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Tesis
Que como parte de los requisitos para obtener el grado de
Especialidad en Ingeniera de Invernaderos
Presenta:
Jos Gaspar Ku Ucan
RESUMEN
Palabra clave: Lippia graveolens, extractos totales, aguas madre y aceite esencial de
oregano.
ix
ABSTRACT
Plants produce compounds with antimicrobial properties that can be used in the
control of diseases in horticultural crops. One of these plants is oregano (Lippia
graveolens), which grows wild in most of the Mexican Republic. The oregano is
harvested for sale during August and September, meaning an important money entry for
local people during that period of the year. In this work, different extracts of oregano
were evaluated in vitro on the growth, sporulation, and germination of Xanthomonas,
Cladosporium and Aspergilium, fungus species that attack different horticultural crops,
including tomato. Dry leaves of Lippia graveolens (oregano) from plant populations in
the municipality of Peamiller, Queretaro, were used. Total extract was obtained using
the pressurized method, while the essential oil and stock water solution was obtained by
hydro-distillation. This research consisted of two phases. In the first one, all the extracts
of oregano were evaluated at a 50% concentration, and during the second one the
minimum inhibiting concentration of the most effective extracts from phase one was
determined.
Dedicatorias
A mis amigos quienes siempre estuvieron a mi lado para compartir mis sueos y
hacerlos realidad.
AGRADECIMIENTOS
A la Dra. Rosala Virginia Ocampo Velzquez. por su sincera confianza, dedicacin y
gua permanente en el desarrollo de la presente investigacin.
A los doctores Dr. Ramn Gerardo Guevara Gonzlez. Dr. Irineo Torres Pacheco, por
su apoyo, sus valiosos conocimientos, enseanzas y sugerencias como jurados.
A la Dra. Sandra Olimpia Mendoza Daz, quien me apoyo para llevar acabo las
extracciones del aceite y las aguas madre en el laboratorio de la Facultad de Qumica y a
sus alumnas de Maestra, Fanny Yaquelin, Alma y Mariela, por su colaboraron durante
todo el proceso de este trabajo.
Al M. en C. Fidel Landeros Jaime y Kruskaia Kaltzonsin de la Facultad de Ciencias
Naturales (UAQ), por su apoyo en proporcionarnos las cepas de hongos y bacterias
fitopgenas y durante el proceso de la Investigacin.
A los miembros de Semidesierto de Peamiller, ARIC por proporcionarnos la hoja de
organo, materia prima para esta investigacin.
Al Consejo de Ciencia y Tecnologa del Estado de Quintana Roo (COQCYT) y a la
Universidad Autnoma de Quertaro (UAQ) por el apoyo econmico para mi estancia
durante la Especialidad y para el desarrollo de sta investigacin. A todos los maestros
y doctores que me dieron clases y agradecerles por sus enseanzas y el gran impulso
que me brindaron incondicionalmente para llevar a cabo mis objetivos personales y
acadmicos.
Al Dr. Enrique Rico Garca y Ing. Adn Mercado Luna de la Especialidad de Ingeniera
de Invernaderos, debo agradecerles por su gran amistad, los muchos momentos
compartidos y el apoyo en la parte acadmica..
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INDICE
DEDICATORIA.
AGRADECIMIENTOS..
INDICE
INDICE DE FIGURAS...
INDICE DE CUADROS.
RESUMEN..
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I. INTRODUCCION
II. OBJETIVOS E HIPOTESIS...
2.1 Objetivo general.
2.2 Objetivo Especifico
2.3 Hiptesis.
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3
3
III. ANTECEDENTES..
3.1 Produccin Internacional y nacional del organo..
3.1.1 Produccin nacional..
3.2 Uso de organo..
3.2.1 Industria alimenticia
3.2.2 Farmacutico
3.2.3 Potencial Antimicrobiano
3.3 Caractersticas generales del organo (Lippia graveolens).
3.3.1 Taxonomia..
3.3.2 Distribucin del organo.
3.3.3 Cultivo
3.4 Agricultura Orgnica y el control de plagas y enfermedades.
3.4.1 Agricultura Orgnica.
3.4.2 Mtodos de control orgnico de plagas y enfermedades.
3.5 Produccin Internacional de Jitomate.
3.5.1 Produccin Nacional de Jitomate...
3.5.2 Produccin en el Estado de Queretaro de Jitomate
3.6 Caractersticas generales del Jitomate.
3.6.1 Origen.
3.6.2 Taxonomia..
3.6.3 Morfologa..
3.7 Plagas y Enfermedades del Jitomate..
3.7.1 Plagas..
3.7.2 Enfermedades.
IV. MATERIALES Y MTODOS
4.1 Ubicacin del Estudio.
4.2 Material biolgico
4.2.1 Vegetal
4.2.2 Patgeno.
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V. RESULTADOS Y DISCUSIN
5.1 Extractos vegetales...
5.1.1 Extracto total
5.1.2 Aceite esencial.
5.1.3 Aguas Madre...
5.2 Pruebas de inhibicin
5.3 Fenoles y Flavonoides..
5.4 Resultados de la Evaluacin del crecimiento del hongo fitopatogeno
Aspergillus niger en diferentes extractos..
48
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VI. CONCLUSIONES..
66
LITERATURA CITADA
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ANEXOS....
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INDICE DE FIGURAS
Figura 3.1 Produccin agrcola en el Estado de Quertaro (SEDEA,
2007).
Figura 3.2 Superficie cultivada de hortalizas en Quertaro en el
2006..
Figura 3.3 Planta de jitomate de la variedad (Cimabue), indeterminada
cultivada en el invernadero del Campus Amazcala de la Facultad de
Ingeniera.........................
Figura 3.4 Araa roja (Tetranychus unticae) en fase adulta, sobre una
Paginas
hoja de jitomate..
