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FACULTAD DE ODONTOLOGA
UNIDAD DE INVESTIGACIN,
TITULACIN Y GRADUACIN
Quito
Abril, 2015
DEDICATORIA
ii
AGRADECIMIENTO
Adriana Haro V.
iii
Yo, Adriana Beln Haro Valencia en calidad de autor del trabajo de investigacin o
tesis realizada sobre "ESTUDIO IN VITRO DE LA EFICACIA ANTIBACTERIANA
ENTRE EL EXTRACTO ALCOHLICO DE CAESALPINIA SPINOSA (TARA) AL
100% E HIPOCLORITO DE SODIO AL 5,25% SOBRE EL ENTEROCOCCUS
FAECALIS", hacer uso de todos los contenidos que me pertenecen o de parte de los que
contienen esta obra, con fines estrictamente acadmicos o de investigacin.
IV
En mi carcter de Tutora del trabajo de Grado, presentado por la seorita Adriana Beln
Haro Valencia, para optar el Ttulo de Odontlogo, cuyo ttulo es sobre "ESTUDIO IN
VITRO DE LA EFICACIA ANTIBACTERIANA ENTRE EL EXTRACTO
ALCOHLICO DE CAESALPINIA SPINOSA (TARA) AL 100% E HIPOCLORITO
DE SODIO AL 5,25% SOBRE EL ENTEROCOCCUS FAECALIS". Considero que
dicho Trabajo rene los requisitos y mritos suficientes para ser sometido a la
presentacin pblica y evaluacin por parte del jurado examinador que se designe.
En la ciudad de Quito a los 23 das del mes de abril del 2015.
vi
NDICE DE CONTENIDOS
DEDICATORIA ............................................................................................................... ii
AGRADECIMIENTO ..................................................................................................... iii
AUTORIZACIN DE LA AUTORA INTELECTUAL ............................................... iv
INFORME DE APROBACIN DEL TUTOR ................................................................ v
CERTIFICADO DE APROBACIN DEL TRIBUNAL ............................................... vi
NDICE DE CONTENIDOS .......................................................................................... vii
RESUMEN ..................................................................................................................... xii
Palabras clave: IRRIGANTES, ENDODONCIA, EFECTO ANTIBACTERIANO,
CAESALPINIA SPINOSA, TARA, HIPOCLORITO DE SODIO, ENTEROCOCCUS
FAECALIS. .................................................................................................................... xii
"STUDY IN VITRO ANTIBACTERIAL BETWEEN THE EFFECTIVENESS OF
ALCOHOLIC EXTRACT CAESALPINIA SPINOSA (TARA) TO 100% E SODIUM
HYPOCHLORITE 5.25% ON ENTEROCOCCUS FAECALIS" ................................ xiii
ABSTRACT .................................................................................................................. xiii
Keywords:
IRRIGATING,
ENDODONTIC,
ANTIBACTERIAL
EFFECT,
CAESALPINIA SPINOSA, TARA, SODIUM HYPOCHLORITE, ENTEROCOCCUS
FAECALIS. ................................................................................................................... xiii
INTRODUCCIN ......................................................................................................... xiv
CAPTULO I .................................................................................................................... 1
1.1 PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................... 1
1.2 OBJETIVOS: .............................................................................................................. 2
1.2.1 GENERAL: ............................................................................................................. 2
1.2.2 ESPECFICOS: ....................................................................................................... 2
1.3 Hiptesis: .................................................................................................................... 3
1.4 Justificacin: ............................................................................................................... 3
CAPTULO II ................................................................................................................... 5
MARCO TERICO ......................................................................................................... 5
2. Microbiota endodncica ............................................................................................... 5
2.1 Vas de invasin microbiana ...................................................................................... 5
2.1.1Tbulos dentinarios .................................................................................................. 6
2.1.2 Defectos en el sellado marginal ............................................................................... 6
2.1.3 Infeccin periodontal ............................................................................................... 7
vii
ix
NDICE DE IMAGENES
NDICE DE TABLAS
xi
RESUMEN
Se realiz un estudio in vitro de la eficacia antibacteriana entre el extracto alcohlico de
Tara 100% e hipoclorito de sodio 5,25% sobre el E. faecalis. Embebiendo sensidiscos
con 50uL de cada solucin y colocndolos en medios de cultivo Mueller Hilton
previamente preparados con colonias jvenes de E. faecalis ATCC 29212, incubando
las muestras a 37C de 24 a 72 horas. Resultados obtenidos en halos inhibitorios
demostraron que ambas soluciones fueron capaces de producir inhibicin del
crecimiento bacteriano; siendo durante las primeras 24 h el NaOCl 5,25% ms efectivo
en comparacin con el extracto de Tara 100%. Adicional a esto, se investig el efecto
de sustantividad de las soluciones en el transcurso de 48 y 72 h; encontrando que el
extracto de Tara 100% posee un efecto antimicrobiano mayor y prolongado en contraste
con el NaOCl 5,25%, el cual present un efecto antibacteriano menor.
xii
ABSTRACT
An in vitro study of the antibacterial efficacy between the alcoholic 100% Tara extract
and 5.25% sodium hypochlorite on E. faecalis was performed. Embedding sensidiscs
with 50uL of each solution and placing in culture media prepared with Mueller Hilton
previously young colonies of E. faecalis ATCC 29212, incubating the samples at 37 C
for 24 to 72 hours. Results obtained in inhibitory halos showed that both solutions were
able to produce inhibition of bacterial growth; still during the first 24 h 5.25% NaOCl
more effective compared to 100% Tara extract. In addition to this, the effect of
substantivity of the solutions during 48 and 72 h was investigated; finding that the
extract of Tara has 100% more prolonged antimicrobial effect in contrast to the 5.25%
NaOCl, which showed a lower antibacterial effect
Keywords:
IRRIGATING,
ENDODONTIC,
ANTIBACTERIAL
EFFECT,
xiii
INTRODUCCIN
El xito en el tratamiento de conductos se encuentra asociado con la reduccin de la
carga bacteriana endodncica. Para asegurar dicho xito, estudios in vitro y la prctica
clnica han demostrado que nicamente la instrumentacin mecnica no es suficiente
para eliminar los microorganismos presentes en los conductos de manera completa y
definitiva. Debido a esto es necesario emplear irrigantes qumicos los cuales han sido
usados a lo largo de los aos para obtener una desinfeccin del conducto radicular (Rico
Romano, Crdoba del Moral, Mena Alvarez, Vera Mors, Garrido Lapea, &
Rodrguez Arrevola, 2012).
