1.

INTRODUCCIN

En la actualidad se busca el
aprovechamiento de los residuos
agroindustriales como sustratos en procesos biotecnolgicos para la
produccin de productos de alto valor agregado es una alternativa atractiva
ya que estos materiales son abundantes, renovables y de bajo costo. La
bioconversin de estos materiales polimricos requiere un proceso que
comprende dos etapas: hidrlisis cida o enzimtica de los polmeros en
monosacridos, seguido de la bioconversin de los monmeros en un
producto de inters industrial. El xilitol fue originalmente producido para ser
usado como edulcorante para personas diabticas. La produccin qumica y
microbiana de xilitol fue reportada por Lohman (1957), Onishi y Suzuki
(1966, 1969); respectivamente. Se ha reportado un mtodo cromatogrfico
a escala industrial para la separacin de diferentes azcares de residuos
hemicelulsicos, el cual fue desarrollado en Finlandia. Este mtodo ha
permitido obtener D-xilosa de manera eficiente.
El bagazo de caa de azcar es un residuo lignocelulsico de la industria
azucarera, con alto contenido de xilano que puede ser convertida en xilosa,
la cual puede ser utilizada para obtener xilitol. Por hidrlisis cida la
biomasa vegetal es tratada con una solucin cida y sometida a altas
temperaturas, generando un hidrolizado constituido por azcares como
pentosas, hexosas y compuestos txicos a la fermentacin como son los
compuestos furnicos, fenlicos y el cido actico. A escala industrial, el
xilitol es convencionalmente producido por procesos qumicos a travs de la
hidrogenacin cataltica de la xilosa pura, obtenida de la hidrlisis de
materiales lignocelulsicos con altas concentraciones de xilano.
La va microbiolgica es una alternativa prometedora debido a que la
bioconversin se produce directamente en el hidrolizado. Adems de esto, el
proceso opera con menores temperaturas y presin, tornndose ms
econmico. El proceso fermentativo presenta limitaciones en cuanto a la
productividad, debido principalmente a la presencia de compuestos
inhibidores del metabolismo microbiano en el hidrolizado hemicelulsico
usado como sustrato. Varios tratamientos fisicoqumicos han sido
estudiados con el objetivo de minimizar el efecto txico de estos a la
fermentacin tanto por la transformacin de inhibidores en compuestos
inactivos como por la eliminacin de estos. Entre los mtodos ms
utilizados, con buenos resultados, se encuentra la adsorcin con carbn
activado (Rodrguez et al., 2001). Un mtodo novedoso que se est
utilizando en la actualidad es el tratamiento de neutralizacin y/o
purificacin con resinas de intercambio inico que remueve eficientemente
no solo el color del hidrolizado, sino tambin compuestos fenlicos, cidos
orgnicos e inorgnicos, compuestos furnicos y metales, que son
inhibidores del proceso fermentativo y no presenta prdidas de xilosa. El

objetivo del trabajo es conocer y analizar las materias primas de las cuales
se puede procesar para obtener xilitol.

2. FUNDAMENTO TERICO
2.1

XILITOL

El xilitol (E967) es un azcar natural, un alditol no

fermentable utilizado principalmente en la industria alimentaria
como sustituto del azcar desde finales de 1960. El descubrimiento
de xilitol, tambin llamado azcar de madera o azcar de abedul, se
atribuye al qumico alemn Emil Fisher (posteriormente premio Nobel
de Qumica) y a su alumno Rudolf Stahel, que a travs del uso de la
hidracina, fueron los primeros en aislar el compuesto, llamando a su
invencin Xilitol. Casi al mismo tiempo, en su investigacin sobre
los derivados de la Xilosa, el qumico francs M.G. Bertrand aisl un
jarabe de xilitol con caractersticas similares.
El xilitol no slo se encuentra en la naturaleza en muchas frutas y
verduras como la coliflor, fresas, frambuesas y arndanos, sino
tambin en el maz y el abedul, que es de dnde generalmente se
extrae por razones econmicas.
Tras largos estudios cientficos que han hecho muy famosas sus
propiedades, el xilitol se ha convertido en un producto no slo
ampliamente utilizado en Escandinavia, sino tambin en los EE.UU.

