CAPTULO 6: LA MUTACIN COMO CAUSA DE ENFERMEDAD

Tema 6. La Mutacin como causa de enfermedad

Caractersticas generales de las mutaciones. Potencial patognico de las
mutaciones en el ADN codificante. El proceso de ayuste y su regulacin.
Potencial patognico de mutaciones que afectan al ayuste.
Caractersticas generales de las mutaciones
Ya se ha mencionado que el genoma humano est sujeto a variacin gentica y que esta capacidad de
introducir modificaciones genticas heredables supone una ventaja para la especie, al permitir la
adaptacin a condiciones ambientales cambiantes. Sin embargo, la existencia de una tasa mutacional
basal tiene el peligro de introducir cambios genticos deletreos en un individuo o una familia concreta,
provocando enfermedades heredables. Por tanto, de modo general podemos decir que la presencia de
mutaciones en una poblacin est sujeta al juego entre la tasa mutacional basal (la velocidad a la que se
producen nuevas mutaciones en la lnea germinal de esa poblacin) y la presin selectiva frente a cada
una de las mutaciones, de forma que aquellas mutaciones que sean muy agresivas no se extendern al
resto de la poblacin tan rpidamente como mutaciones con efectos fenotpicos ms leves. Por ejemplo,
ya hemos visto en otro captulo que las aberraciones cromosmicas (trisomas, monosomas, etc) son
raras pero casi siempre patognicas, mientras que los polimorfismos de secuencia variantes allicas
que no causan ninguna enfermedad son mucho ms frecuentes. En cierto modo, lo mismo sucede con
los distintos tipos de mutaciones: aquellas que provocan alteraciones graves del producto proteico
suelen ser menos frecuentes por estar sometidas a una fuerte presin selectiva en su contra.
Antes de estudiar todos los posibles tipos de mutaciones, ser de gran utilidad recordar la estructura y
procesamiento de un gen tpico, porque esto nos ayudar a comprender cmo se clasifican y sus efectos.
Como apreciamos en la siguiente figura, en un gen podemos distinguir (en el ADN genmico) una
regin 5' no-traducida (desde el inicio de la transcripcin hasta el ATG que seala el inicio de la
traduccin), exones separados por intrones (que contienen las secuencias consenso de ayuste GT-AG),
el codn de terminacin (TAA en la figura) y la regin 3' no traducida, que incluye la seal de
poliadenilacin (AATAAA). La transcripcin del gen y la posterior maduracin del transcrito primario dan
como resultado el ARNm maduro, que despus es traducido en la protena correspondiente. En general,
los distintos tipos de mutaciones que se encuentran en un gen pueden ser tanto mutaciones simples
(deleciones, inserciones o substituciones que afectan a un nucletido o a unas pocas bases) o
reordenamientos grandes (deleciones parciales o reordenamientos que dan lugar a duplicaciones o
deleciones del gen).

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Figura 6.1 Se muestra un gen con cuatro exones (rectngulos coloreados),

el ARNm generado por el proceso de ayuste y la protena final (lnea
naranja). La flecha horizontal de la parte superior representa una posible
delecin del gen, que incluya varios exones. Las flechas azules representan
posibles mutaciones de las regiones codificantes, que afectan al codn de
inicio (ATG), al codn de parada (TAA), a la seal de poliadenilacin
(AATAAA) o a codones codificantes de aminocidos. De estos ltimos, se
presenta una mutacin que crea un codn de parada (STOP) y otra
mutacin que provoca un cambio de aminocido en la protena (Leucina
por

Prolina

en

posicin

166).

Las

flechas

de

color

naranja

representan mutaciones que destruyen alguna de las secuencias de ayuste

(GT/AG).

Las substituciones simples de un nucletido por otro se denominan

transiciones transversiones, segn provoquen el cambio de purina
por purina pirimidina por pirimidina (transiciones), o el cambio de una
purina por pirimidina viceversa (transversiones). En el esquema
adjunto, las transiciones se representan por flechas grises y las
transversiones

por

flechas

negras.

