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INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD

AREA ACADEMICA DE MEDICINA

Laborat
de
Patolog
a
Nombre: Cruz Jurez
Abraham
Tercer Semestre
Pachuca Hidalgo, 2015
Dr. DE LA ROSA BAYON JAVIER
F.

Tcnica Histolgica
La tcnica histolgica es una serie secuencial de pasos a travs de los cuales una
muestra de tejido llega a transformarse en delgados cortes coloreados capaces de ser
observados al microscopio.
Pasos de la tcnica histolgica

OBTENCIN

Consiste en la provisin del material que se desea estudiar por medio del microscopio.
El mtodo seleccionado debe ser el adecuado para cada tipo de material. En todos los
casos el instrumental con el cual se seccionan los tejidos debe estar muy afilado para
evitar aplastar sus elementos, as como se debe evitar cualquier otro tipo de maltrato
en su manipulacin. Los principales mtodos empleados son: la biopsia, la reseccin
quirrgica y la autopsia.

Biopsia: Consiste en tomar un trozo de tejido de un ser vivo.


Este procedimiento de uso frecuente en medicina requiere el mismo
cuidado de asepsia, antisepsia, etc., que se utiliza en todo acto quirrgico
menor o mayor.
o Biopsia incisional: se realiza seccionando con instrumentos cortantes
como el bistur.
o Biopsia por punch: el punch es un instrumento filoso con forma de
sacabocados que se utiliza para tomar biopsias de piel.
o Biopsia por puncin: se realiza con agujas de biopsia y recientemente
tambin con agujas del tipo intramuscular (microbiopsia).
o Biopsia endoscpica: se hace a travs de endoscopios, que son
instrumentos flexibles que permiten la observacin de algunas cavidades
internas del organismo.

Necropsia: Es el procedimiento en el cual se extrae material de


un cadver
Autopsia: Consiste en el estudio analtico y sistemtico completo
macroscpico y microscpico de los rganos, aparatos y sistemas de un
cadver. Se realiza para establecer causas de muerte.

FIJACIN

Una

vez

obtenido el material que se desea estudiar por cualquiera de los


procedimientos descriptos se procede a su fijacin con lo que se evita la
destruccin o lisis celular. Es un proceso fsico-qumico complejo por el cual se
mantiene a las estructuras orgnicas en el estado ms parecido al que posean
en vida. La fijacin debe realizarse inmediatamente de extraer las clulas del
organismo, para evitar las lesiones agnicas ocasionadas por la anoxia, que
inicialmente producen cambios osmticos y luego alteraciones estructurales y
bioqumicas ms profundas, fenmenos conocidos en conjunto como autolisis. Por el
mismo motivo los fijadores deben actuar sobre fragmentos relativamente pequeos de
tejidos (como regla general menos de 1 cm cbico), para que la difusin del fijador
desde las superficies hasta la parte central del bloque tisular se haga en un tiempo
reducido
Los objetos de la fijacin son:
o Mantener las estructuras en el estado ms parecido al que posean in vivo.
o Evitar la lisis celular y la proliferacin bacteriana
o Dar cierta solidez o dureza al tejido o material. La fijacin detiene los
procesos vitales pero en ciertas condiciones mantiene las actividades de
algunos componentes moleculares, por ejemplo la actividad de algunas
enzimas
CLASIFICACIN GENERAL DE LOS FIJADORES

- Fsicos
- Qumicos
simples

Calor
Desecacin
Microondas
Alcoholes

- Aldehdos
- Acidos
- Sales

Metanol
Etanol
Formaldehdo
Glutaraldehdo
Actico
Pcrico
Osmico
Bicromato de potasio

- Mezclas de
qumicos

- Carnoy
- Bouin
- Zenker

- FaGlu

- Bicloruro de mercurio
- Alcohol etlico +
Acido actico
- Acido pcrico +
Formol +
Acido actico
- Bicromato de potasio
+
Bicloruro de mercurio +
Acido actico
- Formaldehdo +
Glutaraldehdo

Tiempos de fijacin: Depende del tejido, su volumen y el fijador usado


Cuando se usa el formol las piezas pequeas requieren algunas horas y ya a las 24 hor
as se fijan bien. La fijacin se puede controlar a simple vista por el cambio de color
del tejido y su consistencia (se endurece) pero una buena fijacin solo se
aprecia en el corte ya preparado observando al microscopio ptico.