Estructura qumica del

xilitol

2.1.1 PROPIEDADES Y BENEFICIOS

Debido a que no afecta a la produccin de insulina y afecta

mnimamente a la de la azcar en la sangre, el xilitol est
indicado y es apto para diabticos.
El xilitol se absorbe mucho ms lentamente y no promueve
la hiperglucemia, como ocurre con la sacarosa. Esta
caracterstica tambin es buena para las personas con
sndrome metablico, un trastorno comn que incluye la
resistencia
a
la
insulina,
la
hipertensin,
la
hipercolesterolemia y un mayor riesgo de cogulos de
sangre.
Tiene la ventaja de que no provoca caries, porque a
diferencia de la sacarosa, el xilitol no es fermentado en
cidos por las bacterias de la boca y Previene la otitis
(infeccin de odos) en nios pequeos.
El xilitol tiene casi el mismo poder edulcorante que la
sacarosa, pero posee un contenido calrico de 2.4 Kcal/g
comparado con 4 Kcal/g de la sacarosa.
En un estudio de 2002, se demostr que en el intestino, el
xilitol se une al calcio para facilitar su absorcin y esto
ayuda a aumentar la densidad sea. Por esta razn, en los
Estados Unidos ya se utiliza como una terapia para combatir
la osteoporosis.
El xilitol permanece pasivo en el intestino delgado y al no
existir un sistema de transporte especfico, ste se absorbe
lenta y parcialmente. Ms adelante, es destruido mediante
procesos de fermentacin de la flora bacteriana.
En un informe reciente, se ha sugerido que el consumo de
xilitol ayuda a controlar la infeccin llamado Cndida, en
comparacin con la glucosa, galactosa y sacarosa, que
pueden llegar a ser la causa.

2.1.2 USOS DEL XILITOL

El xilitol en la cocina es adecuado para ser utilizado en la

preparacin
de
postres
sanos y
en
todas
las
preparaciones a base de azcar. Tambin es un excelente
sustituto del azcar para el caf, el t y las bebidas en la
que normalmente se usa siempre sacarosa. El xilitol es
estable a altas temperaturas y carameliza slo despus de
un calentamiento de varios minutos a temperatura de
ebullicin.
El xilitol se utiliza como un sustituto del azcar en dulces
tales como helados, chocolate, caramelos, goma de mascar.
Se encuentra en muchos alimentos de consumo de
diabticos como en caramelos para la garganta, jarabes,
suplementos, cremas dentales y enjuagues bucales.

2.2

PRODUCCION DE XILITOL

2.3 PRODUCCIN MICROBIANA DE XILITOL

La produccin microbiana de xilitol utilizando ingeniera metablica
en S.cerevisiae ha sido reportada por Bruinenberg et al. (1983),
evaluando el efecto de diferentes fuentes de carbono y nitrgeno
sobre la produccin y consumo de NADPH en Candida utilis. Ellos
concluyeron que durante el metabolismo de la xilosa, la principal
fuente de NADPH es la va de las hexosa monofosfato y la enzima
glucosa 6-P deshidrogenasa. En aos anteriores, fue sugerido que el
balance redox entre la xilosa reductasa dependiente de NADPH y la
xilitol deshidrogenasa dependiente de NAD era la principal razn
para la acumulacin del xilitol (Bruinenberg, 1986).Ktter et al. (1990)
construyeron una transformante de S. cerevisiae capaz de utilizar la
xilosa. Un ao ms tarde, Hallborn et al. (1991) reportaron un 95 %
de rendimiento en la conversin de xilosa a xilitol con la cepa
transformada de S. cerevisiae. Ktter y Ciriacy (1993) sugieren que la
deficiencia de NADPH es el cuello de botella de la fermentacin de la
xilosa en el metabolismo de S. cerevisiae. Concluyeron que la va de
las pentosas fosfato en S. cerevisiae no puede regenerar suficiente
cantidad de NADPH durante el metabolismo de la xilosa bajo
condiciones limitadas de oxgeno (Hallborn et al., 1994). Desde
entonces, el papel del NADPH en el metabolismo de las levaduras ha
sido intensamente estudiado. Han sido estudiadas diferentes
estrategias para incrementar la generacin de NADPH en S.
cerevisiae. Los ltimos estudios (Gombert et al., 2001) se han
enfocado en el metabolismo y flujo de la va de las pentosas fosfato y
consecuentemente en la regeneracin del NADPH, la cual ha sido
evaluada durante el metabolismo de la glucosa con diferentes
levaduras (Gombert et al., 2001). Durante el metabolismo de la
glucosa en S. cerevisiae, los requerimientos de NADPH son
abastecidos con un incremento del flujo hacia la va de las pentosas
fosfato. Sin embargo, durante el metabolismo de la xilosa no se
abastecen los requerimientos de NADPH.
Para resolver esta situacin se han desarrollado estrategias en la
sobre expresin de la enzima glucosa 6-P deshidrogenasa (Minard et
al., 1998) o de la enzima D-gliceraldehdo 3-fosfato deshidrogenasa
dependiente de NADP (Verho et al., 2003). Estudios recientes incluyen
la remocin de la va de xido reduccin de la xilosa en xilitol
reemplazndola directamente por la isomerizacin de D-xilosa en Dxilulosa (Kuyper et al., 2003). Con estos trabajos se elimina el cuello
de botella en la generacin de NADPH, permitiendo la captacin de
xilosa independientemente de la presencia y requerimiento de NADPH
para la fermentacin a etanol. El otro paso susceptible al bloqueo; es