Como

puede

apreciarse,

las

transversiones deberan ser el doble de frecuentes que las transiciones (8

posibles transversiones por 4 posibles transiciones). En cambio, al
analizar

las

mutaciones

presentes

en

enfermedades

humanas

encontramos que las transiciones son ms frecuentes. Esto es debido a que en general las
transiciones provocan una alteracin menos severa del producto proteico, por lo que la presin selectiva
contra ellas es menor. Adems, el dinucletido CpG suele estar metilado en la citosina, y la desaminacin espontnea de una metil-citosina da lugar a una transicin del tipo CT. Como este

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cambio tiene lugar con relativa frecuencia en el genoma de mamferos, esto tambin contribuye a la alta
frecuencia de transiciones que se observa en estas especies.
Nomenclatura general de mutaciones: Es importante conocer la nomenclatura recomendada para
describir los distintos tipos de mutaciones que pueden afectar al genoma. Aunque las recomendaciones
van cambiando con el paso de los aos, a continuacin se resumen las reglas principales:
1. Describir la mutacin utilizando la numeracin de nucletidos de la secuencia genmica (g.) o del
ADNc (c.) o la numeracin de la secuencia de aminocidos, segn los casos. Siempre la Adenina del
codn de iniciacin ATG se toma como posicin +1, por lo que el nucletido anterior es la posicin -1.
2. Describir las substituciones de nucletidos segn el esquema general:
Intervalo + secuencia antigua + tipo de cambio + secuencia nueva.
Utilizar una flecha el signo ">" para las sustituciones, "del" para deleciones, "ins" para inserciones.
Los rangos se indican con guin bajo (de subrayado) para evitar confusiones con el signo negativo. Las
combinaciones de dos o ms alteraciones se separan con el signo + y se incluyen en corchetes. Algunos
ejemplos:
g.12T>A (Cambio de timina por adenina en el nucletido 12 de la secuencia genmica)
[6T>C + 13_14del] (Dos cambios en el mismo alelo)
[6T>C] + [13_14del] (Dos mutaciones, una en cada alelo)
14-15insT (Insercin de timina entre dos nucletidos)
112_117delAGGTCAinsTG

(Insercin de TG en vez de AGGTCA, tambin se podra indicar

como 112_117>TG)
3. En repeticiones en tandem, se asigna por convenio el cambio a la ltima repeticin (la que ocupa una
poscin ms 3): por ejemplo, la delecin de un dinucletido TG en la secuencia ACTGTGTGCC (siendo A
el nucletido 1991) se describira como 1997-1998del ( 1997-1998delTG).
4. La variabilidad en microsatlites se designa contando la posicin de la primera repeticin. Si la
secuencia del ejemplo anterior fuese polimrfica, se designara 1993(TG)3-22, para indicar que en
posicin 1993 comienza un dinucletido TG que se encuentra en la poblacin repetido entre 3 y 22
veces.
5. En intrones (cuando no se conoce la secuencia genmica), se seala la posicin dentro del intrn con
referencia al exn ms cercano (utilizando nmeros positivos comenzando con la G de la secuencia de
ayuste GT donante, y nmeros negativos contando desde la G de la secuencia AG aceptora). Se puede
usar tanto la sigla IVS como sinnimo de intrn, como la numeracin correspondiente a la secuencia
del ADNc. Ejemplos:
IVS3+1G>T c.621+1G>T (621 es el ltimo nucletido del exn 3, luego +1 es la G de la
secuencia donante GT del intrn 3)
IVS6-5C>A c.1781-5C>A (1781 es el primer nucletido del exn 7, luego 1 es la G de la
secuencia aceptora AG del intrn 6, -2 es la A, y as sucesivamente hasta llegar a -5).

