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UNIVERSIDAD NACIONAL DE EL SALVADOR


FACULTAD MULTIDISCIPLINARIA ORIENTAL
DEPARTAMENTO DE MEDICINA
SECCION DE BIOQUIMICA

ASIGNATURA :Bioqumica I
ACTIVIDAD

: Discusin #1 ( Bloque III)

Regulacin del pH en el organismo


CATEDRATICO :Dr. Mario Arturo Castro

ALUMN@S
:
Aparicio Morales , Jaren Ludin
Argueta Martnez , Laura Alejandra
Arriaga Martinez , Laura Esperanza
Ayala Ortez , Kevin Josue
Alvarez Perez , Angel David
Amaya Parada, Monica Rocio
Aviles Quintanilla , Jesus Alberto
CARRERA :Doctorado en Medicina

AO:2

CICLO : I

Fecha de entrega : Mircoles 16 de febrero de 2014

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Indice

Temas

N` de
pagina

Justificacin -------------------------------------------3
Introduccin --------------------------------------------4
Objetivos

--------------------------------------------5

Desarrollo de objetivos -------------------------------6


Conclusiones -------------------------------------------19
Glosario -------------------------------------------------20
Bibliografa ---------------------------------------------22

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Justificacin.
El presente trabajo nos muestra de una forma entendible la
regulacin del pH en el organismo, siendo tema de gran
importancia para nuestro conocimiento, y como estudiantes
de doctorado en medicina, primeramente conoceremos sobre
los sistemas buffer ms importantes en la regulacin del pH
intra y extracelular (medio ambiente interno). Sabiendo sobre
el tema podremos comparar los sistemas que mantienen en
equilibrio cido-base en nuestro organismo; la investigacin
nos muestra la accin de los sistemas amortiguadores usando
curvas de titulacin; para finalmente poder explicar dentro de
que valores (rango) de pH un buffer determinado ejercer su
mxima accin amortiguadora, conociendo anticipadamente
el valor de pKa del acido que lo forma.

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Introduccin
Los sistemas amortiguadores o mayormente conocidos como
buffer son aquellos que ante cualquier adicin de cidos o
bases evitan que el pH se eleve o descienda de manera
brusca. En el organismo son importantes debido a que si estos
no podra tan siquiera existir la vida
Los sistemas buffer mas importantes en el organismo para
regular o mantener los niveles de pH intracelular y
extracelular son aquellos que pueden evitar que el organismo
pueda caer en estado acido o bsico que pueda llevar a la
muerte ,
Estos son los tampones como el bicarbonato, fosfato, sistema
de protenas, pero al comparar cada uno de estos nos damos
cuenta de que existen ciertas diferencias entre ello como en
que sistema del organismo actan, el tiempo en el que estos
buffer actan, en que forma ayudan a nuestro organismo. La
manera practica de poder observar la forma en como actan
los sistemas buffer son mediante experimentos que
explicaremos mas adelante as como la elevacin o descenso
de PH cuando el buffer no tiene la capacidad de soportar
adiciones de cidos o bases. Tambin demostraremos que
mediante el conocimiento de la constante de acidez Ka
podemos determinar dentro de que valores un buffer realizara
su mayor accin amortiguadora. Esto es posible de comprobar
mediante la formula de pH = pK1

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Objetivos

9- sealar los buffer ms importantes para la regulacin del


pH intra y extra celular.

10- cuadro comparativo sistemas buffer que mantienen el


equilibrio acido-base.

11- analizar los resultados obtenidos en la parte a de su


experimento.

12- explicar la accin de los amortiguadores mediante curvas


de titulacin .

13. comprobar dentro de que valores de ph ejercer un buffer


su mxima accin amortiguadora conociendo el valor de pka
del cido que lo forma.

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Desarrollo de objetivos
9- SEALAR LOS BUFFER MS IMPORTANTES PARA LA
REGULACIN DEL PH INTRA Y EXTRA CELULAR:

El pH : es el logartmico negativo de la concentracin de iones


hidrgeno

Valores normales
Neutro : 7
que 7

cida : menor

Principales lquidos biolgicos

a 7.