la captacin de D xilulosa dependiente de ATP, pero esto puede

solucionarse con la multi-expresin de las enzimas de la fase no
oxidativa de la va de las pentosas fosfato (Johansson & Hahn
Hagerdal, 2002). Los principales objetivos de la ingeniera en S.
cerevisiae para la produccin industrial de xilitol, captacin de Dxilosa y regeneracin de NADPH a travs de la va de las pentosas
fosfato, son: mejorar en forma definitiva la produccin de NADPH para
las reacciones intracelulares incrementando el flujo de la va de las
pentosas fosfato. La nica forma de aumentar el flujo de la va de las
pentosas fosfato es incrementando la velocidad de crecimiento
durante el metabolismo de la glucosa (Gombert et al., 2001). Sin
embargo, la D-xilosa no es la fuente de carbono preferida por S.
cerevisiae, ya que este sustrato no proporciona la suficiente energa
para el crecimiento y metabolismo (Sonderegger et al., 2004). Se
sabe que la D xilosa no induce ni incrementa la recirculacin del flujo
de carbonos a travs de la va de pentosas fosfato. Adems, en una
ruta alternativa, la D-xilulosa puede ser dirigida hacia la va de la
pentosas fosfato gracias a la enzima xilulocinasa o convertida a xilitol
por la enzima xilitol deshidrogenasa. Esto puede abrir nuevas
posibilidades para considerarla en la produccin de bioetanol o xilitol
utilizando levaduras.

2.3.1 PRODUCCIN BIOTECNOLGICA DEL XILITOL

Existen varios mtodos para la produccin de xilitol. Puede extraerse
de manera directa de algunos frutos o por medio de la hidrogenacin
de la xilosa. Dicha xilosa puede obtenerse de materiales
lignocelulsicos (los cuales deben pasar por un proceso de hidrlisis
previa). La hidrogenacin de la xilosa puede llevarse a cabo por
medios qumicos o biotecnolgicos. Los principales medios
biotecnolgicos
de
hidrogenacin
son
los
enzimticos
y
microbiolgicos.
2.3.2 PRODUCCIN DE XILITOL USANDO CLULAS COMPLETAS
Se sabe que el xilitol es producido por bacterias, hongos filamentosos
y levaduras. Sin embargo, la mayor parte de las exploraciones que se
han realizado se centran en levaduras del gnero Candida. La razn
de ello es debido a que pocos organismos son capaces de utilizar la
xilosa como fuente de carbono y, por otra parte acumular el xilitol,
evitando que se transforme en D-xilulosa. Las especies que han
reportado mayores productividades y rendimiento son Candida
tropicalis,
Pachysolen
tannophilus,
Pichia
stipitis,
Candida
guillermondii, Debaryomyces hansenii y Candida parapsilopsis,
fluctuando los rendimientos de xilitol respecto a la xilosa entre 0.730.88 % y las productividades entre 1.73 y 3.15 g l1 h1 (Gong et al.,
1981). En 2002, Kim et al., lograron incrementar la productividad de

