Microscopio ptico

Microscopio ptico.Descripcin:A) ocular,B) objetivo, C)

portador del objeto, D) lentes de la iluminacin, E) sujecin
del objeto, F) espejo de la iluminacin.
Un microscopio ptico es un microscopio basado
en lentes pticos. Tambin se le conoce como microscopio
de luz, (que utiliza luz o "fotones") o microscopio de
campo claro. El desarrollo de este aparato suele asociarse
con los trabajos de Anton van Leeuwenhoek. Los
microscopios de Leeuwenhoek constaban de una nica
lente pequea y convexa, montada sobre una plancha, con
un mecanismo para sujetar el material que se iba a
examinar (la muestra o espcimen). Este uso de una nica
lente convexa se conoce como microscopio simple, en el
que se incluye la lupa, entre otros aparatos pticos.
ndice
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1 Historia

2 Partes del microscopio ptico y sus funciones

3 Sistema de iluminacin

4 Microscopio ptico compuesto

5 Principales elementos de un microscopio bsico

6 Poder separador, objetivos de inmersin y aumento

til
o

6.1 Las aberraciones

6.2 Correccin de las aberraciones

7 Aplicaciones del microscopio ptico

8 Microscopio estereoscpico

9 Conectar una cmara digital a un microscopio ptico

o

9.1 Mtodos bsicos

10 Vase tambin

11 Referencias

12 Enlaces externos
Historia[editar]

1608 Zacharias Jansen construye un microscopio con

dos lentes convergentes.

1611 Johannes Kepler sugiere la manera de fabricar un

microscopio compuesto.

1665 Robert Hooke utiliza un microscopio compuesto

para estudiar cortes de corcho y describe los pequeos
poros en forma de celdas a los que l llam "clulas".
Publica su libro Micrographia.

1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de

protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9 aos
despus.

1828 W. Nicol desarrolla la microscopa con luz

polarizada.

1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de

la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad
estructural y funcional en plantas y animales.

1849 J. Quekett publica un tratado prctico sobre el

uso del microscopio.

1876 Abb analiza los efectos de la difraccin en la

formacin de la imagen en el microscopio y muestra
cmo perfeccionar el diseo del microscopio.

1881 Retzius describe gran nmero

de tejidos animales con un detalle que no ha sido
superado por ningn otro microscopista de luz. En las
siguientes dos dcadas l,Cajal y
otros histlogos desarrollan nuevos mtodos de tincin y
ponen los fundamentos de la anatoma microscpica.

1886 Carl Zeiss fabrica una serie de lentes, diseo de

Abb que permiten al microscopista resolver estructuras
en los lmites tericos de la luz visible.

1908 Khler y Siedentopf desarrollan el microscopio de

fluorescencia.

1930 Lebedeff disea y construye el

primer microscopio de interferencia.

1932 Zernike inventa el microscopio de contraste de

fases.

1937 Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes,

construyen el primer microscopio electrnico.

1952 Nomarski inventa y patenta el sistema de

contraste de interferencia diferencial para el microscopio
de luz.

Partes del microscopio ptico y sus funciones[editar]

Tubo, cremallera de enfoque y tornillo macromtrico.

Oculares intercambiables de diferentes aumentos.

Tornillos macro y micromtrico.

Objetivos desmontados.

Diafragma - Condensador.

Platina y base.

Revlver.
1 * Ocular: lente situada cerca del ojo del observador.
Capta y ampla la imagen formada en los objetivos.
2 * Objetivo: lente situada en el revlver. Ampla la
imagen, es un elemento vital que permite ver a travs de
los oculares.
3 * Condensador: lente que concentra los rayos
luminosos sobre la preparacin.
4 * Diafragma: regula la cantidad de luz que llega al
condensador.
5 * Foco: dirige los rayos luminosos hacia el condensador.
6 * Tubo: es la cmara oscura que porta el ocular y los
objetivos. Puede estar unida al brazo mediante una
cremallera para permitir el enfoque.
7 * Revlver: Es el sistema que porta los objetivos de
diferentes aumentos, y que rota para poder utilizar uno u
otro, alinendolos con el ocular.
8 * Tornillos macro y micromtrico: Son tornillos de
enfoque, mueven la platina o el tubo hacia arriba y hacia
abajo. El macromtrico permite desplazamientos amplios
para un enfoque inicial y el micromtrico desplazamientos
muy cortos, para el enfoque ms preciso. Pueden llevar
incorporado un mando de bloqueo que fija la platina o el
tubo a una determinada altura.