Bsica : mayor

- pH

Sangre. 7.4
Orina 5.8 60
Saliva 7.3 7.0
Liquido cefalorraquideo - 7.5 7.7
Jugo gstrico 1.0 20
Jugo pancretico - 7.8 8.0
-Sistema amortiguadores
Mantienen
el
homeostticos

pH

constante

mediante

mecanismos

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Que es Homeostasis (del griego homoque significa "similar" y


estasis "estado", "estabilidad").
Es una propiedad de los organismos vivos que consiste en su
capacidad de mantener una condicin interna estable .
La homeostasis es una forma de equilibrio dinmico posible
gracias a una red de sistemas buffer que constituyen los
mecanismos de autorregulacin de los seres vivos.
Ya que el organismo no soporta variaciones mayores a una
dcimas, esto consiste en un cido dbil q libera un ion de
hidrgeno y una base conjugada q es el aceptor de protones .
Que es un BUFFER: es un sistema formado por un cido dbil
y una sal fuerte de dicho cido, que funciona como base. En
los lquidos corporales, tanto extra como intracelulares,
existen buffers cuya misin es amortiguar, es decir, disminuir
los cambios de acidez de una solucin cuando a sta se le
aade un cido o un lcali y conseguir, por lo tanto, que el pH
de la solucin cambie lo menos posible; su efecto es
prcticamente inmediato. Lo ideal es que un buffer tenga la
misma cantidad de sus dos componentes (cido y base), para
amortiguar tanto un cido como una base.

* Los buffer o soluciones amortiguadoras


importantes a nivel intra y extracelular son :

ms

- Tampn bicarbonato (sistema respiratorio: acta en fraccin


de min)
Consiste en una solucin acuosa con dos componentes: un
cido dbil (el cido carbnico o H2CO3) y una sal
bicarbonato, por ejemplo bicarbonato de sodio (NaHCO3). El
H2CO3, se forma en el organismo mediante la reaccin:
CO2 + H2 H2CO3

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Esta reaccin es lenta y las cantidades de H2CO3 que se


forman son pequesimas a menos que tenga lugar en
presencia de la enzima anhidrasa carbnica. Esta enzima es
especialmente abundante en las paredes de los alvolos
pulmonares, desde se libera el CO2; tambin se encuentra en
las clulas epiteliales de los tbulos renales, donde el CO2
reacciones con el H2O para formar el H2CO3.
El H2CO3 se ioniza dbilmente para formar pequesimas
cantidades de H+ y de HCO3- .
H2CO3 H+ + HCO3El segundo componente del sistema, el bicarbonato, se
encuentra principalmente en forma de sal sdica (NaHCO3) .
El NaHCO3 se ioniza casi por completo, formando iones de
bicarbonato (HCO3-) y de sodio (Na+): NaHCO3 Na+ +
HCO3- Tampn fosfato ( sistemas renales : acta en fraccin de
hora)
El sistema amortiguador de fosfato interviene sobre todo en el
amortiguamiento del lquido de los tbulos renales y de los
LIC. Los elementos principales de este sistema son H2PO4(anin fosfato dicido) y HPO4+ (catin fosfato monocido).
Cuando se aade a una mezcla de estas sustancias un cido
fuerte, se produce lo siguiente:
HCl + Na2HPO4 NaH2PO4 + NaCl
El sistema amortiguador del fosfato es especialmente
importante en los lquidos tubulares de los riones porque el
fsforo suele concentrarse mucho en esos tbulos. Adems es
importante para el amortiguamiento de los LIC, ya que la
concentracin de fosfato en estos lquidos es muy superior a
la que existe en los LEC.
- Sistema de las protenas (Hemoglobina)
Gracias a sus elevadas concentraciones, sobre todo en el
interior de las clulas, las protenas son uno de los

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amortiguadores ms importantes del organismo. Constituyen


el amortiguador ms abundante en el LIC y en el plasma.
La hemoglobina es una protena que resulta especialmente
eficaz como amortiguador dentro de los eritrocitos, en tanto
que la albmina constituye la principal protena
amortiguadora en el plasma.
Como las protenas se componen de aminocidos, contienen
al menos un grupo carboxilo (-COOH) y al menos un grupo
amino (-NH2); estos grupos son los elementos funcionales del
sistema amortiguador protenico.
El grupo carboxilo libre en un extremo de la protena acta
como cido al liberar H+ cuando se eleva el pH. En esta forma
el H+ puede reaccionar con cualquier exceso de OH- que hay
en la solucin para formar agua.
El grupo amino libre que se encuentra en el otro extremo de la
protena puede actuar como base y combinarse con H+
cuando disminuye el pH.
Por consiguiente, las protenas pueden amortiguar tanto los
cidos como las
bases. Adems de los grupos terminales carboxilo y amino,
siete de los 20 aminocidos tienen cadenas laterales que
pueden amortiguar el H+.
En resumen, el hgado metaboliza las protenas produciendo
iones hidrgeno ( H+ ), el pulmn elimina el dixido de
carbono ( CO2 ), y el rin generando nuevo bicarbonato
( H2CO3 ).