C. tropicalis en una mezcla de glucosa y xilosa. Sreenivas et al. (2006)

reportaron modificaciones a la cepa de C. tropicalis utilizando rayos
UV y una serie de mutaciones con N-metil, N-amino, nitrosoguanidina,
obteniendo rendimientos de hasta 0.88 respecto a la xilosa inicial.
Lpez et al. (2004), aislaron una cepa de C. tropicalis en silages de
maz, obteniendo rendimientos de 0.91. Se ha estudiado el
metabolismo de la xilosa y del xilitol en Pachysolen tannophilus y se
han realizado modificaciones genticas, sin embargo la mayora ha
sido para desviar el metabolismo de la xilosa hacia etanol o para la
comprensin del metabolismo de las pentosas en las levaduras
(Jeffries ,1984). D. hansenii es una levadura osmotolerante que puede
crecer en presencia de hexosas y pentosas, aunque su crecimiento en
presencia de pentosas es mucho ms lento y su rendimiento de xilitol
es muy similar en ambos casos (Nobre et al., 1999). Tambin se han
estudiado sus sistemas de transporte de hexosas y pentosas,
encontrando que se trata de mecanismos de difusin facilitada y
siendo simportadores de protones (Nobre et al., 1999). D. hansenii fue
inmovilizada en alginato de calcio por Domnguez (1998) encontrando
productividades
elevadas
en
biomasa,
sin
embargo
las
productividades de xilitol disminuyeron. Sampaio et al. (2005)
observaron el crecimiento de D. hansenii representado en tres fases:
una fase caracterizada por el aumento en la biomasa sin produccin
de xilitol, una de baja produccin de xilitol y una tercera de alta
produccin de xilitol con bajo crecimiento celular. Nobre et al., (2002),
estudiaron los cambios en el comportamiento de las enzimas
involucradas en la produccin del xilitol en un quimiostato. Al
modificar la velocidad de dilucin, observaron que, a bajas
velocidades de crecimiento, la xilosa deshidrogenasa tiene mayor
actividad que la xilosa reductasa, sin embargo, al incrementarse la
velocidad se da mayor actividad en la xilosa reductasa, indicando un
cambio metablico dirigido a satisfacer requerimientos mayores de
NADPH (Naobre et al., 2002). C. parapsilopsis ha sido probada para la
produccin de xilitol a partir de xilosa, mostrando que dicha
produccin puede ser incrementada controlando el potencial redox y
la concentracin de glucosa y manosa .

2.4 PRODUCCIN DE
MATERIAS PRIMAS

XILITOL

PARTIR

DE

DIFERENTES

Las materias primas para la produccin biotecnolgica de xilitol

suelen ser fuentes ricas en xilosa, principalmente residuos
lignocelulsicos. Para la produccin de xilitol a partir de este tipo
de residuos se requiere una etapa de hidrlisis para liberar los
xilanos contenidos en la hemicelulosa (tabla 1).

Glucosa y xilosa para la produccin de xilitol

El xilitol se produce qumica o biolgicamente por reduccin de la
D-xilosa, pero este proceso es costoso debido a los altos costos del
sustrato (D-xilosa). Una gran variedad de polialcoholes se
producen con buenos rendimientos por asimilacin aerbica de
varias pentosas y hexosas a partir de levaduras. En 1969 Onishi y
Suzuki, desarrollaron un mtodo microbiolgico que convierte la
glucosa a xilitol va D-arabitol y D-xilulosa, en el que se
involucraron tres pasos secuenciales. De acuerdo con sus
estudios, si una levadura crece bien en D-xilulosa y produce xilitol
con buenos rendimientos, se esperara que el xilitol pudiera