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012), refieren que una adecuada irrigacin
intraconducto consiste en la aplicacin de una o ms soluciones intraconducto antes,
durante y despus de la preparacin biomecnica para lograr una reduccin de la carga
bacteriana, limpieza del sistema de conductos y as garantizar un tratamiento exitoso.
Estudios realizados por (Prez Alfayate, Daz-Flores Garca, Algar Pinilla, Valencia
de Pablo, Estvez Luaa, & Cisneros Cabello, 2013) demostraron que las diversas
formas de presentacin de las patologas pulpares pueden tener etiologas microbianas
variadas; debido a que identificaron de 15 a 30 especies en el conducto infectado, de
ms de 500 especies que se encuentran en la cavidad oral y probablemente sean las
causantes de la mayora de lesiones periradiculares en humanos.
xiv
(Wang, Zhang, Chu, & Zhu, 2012), demostraron que el E. faecalis es la especie ms
comn en dientes con periodontitis apical crnica en un 38% de las muestras analizadas.
De igual manera (Pardi, Guilarte , Cardozo, & Briceo, 2009), indicaron que de 20
dientes con fracaso del tratamiento endodncico el 60% evidenciaron la prevalencia de
esta especie.
Por otro lado, (Espinel Pinzn, Garca Romero, Olarte Collazos, Barajas
Villamizar, & Barrientos Snchez, 2009) indicaron en su estudio que la remocin del E.
faecalis luego de la preparacin rotatoria e irrigacin con hipoclorito de sodio 5%
complementndolo con EDTA 1,7% fue poco favorable, ya que determinaron que
ninguna de estas soluciones empleadas erradican totalmente esta bacteria.
Por esto, investigaciones realizadas por (Escobar Bobadilla & Chvez Castillo,
2008) demuestran que el extracto alcohlico del fruto de Caesalpinia spinosa Taya a
xv
xvi
xvii
CAPTULO I
Segn (Hil & Balandrano Pinal, 2009), el xito en Endodoncia depende de varios
factores, de entre ellos; el biomecnico se encuentra relacionado con el acceso, la
preparacin y la obturacin radicular, sin embargo dichos pasos no son suficientes para
conseguir un tratamiento endodncico exitoso, debido a que deben de ser
complementados con una irrigacin adecuada, medicaciones intraconducto y un sellado
coronal hermtico; evitando as posibles micro filtraciones, contaminacin y un fracaso
de la rehabilitacin integral de la pieza dentaria..
Por esto, es necesario hacer mucho hincapi a la irrigacin, la cual es base para un
tratamiento endodncico exitoso debido a que tiene por objetivo principal disminuir la
carga bacteriana presente en el conducto radicular, ya que si no se emplea un correcto
irrigante existe la posibilidad de persistencia bacteriana y sea causa del fracaso
endodncico.
1.2 OBJETIVOS:
1.2.1 GENERAL:
1.2.2 ESPECFICOS:
1.3 Hiptesis:
1.4 Justificacin:
Este hecho demuestra que dicha bacteria es capaz de resistir luego de realizado un
tratamiento de conducto, como tambin puede permanecer ah desde el inicio del
tratamiento y prevalecer gracias a su capacidad de sobrevivencia en relacin con otras
bacterias.
De igual manera este estudio se enfoca en conseguir un irrigante que brinde una
seguridad de desinfeccin, fcil disponibilidad y uso; para realizar un tratamiento eficaz
en un tiempo adecuado.
CAPTULO II
MARCO TERICO
2. Microbiota endodncica
En la cavidad oral existe una gran diversidad de la microbiota endodncica
pudiendo identificarse desde virus, hongos, arqueas y protozoos; pero en su mayor
prevalencia y predominio a las bacterias (Cohen & Hargreaves, 2011).
La microbiota presente en la cavidad oral puede optar diversas vas de entrada hacia
la cavidad pulpar, al ser estril y encontrarse aislada de contaminacin bacteriana
gracias a barreras mecnicas como las propias estructuras dentarias; pero cuando esta
integridad se llega a alterar o romper por diferentes causas existe la posibilidad de que
una infeccin pulpar ocurra dependiendo su va de entrada; la magnitud de la patologa
que se llegue a instaurar ser de manera lenta o rpida. Existen diferentes vas de
5
2.1.1Tbulos dentinarios
2.1.4 Traumatismos
Existen un sin nmero de causas las cuales exponen la cavidad pulpar directamente
con la cavidad oral; pudiendo ser lesiones cariosas, atricin, bruxismo, grietas, fisuras,
fracturas, iatrogenias, etc. Cuando se presentan traumatismos dentales comprometiendo
no solo esmalte incluso dentina o fractura de la corona dental y/o raz, existe una clara y
gran va de ingreso para los microorganismos presentes en la cavidad oral, debido a que
se encuentra en exposicin tbulos dentinarios y en casos graves pulpa dentaria; en la
cual los microorganismos invaden y se manifiestan con patologas a mediano o largo
plazo dependiendo de la complejidad del traumatismo y del tipo de paciente afectado
(Libana Urea, 2002). Pacientes nios y jvenes son ms susceptibles a sufrir
traumatismos dentarios al estar en actividad constante y deportes de contacto y de igual
manera poseen tbulos de mayor dimetro a diferencia de pacientes adultos y edad
avanzada los cuales son ms probables a sufrir de bruxismo en la cual existe una
exposicin de tbulos dentarios pero estos poseen un dimetro menor debido a su
calcificacin dentaria (Canalda Shali & Brau Aguad, 2006).
2.1.5 Anacoresis
(Libana Urea, 2002). Esta infeccin se da lugar cuando el diente presenta defectos en
su sistema de defensa como puede ser una pulpa necrtica o en una sobre
instrumentacin durante el tratamiento de conducto, lesionando tejido periodontal
permitiendo anidar en el conducto radicular bacterias pudiendo de esta manera
multiplicarse y presentar patologas durante un tratamiento de conducto o inclusive
luego de rehabilitada integralmente la pieza dental (Cohen & Hargreaves, 2011).
Este tipo de infecciones son conocidas tambin como infeccin inicial o virgen,
debido a que los microorganismos invaden y colonizan el tejido pulpar necrtico desde
el primer momento provocando una infeccin intraradicular, estos microorganismos
pueden ser los mismos que en el principio colaboraron con la necrosis bacteriana o son
los primeros en llegar hasta la pulpa necrtica y de esta manera aprovechan el ambiente
necrtico, liberando productos metablicos produciendo dicha infeccin (Cohen &
Hargreaves, 2011).