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Figura 3.10 En los tallos se aprecia el dao en los nudos, en las heridas
de poda,.
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Figura 3.11 dao causado por Podredumbre de races del tomate. Foto:
Infojardin, 2001
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Foto:..
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Figura 4.7 la solucin del extracto se virtio en todas las cajas petri
donde se har la siembra
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hidrodestilacion..
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INDICE DE CUADROS
Cuadro 3.1 Principales pases productores de jitomate en el ao
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extractos de organo...
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I. INTRODUCCIN
La importancia de los invernaderos En Mxico, el invernadero es siempre una
inversin rentable, tiene como desventaja su alto costo inicial pero se controlan ms las
plagas, ahorran agua y cuesta menos producir, se calcula que en 6 o 7 aos se recupera
el costo inicial y las ganancias son altas, adems de que el monto de la inversin se
amortiza. Los invernaderos se pueden clasificar de distintas formas, segn determinadas
caractersticas de sus elementos constructivos (por su perfil externo, segn su fijacin o
movilidad, por el material de cubierta, segn el material de la estructura, etctera) pero
en realidad todos cumplen con la misma funcin. El uso de invernaderos en Mxico est
muy extendido. Dependiendo del mercado y del tipo de fruto o flor, los principales
estados y regiones que lo utilizan son: Sinaloa, Baja California, el Bajo, centro y sur
del pas, aunque en lugares calientes requiere de otro tipo de estructura llamado cubierto
malla sombra. Los invernaderos pueden establecerse prcticamente donde sea, puesto
que se han diseado hasta enriquecimientos de suelo.
Los productos que ms se producen bajo condiciones del invernadero en Mxico
son el jitomate cereza, el tomate, el pepino europeo, el pimiento dulce y las berenjenas.
El costo aproximado de un invernadero en Mxico va de los 160 a los 240 pesos el
metro cuadrado y hay algunos planes de empresas que venden el material y asesoran la
autoconstruccin hecha por los agricultores.
La produccin bajo invernadero se basa principalmente en el uso de
agroqumicos siendo los pesticidas un insumo importante. Los plaguicidas han
adquirido un papel preponderante en la proteccin de cultivos contra plagas y
enfermedades debidos en gran parte al fuerte apoyo que recibi la investigacin y
desarrollo de la industria agroqumica, con un gran auge a partir de los sesentas con la
mal llamada Revolucin Verde. Sin embargo, el empleo intensivo (y a veces
desmedido) de productos qumicos ha tenido efectos negativos sobre el ambiente y la
calidad de vida de las poblaciones humanas. Su eficacia puede ser de corta duracin, ya
que pueden provocar resistencia de algunas poblaciones de plagas y patgenos.
Asimismo, estos productos se pueden acumular en los alimentos, suelos y aguas si no se
respetan las dosis, intervalos de seguridad y los productos aprobados para un cultivo, lo
1
cual ocurre con gran frecuencia y estos residuos terminan en los alimentos que
adquiere el consumidor provocando problemas de salud, como cncer, enfermedades
cardiacas, dolores gastrointestinales, etc. (Carren et al., 2007).
Ante esta problemtica se han buscado opciones de produccin de alimentos
que garanticen la obtencin de productos inocuos, siendo la agricultura orgnica una de
ellas. Este sistema de produccin no utiliza productos de sntesis qumica, se basa en
lograr un cierto nivel de equilibrio entre todos los organismos del sistema: plantas,
animales y mltiples microorganismos. En el manejo de plagas y enfermedades, la
produccin orgnica busca favorecer los mecanismos de defensa que los organismos
vivos poseen de manera natural, siendo la diversidad un pilar fundamental para obtener
y mantener este equilibrio. Adems lleva a cabo el control por medio de agentes
biolgicos, microbiales y con el uso de extractos de origen vegetal. El uso de extractos
es cada vez ms aceptado debido a la necesidad de emplear compuestos eficaces que no
provoquen efectos deletreos para la salud y el ambiente. Basndose en los usos
populares de las plantas medicinales de la regin se pueden identificar recursos
botnicos con potencial. Sin embargo, hace falta investigacin en este campo que
permita enriquecer esta lnea como una opcin en el control de plagas y enfermedades a
nivel comercial.
Una de estas especies potenciales es el organo (Lippia graveolens), el cual, es
una especie que crece en casi toda la Repblica Mexicana en las zonas semiridas del
pas. Los pobladores de stas zonas la recolectan en los meses de Agosto a Septiembre y
la venden, significando un ingreso importante en esta poca del ao. Actualmente en el
pas, existen diferentes grupos de oreganeros que ya se encuentran organizados y que
comercializan la hoja de manera conjunta. Adems, algunos de stos grupos ya cuentan
con maquinaria e instalaciones para obtener aceite esencial como un subproducto por lo
cual nace el inters de evaluar las propiedades de este aceite y de las aguas que se
obtienen como parte del proceso de destilacin (aguas madre), en el control de
enfermedades importantes del cultivo de jitomate bajo invernadero, necesidad a la cual
responde la presente investigacin.
2.3 HIPOTESIS
III. ANTECEDENTES
3.1 Produccin internacional y nacional de organo.
El organo del gnero Origanum (europeo), se extrae generalmente de
plantaciones comerciales bien establecidas, mientras que el mexicano se obtiene de
poblaciones silvestres de casi todo el territorio nacional sin ningn plan de manejo. Es
importante considerar que las especies mexicanas de organo se caracterizan por ser
plantas que crecen principalmente en climas secos y las especies europeas crecen en
climas mediterrneos. Las condiciones ambientales donde habitan estas especies, se
reflejan en la cantidad y composicin de sus aceites esenciales, de tal forma que al
organo mexicano (Lippia graveolens y L. palmeri) la American Spice Trade
Association (ASTA) lo describe como un organo con un sabor mucho mas fuerte, con
hojas mas largas y con un mayor contenido de aceites esenciales (3-4%), en
comparacin con el del mediterrneo (especies de Origanum) que provienen de Grecia,
Turqua o Albania que contienen entre 2-2.5% (Oliver, 1996).