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6. Para describir substituciones de aminocidos, se indica el nmero del aminocido y el cambio
operado, considerando la metionina iniciadora como +1. Se sigue el esquema general aminocido
cambiado + rango + aminocido nuevo.
Se recomienda usar el cdigo de aminocidos de una letra, aunque tambin puede utilizarse el de tres
letras, empleando la letra X para indicar un codn de parada. Ejemplos:
R117H (la Arg en posicin 117 pasa a His)
G542X (la Gly 542 se convierte en codn de parada)
T97del (delecin de la treonina 97) T97_C102del (delecin de los aminocidos 97 a 102)
T97_W98insLK (insercin de leucina y lisina entre las posiciones 97 y 98, ocupadas por
treonina y triptfano)

Potencial patognico de las mutaciones en el ADN codificante

Cuando las substituciones simples tienen lugar en ADN codificante, sus efectos pueden ser de
varios tipos:
a)

substituciones silenciosas (llamadas sinnimas, sin cambio de sentido): no cambian ningn

aminocido en la protena codificada, debido a que la mutacin cambia un codn por otro codn
sinnimo. Como son biolgicamente neutras, no estn sujetas a seleccin y por tanto son
relativamente frecuentes en ADN codificante. Habitualmente se producen por cambios en la
tercera base de un triplete, ya que es habitualmente este nucletido el que vara entre codones
sinnimos.

b)

substituciones no-sinnimas (el cambio de nucletidos origina un cambio en la capacidad

codificante del ARNm). Segn el cambio introducido, podemos distinguir:
Mutaciones con cambio de sentido (mis-sense, en ingls), cuando el cambio de nucletidos
provoca un cambio de aminocidos. Se habla de cambio conservativo cuando ambos
aminocidos (el original y el nuevo) pertenecen al mismo grupo bioqumico, o no conservativo
cuando pertenecen a grupo distintos. Estos ltimos son en general ms graves, puesto que
alteran la estructura de la protena en mayor grado. Tambin son importantes los cambios que
afectan a Cistenas y Prolinas, que son aminocidos muy importantes en el mantenimiento de
la estructura terciaria de la protena.
Mutaciones sin sentido (non-sense), cuando un codn que codifica un aminocido se convierte
en un codn de parada (UAA, UAG UGA). Estas mutaciones dan lugar a protenas truncadas
en la regin C-terminal, adems de disminuir la estabilidad del ARNm. En general son muy
graves, por lo que son menos frecuentes que las mutaciones con cambio de sentido.

Figura 6.2 El video muestra distintos tipos de mutaciones puntuales

y su efecto sobre la protena: mutaciones sinnimas, con cambio de
sentido sin sentido.
Mutaciones con ganancia de sentido, cuando la mutacin transforma un codn de parada en
un codn codificante. Son casos infrecuentes, entre los que destaca el de una variante de la
hemoglobina denominada "Hemoglobina Constant Spring" (variante allica HBA20001),
originada por el cambio de UAA (codn de parada) a CAA. Esto tiene como resultado la adicin

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de 30 aminocidos a la secuencia de la hemoglobina alfa-2, que se hace ms inestable y
provoca una enfermedad de la sangre llamada alfa-talasemia debida a la presencia de cadenas
anormales de hemoglobina.

Figura 6.3 Esquema de la mutacin que origina la hemoglobina

Constant Spring.
c) Deleciones e inserciones de uno de unos pocos nucletidos pueden introducir o eliminar aminocidos
sin cambiar la pauta de lectura, siempre que se trate de inserciones o deleciones de tres nucletidos (
mltiplos de tres). Cuando se insertan o delecionan nucletidos en un nmero que no es mltiplo de
tres, se produce un frameshift (desplazamiento del marco de lectura) con un cambio muy
importante en la estructura proteica. Para comprender las mutaciones con cambio del marco de lectura,
es importante repasar este concepto.

Figura 6.4 Este video explica el concepto de marco de lectura y de cmo se

puede buscar un marco de lectura abierto en una secuencia de ADN,
dependiendo de la posicin de codones de iniciacin y parada. Este otro
video muestra cmo las inserciones o deleciones de uno dos nucletidos
pueden desplazar el marco de lectura (frameshift) y alterar gravemente la
secuencia proteica.
Al igual que las mutaciones sin sentido, las mutaciones con cambio del marco de lectura provocan
alteraciones importantes del producto proteico y, por tanto, estn sometidas a mayor presin selectiva,
por lo que suelen ser menos frecuentes en ADN codificante que las mutaciones sinnimas. Adems, los
cambios del marco de lectura suelen introducir codones de parada prematuros, por lo que habitualmente
se producen tambin protenas truncadas que ven muy comprometida su funcionalidad.