En este tipo de infecciones se encuentra una microbiota entre 20-30 especies de las
cuales la mayora son anaerobias, aunque puede existir especies facultativas o
microaerfilas (Torabinejad & Walton, 2010).
Torabinejad & Walton (2010) refieren que este tipo de infeccion primaria
intraradicular evidencia una microbiota variada independientemente del tipo de
periodontitis apical que se presente, la cual esta compuesta por generos de bacterias
gram negativas siendo estas las ms prevalentes: Dialister, Treponema, Prevotella,
Fusobacterium, Tannarella,
Neisseria.
10
Staphylococcus aureus
Estreptococos orales
Peptostreptococcus spp.
Actimonyces spp.
Eubacterium spp.
Capnocytophaga spp.
Campylobacter spp.
Eikenella corrodens.
Porphyromonas spp.
Prevotella spp.
Mitsuokella dentalis
Selenomas spp.
Lactobacillus spp.
Veillonella spp.
Enterococcus spp.
Treponemas orales
11
de una intervencin profesional; es decir, entre cita y cita o inclusive despus de obturar
el conducto radicular. De cualquier forma los microorganismos presentes tendrn la
capacidad de adaptarse, sobrevivir y proliferar; dando as origen a la infeccin
secundaria pese al ambiente hostil en el cual se desarrollan (Cohen & Hargreaves,
2011).
Este tipo de infecciones como su nombre lo indica, son persistentes debido a que
los microorganismos que se encontraban en infecciones primarias o secundarias han
conseguido sobrevivir pese al empleo de medicamentos antibacterianos intraconducto y
culminado el tratamiento de conducto. Este tipo de infeccin intraradicular persistente
se asocia con el fracaso del tratamiento de conducto debido a dos causas; una de las
causas es que las bacterias invaden, colonizan y prolifera el interior del conducto
durante el momento de obturacin del conducto radicular y otra de las causas se basa en
dientes que han sido tratados endodncicamente mostrando un dao periapical
persistente podr evolucionar en una infeccin intraradicular (Cohen & Hargreaves,
2011).
Segn (Cohen & Hargreaves, 2011) debido a que las infecciones intraradiculares
tanto secundarias como persistentes estn ntimamente relacionadas con el fracaso del
tratamiento endodncico, la microbiota de los conductos radiculares poseen dos
etiologas las cuales se resumen en microbiota presente en el conducto en la fase de
obturacin radicular y microbiota en dientes tratados endodncicamente.
Las bacterias que permanecen durante la fase de obturacin y resultando ser las ms
prevalentes y resistentes ante todo el proceso teraputico realizado son pocas bacterias
gram negativas entre las cuales se encuentran bacilos anaerobios como Prevotella,
Campylobacter y F. nucleatum; de igual manera se encuentran especies gram positivas
las cuales son mucho ms resistentes y obtenidas en mayor porcentaje luego de
12
13
14
2.4.1 Enterococcus
15
2.4.2.1 Historia
2.4.2.2 Taxonoma
16
De entre todas estas especies el E. faecalis y E. faecium son las especies que ms se
relacionan con la morbilidad y mortalidad del ser humano debido a su patogenicidad y
resistencia bacteriana en un 90% de los casos clnicos (Daz P, Rodrguez M, &
Zhurbenko, 2010).
2.4.2.3 Fisiologa
Los enterococos son bacterias cocos Gram positivos que se presentan aislados, en
parejas o cadenas cortas, inmviles, no productoras de esporas, anaerobios facultativos
que fermentan la glucosa sin producir gas, por lo que resultan ser catalasa negativo
demostrando no presentar efervescencia en el momento de la identificacin bacteriana,
de esta manera se puede cultivar en presencia o no de oxgeno a partir de 10-40C,
resistiendo temperaturas altas de hasta 60C durante 30 minutos; sobrevive en
condiciones ambientales hostiles como pH extremadamente alcalino, cloruro de sodio al
6,5%, sales biliares y detergentes (Prez Alfayate, Daz-Flores Garca, Algar Pinilla,
Valencia de Pablo, Estvez Luaa, & Cisneros Cabello, 2013).
2.4.2.4 Patogenicidad
Garca, Algar Pinilla, Valencia de Pablo, Estvez Luaa, & Cisneros Cabello, 2013)
(Quiones Prez, y otros, 2008) (Surez Pita, 2002).
18
Debido a que el E. faecalis resulta una gran amenaza para el tratamiento teraputico
frente a diversos medicamentos antibiticos gracias a su resistencia bacteriana a
frmacos como la vancomicina; en el campo odontolgico no es la excepcin, por lo
que resulta una bacteria muy predominante y resistente al momento de erradicar un
proceso infeccioso periapical, en el cual es responsable dicha bacteria y sobre todo
resiste al tratamiento de conducto incluso con la aplicacin de medicamentos
intraconducto y sustancias desinfectantes (Prez Alfayate, Daz-Flores Garca, Algar
Pinilla, Valencia de Pablo, Estvez Luaa, & Cisneros Cabello, 2013).
19
Por la relacin del E. faecalis con los diversos tipos de infecciones intraradiculares,
su resistencia bacteriana frente a medicamentos antibiticos y de conducto, su gran
capacidad de patogenicidad y su gran prevalencia en los fracasos de tratamientos de
conducto; es de suma importancia clnica una opcin teraputica dirigida a su
erradicacin (Araujo Daz & Salas Asencios, 2009) (Bornaz Acosta, Bornaz Arenas, &
Bornaz Arenas, 2013)
A consecuencia que este gnero presente una resistencia propia a varias opciones de
antibiticos como ampicilina y vancomicina, dicha firmeza se le atribuye a sus diversos
factores de virulencia entre los cuales se le atribuye a los plsmidos, sustancia de
agregacin, gelatinasa, protena superficial, citolisina, adhesinas y hialuronidasa; siendo
estos factores una gran importancia para la supervivencia del Enterococcus faecalis
(Kayaoglu & rstavik, 2004) (Silva, y otros, 2013).
20
accin muy limitada frente a esta bacteria (Marques da Silva, Fagundes Tomazinho,
Aguiar Anele, Piotto Leonardi, & Baratto Filho, 2010).