DESHIDRATACIN

ACLARACIN.

Se coloca la muestra en alcoholes de concentracin creciente para eliminar el agua


que contenga ya que la parafina no es miscible con agua. Se utiliza etanol al 70%,
80%, 96% y 100%.
Son solventes que producen transparencia en los tejidos, adems de solubilizar la
parafina. Entre ellos se encuentran: xilol, toluol, acetona, benceno. El ms usado es el
Xilol.

INCLUSIN EN PARAFINA

CORTE

COLOCACIN SOBRE PORTA OBJETO

La parafina es una mezcla de hidrocarburos saturados que tienen diferentes puntos de


fusin. Parafina blanda funde a 44-48C y la parafina dura a 56-58C.
La parafina se pone en estufa de cultivo a unos grados por encima de su punto de fusi
n.
Se sumerge la muestra, se lleva a estufa unos minutos para que la parafina penetre
en los tejidos. Luego se enfra bruscamente colocando el recipiente en hielo.
Se Realiza mediante el uso del micrtomo. El micrtomo de congelacin permite cortar
el tejido despus de fijarlo por frio, congela con dixido de carbono y lo endurece para
que luego pueda ser cortado. Es un mtodo rpido y por eso se usa para el diagnostico
de biopsias obtenidas en el acto quirrgico para que el cirujano proceda segn este
informe. Se lo usa tambin para visualizacin de lpidos y es muy til en el estudio de
tejido nervioso. Los cortes en el micrtomo pueden tener un espesor de 4 a 1000mm o
ms, segn los tejidos que se estudian.
Efectuados los cortes se colocan en agua tibia para que
se extiendan
y luego se
recogen con un pincel y se los extienden en el portaobjetos y se dejan secar para su
posterior coloracin.

DESPARAFINIZACIN

HIDRATACIN

Se debe extraer todo la parafina del tejido y aclararlo nuevamente. Se utiliza Xilol.

Se debe hidratar el tejido ya que la mayora de los colorantes son de base acuosa. Para
ello se coloca el portaobjeto en soluciones de etanol de concentraciones decrecientes.
Etanol 100%, 96%, 80%, 70% y Agua destilada

COLORACIN

Es un completo complejo fsicoqumico que le confiere color a los tejidos durante tiemp
os prolongados. Las molculas de colorantes tienen un grupo que es el que le confiere
el
color: cromforo y otro que lo fija auxocromo. Los colorantes son sales pero se los clasi
fica en:
o
o
o

Bsicos: en donde la molcula de sal que colorea es la base como por ejemplo e
l azul de toluidina, azul de metileno, hematoxilina.
cidos:
Donde la molcula de sal que colorea es el cido como por ejemplo la
eosina.
Neutros: Donde las dos partes de la solucin salina proporcionan color, un
ejemplo de esta es el eosinato de azul de metileno.

COLOCACIN DE CUBREOBJETO

Se cubre el corte con un delgado vidrio (el cubreobjeto) que se adhiere con resina
(blsamo de Canad) y permite su uso prolongado.
ARTIFICIOS DE TCNICAS
Son todas las alteraciones que se producen en los preparados histolgicos por
defectos o fallas en una o ms de las etapas de la tcnica.
o Defectos de fijacin, deshidratacin, inclusin, pueden causar desgarros
y retracciones.
o Si la acidez del formol no fue neutralizada, pueden aparecer grnulos
coloreados por interaccin del acido frmico con la hemoglobina.
o Durante el corte pueden aparecer desgarros por melladuras en la cuchilla.
o Si el corte no es cuidadosamente extendido pueden aparecer pliegues
o arrugas.
o Defectos en la coloracin son inherentes a la calidad y preparacin de
los colorantes as como insuficiente coloracin.

RESUMEN DEL PROCESO HISTOLOGICO:

BIBLIOGRAFA

http://histologiaunam.mx/descargas/ensenanza/portal_recursos_linea/apuntes/3
_tecnica_histologica.pdf

LeBlonde, Brown y DeGowin y DeGowin. Examen diagnstico. 9 ed. Mxico:


Editorial Mc Graw-Hill; 2009.

