rsistants apparaitront en rose-rouge.

Techniques de concentration :
Les lments parasitaires sont souvent prsents en petit nombre dans les selles. Dans ce cas, lexamen direct
peut ne pas suffire pour dceler une infestation. Le but dune technique de concentration est de traiter un
volume assez important de selles afin de concentrer les parasites rares disperss dans un grand volume vers
un volume rduit. Ce petit volume pr-trait, qui contiendra donc un plus grand nombre de parasites, sera
examin comme pour lors dun examen direct. Les techniques de concentration ne permettent cependant pas
de mettre en vidence les formes vgtatives des protozoaires qui sont dtruites par le processus de
concentration. Lexamen direct dune prparation frais est donc la premire tape obligatoire de tout examen
microscopique.
Il existe un grand nombre de techniques de concentration avec diffrentes variantes. La majorit des
techniques sont bases sur des diffrences poids spcifiques. Le tableau suivant donne titre indicatif, les
poids spcifiques de diffrents lments.
ELEMENTS
Solution sature en sulfate de Zinc
Eau physiologique formole 10 % (v/v)
Ether
ufs dAncylostoma duodenale
Kystes de Giardia lamblia
Kystes dEntamoeba histolytica
Kystes dEntamoeba coli
Kystes dEndolimax nana
ufs fconds dAscaris lumbricoides
ufs de Trichuris trichiura
Kystes de Chilomastix mesnili
ufs non fconds dAscaris lumbricoides

POIDS SPECIFIQUES
1.180
1.019
0.714
1.055
1.060
1.065 1.070
1.065 1.070
1.065 1.070
1.110
1.150
1.180
1.200

Nous ne dcrirons ici que les techniques les plus simples le plus couramment utilises.
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Technique de concentration par sdimentation (mthode diphasique de Ritchie modifie) :


Les selles sont dilues dans un liquide de faible densit (eau physiologique), les rsidus fcaux sont dissous
dans lther et les parasites sont entrans vers le fond par centrifugation. Cette mthode permet de concentrer
tous les types dufs de vers, les larves et les kystes de protozoaires.

 ATTENTION :

Lther est une substance extrmement inflammable qui senflamme et explose


rapidement au contact dune flamme ou dune tincelle. Conservez les bidons ou les flacons entams sous
hotte chimique ou sur une tagre (pour que les vapeurs se dispersent) dans la partie la plus frache du
laboratoire. Comme lther est trs volatile, les flacons doivent tre hermtiquement bouchs. Ne mettez PAS
un flacon dther au rfrigrateur : les vapeurs saccumulent dans celui-ci, mme si le flacon est
hermtiquement ferm, et peuvent exploser lors de louverture de la porte. Ne rangez PAS des flacons
entams dans une armoire. Nayez que des petites quantits dther dans le laboratoire.

 ATTENTION : Le xylne est une substance inflammable.

Manipulez ce produit loin dune flamme. Ce


produit est aussi nocif par inhalation et par contact avec la peau. Il est encore irritant pour la peau. Evitez donc
tout contact avec la peau et les yeux. Manipulez ce produit sous hotte chimique ou fentre ouverte.

 ATTENTION :

Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et par
ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce produit fentres
ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.

Suspendez environ 3 gr. de selles dans 42 ml deau physiologique (ventuellement formole. Le


formol offre deux avantages : linactivation de la majorit des parasites et la fixation des globules
blancs qui se retrouvent alors dans le culot de centrifugation, mais dforms).
Aprs homognisation (30 minutes dinversion lente), versez environ 1.5 ml de cette suspension
dans un tube centrifuger fond conique.
Ajoutez environ 3,5 ml deau physiologique (ventuellement formole).
Ajoutez 5 ml dther. Lther peut tre remplac par de lessence pour voiture).
Ajoutez ventuellement 2 gouttes de xylne. Le xylne nest pas ncessaire, mais il diminue
ladhrence des dbris sur tube en verre.
Bouchez hermtiquement le tube centrifuger et mlangez vigoureusement durant 1 minute.
Enlevez le bouchon et centrifugez le tube 2.000 RPM (650g) durant 5 minutes.

Aprs centrifugation, on
retrouve 4 couches :

Ether et graisses

Dbris

Eau physiologique (formole)

Culot de sdimentation contenant


les parasites ventuels

Aprs centrifugation, on observe 4 couches dans


le tube (cf. figure ci-contre).
Dcollez ventuellement le bouchon de dbris des
parois du tube avec un btonnet.
Jetez le surnageant en renversant le tube dun
mouvement rapide.
Prlevez le culot de centrifugation avec une
pipette pasteur et le dposer sur une lame.
Recouvrez dune lamelle 20 mm x 20 mm, et
observez systmatiquement au microscope.

La technique de Ritchie permet aussi dobtenir un rsultat quantitatif : OPG (nombre dufs par gramme de
selles). LOPG nest PAS utile pour les cestodes, Enterobius vermicularis et Ascaris lumbricoides.
Calcul : 3 grammes de selles dans un volume final de 45 ml. Comme on examine entirement le culot
de centrifugation obtenu sur 1,5 ml de cette dilution de selles, on obtient le nombre dufs prsents
dans 0,1 gramme de selles. En multipliant donc le nombre dufs compts dans tout le sdiment par
10, on obtient le nombre dufs par gramme de selles.

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Technique de concentration par flottation (mthode de Willis modifie) :


Les selles sont dilues dans un liquide de forte densit. Les parasites plus lgers remontent la surface. Cette
technique permet de concentrer les kystes et les oocystes de protozoaires ainsi que les ufs des cestodes et
de nmatodes. (En raison du poids spcifique lev des ufs de trmatodes, aucune technique par flottation
nest indique).

Suspendez 5 g de selles dans 100 ml dune solution sature de NaCl (ou


ZnSO4).

Homognisez la suspension (tamisez la suspension si ncessaire


travers un tamis th).

Versez la suspension dans un tube essai ras bord.

Appliquez une lamelle sur louverture du tube.

Aprs 30 minutes, transfrez la lamelle (toujours en position horizontale)


sur une lame.

Observez la prparation systmatiquement au microscope.

Technique de concentration pour larves de nmatodes (mthode de Baermann) :


La mthode de Baermann est une technique destine mettre en vidence les larves danguillules dans les
selles. Elle est base sur lhygrotropisme et le thermotropisme de ces larves. Cette technique nest utilisable
que sur des selles moule et frache. Elle nest applicable ni sur des selles vielles de plus de 5 heures, ni sur
des selles liquides ou diarrhiques, ni sur des selles fixes, ni sur des selles prleves aprs prise de Baryum.

Mettez environ 20 g de selles (fraches et moules) dans une passoire


pointue (de type chinois dont le diamtre des mailles de lordre de
0,6-0,7 mm), tapisse de deux couches de gaze (mailles de 0,6-0,7
mm).
Dposez la passoire dans un entonnoir en verre reli un tuyau ferm
par une pince clamper.
Remplissez prudemment lentonnoir deau tide (30-35C), jusqu
immerger compltement les selles.
Attendez au moins 6 heures (ou mieux une nuit), pour permettre aux
larves de quitter les selles et daller dans leau.
Ouvrez la pince du tuyau pour recueillir environ 10 ml de leau du fond
de lentonnoir dans un tube centrifuger.
Centrifugez le tube pendant 10 minutes 2.000 RPM (650 g).
Dcantez dlicatement le surnageant, dposez le culot de
centrifugation sur une lame, recouvrez dune lamelle et recherchez
systmatiquement les larves (la plupart du temps encore vivantes) au
microscope (grossissement 100 x).

EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUNE BIOPSIE RECTALE :


La biopsie, crase entre deux lames porte-objet est examine sans coloration sous microscope lobjectif 10x
pour la recherche des ufs de Schistosoma spp. et/ou des trophozotes de Balantidium coli ; ou lobjectif 40x
pour la recherche de trophozotes dEntamoeba histolytica.

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SCOTCH TEST (TAPE TEST OU TEST DE GRAHAM):


Ce test est utilis pour la recherche des ufs dEnterobius vermicularis. Comme les vers adultes femelles
pondent principalement le soir et la nuit au niveau pri anal, le test doit se raliser le matin avant dfcation ou
toilette. Il est galement possible de retrouver accidentellement des ufs de Tnia spp. (La plupart du temps
de Tnia saginata) lors de cet examen.

 ATTENTION : Comme les ufs sont trs collants et directement infectants, Il est indispensable
dutiliser des gants et de se laver les mains aprs manipulation.
personne effectuant le prlvement sans prcaution est important.

Le risque dinfestation pour la

Repliez un ruban autocollant transparent sur lextrmit dun tube essai, face collante dirige vers lextrieur.
Tout en cartant les fesses du patient, appliquez lextrmit du tube portant le ruban en diffrents endroits de la
marge anale pour collecter les ufs ventuellement prsents. Le ruban est ensuite coll sur une lame porteobjet et examin au microscope (objectif 10x). Pour augmenter la qualit de limage au microscope, il est
conseill de mettre un peu deau (ou un peu de dhydroxyde de sodium 1%) entre la lame et le ruban adhsif.
Les extrmits du ruban doivent cependant rester sches autrement il nadhrera pas la lame.

DCOLORATION POUR DIAGNOSTIC DIFFRENTIEL DES VERS ADULTES DE TNIA SPP. :


Le diagnostic diffrentiel de segments de vers adultes de Tnia spp. se fait sur le nombre de ramifications
unilatrales de lutrus des segments gravides. Pour faciliter la visualisation de lutrus, on peut dcolore les
segments lacide actique.

 ATTENTION : En raison du risque de cysticercose en cas dingestion dufs de Taenia solium,


manipulez les vers adultes ou les segments avec grande prudence. Il est indispensable dutiliser des
pinces, de porter des gants et de se laver les mains aprs manipulation.
Trempez les segments dans une solution chaude ( 60C) dacide actique 5 %. Lacide actique 5 % peut
tre remplac par du vinaigre de table. Incubez 30 minutes 1 heure. Aprs incubation, crasez les segments
claircis entre deux lames porte-objet. Observez lil nu, contre la lumire pour comptez le nombre de
ramifications de lutrus.

EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUN LIQUIDE DUODNAL :


Cet examen peut tre utile pour la recherche des ufs de Fasciolidae, dOpisthorchis spp. et dHeterophyes
heterophyes, ainsi que pour les formes vgtatives de Giardia lamblia.
Le liquide duodnal, obtenu par tubage, est centrifug dans un tube conique 2.500 rpm (700 g) pendant 5
minutes.
Le surnageant est limin et le culot de centrifugation est examin compltement et
systmatiquement au microscope (objectif 10x). Pour la recherche de Giardia lamblia, lexamen se fait
lobjectif 40 x, tant frais quaprs coloration au lugol de DAntoni. N.B. : Comme le lugol immobilise les formes
vgtatives, lidentification devra se faire uniquement sur base dune morphologie typique.

EXAMEN PARASITOLOGIQUE DES URINES :


On examine en gnral les urines pour rechercher des ufs de Schistosoma haematobium. On peut
galement retrouver des formes vgtatives de Trichomonas vaginalis. Il est galement possible de retrouver
des microfilaires appartenant aux espces Wuchereria bancrofti (le plus souvent en cas de chylurie), de Loa-loa
(le plus souvent en cas dhmaturie) et dOnchocerca volvulus dans les urines (plus rarement, le lus souvent en
cours de traitement). Et finalement, on peut aussi retrouver plus rarement des ufs dEnterobius vermicularis
ou de Tnia spp. dans le sdiment urinaire.
Les conditions de prlvement dterminent la qualit du rsultat de lexamen. Elles tiennent la fois au
malade, au parasite recherch et au matriel.
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Le nombre dufs de S. haematobium prsents dans les urines varie au cours de la journe et montre un pic
entre 10 et 14 heures. Les ufs sont plus facilement retrouvs en fin de miction. Un stress de la vessie
(mouvements, gonflement) aide au dcollement des ufs. Si les urines ne sont pas examines rapidement, il
est possible de retrouver des miracidiums trs mobiles. Pour la recherche des ufs de S. haematobium, les
derniers ml durines sont les plus importants, alors que Trichomonas vaginalis est plus prsents dans le premier
jet urinaire.
Ces lments sont donc prendre en compte dans le prlvement. Lusage de rcipients en plastique large
ouverture est recommand. Le volume rcolt doit tre de 10 ml au minimum. En augmentant le volume
durine rcolte, on augmente la sensibilit de la dtection.
Lexamen parasitologique des urines a ses limites :

Lmission ou la prsence dlments parasitaires dans les urines peut tre discontinue. Dans
ce cas, il faut rpter les examens et ne pas se contenter dun seul examen ngatif.
Il ny a pas dmission dufs, sil ny a que des vers adultes mles (rare).
Il ny a pas dmission dlments parasitaires pendant la phase de latence qui peut
correspondre la maturation in situ du parasite, et/ou la phase de migration interne et/ou au
temps de passage pour les ufs des veinules la lumire vsicale.

La sdimentation et la filtration sont les deux mthodes employes pour dceler les ufs de S. haematobium.
La sdimentation est moins sensible, mais elle est plus conomique et plus simple mettre en uvre que la
filtration. La technique de filtration est surtout utilise dans des enqutes pidmiologiques ncessitant des
donnes quantitatives.

