PRACTICA 1

OBSERVACIN
EN FRESCO Y
COLORACIONES

OBSERVACION DE CULTIVO EN FRESCO

OBJETIVOS

Observacin de bacterias obtenidas en diferentes lugares con el fin de estudiarlas

y observarlas al microscopio.
El manejo de cultivos bacterianos para observar las bacterias.
Observar la estructura de la bacteria bacillus licheniformis

METODOLOGIA
1) Esterilizar el porta objeto con el mechero
2) Agregar dos gotas de melaza en el porta objeto

3)
4)
5)
6)
7)
8)

Esterilizar el gancho microbiano

Esparcir en la parte central de la superficie del porta objeto
Agregar el cultivo a la muestra
Volver a esterilizar el gancho microbiano
Colocar el cubre objeto
Observar en el microscopio
RESULTADOS

Colonia de bacillus licheniformis, microscopia

ptica en objetivo de 100x

FIGURA 01: MUESTRA DE CULTIVO EN

FRESCO

OBSERVACION DE CULTIVO EN SECO

OBJETIVO

Aprender a realizar los distintos tipos de preparaciones para su observacin en seco.

Apreciar las caractersticas de la bacteria bacillus licheniformis.

METODOLOGIA
1)
2)
3)
4)
5)
6)
7)
8)

Esterilizar el porta objeto con el mechero

Agregar dos gotas de melaza en el porta objeto
Esterilizar el asa microbiana
Agregar el cultivo a la muestra
Volver a esterilizar el asa microbiana
Colocar el cubre objeto
Secar la muestra con el mechero
Observar en el microscopio
RESULTADOS

COLORACION GRAM O COMPUESTA

OBJETIVOS

Conocer las tcnicas de preparacin y observacin microscpica de bacterias.

Observar diferencias morfolgicas y estructurales entre y dentro de los
microorganismos.

METODOLOGIA
1)
2)
3)
4)
5)
6)

Esterilizar el portaobjeto
Esterilizar el gancho
Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto
Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo
Secamos la muestra
Colocar dos gotas de violeta de cristal en la muestra dejndolo colorear por dos
minutos , quitar el exceso
7) Colocar el lugol dejndolo reposar 2 minutos, quitar el exceso
8) Lavar las lminas con alcohol de acetona hasta llegar a decolorar
9) Por ltimo echar zafranina dejndolo colorear 1 minutos
10) Finalmente lavar con agua y dejar secar
11) Llevar al microscopio
RESULTADOS

Colonia de bacillus licheniformis, microscopia ptica en

objetivo de 100x.
Bacterias de color rosado u rojo (Gram negativas)

FIGURA 02: MUESTRA DE CULTIVO EN

COLORACION GRAM O COMPUESTA

COLORACION SIMPLE

 OBJETIVOS

Destacar el microorganismo completo para que se vean las formas y las

estructuras celulares bsicas.
Observar la reaccin de la bacteria bacillus licheniformis con el colorante
agregado.

METODOLOGIA
1)
2)
3)
4)
5)
6)
7)
8)

Esterilizar el portaobjeto
Esterilizar el gancho antibacteriano
Sacar dos gotas de melaza y agregar en el porta objeto
Volver a esterilizar el gancho para sacar el cultivo
Secar la muestra
Colocar dos gotas de azul de metileno dejndolo colorear por 1 minuto
Lavar con agua
Observar en el microscopio

PRACTICA
RESULTADOS

2
Colonia de bacillus licheniformis, microscopia ptica en
objetivo de 100x.
Bacterias de color azul en las cuales la capsula es de
color blanco unas dentro y otras fuera de la bacteria.

FIGURA 03: MUESTRA DE CULTIVO EN

COLORACION SIMPLE

MEDIOS
DE
CULTIVO
S

DILUSIONES DE SIEMBRA DE CULTIVO

OBJETIVOS

Familiarizarse con las tcnicas empleadas en Microbiologa para el cultivo y la manipulacin de

microorganismos en condiciones de esterilidad.
Saber la importancia del cultivo en los medios generales, enriquecidos, diferenciales y
selectivos.
METODOLOGIA
1) Preparar 250 ml de solucin salina fisiolgica al 0,85%
2) Agregar 4,5 ml de solucin salina fisiolgica a cada frasco:

101 , 102 y 103 .

