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Fundamento[editar]
Las paredes celulares de ciertas bacterias contienen cidos grasos (cidos miclicos) de
cadena larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la propiedad de resistir la
decoloracn con alcohol-cido, despus de la tincin con colorantes bsicos. Por esto se
denominan cido-alcohol resistentes. Las micobacterias como Mycobacterium tuberculosis
y M. marinum se caracterizan por sus propiedades de cido-alcohol resistencia. La
coloracin clsica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento para que el colorante atraviese
la pared bacteriana que contiene ceras. Al suspender el calentamiento y enfriar con agua,
provoca una nueva solidificacin de lo cidos grasos de modo que el colorante ya no
puede salir de las bacterias. Por otro lado, el calentamiento aumenta la energa cintica de
las molculas del colorante lo cual tambin facilita su entrada a las bacterias. Las bacterias
que resisten la decoloracin son de color rojo y las que no, se ven de color azul ya que se
utiliza azul de metileno como tincin de contraste.
Tcnica[editar]
Esta tcnica puede realizarse tanto en muestras histolgicas como citolgicas.
Variante histolgica[editar]
Para demostrar la presencia de BAAR en cortes de tejido en parafina.Los reactivos
necesarios para su realizacin son los siguientes:
1. cido perydico 58%
2. carbol fucsina de Ziehl culina(fucsina fenicada). Preparar mezclando en el orden
dado:
1. 0,5 g fucsina bsica
2. 50 ml agua destilada
3. 5 ml etanol absoluto
4. 28,5 g cristales de fenol derretidos
3. hematoxilina
4. alcohol cido 1%:
1. alcohol de 35
2. cido clorhdrico
El procedimiento es el siguiente:
1. desparafinar e hidratar los cortes
2. cido peridico 5%, 10 min
3. lavar con agua destilada
4. fucsina fenicada, 15 min
5. decolorar en alcohol cido al 50%
6. lavar con agua destilada
7. hematoxilina, 10 min
8. azulidificar con, por ejemplo, carbonato de litio
9. deshidratar, aclarar y montar preparaciones
Resultados[editar]
BAAR: rojo.
Ncleos: azul semiamarillo.
Variante clsica o "en caliente"=
1. Hacer un frotis de la muestra.
1. La fijacin al calor asegurar de que el frotis quede adherido al
portaobjetos. Un frotis muy delgado puede darle resultados
falsamente negativos y un frotis muy grueso puede desprenderse
del portaobjetos durante la tincin.
2. Utilizando pinzas, coloque los portaobjetos en una gradilla de
tincin con los extendidos hacia arriba.
2. Dejar el frotis sobre el puente de tincin.
3. Aplicar fucsina-fenicada.
1. Deje que el colorante permanezca sobre los portaobjetos durante
5 minutos. Mantenga el calor durante este perodo,
4. Calentar con un mechero hasta la emisin de vapores (3-5 minutos).