Technique de sdimentation :
Agitez soigneusement lchantillon durine et versez-le dans un verre pied conique. Laisser sdimenter
pendant une heure au moins. Eliminez dlicatement le surnageant en conservant environ 10 ml durine au fond
du verre pied. Mlangez et transvasezle dpt dans un tube centrifuger fond conique. Centrifugez le
tube 2.500 rpm (1.000 g) pendant 5 minutes. Eliminez prudemment le surnageant, remettez le culot de
centrifugation en suspension, transvasez le tout sur une lame, recouvrez dune lamelle et observez
systmatiquement toute la prparation au microscope pour rechercher les ufs de Schistosoma haematobium
(objectif 10 x). [La recherche de Trichomonas vaginalis se fait en utilisant un objectif 10 x et 40 x].

Technique de filtration :
Adaptez un filtre (porosit de 12 20 m) dans le porte-filtre. Aprs avoir bien homognis les urines,
prlevez 10 ml dans une seringue. Adaptez la seringue au porte-filtre. En maintenant le tout vertical, faites
passer lurine travers le filtre. Dvissez soigneusement le porte-filtre. Remplissez la seringue dair, refixez-la
au porte filtre et expulsez lair. Cette tape est importante, car elle permet dliminer lexcs durine dans le
porte-filtre et de plaquer les ufs sil y en a, sur le filtre. Dvissez le porte-filtre, retirez le filtre avec une pince
et dposez-le sur une lame, face filtrante vers le haut. Recouvrez dune lamelle et observez systmatiquement
le filtre au microscope (objectif 10x). Il est possible dajouter une goutte de lugol de DAntoni pour augmenter la
visibilit des ufs par leur coloration orange. Grce cette technique de filtration, Il est possible davoir un
rsultat quantitatif (nombre dufs par ml durine).
Il existe plusieurs types de filtres : Des filtres usage unique en papier ou des filtres [rutilisables] en nylon
(Nytrel) ou en polycarbonate (Sartorius, Millipore,...).
Avant rutilisation, les filtres doivent tre
dcontamins une nuit dans de leau de javel domestique (Hypochlorite 1%), lavs et vrifis. La vrification
des filtres consiste examiner systmatiquement le filtre nettoy au microscope pour sassurer quil est bien
dbarrass de tout parasite.
Urines

Air

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EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUN CRACHAT :


Examen direct :
Ce test est utilis pour la recherche des ufs de Paragonimus spp. Plusieurs parasites font un passage
pulmonaire durant leur migration somatique (Ascaris spp., Ancylostomidae, etc.). Un examen des crachats
nest cependant pas indiqu pour leur diagnostic.

 ATTENTION :

Lhmoptysie, symptme courant de linfestation par Paragonimus spp. est aussi


un signe possible de tuberculose pulmonaire. En raison du risque lev de production darosols
potentiellement dangereux durant lexamen parasitologique, liminer la possibilit de tuberculose avant
toute recherche parasitologique dans un crachat. (cf. notes de bactriologie, pour plus de dtails
concernant la procdure).

Des instructions prcises doivent tre donnes chaque patient sur la manire de produire un bon chantillon.
Une bonne procdure de prise dchantillon est en effet indispensable pour obtenir des rsultats de laboratoire
fiables moindre risques pour le personnel :
Le risque dinfection du personnel de sant (mais aussi dautres personnes) est important lorsquun patient
suspect de tuberculose tousse. Pour cette raison, la prise dchantillon doit se faire lextrieur, le plus loin
possible dautres personnes, en tenant compte de lorientation du vent. En cas dimpossibilit, une pice
spciale, spare et trs bien ventile, peut tre utilise (attention la position du patient par rapport aux
ventilations et au sens des courants dair provenant de portes ou de fentres ouvertes).
Chaque crachoir doit tre identifi (date, nom du patient, numro de patient, n de lchantillon, etc.). Pour
viter tout risque dinversion, ces donnes doivent figures sur le pot et non sur le couvercle du crachoir.
Des crachoirs en plastique dur, usage unique avec couvercle vis tanche et avec un diamtre douverture
de 2 3 cm sont vivement recommands. En cas dimpossibilit, des crachoirs rutilisables en verres, avec
les mmes caractristiques peuvent tre utiliss (ils doivent alors bien videmment tre dcontamins, lavs et
striliss avant toute rutilisation). Les crachoirs doivent tre transparents pour permettre un contrle visuel de
la qualit du prlvement sans devoir les ouvrir.
Le crachat doit provenir du plus profond possible du poumon. Ceci peut le plus souvent tre obtenu aprs
plusieurs profondes inspirations suivies dune expiration force. Le volume de lchantillon doit tre suffisant (3
5 ml) et doit contenir des particules solides ou purulentes. (La salive nest pas un bon chantillon en raison du
faible nombre de bacilles pulmonaires que lon peut y trouver et de la prsence possible de mycobactries
commensales. Il en est de mme pour les scrtions nasales). Le crachat nest cependant pas toujours
purulent, pour un tuberculeux en cours de traitement.
On rcolte 2 ou 3 crachats : le premier sur place lors de la consultation (on the spot sputum), le deuxime la
maison (crachat du saut du lit ou early morning sputum) et ventuellement le troisime sur place loccasion de
la consultation suivante. (Le processus ncessite donc 2 jours). Le meilleur chantillon sera le prlvement
matinal qui concentre les scrtions de toute une nuit. Pour cette raison, dans certains programmes de lutte
contre la tuberculose, deux crachats matinaux et un crachat sur place sont utiliss.
Comment juger de la qualit dun crachat : Un bon prlvement ne doit pas ressembler de leau. Sa
couleur peut varier : du blanchtre au jauntre purulent, avec parfois un peu de sang. (Du sang pur nest
pas cependant pas adquat). Un chantillon ressemblant de la salive devrait tre refus, et le patient
devrait tre encourag produire un nouvel chantillon valable. Au cas o rien de mieux ne peut tre
obtenu (surtout en cours de traitement pour une tuberculose), un chantillon aqueux pourrait cependant
tre analys.
La qualit du crachat peut aussi tre value aprs talement et coloration : Un chantillon salivaire sera
trs peu pais et souvent avec des bulles . Sous le microscope, un vrai crachat doit contenir des
filaments muqueux et des globules blancs, tandis quun prlvement salivaire contiendra principalement
des cellules pithliales. Un vrai crachat devrait contenir 20 x plus de globules blancs que de cellules
pithliales.
Un crachat peut tre conserv assez longtemps avant analyse microscopique bactriologique (plus dune
semaine temprature ambiante pour recherche de BAAR). Ceci nest bien videmment pas vrai pour des
cultures ou pour la recherche de parasites.

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Aprs examen bactriologique ngatif, transvasez environ 5 ml de crachat dans un tube centrifuger fond
conique. Ajoutez 5 ml dune solution dhydroxyde de sodium ou de potassium 1 % (p/v). Fermez
hermtiquement le tube avec un bouchon et mlangez vigoureusement durant une minute. La solution
dhydroxyde liqufiera et claircira le crachat. Aprs une heure de repos, re-mlangez vigoureusement le tube
durant une minute. Centrifugez le tube 2.500 rpm (700 g) pendant 5 minutes. Eliminez le surnageant et
transvasez le culot de centrifugation sur une lame porte-objet. Recouvrez dune lamelle et observez
compltement et systmatiquement au microscope (objectif 10x). Regarder plus attentivement les masses
gristres prsentes qui cachent souvent les ufs.

Coloration au RAL-555 :
Technique plutt utilise pour la recherche de Pneumocystis jiroveci dans un produit de lavage alvolaire ou
dans une biopsie ou une ponction pulmonaire. Cette coloration permet de mettre lintrieur des kystes en
vidence. Elle peut tre remplace par une coloration au Giemsa (identique celle dun frottis sanguin).
Centrifugez (10 minutes, 2.000 RPM ou 600 g) le produit de lavage alvolaire et ralisez un frottis mince du
culot de centrifugation (ou ralisez des empreintes de la biopsie sur des lames). Aprs schage lair, fixez les
lames au mthanol puis immergez-les pendant 25 secondes dans le ractif 2 (solution aqueuse dosine, code
RAL 361643). Plongez ensuite dans les lames pendant 40 secondes dans le ractif 3 (solution aqueuse de
bleu de mthylne, code RAL 361653). Rincez leau courante. Il nest pas ncessaire de rincer les lames
entre les diffrents bains. Aprs schage, les lames sont observes au microscope (objectif 100 x, oculaire 10
x). Les renseignements concernant les ractifs RAL et leurs distributeurs peuvent tre obtenus sur le site
internet : http://www.reactifs-ral.fr/

Coloration au Bleu de toluidine O (Chalvardjian et all, 1963, modifie par Marty et all 1981):
Technique plutt utilise pour la recherche de Pneumocystis jiroveci dans un produit de lavage alvolaire ou
dans une biopsie ou une ponction pulmonaire. Cette coloration permet de mettre les parois des kystes en
vidence. Centrifugez (10 minutes, 2.000 RPM ou 600 g) le produit de lavage alvolaire et ralisez un frottis
mince du culot de centrifugation (ou ralisez des empreintes de la biopsie sur des lames). Aprs schage
lair, fixez les lames au mthanol puis immergez-les pendant 5 minutes dans le ractif de sulfatation. Aprs
rinage leau courante, les lames sont plonges 5 minutes dans une solution de bleu de toluidine O. Les
lames sont ensuite passes dans 3 bains dalcool isopropylique (environ 1 minute par bain). Aprs schage,
les lames sont observes au microscope (objectif 100 x, oculaire 10 x).

EXAMEN PARASITOLOGIQUE DUNE SCRETION VAGINALE :


Cette technique est utilise pour la recherche de Trichomonas vaginalis. Prlevez laide dun couvillon les
scrtions vaginales, de prfrence hauteur du col de lutrus. Roulez immdiatement et dlicatement
lcouvillon sur une lame. La scrtion vaginale ainsi obtenue est recouverte dune lamelle et immdiatement
observe au microscope (objectif 10 x et 40 x). Si le prlvement est trop pais, ajoutez une goutte deau
physiologique. Comme cette technique est base sur le mouvement pour dtecter le parasite, lobservation
microscopique doit se faire le plus rapidement possible aprs prlvement.

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EXAMENS PARASITOLOGIQUES DU SANG :


Ces techniques sont valables pour les agents infectieux suivants : Microfilaires sanguines, Plasmodium spp.,
Trypanosoma spp., les Borrelia des fivres rcurrentes et les Babesia spp. Chacune des techniques suivantes
nest cependant pas toujours utile pour tous les parasites mentionns.

Examen direct :
Cette mthode est la plus facile mais aussi la moins sensible pour dceler la prsence de parasites assez
grands et mobiles dans le sang (les trypanosomes, les Borrelia spp. des fivres rcurrentes et les microfilaires
sanguines).
Elle est cependant fastidieuse puisquil faut observer systmatiquement la prparation
microscopique. Comme autre inconvnient, il est signaler quil faut observer immdiatement les lames aprs
leur prparation surtout pour la recherche de trypanosomes. En effet, les trypanosomes tant reconnus leur
mouvement, il faut procder lexamen microscopique avant quils ne simmobilisent, cest--dire 10 15
minutes aprs le prlvement sanguin. (Attention : Les UV du rayonnement solaire immobilisent aussi les
trypanosomes). Ce test prsente cependant un certain intrt, surtout pour la trypanosomiase rhodesiense
au sommet de la vague parasitaire, au moment o lon peut retrouver un nombre relativement important de
trypanosomes dans le sang et pour les fivres rcurrentes (chantillon de sang pris au pic de fivre). Ceci
permet dviter de recourir des techniques plus perfectionnes et plus coteuses. Le seuil de positivit est de
lordre de 15 40 microfilaires et 10.000 trypanosomes par ml de sang.
Une petite goutte de sang [prlvement capillaire ou veineux sur un anticoagulant tel que lEDTA pour la
recherche de microfilaires ou de Borrelia ; ou lhparine pour la recherche de trypanosomes] est place sur une
lame et recouverte dune lamelle. La prparation est examine directement au microscope lobjectif 10 x pour
la recherche de microfilaires (ou 40 x pour la recherche de Borrelia spp. ou de trypanosomes).

Frottis sanguin :
Cette mthode, assez peu sensible nest vraiment utile en parasitologie que pour lidentification exacte de
lespce de Plasmodium infestant une personne (et plus exceptionnellement pour la recherche et/ou
lidentification de Babesia spp). Elle est principalement utilise en hmatologie pour la diffrentiation des
globules blancs et lanalyse de la morphologie cellulaire.
Une petite goutte de sang [provenant dun prlvement
capillaire ou dun prlvement veineux sur un anticoagulant
ne dformant pas les cellules tel que lEDTA] est dpose
lextrmit dune lame porte objet. Sans attendre, dplacez
le petit ct dune autre lame (rode de prfrence) pour
venir toucher la goutte de sang. Les deux lames doivent
former un angle compris entre 30 et 45 . Attendez que le
sang se rpande par capillarit entre les deux lames.
Poussez ensuite la lame incline vers lautre extrmit de la
lame porte objet en entranant derrire elle le sang qui
stale en couche mince. Ce mouvement doit tre rgulier et
ininterrompu jusqu puisement de la goutte de sang. Il doit
aussi tre ni trop lent, ce qui produirait un frottis trop court et
trop pais ; ni trop rapide, ce qui donnerait un frottis trop
long et trop fin. Immdiatement aprs confection du frottis,
agitez la lame pour la faire scher rapidement. En zone
tropicale, le schage dun frottis durant la saison des pluies
peut-tre trop long. Lusage dun sche-cheveux permet
alors de diminuer le temps de schage et dviter la
dformation des globules rouges.