De igual manera en el estudio realizado por (Rico Romano, Crdoba del Moral,
Mena Alvarez, Vera Mors, Garrido Lapea, & Rodrguez Arrevola, 2012)
identificaron que no existen una accin antibacteriana fuerte en el empleo combinando
de la clorhexidina al 2% y el hipoclorito de sodio al 5,25% contra al E. faecalis.
Hoy en da existen muchas sustancias las cuales se les considera un irrigante ideal y
es empleando en la terapia endodncica, entre los cuales se encuentran el Hipoclorito de
sodio, clorhexidina, cido etilendiaminotetraactico(EDTA) y MTAD una solucin
compuesta por doxicicilina, cido ctrico y un detergente tween 80. Estas soluciones son
las ms comunes empleadas actualmente pero no cumplen con ser un irrigante
completamente efectivo debido a que poseen propiedades antibacterianas o actan como
lubricante en el momento de la intervencin endodncica (Miliani, Lobo, & Morales,
2012).
(Leonardo, 2005) refiere que es de mayor valor lo que se asla del conducto
radicular que lo que ah se pone; con esto se busca considerar a la preparacin
biomecnica, en particular una irrigacin de calidad que limpie y desinfecte las paredes
del conducto radicular sin provocar un dao en corto o largo plazo con las sustancias
que se involucren para conseguir dicho propsito (Hil & Balandrano Pinal, 2009).
22
Rapela en 1958 observando que no tena un acceso apto a los conductos emple
detergentes sintticos como vehculo para los antibiticos para as lograr un mejor
acceso; en 1961, Stewart et al., aade el Glioxide, compuesto conformado por perxido
de urea 10% el cual posee actividad antimicrobiana y glicerol como vehculo y a su vez
acte como lubricante. En 1963, Ostby y Fehr manifestaron que la desmineralizacin
efectuada por el EDTA era proporcional al tiempo de aplicacin, comprobando que
durante un tiempo de 5 minutos la dentina se desmineralizaba obteniendo una
profundidad de 20-30 m (Leonardo, 2005).
23
Goldmann et al., utilizaron el cido ctrico en 1988 como sustancia irrigante del
conducto radicular pero se evidencio que produca una eliminacin de la capa de
barrillo dentinario al igual que el empleo del EDTA. El hidrxido de calcio fue tomado
como una opcin a los irrigantes en el ao de 1991, pero estudios realizados por Morgan
et al., demostraron que no posee efecto alguno por si solo o ayudado con el hipoclorito
de sodio al 2,5% (Ballal, Kundabala, Acharya, & Ballal, 2007) (Rico Romano, Crdoba
del Moral, Mena Alvarez, Vera Mors, Garrido Lapea, & Rodrguez Arrevola, 2012)
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012).
Precio mdico
1820 un qumico francs Labarraque formul esta sustancia al 2,5% de cloro activo,
siendo empleado como desinfectante de heridas (Estrela, 2005).
Dakin en 1915 renov la formula al 0,5% de cloro activo y cido brico siendo
conocida como solucin de Dakin, evidenci que la solucin al 2,5% empleada en
heridas desinfectaba pero su cicatrizacin era tarda sin importar en que concentracin
se encontrara el hipoclorito, debido a la gran parte de hidrxido de sodio presente en la
solucin. Reformul la solucin al 0,5% con un pH 11, aadiendo cido brico,
solucin con la cual no se obtuvo la cicatrizacin tarda gracias a que no existi
liberacin de hidroxilos y por ende no irrit los tejidos. (Estrela, 2005).
26
2.5.4.1.3 Ventajas
(Canalda Shali & Brau Aguad, 2006) describe ciertas propiedades del NaOCl:
pH 11,5 - 12
2.5.4.1.4 Desventajas
(Cohen & Hargreaves, 2011) menciona algunas desventajas del empleo del NaOCl:
Corroe el instrumental
Sabor desagradable
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Hipersensibilidad a NaOCl
(Miliani, Lobo, & Morales, 2012) y (Lahoud Salem & Galvz Calla, 2006) refieren
que existen varias causas que influyen en disminucin o aumento de efectividad del
NaOCl entre las cuales se encuentran:
2.5.4.1.7 Presentacin
Varios investigadores optan por la disolucin en dos partes del NaOCl 5,25%
buscando reducir los daos periapicales que se pueden producir por la sobre
instrumentacin y excesiva presin efectuada en la irrigacin en el momento del
tratamiento de conducto, afectando as la accin antimicrobiana, destruccin de toxinas
y disolucin de tejidos (Lahoud & Galvz, 2006).
Sin embargo en el trabajo realizado por (Clegg, Vertucci, Walker, Belanger, &
Britto, 2006) en el cual evaluaron la eficacia del NaOCl 6%, 3% y 1%; en bacterias
obtenidas a partir de periodontitis apical crnica, indicaron que el nico irrigante capaz
de erradicar la microbiota presente era el NaOCl 6%.
A su vez (Siqueira, Rocas, Favieri, & Lima, 2000) determinan en su estudio sobre
la reduccin bacteriana del E. faecalis presente en el conducto radicular luego de la
instrumentacin e irrigacin con NaOCl 1%, 2,5% y 5,25% que no existe diferencia
especfica entre las diferentes concentraciones para conseguir una erradicacin
bacteriana ya que se podra obtener el efecto antimicrobiano de esta solucin realizando
un cambio frecuente y manejando cuantiosas cantidades de solucin irrigante para
compensar los efectos reducidos de las diversas concentraciones.
2.5.4.2.3 Habitat
30
Segn investigaciones realizadas por (De la Cruz, 2004) , (Huarino Acho & Ramos
Perfecto, 2012), (Cabello Liu, 2009) y (Sampaio, Pereira, Dias, Costa, Conde, &
Buzalaf, 2009) al encontrarse la tara en estado silvestre posee un gran potencial mdico,
alimenticio e industrial. Por lo cual hoy en da son usadas las vainas y semillas de tara,
las cuales ofrecen ciertas propiedades que pueden ser aprovechadas debido a su
composicin qumica:
Hojas:
est
compuesta
de
aminocidos,
taninos,
Los taninos estn presentes en diversas plantas entre las cuales se encuentran las
siguientes familias botnicas: Leguminosae, Rosaceae, Polygonaceae,Fagaceae,
Rhyzophoraceae y Myrtaceae (Cabello Liu, 2009).