3.1.1 Produccin nacional.
El volumen de la produccin en Mxico ha llegado a ser de 2559 ton (en 1989),
lo que represent un valor monetario de 3.2 millones de dlares, aunque este volumen
ha fluctuado en otros aos entre 1100 y 1800 ton anuales, lo que representa un valor
comercial de 1 a 2 millones de dlares, dependiendo de las fluctuaciones en el precio en
el mercado.
Cavazos (1991) seala que el pastoreo y la cosecha intensa pueden afectar
negativamente la produccin de hojas, pues las mayores cosechas se presentan en sitios
con un pastoreo moderado. El pastoreo puede tener efectos negativos en su hbitat o
afectar directamente la estructura de edades de esta especie (Martnez, 1991).
Se estima que en 2002, las exportaciones de organo seco no manufacturado con
destino a los Estados Unidos fue de 6648,313 kilogrmos; Mxico particip con una
cantidad de 2143,377, slo por debajo de Turqua. El costo promedio de la hoja seca
de organo por kilo es de 8.00 a 9.00 pesos. Durante la cosecha 2002, productores del
semidesierto de Quertaro lo vendieron hasta en 11.00 pesos, el precio histricamente
ms alto Pagado a colectores de organo en Mxico.
3.2.2 Farmacutico.
(Lippia berlandieri Schauer y Lippia palmeri Watson) Parte utilizada: Hojas
frescas y secas. Forma de preparacin: Infusin acuosa, 0.5%. Aplicaciones:
Antiasmtico (control del asma); antiespasmdico (alivio de clicos); antitusgeno
(control de la tos y del asma); antihelmntico (contra lombrices, en mezcla con
hierbabuena y tomillo); anti infeccioso (accin especficamente contra Staphylococcus
aureus); emenagogo (regulador de la menstruacin); fungicida (accin contra Candida
albicans).
3.2.3 Potencial Antimicrobiano.
Existen mltiples estudios sobre la actividad antimicrobiana de los extractos de
diferentes tipos de organo. Se ha encontrado que los aceites esenciales de las especies
del gnero Origanum presentan actividad contra bacterias gran negativas como
Salmonella
typhimurium,
Escherichia
coli,
Klebsiella
pneumoniae,
Yersinia
3.3.1 Taxonoma.
Con el nombre de organo se conocen a dos grandes grupos: el organo
mediterrneo o europeo y el mexicano. El primero proviene de diversas especies del
genero Origanum vulgare subs. hirtum (organo griego) y O. vulgare subs. gracite
(oregano turco). El organo mexicano proviene de dos especies de la Familia
Verbenaceae: Lippia palmeri y principalmente de L. graveolens (Huerta, 1997).
Segn Semarnat (2001) la taxonoma del organo mexicano es:
Reino: Plantae
Divisin: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsidae
Orden: Lamiales
Familia: Verbenaceae
3.3.3 Cultivo.
Las recomendaciones para establecer esta especie como cultivo son las
siguientes segn Vzquez (2006).
Transplante
Se recomienda realizarlo cuando la planta logra una altura aproximada de 15 cm y
que es aproximadamente a los 65-70 das despus de la siembra, se debe plantar a
una distancia entre plantas de 0.5 m y a una distancia de entre surcos de 0.8 m esto
es opcional porque depende de la apertura de la maquinaria; se debe despus de la
preparacin del suelo utilizando el mtodo tradicional, que consiste en sacar la planta
de la charola de polistireno y plantndola con todo y cepelln, aplicando un riego en
el transplante y otro al tercer da, que si se tiene cuidado con la plantacin y con la
aplicacin del agua de riego oportuna se logra un prendimiento del 100%, y en caso
de no resultar as se recomienda transplantar antes del primer riego de auxilio que es
aproximadamente un mes despus del transplante, utilizando planta con cepelln, en
bolsa de hule de 8 cm de ancho por 20 cm de alto.
Riego
El primer riego es al momento del transplante repitindolo al tercer da,
posteriormente se da otro riego de auxilio 20 das despus siendo el ltimo, ya que se
debe plantar cerca de la poca de lluvias.
Labores de cultivo
Las practicas culturas (deshierbes, aporques, etc) de deben realizar por dos
ocasiones, la primera cuando se ponga el suelo bueno para trabajar despus del
segundo riego del transplante, teniendo cuidado de no lastimar la planta; la segunda
se realizar cuando la tierra est buena para trabajar despus del primer riego de
auxilio que es aproximadamente un mes despus del transplante.
Plagas y enfermedades
Las principales plagas y enfermedades que atacan al cultivo de oregano son los
siguientes: Mosquita blanca (Bemisia spp), Gallina Ciega (Phyllophaga spp),
Barrenador de Ramas (Coleoptera: Chrysomelidae), Chinche Negra y las
enfermedades son: Tizn ( Alternaria sp.), Secadera Temprana ( Rizocthonia sp,
Fusarium sp, Phytophthora sp, Pythium sp.).
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compuestos con propiedades antimicrobianas que pueden ser empleadas para controlar
diferentes enfermedades en productos hortofrutcolas. La obtencin de los extractos
vegetales y el estudio de los componentes activos propician su empleo contra diferentes
fitopatgenos. En condiciones in vitro los extractos inhiben el crecimiento del patgeno,
as como la esporulacin y germinacin de esporas, de modo que ayudan a controlar las
enfermedades de frutos y hortalizas. Se conoce que sintetizan una gran variedad de
metabolitos secundarios relacionados con los mecanismos de defensa. El proceso para
obtener metabolitos secundarios en los extractos es muy variable se pueden obtener
extractos lquidos y en polvo o tambin utilizando otros disolventes para as obtener
otros diferentes compuestos.
