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En esta prctica se utilizara un mtodo de separacin y purificacin diferente

que es la cromatografa en capa fina, se conocern sus caractersticas utilizando


el criterio de polaridad para elegir eluyentes y tambin se identificarn algunas
sustancias de acuerdo a lo que se est estudiando.

La cromatografa en capa fina es una tcnica analtica rpida y sencilla, muy


utilizada en un laboratorio. Entre otras cosas permite:
Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por
ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacin.
Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas.
Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la mis ma sustancia.
Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen los
reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cundo la reaccin ha acabado.
La muestra a analizar se deposita cerca de un ex tremo de una lmina de plstico
o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente
(fase estacionaria). Entonces, la lmina se coloca en una cubeta cerrada que
contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase mvil). A medida
que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a travs del adsorbente, se
produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el
disolvente y el adsorbente.
Los dos adsorbentes (fase estacionaria) ms ampliamente utilizados son la gel de
slice (SiO2 ) y la almina (Al2 O3 ), ambas de carcter polar. El proceso de adsorcin
se debe a interacciones intermoleculares de tipo dipolodipolo o enlaces de
hidrgeno entre el soluto y el adsorbente. El adsorbente debe ser inerte con las
sustancias a analizar y no actuar como catalizador en reacciones de descomposicin.
El adsorbente interacciona con las sustancias mediante interaccin dipolodipolo o
mediante enlace de hidrgeno si lo presentan.
El orden de elucin de un compuesto se incrementa al aumentar la polaridad de la
fase mvil o eluyente. Este puede ser un disolvente nico o dos miscibles de distinta
polaridad. En el siguiente recuadro se recoge por orden creciente de fuerza eluyente
los disolventes ms comnmente empleados.
Hexano < tetraclorometano < cloroformo < diclorometano < acetato de etilo <
acetona < 2propanol < metanol < agua
En general, estos disolventes se caracterizan por tener bajos puntos de ebullicin y
viscosidad, lo que les permite moverse con rapidez. Raramente se emplea un
disolvente ms polar que el metanol.
La relacin entre las distancias recorridas por el soluto y por el eluyente desde el
origen de la placa se conoce como Rf, y tiene un valor constante para cada
compuesto en unas condiciones cromatografas determinadas (adsorbente,
disolvente, tamao de la cubeta, temperatura, etc.). Debido a que es prcticamente
imposible reproducir exactamente las condiciones experimentales, la comparacin
de una muestra con otra debe realizarse eluyendo ambas en la misma placa.
Para calcular el Rf se aplica la siguiente expresin:
Rf = distancia recorrida por el compuesto (X) / distancia recorrida por el eluyente
(Y)
La distancia recorrida por el compuesto se mide desde el centro de la mancha. Si

sta es excesivamente grande se obtendr un valor errneo del Rf.


Se recomienda elegir un eluyente en el que los componentes de la mezcla presenten
un Rf medio en torno a 0.30.5. Para compuestos poco polares, se debe utilizar un
disolvente apolar como el hexano. En el caso de compuestos con polaridad media,
se aconseja utilizar mezclas hexano/acetato de etilo en distintas proporciones.
La mayor parte de las placas de cromatografa llevan un indicador fluorescente que
permite la visualizacin de los compuestos activos a la luz ultravioleta (254 nm). En
el caso de compuestos que no absorben luz UV, la visualizacin (o revelado) del
cromatograma requiere utilizar un agente revelador. Este tiene que reaccionar con
los productos adsorbidos proporcionando compuestos coloreados.

1.
APLICACIN DE LA MUESTRA Y EFECTO DE LA
CONCENTRACIN.
Utilizando como eluyente 4mL de acetato de etilo se
marcaron 3 puntos de aplicacin en el primero de izquierda
a derecha fue de una aplicacin, el segundo de 3 aplicaciones
y el tercero de 9 aplicaciones con la sustancia 1, al revelar
la cromatoplaca en la cmara de rayos UV se apreciaron
algunas manchas oscuras que nos indicaban que tan
concentrada estaba nuestra aplicacin, las manchas eran
ms grandes de acuerdo al nmero de aplicaciones que se
hicieron, el eluyente recorrio 4.8 cm desde el punto de
aplicacin y las muestras puesto que era la misma sustancia
solo 4cm.
RF

