MICROSCOPIAS

Se han diseado tcnicas microscpicas ms complejas que incrementan el

contraste sin afectar la resolucin. Son artificios que proporcionan efectos pticos en la
muestra, permitiendo que aquellos detalles que pasan desapercibidos se traduzcan en
cambios de intensidades luminosas las cuales si pueden ser reconocidas por el ojo
humano. Los principios bsicos de estas tcnicas especiales de microscopa se basan en:
La modificacin de la manera como incide la luz sobre el espcimen: Empleo de
condensadores y filtros:
- Microscopio de campo oscuro.
- Microscopio de contraste de fase.
- Microscopio de luz polarizada, Microscopio petrogrfico y metalrgico.
- Contraste por interferencia diferencial (Differential Interference Contrast) Nomarski.
La modificacin de la fuente emisora de luz: Cambiando la luz blanca por luz
ultravioleta o rayos lser:
- Microscopio de luz ultravioleta.
- Microscopio de fluorescencia.
- Microscopio confocal.
Aplicaciones de las distintas tcnicas en microscopia y las imgenes que de ellas se
pueden obtener, junto con las ilustraciones de los microscopios :
MICROSCOPIO OPTICO
Se da uso en el laboratorio de histologa y anatoma patolgica, donde la microscopa
permite determinadas aplicaciones diagnsticas, entre ellas el diagnstico de certeza del
cncer, numerosas estructuras cristalinas, pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos,
depsitos de amiloide, etctera.
http://goo.gl/xP2g4E

MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO

Esta es ideal para revelar contornos, bordes, fronteras y gradientes de ndice de
refraccin pero no brinda mucha informacin sobre la estructura interna. Los objetos
ideales incluyen clulas vivas sin tincin (donde el campo oscuro brinda informacin no
visible con otras tcnicas), aunque tambin se pueden observar exitosamente clulas fijas
teidas. Las imgenes de campo oscuro son particularmente tiles en hematologa para
examinar sangre fresca. Los especimenes no biolgicos incluyen minerales, cristales
qumicos, partculas coloidales, inclusiones y porosidad en vidrio, cermicas, y secciones
delgadas de polmeros.

Glbulos rojos y fibrina en microscopio de campo oscuro

http://goo.gl/4KRf
P5
MICROSCOPIO DE CONTRASTE DE FASES
La imagen de contraste de fases es aplicable a varios objetos transparentes, como clulas
vivas en cultivos, micro-organismo, rebanadas delgadas de tejido, patrones litogrficos,
vibras, dispersiones de ltex, fragmentos de vidrio, y partculas subcelulares (incluyendo
ncleos y otros organelos) donde la tcnica revela estructuras que no son visibles en
campo claro. Una ventaja de la microscopia de contraste de fases es que las clulas vivas
pueden ser observadas en detalle sin la necesidad de teirlas o usar fluorforos.

http://goo.g
l/KebjRQ
Micrografa de clulas epiteliales en cultivo
mediante la tcnica de contraste de fases brillante
o negativo
http://goo.gl/K65vJj
MICROSCOPIO DE LUZ POLARIZADA
La microscopia de luz polarizada es tal vez mejor conocida por sus aplicaciones
geolgicas principalmente por el estudios de minerales en secciones delgadas de rocas
pero tambin se puede usar para estudiar varios materiales ms incluyendo minerales
naturales e industriales (refinados, extrados o fabricados), compuestos como cementos,
cermicas, fibras minerales y polmeros, y molculas biolgicas cristalinas o altamente
ordenadas como el DNA, almidn, madera y urea. La tcnica puede ser usada tanto
cualitativamente como cuantitativamente en las ciencias de materiales, geologa, qumica,
biologa, metalurgia y medicina.

http://goo.gl/EtwuMd

http://goo.gl/NA1RDJ

Microscopio de Luz Polarizada. Se observan las siguiente estructura que consta de una
muestra de hueso
MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA
Aplicaciones del microscopio
Estudio de clulas vivas, no coloreadas.
En el estudio de especmenes un tanto gruesos que no permiten el uso de contraste de
fases.
En tratamientos de fertilizacin in-vitro.

http://goo.gl/HC9mWA

https://goo.gl/ectcJV
Micrografa de contraste por interferencia diferencial de clulas epiteliales. Ntese el
aspecto tridimensional
MICROSCOPIO DE INTERFERENCIA
En investigaciones en el campo de la biologa celular y biomedicina es muy til para medir
procesos dinmicos, realizar videos para capturar secuencias en muy corto tiempo en
clulas vivas y otras aplicaciones (120, 122, 123, 124, 125, 126):
Procesos celulares: Para medir actividades enzimticas, reacciones de oxidacin, pH
intracelular, fagocitosis, apoptosis, comunicaciones intercelulares. Electrofisiologa.
Estudios de ADN y ARN.
Morfologa de organoides citoplasmticos.
Ciruga y otros mtodos clnicos.
Otras aplicaciones en el campo de la fsica, la qumica y en tecnologa alimentaria

Linfocito T
MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
APLICACIONES:

La obtencin de imgenes autofluorescentes permite visualizar molculas que estn ms

all del lmite de resolucin de la microscopia de luz. La microscopia fluorescente es una
tcnica clave en el diagnstico clnico (por ejemplo, inmunologa, patologa, microbiologa,
citogentica) y ambientes de investigacin. La microscopia fluorescente cofocal, en
particular, se ha vuelto una herramienta esencial para estudiar las dinmicas estructurales
y moleculares en clulas vivas. La fluorescencia habilita tcnicas de imagen como el TIRF,
FRET, FLIM, FLIP y FRAP. La microscopia de fluorescencia tambin es importante para
identificar minerales fluorescentes, contaminantes e impurezas en ciencias de materiales,
geologa, inspeccin de semiconductores, y proteccin ambiental.
Macrfago (rojo) engullendo una bacteria de tuberculosis (amarillo).

http://goo.gl/acqfj4
MICROSCOPIO DE LUZ Ultravioleta
. El mtodo sirve para detectar cidos nucleicos, protenas que contienen determinados
aminocidos. Mediante longitudes de ondas especficas para la iluminacin se puede
obtener mediciones espectrofotomtricas para cuantificar el ADN y el ARN de cada clula.
Se emplea en ciencia forense para el anlisis de ADN, drogas y estudios de evidencias.

Estudios biolgicos

MET
Algunas aplicaciones del Microscopio electrnico de transmisin:
Estudios de ultraestructura de tejidos vegetales, animales y humanos (91,92, 93).
Realizacin de estudios de histoqumica e inmunohistoqumica para identificar
compuestos especficos.
Reconocimiento de virus y sus caractersticas ultraestructurales.
Estudios de citoqumica.
Estudios de estructuras moleculares.
Determinacin de estructura cristalina en minerales, metales y otros materiales.
Estudio de fases y zonas cristalinas en polmeros.
Determinacin del tamao de partculas.
Cambios estructurales de materiales sometidos a diferentes tratamientos.

http://goo.gl/SSrFNu
MEB
Algunas aplicaciones del Microscopio electrnico de barrido:
Morfologa de clulas y tejidos animales, humanos o vegetales (91).
Morfologa interna de clulas y tejidos.
Morfologa superficial de minerales.

 Formas de cristalizacin de minerales.

Cambios morfolgicos de materiales sometidos a tratamientos qumicos.
Estudio de molculas.
Reconocimiento de fsiles.

https://goo.gl/2DcNql
http://goo.gl/pCuzYE
Permite controlar la difusin de tomos ligeros enterrados bajo una superficie.