obtenerse eficientemente a partir de la glucosa, a travs del

siguiente proceso de fermentacin secuencial (Onishi & Suzuki,
1969).
D-glucosa D-arabitol D-xilulosa xilitol
Sus resultados sugieren que el xilitol se puede producir a partir de
glucosa con un rendimiento aproximado del 15 al 20 %, con una
aplicacin secuencial de tres procesos de fermentacin, sin el
aislamiento y purificacin de los productos intermediarios (D-arabitol
y D-xilulosa), lo que hara a esta tcnica comercialmente muy
atractiva (Onishi & Suzuki, 1969). D. hansenii ATCC 20212 se emple
para el primer paso (D-glucosa Darabitol). Se utiliz un medio
modificado A, que contena 15 % de glucosa y 4 % de licor de
hidrolizado de maz concentrado. Cuando la glucosa se consumi casi
por completo y se produjo D-arabitol, se ajust el pH 6.0 del caldo de
fermentacin con NaOH, sin remover las clulas y se esteriliz a 120
C por 15 min. El medio fue luego enriquecido con los nutrientes que
favorecieran el crecimiento de Acetobacter suboxydans, que oxid
casi por completo el D-arabitol a Dxilulosa. Para la reduccin de la Dxilulosa a xilitol, por C. guilliermondii var. soya (ATCC 20216), fue
necesario agregar una cantidad adicional del 4 % de licor de
hidrolizado de maz concentrado al caldo fermentado por A.
suboxydans, para tener un mejor rendimiento. (Onishi & Suzuki,
1969). Por otro lado, Hickman y Ashwell (1958) reportaron la
presencia de un sistema enzimtico en mitocondrias de hgado de
cerdos de guinea capaces de reducir de forma reversible tanto a la Lxilulosa como a la D-xilulosa hasta un intermediario comn, el xilitol,
proporcionando un mecanismo para la interconversin de los
estereoismeros de esta cetopentosa. Muestran la siguiente
secuencia para la conversin de L-xilulosa a glucosa: DPNH
(Difosfonucletido reducido) DPN (Difosfonucletido oxidado). Como
puede observarse, la glucosa puede ser convertida a D-xilulosa-5fosfato; sin embargo, no es posible la conversin de Dxilulosa-5fosfato a D-xilulosa para la produccin de xilitol. De acuerdo con la
Figura 1, la produccin de xilitol no parece estar directamente
asociada al metabolismo de la glucosa (Senac y Hahn-Hagerdal,
1990). Aerobacter aerogenes PRL-R3 posee enzimas inducibles para
el catabolismo de la D-xilosa y del D-arabitol (Figura 2). La D-xilosa es
el inductor de la isomerasa y de la D-xilulocinasa para su propia
conversin. El D-arabitol es el inductor de la deshidrogenasa del Darabitol y de una Dxilulocinasa separada (Wilson & Mortlock, 1973)
Senac y Hahn-Hagerdal (1990) compararon la fermentacin de
glucosa y

Fig. 1. Ruta de la asimilacin de pentosas y pentitoles en A. aerogenes

(Tomado y modificado de Mortlock et al., 1965).
xilulosa y la formacin de productos por S. cerevisiae en cultivo batch
bajo condiciones anaerbicas. En ambas fermentaciones se asimilaron
cerca de 10 mM de xilosa y se produjeron pentitoles, indicando la
presencia de la enzima xilosa reductasa y posiblemente tambin de
la enzima xilitol deshidrogenasa.

Fig. 2. Rutas del metabolismo del D-arabitol, D-xilosa, xilitol y Dxilulosa por
A. aerogenes (Tomado y modificado de Wilson &
Mortlock, 1973).

Las bajas velocidades de consumo de azcar y de produccin de

etanol en clulas que fermentaron xilulosa comparado con las clulas
que fermentaron glucosa pudieron ser causadas por un bloqueo en la
ruta (pentose phosphate pathway) PPP, ya que hubo una acumulacin
de S7P en las clulas que fermentaron la xilulosa, lo cual no fue
observado en las clulas que fermentaron glucosa. Por su parte, Van
Zyl et al. (1993) investigaron la influencia de la D-ribosa como
cosustrato en la absorcin y metabolismo de la D-xilosa por S.
cerevisiae ATCC 26602, un sustrato que no puede utilizar para su
crecimiento. La presencia de un solo sistema de baja afinidad para el
transporte de xilosa en cultivos frescos y la presencia de ambos
sistemas de baja y alta afinidad en clulas privadas de alimento,
indic que la xilosa es transportada por ambos sistemas de transporte
de glucosa. La glucosa inhibe fuertemente el transporte de xilosa en
cultivos frescos creciendo en glucosa, probablemente como resultado
de la competencia de los dos azcares por un acarreador de baja
afinidad. La ribosa tambin inhibe el transporte de baja afinidad de la
xilosa, pero en menor grado que la glucosa. El sistema de alta
afinidad, operativo en clulas expuestas a xilosa y ribosa, fue inhibido
de manera similar por la glucosa, pero no fue significativamente
inhibido por la ribosa. El xilitol y ribitol fueron indicadores de que
ambos azcares son reducidos inicialmente a sus correspondientes
polioles (Figura 3). La enzima que cataliza la conversin de xilosa a
xilitol es aparentemente constitutiva y no est sujeta a represin por
glucosa, ya que su actividad fue similar, independientemente del
crecimiento en glucosa o etanol (Van Zyl et al., 1993).
Una cepa de S. cerevisiae fue modificada genticamente para que
pudiera metabolizar la xilosa (Walfridsson et al., 1995). Los genes
XYL1 y XYL2 de Pichia stipitis CBS 6054, que codifican para xilosa
reductasa y xilitol deshidrogenasa, fueron clonados en S. cerevisiae.
Los productos de estos genes catalizaron las dos etapas iniciales de
utilizacin de la xilosa, de las cuales carece S. cerevisiae. Para
incrementar el flujo a travs de la ruta de las pentosas fosfato, fueron
sobre-expresados los genes TKL1 y TAL1 de S. cerevisiae que
codifican para transcetolasa y transaldolasa. La xilosa y glucosa se
consumieron simultneamente, indicando que el transporte de xilosa
no es una etapa limitante. El consumo de xilosa fue ms rpido en
presencia de glucosa, en un rango de 0.14 a 0.43 g l-1 h-1. Despus
de consumida la glucosa, la velocidad de consumo de xilosa se volvi
ms lenta. Esto se debi probablemente a que el transporte de xilosa
pudo haberse limitado, debido a su baja concentracin. Se cree que la
xilosa es transportada por los mismos sistemas de transporte de la
glucosa, pero con valores de Km mucho mayores.
La produccin de xilitol comenz hasta que la glucosa se consumi y
no se produjo una cantidad adicional de etanol a partir de xilosa. El
hecho de que la produccin de xilitol comenzara inmediatamente