Wallach J. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8 ed. Mxico: Editorial


Wolters Kluwer/Lippincott Williams & Wilkins; 2007.

Miomas Uterinos
Tumores benignos del msculo liso del tero, ocasionalmente malignizan (1%). Su
tamao es variable, van desde milmetros hasta grandes tumores que ocupan toda la
cavidad abdominal. Estn asociados a perodos menstruales abundantes, sntomas de
compresin y ocasionalmente dolor. Son dependientes de estrgenos y progesterona,
generalmente tienen regresin en la menopausia.

La miomatosis uterina es la causa ms comn de


tumores plvicos slidos en mujeres, y ocurre en
20 a 40% de mujeres en edad reproductiva. Se le
conoce tambin como leiomiomatosis uterina,
fibromiomas, leiofibromiomas y fibroleiomiomas.
Estn compuestos por grandes cantidades de
matriz extracelular (colgeno, fibronectina y
proteoglicanos). El colgeno tipo I y II estn
presentes en cantidades abundantes, pero las
fibras de colgeno se forman de manera
irregular y desordenada, parecido a la formacin
queloide.
ETIOLOGA
La etiologa de los miomas an se desconoce.
stos usualmente son de origen monoclonal y su
crecimiento est relacionado con expansin
clonal de una sola clula. Se sabe que
aproximadamente 60% de los miomas son
cromosmicamente normales, con cariotipo
46XX.
El
40%
restante
presentan
anomalas
cromosmicas; de estas alteraciones, las ms
comunes incluyen translocaciones entre los cromosomas 12 y 14, deleciones del
cromosoma 7q, 3q y 1q, as como rearreglos del cromosoma 6q, 10q y 13q.
Los miomas estn claramente asociados con la exposicin de estrgenos y
progesterona circulante. De hecho se observan raramente durante la pubertad, y son
ms prevalentes durante los aos reproductivos, con regresin despus de la
menopausia. Existe mayor concentracin de receptores estrognicos en los miomas
uterinos
que
en
el
miometrio
adyacente.
FACTORES DE RIESGO
o El rango de edad de aparicin de los miomas uterinos puede ir desde los 20 a
70 aos, con mayor incidencia entre los 35 a 45.
o La nuliparidad es un factor de riesgo para el desarrollo de miomatosis uterina
o La obesidad y sobrepeso incrementan el riesgo de desarrollar miomas por el
efecto estrognico sostenido.
o Las condiciones que aumentan la exposicin a estrgenos durante la edad
reproductiva son factores de riesgo para desarrollar miomatosis uterina; tales
como menarca temprana, menopausia tarda, tumores ovricos productores de
estrgenos, ingesta de altas dosis y por tiempo prolongados de hormonales
orales
DIAGNSTICO
o El 50% de las miomatosis uterinas son asintomticas
o La hemorraga uterina anormal se presenta en el 21.4% de las pacientes con
miomatosis uterina. Los sntomas de compresin dependen de su localizacin
anatmica y tamao. El 33% de las pacientes presentan dolor plvico.
o El tacto bimanual (recto-vaginal) tiene una alta sensibilidad cuando el mioma mide
ms de 5 cm.
o La exploracin ginecolgica armada coadyuva a llegar a un diagnstico diferencial.
EXMENES DE LABORATORIO

o
o
o
o
o

El ultrasonido abdominal o transvaginal tienen una sensibilidad hasta del 85% para
detectar miomas de 3 o ms centmetros
Dado que no existe ninguna evidencia que sustente el uso de la
histerosalpingografa para diagnstico de miomatosis uterina no se recomienda su
uso rutinario
Realizar histeroscopa si los estudios previos no son concluyentes para miomatosis
uterina y persiste la sintomatologa
Se recomienda usar la resonancia magntica, en casos justificados (casos con
dificultad diagnstica o de investigacin).
A toda paciente mayor de 35 aos se sugiere realizar biopsia endometrial para
descartar patologa maligna.