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Otro proceso por el que puede perderse o recuperarse el marco de lectura es la edicin del ARN. La
edicin del ARN es un mecanismo de modificacin co- post-transcripcional mediante el cual se cambian
uno varios nucletidos de un ARNm, con el resultado de que la secuencia del mensajero es ligeramente
distinta de la codificada por la secuencia genmica. Este fenmeno, bastante comn en otras especies
pero ms raro en humanos, permite generar diversos ARNm a partir de un mismo gen. Por ejemplo, la
apolipoprotena ApoB48, que se produce en el intestino para entrar a formar parte de los quilomicrones,
es fruto de un cambio CU en el que una citosina se des-amina para dar lugar a un uracilo; este cambio
crea un codn de parada en el ARNm de la ApoB100 y se produce una protena ms corta de lo que sera
esperado segn la secuencia inicial. Un mecanismo similar est implicado en el origen de enfermedades
como la neurofibromatosis tipo I el tumor de Wilms, debidas a alteraciones en los genes NF1 y WT1,
respectivamente.

El video de la Figura 6.5 muestra esquemticamente la edicin del ARN que

da lugar a la ApoB48.
Una variedad curiosa de edicin del ARN surge en unas ratas que tienen una delecin de un solo
nucletido en el gen de la vasopresina, haciendo que desarrollen hipertensin arterial. Estas ratas
mejoran espontneamente al envejecer, debido a un proceso de edicin del ARNm mediante el cual se
pierde el dinucletido GA en un motivo GAGAG de ese mismo gen. La delecin de estos dos
nucletidos, aadida a la delecin de un nucletido que ya tenan, hace que se recupere el marco de
lectura original y que se produzcan mayores niveles de vasopresina funcional. Recientemente, se ha
visto que algo similar sucede en humanos en el caso de la enfermedad de Alzheimer: un motivo
GAGAGA en el gen de la protena precursora de amiloide-

( -APP) sufre una edicin parecida,

con delecin de dos bases en el ARNm y la interrupcin del marco de lectura que produce una protena
truncada y es causa de algunos casos de enfermedad de Alzheimer.

El proceso de ayuste (splicing) y su regulacin

Los ARN mensajeros de eucariotas tienen una caracterstica muy importante: no son codificantes en su
totalidad, desde el principio al fin, sino que las regiones codificantes estn interrumpidas por otras
regiones no-codificantes. Es decir, no todos los nucletidos del ARN mensajero son ledos para sintetizar
protenas, sino que existen regiones codificantes llamada exones que alternan con otras regiones nocodificantes llamadas intrones. Debido a esta configuracin, la maduracin de un ARNm incluye la
eliminacin de los intrones y el empalme de los exones para formar un mensajero maduro que pueda ser
traducido desde el principio hasta el fin y sin interrupciones. Este proceso de corte y eliminacin de
intrones con empalme de los exones se denomina en ingls splicing, trmino natico que corresponde
al castellano ayuste (la unin de dos cabos por sus chicotes). El ayuste es un proceso complejo, porque
hay que tener en cuenta que un gen puede tener un alto nmero de exones e intrones, y requiere una
maquinaria proteica bastante sofisticada. En primer lugar, es importante definir el punto exacto que
delimita la frontera entre un exn y un intrn, para que la maquinaria encargada del ayuste pueda
actuar. Estos puntos vienen determinados por secuencias especficas del ARNm. Por ejemplo, los
intrones de eucariotas comienzan en la prctica totalidad de los casos por los nucletidos GuaninaUracilo (secuencia 5' de ayuste, GU) y terminan en AdeninaGuanina (secuencia 3' de ayuste, AG).
Estas secuencias se localizan dentro de unas regiones ms amplias que cumplen un consenso de
secuencia concreto. Por ejemplo, la secuencia de ayuste 5' est formada por el consenso 5'AG|GU[A/G]AGU-3' (la barra vertical indica el sitio de corte donde termina el exn precedente y