4
4.8

= 0.83

2. POLARIDAD DE LAS SUSTANCIAS Y POLARIDAD DE LOS ELUYENTES.


Para comprobar la polaridad de las
sustancias se utilizaron las disoluciones 2 y
3 en 3 cromatoplacas diferentes, utilizando
como eluyentes Hexano, Acetato de etilo y
Metanol, de acuerdo a los resultados
despus de revelar con la cmara UV.
Hexano: las disoluciones eran polares
pues el hexano es una sustancia no polar
y no logro arrastrarlas por la fase
estacionaria. El RF es cero pues como no
se movieron el numerador es 0 y no se
puede dividir.
Acetato de Etilo: las disoluciones se
desplazaron esta vez, lo cual nos quiere
decir que el acetato es mas polar que el
hexano. Tambin nos damos cuenta de
que la sustancia 2 es ms polar que la sustancia 3 pues recorri menos, esto
quiere decir que si el acetato desplazo con ms facilidad a la 3 entonces esta

es menos polar que la 2 pues el acetato no es tan polar como el metanol que
se ver a continuacin.
RF Sustancia 2 =

0.8
4.7

= 0.17

RF Sustancia 3 =

3.9
4.7

= 0.82

Metanol: este eluyente de acuerdo con la literatura es el eluyente mas polar


de los 3 que se utilizaron y nos damos cuenta de eso porque las sustancias 2
y 3 subieron mas que en el acetato lo cual quiere decir que son polares pero
la sustancia 3 sigue siendo menos polar que la 2, hay que recordar que la silica
gel es una sal metalica polar y por lo tanto los componentes mas polares de la
sustancia 2 se adhieren con mas fuerza a la silica y eluye con mayor lentitud.
RF Sustancia 2 =

3.2
5.9

= 0.54

RF Sustancia 3 =

4.2
5.9

= 0.71

3. PUREZA DE LAS SUSTANCIAS


Para determinar la pureza de las sustancias ahora se
utilizaron as sustancias 4 y 5, utilizando como eluyente
acetato de etilo, al revelarlo despus con la cmara de rayos
UV nos damos cuenta de que la sustancia 5 esta impura pues
hay dos manchas en sta mientras que en la sustancia 4 solo
hay una y no hubo separacin de componentes, en la
sustancia 5 la impureza recorri cerca de un centmetro.
RF Sustancia 4 =

4.3
5.7

= 0.75

RF Sustancia 5 (sustancia principal) =


RF Sustancia 5 (impureza) =

0.9
5.7

4.3
5.7

= 0.75

= 0.15

4. IDENTIFICACIN
En esta ltima parte tuvimos que identificar los
componentes de 2 medicamentos, se utiliz una
aspirina normal y una cafiaspirina para ver la
cafena en ella y usando como patrn la aspirina.
Se molieron las tabletas y las pusimos en un vidrio
de reloj con 3 mL de acetato de etilo. Utilizando
dos cromatoplacas y como eluyentes una vez mas
acetato de etilo y metanol, ya sabamos de acuerdo
al experimento 2 que el mas polar es metanol, esta
vez solo quisimos ver si la cafena o el cido acetil
saliclico eran mas polares y si se separaban estos
de la cafiaspirina. Al revelar con la cmara de rayos
UV observamos que la cafena es ms polar pues
en las dos cromatoplacas recorri menos que la
aspirina sola en metanol casi llegaron a ser iguales.
RF Cafeina en Acetato =

0.7

RF Cafeina en Metanol =

3.2

5.1
5.3

= 0.13

RF Aspirina en Acetato =

= 0.60

RF Cafeina en Metanol =

4.7
5.1

4.2
5.3

= 0.92

= 0.79

Al realizar todos los experimentos nos damos cuenta de que la cromatografa en


capa fina es un mtodo de purificacin y separacin mas til , fcil y rpido,
adems de que podra resultar barato pues no se necesita en este caso mucha
cantidad de disolucin, tambin siempre y cuando se escoja el eluyente
adecuado y a partir del dato de retencin sabremos si es pura o no con ayuda
del RF ya que si este es muy pequeo entonces es mas polar, aparte de separar
las disoluciones nos ayuda para detectar algunas sustancias.

En esta prctica se logr bien usar la tcnica de cromatografa en capa fina y


pudimos observar sus caractersticas, tambin logramos ver la relacin que
existe entre la polaridad de las sustancias qu analizamos y la de los eluyentes
pues observamos cuales sirven de acuerdo a la sustancia que se analiza. Se
logr usar la cromatografa como criterio de pureza al ver los componentes del
medicamento.

https://www.uam.es/docencia/jppid/documentos/practicas/actuales/gui
on-p6.pdf
quimica.laguia2000.com/general/cromatografa-en-capa-fina
www.uprm.edu/biology/profs/velez/fina.htm

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