Tampn qumico

Para otros usos de este trmino, vase Tampn.

Un tampn, buffer, solucin amortiguadora o solucin reguladora es
la mezcla en concentraciones relativamente elevadas de un cido dbil y
su base conjugada, es decir, sales hidrolticamente activas. Tienen la
propiedad de mantener estable el pH de una disolucin frente a la adicin
de cantidades relativamente pequeas de cidos o bases fuertes. Este
hecho es de vital importancia, ya que solamente un leve cambio en la
concentracin de hidrogeniones en la clula puede producir un paro en la
actividad de las enzimas.
Se puede entender esta propiedad como consecuencia del efecto ion
comn y las diferentes constantes de acidez o basicidad: una pequea
cantidad de cido o base desplaza levemente el equilibrio cido-base dbil,
lo cual tiene una consecuencia menor sobre el pH. 1
Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH, el cual depender
de la constante de equilibrio del cido o base empleado. Son importantes en
el laboratorio y en la industria, y tambin en la qumica de la vida.
Tampones tpicos son el par amonaco-catin amonio, cido actico-anin
acetato, anin carbonato-anin bicarbonato, cido ctrico-anin citrato o
alguno de los pares en la disociacin del cido fosfrico.
Contenido
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1 Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn

2 Clculo del pH de disoluciones tampn

3 Sistemas tampn fisiolgicos

o

3.1 Niveles de pH en el cuerpo humano

3.2 Sistemas tampn en el organismo

3.2.1 Tampn bicarbonato

3.2.2 Tampn fosfato

3.2.3 Tampn hemoglobina

3.2.4 Aminocidos y protenas

4 Aplicaciones industriales de las soluciones tampn

5 Experiencias con soluciones tampn

6 Referencias

7 Enlaces externos

[editar]Mecanismo de actuacin de las soluciones tampn

Para poder entender con claridad el mecanismo que utiliza el organismo
para evitar cambios significativos de pH, pondremos un ejemplo de
actuacin del tampn de ms importancia en el organismo, el equilibrio
de cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-), presente en el lquido
intracelular y en la sangre. Como producto del metabolismo se produce
CO2 que al reaccionar con las molculas de agua producecido carbnico,
un compuesto inestable que se disocia parcialmente y pasa a
ser bicarbonato segn el siguiente equilibrio:
CO2 + H2O

H2CO3

HCO3- + H+

Entonces, el bicarbonato resultante se combina con los cationes libres

presentes en la clula, como el sodio, formando as bicarbonato
sdico(NaHCO3), que actuar como tampn cido. Supongamos que entra
en la clula un cido fuerte, por ejemplo, cido clorhdrico (HCl):
HCl + NaHCO3 NaCl + CO2 + H2O
Como se puede ver en la anterior reaccin el efecto cido clorhdrico queda
neutralizado por el bicarbonato de sodio y resultan como productos
sustancias que no provocan cambios en el pH celular y lo mantienen en su
valor normal, alrededor de 7.
[editar]Clculo del pH de disoluciones tampn
Frecuentemente se utiliza la ecuacin de Henderson-Hasselbalch para el
clculo del pH en soluciones reguladoras. Sin embargo, debe aclararse que
esta ecuacin no es aplicable en todos los casos, ya que para su deduccin
se realiza una serie de suposiciones. Esta ecuacin suele proporcionar
resultados incorrectos cuando las concentraciones del cido y su base
conjugada (o de la base y su cido conjugado) son bajas. Para el clculo del
pH, se debe saber el pKa del cido y la relacin entre la concentracin de sal
y cido, como se observa a continuacin

Ecuacin de Henderson-Hasselbalch
Recordemos que pKa de un cido dbil se obtiene a partir de su constante
de acidez (Ka) y es especfico para cada cido. Supongamos que disponemos

de una determinada cantidad de un cido dbil, por ejemplo, cido

lctico de concentracin 10 mM. Sabemos, que la concentracin de su sal
conjugada, el lactato, es de 2 mM y que el pKa cido del cido lctico s
3,86. Por tanto, podemos calcular el pH delcido lctico en una solucin
acuosa sin ningn tipo de sistema tamponador con la ecuacin de
Henderson-Hasselbalch:
CH3-CHOH-COOH