16
Colletotrichum sp.
In vitro
Penicillium
italicum; In vitro
Aspergillus
flavus;
Fusarium sp.; Rhizoctonia
canela (Cinnamomun zyelanicum) y Aspergillus flavus
In vitro
organo (Origanum vulgare)
Stauffer
y
colaboradores
(2005)
Lpez (1996),
Erick Artur y
colaboradores,
(2006)
El cultivo del jitomate, como todos los productos agrcolas, debe cumplir las
condiciones que le permitan al consumidor final disfrutar de alimentos sanos, inocuos y
saludables, es decir, libres de txicos, cuyo proceso de produccin sea social y
ambientalmente responsable. Las nuevas tendencias del mercado, guiadas por mayor
conciencia y sensibilidad del consumidor frente a estos aspectos, as como las
restricciones internacionales respecto del uso de agroqumicos de sntesis, obligan a los
agricultores a buscar nuevas alternativas tecnolgicas que cumplan con estas exigencias.
17
18
Produccin de jitomate.
3.5 Produccin internacional de jitomate.
El tomate o jitomate (Lycopersicon esculentum) es uno de los cultivos
hortcolas con mayor rea cultivada y produccin global. Mxico ocup en el ao de
2003, el noveno lugar en la produccin con 2.1 millones de toneladas, siendo China el
mayor productor con 31.6 y Estados Unidos el segundo con 12.7 (Cuadro 3.1)
(SAGARPA, 2004; FAO, 2004).
Cuadro 3.1
Pases
China
Estados Unidos
Turqua
India
Italia
Egipto
Espaa
Brasil
Mxico
Grecia
Federacin de Rusia
Chile
Portugal
Ucrania
Uzbekistn
Marruecos
Nigeria
Francia
Tnez
Argelia
Japn
Argentina
Produccin (toneladas)
25,466,211
10,250,000
9,000,000
8,500,000
7,000,000
6,328,720
3,600,000
3,518,163
2,100,000
2,000,000
1,950,000
1,200,000
1,132,000
1,100,000
1,000,000
881,000
879,000
870,000
850,000
800,000
797,600
700,000
19
Los mayores consumidores de jitomate son Grecia y Libia al superar los 100
kilogramos por habitante al ao. Por lo tanto, esta regin del mundo se convierte en un
atractivo para los productores y comercializadores de la hortaliza, aun siendo una regin
muy competida por las exportaciones espaolas y holandesas (Alejandro, 2003).
Mxico fue de los ltimos pases en participar en la produccin bajo invernadero
sin embargo tiene la ventaja de producir para el mercado de invierno que tiene los
mejores precios y se estima que ya rebas a Canad en su volumen de produccin,
debido a la rpida expansin de la produccin de invierno, se espera que bajen los
precios. Los precios de los productos de invernadero aun son muy dependientes del
volumen de hortalizas producidas a campo abierto y de las condiciones climatolgicas.
La produccin en invernadero, aun siendo protegida, sigue siendo estacional y esta
sujeta al impacto de eventos climatolgicos (SAGARPA, 2004).
21
Hortalizas (2%)
Pastos y Forrajes
Hortalizas
Granos y Cereales
22
23
3.6.2 Taxonoma.
Segn Garza (1985), la taxonoma del jitomate es la siguiente:
Clase: Angiospermae
Subclase: Dicotyledoneae
Grupo: Metachlamydae
Orden: Solanales
Familia: Solanaceae
Genero: Lycopersicon
Especie: esculentum
Nombre cientfico: Lycopersicon esculentum Mill
3.6.3 Morfologa.
Planta: Perenne de porte arbustivo que se cultiva como anual (Figura 3.3). Puede
desarrollarse de forma rastrera, semierecta o erecta. Existen variedades de
crecimiento
limitado
(determinadas)
24
otras
de
crecimiento
ilimitado
Raz. El sistema radical del jitomate consta de una raz principal tpica de origen
seminal y numerosas races secundarias y terciarias; la raz principal puede alcanzar
hasta 60 cm de profundidad. Sin embargo, cuando la planta se propaga mediante
trasplante, como sucede generalmente, la raz principal se ve parcialmente detenida
en su crecimiento, en consecuencia se favorece el crecimiento de races secundarias
laterales, las que, principalmente se desenvuelven entre los 5 y 70 cm de la capa del
suelo. Las porciones de tallo y en particular la basal, en condiciones adecuadas de
humedad y textura del suelo, tienden a formar races adventicias (Garza, 1985).
25
En las axilas de las hojas del tallo principal surgen los tallos secundarios que son
eliminados mediante poda para una buena conformacin de la planta. El desbrote debe
ser oportuno, sobre todo el brote inmediato inferior al racimo, el cual surge con gran
vigor (Berenguer, 2003).
Hojas. Las hojas son de limbos compuestos por 7 a 9 foliolos con bordes dentados,
el haz es de color verde y el envs de color grisceo. La disposicin de nervaduras en
los foliolos es penninervia. En general, la disposicin de las hojas en el tallo es
alterna (Garza, 1985).
Frutos. Los frutos de jitomate son vallas carnosas con diferencias en forma (lisos,
asurcado, aperado) e intensidad de coloracin rojiza, con cavidades o lbulos
internos variables, en donde se desarrollan las semillas de forma reniforme y
aplanadas (Berenguer, 2003).