31
Los frutos de la tara brindan diversos productos de inters, teniendo as que la vaina
madura de tara representa un 65% de peso de los frutos teniendo una concentracin
mayor de taninos entre 40% y 60% (Cabello Liu, 2009):
Debido a las propiedades y usos que los taninos ofrecen, investigadores han
realizado diversos estudios para determinar las acciones farmacolgicas que pueda
brindar esta planta, entre las cuales son:
antiinflamatorio,
antibacteriano,
antimictico,
de
garganta,
infecciones
vaginales,
sinusitis,
33
localizadas,
afecciones
intestinales,
vesiculares,
Antisptica
Bactericida
Bacteriosttica
Antifngica
Astringente
Protectora
Hipocolesterolmica
Antdoto
34
CAPTULO III
3. METODOLOGA
3.1 Diseo de la investigacin
SOLUCIONES
NUMERO
DE
MUESTRA
TARA 100%
24
48
HIPOCLORITO DE SODIO
5,25 %
AGUA
DESTILADA
24
48
72
1
2
3
4
35
3.2 Muestra
e2
Dnde:
Z= valor de 1,96 (95% de confiabilidad)
p: proporcin de individuos que poseen en la poblacin la caracterstica de estudio.
Este dato es generalmente desconocido y se suele suponer que p=q=0.5 que es la
opcin ms segura.
q: proporcin de individuos que no poseen esa caracterstica, es decir, es 1-p.
p=q= 0,5 * 0,5 = 0,25 probabilidad de que suceda el evento
e = es el margen de error de la muestra (5% al 15%)
n = 61 al 12,5% del margen de error
Mueller Hinton, las cuales contaran con las mismas propiedades y caractersticas, en las
que se colocarn 3 sensidiscos con 50 uL de cada grupo de sustancia a analizar
respectivamente, obteniendo 90 muestras en total; de las cuales 60 son muestras con las
soluciones a analizar y 30 muestras que corresponden al control negativo.
36
DEPENDIENTE
VARIABLES
Enteroccocus
faecalis
ATCC 29212
DEFINICION CONCEPTUAL
DETERMINANTES
Mayor
halo
inhibicin
y
E.
INDEPENDIENTE
SUSTANCIAS
IRRIGANTES
Tiempo
Extracto
Caesalpinia
100%
de
Solucin
de
hipoclorito de sodio al
5,25%
NaOCl 5,25%
Soluciones de irrigacin empleadas en la
limpieza y desinfeccin de las paredes de
los conductos y todos los conductos
laterales y accesorios, especialmente
frecuentes en la zona apical. (Canalda
Shali & Brau Aguad, 2006)
INDICADORES
de
spinosa
Solucin de extracto
alcohlico
de
Caesalpinia spinosa
tara al 100 %
Agua destilada
Agua destilada
24 hrs
48hrs
72hrs
Eficacia
de
las
variable independiente
en relacin al tiempo
37
3.6 Procedimiento
38
Las vainas de Caesalpinia spinosa (tara) fue sometidas a una limpieza y secado
previo a la remocin de la semilla y posterior a esto las vainas de C. spinosa
fueron trituradas, pasando por un proceso de maceracin y purificacin para
obtener de esta manera el extracto alcohlico de Caesalpinia spinosa (tara) al
100 % el cual fue envasado y listo para la manipulacin en la investigacin.
(Imagen#2)
40
(a)
(b)
(c)
(d)
42
(e)
Imagen 6: Incubacin a 37C por 48hrs(a) Toma de colonias puras de E. faecalis (b)
Hisopo con suspensin de E. faecalis (c) Concentracin de bacterias ajustada a escala
Mc Farland N0,5 mediante densidad ptica de la solucin (d) Inoculacin de la cepa
estandarizada en agar Mueller Hinton (e)
Fuente: Adriana Haro
43
(a)
(b)
(c)
(d)
(e)
44
(a)
(b)
Imagen 8: Halos de inhibicin de cada sustancia a las 24 hrs (a) Medicin del halo de
inhibicin obtenido por el extracto alcohlico de C. spinosa 100% con regla milimtrica
(b)
Fuente: Adriana Haro
45
(a)
(b)
(c)
46
(a)
(b)
Imagen 10: Halos de inhibicin obtenidos transcurrido 48 hrs (a) Medicin de halos
con regla milimtrica (b)
Fuente: Adriana Haro
47
Los datos obtenidos fueron recolectados en tablas pre elaboradas sobre una base de
30 repeticiones (n:30) por sustancia y analizados a travs de procesos estadsticos
especficos mediante pruebas de ANOVA y T Student, con el propsito de establecer en
promedio una media obtenida por variable independiente, comparar la igualdad de
medias obtenidas de las dos variables independientes y determinar una variable
independiente mayor segn la hiptesis y objetivos planteados.