CH3-CHOH-COO- + H+

pH = 3,86 + log (2 mM/ 10mM) = 3,86 - 0,7 = 3,16

Por tanto, el pH de una solucin acuosa de cido lctico de concentracin 10
mM, sin la intervencin de ningn tampn es 3,16. Es decir que si esto se
produjese en el lquido intracelular y no existieran las soluciones
amortiguadoras su pH estndar de 7 bajara bruscamente hasta 3,16. Sin
embargo, esto no ocurre en nuestro organismo gracias a los tampones
qumicos.
Si reflexionamos sobre la ecuacin de Henderson-Hasselbalch se deduce
que el pH del sistema amortiguador depende de la proporcin relativa entre
sal y cido, y no de sus concentraciones absolutas. Es decir que si vamos
aadiendo agua al sistema variarn las concentraciones absolutas de cada
sustancia, pero no su cociente de concentraciones. No obstante, si la
dilucin es muy grande, el equilibrio del cido y su sal conjugada se
desplaza hacia los productos y, por tanto, aumenta la sal y disminuye el
cido, entonces el cociente sal/cido aumenta muy significativamente.
Supongamos ahora que aadimos una solucin amortiguadora
de bicarbonato de potasio (KHCO3) y una cantidad grande de agua a la
anterior solucin de cido lctico anterior de 10 mM, suficiente para que se
rompa el equilibrio de concentraciones del cido y su sal conjugada. En
consecuencia, la concentracin de cido lctico disminuye a 0,1 mM y la
concentracin de lactato de potasio aumenta a 200 mM. Calculemos el pH
de la nueva solucin:
CH3-CHOH-COOH + KHCO3 CH3-CHOH-COOK + CO2 + H2O
pH = 3,86 + log (200 mM/ 0,1 mM) = 3,86 + 3,3 = 7,16
Es decir que partiendo de una solucin de cido lctico inicial de
concentracin 10 mM y pH 3,16 cido - sta ha acabado transformndose
en una solucin de cido lctico de concentracin 0,1 mM y pH 7,16
neutro - gracias a la intervencin de un tampn qumico, en este caso, el
bicarbonato de potasio. As es como el organismo consigue mantener su pH
alrededor de 7, a pesar de que entren sustancias cidas o bsicas en el
cuerpo.
[editar]Sistemas tampn fisiolgicos

[editar]Niveles de pH en el cuerpo humano

Muchas biomolculas actan a un determinado valor de pH y solo toleran
fluctuaciones mnimas en el pH. Dado el bajo grado de ionizacin del agua
(H2O), cuando aadimos en sta una pequea cantidad de cido o de base,
el pH vara en mucha cantidad, llegando a niveles de pH en los cuales las
biomolculas no podran cumplir sus funciones. Por esta razn los lquidos
fisiolgicos contienen tampones que, a diferencia del agua, mantienen el pH
constante. Los tampones mantienen la cantidad de cidos y de bases en
equilibrio en un determinado pH en el cual la actividad biolgica de las
protenas, hormonas, enzimas, bombas de iones... sea ptima. En humanos,
los valores compatibles con el mantenimiento de funciones vitales son de
pH entre 6,8 y 7,8; siendo el intervalo de 7,35 a 7,45 el de normalidad. En
concreto, podemos decir que cada lquido fisiolgico tiene un nivel
caracterstico normal de pH: - Sangre arterial: pH= 7,4 - Sangre venosa:
pH= 7,35 - Lquido intersticial: pH= 7,35 - Lquido intracelular: pH= 6 - 7,4 Orina: pH= 4,5 - 8 - HCl gstrico: pH= 0,8
Los tampones son los primeros responsables de mantener estos niveles de
pH constantes aunque en el organismo se produzcan altas cantidades de
cidos debido al metabolismo. As, los tampones son el primer nivel de
defensa contra los cambios de pH. Tambin contribuyen al equilibrio la
regulacin respiratoria (segunda lnea de defensa) y la regulacin renal
(tercera lnea de defensa). Cuando hay alteraciones debidas a
enfermedades de los riones, pulmones o por diabetes mellitus, el pH se ve
alterado y se padece acidosis (pH<7,37) o alcalosis (pH>7,43). Las causas
principales de acidosis son: insuficiencia renal, acidosis tubulorrenal,
cetoacidosis diabtica, acidosis lctica, sustncias txicas (etilenglicol,
salicilato (en sobredosis), metanol, paraldehido, acetazolamida o cloruro de
amonio. Las causas principales de alcalosis son: uso de diurticos (tiacidas,
furosemida, cido etacrnico), prdida de cido causada por vmitos o
aspiracin del contenido del estmago, glndulas suprarrenales hiperactivas
(sndrome de Cushing o utilitazacin de corticosteroides). Estas alteraciones
pueden rendir su efecto en la primera, la segunda o la tercera lnea de
defensa; impidiendo as el funcionamiento de todos los mecanismos
complexos que mantienen los niveles de pH a niveles adecuados.
[editar]Sistemas tampn en el organismo
Existen tampones de gran importancia en el organismo:
Inorgnicos:
Tampn bicarbonato:
CO2 + H2O