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Un bon frottis est assez pais au dbut de ltalement (3) pour samincir et finir en forme de flamme avant la fin
de la lame (1). La partie intermdiaire du frottis (2) est la plus approprie pour lexamen macroscopique. Dans
cette zone, on doit retrouver une couche monocellulaire de cellules, sans superposition.
(1)

(2)

(3)

Fixez la prparation en faisant couler 2 ou 3 gouttes de mthanol absolu sur le frottis dispos verticalement.
Aprs vaporation du mthanol, la lame peut tre colore au Giemsa : Couvrez compltement la prparation
de Giemsa dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adapt aux parasites recherchs (cf. tableau). [Soit
pour obtenir une dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous ajoutez 5
gouttes de Giemsa concentr [Merck N 1.01424]. Laissez colorer pendant 20 30 minutes. Egouttez et
rincez prudemment leau courante. Laissez scher et examinez au microscope sous immersion lobjectif
100x (ou lobjectif 50x).
Pour viter la dgradation du Giemsa par raction acide-base, la prparation de la dilution du Giemsa
doit aussi tre extemporane. Le Giemsa concentr doit aussi tre filtr avant utilisation (au moment du
transvasement dans un petit flacon compte gouttes. Pour obtenir de bonnes colorations, il est
indispensable que leau de dilution ait un pH adquat au but poursuivi. Une eau trop acide colore tout
trop rouge, alors quune eau alcaline colore tout trop bleu. Utilisez un pH adapt lexamen.
pH
6.6
6.8
7.0
7.2
7.4
7.6
7.8
8.0
Hmatologie
et
Paludisme
Paludisme
Leishmanioses
* le pH de 8,0 permet de mettre en vidence les taches de Maurer de P. falciparum.

Utilisations

Hmatologie

Paludisme*
et
Microfilaires

Trypanosomiases

Dans un petit laboratoire, pour viter des erreurs, il est cependant prfrable de standardiser le pH de
leau de dilution 7,2 pour tous les examens, y compris lhmatologie (compromis acceptable pour tous
les usages).

Coloration de GIEMSA
(hmolyse [pour chantillons non fixs] et coloration)

osine (acide)  colore les lments basiques.


Bleu de mthylne (basique)  colore les lments acides.
Azur (basique)  colore les lments acides.
 Dilution extemporane du colorant.
 Influence du pH.

La coloration panoptique de Pappenheim (May-Grnwald-Giemsa), qui sert colorer les frottis pour formules
leucocytaires, peut aussi tre utilise la place de la coloration de Giemsa, sans amliorer notablement la
coloration des parasites sanguins.
Coloration de May-Grnwald-Giemsa : Pour une coloration au May-Grnwald-Giemsa, la fixation du frottis au
mthanol nest pas ncessaire : La premire tape de cette coloration assure la fixation du frottis. Ds que le
frottis est sec, recouvrez compltement la lame de May-Grnwald [Merck N 1.01424] et laissez agir 3 minutes
(fixation). Ajoutez ensuite gouttes gouttes, 4 ml deau tamponne un pH adapt lexamen. (cf. tableau
supra). Laissez agir le colorant dilu 1 minute, puis liminez-le. Sans rincer, recouvrez la lame de Giemsa
dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adapt lexamen (cf. tableau supra). [Soit pour obtenir une
dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous ajoutez 5 gouttes de Giemsa
concentr [Merck N 1.01424]. Laissez colorer pendant 20 30 minutes. Egouttez et rincez prudemment
leau courante. Laissez scher et examinez au microscope sous immersion lobjectif 100x (ou lobjectif
50x).
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N.B. : Numration parasitaire en frottis sanguin (uniquement valable dans le cadre de la malaria et des
infestations Babesia spp.) :
La numration parasitaire en frottis sanguin se fait en comptant le nombre de globules rouges parasits par
des formes asexues du parasite sur au moins 25 champs microscopiques lobjectif 100 x (ou lobjectif 50 x).
Cette mthode ncessite la dtermination prliminaire du nombre moyen drythrocytes prsents par champs
microscopique (cette valeur est de lordre de 200 mais varie considrablement en fonction de la qualit de
ltalement et du grossissement utilis). Elle ncessite aussi la numration des globules rouges.

Nombre drythrocytes infect


------------------------------------------ x Concentration rythrocytaire = Nombre de parasites/l de sang
Nombre drythrocytes observs

Le rapport du nombre de globules parasits par champ microscopique sur le nombre total drythrocytes par
champ donne le pourcentage dhmaties parasites.
Nombre drythrocytes infect
------------------------------------------ x 100 = % dhmaties parasites
Nombre drythrocytes observs

Si le nombre de globules rouges par microlitres de sang nest pas connu, on considre que 1% dhmaties
parasites corresponds 50.000 parasites par l de sang.

Goutte paisse :
Cette mthode est une technique de concentration. Elle utilise +/- 4 fois la quantit de sang (20 l) ncessaire
pour un frottis mince (5 l). Comme le sang est moins tal, les parasites ventuellement prsents sont plus
frquents par unit de surface. Cette technique est utilisable pour la recherche des Plasmodium spp., des
trypanosomes, des microfilaires sanguines et des Borrelia spp. responsables des fivres rcurrentes.
Le seuil de positivit est de lordre de 5 10 (100 en routine) plasmodies par l de sang, 10.000 trypanosomes
ou 15 40 microfilaires par ml de sang.
Une goutte de sang est place sur une lame porte objet et
immdiatement dfibrine pendant 20 30 secondes par un
mouvement en spirale fait laide du coin dune autre lame (la
dfibrination est prfrable lutilisation dun anticoagulant, lEDTA
tant le moins mauvais, sauf pour la recherche de trypanosomes
pour lesquels lhparine est prfrable).
Ce mouvement aura aussi pour effet dtaler le sang sur une surface de 1 2 cm de diamtre. Ltalement doit
tre dune paisseur telle quil est possible de voir des caractres dun journal travers. Laisser scher sans
chauffage et sans exposition au soleil pour viter la fixation des hmaties qui empcherait leur destruction. La
goutte paisse ne peut tre colore que si elle est compltement sche. Pour viter une contamination croise
entre diffrentes gouttes paisses lors de la coloration, lusage de cuve de coloration est viter. Couvrez
compltement la prparation de Giemsa dilu 3,5 % dans de leau tamponne un pH adquat (cf. tableau
supra) [Soit pour obtenir une dilution 3,5% prparez par lame colorer, 4 ml deau tamponne laquelle vous
ajoutez 5 gouttes de Giemsa concentr [Merck N 1.01424]. [Pour la recherche et lidentification des
microfilaires, la coloration de Giemsa devrait tre deux fois plus longue (40 minutes) et le Giemsa deux
fois plus concentr (10 gouttes de Giemsa concentr pour 4 ml deau tamponne idalement pH 8)].
La solution aqueuse de Giemsa aura une double action : hmolyse et coloration.
Egoutter et rincer
prudemment leau courante. Laisser scher et examiner au microscope ( lobjectif 10 x pour la recherche
de microfilaires, ou sous immersion pour la recherche des autres parasites sanguins). Les globules rouges ont
clat et seuls sont rests sur la lame les leucocytes et les parasites ventuels.

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Pour viter la dgradation du Giemsa par raction acide-base, la prparation de la dilution du Giemsa
doit aussi tre extemporane. Le Giemsa concentr doit aussi tre filtr avant utilisation (au moment du
transvasement dans un petit flacon compte gouttes. Pour obtenir de bonnes colorations, il est
indispensable que leau de dilution ait un pH adquat au but poursuivi. Une eau trop acide colore tout
trop rouge, alors quune eau alcaline colore tout trop bleu. Utilisez un pH adapt lexamen.
pH
Utilisations

6.6

6.8

Hmatologie

Hmatologie
et
Leishmanioses

7.0
Paludisme

7.2
Paludisme

7.4

7.6

7.8

8.0
Paludisme
et
Microfilaires

Trypanosomiases

Dans un petit laboratoire, pour viter des erreurs, il est cependant prfrable de standardiser le pH de
leau de dilution 7,2 pour tous les examens, y compris lhmatologie (compromis acceptable pour tous
les usages).
N.B. : Numration des parasites en goutte paisse (uniquement valable dans le cadre de la malaria) :
La recherche de parasites est considre comme ngative si aucun parasite na t retrouv durant lexamen dau moins 200 champs
microscopiques lobjectif 100 x (ou objectif 50 x). Ceci ncessite peu prs 5 10 minutes pour un technicien expriment.
La numration parasitaire en goutte paisse, se fait en comptant le nombre de formes asexues de parasites par 200 leucocytes (nombre
de parasites compts dans autant de champs microscopiques quil est ncessaire pour compter un peu plus de 200 leucocytes). Pour
Plasmodium falciparum, les gamtocytes doivent tre reports sparment. En connaissant la concentration leucocytaire, on peut obtenir le
nombre de parasites par l de sang :
Nombre de parasites asexus compts
----------------------------------------------------- x Concentration leucocytaire = Nombre de parasites/l de sang
Nombre de leucocytes compts
Si la numration leucocytaire nest pas ralise, lOMS recommande dutiliser comme valeur 8.000 leucocytes par l de sang pour tous les
patients.
Chez des personnes non immunes, des parasitmies mmes faibles peuvent donner lieu des phnomnes pathologiques. En absence
dimmunit surtout, la corrlation entre la densit parasitaire de P. falciparum et la gravit des symptmes est nette. [N.B. : Dans les
infestations P. falciparum, lexamen de sries de frottis prlevs toutes les 6 12 heures montrent dimportantes fluctuations dans les
densits parasitaires. Ceci est d la squestration des rythrocytes parasits au moment de la schizogonie. Dans les infestations o le
dveloppement des parasites est synchrone, ceux-ci peuvent disparatre temporairement des prlvements].
Pour la routine dun petit laboratoire tropical, une estimation de la charge parasitaire en goutte paisse est suffisante pour Plasmodium spp.
Ce systme propos par lO.M.S. indique labondance relative des formes asexues des parasites laide dun code allant de 1 4 signes
plus , comme suit :

Echelle OMS simplifie pour exprimer la parasitmie


1-9
1-9
1-9
> 10

parasites asexus / 100 champs = +


parasites asexus / 10 champs = ++
parasites asexus / 1 champs = +++
parasites asexus / 1 champs = ++++

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Woo :
Bonne technique de concentration pour la recherche des trypanosomes, des microfilaires sanguines et des
Borrelia spp. responsables des fivres rcurrentes. Cette technique est relativement facile raliser, mais
ncessite lutilisation dune centrifugeuse hmatocrite lectrique. Ce test est trs sensible car il concentre les
parasites partir de 50 60 l de sang. Cette technique ne permet cependant pas didentifier le type de
microfilaire. De plus, en cas de prsence de microfilaires, il est impossible de visualiser les trypanosomes ou
les Borrelia spp. ventuellement prsents. L'examen microscopique des tubes reste dlicat mme pour un
technicien expriment. Le seuil de positivit est de lordre de 250 trypanosomes et 25 microfilaires par ml de
sang.
La centrifugation d'un tube capillaire rempli de sang provoque la sparation des
globules rouges et du plasma. (Centrifugation de 5 minutes 12.000 rpm ou
15.000 g). Les leucocytes et les thrombocytes qui sont plus lgers que les
hmaties se regroupent l'interface entre la colonne rouge et le plasma, et
Plasma
forment ainsi un trait blanchtre (le buffy coat). Les parasites qui ont peu
prs la mme densit que les globules blancs, se retrouvent dans la mme
Globules blancs
buffy coat
et plaquettes
rgion.
Globules rouges

Aprs centrifugation, le tube est dpos sur une lame spciale et immerg
dans de leau. La lame porte tube est place sous lobjectif du microscope.
Centrez lobjectif sur linterface du tube lire, au niveau du buffy coat. Les
parasites apparaissent anims de mouvements ondulants, soit libres dans le
plasma proximit de la couche de globules blancs, soit enfoncs dans cette
couche ce qui les rend plus difficiles observer. Quel que soit l'objectif utilis
(10x ou 20x), il ne peut permettre la lecture sur toute la profondeur du tube,
aussi faut-il tourner le tube sur lui-mme pour pouvoir examiner tout linterface.
Comme lpaisseur de la prparation empche lutilisation dun objectif 40x
standard, il peut tre utile dutiliser des oculaires 15x.
Pour identifier les parasites retrouvs, on pourrait envisager de couper le capillaire au niveau de la couche des
globules blancs, dtaler cette fraction sur une lame et de raliser une coloration au Giemsa. Cependant, en
raison du risque important de se blesser et donc de sinfecter, cette procdure est dconseiller.