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comienza el intrn; [A/G] significa que en esa posicin puede haber una A una G). Por su parte, la
secuencia de ayuste 3' se ajusta al consenso 5'-NCAG|G-3' (siendo N cualquier nucletido). Adems, es
importante la presencia de una adenina 20-40 nucletidos por arriba (es decir, en direccin 5') de la
secuencia 3' de ayuste. Esta adenina se encuentra en la secuencia consenso 5'-CU[A/G]A[C/U]-3' (es la
adenina en negrita y subrayada), es decir, precedida por A G y seguida por C U, y se denomina
punto de ramificacin (en ingls, "branch point"). Entre el punto de ramificacin y la secuencia de
ayuste 3' se encuentra un tracto rico en pirimidinas, es decir, formado casi exclusivamente por
timinas citosinas. Finalmente, se han identificado pequeos elementos de secuencia en exones en
intrones que actan como potenciadores silenciadores del proceso de ayuste, y que tienen gran
importancia en la modulacin y regulacin fina del proceso.

Figura 6.6 El video muestra esquemticamente las distintas secuencias que

son importantes en el proceso de ayuste. En la imagen se ven los
complejos proteicos que se unen a estas secuencias.
El proceso de ayuste implica varias reacciones enzimticas que realizan cortes endonucleolticos y
unin de extremos libres. El primer paso del proceso es el corte en el sitio de ayuste 5', justo por
delante de la guanina del GU inicial del intrn. Este extremo libre se une a la Adenina del punto de
ramificacin mediante un enlace fosfo-dister 5'-2', creando una estructura en lazo. Finalmente, se
corta la secuencia de ayuste 3' por detrs de la guanina del sitio AG, lo que resulta en la liberacin del
intrn; los extremos libres de los dos exones flanqueantes son entonces religados. Las molculas que
llevan a cabo estos procesos son unas ribonucleoprotenas nucleares pequeas (RNPnp), formadas
por un ARN nuclear pequeo (ARNnp) y varias subunidades proteicas, dando lugar a un complejo que
en su conjunto se denomina ayusteosoma (spliceosome en ingls). Aunque hay muchos tipos de
ARNnp que participan en el proceso de ayuste, los principales se llaman U1, U2, U2AF, U4, U5 y U6,
que dan su nombre a las correspondientes RNPnp. La RNPnp U1 se une a la secuencia de ayuste 5' por
complementariedad de bases, ya que uno de sus extremos es complementario a la secuencia consenso
que rodea a la GU del extremo 5' del intrn, y U2AF se une a la secuencia de ayuste 3 (complejo E).
Cuando U2 se une al punto de ramificacin se forma el complejo A, que facilita la formacin del lazo. A
continuacin, un complejo formado por la RNPnp U4/6 y la RNPnp U5 se une a la regin de ayuste 3'
y estabiliza la formacin de todo el complejo (complejo B). Diversos cambios en la configuracin (con la
salida de U4), llevan a cabo el corte 3' (complejo C) y la unin de los exones.

Este enlace nos lleva a Virtual Cell Animation Collection, un sitio educativo
creado por la National Science Foundation y el U.S. Department of
Education. Haciendo click aqu, accedemos directamente al video que
muestra el proceso de ayuste (splicing).