Tampn fosfato:

H2CO3

HCO3 - + H+

H2PO4-

HPO42- + H+

Orgnicos:
Tampn hemoglobina:
HHbO2

HbO2- / HbH

Hb- + H+

Aminocidos y protenas
[editar]Tampn bicarbonato
Tal y como se ha comentado anteriormente, el tampn bicarbonato est
compuesto por cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-) y el valor de
su pKa es de 6,1. Es el tampn ms importante de la sangre (pH=7,4),
representa el 75% de la capacidad buffer total de la sangre. Tambin est
presente en el lquido intersticial. Es un tampn muy eficaz porque la
relacin HCO3-/ H2CO3 es muy alta, lo que supone una alta capacidad para
amortiguar los cidos. Supone una ventaja el hecho que se trata de un
sistema abierto ya que el CO2 puede ser eliminado en la respiracin muy
rpidamente, los H+ se pueden eliminar por va renal y el HCO3- puede
reemplazarse en la orina. En realidad, este tampn est compuesto por dos
equilibrios, pues el cido carbnico forma CO2, generando una molcula de
H2O.

Bicarbonat
Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los protones libres. As, el
equilibrio se desplaza hacia el H2CO3, que a su vez, mediante la reaccin
catalizada por la anhidrasa carbnica (glbulos rojos), cede una molcula de

H2O y se convierte en CO2, el cual se elimina a travs de los pulmones. Por

el contrario, si el pH de la sangre aumenta, se forma HCO3- a partir de
H2CO3, lo que conduce a mayor captacin de CO 2. Las concentraciones de
HCO3- y de H+ tambin se pueden controlar por mecanismos fisiolgicos a
nivel renal. El rin puede eliminar protones unindolos a amonacos o
fosfatos y mantiene la concentracin de bicarbonato mediante reabsorcin o
regeneracin del mismo. La suma de las formas sal y cido se llama reserva
alcalina. En condiciones normales, esta suma tiene el valor 25,2 mEq de
CO2 por litro. Como a pH sanguneo (pH=7,4), la proporcin entre la forma
sal y cido es de 20, resulta que [HCO 3-] es 24 mEq/L y [CO2] es 1,2 mEq/L.
As, es importante tener en cuenta que el cuerpo necesita ms bicarbonato
que no cido carbnico porque el metabolismo produce ms cidos que
bases.
[editar]Tampn fosfato
El tampn fosfato est compuesto por el hidrgeno fosfato (HPO 4-2) y el
dihidrgeno fosfato (H2PO4-). Acta en el plasma y el lquido intersticial. Este
tampn tiene un pKa de 6,8, el cual est mucho ms cerca del pH
plasmtico. Esto significara que este tampn tendra que ser ms til que el
anterior, pero no es as ya que se encuentra en concentraciones menores en
sangre y la eliminacin del fosfato es mucho ms lenta, por va renal.
A pH fisiolgico de 7,4, la relacin HPO 4-2/ H2PO4- es igual a 4. As, se trata
de un sistema eficaz para amortiguar cidos. Como hemos dicho, a nivel
sanguneo, el tampn bicarbonato resulta ms til que el tampn fosfato ya
que este ltimo se encuentra en concentraciones bajas. Ahora bien, a nivel
intracelular, el tampn fosfato tiene concentraciones elevadas y es ms
eficiente.
[editar]Tampn hemoglobina
La hemoglobina es una protena globular multimrica que dispone de cuatro
puntos de unin a ligandos cuyas propiedades de unin estn reguladas
alostricamente. La funcin principal de la hemoglobina es el transporte de
oxgeno por la sangre. Referente a su estructura, se trata de un
heterotetrmero y consta de dos pares de cadenas polipeptdicas diferentes.
Cada una de las cadenas lleva un hemo como grupo prosttico, donde se
unen las molculas de O2, por lo que una hemoglobina puede unir como
mximo cuatro molculas de O2. La captacin de O2 se ve afectada, entre
otros factores, por los H+ y el CO2. Algunos factores favorecen el estado T,
en el cual la protena no tiene O2unidos, y otros favorecen el estado R, en el
cual la hemoglobina tiene unidas molculas de O2. Este fenmeno se
denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre las
distintas afinidades para el O2; la cual es esencial para que cumpla su
funcin de transporte.
Cuando el CO2 forma cido carbnico y protones, los protones estabilizan el
estado T, de descarga de O2. As, en los capilares perifricos, dnde