26
Nombre cientfico
Estado de desarrollo
en que ataca
En estado larvario
Araa roja
Tetranychus unticae
Mosquita blanca
Bemisia tabaci
En estado adulto
como larvario
Minador de la hoja
Liriomyza sp.
En estado adulto
Pulgn
Aphis gossypii
En estado adulto
Trips
Frankliniella
occidentalis
En estado larvario y
adulto
27
Parte de la planta
que ataca
Haz y envs de las
hojas
Hojas y partes
jvenes de las
plantas.
Ponen sus huevos en
hojas jvenes (envs
y haz) y tambin en
los tallos.
Envs de las hojas y
en tallos
Hojas, flores y frutos
alimentndose de la
capa externa celular.
Figura 3.4 Araa roja (Tetranychus unticae) en fase adulta, sobre una hoja de jitomate
28
qumico:
Abamectina,
Acrinatrin,
Dicofol,
Fenbutestan,
29
30
a)
b)
c)
d)
Sntomas en el cultivo. Las plantas infectadas presentan menos vigor y las hojas se
cubren con mielecilla. La mosca blanca se alimenta del tejido de las hojas, extrayendo la
savia de la planta lo cual entorpece su crecimiento. En las plantas infectadas las hojas se
vuelven amarillentas y se caen. Se desarrolla un hongo semejante a tizn en las hojas
cubiertas del roco viscoso producido por la mosca blanca.
Daos. Los daos que se ocasionan comienzan cuando la mosca se instala en el
envs de la hoja hospedante y tanto en estado adulto como larvario, comienzan a
nutrirse de ella y deteriorando el crecimiento de la misma. Debido a su facilidad para
desplazarse de una planta a otra, e introducir su aparato bucal, llega a transmitir
enfermedades vricas e incluso por su excremento, que forma una lmina pegajosa y
produce el desarrollo de hongos.
31
Cultivos hospederos: Los cultivos que se ven ms afectados por este insecto
son: las plantas del tomate, pimiento, pepino, juda, tabaco.
Control cultural: Proteger las plantas antes del trasplante.
Control biolgico: Se utilizan Encarsia formosa y Eretmocerus califomicus.
Encarsia formosa es una avispa pequea de 0.6 mm de longitud, con la cabeza y el
trax de color negro y con el abdomen de color amarillo. Hay que introducir el
parasitoide cuando la poblacin de la mosquita es baja. Se podrn observar las pupas
parasitadas 2 a 3 semanas de la primera introduccin y tomar alrededor de 8 semanas
para que se parasite el 80% de las pupas. Eretmocerus californicus se desarrolla en
cualquier estado larvario de la mosca blanca pero prefiere el segundo y tercero.
Deposita sus huevos en la larva de la mosca blanca y despus de 3 das el huevo
traslcido se torna a color caf. El ciclo completo toma de 17 a 20 das, dependiendo del
estado larval y de la temperatura (Len, 2001).
Control
qumico:
Abamectina,
Acrinatrin,
Dicofol,
Fenbutestan,
32
Figura 3.6 Hoja de jitomate con dao ocasionado por el minador. Foto: Lpez y
Gastlum, 2003.
33
34
hembra
puede
poner
lo
largo
de
su
vida
es
de
36
76.
Su ciclo tiene una duracin aproximada de unos 15 a 20 das, cuando existen unas
condiciones climticas adecuadas de 25C de temperatura, humedad relativa de 40 a
60% (Lpez y Gastlum, 2003)
Sntomas del cultivo: Los daos son producidos por las larvas que se alimentan
de los tejidos de las hojas jvenes y tiernas excavando galeras dentro de ellas, y
dejando solo por encima la cutcula de la hoja. La hoja acaba destruyndose, curvndose
y la cutcula acaba ennegrecindose. Aunque las hojas queden destruidas por estos
minadores la cosecha no se ve tan afectada. Si las condiciones climticas son buenas
(altas temperaturas) el minador incrementa ms su actividad destructora en las hojas. La
accin del minador de hoja provoca una elevada prdida de masa foliar, reduciendo la
capacidad fotosinttica de la planta lo que produce la prdida de vigor de ste.
35
Descripcin: Los adultos presentan una forma alargada, que oscila entre los 1,2 mm de
las hembras y los 0,9 mm de longitud de los machos, con dos pares de alas plumosas
replegadas sobre el dorso en estado de reposo. Las hembras son de color amarillentoocre con manchas oscuras en la parte superior del abdomen, siendo dicha coloracin
ms clara en verano y en los machos. A su vez presentan un aparato bucal rascador chupador por lo que los daos se dan en la epidermis de los frutos (Biobest, 2006).
36
Reproduccin: Los adultos colonizan los cultivos realizando las puestas dentro
de los tejidos vegetales en hojas, frutos y, preferentemente, en flores (son florcolas),
donde se localizan los mayores niveles de poblacin de adultos y larvas nacidas de las
puestas.
Sntomas del cultivo: Los daos directos se producen por la alimentacin de
larvas y adultos, sobre todo en el envs de las hojas, dejando un aspecto plateado en los
rganos afectados que luego se necrosan. Estos sntomas pueden apreciarse cuando
afectan a frutos (sobre todo en pimiento) y cuando son muy extensos en hojas). Las
puestas pueden observarse cuando aparecen en frutos (berenjena, juda y jitomate). El
dao indirecto es el que acusa mayor importancia y se debe a la transmisin del virus
del bronceado del jitomate (TSWV) (Lpez y Gastlum, 2003).
Cultivos que ataca: frutos (berenjena, juda y jitomate)
Control cultural: Colocacin de mallas en las bandas del invernadero y vigilar
que no haya roturas en el plstico.
Limpieza de malas hierbas dentro y fuera del invernadero y eliminacin de restos de
cultivo sobre todo antes de realizar una nueva plantacin, distanciando sta el mximo
tiempo posible de la anterior.