48
CAPTULO IV
RESULTADOS
4.1 Compilacin de resultados
Los datos tras las mediciones de halos de inhibicin fueron recolectados analizados
y descritos en tablas y grficos, empleando el programa estadstico SPSS 21 y las
pruebas de Hiptesis que se realizan mediante la prueba T student considerando
muestras relacionadas y la prueba T student con muestras independientes. (Tabla #3)
NUMERO DE
MUESTRA
SOLUCIONES
HIPOCLORITO DE SODIO
5,25 %
TARA 100%
AGUA ESTERIL
48h
72h
24h
48h
72 h
24h
48 h
72 h
12,5
12,0
12,0
13,0
12,0
12,0
0,0
0,0
0,0
12,0
12,0
12,0
12,0
12,0
12,0
0,0
0,0
0,0
14,0
13,5
13,0
12,5
11,5
11,5
0,0
0,0
0,0
11,5
12,0
11,5
14,0
14,0
13,5
0,0
0,0
0,0
13,5
13,0
13,0
11,0
10,5
10,5
0,0
0,0
0,0
13,5
14,5
13,5
12,5
12,0
11,0
0,0
0,0
0,0
13,0
13,0
13,0
15,0
14,0
13,5
0,0
0,0
0,0
14,0
13,0
13,5
13,0
12,0
12,0
0,0
0,0
0,0
13,5
13,5
13,0
12,0
12,0
11,0
0,0
0,0
0,0
10
12,5
12,5
12,0
12,0
12,0
10,0
0,0
0,0
0,0
11
13,0
14,0
14,0
14,0
14,0
13,0
0,0
0,0
0,0
12
13,5
13,5
13,0
13,0
13,0
11,5
0,0
0,0
0,0
13
13,0
13,5
13,0
15,5
13,5
13,5
0,0
0,0
0,0
14
12,0
12,0
11,5
12,5
11,5
11,0
0,0
0,0
0,0
15
11,0
11,5
10,5
12,0
12,0
11,0
0,0
0,0
0,0
16
11,5
12,0
11,5
13,0
12,0
11,5
0,0
0,0
0,0
17
13,0
13,5
13,5
11,5
10,5
10,0
0,0
0,0
0,0
18
12,0
12,0
12,5
12,5
13,0
12,0
0,0
0,0
0,0
19
13,0
13,0
12,5
13,0
12,0
10,5
0,0
0,0
0,0
20
12,5
13,0
12,0
12,5
12,0
11,5
0,0
0,0
0,0
21
13,5
13,5
13,5
14,0
13,0
12,0
0,0
0,0
0,0
22
12,5
12,0
12,0
13,0
12,0
12,0
0,0
0,0
0,0
23
12,0
12,0
12,0
13,0
11,0
11,5
0,0
0,0
0,0
24
14,0
13,5
13,5
12,5
12,0
11,5
0,0
0,0
0,0
25
15,0
15,0
15,0
15,5
14,0
13,5
0,0
0,0
0,0
49
26
13,0
12,5
13,0
12,5
11,5
12,0
0,0
0,0
0,0
27
13,0
13,0
13,0
13,5
12,0
12,5
0,0
0,0
0,0
28
12,5
13,5
14,0
14,0
13,5
13,0
0,0
0,0
0,0
29
13,0
13,0
13,5
15,0
13,5
14,0
0,0
0,0
0,0
30
11,5
12,0
12,0
13,0
12,0
12,0
0,0
0,0
0,0
Tabla 3: Datos recopilados de los halos de inhibicin obtenidos con cada sustancia
estudiada
Fuente: Adriana Haro
ANOVA Descriptivos
Hora
24
Hrs
Sustancia
Media
Desviacin
tpica
Error
tpico
Intervalo de
confianza para la
media al 95%
Lmite
inferior
Lmite
superior
Mnimo
Mximo
TARA
100%
30
12,8167
,89523
,16345
12,4824
13,1510
11,00
15,00
NaOCl
5,25%
30
13,0833
1,12252
,20494
12,6642
13,5025
11,00
15,50
AGUA
ESTERIL
30
,0000
,00000
,00000
,0000
,0000
,00
,00
Total
90
8,6333
6,19433
,65294
7,3360
9,9307
,00
15,50
50
TARA
100%
30
12,9000
,84486
,15425
12,5845
13,2155
11,50
15,00
NaOCl
5,25%
30
12,3333
,99424
,18152
11,9621
12,7046
10,50
14,00
AGUA
ESTERIL
30
,0000
,00000
,00000
,0000
,0000
,00
,00
Total
90
8,4111
6,03155
,63578
7,1478
9,6744
,00
15,00
TARA
100%
30
12,7333
,94443
,17243
12,3807
13,0860
10,50
15,00
NaOCl
5,25%
30
11,8833
1,06418
,19429
11,4860
12,2807
10,00
14,00
AGUA
ESTERIL
30
,0000
,00000
,00000
,0000
,0000
,00
,00
Total
90
8,2056
5,90129
,62205
6,9696
9,4416
,00
15,00
48
Hrs
72
Hrs
51
SOLUCIONES
Media
Desviacin tpica
TARA 100%
30
12,8167
,89523
0,16345
NaOCl 5,25%
30
13,0833
1,12252
0,20494
TARA 100%
30
12,9000
,84486
0,15425
NaOCl 5,25%
30
12,3333
,99424
0,18152
TARA 100%
30
12,7333
,94443
0,17243
NaOCl 5,25%
30
11,8833
1,06418
0,19429
24 Hrs
48 Hrs
72 Hrs
Tabla 5: Comparacin de medias obtenidas por cada solucin en los diferentes tiempos
de incubacin
Fuente: Ing. Jaime Molina
72 HORAS: 0,002 < 0,05 luego rechazamos Ho: La media de la solucin TARA
al 100% NO es similar a la media de la solucin de hipoclorito de Sodio al
5,25% a las 72 horas de incubacin.
Horas
Grados de
libertad
Significancia
(bilateral)
Diferencia de
medias
Error tpico de
la diferencia
-1,017
58
0,313
-,26667
,26214
-1,017
55,265
0,313
-,26667
,26214
2,379
58
0,021
,56667
,23821
2,379
56,528
0,021
,56667
,23821
3,272
58
0,002
,85000
,25977
3,272
57,193
0,002
,85000
,25977
24 HORAS
48 HORAS
72 HORAS
PAR 1: se compara el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 24 y
48 hrs; determinando una significancia bilateral = 0,362 > 0,05, con lo cual se acepta la
53
Ho: en la cual la media de la solucin Tara 100% a las 24 horas es similar a la media de
la solucin TARA100% a las 48 horas.
PAR 2: analizando el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 48 y
72 hrs; obteniendo una significancia bilateral = 0,048 < 0,05 por lo que rechazamos la
Ho. En este caso la media a las 48 Horas es mayor a la media a las 72 horas.
PAR 3: estudiando el efecto inhibitorio del extracto de tara 100% obtenido a las 24 y
72 hrs teniendo una significancia bilateral = 0,393 > 0,05 se acepta la Ho. La media de
la solucin TARA 100% a las 24 horas es similar a la media de la solucin TARA
100% a las 72 horas.
PAR 4: al comparar las medias obtenidas del NaOCl 5,25% entre las 24 y 48 hrs se
demostr una significancia bilateral = 0,000 < 0,05 con lo que rechazamos Ho;
finalizando que la media de la solucin a las 24 horas es mayor que la media de la
solucin a las 48 horas.
PAR 5: se compar las medias dadas por el NaOCl 5,25% obteniendo una significancia
bilateral = 0,001 < 0,05, por lo que rechazamos la Ho determinando as que la media de
la solucin a las 48 horas es mayor a la media de la solucin dada a las 72 horas.
PAR 6: analizando la solucin NaOCl 5, 25% con su medias obtenidas a las 24 y 72 hrs
se estableci una significancia bilateral = 0,000 < 0,05 rechazando la Ho: por lo tanto, la
media de la solucin a las 24 horas es mayor que la media de la solucin a las 72 horas.