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Como se puede suponer, en un genoma eucariota hay miles de sitios que cumplen el consenso de
secuencia necesario para funcionar como sitio de ayuste, pero sin embargo slo unos pocos participan
en el procesamiento normal de los genes. De hecho, uno de los temas ms interesantes en la regulacin
del ayuste es cmo se definen exactamente los lmites de exones e intrones, de modo que la
maquinaria de ayuste los reconozca como tales. Aunque todava quedan incgnitas por resolver, hoy en
da sabemos que hay otros elementos que cooperan para estabilizar el ayusteosoma y permitir que se
lleve a cabo el proceso. Entre estos elementos destacan la protenas SR (llamadas as por ser ricas en
los aminocidos Serina y Arginina), que interaccionan con distintos componentes del ayusteosoma y se
unen a secuencias moduladoras como son los potenciadores exnicos del ayuste. Del mismo modo,
algunos tipos de ribonucleoprotenas nucleares heterogneas (hnRNP) se unen a silenciadores del
ayuste, tanto exnicos como intrnicos. Todas estas interacciones tienen lugar antes de la unin de las
RNPnp U4/6 y RNPnp U5, y son muy importantes para definir los lmites de exones e intrones.

Figura 6.7 Este video explica la forma en que se definen los exones e
intrones, dependiendo de las secuencias presentes en el ARN.
Una ventaja del mecanismo de ayuste es que hace posible que distintas clulas utilicen distintas
combinaciones de exones para dar lugar a mensajeros ligeramente diferentes, que se traducen en
protenas distintas. Este fenmeno por el cual un mismo gen puede sufrir distintos patrones de ayuste
dependiendo del tejido del tipo celular en que se lleva a cabo, se denomina ayuste alternativo. Es
muy comn en mamferos, y aade un nivel ms de complejidad a la capacidad codificante del genoma.
Por ejemplo, se estima que al menos el 90% de los ARN mensajeros humanos estn sujetos a
ayuste alternativo, bien en distintos tejidos bien durante el desarrollo embrionario. Esto da una idea de
la importancia de este proceso, y la necesidad de comprender bien cmo se regula.

Figura 6.8 Este video ilustra el fenmeno del ayuste alternativo.

Un primer nivel de regulacin del ayuste alternativo se da en los motivos de secuencia presentes en
exones e intrones. Adems de los motivos generales que ya hemos visto, existen muchos otros que se
unen a otros factores reguladores proteicos. Es precisamente la combinacin de stos, junto con las
distancias a las que se encuentran de los lmites intrn/exn, lo que lleva a que distintos tejidos o tipos
celulares generen diferentes transcritos alternativos. La idea es que los factores de ayuste que se unen a
esos motivos de secuencia estn presentes en unos tejidos pero no en otros, y eso permite leer esas
seales de distinta manera. Este cdigo de ayuste ha sido revelado recientemente para el ratn, y
constituye la primera pieza de la piedra Rosetta que permitir predecir los patrones de ayuste
alternativo.
Adems, recientemente se ha observado que la generacin de transcritos alternativos a partir de un
mismo gen no slo depende de este primer nivel de regulacin, sino que hay otros factores
genmicos que tambin intervienen. En primer lugar, est la velocidad de transcripcin de un gen:
si la polimerasa se enlentece durante la elongacin, esto crea una situacin que favorece la inclusin de
exones dbiles en el transcrito maduro. En segundo lugar, se ha visto que la cromatina tambin
interviene en el ayuste alternativo, principalmente de dos formas. Por un lado, la posicin de los
nucleosomas parece ser importante, ya que constituyen una barrera al paso de la polimerasa y por
tanto pueden enlentecer la elongacin de la transcripcin. Adems de esto, algunas modificaciones
epigenticas como la trimetilacin de la lisina 36 de la histona H3 (H3K36me3) pueden funcionar

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como sitios de unin a factores de ayuste, y favorecer as la inclusin de exones dbiles. En tercer lugar,
en los ltimos aos se ha visto que la accin de los ARN no codificantes (ncRNAs) pueden ser
importantes en la regulacin del ayuste alternativo. Por ejemplo, algunos microARN regulan la expresin
de factores de ayuste durante el desarrollo embrionario, como sucede con el mir-124 y el factor de
unin al tracto de polipirimidinas. Otra forma de actuacin est ejemplificada en el lncRNA MALAT-1,
que acta secuestrando protenas SR en el ncleo: la ausencia de MALAT-1 hace que haya ms protenas
SR disponibles y que cambien los patrones de ayuste de varios genes.