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10- CUADRO COMPARATIVO SISTEMAS BUFFER QUE


MANTIENEN EL EQUILIBRIO ACIDO-BASE
SISTEMA
AMORTIGUADOR
BICARBONATO

OTROS
SISTEMAS SISTEMA
DE REGULATORIOS:
AMORTIGUADOR
PULMN Y RIN
FOSFATO

Es
el
sistema
ms
importante
en
el
lquido extracelular
(especialmente en la
sangre). Se compone de
dixido
de
carbono
(CO2), agua (H2O), cido
carbnico (H2CO3), ion
de hidrgeno (H+) y
anin carbonato cido
(HCO3-, muchas veces
llamado bicarbonato.

Ya
hemos
mencionado el rol
central
que
el
pulmn juega en la
regulacin
del
equilibrio
cidobsico mediante la
exhalacin
o
retencin del CO2. Si
se
produce
un
desequilibrio
que
supera la capacidad
CO2 + H2O <=> H2CO3 de
los
sistemas
<=> H+ + HCO3amortiguadores,
el
cuerpo
reacciona
Durante la respiracin aumentando
o

DE

El
sistema
amortiguador
de
fosfato
interviene
sobre todo en el
amortiguamiento del
lquido de los tbulos
renales y de los LIC.
Los
elementos
principales de este
sistema son H2PO4(anin
fosfato
dicido) y HPO4+
(catin
fosfato
monocido). Cuando
se aade a una
mezcla
de
estas
sustancias un cido

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celular se produce CO2


como
producto
de
desecho. Reacciona con
el agua para formar
el cido carbnico, una
reaccin
que
es
catalizada por la enzima
anhidrasa carbnica. La
disociacin de H2CO3 en
iones
no
necesita
catalizador. La sangre
que pasa el pulmn
libera el CO2 otra vez y
este es eliminado por la
respiracin. Cuando hay
exceso de H+, segn el
principio de Le Chatelier
el equilibrio se desplaza
hacia la izquierda, es
decir se produce ms
CO2 que es eliminado
por el aire expiratorio.
De
esa
manera
se
"exhala"
la
acidez
excedente.

disminuyendo
frecuencia
respiratoria.

la fuerte, se produce lo
siguiente:

Es un mecanismo a
corto plazo ya que la
respiracin reacciona
dentro de minutos a
cambios
del
pH
sanguneo.
La
regulacin mediante
el
rion
es
un
mecanismo a largo
plazo; reacciona ms
lentamente. Es capaz
de retener o excretar
bicarbonato (HCO3-)
y H+ segn sea
necesario.

HCl + Na2HPO4
NaH2PO4 + NaCl
El
sistema
amortiguador
del
fosfato
es
especialmente
importante en los
lquidos tubulares de
los riones porque el
fsforo
suele
concentrarse mucho
en
esos
tbulos.
Adems
es
importante para el
amortiguamiento de
los LIC, ya que la
concentracin
de
fosfato
en
estos
lquidos
es
muy
superior a la que
existe en los LEC.

El sistema bicarbonato es de los amortiguadores mas


importantes por muchos motivos produce CO2 y su transporte
es H2CO3 etc.

ROL DEL APARATO RESPIRATORIO


el aparato respiratorio dispone de sensores exquisitamente
sensibles a las variaciones de pH. Su estimulacin por un
aumento de la concentracin de hidrogeniones, como ocurre
por la produccin de cido lctico en el ejercicio, determina un
incremento de la ventilacin que elimina una mayor cantidad

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de CO2, lo que tiende a mantener constante el pH. A la


inversa, una cada de la concentracin de hidrogeniones deja
de estimular la ventilacin. Lo valioso de este mecanismo en
su rapidez , pero es limitado porque la ventilacin tiene
tambin otras exigencias que cumplir.