54
Media
Par
1
Par
2
Par
3
Par
4
Par
5
Par
6
Desv.
tpica
Error tp.
de la
media
95% Intervalo de
confianza para la
gl
Sig.
bilat.
diferencia
Inferior
Superior
TARA
24-48
-0,08333
,49276
,08997
-,26733
,10067
-0,926
29
0,362
0,16667
,44204
,08071
,00160
,33173
2,065
29
0,048
0,08333
,52659
,09614
-,11330
,27997
0,867
29
0,393
0,75000
,62629
,11434
,51614
,98386
6,559
29
0,000
0,45000
,63450
,11584
,21307
,68693
3,885
29
0,001
1,20000
,55086
,10057
,99430
1,40570
11,932
29
0,000
Hrs
TARA
48-72
Hrs
TARA
24-72
Hrs
NaOCl
24-48
Hrs
NaOCl
48-72
Hrs
NaOCl
24-72
Hrs
55
PROMEDIO DE DIAMETRO
SOLUCION HIPOCLORITO DE SODIO 5,25%
PROMEDIO DE DIAMETRO
SOLUCION TARA 100%
14,0000
14,0000
13,5000
13,0833
13,0000
12,8167
12,9000
12,7333
13,0000
12,5000
12,3333
12,0000
11,8833
12,0000
11,5000
11,0000
11,0000
24 HORAS
48 HORAS
72 HORAS
24 HORAS
48 HORAS
72 HORAS
56
4.5 Discusin
57
De igual manera (Pulipati, Pallavi, Sujan, Anil Babu, & Srinivasa Babu, 2012) en
su evaluacin de la actividad antibacteriana de varios extractos de Caesalpinia sobre el
E. faecalis; indico que el extracto con cloroformo de caesalpinia tiene un mnimo efecto
antibacteriano sobre el E. faecalis a diferencia de los extractos con hexano, agua, etlico,
metanol y acetona usados en ese anlisis, los cuales no presentaron accin inhibitoria
alguna. A diferencia con el trabajo aqu realizado en el cual el extracto alcohlico de
tara 100% sobre dicha bacteria demostr eficacia antibacteriana. Esta diferencia de
resultados podra ser a que el estudio realizado por Pulipati, empleo flores de
Caesalpinia las cuales poseen una capacidad antimicrobiana nula en comparacin con
las vainas maduras de Caesalpinia, las cuales fueron utilizadas en este trabajo de
investigacin.
de tara el efecto inhibitorio sobre la bacteria aumenta. Sin embargo en este estudio
desarrollado, el extracto de tara 100% demostr tener capacidad antibacteriana frente al
E. faecalis pero sin superar el efecto obtenido por el NaOCl 5,25% durante las 24 h. La
discordancia de estos resultados podra corresponder a la sistemtica empleada entre
ambos estudios, coincidiendo nicamente en la concentracin de la solucin aplicada.
Por otro lado cabe recalcar que a pesar de la diferencia de las horas de incubacin y las
bacterias empleadas en ambos estudios; siendo que el C. diphtheriae fue incubado por
18 h y el E. faecalis por 24 h; el extracto de tara se comport de forma antibacteriana
frente a C. diphtheriae.
A su vez, (Araujo Daz & Salas Asencios, 2009) analiz la actividad antimicrobiana
del extracto crudo de tara frente a Staphylococcus aureus demostrando que la vida
media del extracto fue latente durante 3 das, coincidiendo as con esta investigacin;
donde el extracto de tara 100% demostr inhibir al E. faecalis por 72h sobresaliendo
con mayor accin inhibitoria a las 48h. Cabe recalcar que tanto la metodologa de
investigacin y efecto antimicrobiano son anlogos en ambos estudios; sin embargo en
estas investigaciones se analiz la susceptibilidad de dos bacterias Gram positivas
anaerobias facultativas. Siendo el S. aureus una bacteria habitual en el conducto
radicular pero en menor porcentaje a diferencia del E. faecalis que se encuentra en
mayor porcentaje debido a su resistencia a sustancias antispticas y desinfectantes
usadas en el tratamiento de conducto.
(Espinel Pinzn, Garca Romero, Olarte Collazos, Barajas Villamizar, & Barrientos
Snchez, 2009) revelaron en su estudio para la remocin de E. faecalis luego de la
preparacin rotatoria e irrigacin con NaOCl 5% y clorhexidina (CHX) 2% con o sin
EDTA 1,7%, que estas soluciones al combinarse con el quelante disminuye su
efectividad antimicrobiana, tanto el NaOCl 5% y CHX 2% fueron relativamente
efectivos frente al E. faecalis. Esto indica semejanza con el estudio realizado en el cual
el NaOCl 5,25% fue favorable para la inhibicin de E. faecalis en 24 h. Estos resultados
pudieron deberse a que en la primera investigacin procedieron con una preparacin
biomecnica rotatoria en piezas dentarias empleando las soluciones antes expuestas
frente a la bacteria, consecutivamente sembraron tomando muestras de cada diente en
agar BHI para el conteo de UFC a las 48 h; a diferencia de la actual investigacin donde
59
la metodologa fue cultivo en agar Mueller Hinton con discos de papel filtro
impregnados en las soluciones y lectura de los halos de inhibicin en 24 h.
En vista de los diversos estudios realizados y la gran necesidad que existe hoy en
da de erradicar de manera completa la carga microbiana presente en el interior del
conducto radicular, es de suma importancia encontrar una solucin irrigante la cual
cuente con las diversas propiedades que un irrigante ideal requiere. Por lo cual
investigaciones atribuyen potenciales efectos tanto antibacterianos como antifngicos e
innumerables beneficios en el campo microbiolgico a la planta Caesalpinia spinosa
(Tara), por lo tanto resultara de mucho inters adentrarse al estudio de esta planta y
aprovechar los diferentes principios activos que posee.
60
CAPTULO V
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
5.1 Conclusiones
5.2 Recomendaciones
61
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
Araujo Daz, J., & Salas Asencios, R. (2009). Actividad antimicrobiana del extracto crudo de la
vaina de Caesalpinia spinosa "tara" frente al Staphylococcus aureus. Cientfica, 6(N2),
142-155.
Arias, F. G. (2006). El Proyecto De Investigacion Introduccion a la metodologa cientfica (5
ed.). Caracas, Venezuela: Editorial Episteme C.A.
Balandrano Pinal, F. (Abril de 2007). Soluciones para irrigacion en endodoncia: Hipoclorito de
sodio y Clorhexidina. Revista Cientfica Odontolgica CCDCR, 3(1), 11-14.