9 *Platina: Es una plataforma horizontal con un orificio

central, sobre el que se coloca la preparacin, que permite
el paso de los rayos procedentes de la fuente de
iluminacin situada por debajo. Dos pinzas sirven para
retener el portaobjetos sobre la platina y un sistema de
cremallera que permite mover la preparacin. Puede estar
fija o unida al brazo por una cremallera para permitir el
enfoque.
10 *Brazo: Es la estructura que sujeta el tubo, la platina y
los tornillos de enfoque asociados al tubo o a la platina. La
unin con la base puede ser articulada o fija.
11 * Base o pie: Es la parte inferior del microscopio que
permite que ste se mantenga de pie.
Sistema de iluminacin[editar]
La fuente de luz (1), con la ayuda de una lente (o sistema)
(2), llamada colector, se representa en el plano
del diafragma iris de abertura (5) del condensador (6). Este
diafragma se instala en el plano focal anterior del
condensador (6) y puede variar su abertura numrica. El
diafragma iris (3) dispuesto junto al colector (2) es el
diafragma de campo. La variacin del dimetro del
diafragma de campo permite obtener su imagen igual al
campo visual lineal del microscopio. La abertura numrica
del condensador (6) supera, generalmente la de la abertura
del objetivo microscpico: es la iluminacin que permite ver
mejor lo que queremos observar como lasclulas o las
membranas celulares entre otros
Microscopio ptico compuesto[editar]
Artculo principal: Microscopio compuesto
Un microscopio compuesto es un microscopio ptico con
ms de un lente. Se utilizan especialmente para examinar
objetos transparentes, o cortados en lminas tan finas que
se transparentan.

Principales elementos de un microscopio

bsico[editar]

Diagrama simple de la ptica de un microscopio.

Los microscopios de este tipo suelen ser ms complejos,
con varias lentes en el objetivo como en el ocular. El
objetivo de estas lentes es el de reducir la aberracin
cromtica y la aberracin esfrica. En los microscopios
modernos el espejo se sustituye por una lmpara que
ofrece una iluminacin estable y controlable.
Los microscopios compuestos se utilizan para estudiar
especmenes delgados, puesto que su profundidad de
campo es muy limitada. Por lo general, se utilizan para
examinar cultivos, preparaciones trituradas o una lmina
muy fina del material que sea. Normalmente depende de
la luz que atraviese la muestra desde abajo y usualmente
son necesarias tcnicas especiales para aumentar
el contraste de la imagen.
La resolucin de los microscopios pticos est restringida
por un fenmeno llamado difraccin que, dependiendo de
la apertura numrica (AN o
) del sistema ptico y
la longitud de onda de la luz utilizada ( ), establece un
lmite definido ( ) a la resolucin ptica. Suponiendo que las
aberraciones pticas fueran despreciables, la resolucin
sera:

Normalmente, se supone una de 550 nm,

correspondiente a la luz verde. Si el medio es el aire,
la
prctica mxima es de 0,95, y en el caso de aceite
de hasta 1,5.
Ello implica que incluso el mejor microscopio ptico est
limitado a una resolucin de unos 0,2 micrmetros.
Poder separador, objetivos de inmersin y
aumento til[editar]
Poder separador
De la teora de la difraccin sobre la formacin de
imgenes mediante un microscopio se obtiene que la
distancia mnima entre dos puntos visibles por separado
es:

Donde es la longitud de onda de la luz

monocromtica en la que se observa el objeto y A es
la apertura del microscopio.
Objetivos de inmersin
El medio ptico lquido que rellena el espacio entre el
objeto y el objetivo se le denomina lquido de
inmersin. El ndice de refraccin de este es prximo
al del vidrio (se utilizaagua, glicerina, aceites de
cedro y de enebro, monobromonaftalina, entre otros).1
Aunque todos los componentes que constituyen un
microscopio son importantes, los objetivos son de
suma importancia, puesto que la imagen, en
definitiva, depende en gran medida de su calidad. Los
mejores objetivos son aquellos que estn corregidos
para las aberraciones.