ROL DEL RION


El rin participa en la regulacin del equilibrio cido bsico
por dos mecanismos principales. Por una parte, es capaz de
regular la cantidad de bicarbonato urinario, ya que puede
excretar los excesos de este ion o reabsorber el bicarbonato
filtrado. Por otra parte, el rin es capaz de excretar
hidrogeniones en la forma de H3PO4 o de NH4+. Durante este
proceso se genera nuevo bicarbonato, lo que hace posible el
reemplazo de aquel que se consumi al tamponar los cidos
fijos. La acidemia tiende a aumentar la excrecin urinaria de
hidrogeniones y la retencin de bicarbonato, mientras que la
alcalemia tiene los efectos contrarios. Estas funciones
compensatorias son lentas, ya que demoran entre 12 y 72
horas en alcanzar su mxima eficiencia. Por lo tanto, el rin
participa en la mantencin del equilibrio cido-bsico a largo
plazo.

SISTEMA DE FOSFATO
El tampn fosfato est compuesto por el hidrgeno fosfato
(HPO4-2) y el dihidrgeno fosfato (H2PO 4-). Acta en el plasma
y el lquido intersticial. Este tampn tiene un pKa de 6,8, el
cual est mucho ms cerca del pH plasmtico. Esto
significara que este tampn tendra que ser ms til que el

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anterior, pero no es as ya que se encuentra en


concentraciones menores en sangre y la eliminacin del
fosfato es mucho ms lenta, por va renal.
En conclusin:
los sistemas amortiguadores poseen similitudes en cuanto a
su accin en el organismo SON IMPORTANTES PARA LA VIDA.
A nivel celular se producen reacciones qumicas que liberan
residuos de naturaleza cida y deben ser eliminados del
organismo a travs de las vas naturales de excrecin
(riones, intestino, piel y pulmones). Para cumplir
adecuadamente esta tarea la sangre debe mantener un ligero
nivel de alcalinidad. Tal es as que en una persona sana el pH
de la sangre se ubica entre 7,40 y 7,45

11- ANALIZAR LOS RESULTADOS OBTENIDOS EN LA PARTE A


DE SU EXPERIMENTO.
Realizacin del ejercicio:

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Tubo 1 y 3: en la practica observamos que la adicin


de pequeas cantidades de un cido fuerte a una
solucin que no es buffer produce alteraciones
importantes en el valor del PH de dichas soluciones.
Tubo 2 y 4 :
En el Tubo #2 : Debido a que el agua destilada no es
una solucin buffer se ve propensa a sufrir cambios
bruscos de PH, ya que no tiene un sistema de accin
que la ayude a compensar los iones OH - que recibe de
la base por lo que se vuelve alcalina.
En el tubo# 4: que contena una solucin buffer estos
iones hidroxilo fueron compensados con las
molculas de cido actico por lo que no se
presentaron cambios grandes en su PH, variando
solamente de 4 a 5.
Tubo
1
2
3
4

PH Inicial
7
7
4
4

PH Final
2
11
3
5

Explicacin:

En resumen la adiccin de pequeas cantidades de cido o


base fuerte a una solucin buffer casi no ocasiona cambios en
el valor del ph de la solucin por el contrario, las mismas
adiciones hechas al agua producen alteraciones importantes
en el valor del ph de dichas soluciones.

Supongamos un amortiguador constituido de cido actico y


acetato de sodio. El cido estar parcialmente disociado
estableciendo un equilibrio entre las partculas de cido sin

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disociar los iones hidrgenos y los iones de base conjugada. El


acetato de sodio, como todas las sales, est disociado
completamente y, por esta causa, el in acetato procedente
de la sal desplaza el equilibrio hacia la formacin de cido,
disminuyendo la concentracin de hidrogeniones libres. La
presencia conjunta de la sal y el cido hace decrecer la acidez
libre. Si las cantidades de sal y cido son del mismo orden de
magnitud, la concentracin de iones hidrgenos se regular
por la reaccin de equilibrio del cido.
Es decir:
CH3-COOH CH3-COO - + H+