CARACTERSTICAS MACROSCOPICAS
Macroscpicamente son masas slidas bien delimitadas de color que vara desde
ligeramente ms plida que el miometrio circundante hasta blanco grisceo, que al
corte presenta un aspecto arremolinado, conformado por fibras de patrn en espiral y
son de consistencia de firme a ahulada. El aspecto macroscpico puede variar, si ste
presenta cambios degenerativos que son un fenmeno frecuente en los miomas,
especialmente entre mayor tamao tenga ste. El cambio degenerativo ms comn es
la degeneracin hialina que puede involucrar reas o la totalidad del tumor. En este
tipo de degeneracin el mioma asume un aspecto plido eosinof- lico homogneo, con
borramiento del patrn arremolinado en las reas de hialinizacin.
CARACTERSTICAS MICROSCOPICAS
Microscpicamente, los miomas se componen de fascculos entrelazados de clulas
musculares lisas. Las clulas musculares son alongadas, con citoplasma eosinfilo y
ncleos uniformes en forma de puro y las figuras mitticas son prcticamente
inexistentes. Las clulas se encuentran dispuestas de forma ms cercana entre s que
en el miometrio normal, dndole un aspecto hipercelular al tumor.
El trmino fibroide, aunque pueda resultar semnticamente poco cientfico, se usa de
forma universal y es entendido en todo lugar. Llama la atencin la demarcacin
acentuada que existe entre el mioma y el miometrio circundante, de la misma forma
que se observa microscpicamente.
CLASIFICACION ANATMICA DE LA MIOMATOSIS
CLASIFICACION
Submucoso
Intramurales
Subserosos
Otros:
Cervical
Cornual
Intraligamentosos corporal

LOCALIZACIN ANATOMICA
Por debajo de la capa mucosa
En el espesor de la capa muscular del
tero
Por debajo de la capa serosa

Inflamaci

La inflamacin es la respuesta del tejido vivo vascularizado a la lesin. Pueden


desencadenarla infecciones microbianas, elementos fsicos, sustancias qumicas, tejido
necrosado o reacciones inmunitarias. La inflamacin pretende contener y aislar la
lesin, destruir los microorganismos invasores e inactivar las toxinas y preparar al
tejido para la curacin y la reparacin
La inflamacin se caracteriza por:

1) Dos componentes principales: una respuesta de la pared vascular y una


respuesta celular inflamatoria
2) Efectos mediados por protenas plasmticas circulantes y factores producidos en
la zona por la pared vascular o las clulas inflamatorias
3) Terminacin cuando se elimina la causa y los mediadores secretados; tambin
participan mecanismos antiinflamatorios activos
4) Asociacin estrecha con la curacin; incluso cuando la inflamacin destruye,
diluye o contiene de alguna otra forma la lesin, pone en marcha
acontecimientos que al final reparan la lesin
5) Una respuesta fundamental protectora; sin embargo, la inflamacin puede ser
tambin perjudicial, por ejemplo al causar reacciones de hipersensibilidad
peligrosas para la vida o una lesin continua y progresiva del rgano por una
inflamacin crnica y la posterior fibrosis (p. ej., artritis reumatoide,
ateroesclerosis)
6) Patrones agudo y crnico:
o Inflamacin aguda: comienzo temprano (es decir, de segundos a
minutos),duracin corta (es decir, de minutos a das), con exudacin de
lquido (edema) y migracin de clulas polimorfonucleares (neutrfilos)
o Inflamacin crnica: comienzo tardo (es decir, das) y duracin mayor
(es decir, de semanas a aos), con linfocitos y macrfagos, proliferacin
de vasos sanguneos y fibrosis (cicatrizacin)
Hay cinco signos clsicos de la inflamacin (ms destacados en la inflamacin aguda):
Calor (latn: calor) debido a dilatacin vascular
Eritema (latn: rubor debido a dilatacin vascular y congestin
Edema (latn: tumor) debido a un aumento de la permeabilidad vascular
Dolor (latn: dolor) debido a liberacin de mediadores
Prdida de funcin (latn: functio laesa) debida a dolor, edema, lesin
tisular y/o cicatriz.
REGULADORES DEL PROCESO
1. Mediadores de la inflamacin: Histamina, serotonina, bradicinina, eicosanoides
(prostaglandinas, prostaciclinas, tromboxanos y leucotrienos), quimiocinas, enzimas
(triptasas y otras proteasas), factor activador de plaquetas, fibrina, C3a, C5a.
2. Citocinas. Tempranas o de alarma: IL-1, IL-6, TNF, son las conductoras del
proceso. Participan tambin citocinas quimioatractantes (IL-8); inductoras de la
respuesta linfoctica (IL-12, IL-18); generadoras de clulas en mdula sea (IL-3,
GMCSF); supresoras del proceso (IL-10, TGF).
ETAPAS
1. Quimiotaxis
Es el desplazamiento, que por atraccin, realiza una clula a lo largo de un gradiente
de concentracin de una molcula atrayente. A travs de este proceso llegan y se
acumulan clulas en el sitio daado. Por la accin de quimioatractantes como IL-8, C5a,
histamina, leucotrieno (LT) B4, lipopolisacridos, restos de fibrina o de colgena, las
reas lesionadas reclutan, adems de clulas de la circulacin, aquellas que se
encuentran en reposo adheridas a las paredes endoteliales. Inicialmente se captan
neutrfilos y posteriormente, en un lapso de 24 a 72 horas, participan monocitos,
fagocitos y linfocitos. Las clulas tisulares (cebadas, fibroblastos, queratinocitos,