QBC (Quantitative Buffy-Coat) :


Technique de concentration pour la recherche des trypanosomes, des Plasmodium spp. et des microfilaires.
Elle permet aussi de mettre en vidence les Borrelia spp. des fivres rcurrentes et les Babesia spp. Elle
consiste en une centrifugation en tube capillaire combine une coloration par lacridine orange. Le seuil de
positivit est de lordre de 100 plasmodies par l de sang, de 250 trypanosomes ou de 25 microfilaires par ml
de sang.
Aprs centrifugation haute vitesse (5 minutes, 12.000 rpm ou 15.000 g), les globules rouges parasits par des
Plasmodium moins denses que les globules rouges non parasits se rassemblent aussi au niveau de l'interface
avec le plasma. L'acridine orange, agent intercalant spcifique des acides nucliques, induit, aprs excitation
par une source lumineuse approprie (UV), une coloration mtachromatique diffrentielle entre l'ADN (vert
pomme jaune vert) et l'ARN (vert rouge orang). Les Plasmodies sont donc visibles grce leur noyau
dans les rythrocytes non nucls. Un flotteur, d'un diamtre lgrement infrieur au tube capillaire, vient se
positionner cheval sur la couche leucocytaire et rythrocytaire, provoquant une expansion mcanique des
cellules qui l'entourent au voisinage de la paroi du tube o elles seront plus facilement observables.
La lecture au microscope fluorescence (objectif 50 X) est possible immdiatement. Elle permet de visualiser
sous le plasma, la couche plaquettaire, la couche lympho-monocytaire, la couche des granulocytes et enfin le
sdiment rythrocytaire. La mise au point se fait sur la couche rythrocytaire au niveau de l'interface avec les
leucocytes. En cas de ngativit, toute la hauteur du sdiment est examine.
La morphologie des parasites reste comparable celle observe sur un talement mince : Sur un fond sombre,
o les membranes rythrocytaires dessinent une trame, les trophozotes s'observent en position intrarythrocytaire. Le noyau met une fluorescence verte intense, homogne, de 1 2 m de diamtre. Le
cytoplasme, de taille variable, met une fluorescence de vert orange, moins intense et bords nets. Il
enserre le noyau et dlimite une zone non fluorescente correspondant la vacuole. Le diagnostic repose donc
sur une image associant un noyau et un cytoplasme en position intra-rythrocytaire. Les trypanosomes et les
microfilaires sont en plus toujours mobiles facilitant leur mise en vidence. Le diagnostic despce nest
cependant pas possible. Cette technique nest pas recommande pour la recherche de microfilaires des
Borrelia spp. ou des Babesia spp., mais est trs utile dans le cadre de la recherche des trypanosomes.
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Mthode de Knott :
Il sagit dune mthode asse sensible pour la recherche des microfilaires. La limite de dtection est de lordre
dune microfilaire par ml de sang.
1 ml de sang est mlang avec 10 ml de formol 2 % v/v. Cette concentration en formol est suffisante pour
fixer les microfilaires, sans fixer les globules rouges qui seront donc hmolyss. Aprs hmolyse, le mlange
est centrifug 1.000 rpm (160 g) pendant 5 minutes. Le surnageant est limin et le culot tal sur une lame.
Aprs coloration au Giemsa (comme pour une goutte paisse), la lame est examine systmatiquement au
microscope (objectif 10 x). Si ncessaire, les grossissements 400 x et 1.000 x peuvent tre utiliss pour
lidentification de lespce.

Mthode de Strout :
Il sagit dune mthode assez sensible, utilise pour la recherche des formes trypomastigotes de Trypanosoma
cruzi.
Prlevez 20 ml de sang sans anticoagulant. Laissez coaguler le sang. Aprs coagulation, enlevez le caillot.
Centrifugez le srum ainsi obtenu 2.500 rpm (1.000 g) pendant 5 minutes. Examinez le culot de
centrifugation lobjectif 10 x ou 40 x (comme pour un examen direct pour recherche des trypanosomes
mobiles). Comme la dure de la ralisation du test est assez longue, les trypanosomes peuvent tre immobiles.
Il est donc prfrable dtaler et colorer au Giemsa le culot de centrifugation (comme pour une goutte paisse)
puis de lexaminer au microscope immersion (objectif 50 x ou 100 x).

Mini colonne mAECT :


La technique mAECT (mini anion exchange centrifugation technique) est principalement utilise comme
instrument de recherche ou dans les grands centres de dpistage de la trypanosomiase. Elle est base sur la
capacit que possdent les fragments de cellulose quilibrs par un tampon un pH dtermin de prsenter
une charge lectrostatique de surface. Lorsque le sang frais infect scoule travers une colonne de cellulose
quilibre, les cellules du sang sont retenues par la cellulose alors que les trypanosomes scoulent avec le
tampon. Cette technique permet de sparer compltement les trypanosomes dun volume de sang important.
La centrifugation de llut recueilli dans un tube spcial permet de concentrer les parasites au bout du tube qui
peut tre regard directement au microscope (objectif 10x). Cette preuve est trs sensible, mais ncessite la
prparation ou lachat des colonnes (disponible pour approximativement 3 $ en 2005 auprs du Prof. J.-J.
Muyembe, Institut National de Recherche Biomdicale (INRB), Avenue de la Dmocratie. Kinshasa, R.D.
Congo. E-mail : inrb.rdc@ic.cd). Tous les ractifs doivent tre striles pour viter des erreurs de diagnostic en
raison de la prsence de micro-organismes mobiles qui peuvent, lorsquils sont en grappes, tre pris pour des
trypanosomes.
Le seuil de positivit est infrieur 100 trypanosomes par ml de sang.

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EXAMENS PARASITOLOGIQUES DERMIQUE :

Skin snip (biopsie cutane exsangue):


Cette technique de biopsie cutane est utilise pour la recherche des microfilaires dermiques (Onchocerca
volvulus et ventuellement Mansonella streptocerca).
En cas de prsence donchocercomes, le prlvement de la biopsie dermique se fera proximit de ce nodule,
sauf si la localisation est contre indique (visage par exemple). En absence donchocercome, prlevez une
biopsie au niveau du milieu de lomoplate et une autre biopsie au niveau de la crte iliaque. Une troisime
biopsie au niveau de la partie suprieure externe du mollet peut aussi tre utilise. Utilisez de prfrence une
pince sclrotomie ou dfaut une aiguille et un scalpel.
Dsinfectez lendroit choisi. Soulevez la peau laide de laiguille. Coupez dun coup sec le morceau de peau
soulev par la pointe de laiguille, aussi prs de laiguille que possible. Le prlvement de 2 3 mm de large
doit rester accroch la pointe de laiguille. La biopsie doit tre exsangue pour viter une contamination par
des parasites sanguins. Dposez la biopsie sur une lame dans une goutte deau physiologique et recouvrez
dune lamelle. Observez au microscope lobjectif 10 x de temps en temps la prparation pour voir sil ny a
pas de microfilaires qui sortent de la prparation (30 minutes 1 heures. Pour viter le desschement de la
prparation, conservez-la en chambre humide). Dans le cadre dun dpistage de masse o seul Onchocerca
volvulus est recherch, il est possible de dposer chaque biopsie dans des tubes centrifuger fond conique
contenant un peu deau physiologique. Aprs 30 minutes 1 heure, enlevez les biopsies et centrifugez les
tubes 2.500 rpm (1.000 g) pendant 5 minutes. Eliminez les surnageants et observez les culots de
centrifugation systmatiquement, soit frais lobjectif 10 x, soit aprs coloration au Giemsa (comme pour une
goutte paisse).

Scarification profonde :
Cette technique de prlvement de suc dermique est utilise pour la recherche des microfilaires dermiques
(Onchocerca volvulus et ventuellement Mansonella streptocerca). Elle permet de retrouver dans la mme
prparation des microfilaires sanguines mais aussi accidentellement des plasmodies, des trypanosomes ou des
Borrelia spp. Cette mthode nest pas recommande pour la recherche de ces parasites.
Les sites de prlvement sont les mmes que ceux utiliss pour une skin snip . Aprs avoir dsinfect la
peau, incisez la peau au scalpel sur 1 cm de long et 2 mm de profondeur. La profondeur est correcte, sil ny a
quun peu de sang qui perle de lincision. Incisez la peau une seconde et une troisime fois quelques mm de
la premire incision. Si la profondeur de la premire incision ntait pas assez importante (pas de sang perlant
de la scarification), appuyez un peu plus fort sur le scalpel. Pressez la peau autour des scarifications pour faire
sortir la lymphe contamine de sang hors de la scarification. Recueillez ce mlange plusieurs fois sur une lame
porte objet. Laissez scher la prparation. Colorez cette prparation au Giemsa comme une goutte paisse.
Observez systmatiquement la prparation lobjectif 10 x pour rechercher les microfilaires.

Exsudat dune lsion cutane :


Cette technique permet la recherche des leishmanies. Certaines lsions cutanes sont humides. Cet exsudat
peut contenir des parasites (Leishmania spp des formes cutanes ou muco-cutanes). Rcuprez ce liquide
laide dune pipette pasteur en plastique (ou dun couvillon). Etalez ce liquide sur une lame porte objet. Aprs
schage, colorez cette prparation au Giemsa comme une goutte paisse. Leau tamponne utilise pour diluer
le Giemsa devrait optimalement tre un pH de 6,8. Observez la prparation au microscope sous immersion
(objectif 50 x ou 100 x) pour rechercher les parasites ventuels.

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EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN SUC GANGLIONNAIRE :


Il sagit dune technique importante pour le diagnostic de la trypanosomiase du type gambiense. Elle peut aussi
tre utilise avec moins de succs dans la trypanosomiase du type rhodesiense, et parfois pour le diagnostic de
leishmaniose ou de toxoplasmose.
En zone endmique pour la trypanosomiase, cet examen devrait toujours tre effectu et tous les individus aux
ganglions lymphatiques hypertrophies (adnopathie) devraient tre considrs comme des suspects (ceci est
principalement vrai pour la forme gambiense). Le systme lymphatique tant lun des premiers tre envahi
par le trypanosome, lhypertrophie des ganglions lymphatiques peut mme prcder la production danticorps.
Les ganglions hypertrophis forment une petite masse ronde lastique qui glisse sous la peau. Ils ne sont
gnralement pas indurs et rsistent peu la pression. Ils sont gnralement indolores. Gnralement, les
ganglions lymphatiques hypertrophis se trouvent dans la rgion du cou en particulier la base de celui-ci.
La prsence de ganglions lymphatiques hypertrophis est un signe trs suspect en zone endmique
gambiense. Mais il peut tre absent dans 20 40 % des cas. Labsence de ce signe pathologique ne signifie
donc pas que le sujet est indemne de la maladie. On a aussi constat que, dans de nombreux cas, lexamen
de la lymphe est positif, alors que celui du sang reste ngatif (linverse est aussi vrai). Cest la raison pour
laquelle il est absolument ncessaire de palper les ganglions de tous les sujets au cours dune enqute et de
ponctionner tous les ganglions lymphatiques suspects.
Le ganglion est immobilis entre pouce et index. Une aiguille est introduite perpendiculairement au centre du
ganglion. Malaxez doucement le ganglion, tout tournant laiguille sur elle-mme. Retirez laiguille du ganglion
et adaptez-la sur une seringue (piston tir fond). Enfoncez doucement le piston de la seringue pour dposer
le suc ganglionnaire sur une lame porte objet. Recouvrez dune lamelle et observez immdiatement au
microscope (objectif 40x) pour rechercher les trypanosomes mobiles. Les trypanosomes tant reconnus leur
mouvement, il faut procder lexamen microscopique avant quils ne simmobilisent, cest--dire 10 ou 15
minutes au maximum aprs la prise de lchantillon.
Le contenu de laiguille peut aussi tre tal en frottis mince sur une lame, color comme un frottis au Giemsa
et observ au microscope immersion (objectif 100 x ou 50 x). Cette procdure nest cependant indique que
dans le cadre de la recherche de toxoplasmes et de formes amastigotes de Trypanosoma cruzi ou de
Leishmania spp.

EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUNE PONCTION DE MOELLE OSSEUSE :


La moelle osseuse est tale sur une lame comme un frottis sanguin ou comme un tissu mou. Aprs schage,
et fixation au mthanol, la prparation est colore comme un frottis sanguin, au Giemsa ou au May-GrnwaldGiemsa. Cette technique est principalement utilise pour la recherche de Leishmania spp.

EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN TISSU MOU (FOIE, RATE) :


La biopsie prise avec une pince est lgrement presse plusieurs endroits sur une lame prote-objet. On
obtient ainsi des taches de cellules sur la lame Aprs schage, et fixation au mthanol, la prparation est
colore comme un frottis sanguin, au Giemsa ou au May-Grnwald-Giemsa.
Cette technique est
principalement utilise pour la recherche de Leishmania spp.

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EXAMENS PARASITOLOGIQUES DUN LIQUIDE CPHALO-RACHIDIEN :


Cette technique est utilise en parasitologie pour la dtermination du stade, le suivi (et parfois en cas de forte
suspicion clinique pour le diagnostic) de la trypanosomiase africaine, mais aussi pour la recherche de
cryptocoques, de toxoplasmes, de Naegleria, dAcanthamoeba et dans le cadre des mningites osinophiles
provoques par Angiostrongylus. (cf. aussi notes de bactriologie pour les mningites bactriennes).
Le liquide cphalo-rachidien doit tre analys le plus vite possible aprs prlvement, en raison de la lyse
rapide des lments cellulaires (les trypanosomes par exemple lysent ds 10 minutes aprs prlvement).
Dans le cadre de la trypanosomiase, la dtermination du stade de la maladie est ncessaire pour choisir le
traitement adapt avec le moins de risque pour le patient. Le stade II se caractrise par une invasion
parasitaire du systme nerveux central. En supposant que tout changement observ au niveau du LCR reflte
linfestation ou linflammation, diffrents paramtres peuvent tre analyss (numration cellulaires, prsence de
parasites, concentration en protines ou en gamma globulines,). La dfinition dun LCR normal est la
6
suivante : absence de parasite, une cellulorachie infrieure ou gale 5 cellules par l et une faible
concentration protique (les valeurs de protinorachie varient en fonction de la technique danalyse tudie).
Comme il ny a pas de relation troite entre ces paramtres, lO.M.S. recommande des tous les analyser
simultanment.