En condiciones in vitro, el amortiguador bicarbonato/anhdrido


carbnico es un sistema abierto en el que la concentracin de
anhdrido carbnico disuelto se mantiene constante. Cualquier
exceso de anhdrido carbnico producido por la reaccin entre
el ion hidrgeno y el ion bicarbonato es eliminado por los
pulmones y contribuye, por lo tanto, a mantener el pH
alrededor de 7.4.
A primera vista, podra aparecer que en un sistema abierto, la
reserva de bicarbonato se agotara rpidamente. Sin
embargo, in vitro, el bicarbonato se recupera constantemente
mediante los procesos metablicos oxidativa.
Si aadimos al sistema un cido fuerte, por ejemplo cido
clorhdrico, se produce un aumento instantneo de la
concentracin de iones hidrgenos, los cuales son
neutralizados por la base conjugada del cido liberando as,
una cantidad equivalente de cido dbil. Si aadimos al
sistema una base fuerte, por ejemplo hidrxido de sodio, los
iones hidroxilos consumen rpidamente iones hidrgenos del
sistema para formar agua, lo que provoca la transformacin

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de una parte del cido actico libre en acetato que es una


base menos fuerte que el hidrxido de sodio.

12- EXPLICAR LA ACCIN DE LOS AMORTIGUADORES


MEDIANTE CURVAS DE TITULACIN:
Definicin de curvas de titulacin:
La titulacin cido-base es un procedimiento analtico cuyo
objetivo es determinar la concentracin de un analito con
propiedades cidas o bsicas, utilizando una disolucin
valorada de una base o cido, mediante una reaccin de
neutralizacin para formar una sal y agua.
Asimismo, mediante una titulacin tambin es posible deducir
el pK del analito.
Las
valoraciones
cido-base
poseen
las
siguientes
caractersticas
- Se basan en una reaccin volumtrica cido-base.
- El fundamento terico de dicha reaccin es la transferencia
de protones entre el cido y la base
- El intervalo de viraje se caracteriza por un cambio brusco del
pH.
- Se necesita un indicador qumico o un pHmetro para
monitorizar la valoracin.
Las curvas de titulacin son las representaciones grficas de
la variacin del pH durante el transcurso de la valoracin.
Dichas curvas nos permiten:
- estudiar los diferentes casos de valoracin
- determinar las zonas tamponantes y el pKa.
- determinar el intervalo de viraje y el punto de equivalencia.
- seleccionar el indicador cido-base ms adecuado.

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Los casos ms frecuentes en Bioqumica son las valoraciones


de cidos y bases dbiles, ya que muchos metabolitos
presentan un cierto carcter cido bsico.
A modo de ejemplo, a continuacin se presenta la curva de
titulacin del Tris, una base dbil, que se ha de titular con
un cido fuerte (ej. HCl)

cido fuerte = cido titulante (HCl) vs. base dbil = analito


(Tris)

Fases de una curva de titulacin


En esta curva de valoracin se pueden distinguir las
siguientes fases
1. Antes de aadir el cido: BH +OH B+ H2O +
El pH de la disolucin viene determinado por el pKb (=14-pKa)
y predomina la base conjugada dentro del par.
2. Al ir aadiendo el cido titulante (HCl), se forman las
especies B = Tris y BH+ = TrisH+.

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3. PE = Punto de equivalencia. Es el pH al cual se cumple que


N.meq.acido = N.meq.base y se localiza en el punto medio del
intervalo de viraje.
En el punto de equivalencia toda la base se ha transformado
en su forma cida conjugada, y se cumple que + B= BH ;
en nuestro caso, B = Tris, por lo que + Tris TrisH .
Teniendo en cuenta que se emplea un cido fuerte y una base
dbil en esta valoracin, el punto de equivalencia (PE) se
localiza a pH < 7, por lo que se habla de una HIDRLISIS
ACIDA.
4. En este tramo de la curva existe un exceso de H3O+
provenientes de la hidrlisis del cido fuerte, y por lo tanto, el
pH de la disolucin viene definido por el exceso del cido
titulante.
La accin de los amortiguadores puede describirse mediante
curvas de titulacin. En el centro de la curva (la zona de
amortiguacin) el pH es igual al pka del cido o base dbil.