Potencial patognico de mutaciones que afectan al ayuste.

Las mutaciones simples que tienen lugar en ADN no codificante intragnico (es decir, en intrones y
regiones no traducidas) son silenciosas, excepto cuando afectan a las secuencias de consenso para
ayuste (splicing) de los extremos 5' y 3' de los intrones. En este caso, podemos encontrar:
Mutaciones que destruyen una de las secuencias de consenso. Si esto tiene lugar en ausencia de
secuencias de ayuste crpticas (escondidas) y en intrones pequeos, habitualmente se lee todo el
intrn, que queda as incluido en el ARNm. Esto hace que se aadan aminocidos a la protena,
aunque tambin es posible que se introduzca un cambio en el marco de lectura y se altere toda
la secuencia de aminocidos a partir de ese punto.
Si la mutacin que destruye la secuencia de ayuste tiene lugar en presencia de una secuencia de
ayuste crptica en ese mismo intrn, el exn vecino ser ms largo; por el contrario, si la
secuencia crptica est en el exn cercano a la mutacin, dicho exn ser ms corto.
En ocasiones, las mutaciones que destruyen una de las secuencias consenso de ayuste hacen que se
"salte" el exn adyacente (lo que en ingls se denomina skipping del exn), dando lugar a una
protena que ha perdido un cierto nmero de aminocidos, aunque tambin es posible que produzca
un cambio en el marco de lectura. El exn afectado ser el 5 o el 3 a la mutacin, segn se
destruya el GT el AG de un intrn, respectivamente.

Figura 6.9 El video muestra el efecto de distintas mutaciones que

afectan a las secuencias consenso de ayuste.
Un caso especial de este tipo de mutaciones es la transicin AG en posicin +3 de la secuencia
donante de ayuste, una alteracin que est asociada con desarrollo de enfermedades en al
menos 8 genes humanos. Como se recordar, la secuencia donante de ayuste (la del extremo 5'
del intrn) es complementaria a la secuencia del ARN nuclear pequeo U1 (U1snRNA), cuya
presencia es necesaria para que se lleve a cabo el proceso de ayuste. Los dos primeros nucletidos
del intrn son siempre GT (complementarios a CA en el U1snRNA), y el tercer nucletido de la
secuencia de ayuste suele ser adenina (complementaria al uracilo correspondiente en el U1snRNA).
En cambio, las posiciones +4 a +6 no siempre son perfectamente complementarias. De
hecho, la adenina en posicin +3 dota de cierta flexibilidad a los nucletidos de las posiciones +4 a
+6, que pueden ser discordantes de la secuencia del U1snRNA y aun as son capaces de funcionar
correctamente como secuencia donante de ayuste. En cambio, si alguna de las posiciones +4 a +6
no son complementarias a la secuencia del U1snRNA, una mutacin en la posicin +3 tiene como

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resultado la falta de funcionalidad de esta secuencia de ayuste, con lo que se salta el exon
precedente.

Figura 6.10 Este video ilustra el ejemplo del gen COLQ, en el que una
mutacin en la posicin +3 del intrn 16 tiene el mismo efecto que una
mutacin que destruya la secuencia de ayuste 5'. Esto se explica porque
la secuencia que rodea a la secuencia de ayuste 5' no es totalmente
complementaria a la secuencia del ARN nuclear pequeo U1, por lo que
la mutacin de la posicin +3 (que habitualmente no debera tener
ningn efecto) hace que la unin del ARNnp U1 sea ineficaz y el proceso
de ayuste no se lleve a cabo correctamente.
Finalmente, existen mutaciones que, sin afectar directamente a secuencias consenso de ayuste,
pueden activar un lugar crptico en un intrn y producir un exn ms grande y posiblemente un
cambio en el marco de lectura.