despus de que la glucosa se consumiera, indica que la fermentacin

de xilosa, como nica fuente de carbono, da como resultado
concentraciones de metabolitos intermediarios muy bajas para la
induccin de enzimas etanognicas clave. La xilosa reductasa (XR) de
P. stipitis puede utilizar tanto NADH como NADPH como cosustratos,
mientras que la xilitol deshidrogenasa (XDH) utiliza exclusivamente
NAD+. Mediciones in vitro han demostrado que la XR, en cepas
transformadas de S. cerevisiae y en P. stipitis, tiene una preferencia
por NADPH. Esto conduce a la acumulacin de NADH, dando como
resultado la oxidacin de xilitol a xilulosa por la XDH dependiente de
NAD+. En ausencia de oxgeno, el NADH no se puede reoxidar. Como
resultado, el xilitol se acumula y es excretado (Walfridsson et al.,
1995).
Como se puede observar en la Figura 3, S. cerevisiae puede utilizar la
xilulosa, que es fosforilada a xilulosa-5-fosfato y canalizada a travs
de la ruta de las pentosas fosfato (PPP) hacia la gluclisis. En base a
esta ruta, a partir de xilosa y glucosa se puede producir etanol, pero
slo a partir de la xilosa se puede producir xilitol, no as con glucosa.

Fig. 3. Rutas metablicas posibles para la utilizacin de xilosa y ribosa

por levaduras y distribucin de la [13C]-D-xilosa o [13C]-D-ribosa;
NAD, Nicotinamida adenindinucletido en su forma oxidada; NADH.
H+, Nicotinamida adenindinucletido en su forma reducida; NADP,
Nicotinamida adenindinucletido fosforilado su forma oxidada;
NADPH.H+, Nicotinamida adenindinucletido fosforilado en su forma
reducida (Tomado y modificado de Van Zyl et al., 1993).

2.5 CONVERSIN DE XILOSA A XILITOL

La obtencin de xilitol a partir de xilosa involucra varios tipos de
microorganismos y varias rutas metablicas, una es la fermentacin
de la xilosa por Pichia quercuum, para producir cido xilnico y xilitol
al mismo tiempo (Suzuki & Onishi, 1973) (Figura 5), otra es por medio
de la isomerizacin de la xilosa a xilulosa y posteriormente la
reduccin de la xilulosa a xilitol por dos deshidrogenasas ligadas a un
nucletido de piridina, como se mostr en la figura 2.

Fig. 5. Mecanismo probable de oxidacin y reduccin de D-xilosa por

Pichia quercuum;
NADP, Nicotinamida
adenindinucletido fosforilado su forma oxidada; NADPH. H+,
Nicotinamida adenindinucletido fosforilado en su forma reducida.
(Tomado y modificado de Suzuki & Onishi, 1973).