Colocacin de trampas adhesivas azules antitrips desde el inicio del cultivo, a la altura
de ste, para realizar un seguimiento de las poblaciones de adultos.
Control qumico: Este medio de lucha encuentra una gran dificultad en el
control del insecto debido a su comportamiento. Las larvas se encuentran refugiadas en
las flores, las ninfas en el suelo, y el adulto tiene una gran movilidad.
En el control qumico, las aplicaciones deben alcanzar bien toda la planta, sobre todo en
el envs de las hojas y flores. Procurar mantener un control de la plaga desde el inicio
del cultivo y sobre todo antes de la floracin. Alternar el uso de materias activas. Los
productos recomendados pueden consultarse en los boletines de la Seccin de
Proteccin de los Vegetales o consultando a las Estaciones de Avisos.
37
heterpteros
antocricos
del
gnero
Orius.
38
Hongo
Hongo
Hongo
Bacteria
Hongo
Hongo
Hongo
Hongo
10 35 C
24-30 C
15 20 C
10-25 C
10 18 C
10 20 C
las hojas
hoja, tallo,
pednculo, floral,
fruto
hojas, brotes e
inflorescencias),
en las estacasinjerto y racimos
en tallos, hojas y
frutos
En las hojas
Son hojas, tallo y
ramas
Figura 3.9 Daos causados por el hongo Oidiopsis. Foto: Wikipedia 2006
39
40
Figura 3.10 En los tallos se aprecia el dao en los nudos, en las heridas
de poda,
41
42
blanquecinas
en
cultivos
hortcolas,
que
no
desprenden
olor.
Para que se produzca la enfermedad es necesario que haya pasado por unas
determinadas condiciones previas, que se producen en el suelo a partir de infecciones en
cosecha anteriores (Figura 3.11). Este hongo puede tener una duracin media de 4-5
aos en el suelo, siendo el principal medio de destruccin por parasitismo.
Figura 3.11 Dao causado por Podredumbre de races del tomate. Foto: Infojardin, 2001.
43
que, adems de llover, la hoja permanezca mojada la mayor parte del da, lo que
normalmente requiere de cielos cubiertos y plantas con un cierto grado de desarrollo
("ms adelantadas"). Lo ms recomendable en estos momentos es buscar en cada
parcela la posible presencia de plantas con sntomas del hongo, que son: manchas
grandes aceitosas de color achocolatado en hojas y tallos. Cuando aparecen en frutos
estos presentan un oscurecimiento en la zona apical (Agraria, 2004).
44
Reproduccin: Las infecciones suelen producirse a partir del cliz, por lo que
los sntomas cubren la mitad superior del fruto. La dispersin se realiza por lluvias y
vientos, riegos por aspersin, rocos y gotas de condensacin. Las condiciones
favorables para su desarrollo son: altas humedades relativas (superiores al 90%) y
temperaturas entre 10C y 25C.
Sntomas del cultivo: En jitomate ataca a la parte area de la planta y en
cualquier etapa de desarrollo. En hojas aparecen manchas irregulares de aspecto
aceitoso al principio que rpidamente se necrosan e invaden casi todo el foliolo.
Alrededor de la zona afectada se observa un pequeo margen que en presencia de
humedad y en el envs aparece un fieltro blancuzco poco patente. En tallo, aparecen
manchas pardas que se van agrandando y que suelen circundarlo. Afecta a frutos
inmaduros, manifestndose como grandes manchas pardas, vtreas y superficie y
contorno irregular.
Cultivos que ataca: Este hongo es el agente causal del mildiu del jitomate y de
la patata, afectando a otras especies de la familia de las solanceas.
Control biolgico: Los tratamientos con productos de contacto son suficientes para
evitar que se desarrolle el hongo (preventivos) por lo que es aconsejable tener
protegidas todas las plantaciones, pero principalmente las ms adelantadas y sobre todo
si se prevn lluvias de nuevo.
Control qumico: Benalaxil, Fosetil-Al, Mefenoxam, Oxadixil, etc.
45
Figura 3.13 Dao en hoja de jitomate provocado por Alternaria solani. Foto:
46
IV. METODOLOGA
4.1 Ubicacin del estudio.
El presente trabajo se realiz en el Campus Amazcala de la Facultad de
Ingeniera de la Universidad Autnoma de Quertaro, ubicado en el municipio de El
Marqus, Quertaro, Mxico (Figura 4.1).
47
48
4.3.1 Extracto total. Se llevo a cabo a partir de hojas secas de organo por el mtodo de
presurizado, el cual consisti en colocar en una olla de presin Marca T-FAL con
capacidad para 4.5, 300 g del material vegetal seco de hoja de organo (Lippia
graveolens), 909 ml de agua destilada y 91 ml de alcohol de 96. Posteriormente se
coloc la olla en la estufa, hasta que la vlvula comenz a desprender vapores, se
mantuvo a fuego lento de 10 a 15 minutos y posteriormente se retir y se dej enfriar
sin destapar la olla. Por ltimo, se filtr el lquido obtenido y se almacen en un envase
de vidrio color mbar hermticamente cerrado y se guard en el refrigerador. De esta
manera qued listo el producto para su utilizacin (Figura 4.3).
49
Figura 4.3 Procedimiento para obtener extracto total de organo a partir del mtodo de
presurizado.
50
51
Figura 4.5 Separacin de las aguas madre de organo del proceso de hidrodestilacin.
52
53
Figura 4.7 La solucin del extracto se verti en todas las cajas petri donde se hiso
la siembra.
54
55
adicionaron 0.5 l de NaOH 1M, y se afor a 2.5 l con agua destilada. La solucin se
mezcl y la absorbancia se midi contra un blanco preparado en 510 nm. Los resultados
se expresan como miligramos de equivalentes (+)-catechin por ml de extracto.