encontramos CO2, la hemoglobina cede las molculas de O 2. En los capilares

de los alvolos pulmonares se invierte este efecto. As, cuando se unen H+
a la hemoglobina, se produce un efecto en el equilibrio del tampn
bicarbonato ya que se induce a la formacin de bicarbonato. Es un tampn
fisiolgico muy eficiente gracias al cambio de su pK cuando pasa de la
forma oxidada (pK=7,16) a la reducida (pK= 7,71) y a la gran cantidad que
hay en la sangre.
[editar]Aminocidos y protenas
Los aminocidos tienen carcter anftero, es decir, pueden ceder protones y
tambin captarlos. Esto es as gracias a dos de los radicales comunes en
todos los aminocidos: el grupo NH2 y el grupo COOH. Estos radicales, al
estar en contacto con el agua, se presentan ionizados o protonados;
actuando los dos como donantes o aceptores de protones.
En pH cidos:
- El NH2 capta un protn: NH3+ (el pka para este radical es 9)
En pH bsicos:
- El COOH pierde un protn: COO- (el pKa para este radical es 2)
En el punto de pKa del grupo amino existe el 50% de radicales amino
protonados (NH3+) y el otro 50% de radicales amino desprotonados (NH2).
En este punto, la variacin de pH, si adicionamos NaOH a la solucin, es
mnima. Por lo tanto, en este punto la capacidad amortiguadora es mxima.
En el punto de pKa para el grupo carboxil existe el 50% de radicales carboxil
protonados (COOH) y el otro 50% de radicales carboxil desprotonados
(COO-). En este nivel de pH el aminocido tambin es buen amortiguador.
En el punto isoelctrico de los aminocidos sin cadena radical cida o bsica
se encuentra a medio camino entre el pKa del grupo amino y el pKa del
grupo carboxil. Y encontramos el aminocido en su forma zwitterin, com
ambos grupos funcionales ionizados: NH3+ y COO-.
El punto isoelctrico de los aminocidos con cadenas protonables es
diferente ya que existe un tercer pka, que corresponde al valor de pH en el
cual el protn de la cadena lateral se disocia.
As, vemos como esta capacidad para captar y ceder protones convierte a
las protenas y aminocidos en amortiguadores del pH, actuando como
cidos si estn protonados, o como bases, si no lo estn.
Muchas protenas tienen grupos protonables en la cadena radical variable,
as cada protena o aminocido tiene su punto isoelctrico y sus pKa
caractersticos para cada grupo protonable del radical variable.

Los pKa pueden verse afectados por radicales prximos y as, puede variar
calidad amortiguadora de los aminocidos segn radicales de su entorno.
Por ejemplo, la histidina, prxima al grupo hemo en la hemoglobina, tiene
pK muy diferentes segn si est unida al oxgeno o no.
Cuando los aminocidos se unen formando pptidos mediante enlaces entre
el grupo COOH de un aminocido y el grupo NH2 de otro, desaparecen sus
propiedades amortiguadoras. Ahora bien, siempre existen los grupos
terminales y tambin los grupos ionizables de las cadenas laterales de los
aminocidos: cido asprtico y glutmico, arginina, lisina, histidina, etc. As,
para determinar su capacidad amortiguadora, solamente observaremos los
pK de los terminales y de los laterales ionizables.
[editar]Aplicaciones industriales de las soluciones tampn
Como hemos visto las soluciones tampn son muy tiles para el
mantenimiento del pH en sistemas biolgicos, como por ejemplo el cuerpo
humano, pero sus propiedades van mucho ms lejos y son ampliamente
usadas en las industrias actuales.