Ballal, V., Kundabala, M., Acharya, S., & Ballal, M. (2007). Antimicrobial action of calcium
hydroxide, chlorhexidine and their combination on endodontic pathogens. Australian
Dental Journal, 52(2), 118-121.
Bornaz Acosta, G., Bornaz Arenas, V., & Bornaz Arenas, M. (2013). Efecto inhibitorio del
extracto de Caesalpinia spinosa (Tara) al 60%, sobre el cultivo in vitro de Enterococcus
faecalis. Revista Medica Basadrina, 7(N1), 31-35.
Bruneau, A., Forest, F., Herendeen, P., Klitgaard, B., & Lewis, G. (2001). Phylogenetic
relationships in the Caesalpinioideae (Leguminosae) as inferred from chloroplast trnL
intron sequences . Systematic Botany, 26(3), 487-514.
Cabello Liu, I. (2009). Monografa para el cultivo de la tara Caesalpinia spinosa (Molina)
Kuntze. Lima-Per: Perbiodiverso.
Canalda Shali, C., & Brau Aguad, E. (2006). Endodoncia. Tcnicas clnicas y bases cientficas (2
ed.). Barcelona, Espaa: Masson S.A.
Clegg, M., Vertucci, F., Walker, C., Belanger, M., & Britto, L. (May de 2006). The Effect of
Exposure to Irrigant Solutions on Apical Dentin Biofilms In Vitro. Journal of
Endodontics, 32(5), 434-437.
Cohen, S., & Hargreaves, K. (2011). Vas de la Pulpa. Barcelona, Espaa: Elsiever Espaa S.L.
De la Cruz, P. (2004). Aprovechamiento integral y racional de la Caesalpinia spinosa-Caesalpinia
tinctoria. Instituto de Investigacin FIGMMG, 7(14), 64-73.
Daz P, M., Rodrguez M, C., & Zhurbenko, R. (2010). Aspectos fundamentales sobre el gnero
Enterococcus como patgeno de elevada importancia en la actualidad. Revista Cubana
de Higiene y Epidemiologa, 48(2), 147-161.
Escobar Bobadilla, L. E., & Chvez Castillo, M. (2008). Efecto in vitro de diferentes
concentraciones de extracto de Caesalpinia spinosa (Molina) Kuntze, sobre la
viabilidad de Corynebacterium diphtheriae. Revista Medica Vallejiana, 5(N1), 28-37.
Espinel Pinzn, M. L., Garca Romero, D. C., Olarte Collazos, A. M., Barajas Villamizar, I., &
Barrientos Snchez, S. (Ene-Jun de 2009). Remocin de Enterococcus faecalis despus
62
Prez Alfayate, R., Daz-Flores Garca, V., Algar Pinilla, J., Valencia de Pablo, O., Estvez Luaa,
R., & Cisneros Cabello, R. (2013). Actualizacin en microbiologa endodntica. Cient.
Dent., N 10(1), 27-39.
Pulipati, S., Pallavi, G., Sujan, B., Anil Babu, B., & Srinivasa Babu, P. (2012). EVALUATION OF
ANTIBACTERIAL ACTIVITY OF FRESH AND DRY FLOWER EXTRACTS OF CAESALPINIA
PULCHERRIMA L. International Journal of Biological & Pharmaceutical Research, 3(3),
360-365.
Quiones Prez, D., Marrero, D., Falero, B., Tamargo , I., Llop, A., Kobayashi, N., y otros. (2008).
Susceptibilidad antimicrobiana y factores de virulencia en especies de Enterococcus
causantes de infecciones pediatricas en Cuba. REV CUBANA MED TROP, 60(2), 123129.
Rico Romano, C., Crdoba del Moral, G., Mena Alvarez, J., Vera Mors, C., Garrido Lapea, P.,
& Rodrguez Arrevola, N. (Julio-Septiembre de 2012). Estudio in vitro de la eficacia del
hipoclorito de sodio y la clorhexidina contra el Enterococcus faecalis. Endodoncia
AEDE, N 30(3), 103-110.
Rodrguez-Varo, L., Pumarola, J., & Canalda, C. (Enero-Marzo de 2009). Accin antimicrobiana
in vitro de distintas medicaciones sobre Enteroccocus faecalis y Actinomyces israelii.
ENDODONCIA, N27(1), 7-12.
Sampaio, F., Pereira, M., Dias, C., Costa, V., Conde, N., & Buzalaf, M. (2009). In vitro
antimicrobial activity of Caesalpinia ferrea Martius fruits against oral pathogens.
Journal of Ethnopharmacology, 124, 289-294.
Snchez Ruiz, F. H., Furuya Meguro, A. T., Arroniz Padilla, S., Gmez Moreno, A., & Gmez, L.
(Marzo de 2009). Comparacin de la accin bactericida de hipoclorito de sodio y
Microcyn 60. Revista Odontolgica Mexicana, 13(1), 9-16.
Schell, C., Sparo, M., Bernstein, J., Grenvero, S., Delpech, G., Pourcel, G., y otros. (Junio de
2014). Factores de virulencia y multirresistencia en cepas de Enterococcus faecalis
aisladas de infecciones invasivas humanas. RAZyEIE, 8(2), 39-40.
Silva, J., Rodrguez, Y., Araya, J., Gahona, J., Valenzuela, N., Guerrero, K., y otros. (2013).
Deteccin de genes de virulencia en cepas de Enterococcus faecalis susceptibles y
resistentes a aminoglucsidos. Rev Chilena Infectol, 30(1), 17-22.
Siqueira, J., Rocas, I., Favieri, A., & Lima, K. (2000). Chemomechanical Reduction of the
Bacterial Population in the Root Canal after Instrumentation and Irrigation with 1%,
2.5%, and 5.25% Sodium Hypochlorite. Journal of Endodontics, 26(6), 331-334.
Surez Pita, M. (2002). Tendencia actual del estreptococo como indicador de contaminacin
fecal. Rev Cubana Hig Epidemiol, 40(1), 38-43.
Sundqvist, G., & Figdor, D. (2003). Life as an endodontic pathogen. Endodontic Topics, 6, 3-28.
64
Torabinejad, M., & Walton, R. E. (2010). Endodoncia, principios y prctica (4 ed.). Barcelona,
Espaa: Elsevier.
Wang, Q.-Q., Zhang, C.-F., Chu, C.-H., & Zhu, X.-F. (2012). Prevalence of Enterococcus faecalis in
saliva and filled root canals of teeth associated with apical periodontitis. International
Journal of Oral Science , 4, 19-23.
65