3) Agregar una muestra de microbio utilizando el asa bactereolgica aadiendo dicha muestra
al frasco de

101 solucin salina fisiolgica.

4) Transportar una parte de la muestra (0,5ml) de la dilusin del frasco de

(

102 ) realizando ste mismo proceso para el frasco de

5) Del frasco de

101

101

a otro frasco

103 .

extraer 0.1ml y colocar en la parte central del agar MacK Conkey

6) Esterilizar el asa triangular, pasar por la superficie de la placa Petri para su enfriamiento
7) Esparcir la gota de la dilusin por todo el cultivo
8) Esterilizar el asa triangular
2
9) Se realiz en mismo procedimiento con el frasco de 10
10)Para finalizar se cubrieron las placas.

RESULTADOS

FIGURA 04: MATERIALES UTILIZADOS PARA EL

CULTIVO DE AGAR MAC CONKEY

Placas Petri con el cultivo de

enterobacterias por medio de Agar Mac
Conkey las cuales se dejaron incubar para
la formacin de colonias.

FIGURA 05: MUESTRAS DEL CULTIVO DE AGAR

MAC CONKEY

PRACTICA 3
PRCTICA DE
OBSERVACIN DE
BACTERIAS EN MEDIOS
DE CULTIVOS

OBSERVACIN DE CULTIVOS

DESCRIPCION DE BACTERIAS
BACTERIA

MORFOLOGIA
COLOR

TAMAO

BORDE

ASPECTO

ELEVACIN

BACILLUS SP

crema

grande

ondulado

cremoso

plano

ESCHERICHA
COLI

mostaza

mediano

ondulado

cremoso

convexo

VIDRIO
PARAEMOLITUCUS

Verde
oscuro

pequeo

ondulado

terroso

plano

BACILLUS SP

mostaza

mediano

cremoso

cncavo

ondulado

RESULTADOS

Se observa la reproduccin de la bacteria la

cual se llev a cabo por el medio de cultivo
TBCS

FIGURA 06: CULTIVO DE LA BACTERIA VIDRIO

PARAEMOLITUCUS

En la placa Petri se muestra las diversas

colonias de la bacteria a travs de su
reproduccin por el medio de cultivo MAC
CONKEY

FIGURA 07: CULTIVO DE LA BACTERIA

ESCHERICHA COLI

Se observa las diversas colonias formadas por la reproduccin de esta bacteria la cual se realiz por
el medio de cultivo AGAR ALMIDN

FIGURA 08: CULTIVO DE LA BACTERIA

BACILLUS SP

PRACTICA 4

EFECTO DE LOS
DESINFECTANTES Y
ANTIMICROBIANOS
SOBRE EL CRECIMIENTO
BACTERIANO
EFECTO DE LOS DESINFECTANTES Y
ANTIMICROBIANOS SOBRE EL CRECIMIENTO
BACTERIANO

OBJETIVO

Determinar los antibiticos y antispticos para la eliminacin de bacterias.

Determinar los halos de las bacterias.

BACTERIAS

INIBICION POR DESINFECTANTES

RESISTENTES

BACILUS SP
ECHARICHIA COLI
VIDRIO
PARAEMOLITUCOS

RESULTADOS

INTERMEDIOS

SENSIBLE
X

FIGURA 09: BACTERIA ECHERICHIA

COLI CON DISCOS QUE
CONTIENEN DESINFECTANTES
(TIENE UN HALO APORXIMADO DE
3.45 CM).

FIGURA 10: BACTERIA BACILLUS SP

CON DISCOS QUE CONTIENEN
DESINFECTANTES.