Figura 6.11 Este video muestra el proceso por el que una mutacin
puede activar una secuencia de ayuste crptica en un intrn. Si esta
secuencia es ms fuerte que la secuencia de ayuste original, se puede
alterar el patrn normal de ayuste de esa regin.
Como regla general, podemos afirmar que las mutaciones que afectan al mecanismo de ayuste son ms
raras que las substituciones, aunque algunos genes tienen una estructura exnica que les otorga
una tendencia especial a sufrir mutaciones de este tipo: se trata, habitualmente, de genes con
muchos intrones y con exones pequeos, como sucede con los genes que codifican cadenas del colgeno
(COL7A1, por ejemplo, tiene 118 exones), o bien genes con muchos sitios crpticos de ayuste (como es
el caso del gen de la beta-globina).
Como hemos visto en el apartado anterior, los ESE ESS (potenciadores o silenciadores exnicos del
ayuste) y los ISE ISS (potenciadores o silenciadores intrnicos) constituyen secuencias de unin para
protenas SR (las que se unen a los potenciadores de ayuste) o para protenas hnRNP (las que se unen
a los silenciadores). Por tanto, estas protenas regulan el proceso de ayuste y determinan si un exn va
a estar presente en el transcrito final o, por el contrario, se va a saltar. Es importante tener en cuenta
que algunas mutaciones en estos motivos, aunque sean silenciosas porque no cambian el aminocido
(o porque se localizan en intrones), pueden sin embargo tener efectos sobre el mensajero, haciendo que
un exn se pierda y alterando as la estructura de la protena o rompiendo el marco de lectura. De
hecho, en algunos genes (ATM o NF1, por ejemplo) se ha estimado que el 50% de las mutaciones que
originan enfermedades afectan a regiones que cambian el patrn de ayuste sin cambiar la
secuencia de aminocidos. Un buen ejemplo para ilustrar esta situacin es una enfermedad llamada
Atrofia Muscular Espinal, debida a deleciones y/o mutaciones del gen SMN1. Cerca de este gen hay
un gen parlogo casi idntico llamado SMN2, en el que un cambio C

T modifica el patrn de ayuste

(sin cambiar la secuencia de aminocidos) y hace que el exn 7 se pierda, dando lugar a una protena
truncada no funcional. De todas formas, un pequeo porcentaje de las molculas siguen un ayuste
normal (con el exn 7) y producen protena normal a partir del gen SMN2. Por tanto, aunque no haya
ninguna copia funcional de SMN1 (como sucede en enfermos con atrofia muscular espinal) la

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enfermedad tiene distinta gravedad segn el nmero de copias de SMN2 presentes. De hecho, se piensa
que esta circunstancia podra utilizarse para corregir la sintomatologa de los pacientes con Atrofia
Muscular Espinal.

Figura 6.12 El video ilustra los distintos patrones de ayuste de los genes
SMN1 y SMN2, debidos a un cambio nucleotdico que destruye un
potenciador exnico de ayuste en el exn 7 del gen SMN2.
Otro tipo de mutaciones del ADN no-codificante intragnico son las que afectan a la seal de poliadenilacin, que se encuentra en la regin no traducida 3 de un gen. Estas mutaciones pueden
originar protenas defectuosas llevar a la degradacin del ARNm. Por ejemplo, una mutacin en la seal
de poliadenilacin del gen que codifica la hemoglobina alfa-2 (alelo HBA2 0024) convierte la seal
AATAAA en AATGAA, con lo que el ARNm no se poli-adenila correctamente, el ARNm se degrada y se
desarrolla la enfermedad alfa-talasemia por ausencia de cadenas de hemoglobina alfa-2.
Finalmente, las substituciones en el ADN no codificante intergnico sern silenciosas excepto
cuando afecten a elementos reguladores de la expresin gnica (promotores, potenciadores, etc) o a
otros elementos necesarios para el correcto procesamiento del ARNm. Por ejemplo, mutaciones que
afectan a la Regin de Control del Locus de las alfa- y beta-globinas (un conjunto de potenciadores
situados unas 4060 kb en direccin 5' de los genes respectivos) tambin provocan talasemias, por la
sntesis deficiente de globinas.