Numration des leucocytes :


Cette mthode est utile tant en parasitologie quen bactriologie (cf. notes de bactriologie pour dautres
usages et notes dhmatologie pour le principe gnral). En raison du faible nombre de cellules prsentes dans
un LCR normal, on utilise une cellule de numration grand volume (Fuchs Rosenthal, Malassez, Neubauer,
). Il peut tre utile dutiliser des cellules de numration usage unique du type Kova (le volume est plus
juste, mais pour un cot non ngligeable). Nettoyez et montez soigneusement la cellule (absence de poussire
ou de graisse, usage de lamelles spciales pour cellules de numration, prsence danneaux de Newton). La
numration doit se faire sur un liquide frachement prlev et bien videmment avant toute centrifugation.
Homognisez soigneusement le LCR avant de remplir la chambre sans dborder. Comptez les cellules
prsentes sous microscope (objectif 10 x, oculaire 10 x ou 15 x) en fonction de la cellule de numration utilise.
Si ncessaire, confirmez lobjectif 40 x le type de cellules prsentes (globules blancs ou rouges). Si le
nombre de cellules comptes est infrieur 20 par l de LCR, il est recommand de rpter toute la procdure
et de calculer une valeur moyenne sur deux mesures.

6
Notons que la cellulorachie normale peut aller jusqu 30 cellules par l de LCR pour des enfants de moins dun an, jusqu 20 cellules pour des enfants de 1 4 ans et jusqu 10
cellules pour des enfants de plus de 5 ans et ce jusqu la pubert.

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Cellule de numration de Fuchs Rosenthal


Surface : 4 mm x 4 mm.
Profondeur : 0.2 mm.
Volume total : 3,2 mm ou l.
Pour un LCR non dilu, le nombre de cellules comptes dans les carrs moyens 1 5
reprsente le nombre de cellules par l de LCR.

Cellule de numration de Mallassez


Surface : 2 mm x 2,5 mm.
Profondeur : 0.2 mm.
Volume total : 1 mm ou l.
Pour un LCR non dilu, le nombre de cellules comptes dans toute la cellule reprsente
le nombre de cellules par l de LCR.

Cellule de numration de Neubauer (Double improved) :


Surface : 3 mm x 3 mm.
Profondeur : 0.1 mm.
Volume total : 0.9 mm ou l.
Pour un LCR non dilu, compter toutes les cellules prsentes dans toute la chambre,
puis multiplier par 10/9 pour obtenir le nombre de cellules par l de LCR.

Cellule de numration usage unique Kova :


La chambre est constitue de 1 grand carr, divis en 9 carrs moyens et en 81 petits
carrs.
Volume total : 1l.
Volume pour 1 petit carr : 0,0123 l.
Pour un LCR non dilu, le nombre de cellules comptes dans toute la chambre
reprsente le nombre de cellules par l de LCR.

Examen direct :
Rarement, des parasites mobiles peuvent tre retrouvs frais, lors de la numration des leucocytes du L.C.R.
Il peut sagir de trypanosomes, indiquant alors un stade II de la trypanosomiase, des trophozotes amibodes de
Naegleria ou dAcanthamoeba spp. (quil ne faut pas confondre avec des macrophages, mobiles galement par
leurs pseudopodes). On peut aussi retrouver exceptionnellement des kystes dAcanthamoeba spp.

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Examen aprs centrifugation :


Centrifugez quelques millilitres de LCR pendant 10 minutes 3.000 rpm (1.000 g) dans un tube centrifuger
fond conique. Dcantez dlicatement le surnageant, sans toucher le sdiment (invisible si la cellulorachie est
basse). Le surnageant peut tre utilis pour la dtermination de paramtres biochimiques (glycorachie,
protinorachie, etc.). Le culot de centrifugation, remis en suspension dans la dernire goutte du surnageant est
dpos sur une lame, recouvert dune lamelle et est examin compltement et systmatiquement lobjectif 10
x, oculaires 10 x ou 15 x pour rechercher des agents pathognes mobiles (confirmation lobjectif 40 x). Une
coloration au Gram, au bleu de mthylne, lencre de Chine ou au Giemsa du sdiment peuvent aussi tre
utiles pour dtecter dautres agents pathognes ou pour identifier la nature des cellules prsentes
[osinophiles, cellules de Mott, ] (cf. notes de bactriologie).

Examen aprs double centrifugation :


La sensibilit de la recherche des trypanosomes dans le LCR peut tre amliore par une double
centrifugation. Centrifugez quelques millilitres de LCR pendant 10 minutes 3.000 rpm (1.000 g) dans un tube
centrifuger fond conique. Dcantez dlicatement le surnageant, sans toucher le sdiment (invisible si la
cellulorachie est basse). Le surnageant peut tre utilis pour la dtermination de paramtres biochimiques
(glycorachie, protinorachie, etc.). Le culot de centrifugation, remis en suspension dans la dernire goutte du
surnageant est aspir dans un ou deux tubes capillaires hmatocrite. Scellez la flamme lextrmit qui nest
pas entr en contact avec le LCR et centrifugez les micro-capillaires (Centrifugation de 5 minutes 12.000 rpm
ou 15.000 g). Lextrmit infrieure des capillaires bouchs est examine sous microscope comme dans la
technique de Woo.

Evaluation des protines totales :


Le dosage des protines du LCR peut se faire par plusieurs techniques.
Ces techniques sont
malheureusement peu standardises et peu comparables : Toutes les protines ventuellement prsentes ne
ragissent pas de la mme manire avec les ractifs des diffrentes mthodes. (Un LCR normal contient
environ 30 % IgG et 70 % dalbumine, qui ragissent toutes deux diffremment). Avec comme rsultat que des
valeurs diffrentes peuvent tre obtenues en fonction de la mthode utilise et du type de protines utilises
comme calibrateur. Lorsquune mthode est choisie, il faudrait fixer la valeur seuil en testant une srie de LCR
normaux. A titre dexemple, voici quelques valeurs seuils indicatives pour diffrentes mthodes (variable en
fonction du type de protines utilises comme calibrateur) :

Mthode
Prcipitation au TCA 5 %
Prcipitation

lacide
sulfosalicylique 3 %
Colorimtrie au bleu de
Coomasie brillant
Colorimtrie au BCA

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Valeur seuil
(en g/l)
0,25
0,45
0,37
Donne non disponible pour
les LCR

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Evaluation des protines par la technique de Sicard et Cantaloube :

ATTENTION : LAcide trichloroactique est extrmement corrosif. Manipulez ce produit avec


grande prcaution.

4 ml

2 ml
1 ml

Une mthode assez simple est la technique de Sicard et Cantaloube. Il sagit dun
test de floculation : les protines coagulent sous leffet combin de la chaleur et du
milieu acide en flocons blanchtre qui sdimentent au fond du tube. La hauteur du
sdiment est proportionnelle la quantit de protines (albumine) prsente. Les tubes
de Sicard et Cantaloube sont malheureusement difficiles trouver.
Versez dans le tube de Sicard 4 ml du LCR examiner (surnageant aprs
centrifugation du LCR). Chauffez lgrement le tube jusqu 50C. Ajoutez
immdiatement 12 gouttes dacides trichloroactique 30 % (p/v). Fermez le tube et
retournez-le 3x pour homogniser le contenu (ne secouez jamais le tube). Laissez
reposer le tube en position rigoureusement verticale pendant au moins 5 heures (on
peu diffrer la lecture jusqu 24 heures sans grande modification du rsultat). La
hauteur du culot trouble indiquera la quantit de protines prsentes. Par cette
mthode, Un LCR normal ne doit pas dpasser 0,40 g/l.

Evaluation des globulines par la raction de Pandy :

ATTENTION : Le Phnol est extrmement corrosif et toxique. Manipulez ce produit avec grande
prcaution.

Ce test simple, bas sur la prcipitation des globulines en prsence de phnol, permet dvaluer la quantit de
globulines prsentes. En raison de son seuil de positivit, ce test nest utilisable que sur du L.C.R. Mesurez
dans un petit tube essais 1 ml de ractif de Pandy puis placez le tube devant un morceau de carton noir.
Ajoutez goutte--goutte 3 gouttes du surnageant du L.C.R. centrifug et examinez le tube aprs chaque goutte.
Lorsquun prcipit blanc se forme lorsque la goutte de L.C.R entre en contact avec le ractif, le test est positif
(ce qui indique la prsence dune quantit importante de globulines dans le L.C.R.).
Le test est ngatif si aucun prcipit blanc ne se forme, si le mlange reste limpide ou si un lger trouble
apparat mais se re-dissout. Ce test est positif en cas de trypanosomiase (stade 2), de mningite bactrienne,
fongique (cryptococcose) ou parasitaire (amibes). Il est galement positif en cas de malaria crbrale, de
tumeur crbrale, de blessures crbrales,

FORMOL GEL TEST :


 ATTENTION : Le Formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et
par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce
produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Ce test simple, peu coteux mais non spcifique indique une augmentation des gammaglobulines dans le
srum. Il peut tre utilis comme test prsomptif dune leishmaniose viscrale (ou comme test de dpistage sur
des donneurs de sang ?). Sa sensibilit serait de lordre de 90 %. Il deviendrait positif dans les 3 mois qui
suivent linfestation pour se ngativer 6 mois aprs un traitement russi. Des rsultats plus variables seraient
cependant obtenus pour des patients co-infects par le VIH. On peut aussi observer une raction positive dans
certaines infections par lhpatite B et dans certains cancers (mylomes, macroglobulinmie de
Waldenstrm,). La malaria, la trypanosomiase, la lpre, etc., sont aussi associes une augmentation des
globulines, mais gnralement sans atteindre le niveau ncessaire pour positiver le test.
Prlevez 2 5 ml de sang et laissez-le se coaguler. Aprs rtraction du caillot (ce qui prend habituellement de
30 60 minutes dans un tube en verre), centrifugez (10 minutes, 4.000 g) le tube pour obtenir un srum clair.
Mettez 1 ml de srum dans un petit tube en verre. Ajoutez 2 gouttes de formol (formaldhyde 37 % p/v) et
mlangez doucement. Observez de temps en temps le tube durant 2 heures.
Le test est positif si le srum se glifie et/ou blanchi. La plupart des tests positifs sont obtenus en moins de 20
minutes (souvent moins de 5 minutes). En tout dbut dinfestation la glification peut cependant ncessiter
jusqu 2 heures. Le test est ngatif si ni glification ni blanchiment ne se produit dans les 2 heures.

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PREPARATION DES REACTIFS ET DES COLORANTS


1. ACIDE ACETIQUE A 5 % (v/v) (pour claircissement des proglottis) :

 ATTENTION :

L'Acide Actique Glacial est inflammable, nocif et extrmement corrosif. Il est


aussi irritant pour les yeux. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence, loin dune flamme
et fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique).
Eau Distille........................................................................................950 ml
Acide Actique Glacial (C2H4O2)...........................................................50 ml

Ne versez jamais d'eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans un
acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Mesurez 950 ml deau distille
dans un cylindre de 1.000 ml et versez-la dans un flacon de 1.000 ml. Mesurez 50 ml dAcide Actique
Glacial dans un cylindre de 50ml. Ajoutez lentement les 50 ml dAcide Actique Glacial dans le flacon.
Le contenu schauffera.
Ce ractif peut tre remplac par du vinaigre blanc de cuisine.
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun.

2. ACIDE PICRIQUE

(pour coloration lhmatoxyline ferrique)

 ATTENTION

: LAcide picrique est inflammable et explosif sec. Evitez les chocs, les
frottements et la dispersion de poussires. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence, loin
dune flamme
Solution stock dacide picrique:
Acide picrique(C6H3N3O7)..........................................
Eau distille...............................................................

13 g
1.000 ml

Dissolvez les 13 grammes dacide picrique (VWR 1.00621) dans 1.000 ml deau distille dans
un bain-marie 60C.
CONSERVATION : 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.

Solution de travail dacide picrique :


Solution stock dacide picrique...............
Eau Distille.................................................................

80 ml
80 ml

Ne versez jamais d'eau dans de l'Acide Picrique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Mlangez une mme
quantit deau distille et de la solution stock dacide picrique.
CONSERVATION : 1 semaine (et/ou approximativement 200 prparations).

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3. ACIDE TRICHLOROACETIQUE A 30 % (p/v) (pour valuation des protines du LCR) :

 ATTENTION :

L'Acide Trichloroactique est extrmement corrosif et provoque de graves


brlures. Evitez tout contact avec la peau et les muqueuses. Ce produit est manipuler avec une
extrme prudence, fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique). Utilisez des gants.
Acide Trichloroactique (C2HCl3O2)...........................................................30 g
Eau Distille.............................................................................................100 ml

Ne versez jamais d'eau dans l'Acide Trichloroactique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
CONSERVATION : Quelques semaines.