56
V. RESULTADOS Y DISCUSIN
5.1. Extractos vegetales.
5.1.1 Extracto total.
El total de extracto que se obtuvo una vez terminado todo el proceso de
extraccin fue de 380 mL (Figura 5.1) de los 1000 mL colocados, es decir en extracto
nos queda el 38%. Si consideramos lo anterior, de un kilo de hoja de organo seco
podemos obtener 1226 mL de extracto.
Figura 5.1 Envasado y medicin del extracto total de organo obtenido por el mtodo
de presurizado.
57
58
Cuadro 5.1 Crecimiento del hongo Aspergillus niger durante los cinco das
despus de la aplicacin de los tratamientos.
Tratamientos
Tratamientos
1
Extracto de
organo
Testigo absoluto
Aceite de organo
Agua madre
organo
Agua y alcohol
Aspergillus niger
Das despus de la aplicacin
2
3
1
2
1
1.3
2.5
1
1.6
4
1
2.1
4.5
1
2.7
4.6
1
2.1
1.2
3.1
1.2
5
1.2
5
1.2
5
1.2
59
5
4
3
dias
4.6
Serie2
2.7
1
1.2
0
Ext.
Oreg.
Acet.
Agua
Madre
Agua y
Alcoh
Test.
Abs.
tratamientos
Cuadro 5.3 Anlisis de varianza del crecimiento del hongo (Aspergillus niger),
En diferentes das de crecimiento.
Tratamiento
DA
1
2
0.259 0.509
3
1.101 1.049
aceite
Testigo absoluto
0.122 0.349
0.228 0.477
0.368 0.606
0.025 0.159
0.052 0.229
Aceite de organo
0.042 0.207
0.042 0.207
0.042 0.207
Agua y Alcohol
0.045 0.213
0.045 0.213
0.045 0.213
60
Cuadro 5.4 Crecimiento de la bacteria (Xanthomona campestri) durante los cinco das
despus de la aplicacin de los tratamientos.
Tratamientos
Tratamientos
1
Extracto de
organo
Testigo absoluto
Aceite de organo
Agua madre
organo
Agua y alcohol
Xanthomona campestri
Das despus de la aplicacin
2
3
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
SI
61
Al realizar el anlisis de los datos obtenidos se encontr que existe una diferencia entre
los tratamientos con la prueba de tukey, las aguas madre y el testigo no existio
diferencia significativa en comparacin con los tratamientos del extracto y del aceite. El
que tuvo mayor inhibicin en el crecimiento del hongo Aspergillus niger fue el aceite
teniendo hasta el Quinto da de medicin un crecimiento esttico, y para el hongo
Cladosporium cladosporoide fueron los dos tanto el aceite y las aguas madre, en
comparacin con los otros extractos estos si tuvieron crecimiento constante, ya que en
las aguas madre el crecimiento fue acelerado (cuadro 5.8). Los resultados que se han
obtenido nos indica que el aceite es el que ha tenido mejores resultados hasta este
momento, se realizo un anlisis por da que indico el crecimiento que tuvo el hongo
durante los cinco das que se estuvieron midiendo, a estos datos sele realizo un anlisis
con el programa de SAS, con un alpha de (P<0.05) debe ser mayor. (Cuadro 5.6).
62
Cuadro: 5.5 Clculo de medias y desviacin estndar del crecimiento del hongo
(Aspergillus niger), en diferentes das de crecimiento.
Tratamiento
DA
1
0.259 0.509
3
1.101 1.049
aceite
Testigo absoluto
0.122 0.349
0.228 0.477
0.368 0.606
0.025 0.159
0.052 0.229
Aceite de organo
0.042 0.207
0.042 0.207
0.042 0.207
Agua y Alcohol
0.045 0.213
0.045 0.213
0.045 0.213
Repeticiones
Medias
3.5125 (a
Testigo
3.3625 (a
Extracto de organo
1.3125 (b
Aceite de organo
0.7000 (b
Agua y Alcohol
0.6500 (b
Cuadro 5.7 Duracin del crecimiento del hongo Aspergillus niger durante cinco
das con la aplicacin de los diferentes extractos.
Tratamientos
Repeticiones
Crecimiento en milmetros
3.3175 (a
Testigo
3.1350 (a
Extracto de organo
1.3400 (b
Aceites de organo
0.7975 (bc
Agua y Alcohol
0.6450 (c
Nota: Medias con la misma carta o letra no son significativamente diferentes, de acuerdo con Tukey al
0.05 al nivel de significanca.
63
En cuanto al crecimiento de Aspergillus niger, en las cajas petri, se pudo observar que
el tratamiento con menos crecimiento fue el aceite de oregano con 6 centmetros durante
el tercer dia de observacin, seguido por la solucin de agua y alcohol que tuvo un
crecimiento de 1 centmetro, sin embargo las aguas madre no tuvieron ninguna
inhibicin en el crecimiento del hongo teniendo este al tercer dia fue de 50 centmetros,
al igual que el tratamiento de alcohol que no presento crecimiento del hongo ( cuadro
5.7).
Tratamientos
Tratamientos
1
Extracto de
organo
Testigo absoluto
Aceite de organo
Agua madre
organo
Agua y alcohol
Aspergillus niger
Das despus de la aplicacin
2
3
10
2
6
13
25
6
16
4
6
21
45
6
27
46
6
21
10
31
10
50
10
50
10
50
10
Estos resultados indican que los diferentes compuestos fenolicos de los extractos
de aceites pueden tener una capacidad antimicrobiana, por lo que es posible la
inhibicin del hongo Aspergillus niger.