etctera) adyacentes a la zona infectada o lesionada, son las primeras en llegar, en ser
activadas y en promover la inflamacin.
2. Aumento del dimetro vascular
Este cambio vascular, inducido principalmente por las sustancias inflamatorias:
histamina, bradicinina, eicosanoides, triptasas, que son secretadas desde los primeros
segundos por los mastocitos locales, los basfilos y las clulas endoteliales activadas,
aumentan el flujo de sangre hacia el rea inflamada, lo que genera elevacin de la
temperatura y enrojecimiento local (calor y rubor).
3. Aumento de la permeabilidad vascular
La dilatacin capilar permite el paso de lquido y protenas sanguneas (entre las que se
encuentran complemento e inmunoglobulinas), stos al acumularse producen edema
(tumor). La distensin de los tejidos, la accin de la bradicinina y el estmulo que todo
lo anterior ejerce sobre las terminaciones nerviosas, originan el dolor, ltima de las
cuatro manifestaciones clnicas cardinales de la inflamacin: calor, rubor, tumor y
dolor, descritas por Celsus.
4. Adherencia y rodamiento celular
Inicialmente los neutrfilos (posteriormente los monocitos) se unen a las clulas
endoteliales a travs de las molculas de adherencia de baja afinidad denominadas
selectinas. Los leucocitos se desplazan sobre las clulas endoteliales de las vnulas
postcapilares mediante un mecanismo denominado rodamiento; la velocidad de estas
clulas, que normalmente viajan a 4,000 m por segundo, se reduce a 40. Las
quimiocinas (IL-8) se adhieren a la superficie de los leucocitos en rodamiento e inducen
en ellos la expresin de otros grupos de molculas de adherencia de alta afinidad, las
integrinas; a su vez la IL-1 y el TNF actan sobre las clulas endoteliales para que
aumente la expresin de los ligandos (molculas unidoras) para las integrinas de los
leucocitos, con lo que se establece una unin firme entre ambas clulas.
5. Estimulacin de la va extrnseca de la coagulacin
En forma simultnea a los eventos sealados, se inicia esta va. El proceso culmina con
la formacin de fibrina y un estado procoagulante, lo que impide la diseminacin de
grmenes a travs de la circulacin sangunea.
6. Transmigracin o diapdesis celular
El rodamiento de leucocitos sobre las clulas endoteliales, culmina con el paso de los
leucocitos hacia el foco infeccioso o el tejido lesionado. Los leucocitos pueden pasar a
travs de las uniones intercelulares. La protena JAM, las ocludinas y la cadherina VE
mantienen las uniones laterales de las clulas endoteliales, al momento de la
transmigracin se ha observado una prdida focal de esta ltima molcula, lo que
favorece la apertura. Los leucocitos tambin pueden pasar de manera transcelular,
para lograrlo, los neutrfilos extienden pseudpodos al interior de la clula endotelial y
migran a travs de sus poros; esta va es guiada predominantemente por quimiocinas.
Una vez que los leucocitos han traspasado la barrera endotelial, pueden llegar al tejido
inflamado, guiados por las seales quimioatractantes que en l se generan. En el sitio
de la inflamacin, las clulas fagocticas endocitan al antgeno, lo procesan y lo
convierten en pequeos pptidos, los que unidos a molculas de MHC (complejo
principal de histocompatibilidad) pueden ser presentados a los linfocitos T. De esta
manera, se induce la participacin de la inmunidad especfica o facultativa, con lo que
se potencializa notablemente la repuesta inmune ante los agresores o causantes de la
inflamacin. Si la respuesta inflamatoria aguda local es exitosa: el agresor es
eliminado, el dao no se extiende, no hay manifestaciones sistmicas, la respuesta es
inhibida oportunamente, finaliza en poco tiempo y el tejido es reparado