4. ALBUMINE DE MAYER (pour coloration lhmatoxyline ferrique) :


Blanc dufs frais............................................................. 10 ml
Glycrine 87 %......................................... 10 ml
Mlangez doucement une mme quantit de blanc dufs et de glycrine (VWR 1.04094) jusqu
apparition dun col de mousse blanchtre.
Attendez quelques minutes pour obtenir une
solidification. Utilisez uniquement la couche infrieure.
CONSERVATION : 3 mois 4C dans un flacon blanc hermtiquement bouch .

5. ALCOOL ACIDE DE ZIEHL 3 %(v/v) (pour coloration de Ziehl Neelsen et l hmatoxyline ferrique) :

 ATTENTION

: L'thanol est inflammable, manipulez ce produit loin dune flamme. L'Acide


Chlorhydrique est extrmement corrosif. Les vapeurs dAcide Chlorhydrique sont toxiques. Ce
produit est manipuler avec une extrme prudence fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique).
Ethanol 96 % (C2H6O)...................................................... 970 ml
Acide Chlorhydrique concentr (HCl 37 %)..................... 30 ml

Dans un flacon d'un litre, versez 970 ml d'Ethanol 96 %. Ajoutez lentement 30 ml d'Acide
Chlorhydrique en le laissant couler le long de la paroi. Mlangez. Le contenu s'chauffera. Les ractifs
de bases peuvent tre de qualit technique.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.

6. ALCOOL AMMONIACAL (pour coloration lhmatoxyline ferrique) :

 ATTENTION : L'thanol est inflammable, manipulez ce produit loin dune flamme.


Lammoniaque est un produit corrosif. Les vapeurs dammoniaque sont irritantes. Ces produits sont
manipuler avec une extrme prudence fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique).
Ethanol 70 % (C2H6O)..................................................
Ammoniaque 25 % (NH3).......................................

250 ml
3 ml

Mlangez 250 ml dthanol 70 % et 3 ml dammoniaque 25 % (VWR 1.05432).


CONSERVATION : A utiliser dans la semaine.
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7. BLEU DE METHYLENE (pour coloration de Ziehl-Neelsen) :

 ATTENTION :

L'Ethanol est inflammable, manipulez ce produit loin dune flamme.

Bleu de Mthylne, solution mre sature :


Bleu de Mthylne..........................................
Ethanol 96 % (C2H6O).....................................

25 g
250 ml

Le contenu d'un flacon de 25 g de Bleu de Mthylne est introduit dans une bouteille brune de
250 ml qui est ensuite remplie d'Ethanol 96 %. La bouteille est vigoureusement agite trois
reprises dans la mme journe. Laissez dposer. La solution est prte l'emploi ds le
lendemain. On peut ajouter de l'Ethanol tant qu'il reste un dpt de Bleu de Mthylne.
N.B. Le Bleu de Mthylne peut tre dissous dans du Mthanol la place de l'Ethanol. Il ne
faut pas laver ou rincer les flacons contenant des solutions satures. Il faut seulement ajouter
de temps en temps un peu de colorant et un peu d'alcool. Tant qu'il reste un peu de poudre au
fond du flacon, on peut considrer que le surnageant est satur.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Bleu de mthylne, solution de travail :
Solution sature de Bleu de Mthylne filtre.............
Eau Distille.................................................................

100 ml
900 ml

CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.


Filtrer avant emploi.

8. BLEU DE TOLUIDINE 0 (pour coloration au bleu de toluidine O) :

 ATTENTION :

L'Ethanol est inflammable, manipulez ce produit loin dune flamme. Le Bleu de


Toluidine O est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et par ingestion. Les
vapeurs sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce produit fentres ouvertes (ou
sous une hotte chimique) en utilisant des gants. L'Acide Chlorhydrique est extrmement corrosif.
Les vapeurs dAcide Chlorhydrique sont toxiques. Ce produit est manipuler avec une extrme
prudence fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique).
Bleu de Toluidine O .......................................... 320 mg
Eau distille........................................................ 60 ml
Acide Chlorhydrique concentr (HCl).................
2 ml
Ethanol absolu (C2H6O)...................................... 140 ml
Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Chlorhydrique. L'addition d'une faible quantit d'eau
dans un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Dissolvez sous
agitation magntique 320 mg de bleu de toluidine O [exemple Sigma T0394] dans 60 ml deau
distille. Ajoutez sous agitation 2 ml dacide chlorhydrique concentr, puis lentement 140 ml
dthanol absolu.
CONSERVATION : Quelques mois dans un flacon brun hermtiquement bouch.

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9. EAU FORMOLEE A 2 % (v/v) (pour la mthode de Knott) :

 ATTENTION : Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et
par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce
produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Formol 37 % (Formaldhyde) (CH2O).................................................... 2 ml
Eau distille ................................................................................ 98 ml
CONSERVATION : au moins 2 ans dans un flacon brun.

10.EAU PHYSIOLOGIQUE NaCl 0,85 % (p/v) (pour examens frais) :


Chlorure de Sodium (NaCl)..............................................................................8,5 g
Eau Distille....................................................................................jusqu 1000 ml
Utilisez un ballon jaug pour dissoudre le ractif et mesurer le volume d'eau distille.
CONSERVATION : Quelques semaines temprature ambiante. Cette solution doit tre vrifie
rgulirement pour sassurer quaucune prolifration microbienne ou fongique ne se soit installe.
Remplacez la solution si elle est trouble aprs agitation.

11.EAU PHYSIOLOGIQUE FORMOLEE A 10 % (v/v) (pour conservation des selles) :

 ATTENTION : Le formol est une substance toxique par inhalation, par contact avec la peau et
par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les muqueuses. Manipulez ce
produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des gants.
Formol 37 % (Formaldhyde) (CH2O)........................................................10 ml
Eau Physiologique ..........................................................................90 ml
CONSERVATION : Au moins 2 ans dans un flacon brun.

12.EAU TAMPONNEE (pour coloration de Giemsa) :


PREPARATION A BASE DE POUDRE (selon Sorensen) :
Solution stock A :
Phosphate Monopotassique anhydre (KH2PO4). 9,1 g
Eau distille.................................................................. jusqu' 1.000 ml
Utilisez un ballon jaug pour dissoudre le ractif et mesurer le volume d'eau distille.
CONSERVATION : Plusieurs semaines au rfrigrateur dans un flacon en verre brun. Cette
solution doit tre vrifie rgulirement pour sassurer quaucune prolifration microbienne ou
fongique ne se soit installe. Remplacez la solution si elle est lgrement trouble aprs
agitation.
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Solution stock B :
Phosphate Disodique dihydrate (Na2HPO4.2H2O).. 11,9 g
Eau distille................................................................... jusqu' 1.000

ml

Utilisez un ballon jaug pour dissoudre le ractif et mesurer le volume d'eau distille.
CONSERVATION : Plusieurs mois au rfrigrateur dans un flacon en verre brun. Ce ractif
doit tre vrifi rgulirement pour sassurer quaucune prolifration microbienne ou fongique
ne se soit installe. Remplacez la solution si elle est lgrement trouble aprs agitation.
Solutions de travail :
Utilisation

pH

Volume solution A
(en ml)

Volume solution B
(en ml)

Volume eau distille


(en ml)

Hmatologie

6,4

74,0

26,0

900

Hmatologie

6,6

64,0

36,0

900

Hmatologie et
leishmanioses

6,8

50,0

50,0

900

Paludisme

7,0

39,0

61,0

900

Paludisme

7,2

28,0

72,0

900

7,4

19,2

80,8

900

7,6

13,0

87,0

900

7,8

8,5

91,5

900

8,0

5,5

94,5

900

Trypanosomiases

Paludisme
Filarioses

CONSERVATION DE LA SOLUTION DE TRAVAIL : Plusieurs semaines dans un flacon brun


temprature ambiante. Ce ractif doit tre vrifi rgulirement pour sassurer quaucune
prolifration microbienne ou fongique ne se soit installe. Remplacez la solution si elle est
lgrement trouble aprs agitation.

13.EAU TAMPONNEE (pour coloration de Giemsa) :


PREPARATION A BASE DE COMPRIMES :
Solution stock :
Comprims VWR (MERCK) N 9468 pour tampon pH = 7,2...........1 comprim
Eau distille..................................................................................jusqu 1.000 ml
Utilisez un agitateur magntique et une "puce" pour dissoudre le comprim dans un jaug de
1000 ml.
Solution de travail (dilution maximale tester en fonction de la qualit de leau) :
Solution stock................................................................................. 200 ml
Eau distille.................................................................................... jusqu 800 ml
Le fabricant recommande de dissoudre un comprim par litre deau (distille ou filtre). Il est
cependant possible, en fonction de la qualit de leau utilise, daugmenter la dilution jusqu un volume
final de 10 litres. Ceci doit tre test sur des lames et valu en fonction de la qualit de la coloration
obtenue.
CONSERVATION : Plusieurs semaines dans un flacon brun temprature ambiante. Ce ractif doit
tre vrifi rgulirement pour sassurer quaucune prolifration microbienne ou fongique ne se soit
installe. Remplacez la solution si elle est lgrement trouble aprs agitation.
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14.ETHANOL A 70 % (v/v) (antiseptique et coloration lhmatoxyline ferrique) :

 ATTENTION : L'Ethanol est inflammable, manipuler ce produit loin dune flamme.


Ethanol 95 % (C2H6O)................................................................. 730 ml
Eau Distille................................................................................... 270 ml
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.

15.FUCHSINE DE ZIEHL (pour coloration de Ziehl Neelsen chaud et lhmatoxyline ferrique) :

 ATTENTION :

Le Phnol est extrmement corrosif et toxique. Manipulez ce produit avec grande

prcaution.
Solution mre de Fuchsine sature :
Fuchsine Basique.................................... 25 g
Ethanol 96 % (C2H6O)........................ 250 ml
Le contenu d'un flacon de 25 g de Fuchsine Basique (exemple Fluka 602) est introduit dans
une bouteille brune de 250 ml qui est ensuite remplie d'thanol 96 %. La bouteille est
vigoureusement agite trois reprises dans la mme journe. Laissez dposer. La solution
est prte l'emploi ds le lendemain. De meilleurs rsultats sont obtenus en utilisant de la no
fuchsine (exemple new fuchsin Merck 1.04041.0025), mais pour un prix beaucoup plus lev.
P.S. La Fuchsine Basique peut tre dissoute dans du Mthanol la place de l'Ethanol. Il ne
faut pas laver ou rincer les flacons contenant des solutions satures. Il faut seulement ajouter
de temps en temps un peu de colorant et un peu d'alcool. Tant qu'il reste un peu de poudre au
fond du flacon, on peut considrer que le surnageant est satur.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Solution mre aqueuse de Phnol 5 % (v/v) :
Phnol Cristallis fondu (C6H6O)...... 50 ml
Eau Distille................................................... 950 ml
Leau doit tre de leau distille ou filtre. Leau de robinet contient souvent des mycobactries
saprophytes qui ne se distinguent pas microscopiquement des mycobactries pathognes !
Le Phnol Cristallis est normalement incolore. Il est prim, et ne doit pas tre utilis s'il est
de couleur rose violet.
La solution aqueuse de Phnol 5 % est prpare en ajoutant 50 ml de Phnol Cristallis
fondu 45 C (bain-marie ou soleil, ou flacon de 50 g de phnol [exemple : Fluka 77610]) 950
ml d'eau distille. Le cylindre qui sert mesurer le volume de Phnol doit tre prchauff dans
le bain-marie ou au soleil (sinon, le Phnol cristallisera immdiatement dans le cylindre).
CONSERVATION : Quelques mois dans un flacon hermtiquement bouch.
.
Solution de travail :
Solution sature de Fuchsine Basique, filtre............
Solution aqueuse de Phnol 5 %............................

100 ml
900 ml

CONSERVATION : Au moins 2 ans dans un flacon en verre brun.


Filtrez avant emploi
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16.GLYCEROL-VERT DE MALACHITE (pour Kato-Katz) :


Solution aqueuse de Bleu de Mthylne (ou de Vert de Malachite) 3 % (p /v) :
[Ce ractif intervient aussi dans la prparation du liquide de Trck] :
Vert de Malachite (ou Bleu de Mthylne) .3 g
Eau Distille.................................................................................................100 ml
Pilez de la poudre de Vert de Malachite (ou de Bleu de Mthylne) dans un mortier propre et
sec. Pesez 3 g de poudre. Transvasez dans un flacon brun et ajoutez 100 ml deau distille.
Mlangez jusqu dissolution.
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Filtrez avant emploi.
Solution de travail Glycrol- Bleu de Mthylne (ou Vert de Malachite) :
Vert de Malachite (ou Bleu de Mthylne) 3% en solution aqueuse. 1 ml
Glycrol (C3H8O3)..............................................100 ml
Eau Distille.................................................................................................100 ml
Versez 1 ml de solution aqueuse 3 % de Vert de Malachite (ou de Bleu de Mthylne) dans un flacon
brun. Ajoutez 100 ml de glycrol et 100 ml deau distille. Mlangez soigneusement avant usage.
CONSERVATION : Au moins 1 an temprature ambiante dans un flacon en verre brun.

