ADN

ESTRUCTURA
CROMOSOMAS Y GENOMAS

 Los cromosomas son los
portadores de los elementos
hereditarios
 Los cromosomas están
compuestos de ADN y
proteínas
 Cada cromosoma está
formado por una molécula de
ADN

El ADN como principio transformante
Cepa R inocua
Frederick Griffith,
1928
Streptococcus pneumoniae

S: cubierta de
polisacáridos
PRESENTE
R: cubierta de
polisacáridos
AUSENTE

Cepa S letal

Oswald Avery. and Maclyn McCarty. Colin MacLeod. . 1943.

P32 S35 DNA: P32 proteínas: S35 Alfred Hershey & Martha Chase. . 1952.

Estructura. el cuál consiste de largas secuencias de ácidos nucleicos que proporcionan la información necesaria para construir al organismo. organización y propiedades .El ADN molécula de la herencia La naturaleza hereditaria de cada organismo está definida por su genoma.

Las bases nitrogenadas .

DESOXIRIBONUCLEÓTIDOS .

Nucleósido Nucleótido .

Reglas de Chargaff •La cantidad de adenina es la misma que la de timina: A=T •La cantidad de guanina equivale a la de citosina: G=C •La cantidad de bases púricas es la misma que las bases pirimídicas: A+G=T+C Pero la cantidad de A+T  G+C .

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Rosalind Franklin y Maurice Wilkins .

Estructura del ADN James Watson y Francis Crick. 1953. Modelo de la doble hélice del ADN .

Surco menor Surco menor Surco mayor Surco mayor .

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.. 3’ 5’ fosfato Enlace fosfodiester ADN 3’ hidroxilo .5’ GATC.

Complementariedad: Cadenas anti-paralelas A Extremo 5’: PO4 Extremo 3’: OH T G C Bases nitrogenadas: interior Fosfatos: exterior .

¿Cómo se puede copiar la información a generaciones sucesivas? .La estructura del ADN permite responder dos preguntas claves en la Genética: 1. ¿Cómo se puede determinar la información de una función biológica en una forma química? 2.

ADN lineal y circular Doble hélice (procariontes y eucariontes) Cadena sencilla (algunos virus) Secuencias unicas (genes). secuencias repetidas (no codificantes) Circular Superenrollado Bacteria Virus (algunos) Plásmidos Mitocondria Cloroplastos Lineal Nuclear de Eucariontes Virus (algunos) Superenrollado .

2 x 106 pb) • 1 cromosoma • DNA circular doble cadena • sin envoltura de membrana .ADN de bacteria (4.

Superenrollamiento del ADN Bacteria .

Organización del cromosoma bacteriano DNA superenrollado Proteínas que unen al DNA Bacteria en división Bacteria .

Topoisomerasas Enzimas que regulan la tensión en la molécula de ADN Tipo I: Tipo II: Girasa Cortan una de las cadenas de DNA No requieren ATP Introducen incrementos de 1 en Lk Cortan ambas cadenas de DNA Requieren ATP Introducen incrementos de 2 en Lk (superenrollamiento negativo en procariontes) .

Formas topológicas del DNA circular cerrado (topoisómeros) .

Propiedades del ADN Desnaturalización y Re-naturalización El contenido de GC influye en las propiedades del ADN. especialmente sobre la temperatura de desnaturalización y alineamiento % GC Tm .

Concentrar células Source Lysis Methods Lysozyme .Purificación de ADN 2.detergent for cell Bacteria membranes Freeze/Thaw several times French Press Osmotic Organelles Sonication Detergent Osmotic Animal Cells Sonication Detergent Plant Cells Several enzymes to break down cell walls Mechanical grinding 4. Eliminar proteínas . Romper células 1. Precipitar ADN • • • Etanol Isopropanol Butanol 3.degrades polysaccharide cell walls SDS .

9 Ratio > 2 Absorbance peak or shoulder at 270 nm Nucleic Acid Form Double -stranded DNA Single-stranded DNA RNA Quality Contains protein contamination no contamination DNA may contain RNA Phenol contamination NA Concentration at 1 A260 50 µg/ml 37 µg/ml 40 µg/ml .8 1.8 < Ratio < 1.Concentración y calidad del ADN A260 / A280 Ratio < 1.

2.Separación y visualización de fragmentos de ADN Gel de Agarosa 0.5% Bromuro de etidio: Agente intercalante entre las bases nitrogenadas que fluoresce a la luz UV .8% .

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2004. 2003. 2008) Lehninger “Principles of Biochemistry” 3ª. (1999.Bibliografía: Alberts “Molecular Biology of the Cell” 4ª o 5ª Ed. 2008) Lodish “Molecular Cell Biology” 4ª. 5ª o 6ª Ed. 2007) . (2000. (2002. 4ª o 5ª Ed.