Isomerizacin de Xilosa a Xilulosa

A. aerogenes PRL-R3 posee enzimas inducibles para el catabolismo
de la D-xilosa y del D-arabitol. La D-xilosa es el inductor de la
isomerasa y de la D-xilulokinasa. El Darabitol es el inductor de la
deshidrogenasa del D-arabitol y de una D-xilulokinasa separada
(Figura 2) (Wilson & Mortlock, 1972). Reduccin de la Xilulosa a
Xilitol Hickman y Ashwell (1958) reportaron que la L-xilulosa es
convertida a D-xilulosa por dos deshidrogenasas ligadas a un
nucletido de piridina, para producir un sustrato comn, el xilitol.
Las reacciones pueden escribirse como sigue:

2.6 PRODUCCION DE XILITOL A PARTIR DE BAGAZO

2.6.1 ETAPAS DEL PROCESO TECNOLOGICO

El mismo consta de las siguientes etapas tecnolgicas:

Pretratamiento y almacenamiento del bagazo.
Hidrlisis del bagazo.
Neutralizacin del hidrolizado hemicelulsico de bagazo.
Concentracin del hidrolizado.
Purificacin del licor de xilosa.

PRETRATAMIENTO Y ALMACENAMIENTO DEL BAGAZO.

La caa de azcar es un cultivo de campo, contiene de 5 a 15% de

suciedad y cenizas antes de arribar al ingenio, parte de la cual pasa al
bagazo. Estas son mayores cuando se emplea la mecanizacin, haciendo
que la remocin de las mismas sea ms difcil. La slice que contiene el
bagazo hace que sea un material con cierto grado de abrasividad lo cual

crea dificultades adicionales durante el proceso. Por su parte los azcares

residuales (sacarosa) en una proporcin de 2 a 3% crean problemas como es
el incremento en peso del material y la formacin de un sustrato rico para el
crecimiento de los microorganismos durante su almacenamiento, causando
la degradacin de los componentes de inters para el proceso. Por estas
razones es necesario realizar el lavado de la fibra. En su composicin
morfolgica (Bagazo, Manual de los Derivados), se encuentran presentes la
fibra, el meollo y la fraccin de finos y solubles. Para su utilizacin en este
proceso es necesario utilizar bagazo desmeollado ya que la granulometra
juega un papel importante en las operaciones de impregnacin, secado y en
las caractersticas hidrodinmicas. El meollo posee alto contenido de
cenizas que pasan al licor e interfieren grandemente en el proceso de
purificacin. Se propone que el proceso de desmeollado sea realizado en el
propio ingenio como est establecido en el Central Uruguay y Pablo Noriega,
en esta etapa la mdula separada puede unirse con el bagazo integral o la
celolignina residual de este proceso y utilizarse como combustible.

AREA DE PREPARACIN DE BAGAZO.

HIDRLISIS CIDA

Durante la hidrlisis tiene lugar la reaccin de formacin de los

azcares. Parte de la ceniza que aun contiene el bagazo pasa a la
solucin as como la lignina soluble, todas estas sustancias se
disuelven en medio cido (Npoles, A.I. y col.,1987) La solucin
obtenida recibe el nombre de hidrolizado, el cual es un lquido
amarillo verdoso, sus principales componentes son los azcares:
xilosa, glucosa y arabinosa, otros componentes que se forman son el
furfural, cido actico, y compuestos fenlicos los cuales son nocivos
al proceso de hidrogenacin cataltica de la conversin de xilosa a
xilitol. El otro producto que se obtiene es el residuo llamado
celolignina, el cual puede ser utilizado como combustible del propio
proceso. El bagazo es alimentado al reactor por medio de una tolva
la cual se encuentra colocada a la boca de estos. Finalizada la carga
se cierra la tapa superior y se termina de adicionar la solucin cida
acorde con el hidromdulo fijado y a la concentracin de cido
establecida. Para ello el cido sulfrico es transportado desde un
tanque a los reactores a travs de una bomba de desplazamiento
positivo, pero antes se debe pasar por el filtro con el objetivo de
eliminar
posibles partculas extraas. El agua desmineralizada
almacenada en tanques, proveniente de los evaporadores
es
bombeada hasta los reactores donde se alimenta conjuntamente con
el cido sulfrico hasta alcanzar el hidromdulo requerido. Terminada
la carga se realiza el calentamiento con vapor saturado de la masa
hasta la temperatura de trabajo. La hidrlisis del bagazo se realiza en
fase estacionaria durante el tiempo establecido y la celolignina
residual se lava para recuperar los azcares que han quedado en ella
as como para eliminar el cido residual, la celolignina es descargada
hacia los ciclones.

Neutralizacin del hidrolizado.