17.HYDROXYDE DE POTASSIUM A 1 % (p/v) :

ATTENTION : L'Hydroxyde de Potassium est extrmement corrosif. Manipulez ce produit avec


grande prcaution.
Hydroxyde de Potassium en granules (KOH)..................................................1 g
Eau Distille.................................................................................................100 ml

La mise en solution de lhydroxyde de potassium est exothermique.


CONSERVATION : 2 annes temprature ambiante dans un flacon en verre brun.

18.HYDROXYDE DE SODIUM A 1 % (p/v) :

ATTENTION : L'Hydroxyde de Sodium est extrmement corrosif. Manipulez ce produit avec grande
prcaution.
Hydroxyde de Sodium en granules (NaOH)....................................................1 g
Eau Distille.................................................................................................100 ml

La mise en solution de lhydroxyde de sodium est exothermique.


CONSERVATION : 2 annes temprature ambiante dans un flacon en verre brun.
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19.LUGOL FORT selon DAntoni (pour examens des selles) :

ATTENTION : L'Iode Sublime est nocive par inhalation ou contact.


Iodure de Potassium (KI)................................................................................7,5 g
Iode en Cristaux ou Iode Sublime (I2)...........................................................5 g
Eau distille.................................................................................... .. 500 ml

Dissolvez l'Iodure de Potassium dans 30 ml d'eau distille. Ajoutez l'Iode en Cristaux (pralablement
pulvris dans un mortier). Mlangez jusqu' dissolution. Ajoutez le reste de l'Eau Distille (470 ml).
N.B. : Liode ne se dissout pas dans leau et peu dans liodure de potassium. La dissolution de liode
est dautant plus difficile quelle contient des impurets. Utilisez donc toujours de liode bi sublime.
Conservez en bouteille brune l'abri de la lumire.
CONSERVATION : non filtr : 3 mois dans un flacon en verre brun. Le Lugol doit avoir une coloration
brun rouge. S'il est jaune, il ne fonctionnera plus et doit tre jet. Filtrez avant emploi. Liode,
produit corrosif et nocif svapore facilement de cette solution.

20.PEPSINE 2 % en HCl 0.5 %

(recherche de Trichines)

 ATTENTION

: L'Acide Chlorhydrique est extrmement corrosif. Les vapeurs dAcide


Chlorhydrique sont toxiques. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence fentres ouvertes
(ou sous une hotte chimique).
Eau distille.................................................................................... ..1.000 ml
Acide Chlorhydrique concentr (HCl 37 %).............................................
5 ml
Pepsine..............................................................................
20 g
Chlorure de Sodium (NaCl)......................................................................
8,5 g

Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Chlorhydrique. L'addition d'une faible quantit d'eau dans un
acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille. Dans un flacon d'un litre, versez
1.000 ml d'eau distille. Ajoutez lentement 5 ml d'Acide Chlorhydrique en le laissant couler le long de la
paroi. Mlangez. Le contenu s'chauffera. Ajoutez la pepsine et le chlorure de sodium. Mlangez
jusqu dissolution.
CONSERVATION : Au moins un an dans un flacon brun hermtiquement bouch.

21.REACTIF DE PANDY

(pour mise en vidence des globulines dans un L.C.R.)

 ATTENTION :

Le Phnol est extrmement corrosif et toxique. Manipulez ce produit avec grande


prcaution. Le phnol est aussi extrmement hygroscopique. Refermez hermtiquement le pot.
Phnol (C6H6O)..........................................................
Eau distille................................................................

50 g
500 ml

Le Phnol Cristallis est normalement incolore. Il est prim, et ne doit plus tre utilis s'il est de couleur
rose violet. Il existe des conditionnements de 50 g [exemple : Fluka 77610], permettant dviter le
pessage.
Le ractif de Pandy est une solution sature de phnol. Mettez le Phnol dans un flacon brun de 1000
ml. Ajoutez leau distille. Agitez nergiquement. Laissez reposer 1 jour. Vrifiez quil reste bien du
Phnol non dissous. Si oui, filtrez et conservez le ractif dans un flacon brun. Si tout le Phnol est
dissous, ajoutez 10 g de Phnol et attendez encore 1 jour avant de filtrer le ractif.
CONSERVATION : Quelques annes dans un flacon brun hermtiquement bouch.
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22.REACTIF DE SULFATATION (pour coloration au bleu de toluidine O) :

 ATTENTION :

Lther Dithylique est une substance extrmement inflammable qui senflamme


et explose rapidement au contact dune flamme ou dune tincelle. Manipulez ce produit loin dune
flamme. Conservez les bidons ou les flacons entams sur une tagre (pour que les vapeurs se
dispersent) dans la partie la plus frache du laboratoire. Comme lther est trs volatile, les flacons
doivent tre hermtiquement bouchs. Ne mettez pas un flacon dther au rfrigrateur : les vapeurs
saccumulent dans celui-ci, mme si le flacon est hermtiquement ferm, et peuvent exploser lors de
louverture de la porte. Ne rangez pas des flacons entams dans une armoire. Nayez que des petites
quantits dther dans le laboratoire.
L'Acide Sulfurique est extrmement corrosif. Les vapeurs
dAcide Sulfurique sont toxiques. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence fentres
ouvertes (ou sous une hotte chimique).
Ether Dithylique (C4H10O).......................................... +/- 140 ml
Acide Sulfurique concentr............................................... 100 ml

Dans une ampoule dcanter, mlangez en agitant fortement 140 ml dther di-thylique avec 40 ml
deau distille. Attendez que les deux couches se sparent et deviennent transparentes. Eliminez la
couche infrieure (aqueuse) ainsi que quelques ml de la couche suprieure (ther-hydrate) afin de
rincer la tubulure. Versez le reste de lther-hydrate dans un Erlenmayer plac dans de la glace.
Ajoutez alors goutte goutte 100 ml dacide sulfurique concentr tout en agitant lErlenmayer.
CONSERVATION : 1 mois dans un flacon brun hermtiquement bouch. Nutilisez plus le ractif si
celui-ci comporte deux phases.

23.SAF (Sodium-acetate/Acetic acid/Formalin pour fixation des parasites dans les selles) :

 ATTENTION :

L'Acide Actique Glacial est inflammable, nocif et extrmement corrosif. Il est


aussi irritant pour les yeux. Manipulez ce produit avec prcaution, loin dune flamme, fentres ouvertes
(ou sous hotte chimique). Le Formol (Formaldhyde) est une substance toxique par inhalation, par
contact avec la peau et par ingestion. Les vapeurs de Formol sont irritantes pour les yeux et les
muqueuses. Manipulez ce produit fentres ouvertes (ou sous une hotte chimique) en utilisant des
gants.
Sodium actate anhydre (C2H3NaO2)....15 g
Eau distille................................................ 920 ml
Acide actique glacial (CH3COOH) ............................................... 20 ml
Formol 37 % (Formaldhyde) (CH2O) ........................................ 40 ml

Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
Des pots pour chantillons de selles sont remplis de 10 ml de SAF. Le patient doit y mettre +/- 2.5 ml
de selles (le plus rapidement possible aprs mission, en mlangeant bien les selles et le SAF durant
au moins 20 secondes). Prvoyez sur le pot chantillon une tiquette de danger et une indication du
niveau de liquide final [selles + SAF].
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.

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24.SOLUTION DHEMATOXYLINE FERRIQUE (pour coloration lhmatoxyline ferrique) :

 ATTENTION :

L'Ethanol est inflammable, manipulez ce produit loin dune flamme.

Solution stock dhmatoxyline :


Hmatoxyline (VWR 1.15938).....................................
10 g
Ethanol absolu (100 %) (C2H6O)................................. 1.000 ml
Mettez les 10 g dhmatoxyline en poudre dans une bouteille transparente de 1.000 ml.
Ajoutez ensuite les 1.000 ml dEthanol 100 %. Mlangez vigoureusement jusqu dissolution
complte. Laissez mrir la solution la lumire pendant 2 semaines avant de lutiliser.
CONSERVATION : 1 an dans un flacon transparent hermtiquement bouch.

 ATTENTION

: L'Acide Chlorhydrique est extrmement corrosif. Les vapeurs dAcide


Chlorhydrique sont toxiques. Ce produit est manipuler avec une extrme prudence fentres ouvertes
(ou sous une hotte chimique).
Solution stock de mordant :
Ammonium-fer (II) sulfate (NH4)2Fe(SO4)2. 6H2O............. 10 g
Ammonium-fer (III) sulfate (NH4)Fe(SO4)2. 12H2O........... 10 g
Acide Chlorhydrique concentr (HCl 37 %)..................
10 ml
Eau Distille.................................................................
jusqu 1.000 ml
Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Chlorhydrique. L'addition d'une faible quantit d'eau
dans un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
Pesez les 10 g dAmmonium-fer (II) sulfate (VWR 1.03792) et les 10 g dAmmonium-fer (III)
sulfate (VWR 1.03776). Dissolvez-les dans 800 ml deau distille. Ajoutez lentement les 10 ml
dacide chlorhydrique concentr. Aprs refroidissement, portez lentement 1.000 ml avec de
leau distille. L'addition rapide d'eau dans un acide produit suffisamment de chaleur pour faire
exploser la bouteille.
CONSERVATION : 1 an dans un flacon transparent hermtiquement bouch.

Solution de travail dhmatoxyline ferrique :


Solution stock dhmatoxyline .............
Solution stock de mordant....................

80 ml
80 ml

Mlangez un mme volume de solution dhmatoxyline et de solution stock de mordant. Le


mlange schauffera. Laissez refroidir avant usage (au moins 2 heures).
CONSERVATION : 1 semaine (et approximativement 200 prparations). Cette solution doit tre
contrle chaque jour : Mlangez une goutte deau du robinet alcaline avec une goute de solution de
travail. Si une couleur bleu napparat pas, prparez une nouvelle solution de travail.

25.SOLUTION SATUREE EN CHLORURE DE SODIUM (Willis modifie) :


Chlorure de Sodium (NaCl)............................................................................250 g
Eau Distille................................................................................................1.000 ml
Chauffez pour dissoudre un maximum de NaCl. Laissez refroidir avant utilisation.
CONSERVATION : Quelques mois temprature ambiante.

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26.SOLUTION SATUREE EN SULFATE DE ZINC [33% p/v] (Willis modifie) :


Sulfate de Zinc (ZnSO4).................................................................................330 g
Eau Distille................................................................................................1.000 ml
Chauffez pour dissoudre un maximum de ZnSO4. Laissez refroidir avant utilisation.
CONSERVATION : Quelques mois temprature ambiante.

27.TRCK (liquide de dilution pour numration des globules blancs) :


Solution aqueuse de Bleu de Mthylne 3 % (p/v):
[Ce ractif intervient aussi dans la prparation de glycrol bleu de mthylne pour Kato. Il peut
aussi tre remplac par une solution aqueuse de violet de gentiane 1 %] :
Bleu de Mthylne .3 g
Eau Distille.................................................................................................100 ml
Pilez de la poudre de Bleu de Mthylne dans un mortier propre et sec. Pesez 3 g de poudre.
Transvasez dans un flacon brun et ajoutez 100 ml deau distille. Mlangez jusqu dissolution.
CONSERVATION : Au moins 1 an dans un flacon brun hermtiquement bouch.
Filtrez avant emploi.

Prparation du liquide de TRCK :

 ATTENTION : L'Acide Actique Glacial est inflammable, nocif et extrmement corrosif.

Il est
aussi irritant pour les yeux. Manipulez ce produit avec prcaution, loin dune flamme, fentres ouvertes
(ou sous hotte chimique).
Eau distille.................................................................................... 96 ml
Acide actique glacial (CH3COOH)............................................................. 5 ml
Solution aqueuse de Bleu de mthylne 1% ................................................1 ml

Ne versez jamais d'Eau dans l'Acide Actique Glacial. L'addition d'une faible quantit d'eau dans
un acide produit suffisamment de chaleur pour faire exploser la bouteille.
CONSERVATION : Quelques mois au FRIGO en flacon brun. Eliminez tous les 3 mois.