satisfactoriamente. Si por el contrario, el proceso no limit el dao, la inflamacin


aguda inicialmente local, se transforma en un proceso sistmico o crnico.
BIBLIOGRAFA
o
o
o
o

Abbas AK, Lichtman AH, Pillai S. Cellular and molecular immunology.


Philadelphia Ed. Saunders Elsevier 6th edition. 2007.
Edward E. Wallach, MD, and Nikos F. Vlahos, MD. Uterine myomas: An overview
of development, clinical features, and management. Obstet Gynecol 2004; 104
(2): 393-404
http://www.ejournal.unam.mx/rfm/no51-5/RFM051000511.pdf
http://www.medigraphic.com/pdfs/abc/bc-2009/bc094h.pdf

Neoplasias
Los trminos neoplasia (literalmente crecimiento nuevo) y tumor se usan de
forma intercambiable; se refieren a masas anmalas de tejido cuyo crecimiento
es casi autnomo y excede el de los tejidos normales. De modo general, los
tumores se clasifican en funcin de sus comportamientos clnicos en:
Benignos: tienen u n comportamiento inocente caracterizado por una
lesin localizada, sin diseminacin a otros lugares, y susceptible de reseccin
quirrgica; el paciente suele sobrevivir, aunque hay excepciones

Malignos: se denominan cnceres, con comportamiento agresivo que


incluye la invasin y destruccin de los tejidos adyacentes y la capacidad de
diseminacin a otros lugares (metstasis).

Todos los tumores tienen dos componentes bsicos:


Las expansiones clnales de clulas neoplsicas constituyen el parnquima
del tumor
El estroma de soporte compuesto de tejido conjuntivo no neoplsico y vasos
sanguneos; el estroma colgeno abundante se llama desmoplasia y tales
tumores son duros o escirros.
Tumores benignos
Los lipomas, fibromas, angiomas, osteomas y leiomio mas son tumores
mesenquimatosos benignos. La nomenclatura de los tumores epiteliales
benignos es menos sencilla e incorpora elementos de la histogenia, aspecto
macroscpico y arquitectura microscpica:
Adenomas: tumores epiteliales que surgen de glndulas o forman patrones
glandulares
Cistoadenomas: adenomas que producen masas qusticas grandes,
frecuentes en el ovario
Papilomas: tumores epiteliales que forman proyecciones digitales
macroscpicas o microscpicas

Plipo: tumor que se proyecta macroscpicamente sobre la mucosa.


Tumores malignos
Los tumores malignos se dividen en dos categoras generales:
Carcinomas derivados de clulas epiteliales
Sarcomas originados en clulas mesenquimatosas
La nomenclatura de los tumores malignos especficos se basa en su aspecto o
clula de origen. Los tumores epiteliales malignos que se parecen al epitelio
escamoso estratificado se denominan carcinomas epidermoides, mientras que
los que tienen patrones de crecimiento glandulares se llaman
adenocarcinomas. Los sarcomas se designan mediante el prefijo de la clula
adecuada (p. ej., las neoplasias malignas del msculo liso son los
leiomiosarcomas). No es infrecuente que neoplasias compuestas de clulas
poco diferenciadas e irreconocibles solo puedan designarse como tumores
malignos indiferenciados.

Bibliografa

KUMAR, V., A. K. ABBAS, N. FAUSTO y J. C. ASTER Robbins y Cotran


- Patologa estructural y funcional Ed. Elsevier, 8 ed., 2010