ADN

ESTRUCTURA
CROMOSOMAS Y GENOMAS

 Los cromosomas son los
portadores de los elementos
hereditarios
 Los cromosomas están
compuestos de ADN y
proteínas
 Cada cromosoma está
formado por una molécula de
ADN

El ADN como principio transformante
Cepa R inocua
Frederick Griffith,
1928
Streptococcus pneumoniae

S: cubierta de
polisacáridos
PRESENTE
R: cubierta de
polisacáridos
AUSENTE

Cepa S letal

.Oswald Avery. and Maclyn McCarty. Colin MacLeod. 1943.

P32 S35 DNA: P32 proteínas: S35 Alfred Hershey & Martha Chase. . 1952.

organización y propiedades .El ADN molécula de la herencia La naturaleza hereditaria de cada organismo está definida por su genoma. Estructura. el cuál consiste de largas secuencias de ácidos nucleicos que proporcionan la información necesaria para construir al organismo.

Las bases nitrogenadas .

DESOXIRIBONUCLEÓTIDOS .

Nucleósido Nucleótido .

Reglas de Chargaff •La cantidad de adenina es la misma que la de timina: A=T •La cantidad de guanina equivale a la de citosina: G=C •La cantidad de bases púricas es la misma que las bases pirimídicas: A+G=T+C Pero la cantidad de A+T  G+C .

.

Rosalind Franklin y Maurice Wilkins .

Modelo de la doble hélice del ADN . 1953.Estructura del ADN James Watson y Francis Crick.

Surco menor Surco menor Surco mayor Surco mayor .

.

.5’ GATC.. 3’ 5’ fosfato Enlace fosfodiester ADN 3’ hidroxilo .

Complementariedad: Cadenas anti-paralelas A Extremo 5’: PO4 Extremo 3’: OH T G C Bases nitrogenadas: interior Fosfatos: exterior .

¿Cómo se puede determinar la información de una función biológica en una forma química? 2. ¿Cómo se puede copiar la información a generaciones sucesivas? .La estructura del ADN permite responder dos preguntas claves en la Genética: 1.

secuencias repetidas (no codificantes) Circular Superenrollado Bacteria Virus (algunos) Plásmidos Mitocondria Cloroplastos Lineal Nuclear de Eucariontes Virus (algunos) Superenrollado .ADN lineal y circular Doble hélice (procariontes y eucariontes) Cadena sencilla (algunos virus) Secuencias unicas (genes).

2 x 106 pb) • 1 cromosoma • DNA circular doble cadena • sin envoltura de membrana .ADN de bacteria (4.

Superenrollamiento del ADN Bacteria .

Organización del cromosoma bacteriano DNA superenrollado Proteínas que unen al DNA Bacteria en división Bacteria .

Topoisomerasas Enzimas que regulan la tensión en la molécula de ADN Tipo I: Tipo II: Girasa Cortan una de las cadenas de DNA No requieren ATP Introducen incrementos de 1 en Lk Cortan ambas cadenas de DNA Requieren ATP Introducen incrementos de 2 en Lk (superenrollamiento negativo en procariontes) .

Formas topológicas del DNA circular cerrado (topoisómeros) .

Propiedades del ADN Desnaturalización y Re-naturalización El contenido de GC influye en las propiedades del ADN. especialmente sobre la temperatura de desnaturalización y alineamiento % GC Tm .

degrades polysaccharide cell walls SDS .detergent for cell Bacteria membranes Freeze/Thaw several times French Press Osmotic Organelles Sonication Detergent Osmotic Animal Cells Sonication Detergent Plant Cells Several enzymes to break down cell walls Mechanical grinding 4. Eliminar proteínas . Romper células 1. Concentrar células Source Lysis Methods Lysozyme .Purificación de ADN 2. Precipitar ADN • • • Etanol Isopropanol Butanol 3.

8 < Ratio < 1.8 1.Concentración y calidad del ADN A260 / A280 Ratio < 1.9 Ratio > 2 Absorbance peak or shoulder at 270 nm Nucleic Acid Form Double -stranded DNA Single-stranded DNA RNA Quality Contains protein contamination no contamination DNA may contain RNA Phenol contamination NA Concentration at 1 A260 50 µg/ml 37 µg/ml 40 µg/ml .

5% Bromuro de etidio: Agente intercalante entre las bases nitrogenadas que fluoresce a la luz UV .Separación y visualización de fragmentos de ADN Gel de Agarosa 0.8% .2.

.

2008) Lodish “Molecular Cell Biology” 4ª. 2008) Lehninger “Principles of Biochemistry” 3ª. 5ª o 6ª Ed. (2002. 2004. (1999. 2003. 2007) .Bibliografía: Alberts “Molecular Biology of the Cell” 4ª o 5ª Ed. 4ª o 5ª Ed. (2000.

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