En la Industria agrcola, las soluciones tampn se usan para la

fertirrigacin y la agricultura hidropnica (cultivar plantas usando
soluciones minerales y no suelo agrcola). Todas las plantas tienen un
intervalo de pH en que las races absorben nutrientes de forma
idnea. Una variacin del pH puede afectar al proceso de absorcin
de las races: disminuyendo la captacin de minerales y aumentando
la permeabilidad a sustancias txicas como el aluminio. A su vez, una
variacin en el pH afecta la solubilidad de la mayora de minerales.
Existe un pH idneo para cada planta dependiendo de su fisiologa i
de los minerales que requiere, pero, como norma general, podemos
decir que precisan un pH ligeramente cido (5.5-7) salvo excepciones
como las habas con pH un tanto bsico (7.4-8.1)

En la Industria alimentaria tambin son de gran importancia los

parmetros del pH ya que, por ejemplo, nos indica si la carne es apta
para el consumo humano. Si la carne est entre 5.4 i 7.0 de pH, es
apta para el consumo, pero a lo largo del tiempo el pH disminuye,
hecho que indica que su consumo no es pertinente. En la industria
vincola, se deben de tener muy en cuenta las variaciones de pH en la
elaboracin del vino, este debe oscilar entre 2.8 i 3.5, puesto que a
pH superior a 3.5 determinadas bacterias pueden atacar el vino y
producir variaciones en el sabor.

Es sin duda alguna en la Industria farmacutica en la que se debe

tener un control y conocimiento ms exhaustivo del pH, por distintas
razones:

1. Primeramente, para el diseo de los medicamentos es necesario

saber el pH de la zona del cuerpo en que trabajar el frmaco, pues si

bajo ese pH las protenas que queremos usar se desnaturalizan el

medicamento no tendr efecto alguno.
2. En el proceso de formulacin de los frmacos se usan las propiedades
fisicoqumicas del pKa y el pH para elegir la frmula ptima del
medicamento
3. En los ensayos previos a la comercializacin de los medicamentos se
requiere un control del pH para garantizar que los resultados
obtenidos sean reales i ciertos, pues un pH errneo podra dar
resultados falsos.
[editar]Experiencias con soluciones tampn
En bioqumica, como ya hemos expuesto, es necesario controlar el pH de los
medios en los que trabajamos, especialmente si queremos estudiar el
comportamiento de cualquier sustancia con base proteica como, por
ejemplo, enzimas o la separacin de biomolculas con capacidad de
ionizacin. Por eso, es necesario saber preparar un tampn y poder predecir
cual ser su comportamiento durante la experiencia.
Las soluciones tampn como ya sabemos son mezclas de cidos y bases
dbiles y sus propiedades dependen directamente del pKa. El pH del punto
de equilibrio (punto de inflexin de la grfica que dibujaremos) corresponde
al pKa. Este punto es importante porque es el punto en que la capacidad
tampn del sistema es mayor. Es decir que dependiendo de qu nos
interesa estudiar prepararemos un determinado tampn.
Pondremos ahora un ejemplo para poder entender el proceso con claridad.
Supongamos que deseamos preparar un tampn de 100mL A-/Ah de pKa 7.1
a pH 7.4 y una concentracin 0.1M:
Usamos la ecuacin de Henderson-Hasselblach para el cociente entre
concentracin A-/AH.

Perfil de disociacin de tres tampones qumicos diferentes

pH=pKa+log([A-]/[AH])
7.4=7.1+log([A-]/[AH])
log([A-]/[AH])= 7.4-7.3=0.3
[A-]/[AH]= 10^0.3=1.995.
Queremos 100mL de tampn a 0.1M: 0.1M*0.1l= 0.01
x+y=0.01

y=0.01-x
[A]/[AH]= y/x
[A]/[AH]= (0.01-x)/x=1.995
x=0.0034 moles AH
y=0.01-x
y=0.01-0.0034=0.0066 moles ADe esta forma, sabemos los moles de cido y sal que necesitamos para
preparar la solucin tampn de 100mL a 0.1 M. A partir de los resultados,
obtendremos grficos parecidos al de la imagen de la izquierda. Sin
embargo, en nuestro caso el punto de equivalencia estara en un pH de 7.1.
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