Las aberraciones[editar]
Son alteraciones pticas en la formacin de la imagen
debidas a las propias lentes del objetivo.
aberraciones geomtricas (efecto Keystone)2
aberraciones cromticas
Correccin de las aberraciones[editar]
Para evitar las aberraciones geomtricas se
construyen los llamados objetivos planos o
planticos, lo cual suele estar indicado en el propio
objetivo con la inscripcin PLAN. Los objetivos que
estn corregidos para las aberraciones cromticas
se denominan acromticos (corregidos para el rojo
y el azul), semiapocromticos (corregidos para el
rojo y el azul y tienen una mayor apertura
numrica) y finalmente los apocromticos (que son
de mayor calidad y estn corregidos para el rojo, el
azul y el verde).
Aplicaciones del microscopio ptico[editar]
Este instrumento ha sido de gran utilidad, sobre
todo en los campos de la ciencia en donde la
estructura y la organizacin microscpica es
importante, incorporndose con xito a
investigaciones dentro del rea de la qumica (en el
estudio de cristales), la fsica (en la investigacin
de las propiedades fsicas de los materiales), la
geologa (en el anlisis de la composicin
mineralgica y textural de las rocas) y, por
supuesto, en el campo de la biologa (en el estudio
de estructuras microscpicas de la materia viva),
por citar algunas disciplinas de la ciencia.
Hasta ahora se da uso en el laboratorio
de histologa y anatoma patolgica, donde la
microscopa permite determinadas aplicaciones
diagnsticas, entre ellas el diagnstico de certeza

del cncer, numerosas estructuras cristalinas,

pigmentos, lpidos, protenas, depsitos seos,
depsitos de amiloide, etctera.
Microscopio estereoscpico[editar]

Microscopio estereoscpico. En la platina se aprecia

una concha de 4 cm de dimetro.

Microscopio estereoscpico.
El diseo de este instrumento, tambin llamado
lupa binocular, es distinto al del diagrama de
ms arriba y su utilidad es diferente, pues se utiliza
para ofrecer una imagen estereoscpica (3D) de la
muestra. Para ello, y como ocurre en la visin
binocular convencional, es necesario que los dos
ojos observen la imagen con ngulos ligeramente
distintos. Obviamente todos los microscopios
estereoscpicos, por definicin, deben ser
binoculares (con un ocular para cada ojo), por lo
que a veces se confunden ambos trminos. Existen
dos tipos de diseo, denominados
respectivamente convergente (o Greenough) y
de objetivo comn (o Galileo).

El diseo convergente consiste en usar dos

microscopios idnticos inclinados un cierto ngulo
uno con respecto a otro y acoplados
mecnicamente de tal forma que enfocan la
imagen en el mismo punto y con el mismo
aumento. Aunque es un diseo econmico, potente
y en el que las aberraciones resultan muy fciles de
corregir, presenta algunas limitaciones en cuanto
a modularidad (capacidad de modificar el sistema
para poner accesorios) y la observacin durante
tiempos largos resulta fatigosa.
El diseo de objetivo comn utiliza dos rutas
pticas paralelas (una para cada ojo) que se hacen
converger en el mismo punto y con un cierto ngulo
con un objetivo comn a ambos microscopios. El
diseo es ms sofisticado que el convergente, con
mejor modularidad y no genera fatiga en tiempos
de observacin largos. Sin embargo es ms costoso
de fabricar y las aberraciones, al generarse la
imagen a travs de la periferia del objetivo comn y
en un ngulo que no coincide con el eje ptico del
mismo, son ms difciles de corregir.
Los microscopios estereoscpicos suelen estar
dotados, en cualquiera de sus variantes, de un
sistema pancrtico (zoom) o un sistema de
cambiador de aumentos que permite observar la
muestra en un rango de aumentos variable,
siempre menor que el de un microscopio
compuesto. El microscopio estereoscpico es
apropiado para observar objetos de tamaos
relativamente grandes, por lo que no es necesario
modificar los objetos a ver, (laminar) ni tampoco lo
es que la luz pase a travs de la muestra. Este tipo
de microscopios permite unas distancias que van
desde un par de centmetros a las decenas de ellos
desde la muestra al objetivo, lo que lo hace muy
til enbotnica, mineraloga y en la industria
(microelectrnica, por ejemplo) como en medicina