El hidrolizado almacenado en tanques intermedios es enviado al

proceso de neutralizacin donde se eleva el pH hasta 5,5 - 6,0. Para
esto se utiliza una batera de columnas rellenas con resinas de
intercambio inico
dbilmente aninica en forma OH-, los
hidrolizados neutralizados son enviados a tanques y de aqu son
enviados hacia la siguiente etapa.

Concentracin del hidrolizado

La concentracin de los hidrolizados se realiza en
evaporadores mltiple efecto la concentracin es elevada
hasta 45-50o Bx, utilizando vapor directo, el agua extrada es
almacenada en tanques y luego es utilizada para el proceso
de hidrlisis, los licores concentrados son almacenados en
tanques.

Purificacin de los hidrolizados

Los licores concentrados son enviados a la etapa de et

al.Tecnologa del Proceso de Obtencin de Licores de Xilosa a
partir de Bagazo de Caa, para la Produccin Biotecnolgica
de Xilitol SOLENZAL, A. I. N. Braz. J. Food Technol., 5 SIPAL,
maro, 2005 OF FOOD TECHNOLOGY 60 purificacin, la cual se
realiza mediante columnas rellenas con resinas anionicas y
cationicas. Esta es la ltima etapa, la cual es muy importante
ya que es necesario obtener un sirope de xilosa puro el cual
debe cumplir los requisitos para su posterior bioconversin o
hidrogenacin cataltica.

Purificacin del licor de xilosa.

Tratamiento de la celolignina
Para el tratamiento de la celolignina se necesitan dos ciclones
para recibir la celolignina extrada de los reactores, la cual se
descarga a un conductor que lo lleva hacia la caldera. El
soplado de la celolignina se realiza a una presin de 8 Kg. /
cm.2 . Los tubos de entrada al cicln deben ser de acero
inoxidable preferiblemente de 5 mm de espesor. Posee
adems en su interior paletas que arrastran la celolignina por
los orificios de salida hacia la banda. El Tornillo extrusor se
encarga del lavado de la celolignina residual con solucin de
sosa, (para neutralizar esta), la celolignina ser mezclada
con meollo y alimentada a la caldera para generar el vapor
necesario para el proceso.

3. CONCLUSIONES
La factibilidad de obtener siropes de xilosa/xilitol a partir de
hidrolizados hemicelulsicos de bagazo abre nuevas posibilidades a la
industria de los derivados de la caa de azcar.
En trminos de la produccin microbiana de xilitol, la prominente o
deseada cepa para la produccin de xilitol debe tener una xilosa
reductasa dependiente de NADH, la cual parcialmente debe de
bloquear la regeneracin de NADPH a travs de la va de las pentosas
fosfato.
Con estas nuevas producciones de xilosa/xilitol se crearan fondos
exportables ya que se aprovechan desechos de otras industrias, a la
vez se producirn nuevos productos para la industria qumica y
farmacutica.
El xilitol ha sido definido como un azcar extrao y est presente en
bajas concentraciones en la naturaleza. Aunque la productividad
microbiana en las reacciones de reduccin para obtener xilitol puede
ser incrementada por diferentes mtodos de produccin la reduccin

qumica puede ser todava competitiva en relacin a la produccin

industrial.
La purificacin de diferentes azcares derivados de residuos
hemicelulsicos
y su aplicacin como materia prima para la
conversin bioqumica desde un punto de vista industrial, es un punto
de investigacin actual; debido a su aplicacin y escala industria.
Como se constata todas las materias primas utilizadas en este trabajo
proporcionan
hidrolizados
hemicelulsicos
capaces
de
ser
bioconvertidos en xilitol, con mayor o menor xito, por la levadura C.
guilliermondii FTI 20037. Se deben procurar alternativas de
tratamiento con el objetivo de reducir la prdida de azcares
fermentables, especialmente de glucosa y xilosa.

4. BIBLIOGRAFIA
Produccin y Aplicaciones Biotecnolgicas del Xilitol, Juan Carlos
Gonzlez-Hernndez*, Mariana Alvarez-Navarrete, Luz del Carmen
Ornelas Hernndez, Miguel Angel Zamudio Jaramillo, Laboratorio de
Bioqumica del Departamento de Ingeniera Bioqumica, Instituto
Tecnolgico de Morelia; Avenida Tecnolgico 1500. C. P. 58120.
Morelia, Mich, Mxico.
Bagazo. Manual de los Derivados de la Caa de azcar. Segunda
Edicin. Coleccin Geplacea. Serie Diversificacin. p 47 57. 1990.
http://www.tandfonline.com/loi/tcyt19