64
Tratamientos
Tratamientos
1
Extracto de
organo
Aceite de organo
Agua madre
organo
Agua y alcohol
Testigo absoluto
Cladosporium cladosporoide
Das despus de la aplicacin
2
3
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
0
7
0
9
0
10
0
10
0
16
24
22
23
Estos resultados indican que los diferentes compuestos fenolicos de los extractos
de aceites pueden tener una capacidad antimicrobiana, por lo que es posible la
inhibicin del hongo Cladosporium cladosporoide.
Repeticiones
Medias
Extracto de organo
0.400 (c
Aceite de organo
0.000 (c
5.800 (b
Agua y Alcohol
0.000 (c
Testigo
17.080 (a
Tratamientos
Repeticiones
Crecimiento en milmetros
9.0800 (a
Testigo
6.7200 (b
Extracto de organo
5.3600 (b
Aceites de organo
2.1200 (c
Agua y Alcohol
0.000 (c
Nota: Medias con la misma carta o letra no son significativamente diferentes, de acuerdo con Tukey al
0.05 al nivel de significanca.
65
VI. CONCLUSIONES
Con base en los resultados que se obtuvieron en el anlisis de varianza de (SAS).
De los extractos, el que mostr una mayor actividad fue el extracto total de oregano,
aceite de oregano, seguido por el de alcohol y finalmente el de las aguas madre fue de
esperar que este ultimo extracto tuviera una actividad inhibitoria menor ya que fue
obtenido del material de donde se saco el aceite. De acuerdo al anlisis estadstico se
observaron diferencias significativas entre los extractos utilizados como tratamientos, la
inhibicin del hongo Aspergillus niger y Cladosporium cladosporoide se pudo observar
al reducir el crecimiento miceliar en este hongo por lo que el aceite puede ser empleado
como un agente fungicida.
La aplicacin del extracto total y el aceite esencial de organo como un agente de
control, podra minimizar las prdidas que pueden ocasionar las diversas enfermedades
en cultivos de importancia y por consiguiente podra aumentar la productividad al
reducir los costos por el empleo de agroqumicos, con una notable disminucin de la
contaminacin ambiental.
66
LITERATURA CITADA
fungos
fitopatognicos.
Fitopatologa
Brasileira,
Brasilia,
v.18
68
ANEXOS
ANEXO 1. Mtodo de obtencion del aceite y de las aguas madres con el mtodo de
arrastre de vapor.
Primer mtodo utilizado para la obtencion del aceite esencial y las aguas madre hechos
en el laboratorio de Qumica en la UAQ.
70
Sellado y incubacin de las cajas petri en la estufa marca RIOSSA, Modelo HSF-41
EUA, con una temperatura de 28C.
71
extracto
aceite
aguas madre
testigo abs
alcohol y agua
Total
Dia 3
Cuenta
Suma
Promedio
Varianza
Desviacin estandar
DIA 2
Cuenta
Suma
Promedio
Varianza
Desviacin estndar
Dia 1
Cuenta
Suma
Promedio
Varianza
Desviacin estandar
Total
Cuenta
Suma
Promedio
Varianza
Desviacin estandar
8
9.5
1.1875
0.052678571
0.229518129
8
5.6
0.7
0.042857143
0.207019668
8
8
28.1
26.9
3.5125
3.3625
1.10125 0.36839286
1.049404593 0.60695375
8
40
5.2
75.3
0.65
1.8825
0.045714286 1.980967949
0.213808994 1.407468632
8
9.1
1.1375
0.025535714
0.159798981
8
5.6
0.7
0.042857143
0.207019668
8
8
22.6
18.1
2.825
2.2625
0.259285714 0.22839286
0.509201055 0.47790465
8
40
5.2
60.6
0.65
1.515
0.045714286 0.893615385
0.213808994 0.945312321
8
7.1
0.8875
0.024107143
0.155264751
8
5.6
0.7
0.042857143
0.207019668
8
8
16.5
14.6
2.0625
1.825
0.094107143 0.12214286
0.306768875 0.34948942
8
40
5.2
49
0.65
1.225
0.045714286 0.424487179
0.213808994 0.651526806
24
25.7
1.070833333
0.049112319
0.221612993
24
16.8
0.7
0.039130435
0.197814142
24
24
67.2
59.6
2.8 2.48333333
0.808695652 0.65536232
0.89927507 0.80954451
24
15.6
0.65
0.04173913
0.204301567
ANLISIS DE
VARIANZA
Origen de las
variaciones
Muestra
Columnas
Interaccin
Dentro del grupo
Suma de
cuadrados
8.686166667
100.687
10.1855
17.79125
Grados de
libertad
Total
137.3499167
2
4
8
105
119
72
Promedio de los
cuadrados
F
4.343083333 25.6319118
25.17175 148.558069
1.2731875 7.51406942
0.169440476
Valor crtico
Probabilidad
para F
8.60736E-10 3.082852016
2.68492E-42 2.45821013
6.86382E-08 2.02777378
g
catequina
0
20
40
60
80
100
Valores
Abs
DE
0.00016667
0.31626667
0.59636667
0.84726667
1.10963333
1.25726667
0.00015275
0.02906584
0.00250067
0.01755173
0.0430737
0.02272319
g de
Acido
galico
0
2
4
6
8
10
12
14
16
Abs
promedio
DE
0
0.10436667
0.20036667
0.3099
0.40383333
0.4903
0.5691
0.6736
0.72853333
0
0.00406489
0.0132455
0.01685734
0.00196554
0.00277849
0.00253574
0.0072856
0.00155027
Muestra de
organo
FENOLES
g Equivalentes de
cido glico/ml
FLAVONOIDES
g Equivalentes de
catequina /ml
Aceite
esencial
14110.15+487.370
Aguas madre
5881.12+790.898
54306.59 + 3667.11
87