(microscopios quirrgicos) e investigacin,

fundamentalmente en aplicaciones que requieren
manipular el objeto visualizado (donde la visin
estereoscpica es esencial).
Podramos decir que un microscopio estereoscpico
sirve para las disecciones de animales.
Conectar una cmara digital a un microscopio
ptico[editar]

Adaptador digital LM para la Canon EOS 5D.

Un adaptador ptico mecnico es importante
en fotografa digital. Dicho adaptador sirve de
enlace entre la cmara y el microscopio. Es
especialmente importante que la conexin
mecnica sea firme, pues cualquier movimiento
mnimo, es decir, vibraciones de la cmara,
reducira la calidad de la imagen notablemente.
Adicionalmente, se requiere un adaptador ptico
para el trayecto de luz con el que se lograr as que
el sensor CCD/CMOS de la cmara proyecte una
imagen de total nitidez e iluminacin.
La fotomicrografa (fotografa realizada con la
ayuda de un microscopio compuesto) es un campo
muy especializado de la fotografa, para la que hay
disponibles equipos de precio muy elevado, y no
simples equipos de estudio.

Con un microscopio de calidad adecuada, como los

que se encuentran en la mayora de
los laboratorios cientficos, se pueden realizar
fotomicrografas de una calidad razonable,
utilizando una cmara de uso general, de objetivo
fijo o intercambiable.
Mtodos bsicos[editar]
Hay dos mtodos bsicos de tomar fotografas por
medio del microscopio. En el primer mtodo el
objetivo de la cmara realiza una funcin parecida
a la del cristalino del ojo y proyecta sobre el sensor
una imagen real de la imagen virtual que se ve por
el ocular del microscopio. Este mtodo es el nico
adecuado para utilizacin de cmaras con objetivo
fijo, esto es, no intercambiable.
El segundo mtodo, adecuado para cmaras con
objetivo intercambiable, implica retirar el objetivo
de la cmara y ajustar el microscopio de modo que
el ocular forme una imagen directamente sobre el
sensor.
La calidad de la ptica de un microscopio (objetivo
y ocular) es fundamental en la determinacin de la
calidad de una imagen fotogrfica. Los objetivos y
oculares de microscopio se encuentran en
diferentes calidades, determinadas por
la precisin con que han sido corregidos de
aberraciones. Los objetivos ms econmicos estn
corregidos de aberracin esfrica para un solo
color, generalmente el amarillo verdoso, pero no de
aberracin cromtica para la totalidad del espectro
visible, sino solo para dos o tres colores, primarios.
Estos objetivos se llaman acromticos, y tambin
muestran cierta cantidad de curvatura de campo;
esto es, que la totalidad del campo de visin del
objetivo no puede llevarse simultneamente a foco
fino.

Existen los acromticos de campo plano, en los que

la curvatura de campo ha sido casi totalmente
corregida, se denominan planacromticos.
Los apocromticos estn corregidos de aberracin
esfrica para dos colores y de aberracin
cromtica para los tres colores primarios. An as,
mostrarn curvatura de campo a menos que sean
planapocromticos, los mejores objetivos de que se
dispone. Los oculares tambin tienen diferentes
calidades. Los ms simples son los de campo
ancho.
Los oculares compensadores se disean para
compensar ciertas aberraciones cromticas
residuales del objetivo, y dan su mejor resultado
cuando se utilizan con objetivos apocromticos,
aunque tambin pueden utilizarse con xito con los
acromticos de mayor potencia. Existen los
oculares foto, especiales para fotomicrografa, y
cuando se utilizan con los objetivos
planapocromticos dan la mejor calidad posible
de fotografa.