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Liliana Paesky
Anlisis de fitoplancton
Distintas etapas
1- Concentracin
2- Identificacin
3- Recuento
4- Lmites de recuento
5- Clculo y expresin de los resultados
6 Aseguramiento de calidad
6-
CONCENTRACIN
Sedimentacin
Filtracin
Centrifugacin
g
SEDIMENTACIN
P b t o Cmara
Probeta
C
d
de sedimentacin
di
t i
Ventajas:
V
t j El fitoplancton
fit l t no sufre
f deformaciones
d f
i
y no
se rompe, se observa todo el fiplancton (nano y pico
p
plancton)
)
Desventajas: Los tiempos requeridos son largos.
Ej: 10 cm columna de agua en probeta de 500 mL,
mL
con aprox 200 mL de muestra, 5 das de
sedimentacin
FILTRACIN
Filtrado en red y lavado
Semicuantitativo
Cuantitativo
CENTRIFUGACIN
(1000 g durante 20 min)
IDENTIFICACION
El Nivel Taxonmico debe establecerse previamente
y estar de acuerdo a:
9Disponibilidad
Disponibilidad de personal capacitado
9Propsito del anlisis
9Recursos econmicos
9Tiempo
p disponible
p
douce
Pierre Bourrelly
IInternet: www.cyanodb.cz
db
Jiri Komarek
Recuento
Un microscopio directo
Ocular que contenga una cuadrcula de Whipple
Cuadrcula de Whipple
Es un cuadrado que nos delimita una superficie de 1
mm2, con un aumento 100X.
Este cuadrado esta subdivido en 100 cuadritos de 100
m de lado y 10000 m2 de superficie cada uno.
El cuadrito central est a su vez dividido en 25
cuadritos mas pequeos de 20 m de lado y de 400 m2
d superficie
de
fi i
1000 m
Campo y Transecta
Un campo esta
delimitado por la
cuadrcula de Whipple
Una tira por el ancho de
la misma y el dimetro
de la membrana o el
largo de la cmara de
Sedgwick-Rafter
RECUENTO
Como vamos a contar?
Campos: 10 o ms unidades algales del gnero
dominante
Tiras o transectas: Menos de 10 unidades
algales del gnero dominante en un campo
Diversidad Morfolgica
Diversidad Morfolgica
UNIDADES DE RECUENTO
Unicelulares o Cenobiales: una clula o un cenobio es un
individuo.
individuo
Ej: Ceratium, Scenedesmus
Coloniales palmeloides: contar como un individuo a la
parte de la colonia que ocupe un cuadrito de 10000 m2
Ej: Microcystis,
Microcystis Merismopedia
Coloniales filamentosas: contar como unidad aquellos que
ocupen un lado
l d d
de cada
d cuadrito
d it d
de 100 m
Ej: Oscillatoria - Dolichospermun
Lmite de recuento
Cuantas unidades algales contar?
Asumiendo que la distribucin de organismos es al
azar, la poblacin se ajusta a la distribucin de
Poisson, podemos calcular cuantos organismos
contar, con un nivel error aceptable para un lmite
d confianza
de
fi
dado.
d d
Error de recuento
Debe establecerse previamente
Indica cuantas unidades algales deben ser contadas para
un lmite de confianza dado
Para el 95%:
Error del recuento (%)
2
X 100
=
N
TIEMPO
NO SE JUSTIFICA
Cl l y expresin
Clculo
i d
de llos resultados
lt d
Algas/ L / mL
Clulas / L / mL
USS/ L / mL
Clulas/L / mL
A
Algas
Unicelulares:
i
C
Cada
alga es una unidad
i
Algas Cenobiales: Contar los cenobios como
unidad y multiplicar por el N
N de clulas que
poseen
Clulas/L / mL
Algas Coloniales
Filamentosas:
Contar el N
N de clulas de al menos 30 segmentos
de 100 m. Calcular el promedio y multiplicar a las
unidades contadas
Palmeloides:
Contar el N de clulas de al menos 30 cuadrados de
10000 m2 de superficie. Calcular el promedio y
multiplicar a las unidades contadas
USS/L / mL
El factor de superficie
p
se obtiene midiendo:
La superficie del organismo de acuerdo a su
similitud morfolgica
g
que p
q
presente con un
cuerpo geomtrico.
Medir al menos 30 organismos
g
del mismo
gnero.
Calcular el p
promedio y dividir p
por 400
m2
Multiplicar el factor obtenido por las unidades
contadas
Cryptomonas
1.000.000 Clulas/L
1.000.000 USS/L
Ceratium
1 000 000 Clulas/L
1.000.000
20.000.000 USS/L
ASEGURAMIENTO DE LA CALIDAD
ANALISTAS ENTRENADOS
EQUIPAMIENTO ADECUADO
CONTROL ANALTICO
INTERNO
PRECISIN:
Recuento de replicados entre
mismo analista y distinto analista de una
misma muestra
SESGO: Diferencia
SESGO
Dif
i entre
t un resultado
lt d obtenido
bt id y
un valor de referencia aceptado, que puede ser el
valor asignado de un ensayo interlaboratorio
CONCLUSIONES
La eleccin del mtodo depender:
Calidad del agua
Objetivo del ensayo
Tiempo en la entrega de los resultados
MUCHAS GRACIAS!!!