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13- COMPROBAR DENTRO DE QUE VALORES DE PH


EJERCER
UN
BUFFER
SU
MXIMA
ACCIN
AMORTIGUADORA, CONOCIENDO EL VALOR DE PKA
DEL ACIDO Q LO FORMA:
La mxima de accin de un buffer se da cuando la cantidad
de sal es igual a la cantidad de acido
pH=pK
Pero su rango de accin se da cuando la relacin del acido
con respecto a su base es de 1:10 o es de 10:1
pH=pK1
El pKa =-log Ka
La capacidad ser mayor en un sistema mas concentrado
La capacidad amortiguadora es mxima cuando el coeficiente
Sal/acido es prxima a la unidad
Si tenemos 50 molculas de acido actico y 50 de acetato de
sodio el pH=pK
Si en este punto aadimos acido o sal en cantidades un poco
altas el buffer puede sufrir un brusco cambio de pH
El pKa de el buffer bicarbonato es 6.1
El pKa de el buffer fosfato es de 6.8
Cada sistema buffer tiene su propio rango efectivo de pH el
cual depender de la constante de equilibrio del acido o base
empleado.
Son importantes en la qumica de la vida, en laboratorio, en
industrias y otras cosas

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pH=pKa + log ([S]/[A])


Los buffer son mas efectivos en el rango pH=pKa 1

Conclusiones

Podemos concluir que los diferentes sistemas buffer estn


encargados de mantener el equilibrio acido- base de nuestro
organismo tanto en nivel intracelular como tambin en el
extracelular y que sus funciones son actuar de diversas
maneras y en diversos sistemas esto no significa que no sean
sumamente importante, nicamente uno tiene mas relevancia
que los dems claro es el ejemplo de el buffer bicarbonato
que acta en el sistema respiratorio y en el renal.
As como la diferencia de el comportamiento de variacin de
pH de el agua y un buffer al agregar cidos o bases, cierto es
que el agua puede actuar como acido y como base pero no
por eso pueda ser un buffer o tampn. En cambio un buffer
puede aceptar cidos o bases sin que su pH inicial se altere en
gran cantidad.
La curva de titulacin nos puede ayudar a identificar si el
tampn esta o no realizando su funcin correctamente,
cuando el amortiguador mantiene el pH igual al pKa es
entonces cuando se esta efectuando la accin de los

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amortiguadores. Hemos demostrado que la mxima accin de


los buffer va a depender de su constante de acidez y dentro
de que valores se ejercer la mayor accin y que puede
calcularse sabiendo el valor de pKa con la siguiente formula
pH=pK1

GLOSARIO

Acido: Sustancias que ceden protones en una solucin


acuosa.

cidos o Bases Fuertes: Son los que se disocian por


completo en una solucin acuosa.

cidos o Bases Dbiles: Son los que se disocian de forma


parcial en una solucin acuosa.

Base: Sustancias que pueden recibir protones en una solucin


acuosa.

Desequilibrio Acido-Base: Son aquellos que afectan el


balance cido-base normal y que causa como consecuencia
una desviacin del pH sanguneo

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Equilibrio Acido-Base: Es el mantenimiento de un nivel


normal de la concentracin de iones hidrogeno (H+) en los
fluidos del organismo. El (H+) es un protn.

PH: es el logartmico negativo de la concentracin de iones


hidrgeno.

Sistema Amortiguador: son aquellas soluciones cuya


concentracin de hidrogeniones vara muy poco al aadirles
cidos o bases fuertes

Sistema Tampn: Est constituido por una base dbil y su


base conjugada que actan por el
cambio de PH.
Sistema amortiguador de bicarbonato: Es el sistema ms
importante en el lquido extracelular (especialmente en la
sangre).

El sistema amortiguador de fosfato: es el que interviene


sobre todo en el amortiguamiento del lquido de los tbulos
renales y los liquidos corporales.

Que es un analito : es el componente (elemento, compuesto


o ion) de inters analtico de una muestra. Son especies
qumicas cuya presencia o concentracin se desea conocer.

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Titulacin: es el procedimiento para determinar la


concentracin de un cido o una base en solucin, por medio
de la adicin de una base o un cido de concentracin
conocida.

TRIS: Se utiliza ampliamente en bioqumica y biologa


molecular, en particular para preparar
disoluciones tampn (por ejemplo, tampones Tris-HCl, TrisGly, TAEy TBE). Es una amina primaria.

LIC: lquidos corporales.

Hidrolisis acida: es utilizar acido para romper o dividir un


compuesto.

Bibliografia

http://www.buenastareas.com/regulacionphenelorganismo

http://books.google.com.sv/regulaciondelph

http://www.mednet.clbuffermoreimportantintracelular/link.cgi/Medwave/PuestaDia/
Cursos/3608

22

http://www.encolombia.com/medicina/sociedadescien/diabetesaldia2104valordepKa2.htm