PRACTICA 5
METABOLISMO
BACTERIANO

METABOLISMO BACTERIANO

OBJETIVOS

Entender los procesos metablicos

que tienen lugar en la clula
bacteriana y su aplicacin en el
aislamiento e identificacin de
bacterias.
Estudiar el metabolismo de las
bacterias siendo ests la E. coli y

Bacillus sp.
RESULTADOS
Se observan dos partes una de color negro mientras la parte central est en blanco, esto debido a que la
bacteria bacillus sp ha degradado aquella parte por presencia de almidn mientras que en la parte oscura no
hay presencia de almidn por lo cual la bacteria no ha podido degragarlo por ausencia de almidn.
Esta muestra se ha dejado incubar por 24horas a una temperatura de 37c.

FIGURA 11: MUESTRA DEL

METABOLISMO DE LA BACTERIA
BACILLUS SP CON RESPESTO AL
ALMIDN

Cultivo de Agar Dexosicolato el cual se agrag el indicador para

saber que tipo de bacteria se encuentra en este cultivo

FIGURA 12: MUESTRA DEL

METABOLISMO DE LA BACTERIA
E.COLI

Cultivo de Agar Dexosicolato el cual de determino que haba

presencia de la bacteria E. Coli ya que el color inicial fue verde y al
agregar el indicador tom un color amarillento demostrando as que
hay presencia de esta bacteria.

FIGURA 13: MUESTRA DEL

METABOLISMO DE LA BACTERIA
E.COLI

AGAR TSI (tres azcares ms hierro)

OBJETIVOS
Determinar el tipo de bacteria adecuada para cada tipo de cultivo.
Conocer el metabolismo de las diferentes bacterias con respecto a cada medio de
cultivo.
Tener conocimiento sobre la reaccin de los azucares frente al crecimiento
microbiano.

 RESULTADOS

En este tipo de cultivo siendo de tres azcares la bacteria

salmonella no puede metabolizar los tres azcares siendo
estos la glucosa, sacarosa, lactosa ya que el cultivo se
muestra de color rojo despus de haber sido incubado por
24horas a 37C, indicando tambin que el ph de esta
muestra es de 7,2

FIGURA 14: MUESTRA DEL

METABOLISMO DE LA SALMONELLA
EN SIEMBRA DE PUNTURA EN
PROFUNDIDAD

En este cultivo se puede observar la presencia de E. Coli ya

que el color hallado despus de haber sido incubado por
24horas a 37C es de color amarillo, esto quiere decir que la
bacteria es capaz de metabolizar a los azcares bajando as
su ph a 6,5.

FIGURA 15: MUESTRA DEL

METABOLISMO DE E. COLI EN
SIEMBRA DE PUNTURA EN
PROFUNDIDAD

CALDO DE GLUCOSA
OBJETIVOS

Conocer el metabolismo de las diferentes bacterias con respecto a cada medio de

cultivo.
Conocer la reaccin de microorganismos con respecto a la presencia de CO2.

RESULTADOS

Se puede observar que en el tubo de ensayo que contiene un

color turbio hay presencia o crecimiento microbiano ya que los
azcares has sido degradados por las bacterias que se
encuentran en este cultivo formando asi el cido pirvico, el
cambio de color es debido a que el ph baja formando as gas
(CO2)

FIGURA 16: MUESTRA DE LA

DIFERENCIA ENTRE LOS CULTIVOS
PARA CONOCER LA PRESENCIA DE
BACTERIAS Y FORMACION DE CO2

CALDO PECTONADO

OBJETIVOS

Conocer el metabolismo de las diferentes bacterias con respecto a cada medio de

cultivo.
Determinar la reaccin de los diversos metabolismos o reacciones que suceden
en el cultivo en contacto con las bacterias.

RESULTADOS

Se observa que un tubo de ensayo que el papel filtro el

cual ha sido inhibido con acetato de plomo esta de
color oscuro esto debido a que hay crecimiento
microbiano, ya que el microbio presente en este medio
de cultivo degrada protenas dando como resultado el
sulfuro de hidrogeno el cual se encuentra al momento
de la hidrolizacin y se muestra como un color oscuro.

FIGURA 17: MUESTRA DE LA

DIFERENCIA ENTRE LOS CULTIVOS
PARA CONOCER LA PRESENCIA DE
MIICROORGANISMOS