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ANNEXES :
ANNEXE 1 : RELATION ENTRE LA VITESSE DE ROTATION DUNE CENTRIFUGEUSE ET LA FORCE CENTRIFUGE
Vitesse de rotation
de la centrifugeuse
(en rpm)

Rayon de la
centrifugeuse
r (en cm)

Force centrifuge
(en g)

Figure : Relation entre la force centrifuge (g) et le nombre de tours par minutes (rpm) en
fonction du rayon du rotor de la centrifugeuse (r). En reliant les deux valeurs r et g par une droite,
on obtient lintersection avec la ligne vitesse de rotation de la centrifugeuse la valeur en rpm
utiliser pour cette centrifugeuse et ce rotor. La formule de relation entre g et rpm est :
g = 0.00001118 x r x rpm. (N.B. : le rayon de la centrifugeuse est exprimer en cm)

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ANNEXE 2 : TABLEAU RECAPITULATIF DES UFS DHELMINTHES

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ANNEXE 3 : CARACTERISTIQUES IMPORTANTES POUR LE DIAGNOSTIC DES HELMINTHES PRARASITES (sauf filaires)
Organisme

Ancylostoma duodenale
Anisakis spp.
Ascaris lumbricoides
Capillaria aerophila
Capillaria hepatica
Capillaria philippinensis
Clonorchis sinensis
Diphyllobothrium latum
Echinococcus granulosus
Enterobius vermicularis
Fasciola gigantica
Fasciola hepatica
Fasciolopsis buski
Hymenolepis diminuta
Necator americanus
Paragonimus spp.
Schistosoma haematobium
Schistosoma intercalatum
Schistosoma japonicum
Schistosoma mansoni
Schistosoma mekongi
Strongyloides stercoralis
Taenia saginata
Taenia solium
Toxocara canis
Trichinella spp.
Trichostrongylus spp.
Trichuris trichiura
Vampirolepis nana

Dlais entre infestation et


apparition des ufs dans
les selles ou les urines
(maturation du ver)
15 - 40 jours
sans objet
2 - 3 mois

Estimation de la production journalire


(ufs par femelle adulte)

Estimation de l'esprance de vie de


l'helminthe

5.000 - 22.000
sans objet
200.000

1 - 9 ans

2 - 3 semaines
1 - 4 semaines
30 - 45 jours
sans objet
+/- 3 semaines
12 - 15 semaines
4 - 10 semaines
12 - 20 semaines
+/- 20 jours
15 - 40 jours
2 - 3 mois
54 - 84 jours
50 - 60 jours
30 jours
25 - 60 jours
30 - 60 jours
2 - 3 semaines
10 - 12 semaines
5 - 12 semaines

1.000 - 4.000
35.000 - 100.000
sans objet
+/- 500
la plupart du temps strile (faible production ?)
25.000, (mais peu arrivent dans les selles)
+/- 16.000
3.000 - 6.000
20 - 300
150 - 400
1.500 - 3.500
100 - 300
1.500 - 3.500
jusqu' 2.000.000
sans objet
sans objet

30 - 90 jours (130 ?)
+/- 20 jours

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3.000 - 20.000

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1 - 3 ans (20 ans ?)


+/- 1 an
1 - 4 mois
jusqu' plus de 25 ans
jusqu 30 ans
sans objet
jusqu 55 jours (mais auto infestation)
jusqu' plus de 11 ans
jusqu' plus de 25 ans
+/- 6 mois
5 - 7 semaines
4 - 20 ans
10 - 20 ans
3 - 7 ans
jusqu' plus de 25 ans
2 - 18 ans
jusqu' plus de 25 ans
courte (mais autoinfestation)
jusqu' plus de 35 ans
jusqu' plus de 25 ans
jusqu' 4 mois
1 - 4 ans (20 ans)
quelques mois

ANNEXE 4 : TABLEAU RECAPITULATIF DES FORMES VEGETATIVES DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX

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ANNEXE 5 : TABLEAU RECAPITULATIF DES KYSTES (OU DES OOCYSTES) DES PROTOZOAIRES INTESTINAUX

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ANNEXE 6 : TABLEAU COMPARATIF DES PRINCIPALES MICROFILAIRES HUMAINES


Espces
Caractristiques
Gaine
Diamtre
Longueur

Frottis et GE
Formol
Biopsie

Queue

Espace
cphalique

Caractristiques

Wuchereria
bancrofti

Brugia
malayi

Brugia
timori

Loa
loa

Mansonella
ozzardi

Mansonella
perstans

Mansonella
streptocerca

Onchocerca
volvulus

Oui

Oui

Oui

Oui

Non

Non

Non

Non

7,5 - 10 m

5 6 m

4,4 6,8 m

5 7 m

3 5 m

3 5 m

5 6 m

5 9 m

260 [240 - 300]


300 [275 - 320]
/

220 [175 230]


270 [240 300]
/

290 [265 325]


360 [330 385]
/

240 [230 250]


280 [270 300]
/

180 [160 205]


225 [200 255]
/

195 [150 200]


200 [180 225]
/

/
/
210 [180 240]

/
/
310 [280 320]

Effile
Sans noyaux

Effile
Avant dernier et
dernier noyaux trs
espacs

Effile
Avant dernier et
dernier noyaux
trs espacs

Effile
Noyaux jusqu
lextrmit

Pointue
Sans noyaux

Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit

Arrondie
Noyaux jusqu
lextrmit
crosse
dvque

Effile
Sans noyaux
Recourbe

Court : 1/1
Aussi long que
large

Long : 2/1
2 x plus long que
large

Trs long : (2)3/1


(2) 3 x plus long
que large

Court : 1/1
Aussi long que
large

Trs court

Trs court

Trs court

Long
Plus long que large,
souvent en forme de
raquette de tennis

Queue vide

4 noyaux en
file indienne
lextrmit
Noyaux
angulaires.
Dernier noyau
plus gros ou
plus fonc

8 noyaux en file
indienne
lextrmit

Queue pointue et
vide, souvent
recourbe. Noyaux
peu visibles, premier
et 2-3 derniers
noyaux ovodes et
souvent visibles

Corps Noyaux
Hernies
2 noyaux
2 noyaux
bien individualiss lextrmit caudale lextrmit caudale Range simple de
Gaine souvent
Gaine non
se terminant avant
noyaux jusqu
colore en rose au
colore au
lextrmit
lextrmit
Gaine non colore
Giemsa
Giemsa
Gaine non colore
au Giemsa
au Giemsa

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ANNEXE 7 : MORPHOLOGIE DES ELEMENTS SANGUINS SUR FROTTIS COLORE AU MAY-GRNWALD-GIEMSA

TYPE CELLULAIRE
GRANULOCYTES

TAILLE
m

NOYAU
FORME

COULEUR

CYTOPLASME
STRUCTURE
DE LA
CHROMATINE

LEUCOCYTES : GRANULOCYTES POLYMORPHONUCLEAIRES


En boudin
ou en forme
de fer
cheval,
Incurvation
Bleu
NEUTROPHILES NON
centrale
Rseau peu
12 15
pourpre
SEGMENTES
gale au
pais
clair
maximum au
tiers de la
largeur des
extrmits
des lobes 7
NEUTROPHILES
SEGMENTES

EOSINOPHILES

BASOPHILES

Bleu
pourpre
fonc

12 15

2 5 lobes 8

12 15

Le plus
souvent 2
lobes (pincenez)
(parfois 3
lobes)

11 13

Lobes mal
spars
Bleu
(polymorphe) pourpre
peu visible

Bleu
pourpre

Rseau assez
pais et
grossier

Epaisse,
grossire

Epaisse,
grossire,
recouverte par
les granules

QUANTITE

COULEUR

+++

Rose ple

+++

Rose

+++

+++

Rose

Rose ple

GRANULATIONS

Trs fines
granulations,
Rose ou violace.
(parfois absentes)

Trs fines
granulations,
Rose ou rose violet
Grosses granulations
de calibre uniforme,
Jaune orange,
Grains accols.
Grosses granulations
de calibre variable,
Bleu trs fonc,
Grains bien spars,
peu nombreuses.

Dviation gauche de la formule dArneth : Les neutrophiles segments constituent la majorit des neutrophiles dans la formule leucocytaire normale. Une augmentation des non segments au-dessus de 16 % signifie une dviation
gauche (vers les formes plus jeunes). Cela se retrouve dans les processus inflammatoires, mais aussi dans des conditions de stress,
8

Dviation droite de la formule dArneth : Contrairement la dviation gauche o les noyaux segments sont rares voire absents, la dviation droite prsente des neutrophiles hyper-segments, cest--dire cinq segments ou
davantage. Une hyper-segmentation est caractristique des anmies mgaloblastiques. A leur dbut, celles-ci rvlent sur 100 granulocytes plus dun neutrophile 6 segments, plus de 3 5 segments ou plus de 25 4 segments.

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ANNEXE 7 : MORPHOLOGIE DES ELEMENTS SANGUINS SUR FROTTIS COLORE AU MAY-GRNWALD-GIEMSA

(suite)

TYPE CELLULAIRE
AGRANULOCYTES

TAILLE
m

NOYAU
FORME

COULEUR

CYTOPLASME
STRUCTURE
DE LA
CHROMATINE

LEUCOCYTES : AGRANULOCYTES MONOMORPHONUCLEAIRES


Grandes
Rond ou
masse
Rouge
ovode
dintensit de
PETIT LYMPHOCYTES
7 -10
pourpre
Parfois
coloration
fonc
chancr
htrogne ou
pycnotique
Grandes
Rond ou
masse formant
Rouge
GRAND
ovode
des zones
pourpre
10 15
LYMPHOCYTES
Parfois
fonces et
clair
chancr
dautres plus
claires
Rond,
ovode ou en
forme de
haricot

Bleu violet
clair

Fine, rseau
ressemblant
une lintrieur
dun ponge

QUANTITE

(-) ou +

++

+++
Contient
gnralement
des vacuoles.

COULEUR

GRANULATIONS

Bleu ciel
(parfois
presque
invisible)

Bleu ciel

Absentes ou
quelques
granules
azurophiles
(rose violet)

Gris ou gris
bleu

Trs fines
granulation
(poussire),
azurophiles
(rose violet)

MONOCYTES

15 25

ERYTHROCYTES

6,7 7,7

Disque
biconcave,
rose

Aucunes

TROMBOCYTES

1,5 2 (5)

Lgrement
bleu

Rougetres

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ABREVIATIONS
C
Ac
Ag
CAA
CATT
CCA
CDC
cf.
cm
DEC
EDTA
E.I.A.
EITB
ELISA
(En)
ES
ES-Ag
(Es)
Ex.
(F)
FL
g
g
GB
GE
GR
HAP
Hb
Ht
ID
Ig
IF
IFAT
IFI
IHA
KIVI
LCR
LDH
LMC
LMO
LMV
mf.
MIF
ml
mm
MST
OMS
OPG
PCR
PK
PU
PV
QBC
RDC
rpm
SAF
SNC
sp.
spp.
TES
THA

l
m
VIH

Degr Celsius
Anticorps
Antigne
Circulating Anodic Antigen
Card Agglutination Test for Trypanosomiasis
Circulating Cathodic Antigen
Centers for Disease Control and Prevention
Confer
Centimtre
Diethylcarbamazine Citrate
EthyleneDiamine Tetra-acetic Acid (anticoagulant)
Enzyme ImmunoAssays
Enzyme-linked ImmunoelectroTransfer Blot
Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay
Anglais
Excretor/Secretor
Excretor/Secretor antigen
Espagnol
Exemple
Franais
Filariose lymphatique
Force centrifuge
Gramme
Globules Blancs
Goutte Epaisse
Globules Rouges
HmAgglutination Passive
Hmoglobine
Hmatocrite
Immuno Diffusion
Immunoglobuline
Immuno Fluorescent
Immuno Fluorescent Antibody Test
Immuno-Fluorescence Indirecte
Indirect HmAgglutination
Kit for In Vitro Isolation (Trypanosoma cruzi)
Liquide Cphalo-Rachidien
Lactate DsHydrognase
Larva Migrans Cutane
Larva migrans Oculaire
Larva Migrans Viscrale
Microfilaire
Merthiolate Iode Formol
Millilitre
Millimtre
Maladie Sexuellement Transmissible
Organisation Mondiale de la Sant
ufs par gramme de selles
Polumerase Chain Reaction
Pyruvate Kinase.
Prlvement Urtral
Prlvement Vaginal
Quantitative Buffy Coat
Raction de Dviation du Complment
Revolutions per minute
Sodium acetate Acetic acid Formalin (fixateur)
Systme Nerveux Central
Espce : (en faisant rfrence au parasite dont on parle)
Espces : (en faisant rfrence toutes les espces du genre)
Toxocara Excretory-Secretory antigens
Trypanosomiase Humaine Africaine
Micro
Microlitre
Micromtre
Virus de lImmunodficience Humaine

090803 BIOLOGISTES MOD1et2 notes pratiques de parasitologie humaine tropicale

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QUELQUES RESOURCES INTERNET


Site de lInstitut de Mdicine Tropicale :
http://www.itg.be/itg/GeneralSite/Generalpage.asp
Site de lInstitut de Mdicine Tropicale (laboratoire clinique) :
http://www.itg.be/internet/clkb/index.htm?RND=981519759
Site de parasitologie humaine en nerlandais :
http://www.medischeparasitologie.nl
Site de parasitologie humaine (CDC) en anglais :
http://www.dpd.cdc.gov/dpdx/
Site de parasitologie vtrinaire en franais :
http://www.vet-lyon.fr/etu/copro/index.htm
Site destin aux lves se prparant des carrires biomdicales en franais
http://bioimage.free.fr/
Site de formation continue des biologistes en franais :
http://www.bioforma.net/
Site de parasitologie humaine (Facult de Pharmacie Lille)
http://arachosia.univ-lille2.fr/labos/parasito/Internat/courspar/
Site des parasitoses autochtone en France (CHU Rangueil, Toulouse) en franais :
http://www.bmlweb.org/recco.html#Un%20peu%20de%20nomenclature
Site de malariologie (gouvernement australien) en franais et en anglais :
http://www.rph.wa.gov.au/malaria.html
Site de parasitologie vtrinaire (anglais)
http://www.wormers-direct.co.uk/
Site de parasitologie vtrinaire (Merck) en anglais :
http://www.merckvetmanual.com/mvm/index.jsp?cfile=htm/bc/22600.htm
Site de parasitologie (medical chemical corporation) en anglais :
http://www.med-chem.com/Para/Index.htm
Site de mycologie en anglais :
http://www.doctorfungus.org/index.htm
Site gnral de laboratoire [lien avec parasitologie, hmatologie etc.] (Australien) en anglais :
http://www.hoslink.com/MALARIA.HTM
Site consacr aux nouveaux tests de laboratoire
http://www.finddiagnostics.org/

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